高速逆流色谱分离技术

高速逆流色谱的应用与发展

高速逆流色谱的应用与发展（内部交流）欧阳藩顾铭中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心 2007年6月1日从重液滴通过另一液体滴落，溶质在两相中间实现分配的原理出发，进行设备与过程的研发转变，20世纪60年代发明了连续液/液的高速逆流色谱（High-speed Countercurrent Chromatography，HSCCC）技术，目前已广泛应用于生物、医药、天然产物、环境分析、食品等领域的分离、分析和用于质控的指纹图谱的制定工作。从本次会议的论文亦可见，主要利用有机/水两相系统分离和纯化天然药物制备高纯度的药用成分标准品或参照物和探索建立中药材和中药方剂指纹图谱快速简便的质控新方法。从化学工程原理主要而言还是利用目标产物在两不相互溶的液相中的分配实现分离和纯化。本文将从化学工程原理和技术角度讨论高速逆流色谱的应用与发展，供参考：一、设备和装置的结构与规模的多样化、系列化、自动化最早利用溶质在互不混溶的液/液两相分配原理设计了逆流分配装置，将许多试管式的部件安装在一个能转动的台架上，以半自动方式使试管部件及其中两相溶液同时振摇，静置分层，转移传递。基于对流体与传递原理的分析研究发展逆流色谱设备，设备在不断地创新，主要有两大类。一是基于流体静力学平衡的体系，有液滴逆流色谱（DCCC）、回转腔式逆流色谱仪（RLCCC）、旋转腔式逆流色谱（GLCCC）和固定螺旋管式逆流色谱仪（HCCC）等。二是基于流体动力学平衡的体系，与上述差别是螺管绕自身轴线运动，分为非行星式、非同步式和同步式三大类，已开发出了多种形式的离心式逆流色谱设

高速逆流色谱法的概况及应用

高速逆流色谱法的概况及应用高速逆流色谱( High-Speed Countercurrent Chromatography，HSCCC) 是Yoichiro Ito 博士于二十世纪八十年代首先研发、应用并发展起来的一种新型液-液分配色谱技术；HSCCC运用同步多层螺旋管进行行星式离心运动，使得在互不相溶的两相溶剂系统中可以实现样品在短时间内的高效分离，从而制备样品[1,2]。高速逆流色谱技术不需要固体支撑物，主要根据样品在两相中所具有的不同分配系数进而对样品进行分离，相对于其他色谱技术如高效液相色谱、柱色谱等来说，具有高回收率、无吸附损耗、无峰拖尾等优点。 1、HSCCC法概况 1.1 HSCCC法的基本原理 HSCCC属于液 -液分配色谱，所以其基本分离原理与其他同类色谱技术相同，即利用物质在两相间分配系数的差别进行分配。而 HSCCC将两溶剂的分配体系置于高速旋转的螺旋管内 ,建立起一种单向性流体动力平衡体系。螺旋管的运动形式，是在自身自转的基础上，同时绕一公转轴旋转，成行星运动[3]。这样 ,加在分配体系上的离心力场不断发生变化，使两相溶剂充分的混合和分配，从而达到洗脱分离目的。HSCCC技术已经广泛应用于天然产物的分离。 1.2 溶剂系统的选择利用 HSCCC分离物质的关键是溶剂系统的选择。经查阅多篇文献，总结要点如下。对用于 HSCCC分离的溶剂体系，应该满足这几方面的要求：1)不造成样品的分解与变性；2)足够高的样品溶解度；3)样品在系统中有合适的分配系数值；4)固定相能实现足够高的保留[4]。而对于溶剂体系选择的原则，Ito博士本人总结的几个要点是这样描的：1)待分析组分应易溶于溶剂系统 ,并不与之发生反应；2)溶剂体系的各组分应分成体积比例适合的两相，以免浪费溶剂；3)组分在溶剂系统中的分配系数 K应为适当的定值 (0.5≤K≤1)；4)固定相的保留值要满足一定要求 (保留值越大峰形越好 )。溶剂系统的一般选择方法：HSCCC是利用溶质在不同溶剂中的分配进行分离的，所以在溶剂选择时要重点考虑溶质在两溶剂中的分配系数。因而准确测定

高速逆流色谱

高速逆流色谱及其应用王莉 (贵州大学化学与化工学院，贵阳，550003) 摘要：高速逆流色谱是近年发展起来的，不使用固定相载体的新型液液逆流色谱。本文介绍了高速逆流色谱的工作原理，HSCCC在的分离方面具有很大的优势，具有非常广阔的应用前景。本文主要综述了HSCCC在天然产物、生物医药和其他方面的应用情况。关键词：高速逆流色谱；天然产物；分离；应用 Application of High Speed Countercurrent Chromatography WANG Li （School of Chemical Engineering，Guizhou University，Guiyang 550003，China） Abstract:The high-speed countercurrent chromatography (HSCCC) is developing in recent year which without fixed carrier. The work principle，characteristics of HSCCC were introduced in this paper，which summarized the application and purification of HSCCC on the natural product，biomedicine and so on，especially the application on the fields of purification and isolation natural product． Key words: HSCCC; natural product; isolation; application 引言高速逆流色谱（high-speed countercurrent chromatography，HSCCC）是20世纪80年代发展起来的一种连续高效的液-液分配色谱分离技术，它不用任何固态的支撑物或载体。它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。由于不需要固体支撑体，物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现，因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品更能反映其本来的特性，特别适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触，使得样品的制备量大大提高，是一种理想的制备分离手段。它相对于传统的固-液柱色谱技术，具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。目前HSCCC技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术，已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域，特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技术；适合于中小分子类物质的分离纯化。 1 高速逆流色谱原理高速逆流色谱是建立在一种特殊的流体动力学平衡的基础上，利用螺旋管的高速行星式运动产生的不对称离心力，使互不相溶的两相不断混合，同时保留其中的一相(固定相)，利用恒流泵连续输入另一相(流动相)，此时在螺旋柱中任何一部分，两相溶剂反复进行着混合和静置的分配过程。流动相不断穿过固定相，随流动相进入螺旋柱的溶质在两相之间反复分配，按分配系数的大小次序被依次洗脱。高速逆流色谱仪器的装置如图1所示，它的公转轴水平设置，螺旋管柱距公转轴R处安装，两轴线平行。通过齿轮传动，使螺旋管柱实现在绕仪器中心轴线公转的同时，绕自转轴作相同方向相同角速度的自转。

高速逆流色谱仪的优势

高速逆流色谱仪的优势高速逆流色谱（high-speed countercurrent chromatography，简称HSCCC）是一种较新型的液—液分配色谱,由美国国立健康研究院（National Institute of Health, U.S.A.）Ito博土最先研制开发后由北京市新技术应用研究所在国内开展研发和推广工作。其原理是基于样品在旋转螺旋管内的互不混溶的两相溶剂间分配不同而获得分离，因而无须任何固体载体或支撑体，能达到在短时间内实现高效分离和制备，并且可以达到几千个理论塔板数。与其他柱色谱相比较，它克服了固定相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形施尾等缺点[3]。目前此项技术已被应用于生化、生物工程、医药、天然产物化学、有机合成、环境分析、食品、地质、材料等领域[5]。我国是继美国、日本之后最早开展逆流色谱应用的国家，俄罗斯、法国、英国、瑞士等国也都开展了此项研究。美国FDA及世界卫生组织（WHO）都引用此项技术作为抗生素成分的分离检定，90年代以来，高速逆流色谱被广泛地应用于天然药物成分的分离制备和分析检定中。 1. 高速逆流色谱仪原理及特点 HSCCC利用了一种特殊的流体动力学（单向流体动力学平衡）现象。具体表现为一根100多米长的螺旋空管，注入互不相溶的两相溶剂中的一相作为固定相，然后作行星运动；同时不断注入另一相（流动相），由于行星运动产生的离心力场使得固定相保留在螺旋管内，流动相则不断穿透固定相；这样两相溶剂在螺旋管中实现高效的接触、混合、分配和传递。由于样品中各组分在两相中的分配比不同，因而能使样品中各组分得到分离。 2. HSCCC的优点 HSCCC主要具有以下几个方面的优点。 2.1 应用范围广，适应性好。由于溶剂系统的组成与配比可以是无限多的，因而从理论上讲HSCCC适用于任何极性范围的样品的分离，所以在分离天然化合物方面具有其独到之处。并因不需固体载体，而消除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象，特别适用于分离极性物质和其它具有生物活性的物质。 2.2 操作简便，容易掌握。分离过程中对样品的前处理要求低，仅需一般的粗提物即可进行HSCCC的制备分离或分析。 2.3 回收率高。由于没有固体载体，不存在吸附、降解和污染，理论上样品的回收率可达100％。在实验中只要调整好分离条件，一般都有很高的回收率。 2.4 重现性好。如果样品不具有较强的表面活性作用，酸碱性也不强，那么多次进样，其分离过程稳定性都保持很好、峰的保留相对标准偏差也小于2%，重现性相当好。 2.5 分离效率高，分离量较大。由于其与一般色谱的分离方式不同，能实现梯度操作和反相操作、亦能进行重复进样，使其特别适用于制备性分离，产品纯度高。研究结果表明:一台普通的高速逆流色谱仪一次进样可达几十毫升，一次可分离近10g的样品。因此，在80年代后期被广泛地应用于植物化学成分的分离制备研究文章链接：中国化工仪器网https://www.360docs.net/doc/9a5313830.html,/Tech_news/Detail/49747.html

高速逆流色谱操作

高速逆流色谱操作步骤和要点操作步骤： 1 配液。超声脱气约20min，脱气后静置冷却至室温后泵液。 2 打开恒温水浴，将温度升至设定温度。 3 泵固定相。以10-20mL/min流速泵入固定相，检测器出口端流出固定相约20-50 mL后停泵。 4 平衡。打开紫外检测器开始预热，正转转动主机至900 rpm（FWD为正转，REV 为反转），同时以3 mL/min流速泵入流动相，至出口端流出流动相且此时紫外信号稳定，体系基本己平衡。 5 进样。以体系的上、下相溶解一定量的样品，超声溶解均匀后，在装样注射器中倒入样品溶液，将进样六通问切换至load，推排气泡后吸液至样品全进入进样圈中，将load切换至inject，检测器、工作站调零开始记录。 6 接收流分。工作站记录，设备运行时间为如5 min，保存后采集数据，保存。7清洗。断开泵与主机的连接，将主机进口与气管出口连接，吹气；将主机中溶剂吹出后，泵入约50 mL清洗液，吹气，重复此过程2~3次；最后一次长时间（1小时左右直至吹干）吹气时将主机内液体吹尽。 8 关机。操作要点：本仪器适用于有机溶剂，316L不锈钢及PTFE材料可耐受的酸碱溶液。 1 本设备可承受的压力限制为 2 MPa，请勿泵入不可溶解的固体颗粒。 2 设备运行前先检查连接管路是否正确，是否紧密；检测器波长是否正确。 3 配液时溶剂应混合均匀，自然分层澄清后可超声脱气，脱气时间不宜过长，脱气后如溶剂有温热则最好冷却静置至室温后使用。 4 样品溶解可为体系上相或下相，或同时两相溶解；不可以单一的溶剂来溶解进样，以免破坏主机内的体系平衡。 5 每次做完实验请及时清洗设备，一般清洗液为甲醇、乙醇等，如体系内含有酸、碱、盐等溶剂，建议先以纯净水清洗l~2次后，再以清洗液清洗。 6 日常清洗完设备后；如需继续进行实验，请设备放置2小时后重新平衡。

高速逆流色谱技术应用现状

高速逆流色谱技术应用现状 Application actuality of high-speed countercurrent chromatography (HSCCC) 刘迪1陈雪峰1宋晓宇2 LIU Di1CHEN Xue-feng1SONG Xiao-yu2 (1.陕西科技大学生命科学与工程学院,陕西咸阳712081；2.陕西海升果业发展股份有限公司,陕西咸阳713300) (1.Department of Life Science and Engineering,Shaanxi University of Science and Technology,Shaanxi,Xianyang712081,China；2.Shaanxi Haisheng Fresh Juice Co.Ltd,Shaanxi,Xianyang713300，China) 摘要：综述了高速逆流色谱技术(HSCCC)原理及特点，溶剂体系的选择，影响分离效果的因素，与之相联的检测技术及其应用现状。关键词：高速逆流色谱(HSCCC)；溶剂体系；分离；检测；应用 Abstract:This paper reviews the principle,characteristic,choice of two-phase solvent systems,factors of effecting separetion impact,checking and measuring technology coupled with HSCCC forhigh-speed countercurrent chromatography(HSCCC)。The application of HSCCC is also introduced.At last，this article discusses the expectation of HSCCC. Keywords:High-speed countercurrent chromatography(HSCCC)；Two-phase solvent systems；Separation；Checking and measuring；Application 在互不相溶的溶剂中溶质可以有不同的分配系数，根据此原理，产生了逆流色谱技术。逆流色谱从产生至今，经过不断的发展与完善，逆流色谱技术和设备都已趋近于成熟。至今，已出现了高速逆流色谱技术(high-speed countercurrent chromatography，HSCCC)，它是逆流色谱技术经历了近60年发展的结果。高速逆流色谱技术(HSCCC)最早的研制应用者是美国国立卫生院Ito博士[1]，最初它是用来进行制备分离的。近几年，人们对健康的认识越来越深刻，更多的人追求天然绿色的健康理念，故HSCCC作为一种对提取物污染小的制备技术，它的应用越来越受到了人们的关注。目前，HSCCC已从制备型发展到了分析型，甚至是微量分析型，应用范围也十分广泛[2]。高速逆流色谱技术在我国的应用较早，技术水平在国际领域也处于领先地位。目前，我国是世界上为数不多的高速逆流色谱仪生产国之一。我国的深圳同田生化技术有限公司是全球第一家多分离柱高速逆流色谱仪专业生产企业。公司拥有自主知识产权的高速逆流色谱专利技术，现已研制并生产出TBE系列分析型，半制备型TBE-300、300A，制备型TBE-1000高速逆流色谱仪设备。本文就高速逆流色谱技术的原理及特点、溶剂体系的选择、影响提取效果的因素、与之相联的检测技术以及其应用现状，做简单的综述。 1原理及特点 ————————— 基金项目：广东佛山市科技局攻关项目（03080011），陕西科技大学B类科研创新团队资助。作者简介：刘迪(1980-)，女，陕西科技大学生命科学与工程学院在读研究生。 E-mail:didi19801210@https://www.360docs.net/doc/9a5313830.html, 收稿日期：2005-12-21

高速逆流色谱分离技术

四川大学硕士研究生课程考试试卷姓名唐昌云学号 07 学院华西药学院专业生药学任课教师王曙教授课程名称高等生药学课程成绩考试时间 2012.12.31. 四川大学

高速逆流色谱分离技术的运用 1 发展历史高速逆流色谱(HSCCC)是在1982年，美国国立卫生院的一个教授首先研究和发展起来的一种不同于传统液相色谱法的现代色谱分离制备技术。作为一种新的色谱技术，HSCCC分离系统可以理解为以螺旋管式离心分离仪代替HPLC的柱色谱系统。HSCCC不使用固相载体作固定相, 克服了固相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形拖尾等缺点。由于不需要固定相，HSCCC技术具有进样量大、无不可逆吸附等优于其他色谱技术的优点，此项技术已经被广泛地应用于医药、环境、化工等领域。 2 原理 2.1 色谱分离原理高速逆流色谱分离原理结合了液液萃取和分配色谱的优点，是一种不需任何固态载体或支撑的液-液分配色谱技术，其基本分离原理与其他同类色谱技术相同，主要是利用物质在两相间分配系数的差别进行分配。而HSCCC将两溶剂的分配体系置于高速旋转的螺旋管内，螺旋管的运动形式，是在自身自转的基础上，同时绕一公转轴旋转，形成行星运动。由此加在分配体系上的离心力场不断发生变化，使两相溶剂充分的混合和分配，从而达到洗脱分离目的。因为样品中各组分在两相中分配系数不同，导致组分在螺旋柱中的移动速度不同，因而能使样品组分按分配系数的大小次序被依次洗脱下来的一种色谱分离技术。在流动相中分配比例大的先被洗脱, 在固定相中分配比例大的后被洗脱。 2.2 固定相的保留在高速逆流色谱仪设计方面，其有两个轴，其中一个为公转轴，一个为自转轴，两个轴由一个电动机带动。仪器的公转轴呈水平方向，圆柱形的螺旋管支持件围绕此轴进行行星式运转，同时围绕自转轴进行自转。由于螺旋管柱的行星式运动产生了一个在强度和方向上变化的离心力场，使在螺旋柱中互不相溶的两相不断混合从而达到稳定的流体动力学平衡，两相分离成两层，重相占据螺旋管的每一段的外部，轻相占据每一段的内部，并且两相沿螺旋管形成一个清晰的线性

高速逆流色谱仪

高速逆流色谱仪高速逆流色谱仪（HSCCC) 高速逆流色谱法 (High-speed Countercurrent Chromatography，简称HSCCC)，于1982年由美国国立卫生院Ito博士研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术，与其它色谱技术不同的是它不需任何固态载体，因此能避免固相载体表面与样品发生反应而导致样品的污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响。同时它也具有适用范围广、快速、进样量大、费用低、回收率高等优点。因此，己在生物、医药、食品、材料、化妆品和环保等领域获得了广泛的应用，尤其是在天然产物活性成分的分离纯化领域倍受重视。一、高速逆流色谱法的发展简史二十世纪六十年代，首先在日本，随后在美国国家医学研究院发现了一种有趣的现象：即互不相溶的两相溶剂在绕成螺旋形的小孔径管子里分段割据，并能实现两溶剂相之间的逆向对流。Ito及其后来者在此基础上研究并设计制造出了一系列逆流色谱装置，早期的是封闭型的螺旋管行星式离心分离仪CPC（coil planet centrifuge），用于分离染料，蛋白质和细胞粒子。数年后Ito把流通机制引入到螺旋管柱体系中，使逆流色谱和现代色谱一样可以实现连续的的洗脱、分离、检测和收集，并建立了两个基本的流通体制。其中有在比较简单的流体静力学平衡体制HDES基础上开发的作为分析分离的CCC、用作制备分离的DCCC以及移位腔室CCC等。另一方面，以流体动力学平衡体制HDES为基础，研制出在重力场作用下的大制备量分离仪器和在离心力场作用下的分析型和半制备型分离仪器。二、高速逆流色谱原理记忆器的基本配置 1．高速逆流色谱技术的原理高速逆流色谱法是建立在单向性流体动力平衡体系之上的一种逆流色谱分离方法，它是在研究旋转管的流体动力平衡时偶然发现的。当螺旋管在慢速转动时，螺旋管中的两相都从一端分布到另一端。用某一相作移动相从一端向另一端洗脱时，另一相在螺旋管里的保留值大约50%，但这一保留量会随着移动相流速的增大而减小，使分离效率降低。但使螺旋管的转速加快时，两相的分布发生变化。当转速达到临界范围时，两相就会沿螺旋管长度完全分开，其中一相全部占据首端的一段，我们称这一相为首端相，另一段全部占据尾端的一段，称为尾端相。高速逆流色谱正是利用了两相的这种单向性分布特征，在高的螺旋管转动速下，如果从尾端送入首端相，它将穿过尾端相而移向首端，同样，如果从首端相送入尾相，它将穿过首端相而移向螺旋管的尾端。分离时，在螺旋管内首先注入其中的一相(固定相)，然后从合适的一端泵入移动相，让它载着样品在螺旋管中无

高速逆流色谱仪原理特点及应用

高速逆流色谱仪原理特点及应用高速逆流色谱法于1982年由美国国立卫生院Ito博士研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术，与其它色谱技术不同的是它不需任何固态载体，因此能避免固相载体表面与样品发生反应而导致样品的污染、失活、变性和不可逆吸附等不良影响。同时它也具有适用范围广、快速、进样量大、费用低、回收率高等优点。因此，己在生物、医药、食品、材料、化妆品和环保等领域获得了广泛的应用，尤其是在天然产物活性成分的分离纯化领域倍受重视。高速逆流色谱仪原理及特点 HSCCC利用了一种特殊的流体动力学（单向流体动力学平衡）现象。具体表现为一根100多米长的螺旋空管，注入互不相溶的两相溶剂中的一相作为固定相，然后作行星运动；同时不断注入另一相（流动相），由于行星运动产生的离心力场使得固定相保留在螺旋管内，流动相则不断穿透固定相；这样两相溶剂在螺旋管中实现高效的接触、混合、分配和传递。由于样品中各组分在两相中的分配比不同，因而能使样品中各组分得到分离。重现性好。如果样品不具有较强的表面活性作用，酸碱性也不强，那么多次进样，其分离过程稳定性都保持很好、峰的保留相对标准偏差也小于2%，重现性相当好。应用领域：（1）天然产物已知有效成分的分离纯化

（2）化学合成物质的分离纯化（3）中药一类、五类新药的开发（4）中药指纹图谱和质量控制研究（5）抗生素的分离纯化（6）天然产物未知有效成分的分离纯化（新化合物开发）（7）海洋生物活性成分的分离纯化（8）放射性同位素分离（9）多肽和蛋白质等生物大分子分离以及手性分离等应用范围广，适应性好。由于溶剂系统的组成与配比可以是无限多的，因而从理论上讲HSCCC适用于任何极性范围的样品的分离，所以在分离天然化合物方面具有其独到之处。并因不需固体载体，而消除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象，特别适用于分离极性物质和其它具有生物活性的物质。标签: 色谱仪

逆流色谱原理简介

逆流色谱原理简介任何熟悉液液萃取（使用分液漏斗）和色谱（例如HPLC）技术的人都很容易理解逆流色谱液液萃取的原理(countercurrentchromatography(CCC))。液液萃取为化学家们分离大量的化学物质提供了一个简单的方法，而且使用的溶剂最少。把样品溶在两相溶剂系统中，振摇使两相充分混合，静置后，两相重新分层。这些步骤是分离样品组分的关键。这种经典的液液萃取在色谱工作者看来，最大的缺点是它在分离过程中只有一个理论塔板数。（事实上，这种情况下没什么理论可言。这一个分离塔板数是源自于工业上的分馏。因此，化学工作者要么设计一合适的单步分离方法去适应自己的需要，要么就用多次液液萃取去提高分离度。通常使用前者，因为后者太麻烦了。（尽管多次液液萃取经常用到，但溶剂系统在不同的提取中通常要改变，以便提高效率。）为了改善分液漏斗，以经过许多的尝试。克雷格逆流分布仪是其中一个最引人注意的突破。这套精妙的仪器，把一系列的分液漏斗有效的排成链，重复的进行系列的步骤：振摇（混合）、静置、分离，再重头开始，这样就提高了塔板数。假如有足够的塔板数，那这套仪器可以达到色谱级的分离。液滴逆流色谱（DCCC）在发展过程中又开发出了液滴逆流色谱（DropletCounterCurrentChromatograph）。这个仪器把一系列垂直的管子用毛细管连接起来。液体固定相留有直管中，把流动相慢慢的泵进去，（如果流动相比较重就从上方泵进去；反之，则从下方）。象所有的色谱那样，组分比较容易溶于流动相中的就移动的快；而比较容易溶于固定相中就滞后了。于是就分离开来了。很显然，每一个直管只有最小可能的理论塔板数。所以，要有显著的效能就要用大量这样的直管。其分离步骤如下：把样品液滴与流动相混合，通过不移动的固定相，期间没有发生振摇。液滴的大小与其他溶剂系统的参数限制了溶质在两质中的分配。静置最终在直管末端形成，在这儿，流过固定相的流动相在通过毛细管进入下一根直管前先聚集起来。如果流速过高就会干扰静置并破坏了分离。通过毛细管，流动相从一个直管流入下一个直管，达到分离的目的。DCCC最大的弱点是可允许的流速太低，因此分离时间长，两相混合差，相对来说，造成效率就低了。离心液滴逆流色谱（centrifugalDCCC，entrifugalplanetarychromatograph,CPC）比DCCC进步的地方就是使用离心加快重力分离。离心液滴逆流色谱更通用的叫法是离心行星色谱，使用很小的直管和毛细管（用多性塑料制成多层的）。一套实用的仪器包含数以千计的直管，可以获得几百个理论塔板数的效能。CPC的缺点和DCCC相似，只是用离心代替了地球重力分离。另外，CPC还多了个缺点，就是它在流动相的进口和出口必须使用旋转流体密封件；而这些密封件性能不好，价格又高，容易损耗，并且限制了泵液的压力，进而限制了流速和离心速度。高速逆流色谱（High-SpeedCountercurrentChromatography,HSCCC）现代的CCC源于Dr.YoichiroItod（国家健康研究中心）的研究：行星离心分离机，及其能支持的许多可能的柱几何学。这些巧妙的仪器运用了鲜为人知的离心分离机定子与转子非旋转连接的方法。（这超出了当前的讨论范围，涉及到如何达到这一目的的方法，任何一本讨论CCC的书对此都有详细的阐述）。功能上，高速逆流色谱有能自转和公转的螺旋盘绕的惰性管（既进行绕自轴旋转的行星式旋转，又同时进行绕公轴旋转。）组成。自轴和公轴（像行星自轴和恒星的公轴）必须同步，这里的讨论只集中于不同HSCCC的共同的地方。这两种旋转造成螺旋盘绕管中作令人昏乱的运动的液体产生混合区和静置分层区。这就为色谱形成造就了非常好的分离环境。

高效逆流色谱仪HPCCCC常见问题解答

高效逆流色谱仪HPCCC常见问题解答 1.什么情况下需要使用高效逆流色谱H PCCC? HPCCC是一种独特的技术，可以在低压状况下实现高质量的色谱纯化分离，并且进样量大，溶剂使用量低。在化学纯化技术方面存在着许多挑战；但是HPCCC特别适用于下列情况： z样品的溶解度不好，使用现有的其它纯化技术无法满足要求时 z从未经加工的原料样品中直接提取目标组份时 z产品开发过程中，涉及到多个制备级别时使用HPCCC的主要优势: z无样品损失——因为两相（流动相和固定相）都是液体，样品可以全部回收 z高通量技术——液/液分配体系除了有助于增加样品的溶解度，还能加大样品负载量，实现高通量的效果 z消耗溶剂少——处理相同数量的未加工原料样品，这种技术消耗溶剂量仅为（其它技术的）10% z工艺放大十分容易-——由于柱子填料容易再生，在任何条件和所有级别设备的操作中，分离条件非常容易复制。 2.高效逆流色谱HPCCC是如何发展起来的？ HPCCC是从液—液萃取技术发展而来的。通常在一个分液漏斗中，使样品溶解在两相溶剂体系中，激烈振荡，静置待两相发生分离。由于组分在两相溶剂中的溶解度不同，目标组分就会在两相中进行分配。待分配平衡后，从分液漏斗中移走重相，然后混合另一新的更轻相或者加入一些更重相到分液漏斗里，重复萃取过程。目标组分将再次被分配，如此反复多次，被分离样品的纯度就会越来越高。上述方式尽管有效，但很明显既费时又费力，因此需要对分液漏斗进行改进。Craig发明了非连续逆流分溶装置（Craig Counter-Current Distribution Apparatus），该装置由一系列分液漏斗连接而成，两相不混溶液体在分液漏斗间有序地重复混合、倾析，最终使溶质以逆流分配的方式分离在不同的漏斗中

高速逆流色谱原理及应用

高速逆流色谱
High Speed Counter Current Chromatography (HSCCC)

Outline
1. Principle 2. Properties 3. Applications

分配定律：Nernst, 1891 年，Ｋ＝Ｃ1／Ｃ2
两组分K相差较大：一次萃取可得到分离较小：多次萃取

? 1941, Martin & Synge 级联链型萃取，开创了分配色谱技术 ? 1944，Craig 非连续式逆流分溶 (countercurrent distribution, CCD) ? 1966，Ito 离心式螺旋管逆流色谱 (countercurrent chromatography,CCC) ? 1981， Ito 高速逆流色谱 High Speed Counter Current Chromatography (HSCCC) 液液分配色谱的新纪元

CCD法（Countercurrent distribution，反流分布法，逆流分溶法）：是一种多次连续的液-液萃取分离过程

Principle
液－液分配色谱 or 逆流色谱
利用一种特殊的流体动力学现象使互不混溶的两相溶剂(固定相和流动相)在螺旋管中高效地接触、混合、分配和传递其中固定相以一种相对均匀的方式分布在一根聚四氟乙烯管绕成的螺旋管中流动相以一定的速度通过固定相，并按照被分离物质分配系数的不同依次洗脱而获得分离
特殊的流体动力学？

高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化当归挥发油

简报高速逆流色谱法（HSCCC）分离纯化当归挥发油中的Z-藁本内酯滕厚雷1张达磊1李桂生1欧晓敏2 （1山东绿叶天然药物研究开发有限公司山东烟台 264003 2烟台大学生化系山东烟台 264003）摘要：目的采用高速逆流色谱技术分离提纯中药当归的活性成分Z-藁本内酯。方法采用正己烷－乙酸乙酯－甲醇－水（7∶2∶5：4）体系, 上相为固定相，下相为流动相，采用超临界萃取法从当归药材饮片中萃取挥发油。结果所得样品，经气相色谱检验纯度, １ＨＮＭＲ13CNMR及质谱判定结构。结论所得样品为Z-藁本内酯,纯度为99%。关键词：Z-藁本内酯；高速逆流色谱；当归油 Separation and purification of （Z）-Ligustilide from essential oils of Angelica sinensis (Oliv.)by high speed counter current chromatography Teng houlei a, Zhang dalei a , Li guisheng a, Ou xiaomin b a Shandong Enggineering Research Center of Natural DrugsYantai Shandong 264003 China b Yantai University Shandong 264003 China Abstract: Objective High speed counter current chromatography(HSCCC) was applied to the separation and purification of （Z）-Ligustilide from essential oil of Angelica sinensis (Oliv.) Diels. Method The solvent system used for HSCCC is n-hexane-ethyl actate-methanol-water(v/v 7∶2∶ 5：4), the organic layer was used as stationary phase, the aqueous phase was used as mobile phase. Essential oil was estracted from dried roots of Angelica sinensis (Oliv.) Diels.by supercritical CO2 extraction Result The purified （Z）-Ligustilide was dentified and analyzed by TLC ,GC, 1HNMR, 13CNMR and MS.Coclusion The result indicate that the solvent system of HSCCC can be used to purify Z-Ligustilide from essential oils of Angelica sinensis . Key words: （Z）-Ligustilide; high speed counter current chromatography; Angelica sinensis (Oliv.) Diels 高速逆流色谱( High-speedCountercurrentChromatography),简称HSCCC 是由美国国家医学院YiochiroIto博士于1982年首先开始的[1]。其工作原理是：当仪器工作时，互不相溶的两相溶剂在绕成线圈的聚四氟乙烯管内具有单向性流体动力平衡性质。在聚四氟乙烯管作高速行星运转时，如用其中一相溶剂作固定相，则恒流泵可以输送另一相溶剂载着样品穿过固定相。由于样品中各组分在两相中的分配能力不同，导致在聚四氟乙烯管中移动的速度也不同,因而能使样品中各