猪人工授精技术操作规程定稿.2

猪人工授精技术操作规程

猪人工授精技术是现代畜牧业的一项重要技术，是加速畜牧业发展的重要手段。为规范生猪人工授精工作，依据猪人工授精科学理论，结合泸县生产实际，制定本规程。

一、公猪调教

1、调教年龄：后备公猪7-8月龄可开始调教，有配种经验的公猪也可进行采精调教。

2、调教方法：将成年公猪的精液、包皮部分泌物或发情母猪尿液涂在假母猪上，将公猪引至假母猪训练其爬跨，每天可调教1次，但每次调教时间最好不超过15分钟。

二、采精前准备

1、器械清洗消毒：玻璃类，金属类，纱布，毛巾先煮沸后干燥（煮沸15-30分钟）；温度计采用酒精棉球消毒；稀释液采用蒸馏水并隔水煮沸10-15分钟或直接煮沸消毒；消毒过的器械使用前用蒸馏水冲洗一遍。

2、采精公猪的准备：剪去公猪包皮的长毛，将公猪体表赃物冲洗干净并擦干体表水渍。

3、采精器械的准备：烧杯置于保温提锅中备用。把公猪引至采精室，同时准备好已消毒的干纱布，用于采精时清洁公猪包皮内的污物。

4、配制精液稀释液：用蒸馏水按精宝使用说明上的比例配制好所需量的稀释液，置于水浴锅中预热至35-37℃。

5、精液质检设备的准备：调节好质检用的显微镜，开启显微镜载物台上恒温板以及预热精子密度测定仪。

6、精液分装瓶的准备：准备好分装精液所需的瓶或袋。

三、采精

1、采精地点：采精应在采精室内进行。采精室应清洁卫生，安静无干扰，地面平坦不滑。

2、采精员要求：采精员穿戴洁净工作衣帽，桶靴，胶手套，胶手套应先用75％酒精消毒、凉干，30分钟后使用。

3、采精程序：采精员一手带胶手套，另一手持保温提锅（内装已消毒的烧杯）用于收集精液，用0.1%高锰酸钾溶液清洗公猪腹部和包皮，再用温水清洗干净，避免残留药液对精子的伤害。挤出包皮内的积尿，按摩包皮，刺激其爬跨假母猪，待公猪爬跨假母猪并伸出阴茎，脱去外层手套，用手（大拇指与龟头相反方向）握住伸出的阴茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直，握紧阴茎龟头防止其旋转。待公猪射精时用滤纸过滤收集全部精液于保温提锅内的烧杯内，最初射出的少量（5mL 左右）精液不接取，直到公猪射精完毕，一般射精过程历时5-7分钟。

4、采精频率：采精频率以单位时间内获得最多的有效精子数来决定，做到定时、定点、定人。成年公猪每周采精不超过3—4次，青年公猪每周1—2次。

四、精液品质检查

1、采精量：采集精液后用量筒量取，公猪的射精量，一般为150-300毫升。

2、颜色：正常的精液是乳白色或浅灰色，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。如带有绿色、黄色、浅红色、红褐色等异常颜色的精液应废弃。

3、气味：猪精液略带腥味，如有异常气味，应废弃。

4、pH值（酸碱度）：以pH计或pH试纸测量，正常范围6.8-7.5。

5、精子活力检查：精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率，在显微镜下观察，一般按0.1-1.0的十级评分法估计，鲜精活力要求不低于0.7，检查活力时要求载玻片和盖玻片都应37℃预热。

精子活力0.1-1.0十级评分指标：

1级是指100％精子呈直线式前进运动。

0.9级是指有90％精子呈直线式前进运动。

0.8级是指有80％精子呈直线式前进运动。

0.7级是指有70％精子呈直线式前进运动。

0.6级是指有60％精子呈直线式前进运动。

0.5级是指有50％精子呈直线式前进运动。

0.4级是指有40％以下精子呈直线前进运动的精液，不能用于输精。合格的精子活力不能低于0.7级。

6、精子密度：按照猪精液密度仪的操作规程进行操作。

7、精子畸形率：畸形率是指异常精子的百分率，一般要求畸形率不超过18%，其测定可用普通显微镜，但需伊红或姬姆萨染色，公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子。畸形精子种类很多，如：巨型精子、短小精子、双头或双尾精子，顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查一次精子畸形率。

五、精液稀释

1、时间要求：精液采集后应尽快稀释，原精贮存不超过30分钟。

2、品质要求：未经品质检查或检查不合格（活力0.7以下）的精液不能稀释。

3、温度要求：稀释液与精液要求等温稀释，两者温差不超过1℃，即稀释液应加热至35-37℃，以精液温度为标准来调节稀释液的温度，绝不能反过来操作。

4、操作细节：稀释时，将稀释液沿盛精液的杯（瓶）壁缓慢加入到精液中，然后轻轻摇动或用已消毒的玻璃棒搅拌，使之混合均匀。如作高倍稀释时，应先作低倍稀释（1:1-2），待半分钟后再将余下的稀释液沿壁缓缓加入。

5、稀释倍数的确定：要求每个输精剂量含有效精子数30亿以上，输精量以80-100mL确定稀释倍数。

6、稀释镜检：稀释后要求静置片刻再作精子活力检查，如果稀释前后活力无太大变化，即可进行分装与保存；如果活力显著下降，不能使用。

7、精液混合：新鲜精液首先按1:1稀释，根据精子密度和混合精液的量记录需加入稀释液的量，将部分稀释后的精液放入水浴锅中保温，混合2头以上公猪精液置于容器，加入剩余部分稀释液（要求与精液等温），混合后再进行分装。

六、精液的分装

1、分装数量：一般为10-20mL/瓶，将精液分装在精液瓶中。

2、填写标签：在瓶上标明公猪耳号、生产日期、保存有效期、稀释剂名称和采精员姓名等。

七、精液贮存

1、温度要求：精液置于室温（25℃）1-2小时后，放入17℃恒温箱贮存，也可将精液瓶或毛巾包严直接放入17℃恒温箱内。

2、注意事项：稀释后的精液一般可保存3天，贮存过程中每隔12小时轻轻翻动一次精液瓶，防止精子沉淀而引起死亡，对贮存的精液应尽快用完。

八、精液运输

精液运输应置于保温较好的装置内，保持在16℃-18℃，恒温器中运输，防止受热、震动和碰撞。

九、输精

1、输精时间：母猪输精时机以发情后期为好，当按压母猪腰尻部，母猪表现很安定，两耳竖立或出现“静立反应”，此时是输精最佳时机。如用公猪试情，一般在母猪愿意接受公猪爬跨后的4-8小时之内输精为宜，之后每间隔8-12小时进行第2或第3次输精。

2、精液检查：从17℃恒温箱中取出精液，轻轻摇匀，用已灭菌的滴管取1滴放于恒温的载玻片上，用显微镜检查活力，精液活力≥0.7，方可使用。

3、输精管：检查一次性输精管前端的橡皮头是否松动，输精管一头猪一支。

4、输精程序

（1）输精人员清洁消毒双手。

（2）清洗母猪外阴、尾根及臀部周围，再用温水浸湿毛巾，擦干外阴部。

（3）从密封袋中取出输精管，手不应接触输精管前2/3部分，在橡皮头上涂上润滑剂。

（4）将输精管45度角向上插入母猪生殖道内，当感觉有阻力时，缓慢逆时针旋转同时向前移动，直到感觉输精管前端被锁

定（轻轻回拉不动），并且确认被子宫颈锁定。

（5）从精液贮存箱取出品质合格的精液，确认公猪耳号。

（6）缓慢颠倒摇匀精液，用剪刀剪去输精瓶瓶嘴，接到输精管上，轻轻压输精瓶，确保精液能够流出输精瓶。

（7）控制输精瓶的高低（或进入空气的量）来调节输精时间，输精时间要求5-10分钟。

（8）当输精瓶内精液输完后，放低输精瓶约15秒，观察精液是否回流到输精瓶，若有倒流，再将其输入。

（9）在防止空气进入母猪生殖道的情况下，把输精瓶后端一小段折起，放在输精瓶中，使其滞留在生殖道内5分钟以上，让输精管慢慢滑落。

（10）做好母猪圈号、耳牌号、配种时间、与配公猪耳牌号、配种方式和配种员等的相关记录记载。

泸县畜牧局生产科教站