增补本药典 沉降菌监测实验记录
...............................制药厂
沉降菌监测实验记录
检验人：复核人：
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沉降菌监测实验记录
检验人：复核人：
沉降观测记录表完整版本
建筑物沉降观测测量记录 编号：DLMJTC-001工程名称美景天城基坑支护沉降观测水准点编号M1 - M16 水准点所在位置4号家属楼水准点高程 观测日期观测性质 工程地点辽源市东辽县 测量仪器仪器名称：水准仪 沉降观测结果 观 测 点 编 号 观测 点相 对标 高(m) 上午下午 实测标高 (m) 沉降量 (mm) 实测标高 (m) 沉降量 (mm) 本次累计本次累计M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10 M11 M12 M13 M14 M15 M16 工程进度 状态 技术部 施测人记录人
建筑物沉降观测测量记录 检验（建）表5.1.7－2 共6页第1页工程名称银利财富广场8#楼水准点编号 水准点 所在位置 永久水准点水准点高程22.53M 观测起止 日期 2013.2.15始观测性质见证观测工程地点安徽省含山县铜闸镇银利财富广场 测量仪器仪器名称：水准仪 沉降观测结果 观测 点编 号 观测点相对标 高(m) 第一次 2013年2月28日 标高 (m) 沉降量 (mm) 本次累计M1 -2.2 -2.2 0 0 M2 -2.25 -2.251 1 1 M3 -2.1 -2.1 0 0 M4-2.3 -2.301 1 1 M5-2.32 -2.32 0 0 M6-2.23 -2.23 0 0 观测点布置简图 - 工程进度 状态 架空层层顶梁板 施工单位项目技术负责人施测人监理（建 设）单位 监理工程师（建设单位 项目专业技术负责人）
建筑物沉降观测测量记录 检验（建）表5.1.7－2 共6页第2页工程名称银利财富广场8#楼水准点编号 水准点 所在位置 永久水准点水准点高程22.53M 观测起止 日期 2013.2.15始观测性质见证观测工程地点安徽省含山县铜闸镇银利财富广场 测量仪器仪器名称：水准仪 沉降观测结果 观测 点编 号 观测点 相对标 高(m) 第二次 2013年3月30日 标高 (m) 沉降量 (mm) 本次累计M1 -2.2 -2.201 1 1 M2 -2.25 -2.252 1 2 M3 -2.1 -2.101 1 1 M4-2.3 -2.302 1 2 M5-2.32 -2.322 2 2 M6-2.23 -2.231 1 1 观测点布置简图 - 工程进度 状态 一层顶梁板 施工单位项目技术负责人施测人监理（建 设）单位 监理工程师（建设单位 项目专业技术负责人）
洁净区沉降菌、浮游菌检测标准操作规程
1.目的：建立沉降菌、浮游菌检测的标准操作程序，用以规范检测操作。 2.范围：适用于公司内部生产洁净区内的沉降菌、浮游菌检测工作 3.责任：中心检验室主任、检验员对本规程的执行负责。 4.内容： 浮游菌检测 4.1.1 检测前的准备 4.1.1.1按照药典规定制作平皿培养基。 4.1.1.2领出检测仪器，去掉防尘护罩。 4.1.1.3先用喷洒方法对仪器及采样管进行消毒，无法喷洒的地方应用擦拭或 浸泡办法进行消毒，消毒后置放十分钟使仪器基本干燥。 4.1.1.4将采样器放在采样工作台面上，拧下采样盖，使整个缝隙完全暴露在 空气中，便于直接采样。 4.1.1.5当在较高位置取样时，可把仪器采样盖拧紧，插上采样塑料管，把管 子延伸到所要采样的空间。 4.1.1.6打开采样器透明外罩，迅速将准备好的平皿放入采样托盘内，拿去平 皿上盖，立即拧上透明外罩密封。 4.1.1.7拧松外罩顶部装有指针的螺母，让指针自然下落或使指针底部刚接触 到培养基为止。 4.1.1.8调节狭缝螺母，使狭缝上升直至到头，再反方向调节使狭缝面下降， 将齐狭缝大螺母侧面的色标线与指针于水平线上。（保持狭缝的底平面与培养基表面相距1-3mm）。
4.1.1.9将指针向上轻轻拔起，使其底部离开培养基表面，并拧紧螺母，使之 固定不动。 4.1.2 采样操作 4.1.2.1将采样器后面板上的电源插上，按下仪器面板上的电源开关，指示灯亮， 时间显示窗内的数码应为“P”。 4.1.2.2根据采样现场环境的洁净度，选择采样时间中的某一档，并按下相应按 钮，指示灯亮，数码由“P”显示为“Y”，约经10分钟后气泵自动开启进 行采样。当采样时间达到时，气泵自动停止运行，数码显示终点采样时间。 4.1.2.3关掉电源开关，打下仪器的活动透明外罩，迅速把平皿上盖盖上并从仪 器中取出。 4.1.2.4按照上述方法，再放入新的平皿，进行第二次采样，直到采样完毕。4.1.2.5采集样品的平皿应置入培养箱，在培养48小时后，按检验规程检查菌 落数。 4.1.2.6采样工作结束，关断仪器电源，将程序： 4.2沉降菌检测 4.2.1消毒φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。 4.2.2称取普通肉汤琼脂培养基31克，加蒸馏水1000ml，加热溶解分装，经 116℃30分钟灭菌备用。 4.2.3在无菌条件下将消毒的培养基注入培养皿中备用。 4.2.4放平板前应先洗手，穿消毒好的无菌衣、裤、帽、口罩。 4.2.5将已制备好的培养皿按净化级别要求选择放置位置和平皿块数。 4.2.6到车间打开培养皿盖，使培养基表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。 4.2.7全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。（温度30℃~35℃， 时间不少于48h）。 4.2.8每批培养基应有对照试验，可选2~3只培养皿作对照培养，以检验培养 基本身是否污染。
无菌室沉降菌测试标准操作规程
无菌室沉降菌测试标准操作规程 一、目的：建立无菌室中沉降菌的测试标准操作规程，保证微生物检验在规定洁净级别内进行。 二、范围：无菌室的沉降菌的监测。 三、依据：国家标准GB/T 16294-1996。 四、职责：微生物检验人员对本制度的实施负责。 五、内容 1、菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。通常用个数表示。 2、测试方法：沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。 3、所用的仪器和设备 1）高压灭菌锅锅 2）恒温培养箱：必须定期对培养箱进行检定。 3）培养皿：一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20分钟。 4、培养基：普通营养琼脂培养基。将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15m1。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30～35℃恒温培养箱中培养数小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2～8℃的环境中存放。 5、测试步骤 1）采样方法：将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置。 2）培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。 3）菌落计数：用肉眼直接计数，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。 6、注意事项 1）测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 2）采取一切措施防止人为对样本的污染。 3）对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 4）由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 5）采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。 7、测试规则 1）测试状态 （1）沉降菌测试前：被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求，静压差、必须控制在规定值内。被测试洁净室（区）已消毒。 （2）测试状态有静态和动态两种，并在报告中注明测试状态。 （3）测试人员：测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。静态测试时，室内测试人员不得多于2个人。
沉降菌测试方法..
沉降菌测试方法 1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。 2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。 3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。 4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。 5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。 6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。 7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净
化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。 8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3 平均菌落数= .........21n Mn M M ++ n —培养皿总数 M 1—1号培养皿菌落数 M 2—2号培养皿菌落数 M n —n 号培养皿菌落数 用平均菌落数判断洁净空气中微生物。洁净室内平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。若某洁净室内平均菌落数超过标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 人员进出洁净生产区的一般程序： 人员进出无菌操作洁净生产区程序：
洁净室沉降菌的测试方法.doc
1.目的： 本文规定了洁净室沉降菌的测试方法，以达到对其空气洁净度的评定。 2.适用范围： 适用于洁净区中沉降菌的监测和对洁净区等级的验证。 3.检测仪器：高压消毒锅、恒温培养箱。 4.检测依据： GB/T 16294—2010 医药工业洁净室 ( 区) 沉降菌的测试方法 5.测试前准备： 洁净室的温度应控制在18℃～ 26℃，相对湿度应控制在45％～ 65％之间。风速或压差的测试应符合要求。 静态测试时，室内测试人员不得多于 2 人。 对单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于10min 后开始。对非单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于30min 后开始。采样点数目见下表 面积 m 2 100 洁净度级别 300000 10000 100000 ＜10 2～3 2 2 2 ≥10～＜20 4 2 2 2 ≥20～＜40 8 2 2 2 ≥40～＜ 100 16 4 2 2 ≥ 100～＜200 40 10 3 3 ≥ 200～＜400 80 20 6 6 ≥400＜1000 160 40 13 13 ≥1000～＜2000 400 100 32 32 ≥2000 800 200 63 63 注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积；对单向流洁净室，指的是房间面积。
采样点的位置一般在离地面0.8m 高度的水平面上均匀布置。 采样点的布置，见下图 洁净室 ( 区) 采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。下列采样点的图示可作参考。 洁净棚 ( 层流罩 ) ，洁净工作台等局部空气净化设施的采样点布置： 1.水平单向流 2．垂直单向流 最少培养皿数：见表 洁净度级别所需 90mm培养皿（以沉降计）100 14 10000 2 100000 2 300000 2 6.测试要求： 将已制备好的培养皿按要求的位置放置足够的数量，打开培养皿盖，使培养皿表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。 在 30℃～ 35℃的培养箱中培养不少于 48h。 每批培养基应选三只作对照培养，以鉴别培养基本身是否有污染。 菌落计数，严防遗漏。 7.结果计算和判断： M1+M2+Mn ——————————
沉降菌测试方法..
沉降菌测试方法 1、把ф90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。 2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。 3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。 4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。 5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。 6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。 7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室测试人员不得多于2人。测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净化
房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。 8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3 平均菌落数= .........21n Mn M M ++ n —培养皿总数 M 1—1号培养皿菌落数 M 2—2号培养皿菌落数 M n —n 号培养皿菌落数 用平均菌落数判断洁净空气中微生物。洁净室平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。若某洁净室平均菌落数超过标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 人员进出洁净生产区的一般程序： 人员进出无菌操作洁净生产区程序：
沉降菌检验标准操作规程
01.0目的 01.1阐述洁净室（区）空气中沉降菌检测操作规程，保证药品的质量，防止生产环境 对产品的污染，保证实验室的环境达到检测产品的要求。 02.0适用范围 02.1适用于本公司的洁净室（区）的沉降菌监测和洁净度等级的验证。 03.0人员职责 测试人员对洁净室（区）沉降菌的测试。 04.0内容 04.1术语和定义 下列术语和定义适用于本规程。 04.1.1菌落：细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的细菌集落，简称CFU，通常 用个数来表示。 04.1.2沉降菌：用GB/T16292-2010 提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过专 门的培养基在适宜的生长条件下系繁殖到可见到的菌落数。 04.1.3沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以cfu/ 皿表示。 04.2测试原理：本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子 于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板 培养中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 04.3监测周期：A级洁每次室验做监控，B级每周一次，C级每季度一次，D级每半年 一次监控。 04.4测试方法： 04.4.1使用设备与材料 高压灭菌锅：使用时应严格按照操作规程进行。 恒温恒湿培养箱：必须定期对培养箱进行校验。
培养皿：一般采用φ90mm×15mm培养皿。 培养基：胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）；已灭菌配制好的培养基平皿放入30-35℃ 恒温培养箱中培养72小时，若培养基平皿上确无菌落生生即可供采样用，制备好 的培养基平皿应放在2-8℃的环境中存放。 清洁剂：75%酒精 04.4.2测试时间： （1）对单向流，如A级净化房间内及超净工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。 （2）对非单向流，如B级、C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。 （3）培养皿的采样时间：静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上； 动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4小时。 04.4.3采样点数及其布置 （1）最少采样点数目： （2）最少培养皿数
洁净车间沉降菌检测记录
沉降菌检测记录 记录编号：AI/R QA-005 检测依据:《GB/T16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》 检测步骤： 1 培养皿(￠90mm×15mm的玻璃培养皿) 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现破损或污染的应剔除。 将培养皿121℃湿热灭菌20分钟或于180℃干热灭菌2小时，灭菌后取出备用。 2 培养基配制 取适量培养基，按培养基说明书配制比例加纯化水后加热溶解，溶解后分装于烧瓶，放入高温灭菌锅，121℃高温下灭菌20分钟后取出备用。 灭菌后的培养基冷却至约60℃，在万级洁净室中的百级超净台上，无菌操作要求下将灭菌过的培养基分装于培养皿中，每个培养皿约20mL，冷却凝固后便可使用。 制备好的培养基平皿应在2℃~8℃保存，一般有效期以一周为宜或按厂商提供的标准执行，需保存的剩余培养基应采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称及制备日期的标记。 3 采样方法 将已制备好的培养皿按测点图的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。 4 培养 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 在30℃-35℃培养箱中培养，时间不少于48h。 培养皿在用于检测时，为避免培养基本身污染，每次取3个对照皿同时进行对照试验，与采样皿同法操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，作阴性对照培养，结果应无菌落生长。 5 菌落计数 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，有条件的可用5-10倍放大镜检查有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 检测记录：
注：1、结果判定栏中，用“√”表示。 2、若部分洁净区域检测不符合，则需重新打扫卫生后复测。检测人：复核人：
洁净室区沉降菌检测标准操作规程完整
目的 制定标准的洁净室（区）沉降菌的测试方法，指导沉降菌的测试工作。 范围 适用于洁净室（区）沉降菌的测定和验证。 责任 QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌的测试，QC主管和QA部门负责对测试的数据进行统计分析。 程序 1.定义 1.1.菌落：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称 CFU。 1.2.沉降菌：通过自然沉降原理收集在空气中的活微生物粒子，通过专用的培养 基，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数。 1.3.动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定的方式下进行，并 且有指定的人员按照规范操作的状态。 2.测试方法 2.1.测试过程 2.1.1.设备和培养基：恒温培养箱、购买预灌装TSA平皿或者自制TSA平皿。
2.2.测试条件 2.2.1.洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求 时，温度在18~26℃，相对湿度在45%~65%为宜）。 2.2.2.风速、压差应在合格范围内。 2.2. 3.动态测试。 2.3.测试方法 2.3.1.将准备好的培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约1.0m）。将采样 台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充分暴露后，将培养皿盖盖上后倒置。 2.3.2.在每一只培养皿上标记好具体的取样位置及取样日期，将所有培养皿在QC 微生物室进行培养观察。 2.4.培养观察计数 2.4.1.全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在20~25℃培养箱中 培养3天，30~35℃培养箱中培养2天后观察计数。 2.4.2.每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基本身是否污染。可每次选定2只 培养皿作对照培养。 2.5.计算 2.5.1.平均菌落数M= M1＋M2＋…MN N M1＝1号培养皿菌落数 M2＝2号培养皿菌落数
2015版药典沉降菌检测操作规程
题目：洁净区（室）沉降菌监测标准操作规程 编码：颁发部门：质量部 起草：日期：2015年月日修订日期：年月日 审核：日期：2015年月日生效日期：2016年月日 批准：日期：2015年月日发放份数：版次：第1版 分发部门：质量部、中心化验室 1.目的：阐述洁净室空气中沉降菌检测操作规程，保证药品质量，防止生产环境对产品的污染。 2.范围：适用于本公司洁净区(室)的沉降菌的监测。 3.责任：沉降菌检测员。 4.内容： 4.1基本概念： 4.1.1菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU.通常用个数表示。 4.1.2沉降菌：用GB/T16292-2010提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过专门的培养基在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 4.1.3沉降菌菌落数:规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。 4.2测试原理:本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 4.3测试方法： 4.3.1使用的仪器设备和培养基: 高压消毒锅:使用时应严格按照操作规程进行。 恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。 培养皿:一般采用φ90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20min。 培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基。
将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每 皿约15ml。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入32℃恒温培养箱中培养72 小时若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2-8℃的坏境中存放。 4.3.2测试时间: 对单向流，如A级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。 对非单向流，如B级、C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟开始。 4.3.3采样点数目及其布置: 最少采样点数目:沉降菌的最少采样点数可按表1确定。在满足最少测点数的同时，不宜满足最少培养皿数，见表2 表1 最少采样点数目 面积（m2） 洁净度等级 A、B级C级D级 ＜10 2-3 2 2 ≥10-＜20 4 2 2 ≥20-＜40 8 2 2 ≥40-＜100 16 4 2 ≥100-＜200 40 10 3 注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积，对于非单向流洁净室，指的是房间面积。 表2 最少培养皿数 洁净度等级所需φ90mm培养皿数（以沉降4h计） A 14 B 2 C 2 D 2 采样点的布置: 除受洁净区的设备限制外，取样点应在整个洁净区均匀布置。
洁净室沉降菌的测试方法
洁净室沉降菌的测试方 法 -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1
1.目的： 本文规定了洁净室沉降菌的测试方法，以达到对其空气洁净度的评定。 2. 适用范围： 适用于洁净区中沉降菌的监测和对洁净区等级的验证。 3. 检测仪器：高压消毒锅、恒温培养箱。 4. 检测依据： GB/T 16294—2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法 5. 测试前准备： 洁净室的温度应控制在18℃～26℃，相对湿度应控制在45％～65％之间。风速或压差的测试应符合要求。 静态测试时，室内测试人员不得多于2人。 对单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。对非单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。采样点数目见下表
注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积；对单向流洁净室，指的是房间面积。 采样点的位置一般在离地面0.8m高度的水平面上均匀布置。 采样点的布置，见下图 洁净室(区)采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。下列采样点的图示可作参考。 洁净棚(层流罩)，洁净工作台等局部空气净化设施的采样点布置： 1. 水平单向流 2．垂直单向流
最少培养皿数：见表 洁净度级别所需90mm培养皿（以沉降计） 10014 100002 1000002 3000002 6. 测试要求： 将已制备好的培养皿按要求的位置放置足够的数量，打开培养皿盖，使培养皿表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。 在30℃～35℃的培养箱中培养不少于48h。 每批培养基应选三只作对照培养，以鉴别培养基本身是否有污染。 菌落计数，严防遗漏。 7. 结果计算和判断： M1+M2+……Mn 平均菌落数＝—————————— n Mn—n号培养皿菌落数 n—培养皿的总数 8. 结果评定：
沉降菌测试方法重点
沉降菌测试方法 1、把巾90mm K 15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180C后，干烤2小时。 2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45C 时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。 3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33C恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8C环境中保存。 4、采样时，一般在100 级层流罩中放置3 个培养皿，在100000 级，10000 级按面积大小一般放2 个培养皿。打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5 小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33C培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m 左右。 5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10 倍放大镜检 查是否遗漏，若培养皿上有2 个或2 个以上菌落重叠，分辨时仍以2 个或2 个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。 6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。 7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2 人。测试时间对单向流100 级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min 后开始，对非单向流，100000 级以上净 化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。 8 平均菌落数计算：M+M+M
沉降菌测试原始记录
微生物检验室沉降菌测试原始记录 评定标准十万级w 10CFU 皿；万级w 3CFU 皿；百级w 1CFU 皿 RSB60-00 °C 采样点图示 见附图： 报告日期 _________
结 论 _______________________ 检验者 ____________ 复核者 ___________________ RSB64-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（ 2） 编 号______________________ 测试依据 SPG108-01 环境温度________________ °C 培养基批号__________________ 测试单位 ______________ 测试状态 ______________ 相对湿度% _____________ 培养温度 ______________ 采样点图示 见附图：
评定标准：十万级w 10CFU皿；万级w 3CFU皿；百级w 1CFU皿 结论___________________检验者_________________ 复核者______________ RSB63-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（1 ）
评定标准： 十万级w 10CFU/皿； 万级w 3CFU/皿； 百级w 1CFU/皿 结 论 检验者 复核者 _____________________ RSB61-00 原料车间沉降菌测试原始记录 编 号 ______________________ 测试单位 ________________ 测试依据 SPG108-01 测试状态 _______________ 环境温度 _______________ ° C 相对湿度% ______________ 培养基批号 _________________ 培养温度 _________________ °C 静压差 ___________________ 检测日期 __________________ 报告 采样点图示 见附图： 日期
洁净区(沉降菌)检测标准操作规程
1 目的 建立洁净度（沉降菌）的检验标准操作规程，为沉降菌检查人员提供正确的标准操作方法。 2 范围 适用于本公司洁净度（沉降菌）检查的全过程。 3 责任 QA对本规程的有效执行承担监督检查责任，QC对本规程的实施负责。 4 程序 4.1 概述：本标准对尘粒及微生物污染规定需进行环境控制的房间或区域。其建筑结构、装备及其使用均具有减少对该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能。 4.2 测试方法 4.2.1 方法提要： 本标准按国家技术监督局发布的《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》，采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。 4.2.2 仪器 仪器包括：培养皿、培养基、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。 4.2.2.1 培养皿 一般采用90mm×15mm规格的培养皿。 4.2.2.2 培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或沙氏培养基（SDA）或用户认可并经验证了的培养基。 4.3 测试前的规则： 4.3.1 测试状态； 4.3.1.1 沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求， 静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18℃～26℃，相对湿度在45%～65%之间为宜），同时应满足测试仪器的使用范围。 4.3.1.2 沉降菌测试前，被测试洁净室（区）已经过消毒。 4.3.1.3 测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要 求，并在报告中注明测试状态。 4.3.1.4 静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿 暴露时间为不大于4h。 4.3.2 测试人员： 4.3.2.1 测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。
沉降菌测试原始记录
RSB60-00 微生物检验室沉降菌测试原始记录 测试依据SPG108-01 测试状态 环境温度°C 相对湿度% 培养基批号培养温度°C 静压差检测日期报告日期 评定标准十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿 结论检验者复核者
RSB64-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（2） 测试依据SPG108-01 测试状态 环境温度°C 相对湿度% 培养基批号培养温度°C 静压差检测日期报告日期 评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿 结论检验者复核者
RSB63-00 固体制剂车间沉降菌测试原始记录（1） 测试依据SPG108-01 测试状态 环境温度°C 相对湿度% 培养基批号培养温度°C 静压差检测日期报告日期 评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿 结论检验者复核者
RSB61-00 原料车间沉降菌测试原始记录 测试依据SPG108-01 测试状态 环境温度°C 相对湿度% 培养基批号培养温度°C 静压差检测日期报告日期 评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿 结论检验者复核者
RSB62-00 原料车间沉降菌测试原始记录 测试依据SPG108-01 测试状态 环境温度°C 相对湿度% 培养基批号培养温度°C 静压差检测日期报告日期 评定标准：十万级≤10CFU/皿；万级≤3CFU/皿；百级≤1CFU/皿 结论检验者复核者
RSB61-01 原料车间沉降菌测试原始记录 编 号 测试单位 测试依据 SPG108-01 测试状态 环境温度 °C 相对湿度% 培养基批号 培养温度 °C 静 压 差 检测日期 报告日期 评定标准： 十万级≤10CFU/皿； 万级≤3CFU/皿； 百级≤1CFU/皿 结 论 检 验 者 复核者
无菌室标准(含洁净室沉降菌测试标准操作规程)
无菌室标准 (含《洁净室沉降菌测试标准操作规程》) 1.目的 本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围 生测实验室 3.责任者 QC主管生测员 4.定义 无 5.安全注意事项 严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程 6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。 6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。 6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 6 .11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超
沉降菌测试
沉降菌测试 1.目的 本程序规定了洁净室和洁净区中沉降菌的测试条件、测试方法。 2.范围 本程序适用于洁净室和洁净区、无菌室或无菌区域（包括洁净工作台）的沉降菌的测定和环境的验证。 3.引用文件 3.1.GB/T 16294－1996医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法 3.2.YY/T 0188.6－1995药品检验操作规程，第6部分：药品生物测定法 3.3.药品生产质量管理规范（1998年修订） 3.4.中国药典2000年版 4.职责 质保室中控人员。 5.测试方法 5.1.方法概述：本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养 基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌能进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。 5.2.所用的仪器和设备 5.2.1.高压消毒锅使用时应严格按照仪器说明书操作。 5.2.2.恒温培养箱必须定期对培养箱的温度计进行检定。 5.2.3.培养皿一般采用?90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。 5.2.4.培养基营养肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。其配制方法见附录A。 5.3.测试步骤 5.3.1.采样方法：将已制备好的培养皿按 6.4.1.2的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴 露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。 5.3.2.培养：全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中，在30~35℃培养不少于48h；每 批培养基应选定3只培养皿作对照试验，以检验培养基本身是否污染。 5.3.3.菌落计数：用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5~10倍放大镜检查， 有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 5.4.注意事项 5.4.1.测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 5.4.2.采取一切措施防止人为对样本的污染。 5.4.3.对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 5.4.4.由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不 要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。 5.4.5.采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。 6.测试规则 6.1.测试状态 6.1.1.沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度须达到规定的要求，静压差、换气次数、 空气流速必须控制在规定值内。 6.1.2.沉降菌测试前，被测试洁净室（区）已经过消毒。 6.1.3.测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测
2015版药典沉降菌检测操作规程
1.目的：阐述洁净室空气中沉降菌检测操作规程，保证药品质量，防止生产环境对产品的污染。 2.范围：适用于本公司洁净区(室)的沉降菌的监测。 3.责任：沉降菌检测员。 4.内容： 4.1基本概念： 4.1.1菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU.通常用个数表示。 4.1.2沉降菌：用GB/T16292-2010提及的方法收集空气中的活性微生物粒子，通过专门的培养基在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 4.1.3沉降菌菌落数:规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以个/皿表示。 4.2测试原理:本测试方法利用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，以平板培养皿中的菌落数来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净区的洁净度。 4.3测试方法： 4.3.1使用的仪器设备和培养基: 高压消毒锅:使用时应严格按照操作规程进行。
恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。 培养皿:一般采用φ90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20min。 培养基:胰酪大豆胨琼脂培养基。 将培养基加热熔化，冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入32℃恒温培养箱中培养72 小时若培养基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培养基平皿应在 2-8℃的坏境中存放。 4.3.2测试时间: 对单向流，如A级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。 对非单向流，如B级、C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟开始。 4.3.3采样点数目及其布置: 最少采样点数目:沉降菌的最少采样点数可按表1确定。在满足最少测点数的同时，不宜满足最少培养皿数，见表2 表1 最少采样点数目
洁净车间沉降菌检测记录.docx
精品文档 沉降菌检测记录 记录编号： AI/R QA-005 检测依据 : 《 GB/T16294-2010 医药工业洁净室 ( 区 ) 沉降菌的测试方法》 检测步骤： 1培养皿 ( ￠ 90mm× 15mm的玻璃培养皿 ) 1.1 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现破损或污染的应剔除。 1.2 将培养皿121℃湿热灭菌20 分钟或于180℃干热灭菌 2 小时，灭菌后取出备用。 2培养基配制 2.1取适量培养基，按培养基说明书配制比例加纯化水后加热溶解，溶解后分装于烧瓶，放 入高温灭菌锅， 121℃高温下灭菌 20 分钟后取出备用。 2.2灭菌后的培养基冷却至约60℃，在万级洁净室中的百级超净台上，无菌操作要求下将灭 菌过的培养基分装于培养皿中，每个培养皿约20mL，冷却凝固后便可使用。 2.3制备好的培养基平皿应在2℃ ~8℃保存，一般有效期以一周为宜或按厂商提供的标准执 行，需保存的剩余培养基应采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称及制备日期的标记。 3采样方法 将已制备好的培养皿按测点图的要求放置，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5h ，再将培养皿盖盖上后倒置。 4 培养 4.1 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。 4.2 在 30℃-35 ℃培养箱中培养，时间不少于48h。 4.3 培养皿在用于检测时，为避免培养基本身污染，每次取 3 个对照皿同时进行对照试验， 与采样皿同法操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱内培养，作阴性对照培养，结果应无菌落生长。 5 菌落计数 5.1 用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，有条件的可用5-10 倍放大镜检查有否遗漏。 5.2 若培养皿上有 2 个或 2 个以上的菌落重叠，可分辨时仍以 2 个或 2 个以上菌落计数。 检测记录： 时间温度十万级： 湿度 十万级： 检测状态万级：万级： 男换鞋女换鞋物流通道中间品冷库万级二更万级缓冲静压差
洁净室区沉降菌检测标准操作规程
洁净室区沉降菌检测标准操作规程
目的 制定标准的洁净室（区）沉降菌的测试方法，指导沉降菌的测试工作。 范围 适用于洁净室（区）沉降菌的测定和验证。 责任 QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌的测试，QC主管和QA部门负责对测试的数据进行统计分析。 程序 1.定义 1.1.菌落：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生 物集落，简称CFU。 1.2.沉降菌：经过自然沉降原理收集在空气中的活微生物粒子， 经过专用的培养基，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数。
1.3.动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定的 方式下进行，而且有指定的人员按照规范操作的状态。 2.测试方法 2.1.测试过程 2.1.1.设备和培养基：恒温培养箱、购买预灌装TSA平皿或者自制 TSA平皿。 2.2.测试条件 2.2.1.洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适 应（无特殊要求时，温度在18~26℃，相对湿度在45%~65%为宜）。 2.2.2.风速、压差应在合格范围内。 2.2. 3.动态测试。 2.3.测试方法 2.3.1.将准备好的培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约 1.0m）。将采样台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打 开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养 皿盖上，使培养基表面充分暴露后，将培养皿盖盖上后倒 置。 2.3.2.在每一只培养皿上标记好具体的取样位置及取样日期，将所 有培养皿在QC微生物室进行培养观察。 2.4.培养观察计数
2.4.1. 全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在20~25℃培养箱中培养3天，30~35℃培养箱中培养2天后观察计数。 2.4.2. 每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基本身是否污染。可每次选定2只培养皿作对照培养。 2.5. 计算 2.5.1. 平均菌落数M = M1＋M2＋…MN N M1＝1号培养皿菌落数 M2＝2号培养皿菌落数 Mn ＝n 号培养皿菌落数 n ＝培养皿总数 2.5.2. 结果判定 2.5.2.1. 最终结果采用平均值。但每个碟的菌落数亦不得多于标准规 定。 2.5.2.2. 如有一个碟的菌落数超过标准规定，平均却符合规定，也以不 合格论。 2.5.2. 3. 静态测试时，若某洁净室（区）内的平均菌落数超过评定标 准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。 2.6. 注意事项