不同处理方法对金花茶组培苗不定根发生的影响

不同处理方法对金花茶组培苗不定根发生的影响
不同处理方法对金花茶组培苗不定根发生的影响

不同处理方法对金花茶组培苗不定根发生的影响

李桂娥,文萍,李志辉,蒋昌杰,罗燕英,黄连冬

*

(南宁市金花茶公园,广西南宁530022)

摘要[目的]筛选金花茶组培苗的最适生根培养条件。[方法]以金花茶组培苗为材料,研究不同激素处理、不同生根培养基、不同形

态MW 培养基对金花茶组培苗生根的影响。[结果]就促生根激素而言,500mg /L IBA 溶液浸泡处理效果较好,其生根率达82.5%,显

著优于NAA ;就基础培养基而言,MW 培养基的生根效果更好,其生根率是1/2MS 培养基的1.5倍;固体培养和滤纸桥液体培养同样都

能诱导不定根产生,且生根率相当,不定根都较发达,侧根多。[结论]将金花茶无菌苗基部浸泡于500mg /L IBA 溶液后,转接于MW 固

体培养基进行生根培养,效果最好

。关键词金花茶;组培苗;不定根发生;生根率中图分类号S603.6文献标识码A 文章编号0517-6611(2016)10-157-03Effects of Different Processing Methods on Adventitious Rooting of Camellia nitidissima Tissue Culture Plantlets

LI Gui-e ,WEN Ping ,LI Zhi-hui ,HUANG Lian-dong *et al (Nanning Golden Camellia Park ,

Nanning ,Guangxi 530022)Abstract [Objective ]The aim was to screen out the optimal rooting conditions for Camellia nitidissima tissue culture plantlets.[Method ]With C.nitidissima tissue culture plantlets as materials ,effects of different hormone treatments ,different rooting culture medium and different morphol-ogy MW medium on rooting of C.nitidissima tissue culture plantlets were studied.[Result ]The results showed that for promoting rooting hor-mone ,the effect of 500mg /L IBA solution soaking treatment is better ,its rooting rate is as high as 82.5%,significantly better than that of NAA ;in terms of basic medium ,MW rooting medium is better ,the rooting rateis nearly 1.5times than that of 1/2MS culture medium ;solid cultivation and filter paper bridge liquid cultivation can both induce adventitious roots ,and their rooting rates are nearly the same ,both of them can induce many adventitious roots and lateral roots.[Conclusion ]The rooting effect of soaking in 500mg /L IBA solution and inoculating on MW culture medium is the best.

Key words Camellia nitidissima ;Tissue culture plantlets ;Adventitious rooting ;Rooting rate

基金项目南宁市科学技术局科技攻关项目(20132309)。作者简介

李桂娥(1985-),女,广西桂林人,中级工程师,硕士,从事金花茶病理生理学和组织培养研究。

收稿日期2016-

03-1520世纪60年代初,我国广西首次发现金花茶(Camellia nitidissima ),其属山茶科山茶属金花茶组植物,是一种喜阴湿环境的常绿阔叶植物

[1]

,被誉为“茶族皇后”以及

“植物界的大熊猫”[2]

。金花茶的花朵具有金黄色蜡质,因其含有特

殊的黄色遗传基因,是培育黄色山茶新品种的重要遗传资源

[3]

,被公认为是茶科植物中最珍贵的品种之一,已被引种

到日本、澳大利亚及北美等地。近年来,金花茶因其具有较强的抗氧化能力和自由基清除能力而受到广泛关注

[4]

随着金花茶价值不断被开发利用,对金花茶苗木的需求量迅速增加,传统的育苗方法已无法满足市场需求,能在短期内实现大量繁殖的金花茶组织培养技术备受瞩目。虽然关于金花茶组培快繁已有一些研究,但对于木本植物而言,组织培养生根难度较大,无菌苗能否生根是组培快繁成功与否的关键

[5]

。笔者针对金花茶组培苗生根难的问题,探讨不

同处理方法对金花茶组培苗生根的影响,以期获得金花茶无菌苗瓶内生根的最佳培养方法,为金花茶大规模生产提供理论依据。1材料与方法1.1材试验料供试材料为笔者前期试验获得的长势健

壮、

4 6cm 高的金花茶无菌苗。1.2试验方法

1.2.1

不同促生根激素处理。诱导生根培养基以MW 培养

基为基本培养基,其主要成分:KNO 380mg /L ,Ca (NO 3)2·4H 2O 150mg /L ,MgSO 4·7H 2O 350mg /L ,NaH 2PO 4·H 2O 100

mg /L ,KCl 65mg /L ,Na 2SO 4200mg /L ,KI 0.83mg /L ,H 3BO 36.2mg /L ,MnSO 4·4H 2O 22.3mg /L ,ZnSO 4·7H 2O 8.6mg /L ,Na 2Mo 4·H 2O 0.025mg /L ,CuSO 4·5H 2O 0.025mg /L ,CoCl 2·6H 2O 0.025mg /L ,FeSO 4·7H 2O 27.8mg /L ,Na 2EDTA ·7H 2O 37.3mg /L ,维生素B 11mg /L ,维生素B 61mg /L ,烟酸1mg /L ,肌醇20mg /L ,甘氨酸2mg /L ,蔗糖20 40g /L ,琼脂6 7g /L 。

处理方法1:先将金花茶无菌苗基部浸泡于500mg /L IBA 溶液中20min ,而后转接于生根培养基中进行生根培养。生根培养基以MW 为基本培养基,添加蔗糖20g /L 和琼脂7g /L ,

pH 5.8。处理方法2:将金花茶无菌苗直接转接至含有5mg /L IBA 的诱导生根培养基中,生根培养基以MW 为基本培养基,附加5mg /L IBA ,20g /L 蔗糖,7g /L 琼脂,pH 5.8。处理方法3:将金花茶无菌苗直接转接至含有NAA 的诱导生根培养基中,生根培养基以MW 为基本培养基,分别附加2、4、8mg /L NAA ,20g /L 蔗糖,7g /L 琼脂,pH 5.8。1.2.2

不同培养基处理。将用500mg /L IBA 溶液浸泡基部

20min 的金花茶无菌苗转接于2种诱导生根培养基中进行

生根培养。2种诱导生根培养基分别以MW 和1/2MS 为基本培养基,同时添加蔗糖20g /L 和琼脂7g /L ,调整pH 为5.8。MS 培养基配方:除大量元素含量不同外,其他元素与MW 培养基相同,大量元素含量:KNO 31900mg /L ,NH 4NO 31650mg /L ,CaCl 2·2H 2O 440mg /L ,MgSO 4·7H 2O 370mg /L ,KH 2PO 4170mg /L 。1/2MS 培养基为MS 的大量元素减半,其他成分不变。1.2.3

不同形态培养基接种处理。先将金花茶无菌苗基部

浸泡于500mg /L IBA 溶液中20min ,而后转接于以下2种生根培养基中进行生根培养。固体培养基:以MW 为基本培养基,

安徽农业科学,Journal of Anhui Agri.Sci.2016,44(10):157-159责任编辑李占东责任校对况玲玲

DOI:10.13989/https://www.360docs.net/doc/b37965948.html,ki.0517-6611.2016.10.054

附加蔗糖20g /L 和琼脂7g /L ,调整pH 为5.8。滤纸桥液体:以MW 为基本培养基,附加蔗糖20g /L ,调整pH 为5.8。1.3

培养条件

以上生根培养均在植物组培室采用日光灯

照射进行光照培养,光照时间16h /d ,光照强度2000 3000lx ,温度(25?2)?。接种培养后,统计不同处理金花茶组培苗的生根率,并观察记录组培苗的生长情况。为了确保试验结果的可靠性,每个处理至少50个重复。2结果与分析

2.1

不同激素处理对金花茶组培苗生根的影响

接种培养

42d 后,观察并统计不同激素处理的金花茶组培苗生根和生

长情况,结果见表1和图1。由表1和图1可知,在5种不同处理中,浸泡500mg /L IBA 后转接于无激素的MW 培养基的无菌苗生根率最高,达82.5%,且根系呈辐射状,不定根发达,侧根较多较长,组培苗生长健壮(图1A )。其次是培养基中添加5mg /L IBA 的处理,其生根率为35.6%,不定根短小且少,无菌苗长势良好(图1B )。培养基中添加NAA 的处理效果均不佳,3种浓度的生根率均很低,基部均有愈伤组织产生,不定根短小,且均由愈伤组织上长出,组培苗长势较弱,叶子卷曲,严重的甚至脱落(图1C 、

D )。表1

不同激素处理的金花茶组培苗生根和生长情况

Table 1

The rooting and growth condition of tissue culture plantlets of Camellia nitidissima under different hormone treatments

激素处理

Hormone treatment

生根率Rooting rate ∥%

组培苗生长情况Growth situation of tissue culture plantlets

浸泡IBA 500mg /L Soaking IBA 500mg /L

82.5苗壮,叶色浓绿培养基中添加IBA 5mg /L Adding IBA 5mg /L in medium 35.6长势良好

培养基中添加NAA 2mg /L Adding NAA 2mg /L in medium 6.0基部产生愈伤组织,叶子卷曲培养基中添加NAA 4mg /L Adding NAA 4mg /L in medium 4.0基部产生愈伤组织,叶子卷曲脱落培养基中添加NAA 8mg /L Adding NAA 8mg /L in medium 2.0

基部产生大量愈伤组织,叶子卷曲脱落

注:接种体外植体50个。

Note :There are 50inoculation

explants.

注:A.无菌苗经IBA 浸泡后在MW 培养基上;B.无菌苗直接接种至添加5mg /L IBA 的MW 培养基中;C.无菌苗直接接种至添加2mg /L NAA 的MW 培养基中;D.无菌苗直接接种至添加(4或8mg /L )NAA 的MW 培养基中。

Note :A.The aseptic plantlets soaked in IBA and inoculated in MW culture ;B.The aseptic plantlets inoculated in MW medium with 5mg /L IBA ;C.

The aseptic plantlet inoculated in MW medium with 2mg /L NAA ;D.The aseptic plantlet inoculated in MW medium with NAA (4or 8mg /L ).

图1

不同激素处理金花茶组培苗生根和生长情况

Fig.1

The rooting and growth condition of tissue culture plantlets of C.nitidissima under different rooting hormone treatments

2.2不同生根培养基对金花茶组培苗生根的影响将经

5mg /L IBA 浸泡处理的金花茶无菌苗接种于不同生根培养基中,培养42d 后,观察并统计不同培养基上金花茶组培苗的生根和生长情况,结果见表2。由表2可知,MW 培养基的生根效果较好,生根率为73.6%,是1/2MS 培养基的1.5倍,且在MW 培养基上组培苗长势更好,生长健壮,并有新叶长出,不定根均呈辐射状。2.3

不同形态MW 培养基对金花茶组培苗生根的影响将经IBA 浸泡处理的金花茶无菌苗分别接种于MW 固体培养基和MW 滤纸桥液体培养基,培养90d 后,观察并统计金花茶组培苗的生根和生长情况,结果见表3和图2。由表3和图2可知,MW 培养基的形态对金花茶组培苗生根率影响较小,

2种形态的培养基中金花茶组培苗生根率均在84.0%左右,根系呈辐射状,须根多且发达,生长健壮,但在液体培养基中,组培苗的不定根略多而长,且根系更粗壮发达。

表2不同生根培养基对金花茶组培苗生根和生长的影响

Table 2The effects of different rooting medium on rooting and growth of C.nitidissima tissue culture plantlets

培养基Culture medium

生根率Rooting rate ∥%

组培苗生长情况Growth situation of tissue culture plantlets MW 73.60长势健壮,有新叶长出1/2MS

49.15

长势良好

注:接种体外植体50个。

Note :There are 50inoculation explants.

3结论与讨论

金花茶组培苗不定根发生需要外源生长素的诱导,

NAA 和IBA 是常用的生长素[6]

。不同促生根激素处理试验结果

表明,当生根处理激素采用NAA 时,生长一段时间后,在培养基与外植体的接触面上易产生愈伤组织,叶子卷曲,严重时叶子脱落;而采用IBA 浸泡处理生根效果好,且组培苗长势好。因此,对于金花茶而言,

IBA 的促生根效果显著优于8

51安徽农业科学2016年

NAA ,同时高浓度IBA 短时间浸泡处理的效果显著优于将其直接添加到培养基中。这与庄承纪等[7]

、梁盛业等

[8]

的研究

结果一致。

表3不同形态培养基对金花茶组培苗生根和生长的影响Table 3

The effects of different morphology culture medium on roo-ting and growth of C.nitidissima tissue culture plantlets

培养基形态Culture medium

生根率Rooting rate ∥%

组培苗生长情况Growth situation of tissue culture plantlets 固体培养基

Solid culture medium

83.2长势好,苗粗壮滤纸桥液体培养基

Filter paper bridge liquid culture medium

84.7长势健壮,叶翠绿

注:接种体外植体50个。

Note :There are 50inoculation

explants.

注:A.MW 固体培养基;B.MW 液体滤纸桥培养基。

Note :A.MW Solid medium ;B.Filter paper bridge liquid MW medi-um.图2不同形态MW 培养基上金花茶组培苗的生根情况Fig.2

The rooting of C.nitidissima tissue culture plantlets inoc-ulated in different morphology MW medium

就金花茶组培苗生根效果而言,

MW 培养基是较为合适的生根培养基,生根率高,幼苗长势健壮,其效果显著优于1/2MS 培养基。而MW 培养基与1/2MS 培养基的差异在于大量元素的种类和含量,说明无机盐浓度不同诱导生根的效果也不同,不定根的发生有其最适浓度。促生根激素和基础培养基相辅相成,只有在最适无机盐浓度下,促生根激素才能更好地发挥作用,促进金花茶组培苗不定根又多又好地发生

[9]

山茶科植物组织培养在固体培养基上生根较困难,在以往的生根试验中多采用滤纸桥液体生根

[10]

。该试验结果表

明,只要培养基选择适当,激素配比合适,在固体培养基上同样可以生根,根系发达,生根率与滤纸桥液体培养相当;滤纸桥液体培养的根系较粗壮,但优势不明显,且滤纸桥法操作繁琐,不利于普及推广,以采用固体培养生根为宜。参考文献

[1]韦霄,蒋运生,韦记青,等.珍稀濒危植物金花茶地理分布与生境调查研究

[J ].生态环境,2007,16(3):895-899.[2]梁盛业.金花茶

[M ].北京:中国林业出版社,1993.[3]刘林.世界珍稀观赏植物金花茶[J ].广西林业科学,1997,28(2):

94-96.[4]L J F ,CHEN R,ZHANG M H ,et al.Plant regeneration via somatic em-bryogenesis and shoot organogenesis from immature cotyledons of Camellia

nitidissima Chi [J ].J Plant Physiol ,2013,170:1202–1211.

[5]龚一富.植物组织培养实验指导

[M ].北京:科学出版社,2011.[6]沈海龙.树木组织培养微枝试管外生根育苗技术[M ].北京:中国林业

出版社,

2009.[7]庄承纪,周建葵.云南山茶茎尖培养中多芽体的形成和生根的研究

[J ].实验生物学报,1997,30(1):1-11.

[8]梁盛业,陆敏珠.中国金花茶栽培与开发利用

[M ].北京:中国林业出版社

,2005.[9]黄晓娜,叶品明,黄连冬,等.金花茶组培苗试管外生根研究[

J ].安徽农业科学,

2014(18):5751-5752.[10]袁学军,王志勇.植物组织培养[

M ].北京:北京师范大学出版社,2011.

9

5144卷10期李桂娥等不同处理方法对金花茶组培苗不定根发生的影响

组培苗的炼苗方法

试管苗的炼苗和移栽 一、目的要求 熟练掌握组培苗移栽驯化技术。 二、用品 1、材料:生根组培苗; 2、器具用品:镊子;水盆;蛭石、珍珠岩、草木灰;育苗盘;喷雾器;竹签等。 三、方法与步骤 (一)练苗将生根的组培苗从培养室取出,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。然后打开瓶口,再放置3~7天。 (二)基质灭菌将蛭石、珍珠岩和草木灰分别用聚丙烯塑料袋装好,在高压灭菌锅中灭菌20分钟,或者采用高温干热灭菌法灭菌,灭菌后冷却备用。 (三)育苗盘准备取干净的育苗盘,将蛭石和珍珠岩按1:1混合,然后倒入育苗盘中,用木板刮平。将育苗盘放入1-2cm深的水槽中,使水分浸透基质,然后取出备用。(四)试管苗脱瓶用镊子将试管苗轻轻取出,放入清水盆中,小心洗去根部琼脂,然后涝出,放入干净的小盆中。 (五)移栽用竹签在基质上打孔,将小苗栽入育苗穴盘中,轻轻覆盖、压实。待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。最后将育苗盘摆入到驯化室中,正常管理。 四、作业 记录试管苗移栽驯化步骤,统计移栽成活率。 解释: 1、闭瓶强光练苗。当生根后或根系得到基本发育后,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。 2、开瓶强光练苗。将培养容器的盖子或塞打开,在自然光下进行开瓶练苗3~7天,正午强光或南方光照较强地区要注意采取措施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。如果在开盖容器中培养不超过1周,一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。开瓶炼苗可以分阶段进行,即首先松盖(或塞)一两天,然后部分开盖一两天,最后完全揭去盖。这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。培养容器的开口大小也影响开盖的速度,开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。 3、试管苗的移栽。试管苗移栽是组织培养过程的重要环节,这个工作环节做不好,就会造成前功尽弃。试管苗从琼脂培养基中移出时要用长镊子小心取出,彻底清洗干净根部

大樱桃组培苗炼苗技术

大樱桃组培苗炼苗技术 摘要:根据大樱桃的生物学特性,通过多年大樱桃组培试管苗炼苗的试验,总结出了大樱桃组培试管苗炼苗前后的一系列管理技术。结果表明,试管苗炼苗基质的选择、试管苗温室驯化生根壮苗与开瓶炼苗这3个阶段的工作非常重要。基质选用细沙与蛭石6:4混合为宜,试管苗温室训化生根壮苗与开瓶炼苗时间以10~15d为宜,移入沙床后定期喷洒营养液和杀菌液,按照此方法进行试管苗炼苗可获得很高的成活率。 关键词:大樱桃;组培;炼苗;技术方法 试管苗的炼苗移栽是组织培养过程中重要的环节,这个环节最需要的是操心和细心,即对大棚温湿度操心,对瓶苗移栽各管理环节的细心,若稍有疏忽,则会造成大批幼苗死亡,使整个组培工作前功尽弃,造成巨大的损失。通过几年的实践,总结出了大樱桃试管苗炼苗的关键技术,从试管苗炼苗基质的选择、试管苗温室驯化生根壮苗与开瓶炼苗这3个阶段进行了详细介绍,为天水市优良大樱桃品种的工厂化生产提供了科学依据和技术支持。 1苗床及基质的选择 1.1苗床的制作 苗床在日光温室内要做成凹畦,长6m,宽2m,畦深15~20cm为宜,将畦整平拍实后,喷洒杀虫剂500倍液,在畦内将细砂、蛭石混匀后用木板刮平,并用800倍液多菌灵液将沙床洒透,在畦上搭建小拱棚,可用扁竹或圆竹搭建,高度保持在1.50m 左右,上遮盖遮阳网。 1.2栽种试管苗的基质 栽种试管苗的基质要具备透气、保湿、容易灭菌处理、不利于杂菌滋生的特点,选用珍珠岩、炉渣、蛭石、锯末、草炭土等多种基质进行试验,结果表明,最适合大樱桃组培苗生长的基质为:细沙与蛭石6:4混合,细砂为颗粒为0.10~0.20mm 的面砂。 2试管苗的移栽方法 2.1试管苗的驯化 试管苗从培养架上长好后,将试管苗小心从培养架上取下,要轻取轻放,迅速转移到日光温室中,在日光温室中将瓶苗均匀地摆在地上,温度控制在15~25℃,光照强度为3 000Lx,每天中午在瓶苗周围喷洒多次雾水,达到保湿降温的效果,移到

植物组织培养技术

三.组培苗生长环境有何特点?如何针对这些特点提高移栽成活率? 1.组培炼苗是组培过程较为重要的一个环节,是一个较为复杂的技术体系,提高炼苗成活率是决定组培成败和降低组培成本的关键。试管苗一般在高湿(100%)、弱光(3000-4000Lux)、恒温(25℃)下培养, 2.1组培苗的特点 叶片无保护组织(角质层、蜡质、表皮毛等),加之细胞间隙大,气孔开张大,因此水分散失较快,易于萎蔫。根无根毛或极少,并且有些从愈伤组织上发育的根与芽的疏导组织不相同,因此吸水能力较弱。 2.2提高移栽成活率的方法 而当炼苗移栽时,环境有了极大的改变:湿度降低、光照增强、温度升高、温差变大。具以上特点的组培苗,在此环境下,叶片失水较严重,根系吸水能力不足,即吸水量小于蒸腾水量,从而造成植物萎蔫,炼苗失败。另一种情况是,空气温度上升要比基质温度上升快,而根系的吸水能力在一定范围内与温度是成正比的,当气温升高时,加之湿度较低,叶片蒸腾急速增加,此时基质温度上不去,根系吸水能力不够,造成蒸腾大于吸水的失衡状态,从而萎蔫死亡。要想获得高的炼苗成活率就得针对以上问题,一方面提高出瓶苗的质量,提高其抗逆性,生根前的壮苗、理想的生根配方和生根培养环境的调控是关键;另一方面就得有针对组培苗特点创造一个适宜的炼苗环境,比如保证空气湿度,平衡空气和基质的温度平衡关系等。 四、生长素类分裂素类调节剂在主培中有哪些生理作用?在快速繁殖的起始,芽增殖及生根培养阶段应该如何使用? 培养中生长素一方面用于诱导愈伤组织的形成和生根,另一方面是与一定量的细胞分裂素配合使用共同诱导不定芽的分化,侧芽的萌发与生长以及某些植物胚状体的诱导。 在植物组织培养中的细胞分裂素的主要功能是促进细胞的分裂和分化,打破顶端优势,诱导芽的分化和增殖,促进组织和器官的不定芽发育。当培养基中的细胞分裂素与生长素的比例高时,诱导芽的分化,反之,诱导根的分化。 快速繁殖的起始阶段培养基中加入适量的生长素和细胞分裂素类 芽增殖阶段向培养基中加入较多的细胞分裂素类的物质促进芽的分化 生根培养阶段向培养基中加入较多的生长素类物质促进根的分化 五.利用组织培养技术生产苗木及次生代谢物的手段有哪些?培养对象分别是什么?培养新品种的手段有哪些?培养对象分别是什么?

组培苗的炼苗方法图文稿

组培苗的炼苗方法集团文件发布号:(9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-

试管苗的炼苗和移栽 一、目的要求 熟练掌握组培苗移栽驯化技术。 二、用品 1、材料:生根组培苗; 2、器具用品:镊子;水盆;蛭石、珍珠岩、草木灰;育苗盘;喷雾器;竹签等。 三、方法与步骤 (一)练苗将生根的组培苗从培养室取出,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。然后打开瓶口,再放置3~7天。 (二)基质灭菌将蛭石、珍珠岩和草木灰分别用聚丙烯塑料袋装好,在高压灭菌锅中灭菌20分钟,或者采用高温干热灭菌法灭菌,灭菌后冷却备用。 (三)育苗盘准备取干净的育苗盘,将蛭石和珍珠岩按1:1混合,然后倒入育苗盘中,用木板刮平。将育苗盘放入1-2cm深的水槽中,使水分浸透基质,然后取出备用。 (四)试管苗脱瓶用镊子将试管苗轻轻取出,放入清水盆中,小心洗去根部琼脂,然后涝出,放入干净的小盆中。 (五)移栽用竹签在基质上打孔,将小苗栽入育苗穴盘中,轻轻覆盖、压实。待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。最后将育苗盘摆入到驯化室中,正常管理。 四、作业 记录试管苗移栽驯化步骤,统计移栽成活率。 解释: 1、闭瓶强光练苗。当生根后或根系得到基本发育后,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为 50%~70%。 2、开瓶强光练苗。将培养容器的盖子或塞打开,在自然光下进行开瓶练苗3~7天,正午强光或南方光照较强地区要注意采取措施如用阴蓬

或温室避免灼伤小苗。如果在开盖容器中培养不超过1周,一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。开瓶炼苗可以分阶段进行,即首先松盖(或塞)一两天,然后部分开盖一两天,最后完全揭去盖。这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。培养容器的开口大小也影响开盖的速度,开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。 3、试管苗的移栽。试管苗移栽是组织培养过程的重要环节,这个工作环节做不好,就会造成前功尽弃。试管苗从琼脂培养基中移出时要用长镊子小心取出,彻底清洗干净根部(因为残留的蔗糖和营养会成为潜在的致病微生物的生长培养基,洗不净容易引起移栽苗烂根死亡),并且避免损坏根系。之后直接移栽或使用0.1%~0.3%的高锰酸钾或多菌灵等杀菌剂溶液中清洗,然后用清水清洗后移入苗床或盆钵,也可用水清洗后用多菌灵溶液浸泡10~30分钟后移栽,栽后淋足定根水。炼苗在塑料薄膜(或玻璃)温室内或遮阴网室内进行,使用温室或温棚时应注意设置通风口,防止浇水后高温引起萎蔫及高湿引起烂苗。生长基质应当具有适合的pH值、多空隙、良好的排水和通气性能,如一般用珍珠岩、蛭石、草炭土或腐殖土比例为1:1:0.5。也可用砂子:草炭土或腐殖土为1:1。这些基质在使用前应高压灭菌,或用至少小时烘烤来消灭其中的微生物。由于移出的试管小植株极容易感染病,所以生长环境的卫生状况和病害防治对移栽能否成功十分关键。通常对生长基质、培养容器和苗床进行消毒处理,采用新的培养容器或聚乙烯薄膜效果都很好,必要时可喷施稀的杀菌剂。 4、移栽后的管理。移出的试管苗一般在炼苗前4周遮阴要达到50%~90%,并采用喷雾洒水保持一定的湿度(85%左右),之后逐渐降低湿度和增强光照。湿度降低幅度及光照增加量依不同植物而定,总体上应促使老叶缓慢衰退并同时产生新叶。如果降低或增加过快,会使叶片褪绿和灼伤,缓苗期延长,甚至导致移栽苗死亡。但是,只要小植株能够忍受,尽可能高的光照水平是有利的。温度不应低于20℃,最好达到25~30℃。但温度湿度过高易于滋生杂菌,造成苗霉烂或根茎处腐烂,因此应对温度加以控制。遮阴和调节湿度(喷雾或塑料薄膜覆盖)也有助于控制温度。在炼苗时可适当施用大量和微量元素,如采用1/4或

组培苗的炼苗方法

组培苗的炼苗方法 Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】

试管苗的炼苗和移栽 一、目的要求 熟练掌握组培苗移栽驯化技术。 二、用品 1、材料:生根组培苗; 2、器具用品:镊子;水盆;蛭石、珍珠岩、草木灰;育苗盘;喷雾器;竹签等。 三、方法与步骤 (一)练苗将生根的组培苗从培养室取出,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。然后打开瓶口,再放置3~7天。 (二)基质灭菌将蛭石、珍珠岩和草木灰分别用聚丙烯塑料袋装好,在高压灭菌锅中灭菌20分钟,或者采用高温干热灭菌法灭菌,灭菌后冷却备用。 (三)育苗盘准备取干净的育苗盘,将蛭石和珍珠岩按1:1混合,然后倒入育苗盘中,用木板刮平。将育苗盘放入1-2cm深的水槽中,使水分浸透基质,然后取出备用。 (四)试管苗脱瓶用镊子将试管苗轻轻取出,放入清水盆中,小心洗去根部琼脂,然后涝出,放入干净的小盆中。 (五)移栽用竹签在基质上打孔,将小苗栽入育苗穴盘中,轻轻覆盖、压实。待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。最后将育苗盘摆入到驯化室中,正常管理。 四、作业 记录试管苗移栽驯化步骤,统计移栽成活率。 解释: 1、闭瓶强光练苗。当生根后或根系得到基本发育后,将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右,遮阴度宜为50%~70%。 2、开瓶强光练苗。将培养容器的盖子或塞打开,在自然光下进行开瓶练苗3~7天,正午强光或南方光照较强地区要注意采取措施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。如果在开盖容器中培养不超过1周,一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。开瓶炼苗可以分阶段进行,即首先松盖(或塞)一两天,然后部分开盖一两天,最后完全揭去盖。这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。培养容器的开口大小也影响开盖的速度,开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。 3、试管苗的移栽。试管苗移栽是组织培养过程的重要环节,这个工作环节做不好,就会造成前功尽弃。试管苗从琼脂培养基中移出时要用长镊子小心取出,彻底清洗干净根部(因为残留的蔗糖和营养会成为潜在的致病微生物的生长培养基,洗不净容易引起移栽苗烂根死亡),并且避免损坏根系。之后直接移栽或使用0.1%~0.3%的高锰酸钾或多菌灵等杀菌剂溶液中清洗,然后用清水清洗后移入苗床或盆钵,也可用水清洗后用多菌灵溶液浸泡10~30分钟后移栽,栽后淋足定

卡特兰组培苗的炼苗与移栽技术

卡特兰(Cattleya hybrida)又名卡特丽亚兰,为兰科卡特利亚兰属植物。因其花朵硕大、色泽艳丽,并具有特殊的芳香,被誉为“洋兰之王”。现今巴西、哥伦比亚、哥斯达黎加等国将卡特兰定为国花。我国栽培卡特兰的时间不长,现主要分布在广东、福建和云南,大多是合资企业生产,并有少量出口。随着人们花卉消费水平的提高,卡特兰的需求量将会大幅度上升。目前,组织培养是卡特兰商品化种苗生产的主要方式,但由于组培苗是在组培室中最适宜的条件下获得,而组培室同外界自然环境条件差异很大,如何使卡特兰组培苗尽快地适应外界的生长环境,有效提高移栽成活率,是实现卡特兰规模化生产的关键环节。近年来,南京市农科所先后引进卡特兰杂交栽培品种48个,进行新品种选育和组培快繁技术研究。目前,组培育苗技术已经获得成功,现将卡特兰组培苗的炼苗与移栽技术介绍如下。 1栽培设施 采用钢架联体温室,配置湿帘降温系统、燃油热风机、外遮阳、内保温等温控设施,一年四季可保持室内温度18~30℃、空气相对湿度50~90%和适宜的光照,并可根据需要随时调整,完全能够满足卡特兰的生长要求。 2炼苗 2.1出瓶最佳状态 组培试管苗的质量关系到移栽成活率和移栽后的生长发育状态及成品率。卡特兰组培苗生根培养后,当苗长5~6cm、具有3~5片叶、叶色正绿平展、具有2~3条根、根色白嫩时,出瓶效果最好,此时苗的生命力最旺,易于移栽成活。 2.2炼苗最佳环境 出瓶前2周将组培试管苗置于温室苗床上,保持环境温度20~25℃,光照强度5000Lx左右,进行过渡锻炼,以增强幼苗对环境的适应能力。出瓶前1周,将瓶口盖子逐步打开进行开瓶锻炼,即首先松盖(或塞)1~2d,然后部分开盖1~ 2d,最后完全揭去盖,让瓶苗逐步适应外界的光照和湿度。3移栽 3.1基质选择 卡特兰在自然环境下常年附生于岩石或树干上,根系裸露,需要较高的透气性。因此,基质选择以疏松透气为主,可选用水苔、兰花石、树皮、珍珠岩、椰丝、椰壳、陶粒、碎砖块等。一般成株选用的基质为兰花石、树皮、椰丝等比混合而成,组培苗根系抗旱能力弱,选择水苔作基质效果比较好。水苔使用前用水浸泡6h以上,然后甩干备用,脱水后以不拧出水为准。 3.2出瓶定植 用镊子将幼苗从试管中钳出,切忌用力过重造成伤口而引起病害,然后将苗放入清水中洗净根部附着的培养基,以免琼脂发霉引起烂根。用800~1000倍多菌灵或百菌清浸根10~20min,待根部表面水分稍晾干后,用已准备好的水苔将根部包裹完整,植入塑料小钵中。为防中心不稳,盆钵可放置在塑料托盘中。 3.3栽培管理 3.3.1光照。定植后的小苗要避免太阳光直射,以免灼伤叶片。2周内日间需遮光80%~90%,1个月后日间需遮光60%~70%。生产上一般采用双层遮阳网遮光,外层是一层固定的50%的遮阳网,内层是一层可活动的75%的遮阳网,便于调控光照强度。 3.3.2温度。温度是否适宜是种好卡特兰的关键,卡特兰小苗适宜的栽培温度为昼温21~29℃,夜温18~21℃。夏季温度越高,就越要配合高的湿度方能安全度夏,而高温高湿易于滋生杂菌,造成苗霉烂或根茎处腐烂,因此应对温度加以控制。遮阴、通风和调节湿度(经常喷雾或地面洒水等)都有助于控制温度。冬季是卡特兰生长的困难时期,要确保温度在15℃以上,并减少浇水。 3.3.3水分。卡特兰对空气湿度的要求相对较高,尤其是刚移栽的幼苗,一般要求相对湿度在80%以上。移栽后应立即用塑料薄膜覆盖保湿,用遮阳网遮阴避免太阳光直射。为防烂根,定植后切勿浇水,以喷雾的方式提供叶面蒸发所需水分,晴天需喷雾5~6次,并保持通风透气。1周后根据水苔干湿程度酌情浇水,正确的浇水方法是:待盆土干透后浇水,要浇透,同时确保栽培基质不积水。过多的水分会导致根系缺氧,生长不良,严重的还会引起根系腐烂。一般以4~5d浇1次较合理,基质能在3~4d内恢复干燥。水的pH值控制在5.5~7.0之间,水质中不能含有高浓度的铁离子,否则会引起植株的死亡。 3.3.4施肥。卡特兰是吸收力极强的植物,肥料施用过量或过浓,会导致烂根,引起植株生长不良。因此,刚种植的小苗不可施肥,但可施用1/2MS营养液补充营养,促进小苗生长。1个月左右根系恢复后,根据薄肥勤施的原则,每周喷施1 (下转第39页) 卡特兰组培苗的炼苗与移栽技术 张宁宁邵和平衡燕张琼 (江苏省南京市农业科学研究所,江苏南京210046) 摘要介绍了卡特兰组培苗炼苗的最佳状态、最佳环境以及卡特兰组培苗的移栽技术,包括基质选择、定植方法和栽培管理等方面内容,以期为卡特兰盆花产业化生产提供参考。 关键词卡特兰;组培苗;炼苗;移栽技术 中图分类号S682.1+9文献标识码B文章编号1007-5739(2009)10-0037-01 基金项目江苏省科技自主创新项目“卡特兰新品种选育及配套栽培技 术研究”[CX(08)130]。 作者简介张宁宁(1976-),女,江苏盐城人,助研,主要从事观赏园艺 植物的栽培繁育研究工作。 收稿日期2009-04-01

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