显微镜常见问题集锦

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文章来自:https://www.360docs.net/doc/9712433029.html,/timemodel/article/2010-04-10/294224.html 1.暗场与相差能在同一台显微镜上以便于吗?

答:暗场与相差可行在同一台显微镜上以便于。但一般是在正置显微镜上。倒置显微镜上以便于暗场比较麻烦。

2.我想请教一下,霍夫曼原理和微分干涉原理各有什么特点,什么类型的显微镜会用到这些原理?贵公司的显微镜有使用此原理的吗?

答:霍夫曼是在微分干涉的基础上发展起来的,主要用于检测透明标本和显微注射。比如活细胞检测,转基因等。

微分干涉的特点是分辨率高。但只能使用玻璃的培养皿,而且聚光镜的工作距离短,不适合显微操作。霍夫曼的分辨率没有微分干涉高,但可行使用塑料培养皿(比较经济方便),而且聚光镜的工作距离比较长,适合显微操作(因为空间大)一般霍夫曼都是应用在倒置显微镜上,微分干涉则应用较广倒置和正置显微镜都可行。我们的显微镜当然会有这些检测方法,BX51,BX61,IX51,IX71,IX81等高档显微镜都可行增加这些功能。而且可行在一台显微镜上以便于两种或多种检测方式。(当然,霍夫曼和微分干涉一般没有必要同时使用)

3.N.A值决定物镜的分辨率、焦深、图像亮度的基本数据,请问如何用N.A值大小决定分辨率(解析力)、焦深、图像亮度?

答:分辨率=波长/NA。波长为照明光源的波长,单位微米。如果为

可见光是400--700nm. 平均波长为550nm,所以可行简化成0.55微米。

焦深=Kn/M Na. K为常数约240。n为介质的折射率。M是总放大倍率。NA为物镜的数值孔径。图象亮度由于影响因素太多,无法用简单的公式表术。以上两个公式都是在理想状态下的情况,真实检测中实际的分辨率还回受聚光镜等其他因素影响。

4.体视显微镜可行看到的最小尺寸为多少?可否用于非陶粒滤料体系?解剖时可行适用普通工具吗?还有,是否有哪类显微镜适用于非陶粒滤料体系?

答:体式显微镜能看到的最小尺寸需要由物镜,放大倍率等决定。

当然可行用于非陶粒滤料体系,而且用的还相当多。可直接在体式镜下使用普通工具进行解剖。

5.我们想知道的是体式显微镜最大的放大倍数,不知可否告知? 我们想要检测的物体类似于铅笔尖的形状,但尺寸要远远小于铅笔尖,其尺寸在微米级乃至微米级以下.不知可否适用?

答:体视显微镜如果增加辅助透镜并且更换高倍率的目镜,可行达到600多倍。但是倍率越高,工作距离就越短,能够检测到的视野就越小,显微操作的难度就越大。

关于分辨率的问题,主要看所配的物镜NA值。一般体视镜增加辅助透镜的话也就能达到0.275左右。计算下来最大分辨率可行达到2微

米左右。如果您的标本在微米级以下,从理论上讲,体视镜做不了。可能要用其他显微镜了。

6.荧光显微镜中excitation filter,emission wavelength,barrier filter 代表什么?在显微镜中如何调节?

答:excitation filter:激发滤色镜

emission wavelength:发射波长

barrier filter: 吸收滤色镜

由于现在的大多数显微镜中,激发滤色镜,吸收滤色镜和分光镜都集成为一个激发块,不用调节,直接根据需要使用相应的激发块即可。如有特殊组合的需要,直接和厂家订购时说明即可。

7.我想请问下显微镜里的金相是什么概念呢?

答:主要指用来看金属和工业材料的显微镜,以落射为主。相关配置考虑到工业用户的需求。

8.BH-2的显微镜可行加荧光装置吗,哪里有卖的,价格大概多少?请各位指点。

答:由于BH2系列产品及其荧光装置已经多年不生产,所以现在我们无法提供。非常抱歉。您看是否和有BH2荧光装置的老用户联系购买。

9.我不知道陶粒滤料显微镜与系统显微镜的区别,有谁知道告诉我好吗?

答:其实这是两个不太规范和准确的称呼。陶粒滤料显微镜指应用在陶粒滤料显微镜领域的显微镜,主要是为了与工业显微镜相区别才有这个名字。包括的范围很广。系统显微镜是指功能比较复杂的显微镜,往往一台显微镜内综合了多种检测方式或者相关附件。比如明场,相差,荧光等等功能在一台显微镜上以便于。这些功能现在看起来简单,在几十年前,受技术上的限制,很难在一台显微镜上以便于。目前常见的比较高档的显微镜都可行算系统显微镜范畴。

10.显微镜内发霉。又拆不开,无法清洗,如何是好?

答:看您是显微镜的哪部分发霉。如果是检测筒或者聚光镜等部位,在维修站是可行除霉的。如果您的显微镜是OLYMPUS的可行送到我们的维修站。由于显微镜的内部除霉需要工具和特殊的除霉剂,并且除霉后所有拆过的部件都要进行光路校正,所以最好是送到维修站内进行。

11.把样品夹在两块正交偏振片之间,用普通光学显微镜检测,以代替偏光显微镜会有什么问题吗?以我的预算实在不够买一台偏光的。答:普通光学显微镜加上起偏镜和检偏镜,可行组成一台简易偏光显微镜。这样成本极大地降低。(当然不能完成太复杂的偏光测量)。您

可和我们联系,看是否可行在现有普通光镜上加简易偏光附件,以便于偏光检测,做到少花钱,多办事。

12.我想了解一下显微镜基础知识如:倒置显微镜和正置显微镜比较区别或倒置显微镜的优点;三目是什么概念;普通显微镜的目镜可行调换放大倍数的目镜吗?

答:倒置显微镜不同于正置显微镜的地方有:

1。透射光倒置显微镜光源和聚光镜位于载物台上方,照明光源自上方向下照射

2。物镜安装在载物台下方,向上对焦

3。物镜,聚光镜均适用长焦距检测

4。医学,陶粒滤料学领域中适合检测培养瓶中培养细胞,悬浮细胞,分离细胞。

5。由于工作距离长,一般工作空间大,适合在载物台上搭建其它附件(如细胞注射,电极)

三目指检测筒上除了人眼检测的两个镜筒外,一般在上面还有一个可接照相装置的接口,称为三目。

只要成像面相同,可行调换。

13.相差显微镜是相衬显微镜吗?有人介绍用CX31或CX41加上相差附件就为相差显微镜,是吗?如果是,那么物镜是否也要配相差物镜?

答:没错!相差显微镜就是相衬显微镜

我们所说的相差附件其实包括相差聚光镜和相差物镜两大部分。这两部分缺一不可。

如果要讲相差显微镜原理,这里的篇幅可能就不够了。以后专门介绍一次吧。简单的讲相差显微镜是专门检测透明标本的显微镜,比如活的细胞等不适宜染色的标本。通过特殊聚光镜和物镜的组合使肉眼无法检测到的光的相位差转换成可行识别的明暗差别。

14.请教测钙系统的组成由哪几个部分组成?用于哪些方面?

答:测钙系统:高级单色CCD,毫秒级快速快门,氙灯光源,

高紫外透过物镜,FURO2的激发块,以及相关软件(UIC)

15.请问在视场直径的公式中,F=FN/Mob;得到的值的单位是什么,毫米吗,还是别的?

答:对,是毫米。

16.我想了解一下贵公司是否有集一般金属金相检测和陶粒滤料组织细胞检测于一身的两用显微镜。并且能同时进行照相和图象分析。答:您的要求从理论上是可行以便于的。基本上有两种方案,一是利用金相显微镜的机架,增加透射光检测配件。另一种是利用组织检测的透射光显微镜,增加普通反射光检测附件。

但是,金相检测必须要专用的金相物镜,而陶粒滤料组织细胞检测需

要相差物镜。两种是不能通用的。

关于同时进行照相和图象分析,是肯定没有问题的。

综上所述,您的要求可行在一台显微镜上以便于,但需要配两套物镜。

17. BX61及IX81目前只能达到Z轴的电动聚焦,而用户要求X、Y、Z三轴全部电动,请问X、Y轴的电动如何以便于?

答:我们目前没有X,Y轴的电动载物台,但Media 公司有与IPP软件打包的X,Y,Z轴的电动载物台。

光学显微镜常见机械故障

一、粗调失灵 故障现象是当转动粗准焦螺旋时,镜筒不能随之升降。显微镜镜简的升降是靠齿轮带动因条来实现的,而齿轮固定在粗调旋钮的转轴上,齿条固定在镜筒上。当转动粗调旋钮时,齿轮带动条使镜筒升降。如果镜筒不能随之升降,说明齿轮与齿条没有吻合。常见的故障原因是齿杆套随粗调旋纽一起转动,即齿杆套上的二个止动螺钉没有把齿杆套固定在燕尾导轨上。修理方法是把齿轮移到齿杆套缺口中间,并让齿杆套的缺口面向齿条,再用小螺丝刀将尾导轨端面上的二个止动螺钉旋紧。如果无效,说明齿条磨损严重,则需取下镜筒,旋出齿条上、下的固定螺钉,将齿条倒过来使用,因为齿条磨损主要发生在齿条的上部。或者根据齿条宽度剪一条金属薄片,让金属薄片镶嵌在齿条上,并用固定螺钉把薄片和齿条固定在镜筒上,插上镜筒调试。如感到有松紧情况,则可更换金属薄片的厚度,直至合适为止。或者按原型号规格向生产厂家购买新齿条。 二、镜筒自行下滑 故障现象是当焦距对准后,手松开准焦螺旋,镜简会自行下滑,导致焦距不准。显微镜粗调构造中,齿轮轴的松紧一般是用齿杆套与粗调旋钮间的摩擦力的大小来控制的,而齿轮轴与齿杆套之间的摩擦力是由与齿轮轴连接的两个粗调旅钮通过两个塑料垫圈紧压在齿杆套端面上而取得的。粮调旋或与齿杆套端面压得越紧,得到的摩擦力就越大。镜筒自行下滑的原因是由于垫圈使用日久,磨损变形,导致齿轮轴与齿杆套之间的摩擦力减少,齿轮轴与齿杆套之间的摩擦力产生的力矩克服不了镜筒自身重力而产生的力矩而引起的。修理方法是,双手各握一侧粗调旋钮,相对按照顺时针方向拧紧粗调旋钮。如果无效,则需加厚垫圈。用尖嘴钳插入任一粗调旋钮端面的双眼螺母内,将其旋出,取下粗调旋钮,取出塑料垫圈,用青壳纸或薄塑料片剪一个直径相同的垫圈,夹在原垫圈与粗调旋钮之间,重新装好,如果转动粗调旋钮很费力,说明垫圈加得太厚了,应换个薄些的垫圈,总之以转动粗调旋或有一定的阻力又要镜筒不易自行下滑为准。 三、集光器不能定位或卡死 常见的集光器有二种:一种是圆盘或光栏,在圆盘卜有大小不等的圆孔。这种光栏是依靠载物台下面的定位弹簧和滚珠卡在圆盘的定位孔中来定位的。当滚珠遗失或弹簧失效时都可能造成光柱不能定位。修理方法是更换滚珠或弹簧。现在有的厂家已经把这种依靠弹簧和滚珠的定位方法改为依靠弹簧片来定位,这种结构更牢固,更不容易损坏。另一种是彩虹式光柱,它是由十二片圆弧形薄钢片(即遮光片)组成。只要拨动滑动权上的手柄,就可以任意改变光圈的大小。其常见的故障是遮光片上的小钢柱脱落,造成手柄卡死,光圈无法改变。修理方法是,用小螺丝刀把光栏上的二个固定螺钉松开,取出遮光片,把脱落的小铜柱重新装在遮光片上,并用502胶水把小铜柱胶牢,防止其再脱落。安装时要注意,每片遮光片上的两个小铜柱方向要相反。或者找一小段粗细和这光片上的孔径配合紧密的铜导线制作成小铜柱装上,然后把光栏的底板(带有十二个小孔的圆板叫底板)朝上,把每片遮光片~端的小铜柱插在底板的小孔内,并按逆时外方向逐片排列整齐。再让滑动板上的滑动槽依次套在上述遮光片另一端的小铜柱上,盖上盖板,把三个固定螺钉拧紧即可,如果遮光片断裂一片,只要把断裂的遮光片取出光栏仍可以正常使用,断裂两片以上应向生产厂家购买更换。四、倾斜关节过松 倾斜关节是指镜臂与镜柱连接处的活动关节,使用显微镜时,常将镜臂向后倾斜成便于观察的角度,期使用后,倾斜关节就可能松动,造成镜臂不能随意倾斜。修理办法是,是尖嘴钳分别插入倾斜关节端面的二个双眼螺母内,顺时针旋转,直至镜臂倾斜时松紧适度。如果无效,则可能是镜臂与镜柱两端面的摩擦垫圈磨损,需加厚垫圈,用尖嘴销将双眼螺母旋下,取出转动轴,用青壳纸或薄塑料片剪一个直径相同的奎图将原垫圈加厚,重新组装好。五.反光镜的插脚在插座内过松或过紧

显微镜操作步骤和注意事项

显微镜操作步骤和注 意事项 Revised on November 25, 2020

操作步骤和注意事项 (一)正置显微镜 1、安放 右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立.桌面要清洁、平稳,要选择临窗或光线充足的地方.单筒的一般放在左侧,距离桌边3~4厘米处. 2、清洁 检查显微镜是否有毛病,是否清洁,镜身机械部分可用干净软布擦拭.透镜要用擦镜纸擦拭,如有胶或粘污,可用少量二甲苯清洁之. 3、对光 镜筒升至距载物台1~2厘米处,低倍镜对准通光孔.调节光圈和反光镜,光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜,反光镜要用双手转动. 若使用的为带有光源的显微镜,可省去次步骤,但需要调节光亮度的旋钮. 4、安装标本 将玻片放在载物台上,注意有盖玻片的一面一定朝上.用弹簧夹将玻片固定,转动平台移动器的旋钮,使要观察的材料对准通光孔中央. 5、调焦 调焦时,先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒,并从侧面仔细观察,直到物镜贴近玻片标本,然后左眼自目镜观察,左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒,直到看清标本物像时停止,再用细调焦旋钮回调清晰. 操作注意:不应在高倍镜下直接调焦;镜筒下降时,应从侧面观察镜筒和标本间的间距;要了解物距的临界值. 若使用双筒显微镜,如观察者双眼视度有差异,可靠视度调节圈调节.另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距. 6、观察 若使用单筒显微镜,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野.右手记录、绘图. 镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不重复. 光强的调节:一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱;低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强.除调节反光镜或光源灯以外,虹彩光圈的调节也十分重要. (1)低倍镜观察 观察任何标本时,都必须先使用低倍镜,因为其视野大,易发现目标和确定要观察的部位. (2)高倍镜观察 从低倍镜转至高倍时,只需略微调动细调焦旋钮,即可使物像清晰. 使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮,否则易压碎盖玻片并损伤镜头. 转动物镜转换器时,不可用手指直接推转物镜,这样容易使物镜的光轴发生偏斜,转换器螺纹受力不均匀而破坏,最后导致转换器就会报废.

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)采用点光源照射样本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜搜集,并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面,避免了非焦平面上杂散光线的干扰,克服了普通显微镜图像模糊的缺点,因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图 二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统,激光光源,扫描装置和检测系统构成,整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地

进行。显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式,前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 (一)细胞的三维重建 普通荧光显微镜分辨率低,显示的图像结构为多层面的图像叠加,结构不够清晰。LSCM能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描,得到一组光学切片,经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法,可作单色或双色图像处理,组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态,也可从不同的断面观察细胞内部结构,测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法,可以产生在不同照明角度形成的阴影效果,突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。(二)静态结构检测 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡 检测细胞凋亡不同时期细胞形态、细胞凋亡相关蛋白

原子力显微镜的原理及使用

原子力显微镜的原理及使用 通过近代物理实验课的学习,了解了许多仪器的工作原理以及使用方法,对今后的科研学习有很大的 帮助。其中原子力显微镜就是其中之一,对于做材料方面的专业来说,原子力显微镜在表征物质的表面结 构及性质起着重要的作用。前段时间我们利用AFM对用RF磁控溅射制备的PZT薄膜进行了表征,通过对AFM的使用并查找相关文献,使我对原子力显微镜有了更加深刻的认识。 原子力显微镜,英文:Atomic Force Microscope ,简写: AFM。是一种利用原子,分子间的相互作用力来观察物体表面微观 形貌的新型实验技术.它有一根纳米级的探针,被固定在可灵敏操 控的微米级弹性悬臂上.当探针很靠近样品时,其顶端的原子与样 品表面原子间的作用力会使悬臂弯曲,偏离原来的位置.根据扫描 样品时探针的偏离量或振动频率重建三维图像.就能间接获得样品 表面的形貌或原子成分。 它主要由带针尖的微悬臂、微悬臂运动检测装置、监控其运 动的反馈回路、使样品进行扫描的压电陶瓷扫描器件、计算机控 制的图像采集、显示及处理系统组成。微悬臂运动可用如隧道电 流检测等电学方法或光束偏转法、干涉法等光学方法检测,当针 尖与样品充分接近相互之间存在短程相互斥力时,检测该斥力可获得表面原子级分辨图像,一般情况下分 辨率也在纳米级水平。AFM测量对样品无特殊要求,可测量固体表面、吸附体系等。 一、仪器结构: 在原子力显微镜(Atomic Force Microscopy,AFM)的系统中,可分成三个部分:力检测部分、位置 检测部分、反馈系统。 1、力检测部分 在原子力显微镜(AFM)的系统中,所要检测的力是原子与原子之间的范德华力。所以在本系统中是 使用微小悬臂(cantilever)来检测原子之间力的变化量。微悬臂通常由一个一般100~500μm长和大约500nm~5μm厚的硅片或氮化硅片制成。微悬臂顶端有一个尖锐针尖,用来检测样品-针尖间的相互作用力。这微小悬臂有一定的规格,例如:长度、宽度、弹性系数以及针尖的形状,而这些规格的选择是依照样品 的特性,以及操作模式的不同,而选择不同类型的探针。 2、位置检测部分 在原子力显微镜(AFM)的系统中,当针尖与样品之间有了交互作用之后,会使得悬臂cantilever摆动,所以当激光照射在微悬臂的末端时,其反射光的位置也会因为悬臂摆动而有所改变,这就造成偏移量 的产生。在整个系统中是依靠激光光斑位置检测器将偏移量记录下并转换成电的信号,以供SPM控制器作 信号处理。 3、反馈系统 在原子力显微镜(AFM)的系统中,将信号经由激光检测器取入之后,在反馈系统中会将此信号当作 反馈信号,作为内部的调整信号,并驱使通常由压电陶瓷管制作的扫描器做适当的移动,以保持样品与针 尖保持一定的作用力。 AFM系统使用压电陶瓷管制作的扫描器精确控制微小的扫描移动。压电陶瓷是一种性能奇特的材料, 当在压电陶瓷对称的两个端面加上电压时,压电陶瓷会按特定的方向伸长或缩短。而伸长或缩短的尺寸与 所加的电压的大小成线性关系。也就是说,可以通过改变电压来控制压电陶瓷的微小伸缩。通常把三个分 别代表X,Y,Z方向的压电陶瓷块组成三角架的形状,通过控制X,Y方向伸缩达到驱动探针在样品表面 扫描的目的;通过控制Z方向压电陶瓷的伸缩达到控制探针与样品之间距离的目的。 原子力显微镜(AFM)便是结合以上三个部分来将样品的表面特性呈现出来的:在原子力显微镜(AFM)的系统中,使用微小悬臂(cantilever)来感测针尖与样品之间的相互作用,这作用力会使微悬臂摆动, 再利用激光将光照射在悬臂的末端,当摆动形成时,会使反射光的位置改变而造成偏移量,此时激光检测 器会记录此偏移量,也会把此时的信号给反馈系统,以利于系统做适当的调整,最后再将样品的表面特性 以影像的方式给呈现出来。 二、工作原理: 将一个对微弱力极敏感的微悬臂一端固定,另一端有一微小的针尖,针尖与样品表面轻轻接触,由于 针尖尖端原子与样品表面原子间存在极微弱的排斥力,通过在扫描时控制这种力的恒定,带有针尖的微悬 臂将对应于针尖与样品表面原子间作用力的等位面而在垂直于样品的表面方向起伏运动。利用光学检测法

显微镜维护及故障解决

显微镜维护与保养与故障解决 显微镜维护与保养与故障解决 1.物镜和目镜的生霉生雾的处理办法 准备30%无水乙醇+ 70%乙醚,将不同的镜头单独分开放置干燥剂器皿中,最好用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭,注意不能用力擦,以防止损伤镀膜层。油镜当时就要清洗,特别是100X的油镜,处理不当的话,前片容易浸油或开胶。目镜可以自己拆下来清洗,16X目镜注意别装反了,前片凹面在上。物镜不要随便拆下。指针不要用头发来做,易弄脏镜头,厂家可配备一个指针。一般2个月最好能集中保养一次。显微镜多时,各个镜头要标号以免弄错了搭配。 2.透镜的清洁 清洁灰尘用用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来,注意轻柔慢缓。有些较顽固的污迹如油迹,指纹等,可以用干净的软棉布,棉花棒镜头纸等蘸上无水酒精轻轻的擦去。如果是从油镜上擦去浸油,应用镜头纸,软棉布或纱布,蘸上二甲苯轻轻擦去。注意,不要用二甲苯清洗双目镜筒底部的入射透镜或目镜内的棱镜表面。因为纯酒精和二甲苯容易燃烧,在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。防患于未然。 3.油漆和塑料表面的清洁 我们反对使用有机溶剂(如酒精,乙醚,稀释剂等)来清洗仪器的油漆和塑料表面,建议使用硅布,还有更顽固的污迹可以使用软性的清洁剂来清洗。塑料表面只需要用软布蘸水就可以了清洗了。 4.显微镜闲置的处理 当显微镜在放假等长时间不使用的情况下,请您用塑料罩盖好,并储放在干燥的地方防尘防霉。同时我们强烈建议您将物镜和目镜保存在干燥器之类的容器中,并防些干燥剂。 5.定期检查 显微镜的精细和贵重,要求我们要更加的爱护它。为了保持它的性能的稳定,我们建议您定期的检查,保养。 在显微镜的实际操作中,您或许总是会遇到一些问题。在此,我们奥力公司建议您先对照我们提供的常见故障排除法来先自己动手解决一下。这样即节约您等候维修人员的时间,又提高您自己的显微镜操作水平。如果您解决了,我们要祝贺你的能力实在是不一般;如果还是解决不了,您再向有关的维修部门联系。我们将列举一些常见的问题供您参考!希望对您有所帮助!

LS-DYNA常见问题集锦

1 如何处理LS-DYNA中的退化单元? 在网格划分过程中,我们常遇到退化单元,如果不对它进行一定的处理,可能会对求解产生不稳定的影响。在LS-DYNA中,同一Part ID 下既有四面体,五面体和六面体,则四面体,五面体既为退化单元,节点排列分别为N1,N2,N3,N4,N4,N4,N4,N4和N1,N2,N3,N4,N5,N5,N6,N6。这样退化四面体单元中节点4有5倍于节点1-3的质量,而引起求解的困难。其实在LS-DYNA的单元公式中,类型10和15分别为四面体和五面体单元,比退化单元更稳定。所以为网格划分的方便起见,我们还是在同一Part ID下划分网格,通过*CONTROL_SOLID关键字来自动把退化单元处理成类型10和15的四面体和五面体单元。 2 LS-DYNA中对于单元过度翘曲的情况有何处理方法 有两种方法: 1. 采用默认B-T算法,同时利用*control_shell控制字设置参数BWC=1,激活翘曲刚度选项; 2. 采用含有翘曲刚度控制的单元算法,第10号算法。该算法是针对单元翘曲而开发的算法,处理这种情况能够很好的保证求解的精度。 除了上述方法外,在计算时要注意控制沙漏,确保求解稳定。 3 在ANSYS计算过程中结果文件大于8GB时计算自动中断,如何解决这个问题? 解决超大结果文件的方案: 1. 将不同时间段内的结果分别写入一序列的结果记录文件; 2. 使用/assign命令和重启动技术; 3. ANSYS采用向指定结果记录文件追加当前计算结果数据方式使用/assign指定的文件,所以要求指定的结果记录文件都是新创建的文件,否则造成结果文件记录内容重复或混乱。特别是,反复运行相同分析命令流时,在重复运行命令流文件之前一定要删除以前生成的结果文件序列。具体操作方法和过程参见下列命令流文件的演示。 4关于梁、壳单元应力结果输出的说明 问题:怎样显示梁单元径向和轴向的应力分布图(我作的梁单元结果只有变形图DOF SOLUTIN –Translation,但是没有stress等值线图,只有一种颜色)和壳单元厚度方向的应力、变形图(我们只能显示一层应力、变形,不知道是上下表层或中间层的结果)。

倒置荧光显微镜操作说明

显微镜及数码成像系统操作简要 第一部分观察方法步骤 1、明场观察方法步骤 2、相差观察方法步骤 3、荧光观察方法步骤 第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)

1、明场观察方法步骤 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” 准备工作:柯勒照明光轴中心调节 第一次观察须完成此调试,完成后不需要再调节,直至装卸过部件后,使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。 ① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰 ③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜,使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮,使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑,使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑,使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑

步骤 涉及部件 I ” 载物台、标本夹 3、荧光观察方法步骤 准备工作:高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” CD+或CD-钮

主开关拨到“I ” ND 片插槽 /孔径光阑 准备工作: 高压汞灯对中(第一次观察时调整,以后观察时不需调整,除非更换汞灯) 调整完成后,请不要触动对中部件,如汞灯对中旋钮,视场光阑对中钮等。 ,待弧 载物台

观察筒 视场光阑中心调节钮 第二部分使用IPP 拍摄图像流程 1. 在桌面点击以下图标打开IPP。 2. 在菜单栏中,(采集)Acquire 菜单下点击(视频/数字图像采集)Video/Digital Capture,或点击工具栏中,即出现控制CCD 拍照的对话框。

显微镜维护与保养与

显微镜维护与保养与故障解决

显微镜维护与保养与故障解决 显微镜维护与保养与故障解决 1.物镜和目镜的生霉生雾的处理办法 准备30%无水乙醇+ 70%乙醚,将不同的镜头单独分开放置干燥剂器皿中,最好用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭,注意不能用力擦,以防止损伤镀膜层。油镜当时就要清洗,特别是100X的油镜,处理不当的话,前片容易浸油或开胶。目镜可以自己拆下来清洗,16X目镜注意别装反了,前片凹面在上。物镜不要随便拆下。指针不要用头发来做,易弄脏镜头,厂家可配备一个指针。一般2个月最好能集中保养一次。显微镜多时,各个镜头要标号以免弄错了搭配。 2.透镜的清洁 清洁灰尘用用棉花棒,纱布,柔软的刷子等比较柔软的东西来,注意轻柔慢缓。有些较顽固的污迹如油迹,指纹等,可以用干净的软棉布,棉花棒镜头纸等蘸上无水酒精轻轻的擦去。如果是从油镜上擦去浸油,应用镜头纸,软棉布或纱布,蘸上二甲苯轻轻擦去。注意,不要用二甲苯清洗双目镜筒底部的入射透镜或目镜内的棱镜表面。因为纯酒精和二甲苯容易燃烧,在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。防患于未然。 3.油漆和塑料表面的清洁 我们反对使用有机溶剂(如酒精,乙醚,稀释剂等)来清洗仪器的油漆和塑料表面,建议使用硅布,还有更顽固的污迹可以使用软性的清洁剂来清洗。塑料表面只需要用软布蘸水就可以了清洗了。 4.显微镜闲置的处理 当显微镜在放假等长时间不使用的情况下,请您用塑料罩盖好,并储放在干燥的地方防尘防霉。同时我们强烈建议您将物镜和目镜保存在干燥器之类的容

器中,并防些干燥剂。 5.定期检查 显微镜的精细和贵重,要求我们要更加的爱护它。为了保持它的性能的稳定,我们建议您定期的检查,保养。 在显微镜的实际操作中,您或许总是会遇到一些问题。在此,我们奥力公司建议您先对照我们提供的常见故障排除法来先自己动手解决一下。这样即节约您等候维修人员的时间,又提高您自己的显微镜操作水平。如果您解决了,我们要祝贺你的能力实在是不一般;如果还是解决不了,您再向有关的维修部门联系。我们将列举一些常见的问题供您参考!希望对您有所帮助! 第一类:光学部分的问题 症状原因对策 边缘黑暗或视场明暗不均匀转换器不在定位位置上转到定位的位置灯丝象不在中心调整使对中心透镜上沾有脏物擦干净(软布) 视场里有脏物透镜上沾有脏物擦干净(软布)玻片上有脏物擦干净(软布)聚光镜位置太底校正位置 像质很差 (分辨率低,对比度差)切片上没有盖玻片,或切片放反了使用标准的0.17mm盖玻片盖玻片过厚或太薄使用标准的0.17mm盖玻片干物镜上有浸油,40X更易有擦干净 透镜上有脏物擦干净 油侵物镜没有浸油或油浸有气泡使用浸油,清楚气泡 用了非指定的浸油使用专用浸油 孔径光栏开的过大(过小)调整光栏大小至正常 双目镜筒的入射透镜上有脏物擦干净 聚光镜位置太低校正位置 图象某一侧发暗聚光镜不在视场中心聚光镜偏斜重新安装,仔细调节中心螺钉转换器不在定位处转到定位的位置 标本处于浮动状态可靠地加固 调焦时图象移动 标本浮在载物台表面稳固的安放 转换器不在定位处转动使之到位图象略带黄色未用蓝色滤色镜使用蓝色滤色镜

LS_Dyna的问题总结

一、影响穿透的一些因素解释 I.接触厚度 接触厚度定义的是一个参数——当接触体/面相互穿透的距离大于接触厚度时,程序将不计算这个接触,即认为没有接触了。什么是接触厚度与距离?在自动接触中,接触厚度是一个默认值,大概是面厚度的几倍,在普通接触中,接触厚度无穷大。 II.壳厚度和接触厚度 1. 壳厚度:影响刚度和单元质量; 2. 接触厚度: ①决定解除中的厚度偏移量; ②并不影响刚度或壳体质量; ③默认接触厚度等于壳厚度; ④可以在*CONTACT 或*PART_CONTACAT 中直接缩放接触厚度; ⑤在穿透节点被释放之前影响最大允许穿透深度。 III.运动速度对穿透的影响 如果物体相对运动速度过大,在一个时间步长中所走过的距离会远超过一个单元的尺寸,若缩小时间步长,即缩小在一个时间步长内所走过的距离和单元尺寸的差异,基础检查可以正常进行,若初速度过高,会搜索不到接触,计算会出现问题。 IV.非对称接触算法中,主从面的定义原则 ①粗网格表面定义为主面,细网格表面为从面; ②主从面相关材料刚度相差悬殊,材料刚度大的一面为主面;

③平直或者凹面为主面,凸面为从面。 V.接触刚度的影响 穿透可以认为是一种虚拟穿透,如果设定的穿透刚度(fkn)值,就可以减小这种穿透, 但却不可避免。如果fkn 值过大,会使到那元刚度病态,而不能求解。 二、穿透的可能解决方案 I.接触方面: 1. 修改接触类型,尝试自动接触类型: ①STS(面面接触),当一个体的表面穿透另外一个体的表面是创建 ②SS(单面接触),当一个体的表面自身接触或者接触另一个体的表面时创建 2. 接触定义存在问题: ①增加接触刚度因子 ②改变接触面的主从设置,将刚体设置为主面,同时使用单向接触 ③修改关键字CONTROL_CONTACT中RWPNAL=2 3. 接触穿透距离超过了接触厚度,从而不再计算接触; 4. 如果两个接触体的材料属性和网格差别较大,可以修改SOFT值为1 或者2. 5. 接触群组设置不直接用PART,将可能接触的地方设置为segment; 6. 修改摩擦系数: Fs和Fd通常设置为相同的值,避免额外的噪声产生。 7.注意设定接触厚度;

显微镜操作步骤和注意事项

操作步骤和注意事项 (一)正置显微镜 1、安放 右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立.桌面要清洁、平稳,要选择临窗或光线充足的地方.单筒的一般放在左侧,距离桌边3~4厘米处. 2、清洁 检查显微镜是否有毛病,是否清洁,镜身机械部分可用干净软布擦拭.透镜要用擦镜纸擦拭,如有胶或粘污,可用少量二甲苯清洁之. 3、对光 镜筒升至距载物台1~2厘米处,低倍镜对准通光孔.调节光圈和反光镜,光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜,反光镜要用双手转动. 若使用的为带有光源的显微镜,可省去次步骤,但需要调节光亮度的旋钮. 4、安装标本 将玻片放在载物台上,注意有盖玻片的一面一定朝上.用弹簧夹将玻片固定,转动平台移动器的旋钮,使要观察的材料对准通光孔中央. 5、调焦 调焦时,先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒,并从侧面仔细观察,直到物镜贴近玻片标本,然后左眼自目镜观察,左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒,直到看清标本物像时停止,再用细调焦旋钮回调清晰. 操作注意:不应在高倍镜下直接调焦;镜筒下降时,应从侧面观察镜筒和标本间的间距;要了解物距的临界值. 若使用双筒显微镜,如观察者双眼视度有差异,可靠视度调节圈调节.另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距. 6、观察 若使用单筒显微镜,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野.右手记录、绘图. 镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不重复. 光强的调节:一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱;低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强.除调节反光镜或光源灯以外,虹彩光圈的调节也十分重要. (1)低倍镜观察 观察任何标本时,都必须先使用低倍镜,因为其视野大,易发现目标和确定要观察的部位. (2)高倍镜观察 从低倍镜转至高倍时,只需略微调动细调焦旋钮,即可使物像清晰. 使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮,否则易压碎盖玻片并损伤镜头. 转动物镜转换器时,不可用手指直接推转物镜,这样容易使物镜的光轴发生偏斜,转换器螺纹受力不均匀而破坏,最后导致转换器就会报废.

激光扫描共聚焦显微镜

激光共聚焦显微镜的原理与应用范围 激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源,在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置,并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,在亚细胞水平上观察生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学,遗传学等领域中新一代的研究工具。 1激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的原理 从基本原理上讲,共聚焦显微镜是一种现代化的光学显微镜,它对普通光镜从技术上作了以下几点改进: 1.1用激光做光源因为激光的单色性非常好,光源波束的波长相同,从根本上消除了色差。1.2采用共聚焦技术在物镜的焦平面上放置了一个当中带有小孔的挡板,将焦平面以外的杂散光挡住,消除了球差;并进一步消除了色差 1.3采用点扫描技术将样品分解成二维或三维空间上的无数点,用十分细小的激光束(点光源)逐点逐行扫描成像,再通过微机组合成一个整体平面的或立体的像。而传统的光镜是在场光源下一次成像的,标本上每一点的图像都会受到相邻点的衍射光和散射光的干扰。这两种图像的清晰度和精密度是无法相比的。 1.4用计算机采集和处理光信号,并利用光电倍增管放大信号图 在共聚焦显微镜中,计算机代替了人眼或照相机进行观察、摄像,得到的图像是数字化的,可以在电脑中进行处理,再一次提高图像的清晰度。而且利用了光电倍增管,可以将很微弱的信号放大,灵敏度大大提高。由于综合利用了以上技术。可以说LSCM是显微镜制作技术、光电技术、计算机技术的完美结合,是现代技术发展的必然产物。 2LSCM在生物医学研究中的应用 目前,一台配置完备的LSCM在功能上已经完全能够取代以往的任何一种光学显微镜,它相当于多种制作精良的常用光学显微镜的有机组合,如倒置光学显微镜、紫外线显微镜、荧光显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜(PH)、微分干涉差显微镜(DIC)等,因此被称为万能显微镜,通过它所得到的精细图像可使其他的显微镜图像无比逊色。

光学显微镜的原理及构造

光学显微镜的原理及构造显微镜是人类认识物质微观世界的重要工具,是现代科学研究工作不可缺少的仪器之一。显微镜自1666年问世以来已有300多年的历史了,其间随着科学技术不断发展,显微镜的品种不断增加,结构和性能逐步得到完善和提高。 根据不同的使用用途,光学显微镜可分为普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、体视显微镜、偏光显微镜等10多种。目前,世界上许多国家都可以生产光学显微镜,牌名、种类繁杂,其中德国、日本等国制造的显微镜品质、数量占优势,但价格昂贵。 对于现代的光学显微镜,包括各种简单的常规检验用显微镜、万能研究以及万能照相显微镜等,首先要认识其构造及各部件的功能,同时要掌握正确的调试、使用和保养方法,才能在实际应用中面对各种要求时以不同的显微镜检方法,充分发挥显微镜应有的功能,提高常规检验工作效率. 光学显微镜的原理和构造 随着科学技术的发展,显微镜检方法由最传统的明视野、暗视野发展出了相差法、偏光方法;荧光方法也由透射光激发进展为落射光激发,使荧光效率大为提高;微分干涉相衬方法基于偏光方法,而巧妙地利用了微分干涉棱镜,使之能应用于医学与生物学的样品,又能应用于金相样品的分析与检验。 下面以德国ZEISS公司生产的Axioplan万能研究用显微镜,简单介绍万能显微镜的基本组成部件。 1. 显微镜主机体(stand) 显微镜的主机体设计成金字塔形,而底座的截面呈T字形,使显微镜的整体相当稳固。显微镜的光学部件和机构调节部件、光源的灯室、显微照相装置、电源变压稳压器等,都可安装在主机体上或主机体内。 2. 显微镜的底座(base) 底座和主机体通常组成一个稳固的整体。底座内通常装有透射光照明光路系统(聚光、集光和反光)部件,光源的滤光片组,粗/微调焦机构,光源的视场光阑也安装在底座上。 3. 透射光光源(tranilluminator) 透射光光源由灯室(lamp housing)、灯座(lamp socket)、卤素灯(halogen lamp)、集光与聚光系统(lamp collector and lamp condenser)及其调整装置组成。 4. 透射光光源与反射光光源的转换开关(toggle switch) 这是新一代AXIO系列显微镜特有的装置,透射光和反射光可通用。当具有透/反两用的配置时,利用这一转换开关能方便而又迅速的使透射光 和反射光互相转换。在纯透射光的配置中,这一开关就改为电源开关。

常见问题及解答

常见问题及解答 1.镜检标本时,为什么先用低倍镜观察,而不是直接用高倍镜或油镜观察? 答:因为低倍镜下视野较大,易于发现目标和确定检查的位置,而如果直接用高倍镜观察,因其视野较小,不易找到观察的目标,浪费时间。 2.简述线粒体詹纳斯绿B活体染色原理? 答:线粒体是细胞内一种重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量,主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿B是线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。 3.简述液泡系活体染色原理? 答:动物软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体,能合成与分泌软骨粘蛋白及胶原纤维等,因而液泡系发达。中性红是液泡系特殊的活体染色剂,只将液泡系染成红色,在细胞处于生活状态时,细胞质及核不被染色,中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。 4.微丝观察实验中,1%TritonX-100处理细胞的作用是什么?此实验能否看到微管和中间纤维?作出理由。 答:(1)1%TritonX-100作用是为了抽提细胞骨架以外的蛋白质,从而使骨架图像更加清晰。(2)不能看到微管和中间纤维。因为微管、微丝和中间纤维是由不同的的蛋白质组成的,微管、中间纤维的组装蛋白都被1%的TritonX-100抽提出去,且没有加入促进微管、中间纤维组装的试剂,所以看不到它们。 6.简述Feulgen反应的原理及作好本实验的关键? 答:(1)DNA经酸水解,其上的嘌呤碱和 脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff 试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应,形成紫红色的化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生,是由于反应产物的分子内含有醌基,醌基是一个发色团,所以具有颜色。该反应对DNA具有专一性。(2)Feulgen反应成功的关键在于Schiff试剂的质量。Schiff试剂只能选用注明“DNA染色反应用”的碱性品红才行。 7.简述细胞凝集反应的原理? 答:凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞

lsdana 常见问题

1如何处理LS-DYNA中的退化单元?在网格划分过程中,我们常遇到退化单元,如果不对它进行一定的处理,可能会对求解产生不稳定的影响。在LS-DYNA 中,同一Part ID 下既有四面体,五面体和六面体,则四面体,五面体既为退化单元,节点排列分别为N1,N2,N3,N4,N4,N4,N4,N4和N1,N2,N3,N4,N5,N5,N6,N6。这样退化四面体单元中节点4有5倍于节点1-3的质量,而引起求解的困难。其实在LS-DYNA的单元公式中,类型10和15分别为四面体和五面体单元,比退化单元更稳定。所以为网格划分的方便起见,我们还是在同一Part ID下划分网格,通过*CONTROL_SOLID关键字来自动把退化单元处理成类型10和15的四面体和五面体单元。 2 LS-DYNA中对于单元过度翘曲的情况有何处理方法 有两种方法: 1. 采用默认B-T算法,同时利用*control_shell控制字设置参数BWC=1,激活翘曲刚度选项; 2. 采用含有翘曲刚度控制的单元算法,第10号算法。该算法是针对单元翘曲而开发的算法,处理这种情况能够很好的保证求解的精度。 除了上述方法外,在计算时要注意控制沙漏,确保求解稳定。 3在ANSYS计算过程中结果文件大于8GB时计算自动中断,如何解决这个问题? 解决超大结果文件的方案: 1. 将不同时间段内的结果分别写入一序列的结果记录文件; 2. 使用/assign命令和重启动技术; 3. ANSYS采用向指定结果记录文件追加当前计算结果数据方式使用/assign指定的文件,所以要求指定的结果记录文件都是新创建的文件,否则造成结果文件记录内容重复或混乱。特别是,反复运行相同分析命令流时,在重复运行命令流文件之前一定要删除以前生成的结果文件序列。具体操作方法和过程参见下列命令流文件的演示。 4关于梁、壳单元应力结果输出的说明 问题:怎样显示梁单元径向和轴向的应力分布图(我作的梁单元结果只有变形图DOF SOLUTIN –Translation,但是没有stress等值线图,只有一种颜色)和壳单元厚度方向的应力、变形图(我们只能显示一层应力、变形,不知道是上下表层或中间层的结果)。

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用-17954讲解

激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 Tina(2007-10-23 09:40:17 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM采用点光源照射样本,在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点,该点被照射后发出的荧光被物镜搜集,并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔,分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像,这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面,避免了非焦平面上杂散光线的干扰,克服了普通显微镜图像模糊的缺点,因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图

二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统,激光光源,扫描装置和检测系统构成,整套仪器由计算机控制,各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地进行。显微镜是LSCM的主要组件,它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式,前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 一)细胞的三维重建

普通荧光显微镜分辨率低,显示的图像结构为多层面的图像叠加,结构不够清晰。LSCM 能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描,得到一组光学切片,经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法,可作单色或双色图像处理,组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态,也可从不同的断面观察细胞内部结构,测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法,可以产生在不同照明角度形成的阴影效果,突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM 的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。 二)静态结构检测:原位鉴定细胞或组织内生物大分子、观察细胞及亚细胞形态结构 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡

显微镜的原理和

显微镜的原理和使用方法

显微镜的原理和使用方法-装片的制作 显微镜的结构和使用 (2)显微镜的成像 ①光源(天然光或人工光源)→反光镜→光圈→物体→物镜(凸透镜)→在镜筒内形成物体放大的实像→目镜→把经物镜形成放大的实像进一步放大 ②显微镜放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数 (3)高倍显微镜的使用 ①用低倍显微镜观察 取镜与安放: a. 右手握镜臂,左手托镜座。

b. 显微镜放在实验台的前方稍偏左。 对光: a. 转动转换器,使低倍物镜对准通光孔。 b. 选一较大的光圈对准通光孔,左眼注视目境,转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内,通过目镜,可能看到自亮的视野。 低倍镜观察: a. 把所要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。 b. 转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(此时实验者的眼睛应当看物镜镜头与标本之间,以免物镜与标本相撞)。

c. 左眼看目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋,使镜筒上升,直到看到物像为止,再稍稍转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。 ②高倍镜观察 a. 移动装片,在低倍镜下使需要放大观察的部分移动到视野中央。 b. 转动转换器,移走低倍物镜,转换为高倍物镜。 c. 调节光圈,使视野亮度适宜。 d. 缓缓调节细准焦螺旋,使物像清晰 ③注意事项 a. 使用显微镜一定要严格按照取镜→安放→对光→压片→观察的程序进行。 b. 下降镜筒时,一定要用双眼从侧面注视物镜,使之接近装片,但又要防止镜头触及装片。否则会压碎装片和损坏物镜(l0x物镜的工作距离为0. 5-1 cm)。 c. 有必要使用高倍物镜时,必须先在低倍物镜下将目标移到视野的中心,然后换用高倍物镜。因为在低倍物镜下看到的物像放大倍数小,但看到的标本实际面积大,容易找到目标;与低倍物镜相比,高倍物镜下看到的物像人,同样的视野面积看到的标本的实际面积小,在装片不动的情况下,高倍物镜看到的只是低倍物镜视野的中心部分。

显微镜的知识总结及常考知识点

生物科学:显微镜的知识总结 有关显微镜的知识在生物学中非常重要,也多次考过,现将有关知识总结如下: 1、若要把视野中上方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向上移动。若要把视野中左方的物像移到视野的正中心,则要将装片继续向左方移动,因为显微镜视野中看到的是倒像。 2、换高倍物镜后,应调节细准焦螺旋使物像变得清晰;视野会变暗,可调大光圈或改用反光镜的凹面镜来使视野变亮。 3、目镜越长,放大倍数越小;物镜越长,放大倍数越大。 4、物镜与载玻片之间的距离越小,放大倍数越大。 5、总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积;放大倍数是指细小物体长度或宽度的放大倍数。 6、放大倍数越大,视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。 7、更换目镜,若异物消失,则异物在目镜上;更换物镜,若异物消失,则异物在物镜上、移动载玻片,若异物移动,则异物在载玻片上。 8、如何区别显微镜视野中的细胞核和液泡?一般来说,细胞核透光性不好,是深色的,液泡是浅色的。 此外仔细观察,液泡中液体是流动的,细胞核里面的结构是固定的,看起来有杂质的样子。1.显微镜的放大倍数等于目镜的放大倍数与物镜的放大倍数的乘积。放大倍数指的物体的宽度和长度的放大倍数,而不是面积和体积的放大倍数。 例1.一个细小物体若被放大50倍,这里“被放大50倍”是指该细小物体的() A.体积B.表面积C.像的面积D.长度或宽度 例2.如果使用10倍的目镜和10倍的物镜在视野中央观察到一个细胞,在只换40倍物镜的情况下,该细胞的物象比原先观察到的细胞直径放大了() A.4倍B.16倍C.100倍D.400倍 2.掌握目镜和物镜的结构特点以及镜头长短与放大倍数之间的关系。 目镜是无螺纹的,物镜是有螺纹的;镜头长度与放大倍数的关系:目镜的长度与放大倍数成反比,物镜的长度与放大倍数成正比;物镜越长与装片之间的距离就越短,物镜越短与装片之间的距离就越长。 例1.有一架光学显微镜的镜盒内有2个镜头,甲的一端有螺纹,乙无螺纹,甲乙分别为()A.目镜、物镜B.物镜、目镜C.均为物镜D.均为目镜答案:B 例2.显微镜头盒中的4个镜头。甲、乙镜头一端有螺纹,丙、丁皆无螺纹。甲镜头长3厘米,乙镜头长5厘米,丙镜头长3厘米,丁镜头长6厘米。请问:使用上述镜头观察某装片,观察清楚时物镜与装片之间距离最近的是;在同样的光源条件下,视野中光线最暗的一组镜头是。 解析:根据显微镜的结构可知,甲、乙镜头一端有螺纹为物镜,丙、丁无螺纹为目镜。物镜

LS-DYNA常见问题汇总10

LS-DYNA常见问题汇总 1.0 资料来源:网络和自己的总结yuminhust2005 Copyright of original English version owned by relative author. Chinese version owned by https://www.360docs.net/doc/9712433029.html,/Kevin 目录 1.Consistent system of units 单位制度 (2) 2.Mass Scaling 质量缩放 (4) 3.Long run times 长分析时间 (9) 4.Quasi-static 准静态 (11) 5.Instability 计算不稳定 (14) 6.Negative Volume 负体积 (17) 7.Energy balance 能量平衡 (20) 8.Hourglass control 沙漏控制 (27) 9.Damping 阻尼 (32) 10.ASCII output for MPP via binout (37) 11.Contact Overview 接触概述 (41) 12.Contact Soft 1 接触Soft=1 (45) 13.LS-DYNA中夹层板(sandwich)的模拟 (47) 14. 怎样进行二次开发 (50)

1.Consistent system of units 单位制度 相信做仿真分析的人第一个需要明确的就是一致单位系统(Consistent Units)。计算机只认识0&1、只懂得玩数字,它才不管你用的数字的物理意义。而工程师自己负责单位制的统一,否则计算出来的结果没有意义,不幸的是大多数老师在教有限元数值计算时似乎没有提到这一点。见下面LS-DYNA FAQ中的定义:Definition of a consistent system of units (required for LS-DYNA): 1 force unit = 1 mass unit * 1 acceleration unit 1 力单位=1 质量单位× 1 加速度单位 1 acceleration unit = 1 length unit / (1 time unit)^2 1 加速度单位= 1 长度单位/1 时间单位的平方 The following table provides examples of consistent systems of units. As points of reference, the mass density and Young‘s Modulus of steel are provided in each system of units. ―GRA VITY‖ is gravitational acceleration.

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