鸭肾怎么切花

鸭肝鸭肾都是可以用来吃的，有很多人将鸭肾做成菜，烹饪技术好的厨师能够把鸭肾做的非常好吃，但是除了好吃之外，菜还要讲究色香味俱全，不光要做的好吃，还要做的好看。这时候就需要考验做菜的人的切法，如果鸭肾切得好看就能做的好看。下面教大家鸭肾的切花方法。

1、小麦形花刀在平行斜刀图案的第一倾斜表面姬材料，然后把原料在一个角度，用直刀纪上一个条带斜刀平行线交叉直刀纹，然后改变刀成条状，然后加热后卷曲成小麦的形状

例如：肾，鱿鱼等

如：麦穗花刀切割法：肾脏去除筋膜和臊腰，光滑朝下平放在砧板，刀从斜平行的刀纹，肾深度2/3的第一行内，然后笔直的一行的刀刃平行线，深度为3/4的肾脏，两把刀成十字形图案，然后沿着线直刀切成小片，不太深、也不能太轻，只要稍微附着在皮肤上

刀向上：

在食品表面适当的角度在45度得出一些相当深的刀纹，所以它的卷曲成各种美丽的形状后再加热后，我们俗称为花刀这场战斗实际上是花不仅刀烹饪技术的审美成分，更主要的是缩短生产成熟，平衡的热渗透达到成熟和老嫩一致的内部和外部成分的时间

2、荔枝花形刀

例如：麦穗花刀切割法

例如：肾脏

也不能太轻，不太深，所以它的卷曲成各种美丽的形状后再加热后，两把刀成十字形图案;

第一行内：肾，刀从斜平行的刀纹

就像眼睛成在材料改刀（钻石块）一个块的形状加热后卷曲成荔枝状

提示撞墩子，肾深度2/：肾脏去除筋膜和臊腰，光滑朝下平放在砧板

在食品表面适当的角度在45度得出一些相当深的刀纹，鱿鱼等，然后改变刀成条状

刀向上：肾，然后把原料在一个角度小麦形花刀在平行斜刀图案的第一倾斜表面姬材料，然后沿着线直刀切成小片，深度为3/，更主要的是缩短生产成熟，我们俗称为花刀，然后加热后卷曲成小麦的形状

这场战斗实际上是花不仅刀烹饪技术的审美成分，鱿鱼等

细胞株

A001 人肺癌细胞A549 [A-549] A002 人前列腺癌细胞DU 145 [DU145；DU-145] A003 人胚肾细胞293 [HEK-293；HEK293] A004 人宫颈癌细胞HeLa A005 人乳腺癌细胞MCF7 [MCF-7] A006 人乳腺癌细胞MDA-MB-231 A007 人乳腺癌细胞MDA-MB-435S A008 人乳腺癌细胞MDA-MB-453 A009 人恶性多发性畸胎瘤细胞NTERA-2 A010 人卵巢畸胎瘤细胞PA-1 A011 人胰腺癌细胞PANC-1 A012 人成骨肉瘤细胞Saos-2 A013 人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y A014 人卵巢腺癌细胞SK-OV-3 [SKOV3] A015 人骨肉瘤细胞U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS] A016 人横纹肌肉瘤细胞A-204 A017 人肺腺癌细胞Calu-3 A018 人肾癌Wilms细胞G401 A019 人肝癌细胞Hep G2 [HepG2] A020 人包皮成纤维细胞HFF A021 人早幼粒急性白血病细胞HL-60 A022 人骨肉瘤细胞HOS A023 人慢性髓系白血病细胞K562 A024 人前列腺癌细胞LNCaP A025 人乳腺癌细胞MCF 7B A026 人急性淋巴母细胞性白血病细胞MOLT-4 A027 人胚肺成纤维细胞MRC-5 A028 人小细胞肺癌细胞NCI-H209 A029 人Burkitt淋巴瘤细胞Raji A030 人B淋巴细胞瘤细胞Ramos A031 人B淋巴细胞瘤细胞RAMOS（RA.1） A032 人脑瘤细胞SF126 A033 人脑瘤细胞SF763 A034 人脑瘤细胞SF767 A035 人皮肤黑色素瘤细胞SK-MEL-1 A036 人肾上腺皮质癌细胞SW-13 A037 人结直肠癌细胞T84 A038 人急性单核细胞白血病细胞THP-1 A039 人神经胶质细胞瘤细胞U251 A040 人组织细胞淋巴瘤细胞U937 [U-937] A041 人胃腺癌细胞BGC-823 [BGC823] A042 人低分化肺腺癌细胞GLC-82 [GLC82] A043 人喉癌上皮细胞Hep-2 [Hep2] A044 人皮肤成纤维细胞CCC-HSF-1

CEF、DEF培养

鸡胚成纤维细胞（CEF）、鸭胚成纤维细胞(DEF)培养一、材料 9?10日龄鸡胚13?14日龄鸭胚眼科剪、镊、外科镊、巴氏吸管、蛋架、灭菌平皿 25ml小三角瓶Hanks＇液 0.25%胰酶液 Versene液灭菌纱布、玻璃漏斗、0.1% 结晶柠檬酸（0.1M）或0.4%台盼兰, 血球计数板、60ML培养瓶或60ML培养皿、灭菌盖玻片、营养液。二方法（CEF为例）鸡胚理：取9?10日龄鸡胚直于蛋架，在气室部用于5%碘酊棉消毒，再用洒精棉脱色，用外科镊击破蛋壳用眼科镊取出胚体放于平皿内，去喙瓜眼和内脏，用Hank＇s液洗两次，用弯头眼科剪剪胚剪成1-2mm的碎块，加Hank’s液20ml,略加摇振，静置使组织块下沉，将混有红血球及碎片的上悬液吸去，重复洗2—3次，直至上悬液不混浊为止。 2、消化：将0.25%胰蛋白酶溶液用5、6%NaHCO2滴定至PH7、6—7、8，加热至37度，按组织块量3—5倍加于装有鸡胚碎块的三角瓶中，每个鸡胚约需胰酶5ml，30分钟取出，静置1—2分钟，吸去胰液，再加HanK’s 液20ml，轻轻摇动后吸去，如此反复两三次，目的是洗去残余的胰酶。第三次加入营养液，每胚3ml左右，用粗口吸管吹吸数次，使细胞脱落分散。静置1—2分钟，候组织下沉后，细心将细胞悬液吸出，另置一只25ml三角瓶，如此反复数次，使细胞尽量自组织块脱落，将多次取得的悬液合并一处，纱布过滤悬液。必须注意每次吹吸一般6—7次为宜，太多则细胞受损，消化时间要灵活掌握，不足细胞不易掊落，太久则细胞破碎。在消化过程中，摇动时组织不易下沉即立即停止，消化后如组织粘连如涕，证明消化过度。二、细胞计数：取细胞悬液0.1（100ul）置盛有0.9ml10.4%台盼蓝的试管中混合,用血球计数板计数。计算方法： 4大方格细胞数每ml细胞数=——————————————X10（5） 4 5中格细胞数或每ml细胞数=——————————X10（4）三：接种以营养液配成每ml10（6）细胞（最终稀释度）接种链霉素瓶（1ml）、60ml瓶（8—10ml），100mm dish（10ml），60mm dish（4ml），37度孵育48小进后形成单层，接种病毒或作次代培养。四、CEF单层可供作病毒TCID50\LD50等指数的测定,空斑计数\病毒中和试验等. ①取胚取13d龄spf鸭胚，无菌取出胚体,去除头、翅、爪和内脏，PBS冲洗2-3次以去除残留血液及胚液。 ②剪切用剪刀将胚体充分剪碎为0.5-1mm3的小块,再用注射器将团块吹打均匀，用10倍体积的PBS液洗涤1~2次至悬液清亮。 ③消化加入5倍体积的0.25%胰蛋白酶溶液，倒入玻璃珠充分混匀，消化5min，直至组织块边缘出现絮状物为止。 ④中止加入培养液中止消化，反复吹打细胞至匀浆，并用八层纱布过滤。 ⑤离心900rpm离心10min，弃上清，用培养液将沉淀重悬 ⑥分瓶培养稀释后按每瓶10ml装入细胞瓶中,置37℃恒温箱中静置培养

5-Fu尿嘧啶对人体胚胎肾细胞的抑制作用

5-Fu尿嘧啶对人体胚胎肾细胞的抑制作用摘要：运用MTT测定细胞活力的方法，检测经过不同浓度的5-氟尿嘧啶培养2天细胞的生长状况，计算不同浓度5-FU对细胞生长的抑制率。实验结果表明，在一定的浓度范围内，随着5-FU 浓度的提高，细胞的抑制率也提高；而10ug/ml的5-FU已经对细胞有比较明显的抑制作用。5-FU浓度达到150ug/ml左右时对细胞的抑制作用趋于最大，浓度再增大对细胞的抑制率基本稳定在75%左右不再上升。 5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)，是尿嘧啶5位的氢被氟取代的衍生物，是以抗代谢物而起作用，在细胞内转化为有效的氟尿嘧啶脱氧核苷酸后，通过阻断脱氧核糖尿苷酸受细胞内胸苷酸合成酶转化为胸苷酸，而干扰DNA的合成。氟尿嘧啶同样可以干扰RNA的合成。常用于治疗肿瘤。但由于5-FU对用药的患者有比较大的毒副作用，为治疗结果带来更多的不利影响，且此药通常用于治疗胃癌[5]，对宫颈癌细胞会有多大疗效，用药的浓度等基本的药理信息还比较缺乏。本实验用宫颈癌细胞做体外药物抑制效果实验，尝试探讨5-FU对细胞的抑制作用大小以及其用药浓度，为临床用药量研究提供基础资料。关键词：5-氟尿嘧啶、细胞、MTT法、抑制率引言： MTT法作用原理 MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，汉语化学名为3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色（或蓝色）结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中；在通常情况下，甲臜生成量与活细胞数成正比。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，因此用酶联免疫检测仪在490nm或570nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶，因此加入MTT不会有反应。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。 MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT吸光度最好在0-0.7范围内。同时，利用已知浓度细胞培养后的吸光度可以生成细胞生长趋势曲线，通过该曲线可推测出某一未知浓度细胞的原始接种浓度。 5-氟尿嘧啶抑制癌细胞生长原理恶性肿瘤患者由于肿瘤细胞无止境地分裂、增殖而不断地消耗宿主的营养物质，以及宿主因荷瘤状态所存在的代谢紊乱，机体常存在不同程度的营养不良，严重者导致恶液质，体质下降。5-氟尿嘧啶能够抑制癌移植瘤的生长并诱导瘤细胞的凋亡。5-氟尿嘧啶能选择性地攻击DNA碱基的氮原子，特别是鸟嘌呤的第7位氮原子，和胞嘧啶的第3位氮原子结合。由于和DNA呈交叉联接，对DNA的构型有明显影响，使双螺旋解旋使分子变短；可与DNA形成链内交联，也可形成链间交联或DNA-蛋白质间的交叉联结，由于其可使DNA的模板作用失活，从而抑制DNA合成而抑制肿瘤的生长。方法：主要试剂细胞培养液、胰酶、1640、MTT溶液、5-FU溶液、二甲基亚砜（DMSO）实验用细胞：肿瘤细胞实验方法

肾母细胞瘤

肾母细胞瘤【概述】肾母细胞瘤（Wilms'tumor）是最常见的腹部恶性肿瘤，其发病率在小儿腹部肿瘤中占首位。肿瘤主要发生在生后最初5年内，特别多见于2～4岁。左右侧发病数相近，3～10％为双侧性，或同时或相继发生。男女性别几无差别，但多数报告中男性略多于女性。个别病例发生于成人。1899年德国医师Max Wilms首先报告此病，后以该氏姓氏命名而为人们所熟知。近代称为肾母细胞瘤（Nephroblastoma),因从胚胎发生上由后肾发展而成，且肿瘤由极其类似肾母细胞的成份所组成。自化学疗法问世，尤其放线菌素D 与长春新碱对本瘤特殊有效，加以采用综合治疗方案，使其预后明显改善，各期的2年生存率均可在80％以上，甚至达92％，是肿瘤治疗取得巨大成功的实践之一。【诊断】在婴儿发现上腹部肿块，应按现代诊断技术进行检查。排泄性泌尿系造影可见肾外形增大，肾盂肾盏变形、伸长、移位或有破坏。部分病例肾功能减退或完全不显影，需应用大剂量造影剂造影。平片上伸有散在或线状钙化。超声检查有助于鉴别肾积水。CT 检查有助于确定肿瘤侵犯的范围。并可进行血清红细胞生长素测定和血清肾素测定。必要时可进行肾动脉造影，99mTc-DMSA肾闪烁扫描等检查。

肾母细胞瘤至今尚无诊断性肿瘤标记物。与神经母细胞瘤等肿瘤鉴别时，可进行骨髓穿刺，尿VMA、HVA定量，血清乳酸脱氢酶（LDH），甲胎蛋白（AFP）定量，神经元特异性烯醇化酶（NSE）定量等检查。在剖腹时，典型所见，肾母细胞瘤是一个实质，光滑、表面有扩张的侧支血管，略带蓝色的球形肿物，部分取代其所发生的肾脏，并使肾脏移位。由于肿瘤被高张力的肾被膜所围绕，且有脆而易碎、富于细胞的特性，应避免在术前、术中作穿刺或切开活检，以免种植而播散。为了除外双侧性肿瘤的可能，有时必须进行活检，尤其是在第2次、第3次手术时，要选择合适的部位。在获得确切的诊断后，才能制定有效的治疗方案。有一组报告小儿双侧肾母细胞瘤，虽然活检19例中17例获得生存，这是很好的证明。不应由于惧怕活检种植，以致未能明确肿瘤的组织结构，从而降低生存率。当然，切除单侧病变的病例，为了活检是要付出代价的。肿瘤散落的病例，即使能将肿瘤完全切除，并处于有利的病期，但仍需加用化疗和放疗而对能完整切除肿瘤，未作活检的病例，只要少量化疗可以获得同样的治愈率。术前诊断必须了解以下问题：（一）对侧肾脏是否正常因为肾母细胞瘤的治疗是肾切除，对侧肾功能必须正常。有可能同时发生双侧性肿瘤，也许对侧肾脏缺如或有先天性畸形。根据病史，体检，超声，血和尿的实验室检查以及排泄性泌尿系造影所示，基本上可以作出如下的诊断，对侧

小鹅瘟病毒

小鹅瘟病毒基本介绍鹅细小病毒（Goose Parvoviruse,GPV）是小鹅瘟（Gosling Plague,GP）的病原，1956年我国学者方定一于扬州首次发现并分离到GPV。GPV属于细小病毒科细小病毒属成员，GPV可引起雏鹅急性或亚急性的败血性传染病。 1、形态病毒颗粒直径20～25nm。 2、理化特征病毒浓缩：在0.5 M N a C I 的条件下,6 % P E G 能将绝大部份病毒沉降下来。氯仿处理与P E G 沉淀相结合,可使96.4 % 的杂质蛋白被排除。层析纯化：病毒经P E G 沉淀和蔗糖密度梯度离心后,再经CsC I平衡密度涕度离心,出现两条沉淀带,主带位于1.3 1 ~ 1.3 5g/ml。电镜观察发现大量病毒粒子,有空心和实心两种,大小为 2 0 ~2 2 n m。另一区带极小,密度1.4 2 g / m l左右,但在电镜下未发现病毒粒子。抵抗力：不能凝集禽类、哺乳动物和人类的红细胞，病毒对外界因素的抵抗力很强，能抵抗乙醚、氯仿、胰蛋白酶、pH3和56℃3h 作用处理。

方定一等先后用SYG61-3和SDG65-1毒株鹅胚绒尿液进行试验，结果经氯仿、乙醚、胰酶、pH3处理的绒尿液试验组接种鹅胚，和未经处理的绒尿液对照接种鹅胚无差异。证明鹅胚绒尿液中的小鹅瘟病毒能抵抗氯仿、乙醚、胰酶、pH3的作用。结果经56℃作用3小时，仍然使鹅胚致死，但死亡时间较原来病毒延长至96-120小时；置-7℃冰箱内10个月也使鹅胚致死，但死亡时间延长至96-112小时。在0℃下用真空抽气干燥的病毒和-7℃真空中贮存10个月的病毒，对鹅胚致死的时间并无差异；置-20℃冰箱2年仍能使鹅胚致死。 3、抗原性抗原分析表明，国内外所有GPV分离株属于同一个血清型，目前研究表明GPV 只有一个血清型。 4、培养特性 GPV可在鹅胚、鸭胚上适应和培养。（1）鹅胚：小鹅瘟病毒存在于病鹅的内脏组织、肠管、脑及血液中。用上述病理材料接种于鹅胚（12-13日龄）均能分离到病毒。鹅胚在接种之后3-7天内死亡。在鹅胚连续通过多代以后，对胚体致死的时间可以稳定在3天左右。我们发现鹅胚和雏鹅对病毒的易感性有很大差异，免疫母鹅所产卵的胚和雏鹅对病毒有抵抗力。（2）细胞培养：先后用5个鹅胚传代毒株感染鹅胚成纤维细胞、鹅胚肝细胞、鹅胚肾细胞、鸭胚成纤维细胞、鸭胚肝细胞、鸡胚成纤维

293细胞类别比较

HEK-293细胞293A 293S 293T 和293FT cell区别比较 293细胞分为几种，文献上所提总是笼统的讲293细胞，可293有293A,还有293T，请问二者有什么区别，是否293A是用来包腺病毒的，293T是用来包慢病毒的，是否还有其他293细胞，比如293S 课题需要做腺病毒转染，看了initrogen的说明书上说用293A细胞。在clontech的说明书上就是293细胞。 293细胞比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。293细胞的一个衍生株：293T/17的转染效率更高，成为广大研究者研究基因功能的一个强大工具。 293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失，从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中，就需要让细胞沉降几天时间，因为大量细胞会漂浮在培养液里。来源：人体肾脏形态：上皮细胞生长特性：贴壁注释：该细胞含腺病毒5 DNA 。培养液：MEM（含2 mM L-谷氨酰胺和Earle's BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸钠），10% 马血清（热灭活）。传代：吸去培养液。用0.25% (w/) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清会抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培养箱内约5分钟，直到细胞全部脱落。加6-8毫升培养液，用移液器把细胞吹散。加适量的细胞到新的培养器皿中。（以1：2到1：4为宜，传代期间培养液2-3天更换1次）冻存：95%培养液+5%DMSO冻存于液氮。 293A细胞：比较有意思了，是293中后来又建的细胞亚株，这个A是adhere的意思，就是说293倾向于形成单层细胞（monolayer），它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验（plaque assay)293A是均匀的一层，没有细胞重叠和细胞空隙（hole），就这个意思，这个A所对的是293S（suspension). 293细胞：是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞，表达转染的腺病毒5的基因。 293T细胞：表达E1A蛋白，S40大T抗原，含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。 293FT细胞：能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞，组成性表达E1A 和E1B 蛋白。 AAV-293细胞：腺病毒转化的人胚肾细胞

常见细胞株中文名称及缩写

人类组织正常及永生化细胞英文名中文名称 293E E转化人胚肾293细胞（B类） 293ET ET转化人胚肾293细胞（B类） 293KB KB转化人胚肾293细胞（B类） 293T人胚肾T细胞 A7d野生型人 C-KIT受体细胞株（B类） AMS3(SCF3)人干细胞因子单克隆抗体细胞株(B类) APP-PS1人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293)(B类) FC33ASP2人胚胎肾细胞转化细胞 FIP293FIP293(来源于HEK293)(B类) HEK-293人胚肾细胞 CCC-HPF-1人胚肺二倍体细胞 CCC-ESF-1人胚胎皮肤成纤维细胞 HFF人前皮肤成纤维细胞 HFSF人胚胎眼巩膜成纤维细胞 HFTF人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞 HK-2人肾小球上皮细胞 HKC人胚肾上皮细胞 HSF人皮肤成纤维细胞 MRC-5人胚肺成纤维细胞 WISH人羊膜细胞 CCC-HEL-1人胚胎肝正常细胞 CCC-HEK-1人胚胎肾正常细胞 CCC-HHM-2人胚胎心肌组织来源细胞 CCC-HPE-2人胚胎胰腺组织来源细胞 CCC-HB-2人胚胎膀胱组织来源细胞 CCC-HIE-2人胚胎肠粘膜细胞 CCC-HBE-2人胚胎气管细胞动物组织正常及永生化细胞 3T3swiss swiss鼠胚胎成纤维细胞 3T3L1小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) 3T6swiss小鼠胚胎成纤维细胞 7WCY1.0人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO)(B类) 7WD10人APP基因转染细胞株(CHO)(B类) 7WML6.0人APP-PSI（M146L)双基因转染细胞株（CHO)(B类）7WPS1APP-PS1双基因转染细胞株（CHO）（B类） BaF3小鼠原B细胞（B类） BHK-21金黄地鼠肾 BS-C-1非注洲绿猴肾 C2C12小鼠成肌细胞 C3H10T1/22A6小鼠成纤维细胞 CH0dhfr二氢叶酸缺陷型中国仓鼠卵巢细胞 CHO-K1中国仓鼠卵巢细胞

鸭胚成纤维细胞培养_传代及保存方法的研究_许静

收稿日期：2012-01-04 修回日期：2012-02-20?基金项目：现代农业产业技术体系建设专项资金（NY ?CYTX-45-02）；浙江省农科院科技创新能力提升工程 ??通讯作者，E-mail ：well-being365@https://www.360docs.net/doc/9b7623599.html, 鸭胚成纤维细胞培养鸭胚成纤维细胞培养、、传代及保存方法的研究 ? 许静1，2 ，李进军1??，熊胜1，陈黎1，杨倩2，卢立志1 （1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，浙江杭州310021； 2.南京农业大学动物医学院，江苏南京210095） Culture ，Subculture and Cryopreservation of Embryo Fibroblast of Duck ? XU Jing 1，2 ，LI Jinjun 1??，XIONG Sheng 1，CHEN Li 1，YANG Qian 2，LU Lizhi 1 （1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine ， Zhejiang Academy of Agricultural Sciences ，Hangzhou ，Zhejiang 310021； 2.College of Veterinary Medicine ，Nanjing Agricultural University ，Nanjing ，Jiangsu 210095） Abstract ：Effective methods for isolation ，culture ，subculture and cryopreservation of duck embryo fibroblast in vitro was established which would lay the foundation for culture of embryo or germ stem cells.The duck embryonal tissue was digested with trypsin-EDTA to obtain primary cells and passage cells ，which were cultured with 10%FBS+https://www.360docs.net/doc/9b7623599.html,e the DMSO ，glycerin ，ethylene glycol as cryoprotectants to freeze F 1cells ，and observe the cell viability of anabiotic cells.The methods could be used for isolation and pure culture of duck embryo fibroblast in vitro ，and could be subcultured to the third generation.The results indicated that the cell viability in F 1and F 2came up to 90%，but no significant difference was observed.The cell viability of all anabiotic cells decreased （<80%）after cryostoraged by three different cryoprotectants.DMSO was the most effective reagent for cryopreservation of duck embryo fibroblast. Key words ：duck embryo fibroblast ；culture in vitro ；cryopreservation ；cell viability

2015年微生物检验技术中级主管技师卫生资格考试真题

2015年微生物检验技术中级主管技师卫生资格考试真题天宇考王卫生资格考试题库包含：章节练习、综合复习题、模拟试卷、考前冲刺、历年真题等。试题量：2859道。 B型题：以下提供若干组考题，每组考题共用在考题前列出的A、B、C、D、E 五个备选答案。请从中选择一个与问题关系最密切的答案，某个备选答案可能被选择一次、多次或不被选择。 A.84消毒液 B.过氧乙酸 C.碘酒 D.乙醇 E.新洁尔灭 1、为防止肠道传染病发生，蔬菜、瓜果可选用的最佳消毒剂是正确答案：A 2、对肝炎患者用过的餐具进行消毒最好选用正确答案：B A.AIDS B.中毒性休克综合征 C.SARS D.毒血症 E.腹腔脓肿 3、破伤风梭菌可导致正确答案：D 答案解析：无芽胞厌氧菌的感染往往无特定的病型，常引起局部的炎症、脓肿和组织坏死等，并可累及全身各个部位，如中耳炎、鼻窦炎、牙周脓肿、坏死性肺炎、肺脓肿、腹膜炎、阑尾炎、盆腔脓肿、子宫内膜炎、骨髓炎、败血症、脑脓肿等。

4、无芽胞厌氧菌可导致正确答案：E 答案解析：无芽胞厌氧菌的感染往往无特定的病型，常引起局部的炎症、脓肿和组织坏死等，并可累及全身各个部位，如中耳炎、鼻窦炎、牙周脓肿、坏死性肺炎、肺脓肿、腹膜炎、阑尾炎、盆腔脓肿、子宫内膜炎、骨髓炎、败血症、脑脓肿等。 A.HEK-293、HeLa或A549细胞 B.MA104 C.Caco-2 D.V ero E.无法培养分离 5、A组轮状病毒最适合的细胞培养分离是正确答案：B 答案解析：选用恒河猴胚肾细胞系(MA104)可分离培养标本中的A组轮状病毒。人杯状病毒尚无法培养，也无合适的动物模型。选用人胚肾细胞株HEK-293、HeLa或A549细胞可分离培养肠道腺病毒。大肠癌细胞Caco-2可用于分离培养星状病毒。 6、杯状病毒最适合的细胞培养分离是正确答案：E 答案解析：选用恒河猴胚肾细胞系(MA104)可分离培养标本中的A组轮状病毒。人杯状病毒尚无法培养，也无合适的动物模型。选用人胚肾细胞株HEK-293、HeLa或A549细胞可分离培养肠道腺病毒。大肠癌细胞Caco-2可用于分离培养星状病毒。 7、肠道腺病毒最适合的细胞培养分离是正确答案：A 答案解析：选用恒河猴胚肾细胞系(MA104)可分离培养标本中的A组轮状病毒。人杯状病毒尚无法培养，也无合适的动物模型。选用人胚肾细胞株HEK-293、HeLa或A549细胞可分离培养肠道腺病毒。大肠癌细胞Caco-2可用于分离培养星状病毒。 8、星状病毒最适合的细胞培养分离是正确答案：C 答案解析：选用恒河猴胚肾细胞系(MA104)可分离培养标本中的A组轮状病毒。人杯状病毒

鸭胚成纤维细胞的制备(cy)

鸭胚成纤维细胞培养、传代及保存的操作方法一．成纤维细胞的培养 1.准备事项： ○1细胞培养工作首先应建立在无菌操作的基础上,应注意的是操作人员应穿无菌工作服,戴无菌橡皮手套;试验前,细胞培养室和超净工作台应开紫外灯20~30 min,再进行试验操作;要特别注意提防试剂瓶中的液体浸润瓶盖;严禁操作时手在各种器皿上方经过,并尽量保持培养器皿水平倾斜。 ○2操作器具：烧杯、镊子、剪刀、玻璃皿（培养皿）、培养瓶、酒精灯、记号笔、移液枪、胶质枪头、圆底离心管、离心机、水浴锅、显微镜、超净工作台及培养箱等。 ○3操作药剂：PBS缓冲液、胰蛋白酶、双抗、营养液(培养液)、胎牛血清（犊牛血清）、DMEM等。 ○4选材：取材应以10~13日龄的胚胎较好,因胚胎处于蛋壳内部,大大降低了污染的机率,而此日龄的胚胎未形成或形成较少的绒毛和软骨,操作较方便,且细胞生长状态较好,死细胞少,生长速度快。 2.操作步骤： ○1取胚取10 -13日龄发育良好的鸭胚,分别用碘酒和酒精棉由鸭胚中央向四周擦拭消毒，然后放入超净台，小心地用无菌镊子磕破蛋壳，沿气室边缘夹掉蛋壳，注意不让蛋壳落入蛋内。换用新的无菌镊子揭开蛋壳膜，再用弯头镊子深入胚内夹住鸭胚颈部取出，放入平皿中，再用加有双抗的PBS缓冲液冲洗2 -3次以去除残留血液及胚液。 ○2剪切将取出的鸭胚去头、四肢、内脏，放入一小烧杯中，然后用剪刀仔细将组织反复剪碎，直到成1mm3左右的小块，再用PBS清洗3遍，至组织块发白、悬液清亮为止。 ○3消化 ·冷消化：将盛有洗涤后的组织块的烧杯置冰水浴中,随即加入10倍体积的0.25%胰蛋白酶溶液充分混匀2~3min后放入4℃冰箱中6~18小时取出。吸出其中大部分胰酶液,然后37℃水浴锅或温箱中温育10~30min，其间3~5min混匀一次,直至组织块边缘出现絮状物为止。 ·热消化：将洗涤过的组织块加10倍体积的0.25%胰酶液后直接放入37℃水浴锅中10~30min,吸出其中大部分胰酶液,然后37℃水浴锅或温箱中温育10~30min，其间3~5min混匀一次,直至组织块边缘出现絮状物为止。 ○4洗涤将消化物用5倍体积的营养液轻轻浸洗2~3次,至悬液清亮，然后弃去上清液。 ○5吹打加入预温的营养液洗涤一次,留适量残余液反复吹打细胞至匀浆,加入营养液进一步悬浮细胞,并用四层纱布过滤去杂。 ○6细胞计数用血球计数板做细胞计数后,补加适量营养液,使每毫升约含1×106个细胞。 ○7分瓶培养按每瓶8~10ml装入细胞瓶中,置37恒温箱中静置培养。每隔4 -6小时观察细胞贴壁生长状况并记录。对比操作方法： ○1取10~12日龄鸭胚，照蛋挑选活胚，用碘酒、酒精消毒蛋壳；去壳取鸭胚，放入无菌平皿中，去头、四肢及内脏；将取得的胚体放入小烧杯中，用PBS清洗3次，后转入另一

细胞株分类

细胞株人胚肾细胞 293T CRL-11268? 肾 DMEM＋10％FBS 人肾上皮细胞系 293 肾 DMEM＋10％FBS 人肾上皮细胞系 293H 肾 DMEM＋10％FBS 人脐静脉内皮细胞 HUVEC 脐带静脉 ECM或 EGM-2 人胚肺成纤维细胞 HLF 胚胎；肺 MEM α(+)+10%FBS 人胚肺二倍体细胞 CCC-HPF-1 胚胎；肺 DMEM+ 10% FBS 人微血管内皮细胞 MVEC 微血管 DMEM+ 10%NBCS 人肝癌细胞 Hep G2 HB-8065? 肝细胞癌 DMEM＋10％NBCS 人肝癌细胞 BEL-7402 肝癌 RPMI 1640 + 10% NBCS 鼠肝癌细胞 H22 （悬浮）肝癌 RPMI 1640 + 10% NBCS 人肺腺癌细胞 SPC-A-1 肺癌 RPMI 1640 + 10% FBS 人肺癌细胞 A549 CCL-185? 肺癌 RPMI 1640 + 10% NBCS 人肺癌细胞 GLC82 肺癌人小细胞肺癌细胞NCI-H446 HTB-171? 肺癌 RPMI 1640 + 10% NBCS 人肺鳞癌细胞 NC1-H460 肺鳞癌 RPMI 1640 + 10% FBS 鼠Lewis肺腺癌细胞（非小细胞） LLC 肺癌 RPMI 1640 + 10% FBS 人胃腺癌细胞（低分化） BGC-823 胃癌 RPMI 1640 + 10% NBCS 人胃癌细胞 NCI-N87 CRL-5822? 胃癌 RPMI 1640 + 10% FBS 人胃癌细胞（未分化） HGC-27 胃癌 RPMI 1640 + 10% NBCS 人乳腺癌细胞 MCF-7 HTB-22? 腺癌，乳腺，胸水。 DMEM＋10％NBCS 人乳腺癌细胞 MDA-MB-435S HTB-129? mammary gland; breast DMEM＋10％NBCS 129&Template=cellBiology 人宫颈癌细胞 HeLa CCL-2? 宫颈腺癌 DMEM＋10％NBCS 人结肠癌细胞 CaCo-2 HTB-37? 结肠癌 DMEM＋10％FBS 人胰腺癌细胞 PANC-1 CRL-1469? 胰腺；胰管；上皮细胞癌 DMEM＋10％FBS 人恶性黑色素瘤细胞 A-375 CRL-1619? 皮肤；恶性黑色素瘤 DMEM＋10％NBCS 鼠黑色素瘤细胞 B16-luc 黑色素瘤 RPMI 1640 + 10% NBCS 人纤维肉瘤细胞 HT1080 CCL-121? 纤维肉瘤 MEM或 DMEM＋10％FBS 人原髓细胞白血病细胞 HL-60 （悬浮） CCL-240? 外周血；早幼粒细胞；急性粒－单核细胞白血病

常见细胞株

104C1 转化的豚鼠胎体细胞 143TK 人胸腺激酶缺陷性细胞系 1590 人乳腺癌细胞系 16HBE 人支气管上皮细胞 208F 大鼠成纤维细胞 22RV1 人前列腺癌细胞 293 人胚肾细胞 293A 人胚肾细胞系 293AV 人胚肾细胞-用于腺病毒包装 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞293EE 转化人胚肾293细胞 293ET ET转化人胚肾293细胞 293FT 人胚肾细胞-用于慢病毒包装 A2780细胞[人卵巢癌细胞] 293KB KB转化人胚肾293细胞 293T SV40转化的人胚肾上皮细胞 293TN 人胚肾细胞--用于慢病毒包装 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞2B4 人前列腺癌细胞 2BS 人胚肺成纤维样细胞 2V6.11 人胚肾细胞 311 果蝇胚胎细胞 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞35.1 杂交瘤细胞抗CD2 3AO 人卵巢癌细胞 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞3T3 小鼠胚胎瘤成纤维细胞 3T3-E1 鼠胚成骨细胞 3T3-L1 小鼠脂肪细胞 3T3-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞 3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞4179 长尾绿猴胚胎细胞 4647 长尾绿猴肾细胞 4T1 小鼠乳腺癌细胞 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞5637 人膀胱癌细胞 6T-CEM 人T细胞白血病细胞 769-P 人肾癌细胞系 786-O 人肾透明细胞腺癌细胞 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞7WCY1.0 人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO) 7WD10 人APP基因转染细胞株(CHO)) 7WML6.0 人APP-PS1(M146L)双基因转染细胞株(CHO) 7WPS1 人APP-PS1双基因转染细胞株(CHO) 801-D 人巨细胞性肺癌细胞 810-D 人巨细胞性肺癌细胞 95-C 人低转移肺癌细胞 A2780细胞[人卵巢癌细胞] ATCC细胞95-D 人高转移肺癌细胞 973 人肺腺癌细胞 9L 小鼠胶质瘤细胞