CTAB法提取总DNA

CTAB法提取槐树总DNA

⑴分别精称1.0g槐树新鲜叶片,去主脉,放入研钵。

⑵用液氮将叶片组织研磨成细粉,然后将粉末分装于2mL离心管中。

⑶各离心管中加入65℃预热的2×CTAB抽提液1000µl和β-巯基乙醇4µl,

混和使之充分湿润,于65℃水浴锅中温育1.5h,不时混匀。

⑷ 12000rpm离心10min,将上清液转移至新的离心管中,弃沉淀。

⑸上清液中加入等体积的酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)(v/v),抽提上清,颠倒

混匀7min,12000rmp离心10min。

⑹将离心后所得的上清液体转移至新离心管;每管加入等体积的氯仿/异戊醇

(24:1)(v/v),再次抽提上清液,12 000rpm离心10min,上层液体转移至新管。

⑺每管加入1/10体积的3mol/LNaAc(pH8.0)和等体积的异丙醇,轻轻翻转混

匀,置-20℃冰箱中冰浴30min~1h,沉淀DNA。

⑻ 12000rpm离心10min,弃上清。

⑼用70%酒精和无水乙醇各洗涤沉淀一次,分别离心2min自然干燥。

⑽加50µl TE缓冲液溶解DNA;保存于-20℃的冰箱中备用。

⑾ DNA浓度及质量检测:

取3μL DNA提取液,用1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA浓度、质量。

免费下载该文档:CTAB法提取总DNA
相关文档
CTAB法提取DNA原理及步骤、制胶、电泳
CTAB法提取DNA原理及步骤、制胶、电泳 - CTAB 法提取 DNA 的原理及步骤: 冷冻的植物组织,在低温干燥状态下机械磨碎。通常精提 DNA, 都要加液氮使材料变脆,...
CTAB法提取植物总DNA
关于CTAB 法提取基因组 DNA,原理 CTAB 法原理 CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一 种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀...
CTAB法提取DNA
CTAB法提取DNA - CTAB 和 TE 缓冲液配方: 操作步骤: 1.65 度水浴预热 CTAB 缓冲液; 2. 液氮研磨叶片,转入 1.5ml 离心管中,大约装入 1/3 管,迅速加入...
CTAB法提取DNA简要步骤
CTAB法提取DNA简要步骤_生物学_自然科学_专业资料。1, 取超低温保存的叶片样本, 研钵磨碎后加入 2.0ml 离心管中(加入的叶片粉末量没过 2.0ml 离心管的底部的...
DNA提取(CTAB法)
DNA提取(CTAB法)_生物学_自然科学_专业资料。CTAB 法提取细菌总 DNA 先用试剂盒提取 DNA,未成功则采用此方法。 (1) 将供试细菌纯培养后接入 LB 液体培养基,...
CTAB法提取DNA药品配制
CTAB法提取DNA药品配制 - CTAB 法提取 DNA 药品配制 1M Tris-HCl ( pH7.4, 7.6, 8.0 ) pH 浓 HCl Tris 去离子水 7.4 约 70ml ...
CTAB法提取植物基因组DNA
CTAB法提取植物基因组DNA - CTAB 法提取植物基因组 DNA CTAB法原理 法原理 CTAB(Cetyl trimethyl ammonium bromide) ,十六烷基三甲基溴化...
CTAB法提取微生物DNA
CTAB法提取微生物DNA_生物学_自然科学_专业资料。CTAB法提取微生物DNACTAB 法提取细菌 DNA 一. 1. 2. 3. 细菌总 DNA 提取 将菌株接种于液体 LB 培养基中,...
CTAB法提取DNA
CTAB法提取DNA_生物学_自然科学_专业资料。CTAB法的步骤及原理 CTAB 法提取步骤: (1) 在 7mL 离心管中加入 65℃预热的抽提液 2.5mL。 (2) 加入 1g 样品...
实验一 CTAB法提取植物基因组DNA
实验一 CTAB法提取植物基因组DNA - 实验一 实验目的: CTAB法提取植物基因组DNA 学习从植物组织中(幼叶)提取基因组DNA的基本原理和方法。 实验原理: 采用机械研磨...