氟罗沙星胶囊在健康人体的药动学研究及生物等效性评价

兰芬1,于秀妍2,赵春杰3*(1.第二军医大学长海医院药学部,上海 200433; 2.中国医科大学药学院,沈阳 110003; 3.沈阳药科大学药学院,沈阳 110016)

摘要:目的研究氟罗沙星胶囊在健康人体内的相对生物利用度和生物等效性。方法以18名健康志愿者为受试对象,采用同体交叉试验方法,分别单剂量口服受试制剂或参比制剂各200mg,采用H PL C法测定血浆中药物浓度。结果受试制剂和参比制剂的t max分别为(1 39 0 50)和(1 39 0 50)h,C max分别为(1 86 0 42)和(1 89 0 41) g mL-1,t1/2分别为(11 08 1 43)和(10 94 1 73)h,AU C0~48分别为(21 97 3 80)和(21 95 4 58) g h mL-1,AU C0~!分别为(23 42 3 93)和(23 39 4 74) g h mL-1。结论受试制剂与参比制剂生物等效。

关键词:氟罗沙星;药物动力学;生物利用度;高效液相色谱法

中图分类号:R927 1,R969 5 文献标识码:A 文章编号:1672 2981(2010)08 0597 04

do i:10 3969/j issn 1672 2981 2010 08 012

Pharmacokinetics and relative bioavailability of

fleroxacin capsules in healthy volunteers

L AN Fen1,Y U Xiu y an2,ZH A O Chun jie3*(1.D ep artment o f Phar macy,Chang hai H os p ital,Second M ilitar y M edical Univ er sity,S hanghai200433;2.S chool of P har macy,China M ed ical Univer sity,Sheny ang110001;3. School of Pharmacy,Sheny ang P har maceutical Univ er sity,Sheny ang110016)

Abstract:Objective T o study the phar macokinetics and bioequivalence o f flerox acin capsules in healthy vo lunteer s. Methods A sing le o ral dose of200mg t est o r contr ol pr epar ations of flero xacin capsules w as g iv en to18healthy vo l unteers in a randomized,cro ss o ver study.Ser um concentr ations o f f lero xacin wer e determined by H PL C.Results T he main pharmaco kinetic par ameters of the test and contr ol pr epar ations wer e as follo ws:t ma x(1 39 0 50)and (1 39 0 50)h,C max(1 86 0 42)and(1 89 0 41) g mL-1,t1/2(11 08 1 43)and(10 94 1 73)h, AU C0-48(21 97 3 80)and(21 95 4 58) g h mL-1,A U C0-!(23 42 3 93)and(23 39 4 74) g h mL-1.Conclusion T he fler ox acin test and co ntr ol pr epar atio ns ar e bio equivalent.

Key words:flero x acin;pharmacokinetics;bio lo gical availability;H PL C

氟罗沙星(fler ox acin)是喹诺酮类抗菌药,常用于尿道感染、呼吸道感染、皮肤和软组织感染等[1 2]。氟罗沙星口服后吸收迅速而完全,消除半衰期(t1/2b)为9 9~11 6h,有效浓度可维持24h[3]。已报道的氟罗沙星含量测定方法有荧光光度法[4]、吸附转移溶出伏安法[5]和H PL C法[6 8]等。有关氟罗沙星片的相对生物利用度及生物等效性评价也曾有文献报道[9 10],但已报道的方法存在需要选择内标物、固相萃取操作烦琐,或者药动学试验中采集样本时间过短等缺点。本研究采用更简捷快速的H P LC法,以河南天方药业股份有限公司生产的氟罗沙星胶囊(商品名:天方罗欣)为参比制剂,对天津怀仁制药有限公司研制的氟罗沙星胶囊的生物利用度和生物等效性进行研究。

1 材料1 1 仪器

高效液相色谱仪(包括LC-10A T泵、SP D-10A型紫外可见分光光度器和SiL-10A进样器,日本岛津公司); K r omail C18色谱柱(大连中汇达科学仪器有限公司);N C-2000型色谱工作站(浙江大学智达信息工程有限公司); T GL-16G高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂);DL-720A超声波清洗器(浙江象山县石浦海天电子仪器厂); Y K H-?型液体快速混合器(江西医疗器械厂)。

1 2 试剂和药品

甲醇(色谱纯,山东省禹王实业总公司化工厂);三乙胺(分析纯,沈阳化学试剂厂);水为重蒸馏水(沈阳药科大学药学院自制)。氟罗沙星对照品(天津市药品检定所,纯度99 0%)。氟罗沙星胶囊受试制剂(规格:0 1g粒-1,

作者简介:兰芬,女,药师,主要从事医药编辑,Tel:(021)65519829,134********。 *通讯作者:赵春杰,男,教授,博士生导师,主要从事药物质量控制技术研究,T el:(024)23986299,E mail:zcjjljj@sina com

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天津怀仁制药有限公司,批号:080201);氟罗沙星胶囊参比制剂(规格:0 1g 粒-1,河南天方药业股份有限公司,批号:080522180)。受试制剂和参比制剂经检验均质量合格。

2 方法和结果2 1 试验对象的选择

选择18名男性健康志愿受试者,均为沈阳药科大学在校学生,平均体重(64 7 7 7)kg ,平均年龄(22 4 0 9)岁,平均身高(172 1 4 3)cm 。试验前进行体检,所有受试者血、尿常规,肝、肾功能,心电图、胸片等检查结果正常,无心血管系统、消化系统、泌尿系统、中枢神经系统、代谢系统等病史或其他疾病,试验前2周内未服用过可能影响本试验结果的药物,入选前3个月内未参加过其他药物试验。受试前2周内及实验期间不服用其他任何药物,实验期间禁烟、酒及含咖啡因的饮料,受试者均签署知情同意书。本试验方案经中国医科大学附属第一医院伦理委员会批准。2 2 给药方案

受试者于服药前1日晚上食用清淡食品,受试当日早晨空腹,服药前定时记录心电图,随机分成2组,采用双周期交叉试验。受试者于早晨7:00以250mL 温开水送服受试制剂或参比制剂2粒(均含氟罗沙星200mg ),服药后被安排在观察室休息,采血期间不得离开,避免剧烈运动。分别于服药前和服药后0 25、0 5、0 75、1 0、2 0、4 0、6 0、8 0、12 0、24 0和48 0h 各采肘静脉血5 0mL ,所采血样置于肝素抗凝离心管中,-20#保存。服药后4h 统一进食低脂肪标准餐。

2 3 H PL C 法测定血浆中氟罗沙星浓度

2 3 1 色谱条件色谱柱:K ro mail C 18色谱柱(250mm ?4 6mm,5 m);流动相:甲醇水(30%70,含0 1%三乙胺);流速1 0mL min -1;柱温:35#;检测波长:287nm;检测器灵敏度:0 50A U Fs;进样量:20 L 。2 3 2 血浆样品处理方法精密吸取血浆样品0 5mL 置具塞离心管中,加入甲醇1mL ,涡旋30s,1 0?104r min -1(离心半径1 5cm)离心5min,分取上清液20 L 进样分析。

2 3 3 方法专属性血浆样品按&2 3 2?项下方法分离测定,所得色谱图见图1。由图1可见,氟罗沙星的出峰时间约为5 4min,空白血浆中内源性物质不干扰样品的测定。2 4 方法学验证

2 4 1 标准曲线的制备精密称取氟罗沙星对照品1 0mg,用0 1mmol L -1的盐酸溶液稀释成浓度为10 g mL -1的对照品溶液。取空白血浆10mL 5份,分别置于具塞离心管中,各加入氟罗沙星标准溶液适量,配制成浓度依次为0 063、0 252、0 819、1 575、

3 15 g mL -1的血浆样品,各取0 5mL ,按&2 3 2?项下方法处理后,进行HP LC 分析。以氟罗沙星峰面积(A )为纵座标,浓度(C )为横座标,按加权最小二乘法进行回归[11],得标准曲线方程为:A =1 257?105C +3 407?103,r =0 9991(权重1/c 2),线性范围0 063~3 15 g mL -1,最低定

量限为

图1 氟罗沙星的HPLC 谱图

Fig 1 HPLC chr om atogram of fleroxacin

A.空白血浆(blank plasm a);

B.空白血浆+氟罗沙星对照品(blan k plasma +fleroxacin reference);

C.健康志愿受试者F 给药后0 75h 采集的血浆样品(plas ma sample of volunteer F collected at 0 75h after adm instration ); 1.氟罗沙星(fleroxacin)

0 063 g mL -1。

2 4 2 回收实验 (方法回收率配制低、中、高浓度分别为0 063、0 819、

3 15 g mL -1的氟罗沙星血浆模拟样品各5份,按&2 3 2?项下方法处理,测定峰面积,将峰面积与血浆模拟样品直接进样所得峰面积比较。计算得到低、中、高浓度氟罗沙星的方法回收率分别为(99 13

4 24)%、(103 86 3 88)%和(100 69 2 81)%,R SD 分别为4 3%、3 8%、2 8%(n =5),表明方法准确度良好。)提取回收率配制低、中、高浓度分别为0 063、0 819、3 1

5 g mL -1的氟罗沙星血浆模拟样品,按&2 3 2?项下方法处理,测定峰面积,将峰面积代入标准曲线方程计算得到浓度。以测定浓度与对照品溶液直接进样测得的浓度比较,计算得到低、中、高浓度的氟罗沙星提取回收率分别为(78 85 2 03)%、(79 81 3 54)%、(7

6 52 1 75)%(n =5)。

2 4

3 精密度实验配制低、中、高浓度分别为0 063、0 819、3 15 g mL -1的氟罗沙星血浆模拟样品,按&2 3 2?项下方法处理,分别于1d 和1周内测定浓度5次,求得低、中、高浓度氟罗沙星的日内RSD 分别为3 3%、3 2%和1 1%,日间RSD 分别为5 3%、

4 1%和

599

2 4%(n =5),精密度良好。

2 4 4 样品稳定性考察本方法考察了氟罗沙星血浆样品的稳定性,血浆模拟样品在3个冻融循环中,-20#条件下放置7d,待测物血浆处理后在室温放置8h,测定其浓度RSD 均<15%。结果表明,氟罗沙星血浆样品在3个冻融循环中稳定,在-20#条件下可保持7d 稳定,待测物血浆处理后在室温放置8h 稳定。2 5 血药浓度测定结果

用药期间和用药后,所有受试者均未出现任何不良反应。测得18名健康志愿者给予参比制剂或受试制剂后的血药浓度时间曲线见图2

。

图2 18名健康志愿者单剂量口服200mg 氟罗沙星胶囊后的平均血药浓度时间曲线(n =18)

Fig 2 M ean plas ma concentration time curve of fleroxacin after a sin gle oral dose of 200mg in 18volun teers (n =18)

2 6 药动学参数

根据血药浓度时间曲线计算药动学参数,按梯形法求算血药浓度时间曲线下面积(AU C),以对数血药浓度时间曲线末端直线部分的斜率求算消除半衰期(t 1/2),峰浓度(C ma x )和达峰时间(t ma x )用实测值表示,得到主要药动学参数见表1。2 7 生物等效性评价

对受试制剂和参比制剂的主要药动学参数进行方差分析,用双单侧t 检验法和(1-2 )置信区间法进行生物等效性评价[12],结果2种制剂的C max 、t max 、A U C 0-48和A U C 0-!

在组间、个体间和周期间均无显著性差异。2种制

剂单剂量交叉口服给药的C max 、t max 、AU C 0-48和A U C 0-

的t 1、t 2值(其中1代表受试制剂,2代表参比制剂)均>t

(1-0 05),并且T (T 表示lnA U C)落在(1-2 )置信区间内,受试制剂的AU C 0-48和A U C 0-!

的90%可信限在

参比制剂的80%~125%,C ma x 在参比制剂的70%~143%[13],因此认为受试制剂与参比制剂生物等效,受试制剂的相对生物利用度为(101 23 7 19)%。3 讨论

采用HP LC 法测定氟罗沙星血药浓度并进行药动学研究,已有不少文献报道。但作者分析文献中所用的H P LC 法,认为这些方法均存在需要改进的地方。采用内标法定量分析,在筛选内标物时工作量较大,并且配制溶液和含量测定时操作相对复杂[6 7]。文献[9]对感染患者口服氟罗沙星的药物动力学进行了研究,但存在生物样本采集时间过短的缺

陷。本研究建立的H P LC 法,采用紫外检测器,以外标法定量,大大减少了含量测定时的工作量,比固相萃取 HP L C 法也更为简便[8,10]。线性范围能达到测定的需要,在所建立的色谱条件下,氟罗沙星与血浆中杂质分离良好,结果准确可靠,适用于氟罗沙星的药动学和生物利用度研究。

表1 18名健康志愿者单剂量口服200mg 氟罗沙星胶囊后的主要药动学参数(n =18,x s )

T ab 1 M ain p harm acok in etic p aram eters after an oral adm inis trati on of 200m g fleroxacin caps ule s in 18h ealth y volun teers (n =18, s )组别K e /h -1

t 1/2/h t m ax /h C ma x / g mL -1

AUC 0-48/ g h mL -1

AU C 0-!

/ g h m L -1

受试制剂0 06 0 0111 08 1 431 39 0 501 86 0 4221 97 3 8023 42 3 93参比制剂

0 06 0 01

10 94 1 73

1 39 0 50

1 89 0 41

21 95 4 58

23 39 4 74

参考文献

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(收稿日期:2010 06 12;修回日期:2010 07 12)

埃索美拉唑对氯吡格雷抑制血小板作用的影响

肖金芳1,谢刚2,张军2(1.娄底市第二人民医院,湖南娄底 417000; 2.湘潭大学化工学院,湖南湘潭 411100)

摘要:目的观察埃索美拉唑对氯吡格雷血小板抑制作用的影响。方法 151例接受经皮冠脉介入治疗的冠状动脉疾病患者,均接受氯吡格雷负荷量600mg治疗,在进入研究时,患者已经平均接受了3个月(至少5d)的氯吡格雷(75mg d-1)和阿司匹林(100mg d-1)治疗。其中76例在此基础上给予埃索美拉唑(20mg,bid)治疗,作为实验组;另外75例作为对照组。结果血小板反应指数在实验组(n=76,总体均数51%,范围48%~54%)和对照组(n=75,总体均数49%,范围43%~55%;P=0 718)的患者中几乎完全相同。埃索美拉唑(n=76; PRI=54%;聚集度42U)和对照组(n=75;PR I=49%;聚集度=41U;P=0 373)的患者之间,PR I或者二磷酸腺苷诱导的血小板聚集度没有差异。结论对于接受氯吡格雷治疗且同时需要抑酸干预的患者,需要质子泵抑制剂(PP I)治疗时,应尽可能的选择相互作用影响小的埃索美拉唑。

关键词:埃索美拉唑;氯吡格雷;血小板;血小板聚集度;血管扩张剂刺激磷蛋白

中图分类号:R961 文献标识码:A 文章编号:1672 2981(2010)08 0600 04

do i:10 3969/j issn 1672 2981 2010 08 013

Effect of esomeprazole on clopidogrel induced platelet inhibition

XIA O Jin fang1,XIE G ang2,Z HA N G Jun2(1.Second Peop le?s H os p ital of L oudi City,Loudi H unan417000;2 School of Chemical Engineer ing,X iangtan Univ er s ity,X iangtan H unan411100)

Abstract:Objective T o investig ate the effect o f esomeprazole on platelet inhibitio n induced by clo pidog r el.Methods Respo nse to clopidog rel w as assessed by t he v aso dilato r ag ent st imulated pho sphopro tein(V A SP)assay and agg re g ometr y(multiplat e analyzer)in151patients w ith co ronar y a rtery disease(CAD)undergo ing percutaneous co ronar y interv entio n(P CI).A ll patients r eceived a clopidog rel loading do se(600mg)at the star t of clopidog rel tr eatment. Patients had been t reated w ith clo pido gr el(75mg d-1)and aspir in(100mg d-1)fo r3months o n av erage(5days at least).Esomeprazole w as used in the study.Results T he mean platelet r eact ivity index(PR I,assessed by the V AS P assay)w as near ly the same in patients with eso mepr azo le(n=76;P RI=54%)o r in the contro l g ro up(n= 75;P RI=49%;P=0 718).T here w as no differ ence in the PRI or the adeno sine diphosphate induced platelet ag g reg atio n betw een patients wit h esomeprazole(n=76;PRI=54%;ag gr egation=42U),o r patients w ithout P PI(n =75;PRI=49%;ag gr egation=41U;P=0 373).Conclusion Doctors had better choose esomepr azole with a small interaction to treat patients w ho received clopidogrel therapy and acid suppression intervention when needing PPI treatment. Key words:eso mepr azo le;clopidog rel;platelet;platelet agg reg atio n;vasodilator agent stimulated phosphopro tein

临床上氯吡格雷和质子泵抑制药(P PI)的联合应用越来越普遍。目前,关于氯吡格雷合用P PI是否增加患者心脑血管不良事件的风险尚存在许多争议[1 3]。为此,美国食品药品管理局(FDA)最近公布了一份关于这两类药物潜在相互作用的安全性审查的早期报告,强调了进一步做研究的必要,来评价同时使用P PI时氯吡格雷的有效性。因此,本研究对娄底市第二人民医院及娄底市中心医院常用的P PI+++埃索美拉唑与氯吡格雷的相互作用进行初步考察,为临床提供研究数据。

1 资料与材料

1 1 研究对象

入选标准为:(血小板聚集性增高(AD P0 5 mo l

L-1诱导1~5min的血小板聚集率必须有1次>30%, 1 0 mol L-1诱导1~5min的血小板聚集率必须有1次>

作者简介:肖金芳,女,主管药师,主要从事临床药学工作,Tel:(0738)6524467,E mail:xjf87452@sina com

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