热激蛋白研究概况
热激蛋白研究概况X
杨国正
(华中农业大学农学系武汉430070)
热激蛋白HSP(s)(Heat Shock Proteins(s))是生物体遭受时间(几小时、几分钟、甚至几秒钟)高于其正常生长温度8~12e。(一般称为亚致死温度sub-let hal temper ature)时,体内新合成的或含量增加的一系列蛋白质。HSP具有高度的保守性,它存在于迄今为止研究过的所有生物中,如微生物、植物、动物。其种类很多,分子量以几千道尔顿到几十万道尔顿。一般高等植物中以低分子量Hsp为主,高分子量HSP主要出现在哺乳类动物中。
1HSP的研究历史及现状
对HSP的研究历史并不长。1962年,Ritossa 在研究温度对果蝇胚胎的影响时,发现唾液腺多线染色体的膨突型发生了异常变化。1974年,A lfred T issieres等,证实了多线染色体膨突型的改变,是由于非常活跃的基因转录而合成了一组蛋白质的结果。这是首次有关HSP研究的报道。
从1962年到1977年,人们一直认为蛋白质的这种选择诱导(自热激)是果蝇所特有的。然而, 1978年M ilton J.Schlesing er在鸟类和哺乳类动物的组织培养细胞、L emeaux P.G及Y amamori等在E. coli中都发现了类似的热激反应。此后,对HSP的研究普遍展开。80年代初,开始了对高等植物HSP 的研究,1982年在美国冷泉港召开了第一届HSP的国际会议。
研究HSP所用的材料涉及所有生物。80年代后期研究的内容已进入分子水平,目前,研究HSP 最活跃的仍是美国,其次是加拿大、澳大利亚、日本、法国、德国等。我国对这一课题的研究始于80年代中期,但到现在为止开展此项研究的单位仍不多。
2HSP诱导产生的规律
2.1诱导合成的动力学水稻HSP在37~40e开始启动合成,在43e合成量最大。43e处理0~ 9.5h,可诱导合成两组共18种HSP。第1组8种HSP,在热激后立即启动合成,其分子量大于50kd。第2组10种HSP,在热激处理
3.5h才启动合成,所有低分子量HSP都集中在这一组。但也有人指出,从28e到40e,水稻幼芽可产生7种HSP。40e是热激的最适温度。同样,从28e到40e,绿豆幼根可合成9种HSP,最适热激温度为40e,最适热激时间为2h。玉米HSP的诱导温度是大于或等于35e,有些HSP在41e,15min便可合成出来。但渐变升温与突变升温之间有差异,如果热激温度以3e/h的速度升高,则HSP合成的最适温度提高。
植物中主要的HSP分子量为15~25kd,这些蛋白质热激3h后,即可检测到。也有报道指出,热激处理3~5min,HSPmRNA的量增加,20min 可检测到新合成的HSP,但通常HSP诱导的持续时间是短暂的。如果让植物一直处于热激状态, HSP的合成一般只持续几个小时。玉米HSP的合成只能持续4h,随后下降。
将果蝇细胞从25e移到37e时,HSP迅速合成,且HSP20的量与胁迫的程度有关。
热激后的恢复时间,因生物种类而异。绿豆至少需10h才能恢复正常。而玉米在27e时,6~8h HSP便不存在了。
2.2HSP的合成部位、分布及特异性大麦所有叶绿体的HSP,均在胞质核糖体上合成,然后转移至叶绿体,定位于基质上。玉米HSP26由核编码,定位于质体上。植物HSP可存在于细胞膜、细胞核、细胞质和各种细胞器中。一般70kd的HSP均分布于核和胞浆中,热应激期间,这些蛋白质主要在
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中国农学通报1997年第13卷第5期
X国家自然科学基金资助项目,项目主持人李万九教授。**本文承蒙陈布圣、李万九教授、张秀如、孙湘宁副教授审阅、特此致谢!收稿日期:1996-06-21
核和核骨架中蓄积和浓缩;低分子量的HSP (15~32kd)在细胞内的分布,随生物体和细胞类型的不同而异。
玉米所有组织都合成了典型的10种HSP,但具体的反应特点依组织而异。胚根伸长区的热激反应强烈,愈成熟的部分,合成HSP 的能力愈弱。叶片(绿叶、白化;离体、活体)在25e 时,可低水平的合成低分子量HSP,40e 时,合成水平最高。与其它组织相对,正萌发的花粉不合成上述10种HSP,而代之以92kd 、56kd 两种多肽。高粱在萌发初期进行热激,不能诱导HSP 合成,萌发16h 后热激,只能限制正常蛋白质合成,萌发20~24h 后热激,才能诱导HSP 合成,大麦叶尖HSP mR -N A 水平随发育进程而增加。3 HSP 的功能
大分子量HSP (major HSP)主要起结构作用,增强细胞对逆境的耐受能力和恢复能力;小分子量HSP (small HSP)主要起调节作用。
3.1 HSP 与生物体耐热性的关系 HSP 的产生与生物体耐热性的获得紧密相关,生物体用亚致死高温预处理后,可耐受致死高温。玉米耐高温的品系比不耐高温的品系,HSP 含量高,且多一条45kd 带。具有不同耐热性潜力的玉米近系之间HSP 含量有差异,耐热潜力大的合成的HSP (15~18kd)种数较多。大豆幼苗HSP 的积累与耐热性的获得,在一定范围内显著正相关,在15~18kd HSP 的累积量达总蛋白的0.76%~0.98%时,幼苗才具有良好的耐热性。小麦的情况与此类似,耐热品种比不耐热品种多出了16、17、26kd 的HSP 。C 4植物(高粱)HSP 的种类和数量均高于C 3植物(大麦)的。此外,在棉花生育早期进行热激处理可以降低高温期棉株的蕾铃脱落率,但不同品种,其最佳热激处理时期有别。
许多生物如果蝇、海胆、青蛙、哺乳动物不能产生HSP,对热高度敏感。当可诱导产生HSP 时,生物即具备了耐热性。精子发育对高温极敏感,但果蝇的初生精母细胞,在导入HSP 70后对高温迟钝。使酵母HSP 104基因缺失突变后,将其引入酵母细胞,突变体细胞与野生细胞生长速度相似,直接在50e 高温下,死亡率相同。但在给予37e 预处理后,再经50e 处理20min,突变体细胞的死亡率是野生型的100倍,将野生型基因转移到突变体细胞可弥补后者的缺失。
但是也有实验证明,老鼠的精母细胞在HSP 70
时仍对热敏感。HSP 对酵母在37e 时的耐热性的获得并没有起决定作用。耐热的海岛棉和不耐热的陆地棉之间不存在HSP 的差异。
3.2 HSP 与蛋白质组装有关)))充当分子伴侣 长期以来,关于蛋白质折叠与装配的机理,受自组装(self asembly)学说的支配。但1987年,Ellis 提出了辅助性组装(assisted assembly )学说:活细胞内,蛋白质的折叠及其寡聚体的装配,需要其它辅助因子,如分子伴侣的参与。
分子伴侣(M olecular Chaporones )是指那些与新生肽链折叠、蛋白质的组装和转运有关的特殊的蛋白质分子。它本身并不参与蛋白质的组成。
在细胞的多肽折叠、组装、运输和解离聚集蛋白过程中,HSP 70具有识别和稳定部分折叠中间体的功能,故Hug h R.
C.
Pelham 等认为HSP
(HSP 70)是一种分子伴侣。它可作为植物分泌蛋白质前体跨膜运输时的分子伴侣,识别不同的靶多肽,进而调节其构象或装配状态。在适当的区域中,未折叠蛋白质的积累能诱导HSP 70的合成。3.3 HSP 与正常发育有关 虽然HSP (除泛素外)首先是在热激反应过程中被证实的,但有些HSP 在正常的、没有胁迫的细胞中,或在细胞周期的特殊阶段,或在不同的发育时期,也有相当高的含量,这些HSP 是组成型表达的,起着管家基因的作用,它们对植物的正常生长,发育是必需的。
在正常生长季节,低分子量HSP 在豆科植物(野生种和栽培种)的种子、种荚及花中都有积累。在小麦的休眠胚中,分离到了编码HSP 的mR NA,并且不同条件下生长成熟的胚(大田、25e 生长箱及在种子不同的发育时期给予了38e 热激处理)中,其含量没差异。
3.4 HSP 与育性转化有关 高粱不育系对热激有特殊强烈的反应。热激处理后,原来雄性不育的白色空瘪花药,转变为雄性可育的,并含有某些高度饱满的可育花粉粒的黄色花药。温度逐渐升到46~49e 时,不育系出现了特异的HSP 80,而可育的保持系没有。所以,此蛋白质与雄性不育有关。4 HSP 的调控方式
热激基因转录的调控,并不仅仅包括对环境温度的感知,因为这些基因的转录,可在40e (延长时间的情况下)关闭,在28e
(短暂热激后)继
续。所以,植物体内既有感知温度变化程度的机
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制,也有测量胁迫大小及持续时间的机制,周菊华等认为,热激诱导细胞首先产生化学信号分子)))二核昔酸磷酸,激发HSP产生,而HSP的积累导致其自身降解及HSP合成停止,从而恢复正常蛋白质的合成。而Sean M unr.等认为,热激转录因子,正常情况下以无活性的泛素化的形成存在;热激时,泛素化酶失活,从而使非泛素化的有活性的转录因子积累,进而启动热激基因的转录。依据这一观点可推知:正常情况下,泛素(Ub)与热激转录因子(HSF)在泛素化酶(UbE)的作用下,结合成无活性的泛素化热激转录因子复合体(U B-HSF)。当热激(HS)发生时,泛素化酶失活,导致HSF和U b累积,前者的累积使基因转录,合成HSP;而随着HSP的积累又导致其自身降解;后者的累积使U bE活化,从而使Ub和HSF形成复合体,使后者失活,关闭HSP的合成。所以,这一机制是自我调控的。
5其它诱导的HSP的因素
除高温之外,许多其它因素也诱导生物体产生HSP。用亚砷酸盐处理大豆幼苗,幼苗产生了HSP,且同样在45e时产生热保护。用75L mol/L ABA处理草的悬浮培养细胞后,该细胞也获得了耐热性。
此外,紫外线、缺氧、乙醇、某些重金属离子,以及葡萄糖缺乏、氨基酸类似物、钙离子载体、水分胁迫、胞外pH值的变化、病原入侵、低温处理等,均可诱导细胞产生HSP。所以,越来越多的人主张将HSP改称为应激蛋白SP(S)(Str ess Pro tein(s))。
主要参考文献
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用胰蛋白酶和糜蛋白酶救治毒蛇咬伤
糜蛋白酶治疗蛇伤比较研究(附31例报告) 胰蛋白酶治疗毒蛇咬伤,具有高效、速效、广谱等特点,目前已广泛用于临床。糜蛋白酶经研究证明对动物被蛇咬伤具有显著疗效,但临床用于蛇伤尚未见报道。本文比较两种酶在蛇伤治疗中的应用,经31例临床研究结果表明两种酶对蛇伤防治,均有显著治疗效果,从比较结果表明糜蛋白酶对腹亚科蛇伤治疗效果比胰蛋白酶好,如二者合用,对各种蛇伤疗效更加显著。该法具有高效、广谱、速效、价廉、使用方法简便等特点,值得推广应用 用胰蛋白酶和糜蛋白酶急救药盒救治毒蛇咬伤256例 目的：研究能随身携带自救、互救和局部注射治疗毒蛇咬伤的新方法——胰蛋白酶和糜蛋白酶急救药盒在救治毒蛇咬伤的应用效果。方法：使用配置有胰蛋白酶、糜蛋白酶及抗过敏、抗炎等药物的“急救药盒”。在蛇伤处阻止静脉回流，并切开挤压排毒，取胰蛋白酶２０００Ｕ～４０００Ｕ或糜蛋白酶１５ｍｇ～３０ｍｇ，用０．５％～１．０％普鲁卡因１０ｍｌ～２０ｍｌ稀释后，在蛇伤周围做环形封闭；然后行吸吮排毒。重者隔日封闭２次～３次。结果：２５６例毒蛇咬伤患者全部治愈，治愈率达１００％。结论：用胰蛋白酶和糜蛋白酶急救药盒治疗毒蛇咬伤使用方法简便，易于保存和携带。急救药盒具有高效、速效、广谱及安全可靠的特点，为毒蛇咬伤的治疗开辟了一条新途径，值得广泛推广使用 糜蛋白酶治疗毒蛇咬伤100例 <正> 笔者1983年6月～1991年10月,用糜蛋白酶治疗早期毒蛇咬伤100例,均获治愈。临床资料一、病例来源100例均为农民及农村中、小学学生。年龄6～65岁,青壮年居多。男85例,女15例。眼镜蛇咬伤者2例,银环蛇咬伤者3例,蝮蛇咬伤者95例。受伤至就医时间1～5h。二、治疗方法取上海生物化学制药厂生产的注射用糜蛋白酶10～20mg(2～4支),每支用注射用水4ml稀释,以牙痕为中心,在伤口周围作
本课题国内外研究现状分析
. Word资料●本课题国外研究现状分析 教育科研立项课题如何申报与论证博白县教育局教研室朱汝洪发布时间： 2009 年 4 月 2 日19 时24 分一、课题申报的基本步骤第一步： 阅读各级课题申报通知，明确通知的要求；第二步： 学习研究课题管理方面的文件材料；第三步： 学习研究《课题指南》，确定要申报的课题（可以直接选用《课题指南》中的课题，也可以自己确定课题）；第四步：组织课题组，认真阅读关于填表说明的文字，研究清楚课题《申请评审书》各个栏目的填写要求；第五步： 根据《申请评审书》各栏目的要求分工查找材料和论证；第六步： 填写《申请评审书》草表；第七步： 研究确定后，填写《申请评审书》正式表（一律要求打印）；第八步： 按要求复印份数；第九步： 按要求签署意见、加盖公章；第十步： 填写好《课题申报材料目录表》；第十一步： 按时将《申请评审书》《课题申报材料目录表》和评审费送交县教研室科研组转送市教科所（也可以直接送市教科报，但必须报县教研室备案）。
二、教育科研课题的选题1、课题的选题方法。 一是从上级颁发的课题指南中选定；二是结合学校的实际对课题指南中的课题作修改；三是完全从学校的实际出发确定课题。 2、课题的选题要依据的原则。 一是符合法规和政策；二是切合当地和学校实际；三是适合教师的水平和能力；四是切中当前教改热点。 3、课题名称的规表述。 ①研究，如小学生学习兴趣培养的研究。 ②实践与研究，如高中学生探究性学习的实践与研究。 ③应用研究，如合作学习理论在初中语文教学中的应用研究。 ④实验与研究，如杜郎口模式的实验与研究。 ⑤探索与研究，如农村寄宿制小学学生管理的探索与研究。 三、立项课题的论证例说（以2009 版市课题申报表的要求为准）1、课题论证的含义。 课题论证，也叫论证与设计、设计与论证，是对所要申报的课题的选题依据、研究目标、研究容、研究重点、研究难点、研究思路、研究步骤、研究条件等进行的阐述与设计。 2、课题论证的包括的容。 不同级别的课题申报表（课题申请、评审书）要求有所不同，但基本上包括两大方面的容： 一是关于本研究课题的论证，二是关于对课题实施的论证。 3、课题论证例说。
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人热休克蛋白90α
人热休克蛋白90α，即Hsp90α，是热休克蛋白家族中的重要成员。1989年国外专家首次报道了Hsp90α的基因序列，确认了该蛋白的身份。1992年外国科学家发现，Hsp90α能被肿瘤细胞分泌到细胞外，但其分泌调控机制在此后很长时间里并不清楚。[1] 热休克蛋白，英文简称HSPs，它是细胞在某些环境因素或应激条件刺激下形成的一类具有分子伴侣特性的蛋白质，广泛存在于从细菌到哺乳动物的各类细胞中。 热休克蛋白90α 清华大学发布消息，山东籍归国博士罗永章研究组，在国际上首次发现热休克蛋白90α为一个全新的肿瘤标志物，并自主研发出试剂盒，只需要采一滴血液，就可以对肿瘤进行预警和诊断。热休克蛋白90α，是一种与肿瘤相伴的物质，早在24年前，科学家就发现了这种蛋白。但这种物质与肿瘤的关系却是罗永章团队率先发现的，项目研发初期曾得到国家、山东省科技资金和平台支持。 清华大学教授罗永章：“肿瘤恶性程度越高它分泌到细胞里的量越多而且还发现在血液里面它的含量明显多于健康人基于这个发现我们就想能不能作为一个肿瘤标志物就是利用肿瘤病人血液里面含量的变化来测量一个病人是不是得了肿瘤”与其它检测手段相比，肿瘤标志物更加方便快捷，成本大大降低，但如何以这个标志物为基础，生产出临床试剂，是一项更为困难的科技攻关。罗永章团队与普罗吉生物公司合作，用四年时间，研发出了性能稳定的“定量检测试剂盒”，只需要采一滴血，就可以进行肿瘤检测、和疗效评价。[ 中国科技网北京11月17日电（记者朱丽）记者今天从清华大学获悉，该校生命学院罗永章教授研究组在国际上首次发现热休克蛋白90α（Hsp90α）为一个全新的肿瘤标志物，自主研发的Hsp90α定量检测试剂盒已通过临床试验验证，并获准进入中国和欧盟市场。这是人Hsp90α被发现24年来，全球首个将其用于临床的产品，对于提高肿瘤患者的病情监测和疗效评价水平、实现肿瘤个体化治疗具有重要推动作用。 热休克蛋白（Heat shock proteins, HSPs）是细胞在某些环境因素或应激条件刺激下形成的一类具有分子伴侣特性的蛋白质，广泛存在于从细菌到哺乳动物的各类细胞中。1974年，Tissieres 课题组首先从果蝇中分离得到了HSPs。按照蛋白的大小，HSPs分为HSP100，HSP90，HSP70，HSP60 和小分子HSP。人热休克蛋白90α（Hsp90α）是热休克蛋白家族中的重要成员。1989年，Weber课题组首次报道了人Hsp90α的全长基因序列，使该蛋白的身份得到了确认。1992年，Ferrarini课题组发现，人Hsp90α能被肿瘤细胞分泌到细胞外，但其分泌机制在过去的近二十年间却并不清楚。 Hsp90α这一全新肿瘤标志物的确认，源于罗永章课题组首次揭示癌细胞分泌Hsp90α调控机制的重大科学发现。2009年，该课题组在世界上首次报道了肿瘤细胞特异分泌Hsp90
糜蛋白酶生产技术及市场行情研究报告
糜蛋白酶生产技术及市场行情研究报告 出版日期：2013-9-5 目录 第一部分：有机化工行业概述 (1) 第一节：有机化工行业范围、基本原料和用途介绍 (1) 第二节：化工市场跌宕起伏，有机化工产品表现上佳 (2)
第三节：生物基有机化工产业正在兴起 (3) 第二部分：糜蛋白酶生产技术及市场行情研究报告目录 (5) 第三部分：研究方法、数据来源和编写资质 (9) 第一部分：有机化工行业概述 第一节：有机化工行业范围、基本原料和用途介绍 有机化工是有机化学工业的简称，又称有机合成工业。是以石油、天然气、煤等为基础原料，主要生产各种有机原料的工业。 基本有机化工的直接原料包括氢气、一氧化碳、甲烷、乙烯、乙炔、丙烯、碳四以上脂肪烃、苯、糜蛋白酶、糜蛋白酶、乙苯等。从原油、石油馏分或低碳烷烃的裂解气、炼厂气以及煤气，经过分离处理，可以制成用于不同目的的脂肪烃原料；从催化重整的重整汽油、烃类裂解的裂解汽油以及煤干馏的煤焦油中，可以分离出芳烃原料；适当的石油馏分也可直接用作某些产品的原料；由湿性天然气可以分离出甲烷以外的其他低碳烷烃；从煤气化和天然气、炼厂气、石油馏分或原油的蒸气转化或部分氧化可以制成合成气；由焦炭制得的碳化钙，或由天然气、石脑油裂解均能制得乙炔。此外，还可从农林副产品获得原料。 基本有机化工产品的品种繁多，按化学组成可分类如表。这种划分具有一定的灵活性，因很多物质含有两种以上的特定元素或两种以上的基团，它们常又按其主要特点划入某一类。 基本有机化工产品也可按所用原料分类： ①合成气系产品（见合成气）。 ②甲烷系产品（见甲烷）。 ③乙烯系产品（见乙烯）。 ④丙烯系产品（见丙烯）。 ⑤C4以上脂肪烃系产品（见碳四馏分；碳五馏分）。 ⑥乙炔系产品（见乙炔）。
国内外相关研究现状综述知识分享
1.2 国内外相关研究现状综述 1.2.1国外研究综述 1）人力资源外包 Lever觉得外包是一种管理策略，将非核心业务委托给外部专家执行，使公司能专注于本身核心业务发展，以提高竞争优势[3]。而人力资源管理外包，则是一种特殊的外包形式。greer认为，外包是由外部伙伴在重复基础上从事原来由企业内部从事的人力资源任务[4]。 对于人力资源外包，许多国外学者认为，对许多企业来说，外包浪潮的兴起并不意味着一定要实行人力资源管理外包，人力资源管理的实践性很强，往往对适合的企业才最好。 在总结外包优势的基础上，Rodriguez和Carlos指出与专业的雇佣组织签订合同来处理企业的人力资源职能是一个可变的结论，专业雇佣组织可以与他的顾客建立一个雇佣合作关系。Greet认为有五项竞争因素使企业将人力资源部分或是全部外包，分别是企业精简、快速成长或衰退、全球化、竞争增加以及企业再造，而在这些竞争因素背后的根本因素其实就是降低成本与增加人力资源的服务品质。 关于人力资源外包的风险，Quelin认为一个是企业在外包过程中对外包商的过分依赖，他们认为外包后企业就不用再过问这部分工作了，全部由外包商负责就行，很少进行沟通。另外一个是外包商的工作效率及能力不能达到既定目标，影响组织绩效的完成，把工作交给外包商后，企业失去了对这部分工作的控制，至少不能完全控制，于是当外包商的能力及效率不能达到原来期望的时候，就会影响企业的整体绩效。Bahli，Bouchaib等根据交易成本的观点，归纳了外包所具有的风险带来的不确定性有以下两点:交易的不确定性；委托的不确定性和所提供服务的不确定性。 以上研究表明国外的人力资源外包相关研究大多集中在外包决策、外包作用与外包风险上。主要关注的是企业人力资源外包在实际运用中的可行性与实践中的问题。在人力资源外包中引入信任的研究不多。国外学者对信任的研究集中在信任的作用、类型与建立上。这里只摘录其中的一部分。 2）信任 梅耶、戴维斯、斯库尔曼认为:信任是指一方在有能力监控或控制另一方的情况下，宁愿放弃这种能力而使自己处于弱点暴露、利益有可能受到对方损害的状态。Sabel认为:“相互信任就是合作各方坚信，没有一方会利用另一方的脆弱点去获取利益。”胡孔河将信任定义为：在一定情境下，一方凭借自己对对方的
蛋白质组学蛋白质组学相关技术及发展文献综述
蛋白质组学蛋白质组学相关技术及发展文献综述 蛋白质组学相关技术及发展文献综述张粒植物学211070161概念及相关内容1994年澳大利亚Macquaie大学的Wilkins和Williams等在意大利的一次科学会议上首次提出了蛋白质组proteome这个概念该英文词汇由蛋白质的“prote”和基因组的“ome”拼接而成并且最初定义为“一个基因组所表达的蛋白质”1。然而这个定义并没有考虑到蛋白质组是动态的而且产生蛋白的细胞、组织或生物体容易受它们所处环境的影响。目前认为蛋白质组是一个已知的细胞在某一特定时刻的包括所有亚型和修饰的全部蛋白质2。蛋白质组学就是从整体角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平与修饰状态了解蛋白质之间的相互作用与联系提示蛋白质的功能与细胞的活动规律。2蛋白质组学的分类蛋白质组学从其研究目标方面可分为表达蛋白质组学和结构蛋白质组学。前者主要研究细胞或组织在不同条件或状态下蛋白质的表达和功能这将有助于识别各种特异蛋白3目前蛋白质组学的研究在这方面开展的最为广泛其运用技术主要是双相凝胶电泳Two-dimensional gel electrophoresis2DE技术以及图像分析系统当对感兴趣的蛋白质进行分析时可能用到质谱。由于蛋白质发生修饰后其电泳特性将发生改变这些技术可以直接测定蛋白质的含量并有助于发现蛋白质翻译后的修饰如糖基化和磷酸化等4。结构蛋白质组学的目标是识别蛋白质的结构并研究蛋白质间的相互作用。近年来酵母双杂交系统是研究蛋白质相互作用时常用的方法同时研究者也将此方法不断改进5。有研究者最近发现在研究蛋白质相互作用时通过纯化蛋白复合物并用质谱进行识别是很有价值的4。3蛋白质组学相关技术目前蛋白质组学研究在表达蛋白质组学方面的研究最为广泛其分析通常有三个步骤第一步运用蛋白质分离技术分离样品中的蛋白质第二步应用质谱技术或N末端测序鉴定分离到的蛋白质第三步应用生物信息学技术存储、处理、比较获得的数据。3.1蛋白质分离技术这类技术主要是电泳其中应用最多的是双向电泳技术其他还有SDS-PAGE、毛细吸管电泳等。除了电泳外还有液相色谱通常使用高效液相色谱HPLC和二维液相色谱2D-LC。另外还有用于蛋白纯化、除杂的层析技术、超离技术等。 3.1.1双相凝胶电泳双相凝胶电泳two-dimensional gel elec—trophoresis2DE这是最经典、最成熟的蛋白质组分离技术产生于20世纪70年代中叶但主要的技术进步如实验的重复性、可操作性蛋白质的溶解性、特异性等是在近lO年取得的。它根据蛋白质不同的特点分两相分离蛋白质。第一相是等电聚焦IEF电泳根据蛋白质等电点的不同进行分离。蛋白质是两性分子根据其周围环境pH可以带正电荷、负电荷或静电荷为零。等电点pI是蛋白质所带静电荷为零时的pH周围pH小于其pI时蛋白质带正电荷大于其pI时蛋白质带负电荷。IEF时蛋白质处于一个pH梯度中在电场的作用下蛋白质将移向其静电荷为零的点静电荷为正的蛋白将移向负极静电荷为负的将移向正极直到到达其等电点如果蛋白质在其等电点附近扩散那么它将带上电荷重新移回等电点。这就是IEF的聚焦效应它可以在等电点附近浓集蛋白从而分离电荷差别极微的蛋白。pH梯度的形成最初是在一个细的包含两性电解质的聚丙烯酰胺凝胶管中进行。在电流的作用下两性电解质可形成一个pH梯度。但由于两性电解质形成的pH梯度不稳定、易漂移、重复性差80年代以后研究人员研制了固定pH梯度的胶条IPG。此种胶条的形成需要一些能与丙烯酰胺单体结合的分子每个含有一种酸性或碱性缓冲基团。制作时将一种含有不同酸性基团的此分子溶液和一种含有不同碱性基团的此分子溶液混合两种溶液中均含有丙烯酰胺单体和催化剂不同分子的浓度决定pH的范围。聚合时丙烯酰胺成分与双丙烯酰胺聚合形成聚丙烯酰胺凝胶。第二相是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE根据蛋白质的分子量不同进行分离。此相是在包含SDS的聚丙烯酰胺凝胶中进行。SDS是一种阴离子去污剂它能缠绕在多肽骨架上使蛋白质带负电所带电荷与蛋白质的分子量成正比在SDS聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质分子量的对数与它在胶中移动的距离基本成线性关系。SDS-PAGE装置有水平和垂直两种形式垂直装置可同时跑多块胶如Amersham pharmacia Biotech的Ettan DALT II系统可同时跑12块胶提高了操作的平行性。经过2DE
糜蛋白酶
药品名称：糜蛋白酶Chymotrypsin 药品分类：呼吸系统类→祛痰药物→促进痰液溶解的药物 药品别名：胰凝乳蛋白酶、α-糜蛋白酶、Avazyme、Chymar 药品剂型：注射用糜蛋白酶：1mg(800U)；5mg(4000U)。 药理作用：糜蛋白酶是由牛胰中分离制得的一种蛋白分解酶类药，作用与胰蛋白酶相似，能促进血凝块、脓性分泌物和坏死组织等的液化清除。本药具有肽链内切酶及脂酶的作用：可将蛋白质大分子的肽链切断，成为分子量较小的肽，或在蛋白分子肽链端上作用，使氨基酸分出；并可将某些脂类水解。通过此作用能使痰中纤维蛋白和粘蛋白等水解为多肽或氨基酸，使粘稠痰液液化，便于咳出，对脓性或非脓性痰都有效。此外，本药尚能松弛睫状韧带及溶解眼内某些组织的蛋白结构。糜蛋白酶还有促进抗生索、化疗药物向病灶渗透的作用。 药动学：本药和胰蛋白酶都是强力蛋白水解酶，仅水解部位有差异。蛇毒神经毒含碱性氨基酸，易被本药和胰蛋白酶分解为无毒蛋白质，从而阻断毒素进入血流产生中毒作用。本药对蝮亚科蛇伤疗效优于胰蛋白酶，两种酶制剂联合应用效果更佳。 适应症：1.用于眼科于术松弛睫状韧带、减轻创伤性虹膜睫状体炎；也可用于白内障摘除，使晶体易于移去。2.用于创伤或手术后伤口愈合、抗炎及防止局部水肿、积血、扭伤血肿、乳房手术后浮肿、中耳炎、鼻炎等。3.用于慢性支气管炎、支气管扩张或肺脓肿的治疗，可使脓性和非脓性痰液均可液化，易于咳出。4.毒蛇咬伤的处理。 禁忌症：1.20岁以下的患者，由于晶体囊膜玻璃体韧带相连牢固，眼球较小，巩膜弹性强可致玻璃体脱出，或玻璃体液不固定的创伤性白内障病人，因可导致玻璃体液丧失，故均禁用。 2.眼压高或伴有角膜变性的白内障患者，以及玻璃体有液化倾向者均禁用。 3.严重肝、肾疾病、凝血功能异常及正在应用抗凝药者禁用。 注意事项：1.本药肌内注射前需做过敏试验，并禁止静脉注射。2.如引起过敏反应，应立即停止使用，并用抗组胺类药物治疗。3.本药对视网膜有较强的毒性，由于可造成晶体损坏，应用时勿使药液透入玻璃体。4.本药遇血液迅速失活，因此在用药部位不得有末凝固血液。 5.本药在固体状态时比较稳定，但其溶液不稳定，室温放置9天可损失50%的活性，故应临用前配制。 6.对本药引起的青光眼症状，于术后滴用β-受体阻滞药(如噻吗洛尔)或口服碳酸酐酶抑制药(如乙酰唑胺)，可能会缓解。 7.由于超声雾化后糜蛋白酶效价下降明显，因此，糜蛋白酶超声雾化吸入时间宜控制在5min内。 不良反应：1.眼：眼科局部用药一般不会引起全身不良反应，但可引起短期眼压增高，导致眼痛、眼色素膜炎和角膜水肿，这种青光眼症状可持续1周后消退，还可导致角膜线状混浊、玻璃体疝、虹膜色素脱落、葡萄膜炎及创口开裂或延迟愈合等。2.血液系统：糜蛋白酶可造成凝血功能障碍。3.其他：(1)肌内注射偶可致过敏性休克。(2)糜蛋白酶可引起组胺释放，导致局部注射部位疼痛、肿胀。 用法用量：[该用法是参考最新药典提供，临床中具体药物用法用量请参考药物说明书] 成人常用量1.肌内注射：通常一次4000U，用前将糜蛋白酶以氯化钠注射液5ml溶解。2.
热休克蛋白70
本科生毕业论文（设计）册 学院生命科学院 专业生物科学 班级（届） 2015届 学生张川 指导教师李东明 任务书编号 2015届103
河北师范大学本科毕业论文（设计）任务书 编号： 2015届103 论文（设计）题目：急性低氧刺激下树麻雀HSP70基因的适应性变化 学院：生命科学院专业：生物科学班级（届）： 2015届 学生姓名：张川学号： 2011012028 指导教师：李东明职称：副教授 1、论文（设计）研究目标及主要任务 研究目标：在急性低氧刺激下，树麻雀肝脏组织中HSP70基因水平的变化。 主要任务：分析低氧刺激对树麻雀HSP70基因水平的影响。 2、论文（设计）的主要内容 热休克蛋白是一种高度保守的应激蛋白，在受到外界刺激时，机体的HSP70会有一定变化，以保护组织器官等。本研究以树麻雀为研究对象，研究其在低氧刺激下肝脏组织中HSP70基因的变化。 3、论文（设计）的基础条件及研究路线 基础条件：本实验室主要研究动物对环境的适应性，具备研究树麻雀HSP70的基础条件，实验室仪器设备齐全，并具有野外取材的条件和能力。 研究路线：将树麻雀放入模拟各种海拔高度低氧的环境生活一定时间，然后提取其肝脏组织，对肝脏组织中HSP70基因的mRNA表达量进行分析对比。 4、主要参考文献 [ 1 ] Welch WJ. Mammalian stress response: cell physiology, struc2 ture / function of stress p roteins, and imp lications for medicine and disease[ J ]. Physiol Rev, 1992, 72 (4) : 1063 - 1081. [ 2 ] Suzuki k, Sawa Y, Kagisaki k, et a l. Reduction in myocardial apop tosis associated with overexp ression of heat shock p rotein 70 [ J ]. Basic Res Cardiol, 2000, 95 (5) : 397 - 403. [ 3 ] 任宝波,王玉艳,王纯净,等. HSP70 家族的分类及基因结构与功能[J ]. 动物医学进展,2005 , (26) :98 - 101. [ 4 ] Ishii T ,VdonoH ,Yamano T ,et al. Isolation of MHC class I - restricted tumor antien peptide and its precursors asso2 ciated with heat shock proteins HSP70 , HSP90 and gp96 [J ]. Immunol ,1999 ,162 :1303 - 1309. [ 5 ] 陈劲松. 热休克蛋白的分子遗传学研究进展[J ] . 国外医学一遗传学分,2001 ,24 (3) 128 - 132. 指导教师：年月日 教研室主任：年月日
高级生化-蛋白质综述
摘要：蛋白质组学是后基因组时代的新兴学科，是当今生命科学领域 新的增长点，本文就蛋白质组学中的分离和鉴定技术包括双向凝胶电泳、色谱和质谱等技术近几年的发展状况及最新研究进展进行综述。关键词：蛋白质组学；双向凝胶电泳；色谱；质谱；生物信息学 Abstract：Proteomics which is the new discipline in the time of the post-genomics develops rapidly in the life science．The present paper has documented the current situation and new development of the techniques of separation and identification in this area，including 2·dimensional gel- electro·phoresis，chromatography an d mass spectrometry． Key words：Proteomics；2-Dimensional gel electrophoresis；Chromatography；Mass spectrometry；Bioinformatics 1、概念及相关内容 随着人类基因组测序计划的完成,生命科学的重心开始转移到对基因的功能性产物即蛋白质的研究,并产生了一门新的学科———蛋白质组学(proteomics) 。“蛋白质组(proteome) ”一词是1995 年由澳大利亚科学家Marc Wilkins 和Keith Wil2liams[ 1 ] 最早提出的,是由蛋白质(protein) 和基因组(genome) 派生而来。被定义为“一个细胞或组织所表达的所有蛋白质产物或某一特定时期内所表达的 所有蛋白质产物”。蛋白质组研究与以往的蛋白质化学研究不同,它着重于全面性和整体性,研究的对象不是单一或少数的蛋白质,而是 从细胞整体水平上对蛋白质的结构和功能进行研究,包括蛋白质在细胞内的表达水平、位置、功能和调节以及翻译后的修饰、剪接等加工信息。蛋白质组研究使人们对生命系统与活动分子机制的认识由间接
减肥药的现状及研究进展
减肥药的现状及研究进展 论文导读：肥胖症是一种常见的代谢症候群。减肥药物现逐渐成为肥胖治疗的一种较好的辅助手段。肥胖，减肥药的现状及研究进展。 关键词：肥胖，减肥药 肥胖症是一种常见的代谢症候群。毕业论文，肥胖。当人体进食热量多于消耗热量时，多余热量以脂肪形式储存于体内，其量超过正常生理需要量，且达一定值时遂演变为肥胖症。毕业论文，肥胖。因体脂增加使体重超过标准体重20%或体重指数大于27称为肥胖症。如无明显病因可寻者称单纯性肥胖症；具有明确病因者称为继发性肥胖症。单纯性肥胖是肥胖症中最常见的一种，是多种严重危害健康疾病（如糖尿病、冠状动脉粥样硬化心脏病、脑血管疾病、高血压、高血脂症等）的危险因子，在其发病中起着或为病因、或为诱因、或为加重因素、或兼而有之的作用。肥胖已成为发达国家人口发病和死亡的一个主要原因。因此，肥胖症的防治有着十分重要的临床意义【1】。 肥胖的治疗应提倡综合疗法，即饮食控制，运动疗法，行为疗法及药物治疗等多方式联合。肥胖的药物治疗是一个有争议的问题，随着对肥胖发病机制的认识深入，减肥药物现逐渐成为肥胖治疗的一种较好的辅助手段。目前临床应用的减肥药按作用机制可分为三类：①
食欲抑制药；②增加能量消耗的药物；③抑制肠道消化吸收的药物。【2】现分类介绍减肥药物及最新研究进展。 1．食欲抑制剂食欲由下丘脑腹内侧的饱中枢与下丘脑外侧区的摄食中枢调节。研究证明，中枢增强或抑制调节摄食功能主要是通过儿茶酚胺诶神经递质如去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺等的变化。毕业论文，肥胖。食欲抑制药大多是通过影响这些递质在下丘脑的合成、释放与再摄取，以调节食欲，改变摄食行为，从而影响体重【3】。 西布曲明是一种去甲肾上腺素和5一羟色胺(5-HT)重摄取抑制剂．1997年获美国FDA批准，主要通过产生饱胀感和生热作用治疗肥胖症。研究报告显示，服用西布曲明半年内可观察到体重减轻效果，服用1年可减轻体重超过4kg，长期服用的减肥作用可以保持至少2年【4】。 芬氟拉明和右芬氟拉明都是法国施维雅公司的产品，分别于40年前和20年前上市，在美国的上市时间分别为1973年与1976年。此类药物的不良反应包括恶心、腹泻、嗜睡、口干、头痛、头晕、旋转性眼震、下颌震颤等。长期用药可引起心脏瓣膜损害，主要表现为轻至中度二尖瓣或主动脉瓣返流；并能引起肺动脉高压和诱发高血压危象[5]。因此，在1997年FDA宣布禁用芬氟拉明和右芬氟拉明。 2．增加能量消耗的药物 目前，还没有专门用于提高产热作用(基础代谢率)的药物。不过，一些药物可能具有这么面。麻黄碱可通过直接兴奋肾上腺素β受体，促进机体产热，也可通过促使中枢神经末梢释放去甲肾上腺素而产生
毕业论文指之国内外研究现状的写法与范文
毕业论文指之国内外研究现状的写法与范文 毕业论文指之“国内外研究现状”的撰写一、写国内外研究现状的意义通 过写国内外研究现状，考察学生对自己课题目前研究范围和深度的理解与把握， 间接考察学生是否阅读了一定的参考文献。这不仅是毕业论文撰写不可缺少的组 成部分，而而且是为了让学生了解相关领域理论研究前沿，从而开拓思路，在他 人成果的基础上展开更加深入的研究，避免不必要的重复劳动或避免研究重复。二、国内外研究现状写法在撰写之前，要先把从网络上和图书馆收集和阅读过的与所写毕业论文选题有关的专著和论文中的主要观点归类整理，找出课题的研究 开始、发展和现在研究的主要方向，并从中选择最具有代表性的作者。 1. 在写 毕业论文时，简写课题的研究开始、发展和现在研究的主要方向，最重要的是对 一些现行的研究主要观点进行概要阐述，并指明具有代表性的作者和其发表观点 的年份。 2. 再者简单撰写国内外研究现状评述研究的不足之处，可分技术不足和研究不足。即还有哪方面没有涉及，是否有研究空白；或者研究不深入；还有哪些理论或技术问题没有解决；或者在研究方法上还有什么缺陷等等。 3. 最后简 略介绍发展趋势。三、写国内外研究现状应注意的问题 1.注意写的是把研究现状，而不是写课题物本身现状，重要体现研究。例如，写算法的可视化研究现状，应 该写有哪些专著或论文、哪位作者、有什么观点等；而不是大量算法的可视化研 究何时产生、有哪些交易品种、如何演变，此只需一笔带过，也是对研究的一种 把握。 2.要写最新研究成果和历史意义重大的研究成功，主要写最新成果。 3．不要写得太少或写的太多。如果写的少，说明你查阅的材料少；如果太多则说明你没有归纳，只是机械的罗列。一般2-3 页A4 纸即可。 4.如果没有与毕业论 文选题直接相关的文献，就选择一些与毕业论文选题比 较靠近的内容来写。多从网络上找资料，学习和练习。 “国内外研究现状”的撰写范文在计算机图形学领域，三维可视化是一个重 要的研究方向，许多研究人员己经进行了大量卓有成效的研究，并有许多成熟的 技术己经应用到实际中，出现了大量的优秀的可视化软件产品，如3DMAX、MAYA、EVS、 AVS 等。这些产品主要应用于游戏、电影动画、工业设计以及其它专业领 域的研究，而与GIS 联系较少。可视化理论与技术用于地图学与GIS 始于90 年 代初。1993 年，国际地图学协会在德国科隆召开的第16 届学术讨论会上宣告成 立可视化委员会,其主要任务是定期交流可视化技术在地图学领域中的发展状况 和研究热点，并加强与计算机领域的协作。 1996 年该委员会与美国计算机协会图形学专业组进行了跨学科的协作，制订了一项称为“CartoProiect"的行动计划，旨在探索计算机图形学领域的理论和技术如何有效地应用于空间数据可视化中， 同时也探讨怎样从地图学的观点和方法来促进计算机图形学的发展。1998 年 2 月由B．H．Mccormick 等根据美国国家科学基金会召开的“科学计算可视化研讨
糜蛋白酶
糜蛋白酶在临床中的应用 糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶) 【外文名】Chymotrypsin ,Alpha-CHYMAR, Catarasa, Chymlase, Chymozym, Impral 【别名】糜蛋白酶;胰凝乳蛋白酶,α-糜蛋白酶,甲-糜蛋白酶【作用与用途】本品为胰腺分泌的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质，作用、用途与胰蛋白酶相似，比胰蛋白酶分解能力强、毒性低、不良反应小。用于创伤或手术后伤口愈合、抗炎及防止局部水肿、积血、扭伤血肿、乳房手术后浮肿、中耳炎及鼻炎等。可用于白内障摘除。【剂量与用法】白内障摘除术，取本品以生理盐水配成1/5000的溶液，由瞳孔注入后房，经2～3分钟，当晶体浮动后，再以生理盐水冲洗，即可取出晶状体。肌注，5mg/次，1～2次/日。湿敷或喷雾，5mg/次。气溶疗法，0.2mg～0.3mg/次，3～4次/日。气管滴入，以0.5mg/ml溶液适量滴入。可使粘稠的痰液稀化，便于咳出，对脓性和非脓性痰液均有效祛痰:肌内：4000u/次，以0.9%NS5ml溶解。喷雾吸入：4000u/次，浓度：400u/ml. 【副作用】1 常见有发热、头重、恶心、呕吐、皮疹、胃液酸度低下等。2 肌注局部常有疼痛和硬结。3 大量非口服给药可发生过敏反应。4 有时可引起凝血时间延长和纤维蛋白原减少。5 肌注忌用于严重肝肾疾患、出血性溃疡及血凝功能异常者。6 不到20岁的眼病或玻璃体液不固定的创伤性白内障病人忌用。用前需做过敏试验。附：糜蛋白酶含于胰液中，受胰蛋白酶激活，可水解芳香族氨基酸，如苯丙氨酸，酪氨酸，色氨酸。 1 糜蛋白酶的治疗腹部切口脂肪液化 糜蛋白酶是从牛胰脏提取的生化制剂,为蛋白分解酶,能迅速分解坏死组织使其变得稀薄,利于引流排除,加速创面净化,从而有利肉芽组织生成，先用生理盐水冲洗裂口两遍,再用无菌纱布行裂口清创,吸净渗液,若表皮未裂开,可不打开,而是将创口内渗液挤出,然后将α糜蛋白酶粉2ｍｇ均匀洒于创面,最后用无菌蝶形胶布固定创口,消灭死腔,3、5天后换药。此方法治疗腹部切口脂肪液化,方法简单,疗效满意,值得推广 2糜蛋白酶治疗分泌性中耳炎 分泌性中耳炎是中耳常见病,它是一种以传导性耳聋及鼓室积液为主要特征的中耳非化脓性炎症性疾病。分泌性中耳炎的病因至今尚不完全明了, 但目前临床认为其发病与咽鼓管功能障碍、感染因素和免疫变态反应有关, 病理特点为局部受累器官轻微炎症细胞浸润、肉芽组织增生及瘢痕生成。地塞米松有抗炎、抗过敏、抗自身免疫性疾病作用, α- 糜蛋白酶能清洁软化创面,溶解脓液和坏死组织, 促进肉芽组织新生,所以能溶解和清除鼓室含有多量蛋白质的废物,降低液体黏稠度,使局部积液加快扩散,有利于鼓室引流和吸收,改善病人听力,达到治愈目的。因此, α- 糜蛋白酶与地塞米松的联合应用可提高分泌性中耳炎的痊愈率和总有效率。 具体治疗方法:中耳抽液后, 立即注入4 000 U α- 糜蛋白酶和5 mg 地塞米松混合液, 每周1 次; 同时每日口服诺氟沙星2.0 g, 连续1 wk;辅以1%麻黄素滴鼻。 3糜蛋白酶治疗鼻窦炎 窦口鼻道复合体的引流障碍是发生鼻窦炎的主要原因。鼻窦炎患者的窦口鼻道复合体中可见充血、脓肿和脓性分泌物,故此处脓性分泌物的稀释和引流是治疗的关键。在原用血管收缩和抗炎药物疗法的基础上,加用α- 糜蛋白酶,临床疗效明显提高。 具体治疗方法:8 mL 呋麻滴鼻液(呋喃西林-麻黄素) 中加入4 000 U α- 糜蛋白酶,每次每鼻腔1 滴,每天3次。 4 糜蛋白酶治疗慢性喉炎、咽炎 慢性喉炎是常见病、多发病, 主要是指喉部黏膜因一般性病菌感染或用声不当引起的慢性炎症, 临床表现主要为声音嘶哑、喉部不适感、喉部分泌物增加、讲话乏力等,尤以用嗓较多职业者的发病率为高。 慢性喉炎治疗一般使用抗生素和激素(口服或雾化吸入), 但疗效欠佳, 长期应用副作用也
丝氨酸蛋白酶的相关研究
丝氨酸蛋白酶的相关研究 摘要：本文概述了丝氨酸蛋白酶的酶学基础，反应机制，该酶抑制剂的设计及其应用。丝氨酸蛋白酶是一个蛋白酶家族，它们的作用是断裂大分子蛋白质中的肽键，使之成为小分子蛋白质。其激活是通过活性中心一组氨基酸残基变化实现的，它们之中一定有一个是丝氨酸（其名字的由来）。在哺乳类动物里面，丝氨酸蛋白酶扮演着很重要的角色，特别是在消化，凝血和补体系统方面。正是由于该酶的特殊性质，使其在众多领域都有所应用。 关键字：丝氨酸蛋白酶；酶学基础；反应机制；应用 Abstract：This article provides an overview of the serine protease enzyme, reaction mechanism, the design and application of enzyme inhibitors. Serine protease is a protease family, their roles are to break large protein molecules in the peptide bond, to become small molecular protein. Its activation is through the active center of a group of amino acid residues change, they must have a serine (the origin of the name). In mammal animal, serine proteases play a very important role, especially in the digestion, Coagulation and complement systems. Because of the special nature of the enzyme, and it has been applied in many fields. Keywords: Serine protease; fundamentals of enzymology; reaction mechanism; application
国内外自主学习研究现状综述
国内外自主学习研究现状综述 自主学习的思想源远流长。继古希腊的苏格拉底、柏拉图、亚里士多德之后，卢梭、第斯多惠、杜威等都是自主学习思想的倡导者。从20世纪50年代开始，自主学习成为教育心理学研究的重要课题。20世纪80年代末出版的《自主学习和学习：理论、研究和实践》一书中也系统总结了维果斯基学派、操作主义、现象学派、社会学派、意志理论、信息加工心理学等不同角度对自主学习做过的一些探讨。但是，由于研究者的理论立场和视角不同，对于什么是自主学习至今尚未形成统一的看法。目前，国外使用的与自主学习有关的术语也很多，如自我调节的学习（self—regulated learning）、自我管理的学习（self—managed learning）、主动学习（active—learning）、自律学习（autonous learning）、自我计划学习 （self—planned learning）、自我监控学习 （self—monitored learning）、自我定向学习（self—directed learning）、自我教育（self—education）、自我指导（self—instruction）等。在国外，自主学习思想一直受到心理学和教育学的共同关注。但是，20世纪中叶以后，由于信息加工理论心理学迅速发展，维果斯基的语言自我指导理论在西方得到了认可，人本主义心理学的开始兴起，心理学领域的这些发展从不同角度推动了对自主学习的理论阐述或者实践研究。
以斯金那纳为代表的操作主义理论认为自主学习本质上是一种操作性行为，它是基于外部强化或自我强化而做出的一种应答性反应。自主学习能力的形成，本质上是个体的学习调控反应与邻近的强化物建立联系。它包含四个子过程：自我监控、自我指导、自我评价和自我强化。以及由此开发出了自我记录技术、自我指导技术、自我强化技术。该理论最强调外部环境对自主学习的制约作用。 以班杜拉为代表的社会认知学派从个人、行为和环境交互作用的角度来理解学生的自主学习问题。认为学生的自主学习行为主要由个人内部的本能、需要、驱力、特质等决定，不主要由外在的环境因素来决定，而是受到这两者的交互作用——主体社会认知的影响制约，这种影响并决定行为的社会认知有两种：即结果期望和自我效能感。结果期望是指人关于自己的某一行为会导致他所期望的某种主观推测或判断。自我效能感是指人关于自己是否有能力胜任某一行为的主观判断或推测，它将影响行为的结果因素转化为先行因素，对行为发作用。从理论分析，任何学生的学习行为实际上受学生的结果期望和自我效能感的双重制 约和调节。这一理论十分重视学生的社会交往和社会认知在其自主学习发展中的作用。它认为，学生与教师、父母、其他学生的积极交往和反馈会极大地促进自主学习的发展。此理论把自主学习分成自我观察、自我判断、自我反应三个子过程，强调自我效能和榜样示范在自主学习中的作用。 自由意志理论认为自主学习实际上也是一种意志控制过程，意志成分控制着人的学习行为，使学习者克服困难、坚持学习。高度的自