血清的融化与存储
血清的融化与存储
血清一般在-10℃～-40℃可稳定存储很长时间。将血清存储在-70℃是不必要的，这种方式并不能更好的保证血清的品质（比如更长的保质期），反而会将存储血清的瓶子冻坏，导致血清无法使用。
1.将血清从冷冻装置中取出，放在冰箱的保鲜层（冷藏）或者冷房间中（温度2℃～8℃）
2.将血清完全融化（不是摇晃混匀），并达到融化环境的温度，为此，经常需要放置过夜。
3.将融化的血清放到室温环境中，当血清达到室温环境，将血清在37℃预热，预热后的血清可添加培养基或者进行热灭活。
4.决不能将血清从冷冻或者冷藏状态取出直接放在水浴锅中溶解或预热，这种做法会降低血清的品质，并可能引起盛放血清的瓶子破裂。
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总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)
总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) 产品编号产品名称包装 S0116 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) 100次 产品简介： 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP)方法，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。 活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。 机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。 植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。 FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine (Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素。并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM，因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的，样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。 Antioxidant Fe3+-TPTZ ——————> Fe2+-TPTZ (蓝色) 提供了抗氧化物Trolox作为对照。Trolox是一种维生素E的类似物，水溶性较好，抗氧化能力和维生素E相近。 本试剂盒方便快捷，加入待测样品后3-5分钟即可进行吸光度测定，通常10-20个样品可以在十多分钟内检测完毕。 本试剂盒可以检测100个样品。 包装清单： 产品编号产品名称包装 S0116-1 TPTZ稀释液 15ml S0116-2 TPTZ溶液 1.5ml S0116-3 检测缓冲液 1.5ml S0116-4 FeSO4·7H2O 200mg S0116-5 Trolox溶液 (10mM) 0.1ml —说明书1份 保存条件： -20℃保存，一年有效。其中S0116-2 TPTZ溶液，S0116-3 检测缓冲液和S0116-5 Trolox溶液 (10mM)需避光保存。 注意事项： 在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂会对本试剂盒的检测产生干扰，需尽量避免。 如果样品中含有外加的较高浓度的铁盐或亚铁盐，会干扰测定。但血浆、血清、细胞或组织裂解液等样品中含有的微量的铁盐或亚铁盐不会干扰测定。 样品中不能添加DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的物质，也不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂。 测定时需可以测定A593的酶标仪一台(测585-605nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。 TPTZ对人体有刺激性，请注意适当防护。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2018年重庆第一次感染性疾病血清学标志物系列B室间质评活动小结
2018年重庆市第一次感染性疾病血清学标志物 系列B室间质评活动小结 2018年重庆市第一次感染性疾病血清学标志物系列B室间质评活动共有219家实验室参加，本次有216家参评实验室按时回报了结果。请各实验室注意回报时间，不要迟报和漏报。 表1. 样本的预期结果 项目编号201811 201812 201813 201814 201815 抗HCV R(约2 NCU/ml) R (1 NCU/ml) N N R (约1 NCU/ml) 抗HIV R (约>4 NCU/ml) N R (约>4 NCU/ml) N R (约2 NCU/ml) 梅毒（非特异）N R(1:1/1:2/1:4) N N N 梅毒（特异）N R (约>24 mIU/ml) R (4 mIU/ml) R (12 mIU/ml) N 表2. 各项目的检测情况 项目样本编号总实验室数正确实验室数错误实验室数正确率% 错误率% 抗HCV 201811 213 212 1 99.5 0.5 201812 213 210 3 98.6 1.4 201813 213 211 2 99.1 0.9 201814 213 213 0 100 0 201815 212 207 5 97.6 2.4 抗HIV 201811 209 208 1 99.5 0.5 201812 209207 2 99 1 201813 209206 3 98.6 1.4 201814 209208 1 99.5 0.5 201815 209202 7 96.7 3.3 梅毒（非特异）201811 169 169 0 100 0 201812 173 170 3 98.3 1.7 201813 173171 2 98.8 1.2 201814 173 167 6 96.5 3.5 201815 169 169 0 100 0 梅毒 （非特异凝 集效价） 201812 162 151 11 93.2 6.8 梅毒（特异）201811 208 208 0 100 0 201812 208 208 0 100 0 201813 208 200 8 96.2 3.8
常见免疫学指标的临床意义
一、抗核抗体谱（ANA谱） 1、ANA定义：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称。 2、ANA分类： 抗DNA抗体:抗单链(ds)-DNA抗体抗双链(ds)-DNA抗体抗左旋-DNA抗体 抗组蛋白抗体：抗总组蛋白抗体(AHA) 抗H1、H2A、H2B、H3、H4 和H2A-H2B抗体 抗非组蛋白抗体： 抗核可溶性成分(ENA):抗PM-1、rRNP、Sm、RNP 、SSA 、SSB、Scl-70、Jo-1、PCNA等 抗着丝点抗体(ACA) 抗核仁抗体 抗其他细胞成分: 指抗细胞浆成分的抗体（ANCA） 3、ANA阳性的定义:一般将超过95％正常人群ANA水平的数值定义为ANA阳性，对大多数实验室而言，通常认为IFANA滴度1：80为阳性。 4、ANA阳性的临床意义:可见于多种临床情况，除了风湿病外，也可见于正常人或非风湿病: (1)健康人:年龄越大,阳性率越高(>60岁的阳性率为20%～25%),但为低滴度,均质型或弥漫型; (2)有SLE、SS或SSc 家族史的一级亲属,有近50%为阳性; (3)肺疾病:原发肺纤维化、原发肺动脉 高压或石棉所致的肺纤维化；（4）肝病和血液病:活动性肝炎、原发胆汁性肝硬化、酒精性肝病、白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、ITP或自身免疫性溶血性 贫血等; （5）慢性感染: 寄生虫、结核杆菌、麻风杆菌、沙门菌或克雷伯杆菌感染等; （6）其他:Ⅰ型糖尿病, 多发性硬化,终末期肾病,器官移植后等。注意在正常人中一般ANA滴度较低。ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳性并不能确立某种临床诊断，反之，ANA阴性也不能排除自身免疫性病。 附正常人% ≧1：40 20-30，≧1：80 10-12 ，≧1：160 5 ，≧1：320 3 临床上如果ANA滴度≥1：1000肯定可以考虑为结缔组织病或者自身免疫性疾病。具体是哪一种疾病，要结合其他临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。如果对初发患者ANA（＋）≤1：320不能肯定，但也能排除结缔组织病或者自身免疫性疾病可能，也要结合临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。一般ANA=（＋1：100）时，临床意义也不大。因为除对标本稀释处理之外，实验室在对Hep细胞和肝片质控板免疫荧光吸收值是以1：100为定标。如血管炎ANA可阳性，但多为低滴度。借用一句话总结。“不怕做不到，就怕想不到”。 5、ANA阴性的意义，除了上述的阳性、假阳性意义外，也要注意阴性的意义，抗核抗体阴性的原因：正常人或非结缔组织病患者，其体内不存在ANA ；疾病初期，ANA含量不足以被测出或临床治疗有效，病情缓解，ANA确实转阴；其他实验室误差，特别是试剂，有时试剂有问题会让你很郁闷，有的病人出现ANA 谱三阳，而且是一段时间内多个病人，或明显的SLE，但抗体就是阴性，让你很郁闷，这时除排除其他情况外，注意一下实验试剂盒，是否是同一批试剂检测的。 6、抗ds-DNA 抗体：对SLE诊断有高度特异性，目前公认为SLE的特异性抗体，并与疾病活动有关，可用于监测SLE病情变化和观察药物疗效。 7、抗Sm:是SLE标记抗体，帮助前瞻性和回顾性诊断，常与nRNP抗体共存。 8、抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于MCTD的诊断。nRNP抗原与rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而rRNP是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与SLE 有关，尤其有精神神经症状的SLE阳性率较高 9、其他ANA谱，抗SSA和抗SSB与Sjogren?s Syndr ome相关，并可造成新生儿狼疮和先天性心脏传导阻滞；抗ScL-70为SSC的标记抗体，抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有关，有助于药物性狼疮的诊断，抗核仁型抗体常与SSC有关；抗Jo-1是PM/DM的标记抗体；PCNA为SLE的特异性抗体，但ANA阳性且呈斑点型，对荧光法判断PCNA有干扰，因此首先注意排除实验室误差，PCNA在LE患者中阳性率约3-5%，且有报道其与狼疮患者发生弥散性增殖性肾小球肾炎相关,其他结缔组织病人中常为阴性。
血浆血清管的区别
血清、血浆和采血管知识 血浆一般只用于检验凝血功能及血沉 全血一般用于血液分析，如血常规，血型鉴定等 除了上面的，血清基本都可以胜任！ 一般情况下，血清能做的血浆也可以做，他们之间的差别在于血清缺乏某些凝血因子如凝血因子3等 全血其实一般用的都是细胞，比如做糖化血红蛋白，人白细胞抗原等试验就需要用到全血中的细胞 一、血清与血浆： 1、血清 血清是血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出，放入试管中，不加抗凝剂，则凝血反应被激活，血液迅速凝固，形成胶冻。凝血块收缩，其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清，也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中，纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，所以血清中无纤维蛋白原，这一点是与血浆最大的区别。而在凝血反应中，血小板释放出许多物质，各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰，血液中许多化学成分的分析，都以血清为样品。 （1）血清的基本成分是： [血清蛋白] 总蛋白、白蛋白、球蛋白、TTT、ZTT。[有机盐] 肌氨酸酐、尿素氮、尿酸、肌氨酸酐·净化值。 [糖质] 血糖、Glycohemoglopin。 [脂质] 胆固醇、三甘油脂、β-脂蛋白、HDL胆固醇。 [血清酵素] GOT、GPT、γ-GTP、LDH(乳酸脱水酵素)、淀粉酶、碱性碳酸酶、酸性碳酸酶、胆素脂酶、醛缩酶。 [色素] 胆红素、ICG、BSP。 [电解质] 钠(Na)、钾(K)、钙(Ca)、氯(Cl)。 [激素] 甲状腺荷尔蒙、甲状腺刺激荷尔蒙。 （2）血清主要作用： ●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。 ●提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。 ●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。 ●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。 ●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如seo3,硒等。
抗氧化酶的作用
重要的抗氧化酶和抗氧化剂的作用 超氧化物歧化酶（SOD）是美国的McCord和Fridovich在1969年发现的一种清除超氧阴离子自由基的酶。SOD是一种广泛存在于生物体内的金属酶，按金属辅基的成分不同主要分成三类,第一类含铜和锌，称为CuZn-SOD，是最常见的一种，呈蓝绿色，主要存在于真核细胞的细胞浆内。第二类含锰，称为Mn-SOD，呈粉红色，主要存在于原核细胞体、真核细胞的细胞浆和线粒体内。第三类含铁，称为Fe-SOD，呈黄褐色，主要存在于原核细胞中。另外，在牛肝中还发现一种CoZn-SOD[8]。 正常生理状态下，机体产生的自由基和清除自由基的速率处于动态平衡状态。但当机体内自由基产生增多，就会对机体的蛋白质、脂质和DNA造成损伤，导致机体疾病的发生。SOD是生物体内对抗氧自由基的一种最重要的抗氧化酶，是专门清除超氧阴离子自由基的。它的作用是将氧自由基歧化，发生 2O 2-+2H+SOD H 2 O 2 + O 2 的反应。由于H 2 O 2 在SOD活性部位生成，会对SOD 本身产生杀伤。催化产生的H 2O 2 如果不被及时清除，它会与O 2 -反应生成毒性 更大的羟基自由基。衰老自由基学说认为，代谢产生的自由基对机体造成的损害可引起衰老，SOD可有效的清除自由基，在一定程度上延缓衰老。此外，SOD还具有增强机体免疫力，提高机体对自由基引发的疾病的抵抗力，消除运动性疲劳等生理功能[3]。 过氧化氢酶（CAT）是一种末端氧化酶，广泛存在于动植物和微生物体内，酶分子结构中含有铁卟啉环，1个分子酶蛋白中含有四个铁原子[9]。CAT的生 物学功能是催化过氧化氢分解为水和氧，2 H 2O 2 CAT 2H 2 O + O 2 。过氧化氢 酶（CAT），广泛存在于动植物和微生物体内的一种末端氧化酶。它的生物功能是 催化细胞内的过氧化氢分解，起抗氧化作用，即2H 2O 2 2H 2 O+O 2 ，它可防 止过氧化氢含量过高对机体组织造成损伤，对细胞起到保护作用。 本研究结果显示，力竭运动后，大鼠的心组织、肝组织和肺组织中CAT活性均表现出升高，这可能是由于运动应激造成大鼠组织过氧化物质增多，使得组织CAT活性对应升高。同时，结果显示，联合补充谷氨酰胺和番茄红素对力竭运动大鼠肝组织和肺组织的抗氧化能力提高的效果最为明显，而单纯补充番茄红素对心脏组织的抗氧化能力提高优明显作用。这说明对于力竭运动大鼠的肝和肺组织，联合补充这两种物质起到协同抗氧化的作用。对于心脏组织，联合补充的效果不如单独补充一种的效果好，此机理尚待探讨。 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX），为水溶性四聚体蛋白，含有四个亚基，每个亚基含有一个硒原子[10]。主要存在生物体的线粒体和细胞液中，它的生理功能是不仅可以清除过氧化氢，同时还可以清除脂质过氧化物，所以说它也是机体内重要的抗氧化酶之一，在反应过程中还原性谷胱甘肽作为还原物
小鼠总抗氧化能力的测定
小鼠总抗氧化能力的测定 刘小美宋菊敏 （2006-10-24） 一、原理 机体中有许多抗氧化物质，能使Fe3＋还原成Fe2＋，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低。 二、目的 1．掌握总抗氧化能力的测定方法。 2．观察血虚小鼠模型总抗氧化能力的变化。 3．观察中药对血虚小鼠模型总抗氧化能力的影响。 三、材料和方法 1．试剂：总抗氧化能力测定试剂盒（南京建成生物工程研究所） 2．材料：EF管（1.5ml）120支，一次性试管（10ml）60支，移液器（P20ul、P100ul 、P1000ul）各2把及配套枪头各200支，玻璃比色皿（3ml，1cm光径）4只，温浴箱，分光光度计，漩涡混匀器1台，普通离心机大管、小管各1台，试剂瓶（125ml）1个，烧杯（150ml）2个，吸管（10ml）2支，吸球1支，量筒（200ml）1个，标签纸2张。 3．测定方法 （1）样本处理：取全血3500转/分离心15分钟得血清待测。 （2）试剂盒组成及配制：（50T） 试剂一：液体60ml×2瓶，40C保存。 试剂二：粉剂×2支，用时每支加双蒸水至120ml，室温保存。 试剂三：黄色贮备液10ml×1瓶，避光冷藏保存。贮备液得稀释液60ml×1瓶。 试剂三应用液的配制：临用前取贮备液以稀释液稀释，比例为1：19。需多少配制多少。 试剂四：溶液24ml×1瓶 试剂五：溶液24ml×1瓶，室温保存（天冷时会凝固，每次测试前适当加温以加速溶解，直至透明方可使用）。——测组织中总抗氧化能力时用到，测血清时不用。 处测各管吸光度。（370C时，每分钟每毫升血清使反应体系的吸光度（OD）值每增加0.01时，为一个总抗氧化能力单位）。 4）计算： 总抗氧化能力（单位/毫升血清）＝（测定管OD-对照管OD）÷0.01÷30×19 四、注意事项 1．室温放置10分钟后必须立即测定吸光度，否则吸光度会增加。 2．实验试剂用量较少，所以加量一定要仔细、准确。 3．每次加样后都必须在漩涡器上充分混匀。 4．难吸难打的试剂必须做到慢吸慢打。 五．思考题 1．小鼠血虚模型总抗氧化能力会出现什么样的变化？为什么会出现这样的变化？ 2．怎样用本实验的结果解释模型动物的某些主要症状？ 1
抗氧化活性测定方法的比较
抗氧化活性测定方法的比较 人体衰老和多种疾病均与自由基有关，寻找天然抗氧化剂具有重要意义。黄酮、多糖、多肽、酚类等生物活性成分均具有抗氧化活性，抗氧化活性的筛选方法可分为体外和体内2种测试体系。 体外：抗氧化活性可以用在特定条件下，样品对检测体系中自由基的清除能力、抗油脂过氧化能力及样品的还原能力、总抗氧化能力等来衡量和表征。常用的方法有羟基自由基（·OH）清除能力法、1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH法）、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐（ABTS 法）、超氧阴离子自由基法（O2-·）、邻苯三酚自氧化法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法、铁离子还原能力测定（FRAP法）、总酚测定法、ORAC法等方法。体内：主要有DNA氧化损伤法、蛋白质氧化损伤法、线粒体氧化损伤法。 其中DPPH法和ABTS法操作较简单便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外分光光度测量值后计算其自由基清除率，缺点是不同物质具有组成和结构的差异，与DPPH·、ABTS+·的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断，且DPPH自由基会和其他自由基发生反应。邻苯三酚自氧化法缺点是检测波长、缓冲液的组成及ｐＨ值、邻苯三酚浓度等关键测定条件存在
着较大差异。β-胡萝卜素漂白法的缺点是β-胡萝卜素本身有抗氧化活性，对样品活性的测定结果有影响。FRAP法主要用于食品业，优点是简单易操作、可以重复，缺点是无法测定硫醇化合物的还原能力。ORAC法是国际上通用的评价食品氧化的标准方法，缺点是仪器成分较复杂，检测成本较高。 目前普遍使用的体外抗氧化活性指标一般都采用分光光度法，使用分光光度计测量各种颜色成分含量的变化。分光光度法操作较简单、便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外-可见分光光度测量值后计算其活性大小，具有成本低、效率高、样品量少等优点。分光光度法缺点是会受到样本自身颜色和浑浊度的影响和限制，颜色深的样品测得的数据误差大，甚至得到错误的结果；不同物质组成和结构存在差异，与各种自由基的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断。外界环境因素对实验结果也存在一定程度的影响，有些抗氧化活性实验在冬天低温时不易成功，测得的数据往往没有规律。 我觉得在测定样品的抗氧化活性时，各种方法都有自己的优缺点，要根据需测物质来决定用什么方法，比如DPPH 法的自由基选择性强，不和只有一个羟基的芳香酸、无羟基的类黄酮反应，这类物质需用其他方法测定。若对检测结果
制动对骨骼肌的影响
中华物理医学与康复杂志 CHINESE JOURNAL OF PHYSICAL MEDICINE AND REHABILITATION 2000，vol.22No.2P.125-126 制动对骨骼肌的影响 倪国新 【关键词】制动;关节疾病 制动是骨关节病损的一种常用治疗手段，然而制动在保护受损组织的同时，也会对周围健康组织产生诸多不利的影响。研究表明：制动会引起肌肉生理、生化及生物力学等的改变，从而导致其功能的下降。了解制动对肌肉的影响，对探讨制动所致肌萎缩的防治具有重要意义。现就制动对骨骼肌的形态、生化、功能等的影响及相关因素以及早期预防的措施等方面作一综述。 1制动对骨骼肌形态的影响 MacDougall等将健康人的肘关节石膏制动4周后，前臂周径减少5%。Hather 等［1］采用核磁共振技术，发现人小腿制动6周后腓肠肌的截面面积减少26%，比目鱼肌减少17%。大量研究表明制动使得肌肉重量下降，但下降幅度与制动时间、动物种类、肌肉类别等密切相关。最明显的变化发生在制动后5～7 d内。倪国新等［2］将兔后肢制动4周，发现比目鱼肌和腓肠肌的肌肉湿重（muscle wet weight, MWW）分别下降31%、29%。制动同样会引起肌纤维的萎缩，但其程度与肌肉重量的下降程度并不一致。Qin等［3］的研究表明：兔胫骨前肌制动4周后，MWW下降了19%，而肌纤维的截面面积却下降了26%。这种不一致与制动后肌纤维间结缔组织增生，胶原形成增多使得非收缩性成分增加有关。 1.1光镜观察 制动48 h内，光镜下未见改变，明显的变化一般出现在制动7 d以后4，主要表现为：肌纤维间结缔组织增生，肌纤维变细，排列紊乱，某些区域可见非系统性病灶坏死，纤维内成份被巨噬细胞吞噬，卫星细胞被激活，分化成成肌细胞（myoblast），肌管形成，并发展成小纤维，这些变化表明了制动对肌肉的损伤［3］。 1.2电镜观察 制动10 h时，电镜下可见明显的线粒体肿胀，并有结晶体形成，此种变化逐步发展，到36 h以后开始逐渐减轻。48 h时可见肌原纤维排列紊乱。这些变化表明制动早期肌肉出现轻微、暂时性的代谢紊乱［4］，而持续长时间的制动将导致肌肉进行性损伤。 1.3毛细血管和血液供应 正常情况下，当肌肉处于伸长位时，毛细血管是笔直的；而当肌肉处于短缩位时，毛细血管则变得弯弯曲曲。将肌肉制动在短缩位，由于肌纤维不能伸展，必然会对毛细血管的形态产生影响。Oki等［5］将鼠比目鱼肌短缩位制动，在第8周时发现弯弯曲曲的毛细血管形态开始消失，趋于笔直，且随着时间的延长，这种改变更加明显。这种变化使得血管失去其伸展性，因此在解除制动后，肌肉的伸展易引起血管破裂。 由于血管形态的变化等诸多原因的影响，制动后肌肉的血液供应减少。Carmeli等［6］发现鼠腓肠肌制动4周，其毛细血管容量下降34%。Herbison等推测肌肉萎缩和纤维退变是由于制动的肌肉血液灌注下降所致的一种非特异性反应。毛细血管密度（CD）和毛细血管数/肌纤维数（C/F）是评价血供的二个常用指标，但二者对制动的反应并不一致：Qin等［3］发现兔胫骨前肌制动4周后，CD上升11%，C/F下降20%；Desplanches等也发现大鼠胫骨前肌制动4周后，C/F下降，而CD不变。这种不一致是由于制动导致肌纤维的萎缩程度较C/F大，肌肉单位面积毛细血管数相对增加所致。
植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒
植物总抗氧化能力（TAC）比色法（ABTS）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
植物总抗氧化能力 （TAC） 比色法 （ABTS） 定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与， 使染料 ABTS 氧化，在抗氧化剂的存在下，通过分光光度仪，观察其峰值下降的变化，来定量检测对应于标准水溶性生 育酚 Trolox 的总抗氧化能力，即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功 实验证明的。适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检 测。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。b5E2RGbCb5E2RGbC
技术背景
超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-） 、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2） 、羟自由基或氢氧基 （hydroxyl radical；OH-） 、过氧化基（peroxyl radical；ROO-） 、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO） 、烷 氧自由基（alcoxyl radical） 、氮氧基（nitric Oxide；NO-） 、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-） 次氯酸（hypochlorous acid；HOCl） 、半醌自由基（semiquinone radical） 、单线态氧气（singlet oxygen）等 细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如 冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物 歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER） 、 铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素 （bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。通过过硫酸钾 （potassium persulfate）氧化2,2’-连氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸） （2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzthiazoline6-sulfonic acid)，diammonium salt；ABTS）产生的ABTS自由基，衡量体系中抗氧化剂捕获自由基或者消耗 抗氧化剂的能力，在分光光度仪（730nm波长）的帮助下，观察其峰值下降的变化，并与标准化抗氧化剂 水溶性生育酚Trolox对照。p1EanqFDp1EanqFD
产品内容
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免疫学名词解释
免疫学名词解释 免疫（immunity）：机体免疫系统识别“自己”和“非己”，对自身成分产生天然免疫耐受，对非己异物产生排除作用的一种生理反应。 免疫防御：防止外界病原体的入侵及清除已入侵病原体及其他有害物质。 免疫监视：随时发现和清除体内出现的“非己”成分，如肿瘤细胞、衰老凋亡细胞和病毒感染细胞。 免疫自身稳定：通过自身免疫耐受和免疫调节两种主要的机制来达到免疫系统内环境的稳定。 免疫应答：是指免疫系统识别和清除“非己”物质的整个过程 固有免疫（innate immunity）：固有免疫是生物在长期进化中逐渐形成的，是机体抵御病原体入侵的第一道防线 适应性免疫（acquired immunity）：适应性免疫应答是指体内T、B淋巴细胞接受“非己”的物质（主要指抗原）刺激后，自身活化、增殖、分化为效应细胞，产生一系列生物学效应（包括清除抗原等）的全过程。 黏膜相关淋巴组织（MALT，mucosal-associated lymphoid tissue）： 概念：亦称黏膜免疫系统，主要指呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道黏膜固有层和上皮细胞下散在的淋巴组织，以及含有生发中心的淋巴组织，如扁桃体、小肠派尔集合淋巴结及阑尾等，是发生黏膜免疫应答的主要部位。 淋巴细胞再循环：指定居在外周免疫器官的淋巴细胞由输出淋巴管经淋巴干、胸导管或右淋巴导管进入血液循环，经血液循环到达外周免疫器官后，穿越HEV，重新分布于全身淋巴器官和组织的反复循环过程。 淋巴细胞归巢（lymphocyte homing）：成熟淋巴细胞离开中枢免疫器官后，经血液循环趋向性迁移并定居在外周免疫器官或组织的特定区域，称为淋巴细胞归巢。 Ag（抗原，antigen）：是指所有能激活和诱导免疫应答的物质，通常指能被T、B淋巴细胞表面特异性抗原受体（TCR或BCR）识别及结合，激活T、B细胞增殖、分化、产生免疫应答效应产物（特异性淋巴细胞或抗体），并与效应产物结合，进而发挥适应性免疫应答效应的物质。 免疫原性（immunogenicity）：指刺激特异性免疫细胞，使之活化、增生、分化，最终产生免疫效应物质的特性。抗原被T、B细胞表面特异性抗原受体（TCR、BCR）识别及结合，诱导机体产生适应性免疫应答（活化的T/B细胞或抗体）的能力。 免疫反应性（immunoreactivity）：指抗原在体内外与其所诱导产生的相应的免疫应答效应物质（活化的T/B细胞或抗体）特异性结合的能力。 完全抗原（complete antigen）：同时具有免疫原性和免疫反应性的物质。（蛋白质、病原微生物、动物血清） 半抗原（hapten）：只有免疫反应性无免疫原性的物质，又称不完全抗原。（某些多糖、脂类、药物）。半抗原必须与蛋白质载体（carrier）结合后才具有免疫原性。半抗原赋予抗原反应性，载体赋予免疫原性。 半抗原-载体效应：指半抗原偶联载体称为TD-Ag，其载体为T细胞抗原决定基。B细胞识别半抗原又提呈给CD4+T细胞，载体称为T-B细胞之间的连接桥，使T细胞辅助B细胞产生抗体。 耐受原（tolerogen）：某些情况下，抗原也可诱导相应的淋巴细胞克隆对该抗原表现为
抗氧化剂抗氧化活性的测定方法
1.抗氧化剂是指在低浓度下能有效延缓或阻止底物氧化的物质。被氧化的底物包括蛋白质、脂质、糖和DNA。 2.初始型抗氧化剂(AH)可通过与脂质自由基L.、过氧自由基LOO.或烷氧自由基LO.反应抑制脂质氧化链反应。 L.+ AH--- LH + A. LOO.+ AH--- LOOH + A. LO.+ AH--- LOH + A. 抗氧化剂自由基A.也能与过氧自由基、烷氧自由基反应从而终止脂质氧化反应。 LOO.+ A.---LOOA LO.+ A.---LOA 次级型抗氧化剂可通过各种机理延缓脂质氧化,如螯合过渡金属、给初始型抗氧化剂补充氢、清除氧以及使活性物质失活等。 抗氧化剂的活性分为在生物体外(如食品中)的活性和在生物体内的活性。本文综述了体外测定抗氧化剂抗氧化活性的方法,不包括在生物体中测定生物活性的方法。 3.评价或表征抗氧化活性的方法为了说明在特定条件下被测物抑制底物氧化的效力或清除自由基的能力 实际测定时至少要说明在测试条件下被测物是抗氧化剂还是促氧化剂;在指定浓度下比较不同测试材料(如被测物与标准抗氧化剂或添加有被测物的测试体系与空白体系)对底物的作用。 评价或表征抗氧化活性的方法有: (1)在指定的时间测量氧化产物或官能团的浓度或吸光度值;( 2)测量反应的速率;
( 3)测量诱导期(延滞期)或氧化达到一定程度所需的时间;( 4)测量速度的积分(即动力学曲线下的面积) ; ( 5)测量被测物产生与标准抗氧化剂相当作用的浓度。4.参数 4.1诱导期( induction period) 诱导期tIND(也叫延滞期, lag period)常定义为化学反应的速度。诱导期是一个相当不确定的值,受检测方法、使用仪器的灵敏性以及一些其他因素的影响。对于脂质氧化,诱导期通常是指链增长阶段动力学曲线的切线和时间轴的交点。 4.2抑制率( percentag e of inhibition)和IC50 抑制率和IC50 (抗氧化剂提供50%抑制作用时的浓度,也可用EC50表示的)常用来表征抗氧化能力。它们不仅与被测抗氧化剂的反应性能和氧化的底物有关,而且受其他因素的影响,如脂质氧化链反应的长度和抑制速率等。此外,用IC50表征抗氧化剂 的活性与比较活性的时间点有关。只有在其他参数相同的情况下,在某一研究中测得的抑制率和IC50才可以与另一研究中测得的值进行直接比较。TEC50是指抗氧化剂提供50%抑制作用所需的时间,也常用来表征抗氧化活性 5.对测定方法的要求 测定抗氧化剂抗氧化活性的方法应满足如下要 求: ( 1)能说明测试体系中发生的反应,并能用明确的动力学图解描述;( 2)测试要有再现性; ( 3)测试效率要足够高; ( 4)方法要相对简单; ( 5)能连续检测; ( 6)应使用与体内或食品有关的活性自由基;
血清血浆全血
从网上摘录的： 做IVD临床试验遇见最多问题就是临床样本的收集，；1、血液样本的基本分类：；血液样本分为全血、血浆、血清三种；全血不加抗凝剂而自然凝固后分离出来的，不含纤维蛋；2、血浆与血清的区别：采取血浆的优点是可以立即分； 3、全血与血浆的区别：全血与血浆含水量不同，医学；如果拿到一份血液样本该如辨别它是哪种血液样本类型；告诉你一个简单的方法，看采血管帽的颜色，真空采血； 做IVD临床试验遇见最多问题就是临床样本的收集，临床样本有许多种，其中包括血液、尿液、粪便、痰液、脑脊液、宫颈脱落细胞、精液等，种类很多，但最常使用的是血液，下面蜂巢工作室（贝长号Newbeehive1986）小编为大家简单介绍下血液样本。 1、血液样本的基本分类： 血液样本分为全血、血浆、血清三种。简单表示即：血细胞＋血浆＝全血。全血加抗凝剂后离心分离出来的淡黄色液体＝血浆。 全血不加抗凝剂而自然凝固后分离出来的，不含纤维蛋白原的淡黄色液体＝血清。血浆中含有血细胞及其有形成分及多种生理物质和代谢产物。 2、血浆与血清的区别：采取血浆的优点是可以立即分离血细胞而无须待血样本自然收缩，这样可以避免凝血及样本运输过程中产生溶血。血浆与血清中丙
种转氨酶、总胆红素、尿素氮、钙、二氧化碳、肌酸激酶（CK）、葡萄糖等的含量无明显差别。而碱酶（AKP）、钠（Na+）、白蛋白（ALB）、尿酸（UA）、甘油三酯（TG）等物质，二者间有一定差异，但无临床意义。 3、全血与血浆的区别：全血与血浆含水量不同，医学教|育网|收集整理全血中水占81％，而血浆中水占93％。血中某些可溶于水的物质如葡萄糖、尿素氮等，用血浆测定比用全血测定高，尤以红细胞压积显著升高。目前临床检验用血样本，除血细胞检查、血培养等少数项目用全血外，其它生化、免疫、肿瘤标记物等检测多采用血清或血浆测定。这是由于血清或血浆中的生理成分与机体组织间液比较接近，更能真实地反应机体的生理情况，反映其病理改变也更灵敏。 如果拿到一份血液样本该如辨别它是哪种血液样本类型呢？ 告诉你一个简单的方法，看采血管帽的颜色，真空采血管一般分为以下几种颜色： 1.红色头盖管（无添加剂的干燥真空管）：采血管内壁均匀涂有防止挂壁的药剂（硅油）。它利用血液自然凝固的原理使血液凝固，等血清自然析出后，离心使用。主要用于血清生化（肝功、肾功、心肌酶、淀粉酶等）、电解质（血清钾、钠、氯、钙、磷等）、甲状腺功能、药物检测、艾滋病检测、肿瘤标志物、血清免疫学。可以理解就是装血清的管子。 2.橘红色头盖管（促凝管）：采血管内壁均匀涂有防止挂壁的硅油，同时添加了促凝剂。促凝剂能激活纤维蛋白酶，使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维
慢性阻塞性肺疾病骨骼肌萎缩机制的研究进展
四综述四 D O I :10.3760/c m a .j .i s s n .1673-436X.2014.07.013基金项目:国家自然科学基金委员会资助项目(81160006)作者单位:650500昆明医科大学第一附属医院呼吸二科 慢性阻塞性肺疾病骨骼肌萎缩机制的研究进展 郑玉燕 戴路明 ?摘要? 骨骼肌萎缩是C O P D 患者常见的全身症状,是导致C O P D 患者生活质量下降和病死率增加的主要危险因素三C O P D 骨骼肌萎缩的形成机制非常复杂,与全身炎症反应二氧化应激二缺乏锻炼等因素有关三碳酸酐酶Ⅲ可能也参与了C O P D 患者骨骼肌萎缩的发生三上述刺激因素会降低骨骼肌氧化代谢能力,使肌蛋白分解/合成过程失衡二影响骨骼肌纤维的凋亡过程及改变肌纤维类型和氧化表型,导致骨骼肌功能障碍三 ?关键词? 碳酸酐酶Ⅲ; 全身炎症反应综合征;氧化性应激;肺疾病,慢性阻塞性;肌,骨骼R e s e a r c h p r o g r e s s o fm e c h a n i s m s o f s k e l e t a lm u s c l e a t r o p h y i n c h r o n i c o b s t r u c t i v e p u l m o n a r y d i s e a s e Z h e n g Y u y a n ,D a iL u m i n g .T h eS e c o n d D e p a r t m e n to f R e s p i r a t o r y M e d i c i n e ,F i r s t H o s p i t a l ,K u n m i n g U n i v e r s i t y S c h o o l o f M e d i c i n e ,K u n m i n g 6 50500,C h i n a ?A b s t r a c t ? S k e l e t a l m u s c l e a t r o p h y i s c o mm o n s y s t e m i c s y m p t o m i n p a t i e n t s w i t h c h r o n i c o b s t r u c t i v e p u l m o n a r y d i s e a s e (C O P D ),i tw i l l b e c o m e t h em a j o r f a c t o r o f t h e d e c r e a s e o f t h e q u a l i t y o f l i f e a n d t h e i n c r e a s e o fm o r t a l i t y r a t e i nC O P D p a t i e n t s .T h em e c h a n i s mo f s k e l e t a lm u s c l e a t r o p h y i nC O P D i sv e r y c o m p l e x ,t h a ti n v o l v e ss y s t e m i ci n f l a mm a t o r y r e a c t i o n ,o x i d a t i v es t r e s s ,l a c k o fe x e r c i s e ,e t c f a c t o r s .C a r b o n i c a n h y d r a s eⅢm a y a l s o i n v o l v e i n t h i sm e c h a n i s m.T h e s e s t i m u l u sw i l l d e c r e a s e s k e l e t a l m u s c l eo x i d a t i v e m e t a b o l i s m c a p a c i t y ,m a k e a d i s b a l a n c e b e t w e e n m u s c l e p r o t e i n d e g r a d a t i o n a n d s y n t h e s i s ,i n f l u e n c e s k e l e t a lm u s c l e f i b e r a p o p t o s i s p r o c e s s a n d c h a n g e t h em u s c l e f i b e r t y p e a n d o x i d a t i o n p h e n o t y p e ,a n d f i n a l l y r e s u l t i n g i n s k e l e t a lm u s c l e a t r o p h y .?K e y w o r d s ? C a r b o n i ca n h y d r a s e Ⅲ;S y s t e m i c i n f l a mm a t o r y r e a c t i o ns y n d r o m e ;O x i d a t i v es t r e s s ;C h r o n i c o b s t r u c t i v e p u l m o n a r y d i s e a s e ;S k e l e t a lm u s c l e C O P D 是一种可以预防和治疗的常见疾病,其特征是持续存在的气流受限三气流受限呈进行性发展,伴有气道和肺对有害颗粒或气体所致慢性炎症反应的增加三急性加重和合并症影响患者整体疾病 的严重程度[1 ]三C O P D 同时也是一种涉及多器官受 损的全身疾病三全身主要症状表现为骨骼肌功能障碍二心血管疾病二骨质疏松二焦虑和抑郁及代谢综合征和糖尿病等三 C O P D 这个疾病的发展中有一种强烈的慢性气 道炎症参与,除了气道炎症,在C O P D 患者有全身炎症反应增加的证据三尽管局部炎症与全身炎症呈正相关,但是全身炎症反应的存在与F E V 1呈负相关,因此全身炎症反应在疾病进展中有重要作用[ 2] 三炎症介质在干扰骨骼肌数量及骨骼肌运动能力上起 着重要作用[ 3 ]三C O P D 患者运动后, 肌肉脂质过氧化反应增强,氧化蛋白明显增加,说明骨骼肌耐力下降与运动后 骨骼肌氧化应激有关[ 4 ]三碳酸酐酶Ⅲ(C AⅢ) 在氧化作用环境中存在,发生化学修饰,从而发挥抗氧化剂作用[ 5 ]三因此认为C AⅢ在骨骼肌中的功能是抗氧化剂, 可能是由谷胱甘肽介导的抗氧化活性[ 6] 三羰基化作用参与被氧化蛋白修饰,是导致C O P D 患者骨骼肌功能障碍的一 个重要因素[7] 三C O P D 患者股外侧肌C AⅢ发生强 烈的羰基化反应,严重C O P D 患者股四头肌的肌肉功能明显下降,且肌肉蛋白羰基化水平二抗氧化水平 与股四头肌肌肉功能呈负相关[ 8 ]三在运动受限的C O P D 患者中,约40%患者的肺 功能并没有严重受损,而表现为明显的骨骼肌萎缩三全身炎症反应二氧化应激二C AⅢ等因素参与C O P D 骨骼肌萎缩的形成三 1 全身炎症反应与骨骼肌萎缩 炎症刺激引发骨骼肌萎缩三循环中炎症介质肿瘤坏死因子α(T N F -α)二I L -6升高并通过信号转导 四 635四国际呼吸杂志2014年4月第34卷第7期 I n t JR e s p i r ,A p r i l 2014,V o l .34,N o .7