RP_HPLC法测定威斯康辛州产_省略_参中人参皂苷Rg1_Rb1的含量_陈孔荣

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人参皂苷的提取教学文稿

人参皂苷的提取

第一章综述 1.1 人参皂苷的简介 人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始 载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢 冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、 心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。经现代医学和药理研究 证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。 人参皂苷(ginsenoside,GS)是人参的主要有效成分,现已明确结果的GS单体约 有40余种;在人参中的含量在4%左右。其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为 Rg3与Rh2。众多研究表明,它具有较高的抗肿瘤活性,对正常细胞无毒副作用,与其 他化疗药物(如顺铂)联合应用有协同作用。人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱 导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤 发展,诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体,不引起周围组织炎症反应。Popovich等研究认为,人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡,其途径与地塞米松相识,均为受体依赖性。目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机 制以及临床应用等方面做了大量研究,而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。 1.2 人参皂苷成分 人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。到目前为止, 文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、- Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50 余种人参皂苷。 Rh2:具有抑制癌细胞向其它器官转移,增强机体免疫力,快速恢复体质的作用。 对癌细胞具有明显的抗转移作用,可配合手术服用增强手术后伤口的愈合及体力的恢复. Rg:具有兴奋中枢神经,抗疲劳、改善记忆与学习能力、促进DNA、RNA合成的作用。 Rg1:可快速缓解疲劳、改善学习记忆、延缓衰老,具有兴奋中枢神经作用、抑制 血小板凝集作用。 Rg2:具有抗休克作用,快速改善心肌缺血和缺氧,治疗和预防冠心病。 Rg3:可作用于细胞生殖周期的G2期,抑制癌细胞有丝分裂前期蛋白质和ATP的 合成,使癌细胞的增殖生长速度减慢,并且具有抑制癌细胞浸润、抗肿瘤细胞转移、促 进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等作用。 Rb1:西洋参(花旗参)的含量最多,具影响动物睾丸的潜力,亦会影响小鼠的胚胎 发育,具有增强胆碱系统的功能,增加乙酰胆碱的合成和释放以及改善记忆力作用.

人参化学成分及研究进展

天然产物化学 论文(设计)题目:人参化学成分及生物活性的研究进展 学院:化学与化工学院 专业:化学 班级: 学号: 学生: 2013年 11 月 22 日

目录 摘要 ................................................................. I 第一章前言 .. (2) 第二章人参的化学成分及药理作用 (2) 2.1人参皂苷 (2) 2.1.1人参皂苷的分类 (3) 2.1.2人参皂苷的药理作用 (6) 2.2脂溶性性成分 (8) 2.2.1脂溶性成分的抗菌作用 (8) 2.2.2脂溶性成分的抗肿瘤作用 (9) 2.3多糖类物质 (9) 2.3.1人参多糖类物质的调节免疫作用 (9) 2.3.2人参多糖类物质的降血糖作用 (10) 2.3.2人参多糖类物质的抗肿瘤作用 (10) 第三章结语 (11) 参考文献 (12)

人参化学成分及生物活性的研究进展 摘要 现代研究证明,人参可增进食欲、强心、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤,治贫血、神经衰弱等症。本文对人参化学成分及人参的药理研究的新进展给予综述并对人参的研究作简要展望 关键词:人参,化学成分,药理作用

第一章前言 中药人参是五加科人参,属植物人参的干燥根,是一种名贵药材,同样为一种比较常见的药物。经中医临床验证表明人参的主要功效包括有补脾益肺、大补元气、生津安神益智等。临床上人参能够对诸多疾病均能够产生良好的防治效果,特别是对人体滋补强壮作用更加的明显。并且它的化学成分相对较为复杂,具有广泛的生物活性,药理作用相对独特,由于现代分离以及分析技术得到了突飞猛进的发展,人参的化学成分的研究也获得了进一步的进展。目前人们对其药理活性广泛关注,本文针对其化学成分和药理活性展开论述,从而为今后的临床研究提供参考。 第二章人参的化学成分及药理作用 人参的现代研究已有一百多年的历史,这期间对人参的研究大多采用粗制剂或总皂贰成分,固然是由于人参有效成分的含量低和纯化困难,还由于对人参有效成分及其药理作用的多样性认识不足。至今,已阐明的人参化学成分包括皂苷、糖类、蛋白质、多肤、氨基酸、有机酸、维生素、脂溶性成分和其它成分【1】。其中,皂苷被公认为是人参的主要的有效成分之一。 2.1人参皂苷 皂苷是广泛存在于植物中的一类复杂的有机化合物,这类化合物因具有较大的表面活性,在水中震荡或加热时可以产生胶状溶液和泡沫,因而得名皂苷。人参皂苷为人参属植物中主要活性成分,是由皂苷元和糖相连构成的糖苷类化合物,人参中人参皂苷的含量约占人参干重的4%左右。人参皂苷为白色无定形粉末或无色针状结晶,味微甘苦,具有较强的吸湿性。极性大的人参皂苷易溶于水、甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、醋酸和

比色法测定总皂苷含量

比色法测定总皂苷含量 1、仪器 紫外分光光度计、电热恒温水浴锅、电子分析天平、旋转蒸发器、大孔树脂柱(内径0.8 cm,长20 cm)。 试剂 无水甲醇、无水乙醇、正丁醇、冰醋酸、高氯酸和香草醛等均为分析纯;大孔树脂 DM-301、对照品、洋金花药品。 2、方法 2.1 对照品溶液的制备 取对照品 10 mg,加甲醇溶解定容至 10 ml,制成 1 mg/ml对照品溶液。 2.2供试品溶液的制备 取药材粉末(过4号筛)约0.2 g,准确称定,置于150 ml具塞锥形瓶中。精密加入50 ml 甲醇后,准确称重。浸泡60 min,超声提取30 min,再次称重,补加甲醇至超声前重量。过滤,精密移取续滤液25 ml于蒸发皿中,水浴蒸发至干,用5 ml水溶解残留物,所得溶液缓缓通过已处理好的大孔吸附树脂柱(径高比1:5),以水50 ml洗脱,弃去水液,之后再以50 ml 95%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,蒸干。用20 ml水分次将残留物溶解转移至60 ml分液漏斗中,用水饱和的正丁醇萃取(4×20 ml),合并正丁醇层,减压蒸干。残留物用70%甲醇溶解转移至10 ml量瓶中,定容,摇匀,即得。 2.3测定波长的选择 精密移取1.5 ml的对照品及l ml供试品溶液,于70℃水浴蒸发至干,加入5%香草醛一冰醋酸(临用新配)0.2ml,高氯酸0.8 ml,于60℃水浴显色15 min后流水冷却 lO min。加冰醋酸5 ml,摇匀。立即在紫外分光光度计于400~800 nm波长下扫描,同时空白溶液作参比。对照品及供试品的最大吸收波长均在475 nm,故选取475 nm为检测波长。 2.4线性关系考察 精密量取对照品溶液0.60,1.50,2.40,3.30,4.20 ml,置具塞试管中,于70℃水浴蒸发至干,加入5%香草醛-冰醋酸(临用新配)O.2 ml,高氯酸0.8 ml,于60℃水浴显色15min后流水冷却10 min。各加冰醋酸5 ml,摇匀,以同法平行处理的空白溶剂为空白,在475 nm处测定吸光度。以对照品质量c(mg)为横坐标,吸光度A为纵坐标,使用软件OriginPro 7.0进行回归分析,得到回归方程为:A=0.007 4+1.120 83c, r=0.999 97。在0.096—0.672 mg内线性关系良好。 2.5精密度试验 精密吸取对照品溶液1.5 ml,依“2.4”项下方法显色测定吸收度,连续测定5次,结果RSD为0.254%,说明仪器的测试性能良好。 2.6稳定性试验 取对照品和样品溶液,依“2.4”项下方法操作,按不同时间测定吸光度,结果见表1。2.7样品含量测定 取供试品溶液6份,每份精密吸取80 μ L,按“2.3”项的方法显色后,在540nm测定吸光度,计算样品含量。 2.8加样回收率试验 取供试品溶液8份,每份精密吸取80μL,加入0.2mg/mL齐墩果酸溶液50 u I。,按“2.3”项的方法显色后,在540hm测定吸光度,计算加样回收率。

提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项

1.人参皂苷提取 人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解,可得到三种皂甙元,齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。而不能得到原人参二醇和原人参三醇,这是因为在酸水解过程中侧链的20-位碳原子上的羟基(-OH)与该链上的双键(C=C)易闭环,而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。水解后,除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂甙元,经重结晶获得纯品,分别与已知皂甙的红外光谱相一致。 2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程 ①人参皂甙提取工艺: 人参茎叶粗粉20g 热水提取1小时,粗滤,(棉花) 提取液药渣 加0.6g是会乳沉淀,并调至PH9-10,放置10分钟,抽滤 沉淀物滤液 浓硫酸调PH7,放置10分钟。 中性提取液 回收后,上大孔树脂柱,先用水洗至无色,再用 70%氨性醇洗至绿色。 乙醇洗脱液 回收乙醇 人参总皂甙(黄白色) a)人参皂甙元的水解和甙元的分离流程 人参总皂甙 加含5%HCl的50%乙醇液, 加热回流2小时 沉淀水解液 (酸性皂甙元部分)加水稀释,水浴蒸去醇,氯仿萃取 3次(10,5,5ml)

水层氯仿层 干燥, 无水NaSO 4 回收氯仿 总皂甙元 少量苯溶解,硅胶柱 层析,用苯-乙酸乙脂 (8:2)洗脱 组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ95%乙醇重95%乙醇重丙酮结晶 结晶3次结晶3次2次 齐墩果酸人参二醇人参三醇 mp299-301℃mp245-250℃mp244-246℃ 1.操作方法 人参总皂甙的提取:取人参茎叶粗粉20g,放入烧杯用热水(80℃-90℃)提取1小时,然后用棉花粗滤,在所得滤液中加入0.6g水石灰乳除杂并调PH9-10放置10分钟左右,过滤,再将滤液用浓硫酸(少量)调PH7,放置10分钟左右,回收提取液至少量(5-10ml),再上大孔树脂柱(注:此柱应提前洗好,清洗办法略)先用蒸馏水洗至无色,再用70%的乙醇洗至无色,分别用小瓶接收。便得到了乙醇洗脱液,回收乙醇,便得到了人参总皂甙(黄白色)。 人参皂甙的水解 称取人参皂甙()4-5g(不足时由老师提供),加20倍量含5%HCl的50%乙醇溶液,加热回流2小时,放冷,加倍水,水浴去醇,转入分液漏斗中,用氯仿萃取3此(10,5,5ml),合并氯仿层,加少量无水硫酸钠干燥,回收氯仿即得总皂甙元。 甙元柱层析分离 称取100-200目硅胶(105℃活化30分钟)50g,用苯做洗脱剂湿法装柱,柱顶放一层脱脂棉,压上数个玻璃球,放出多余的苯(至高于吸附剂1cm),计算保留体积。总皂甙元用少量苯溶解上柱,用苯-乙酸乙脂(8:2)洗脱,薄层检识(与甙元标准品对照)相同组分合并,回收溶剂。齐墩果酸、人参二醇用95%乙醇重结晶,人参三醇用丙酮重结晶,纯品80℃干燥,收集于小瓶中。 2.人参皂甙的检验 (一)显色反应

人参三七皂苷化学成分及药理作用对比研究_王海静 (1)

人参三七皂苷化学成分及药理作用对比研究 王海静 严铭铭 邵 帅 赵大庆 (长春中医药大学·吉林长春·130021) 摘 要:对来源于五加科人参属近缘植物人参和三七的化学成分和药理作用进行了综合比较。两种药 材在化学成分上既具有相似性又存在着差异性,因而在药理作用上也表现出一定的相似性和区别。 关键词:化学成分;药理活性;人参皂苷;三七皂苷 人参、三七均为五加科人参属植物,是临床常用传统中药,二者均以皂苷为其药理活性成分,人参为补益药主要功能是大补元气,滋补强壮,复脉固脱,补脾益肺,生津安神;三七为止血药主要功能是止血、散瘀、消肿、止痛、补虚、强壮等功效。现代研究发现二者在神经系统、心血管系统、免疫系统以及在抗衰老、抗肿瘤等多方面有相似的药理活性,对照化学成分发现二者有许多相同的单体皂苷类成分,但由于各单体皂苷含量的不同又表现出不同药效作用,本文就从人参、三七化学成分及药理作用方面做以比较和综述。1 化学成分 皂苷类成分均为人参和三七的主要有效成分,主要分为三大类即原人参二醇型(P r o t o p a n x a d i o l),如人参皂苷R b1、R b2、R c、R d、R h2、M-R b1、M-R d等,原人参三醇型(P r o t o p a n x a t r i o l)如人参皂苷R e、R f、R g1、R g2、R h1等和齐墩果酸型(o l e a n o l i c a c i d)有人参皂苷R o、R i等;随着研究的深入,最近又有许多新的单体人参皂苷被发现,但主要集中在前两种类型并主要是对原有类型的进一步细化,如丙二酰类皂苷,20位不同构型异构体皂苷(类型A)以及17位不同取代模式的单体皂苷(类型D)[1~3]。据F u z z a t i[4]初步统计,迄今为止从人参的不同部位分离得到的皂苷成分已有80余种,而从三七的不同部位分离得到皂苷成分也有60余种,但未发现齐墩果酸型皂苷,其中在三七中分离得到了人参皂苷F2、R a3、R b1、R b2、R b3、R c、R d、R g3、R h2、R h3、M C、M-R b1、M-R d、R g3、R h2等,主要以人参三醇型为主。 2 药理活性 观察人参和三七的化学组成发现二者的皂苷组成有相同的成分,现代药理研究证明二者在许多方面呈现相同或类似的药理作用;同时,二者也因各单体皂苷所含种类和含量的不同而呈现不同的药效作用。 2.1 对中枢神经系统的作用 人参皂苷R g类有中枢兴奋作用,R b类呈镇静作用[5];R g1与学习过程有关,而R b1与记忆和安定作用有关;R g类和R b类皂苷都是人参和三七所含的主要皂苷成分,因而在药理作用上表现出很多相似性。2.1.1 益智作用 现代研究认为人参皂苷R g1和R b1是人参中益智作用主要成分。药理作用机制研究表明[6],人参皂苷R g1和R b1均可促进幼鼠身体发育,并易化小鼠成年后跳台法和避暗法记忆获得过程,可明显增加小鼠海马C A3区细胞突触数目。这是人参皂苷促进学习和记忆的组织形态学基础。另有报道,三七皂苷G-R b1和G-R g1能显著增强小鼠的学习和记忆能力,对亚硝酸钠及40%乙醇造成的小鼠记忆不良均有不同程度的对抗作用。 2.1.2 镇静、镇痛作用 三七地上部分对中枢神经有抑制作用,表现为镇静、安定与改善睡眠等功用。三七总皂苷(P N S)、三七单体G-R b1均有显著的镇静作用,并能协同中枢抑制药的抑制作用。同时,P N S、G-R b1对化学性和热刺激性引起的疼痛均有明显的镇痛作用。作为镇静、镇痛作用主要成分的人参皂苷R b1是人参的主成分之一,推测人参也应具有一定程度的镇静、镇痛作用。 2.1.3 对神经细胞的作用 江山等[7]研究发现,人参皂苷R b1对缺血性脑损伤有保护作用,但并不呈剂量依赖性;胡堂等[8]人通过实验发现低浓度人参皂苷R b l对雪旺细胞增殖有明显促进作用,高浓度则显示抑制作用。刘雯等[9]实验观察三七总皂苷对模型细胞的保护作用,发现三七总皂苷对能量代谢障碍引起的神经细胞损伤有保护作用。对照人参皂苷对神经细胞的保护作用怀疑三七皂苷G-R b1可能是三七对神经细胞起保护作用的主成分之一。 2人参研究 R E N S H E N Y A N J I U 2008年第1期

人参化学成分的提取及测试方法的优化研究

人参化学成分的提取及测试方法的优化研究人参(Panax ginseng C.A.Mey)作为滋补佳品,在医药保健史中占据着重要地位,市场需求量巨大。当下,我国在人参化学成分评价方面不够系统全面,缺少完善的评价标准和管理规范。 本研究旨在以传统提取分离技术为基础,结合现代分析手段优化人参多成分提取及检测工艺,建立基于多成分化学成分评价体系,同时比较吉林5个样品人 参化学成分含量。结果如下:采用Box-Benhken设计,对人参皂苷Rg1、Rb1和Re超声辅助提取工艺进行优化研究,得到最佳提取工艺:以70%乙醇为溶剂,超声功率480W、料液比1∶50 g/mL、温度60℃、时间30 min、提取3次;并建立28种人参皂苷UPLC-MS/MS检测分析方法。 采用正交实验设计优化人参多糖的索氏提取法、微波辅助提取法、超声辅助提取法提取工艺,得到最佳提取方法及工艺为以超声辅助提取,以水作溶剂,超声功率200 W、料液比1∶50 g/mL、时间25 min、温度80℃、提取2次。通过比较四种农药残留提取净化方法,优化净化工艺,得到:使用QuEChERS快速萃取净 化法,超声提取,提取液用Dispersive SPE固相萃取小柱净化,回收率较高,净化完全;并建立了人参中32种农药残留GC-MS/MS检测方法。 采用微波消化法消化,建立了人参中23种元素(包括已有限量规定的6种重金属元素)ICP-MS检测方法。基于多成分分析方法,对5个产区间人参比较:针 对总皂苷含量来说,靖宇人参总皂苷含量明显高于其它样品;对于人参皂苷 Rg1+Re和Rb1来说,均已达到药典中标准,且在长白人 参中人参皂苷Rg1+Re含量最高,而靖宇人参中人参皂苷 Rb1明显高于其它样品;针对单体皂苷含量而言,存在着明显差异,在

人参皂苷的提取与分离材料

人参皂苷的提取与分离 学生姓名 专业 班级

学院 摘要 首先认识人参和人参皂苷,了解人参皂苷的详细作用和功效,接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法,用详细的工艺提取人参皂苷,并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定,为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。 关键词:皂苷;人参茎叶;鉴定。 Abstract The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem leaf total saponin extraction method, with the detailed process of extraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem and leaf development lays a foundation. key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;

目录 摘要 (1) Abstract ..................................... 错误!未定义书签。 1 绪论 (3) 1.1 ............................................. 人参概述 错误!未定义书签。 1.2 ........................................ 人参的化学成分 1 1.2.1人参皂苷 (1) 1.2.2人参蛋白 (1) 1.2.3人参多糖 (1) 1.2.4无机元素 (2) 1.2.5其他成分 (2) 1.3 ................................ 人参的生理功能及药理活性 2 1.3.1增强免疫功能 (2) 1.3.2抗衰老 (2) 1.3.3抗肿瘤 (3) 1.3.4增强学习和记忆能力 (3) 1.3.5保护心血管系统 (3) 2 实验部分 (5) 2.1 ............................................ 实验材料 5 2.2 人参皂苷的提取分离 (5) 2.2.1 人参皂苷的提取分离原理 (5) 2.2.2 人参皂苷提取和苷元分离工艺流程 (5) 2.3 ........................................ 人参皂苷的检识 7 2.3.1 显色反应 (7)

人参皂苷研究分析

摘要 人参皂苷主要有原人参二醇(Protopanaxadiol, PPD) 型、原人参三醇( Protopanaxatriol, PPT) 型、齐墩果酸(Oleanic Acid, OA)型三种类型,其具有广泛的生物学活性,包括免疫调节、抗肿瘤、提高学习记忆、抗衰老、抗炎、抗痴呆、抗疲劳和促进造血等。但是人参皂苷本身不易被吸收,生物利用度较低。大量研究表明,人参皂苷在胃肠道去糖代谢后形成苷元或次苷,这些成分更容易被胃肠道吸收,且活性较皂苷增强。人参皂苷元混合物DS-1226系采用专有技术从人参茎叶中提取、水解、精制而成的一种类似人参皂苷肠代谢组合物的新型中药有效组份,该产品及技术已获得中国、美国、加拿大、欧盟、台湾等8个国家或地区的授权专利,其主要成分为PPT(33 %)和PPD (16 %)。行为学实验表明DS-1226对睡眠干扰所致的学习记忆障碍具有改善作用,此外其还对化疗所致的骨髓抑制有保护作用。 人参是五加科(Araliaceae) 人参属植物人参Panax ginseng C.A.Meyer的干燥根,是珍贵的中药材,始载于《神农本草经》,在我国药用历史悠久。人参主产于我国吉林的长白山等地区,具有大补元气、补脾益肺、生津、安神益智等功效-4。人参中含有多种类型的化学成分,如皂苷类、挥发油类、多糖类、氨基酸和多肽类、微量元素等,其中人参皂苷是主要的活性成分15]。人参皂苷属于三萜类皂苷,目前可分为三类6:-类为原人参二醇( Protopanaxadiol, PPD) 型,主要有人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rh2等;另一类为原人参三醇( Protopanaxatriol, PPT) 型,有人参皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1等;还有一类为齐墩果酸(Oleanic Acid, 0A)型,有人参皂苷Ro、Rh3、Ri、F4等。近年来,对于人参皂苷以及其代

保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究

保健食品中人参总皂苷的含量测定方法研究 发表时间:2014-08-26T15:20:35.077Z 来源:《医药前沿》2014年第20期供稿作者:张高飞于玥邬晓鸥李军 [导读] 本文建立的方法简单、便捷,准确性、重复性好,可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 张高飞于玥邬晓鸥李军 (深圳市药品检验所 518057) 【摘要】目的建立保健食品中人参总皂苷含量的测定方法。方法用水提取人参总皂苷类成分,经水饱和正丁醇萃取、氨试液洗涤除杂后,试样中的人参皂苷类成分在高氯酸的作用下与香草醛反应,产生特征的紫红色,在560nm下测定吸光度。结果人参总皂苷在0.0722~0.2165mg质量范围内与吸光度线呈良好的线性关系,平均回收率为95.9%。结论本文建立的方法简单、便捷,准确性、重复性好,可用于保健食品中人参总皂苷的含量测定。 【关键词】保健食品人参总皂苷分光光度法 【中图分类号】R93 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)20-0217-02 皂苷类成分是参类中的主要活性物质, 具有滋补强壮,增强免疫,抗疲劳的功效[1],常用的检测方法为紫外分光光度法[2-5]。目前市售含参类的保健食品有片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液等,均是以总皂苷含量来评价其产品的质量和功效。其测定方法大多都是按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的方法检测[6],在实际应用中,主要存在以下问题:1、固定的树脂柱载样量与不确定的样品总皂苷含量之间的矛盾,部分样品存在柱容量超载的情况,测定结果偏差严重。2、部分样品经过大孔树脂柱除杂后,仍存在干扰比色测定的杂质。3、操作步骤欠规范,导致测定结果重现性差。本文针对总皂苷的提取方式、以及测定过程中的参数进行研究,建立了保健食品中人参总皂苷的测定方法。 1 仪器、材料与试药 岛津UV2450紫外分光光度计;瑞士梅特勒XS105DU电子天平;上海一恒电热恒温水浴锅;人参皂苷Re(中检所,批号110754-200822,含量88.8%);儿童装高丽红参液,舒灵胶囊,舒慰快牌胃肠液均购自市场;水为蒸馏水,其余试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1供试品溶液的制备 固体试样:称取1 g样品,置100 mL容量瓶中,加水80 mL,超声提取30 min,放冷至室温,用水定容至刻度,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25 mL,进行萃取。 液体试样:吸取试样10 mL至分液漏斗中(含乙醇的保健食品,水浴挥尽乙醇),加水至约25 mL,进行萃取。 在已处理好的试样中加入20 mL水饱和正丁醇,振摇萃取3次,取正丁醇层(必要时可离心),合并提取液,用20 mL氨试液洗涤3次,置蒸发皿中100℃水浴蒸干,残渣用甲醇溶解并转移至25 mL量瓶中,甲醇定容,即得。 2.2 标准曲线的绘制 分别精密吸取人参皂苷Re标准溶液0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL于10 mL具塞比色管中,水浴挥干溶剂,加入0.2 mL 5%香草醛冰乙酸溶液,再加入0.8 mL高氯酸,使残渣溶解,于60℃水浴加热10 min,冰浴冷却后,精密加入冰乙酸5 mL,摇匀,于560 nm波长处测定吸光度。取供试品溶液1 mL于10 mL具塞比色管中,自“水浴挥干溶剂”起操作。 3 方法学考察 3.1线性关系 取人参皂苷Re对照品0.01804 g,置100 mL量瓶中,加甲醇溶解稀释至刻度,作为标准溶液,精密量取标准溶液0.4、0.6、0.8、 1.0、1.2 mL分别置10 mL比色管中,水浴蒸干,显色,以对照品的质量(mg)为横坐标,吸光度为纵坐标,得回归方程:y=4.4807x- 0.0886,r=0.9997。结果表明,人参皂苷Re对照品质量在0.0722~0.2165 mg之间与吸光度呈良好的线性关系。 3.2 萃取次数 取舒灵胶囊、儿童装高丽红参液,按2.1制备样品水提取液,用水饱和正丁醇分别萃取3、4、5次,结果表明,萃取3次可将人参总皂苷提取完全(表1)。 表1 萃取次数比较结果 3.3热稳定性考察 由于正丁醇沸点较高,为此对人参皂苷的热稳定性进行考察,以便选取合适的水浴温度。取人参皂苷Re标准溶液0.6 mL,分别按60℃、100℃水浴蒸干、100℃水浴蒸干后继续放置30 min处理,测定结果分别为0.663、0.658、0.653,表明人参皂苷的热稳定性良好,因此水浴温度选为100℃。 3.4显色稳定性 取人参皂苷Re标准溶液0.3 mL,显色后每隔10 min测定其吸光度,结果表明,显色后的紫红色溶液不稳定,吸光度呈下降趋势,因此显色完成后需在10 min内完成测定。 3.5重复性试验 取舒灵胶囊按2.1下方法制备6份供试品溶液,分别测定,结果表明本方法重复性良好(表2)。

浅谈中药人参的药理作用与应用研究

浅谈中药人参的药理作用与应用研究 中药人参为五加科的干燥根,栽培品称“园参”,野生品称“山参”,主产于东北三省。秋季采挖。园参经晒干或烘干,称“生晒参”;蒸制后的干燥品,称“红参”。切片或研粉用。人参的化学成分主要是人参皂苷、多糖、维生素及人参黄酮类等。多数为达玛烷型皂甙,如人参皂甙Ral,Ra2,Rbl,Rb2,Rb3,Rc,Rd,Re,Rf,Rgl,Rhl,及20-葡萄糖人参皂甙Rf(20-glucoginsenoside Rf)等;少数为齐墩果酸型(C型)皂甙,如人参皂甙R[1]。 人参是我国特产珍贵药材之一,古代医药学书籍《神农本草经》对人参的功效有重要记载,人参药用部分主要为人参的根和须,现在也有将人参叶和人参花蕾作药用的。中医功效为大补元气、复脉固脱、补脾益气、生津、安神、益智。用于体虚欲脱、肢冷脉微、肺虚喘咳、惊悸失眠、神经衰弱、精神倦怠及各种气血津液不足症。 1人参的药理作用和临床功效 1.1对神经系统的作用 人参促进大脑对能量物质利用的有效成分为人参皂苷,其中人参皂苷Rb1,能调节中枢神经系统兴奋过程和抑制过程的平衡,对中枢神经系统均有小剂量兴奋,大剂量则转为抑制的作用。人参皂苷Rb1具有营养神经,促进轴突外生和神经再生的作用,人参皂苷;具有神经保护作用[2],对脑缺

氧损伤的神经细胞有保护作用[3],能作为脑细胞和神经细胞的保护剂,人参皂苷Rb1,对许多大脑细胞、神经细胞均有保护作用。姜正林[4]等用立体海马脑片模型研究发现,人参总皂苷对脑缺氧损伤的神经细胞有保护作用,人参皂苷Rb1,可促进抑制细胞死亡的基因产品的表达,抑制凋亡和凋亡细胞的死亡,对治疗或预防大脑和神经系统的疾病是有效的。近几年,人参皂苷抗神经细胞凋亡的作用受到人们的广泛关注,李军庆等[5]提出Rg,可抑制DNA断裂,从而防止细胞凋亡,人参能提高脑力与体力劳动的能力,提高工作效率,并有调节中枢神经系统抗疲劳作用;研究证明人参茎叶皂苷对电休克所致的大鼠较正常大鼠的不同脑区的单胺类递质含量明显增多,能改善大鼠的记忆学习功能[6]。海马与神经记忆活动有关,研究证明Rb1,能够促进海马苔藓纤维出芽等神经元的变化而提高神经元核内核糖核蛋白基因(Rdna)的转录活性,促进蛋白质的合成和增强海马突触的传递效应而增强学习记忆功能[7],人参对不同记忆障碍的动物模式的记忆与学习能力的改善,充分说明人参在中枢系统的效应。 1.2对心血管系统的作用 人参有抗缺血作用,人参总皂甙(GS)对心肌梗塞和再灌注损伤均具有保护作用。人们对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用的研究,以20~80mg/L浓度范围内为宜,且该作用随浓度升高而增强,但当浓度达到160mg/L时,反而有加

人参主要成分化学分析方法

人参主要成分化学分析方法 对人参主要成分及其结构、种类及分离提取方法进行了评述,全面论述了包括比色法、薄层色谱法及高效液相色谱法等现有人参皂甙的主要分析方法,并展望了發展趋势。 标签:人参,人参皂苷,化学分析 人参是五加科,具有多方面的药理盒生活活性,含有多种化学类型的成分,如皂苷类,多糖类,多肽类,脂肪酸,氨基酸,聚乙炔醇类等。其主要活性成分为人参皂苷,目前分理处的单体皂苷已超过30种。[1]人参皂苷有多种分析测定方法,主要有比色法、高效液相色谱法、超高效液相色谱法、高效液相色谱-串联质谱联用法、超高效液相色谱-串联质谱联用法及胶束电动毛细管色谱法等。 1、人参的样品处理,一般以醇(甲醇、乙醇、正丁醇)提取,为了充分提取,可进行超声处理20~30分钟。提取液用醚或氯仿脱脂后,需进一步净化处理。净化方式多为柱层析,所用柱子包括C18硅胶小柱[2]、大孔吸附树脂柱[3]、Sep—PakC18柱[4]等;也可以水饱和的正丁醇多次萃取净化。减压浓缩或蒸于后,以流动相或甲醇定容后待分析。若用高效液相色谱法测定,为了防止柱子堵塞,所有样品及人参皂甙对照品进样前可通过0.45tan微孔滤膜[5]。 2、分析方法 2.1比色法 比色法(colorimetry)是通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。比色法作为一种定量分析的方法,大约开始于19世纪30~40年代。这是利用有色物质对特定波长光的吸收特性来进行定性分析的一种方法,其原理是基于被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。如利用光电效应,将透过有色溶液后的光强度成正比例地变换为电流的强度来进行比色定量的方法,称为光电比色法。 比色法一般用于人参皂甙的测定,最常用的是香草醛比色法,为了提高显色的灵敏度及稳定性,常在香草醛中加入一定比例的高氯酸、冰醋酸或硫酸、磷酸等。最大吸收波长在540~56Ohm 之间。也有以浓硫酸显色用紫外分光光度法测定的。[6] 2.2薄层色谱法 薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的

总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法-实验流程图-李熙灿-XicanLi

总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法(香草醛法):实验流程图2017.10 【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16. 【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中,而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。为了测定这些皂苷的总含量,便建立了总皂苷的检测方法。总皂苷的检测多使用分光光度法,并以某种标准品绘制工作曲线,依该曲线所建立的回归方程,计算其含量。 【溶液配制】 1.香草醛-冰醋酸溶液(测试液)配制:精密称取25mg香草醛,加冰醋酸定容至5mL。即制成5mg/mL 香草醛-冰醋酸测试液。 2.样品液配制:将待检测的样品用甲醇溶解,配成约5mg/mL的样品液。具体浓度视样品的溶解度而定, 但是必须有精确的数据。 3.齐墩果酸标准品溶液配制:精密称取齐墩果酸1mg,加甲醇定容至5mL,配成0.2mg/mL齐墩果酸标 准品溶液。(也可以使用其他的皂苷物质,如人参皂苷Rg3。但必须是纯的化合物) 4. 高氯酸:分析纯试剂。 5. 冰醋酸:即纯的无水乙酸(分析纯) 【检测方法与实验流程图】 【标准曲线绘制】(齐墩果酸) 取上述齐墩果酸溶液x μL (x=0,40,80,120,160,200),依“实验流程图”,在70℃水浴15mim 后呈桃红色。以第一份溶液(x=0)作为空白对照,测A540nm值。以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量,为横坐标,A540nm值为纵坐标,绘制标准曲线。以此标准曲线计算,得线性回归方程。 【样品液的测定】 将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液,进行实验,并测定其A540nm值。将此A540nm代入线性回归方程,即可计算出其总皂苷的含量(以齐墩果酸计)。 【说明】 1.此法是以齐墩果酸为标准品测得总皂苷的含量。所以,其结果应表示为,如:“某某提取物中含 有0.12mg/g的总皂苷(以齐墩果酸计)”。这并不意味着该提取物中真的就含有齐墩果酸。 2.“实验流程图”中,在“彻底挥干溶剂”一步中,如果溶剂挥干不彻底,哪怕是有一点点,都 会干扰。水也要彻底挥干。 1

人参皂苷的提取

第一章综述 人参皂苷的简介 人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。 人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。 人参皂苷(ginsenoside,GS)是人参的主要有效成分,现已明确结果的GS单体约有40余种;在人参中的含量在4%左右。其中研究最多且与肿瘤细胞凋亡最为相关的为Rg3与Rh2。众多研究表明,它具有较高的抗肿瘤活性,对正常细胞无毒副作用,与其他化疗药物(如顺铂)联合应用有协同作用。人参皂苷通过调控肿瘤细胞增殖周期、诱导细胞分化和凋亡来发挥抗肿瘤作用。将肿瘤细胞诱导分化成正常细胞有利于控制肿瘤发展,诱导肿瘤细胞凋亡使细胞解体后形成凋亡小体,不引起周围组织炎症反应。Popovich等研究认为,人参皂苷可以促进人白血病细胞的凋亡,其途径与地塞米松相识,均为受体依赖性。目前我国对人参皂苷的提取分离方法、制剂工艺、抗肿瘤作用机制以及临床应用等方面做了大量研究,而且已经有人参皂苷的新产品推向市场。 人参皂苷成分 人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。 Rh2:具有抑制癌细胞向其它器官转移,增强机体免疫力,快速恢复体质的作用。对癌细胞具有明显的抗转移作用,可配合手术服用增强手术后伤口的愈合及体力的恢复. Rg:具有兴奋中枢神经,抗疲劳、改善记忆与学习能力、促进DNA、RNA合成的作用。 Rg1:可快速缓解疲劳、改善学习记忆、延缓衰老,具有兴奋中枢神经作用、抑制血小板凝集作用。 Rg2:具有抗休克作用,快速改善心肌缺血和缺氧,治疗和预防冠心病。 Rg3:可作用于细胞生殖周期的G2期,抑制癌细胞有丝分裂前期蛋白质和ATP的合成,使癌细胞的增殖生长速度减慢,并且具有抑制癌细胞浸润、抗肿瘤细胞转移、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等作用。

人参化学成分和药理研究进展_郭秀丽

-26- Clinical Journal of Chinese Medicine 2012 V ol.(4) No.14人参化学成分和药理研究进展 A review on the ginseng chemical constituents and pharmacological 郭秀丽高淑莲 (泰安市中医医院,山东泰安,271000) 中图分类号:R282 文献标识码:A 文章编号:1674-7860(2012)14-0026-02 【摘要】人参在《神农本草经》中被列为上品药物,具有“多服久服不伤身、轻身益气不老延年”的作用。其在中医药临床领域中具有悠久的历史,然传统研究进展十分缓慢,属于古代朴素研究阶段。由于现代科技的飞速发展,对人参的研究也得到了突飞猛进的突破。本文针对人参的化学成分以及药理作用的研究进展展开综述。 【关键词】人参;化学成分;药理作用;研究进展 【Abstract】 In Shen Nong's Herbal Classic, the ginseng was listed as the top grade medicine, with the role of “multi-service Jiufu not damage the health and Qingshen Yiqi Yannian”. It has a long history in TCM in the clinical field, then the traditional research progress has been slow, belonging to the ancient simplicity stage. Due to the rapid development of modern science and technology, the study of ginseng has also been a rapid breakthrough. In this paper, the research progress of the chemical composition and pharmacological effects of ginseng were summarized. 【Keywords】Ginseng; Chemical composition; Pharmacological effects; Research progress 中药人参是五加科人参,属植物人参的干燥根,是一种名贵药材,同样为一种比较常见的药物。经中医临床验证表明人参的主要功效包括有补脾益肺、大补元气、生津安神益智等。临床上人参能够对诸多疾病均能够产生良好的防治效果,特别是对人体滋补强壮作用更加的明显。并且它的化学成分相对较为复杂,具有广泛的生物活性,药理作用相对独特,由于现代分离以及分析技术得到了突飞猛进的发展,人参的化学成分的研究也获得了进一步的进展[1]。目前人们对其药理活性广泛关注,本文针对其化学成分和药理活性展开论述,从而为今后的临床研究提供参考。 1 人参的化学成分 人参中主要成分包括有糖类,皂苷类,挥发性成分等,有机酸以及其酯,酶类,蛋白质,甾醇及其苷,含氮化合物,多肽类,黄酮类,木质素,无机元素以及维生素类等。在这诸多化学成分中主要的有效成分是人参皂苷以及人参多糖。 1.1 皂苷类 ①齐墩果酸类包括有人参皂苷。②原人参二醇类包括有丙二酸基人参皂苷、人参人参皂苷、西洋参人参皂苷等。③原人参三醇类包括有三七人参皂苷、葡萄糖基人参皂苷、假人参皂苷以及原人参三醇等。 1.2 多糖类 人参中一般含有38.3%的水溶性多糖以及约7.8%~10.0% 的碱性多糖,在这其中约有80% 为人参淀粉,而另外的20%为人参果胶,少量糖蛋白等,由半乳糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖残基以及葡萄糖等组成,同时也会存在少量鼠李糖和一些未知的戊糖衍生物等[2]。 2 人参的药理作用 2.1 对中枢神经系统的作用 据研究证实人参能够产生明显的镇静与兴奋的双向作用,会受到用药时神经系统的功能状态的影响,并且与剂量大小以及人参的不同成分也存在一定的关系。人参皂苷Rb 与Rc 的混合物对小鼠的中枢神经系统能够产生明显的安定以及镇痛的效果,并且还能够产生中枢性肌肉松弛、降温、减少自发活动等作用。人参皂苷Rg1、Rg2以及Rg2 的混合物对中枢神经系统也能够产生明显的兴奋效果,而大剂量时则会表现出明显的抑制作用[3]。 2.2 对人体应激性作用 诸多研究结果显示表明,手术前口服人参皂苷胶囊对降低手术后应激反应具有良好效果,能够有效减轻手术后的疲劳,对老年胃肠外科病人的早期康复产生促进作用。人参多糖具有对绒毛膜促性腺激素诱导黄体细胞孕酮分泌进行抑制的效果,可以使绒毛膜促性腺激素诱导颗粒细胞孕酮分泌得到促进;然会对黄体细胞以及颗粒细胞cAMP生成产生协同作用,人参多糖会导致卵母细胞的生长抑制率明显降低,表现出区间剂量依赖关系[4]。 2.3 对循环系统的作用 人参能够对血压、强心、保护心肌产生双向调节的作用。人参皂苷Rb1可以对急性心肌梗死大鼠的心室重构进行有效抑制,进而保护心功能。有研究证实,人参皂苷Rg1对AMI 大鼠进行治疗,可以使外周血的干细胞数量得到显著提高,并且对干细胞归巢梗死心肌分化为心肌细胞样细胞进行促进,使梗死面积得以缩小,有效减轻心室重构,对缺血心肌的基本结构进行保护。并且人参皂苷Rg1会利用对心肌局部组织分泌粒细胞集落刺激因子(G-CSF)进行刺激从而实现对骨髓细胞游走至心肌组织的诱导,进而向血管内皮细胞分化。内皮细胞的再生会对缺血心肌组织的毛细血管再生及血流供应的维护产生直接的促进作用[5]。 2.4 对内分泌的作用 人参不具有性激素样作用,但是却可以对垂体分泌促性腺激素进行促进,使大鼠的性成熟过程得以加速,或者是使性已

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