志贺氏菌的测定
食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验
1.范围本标准规定了食品中志贺氏菌的检验方法。本标准适用于各类食品和食物中毒样品中志贺氏菌的
检验。
2.规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，
其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的墩新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
3.设备和材料
3.1冰箱：0℃～4℃。
3.2恒温培养箱：36℃士1℃，42℃。
3.3显微镜：10*～l00*。
3.4均质器或灭菌乳钵。
3.5架盘药物天平：0g一500g，精确至0.5g。
3.6灭菌广口瓶：500mL。
3.7灭菌锥形瓶：500mL、250mL。
3.8灭菌培养皿：直径90mm。
3.9硝酸纤维素滤膜：150mm*50mm，Φ0.45um。临用时切成两张，每张70mm*50mm，用铅笔划格，
每格6mm*6mm。每行10格，分6行。灭菌备用。
4.培养基和试荆
4.1 GN增菌液：按GB/T4789.28一2003中4.17规定。
4.2 HE琼脂：按GB/T4789.23一2003中4.21规定．
4.3 SS琼脂：按GB/T4789.28一2003中4.22规定。
4.4 麦康凯琼脂：按GB/T4789.28一2003中4.24规定。
4.5 伊红美蓝琼脂（EMB)：按GB/T4789.28一2003中4.25规定。
4.6 三糖铁琼脂（TSI)：按GB/T4789.28一2003中4.26、4.27规定。
4.7 葡萄糖半固体管：按GB/T47名9.28一2003中连，31规定。
4.8 半固体管：按GB/T4789.28一2003中4.30规定。
4.9 葡萄糖钱琼脂：按GB/T4789.28一2003中3.8规定。
4.10 尿素琼脂（pH7.2)：按GB/T4789.28一2003中3.15规定。
4.11 西蒙氏柠檬酸盐琼脂：按G曰T47豹．28一2。的中3.5规定。
4.12 氰化钾（KCN）培养基：按G酬T4789.28一2。。3中3.16规定。
4.13 氨基酸脱按酶试验培养基：赖氨酸、鸟氨酸及对照培养基，按GB/T4789.28一2003中3.12规定。
4.14糖发酵管：棉子糖、甘露醇、甘油、七叶昔及水杨普，按GB/T4789.28一2003中3.2规定。
4.15 5％乳糖发酵管：按GB/T4789.28一2003中4.32规定
4.16蛋白豚水、靛基质试剂：按GB/T4789,28一2003中3.13规定4.17志贺氏菌属诊断血清。
5.检验程序：志贺氏菌检验程序见图（图）。
6.操作步骤
6.1增菌以无菌操作取检样25g（ml)，加入装有225mLGN增菌液的广口瓶内，固体食品用均质器以8000r/min一10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培养6——8h。培养时间视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。
6.2分离和初步生化试验
6.2.1取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板一个；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板一个，于36℃培养18h——24h，志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。
6.2.2挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各一管。一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经36℃培养18h——24h，分别观察结果。
6.2.3下述培养物可以弃去：a）在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长的培养物；b）在18h——24h内发酵乳糖、蔗糖的培养物；c）不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培养物；d）产气的培养物．e）有动力的培养物；f）产生硫化氢的培养物。
6.2.4凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体），无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验。
6.3血清学分型和进一步的生化试验
6.3.1血清学分型挑取三糖铁琼脂上的培养物，做玻片凝集试验。先用四种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查；如果呈现凝集，则用Al、AZ、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1——15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3～工2型多价血清及各型因子血清检查。
6.3.2进一步的生化试验在做血清学分型的同时，应做进一步的生化试验，即：葡萄糖钱，西蒙氏柠檬酸盐，赖氨酸和鸟氨酸脱梭酶，pH
7.2尿素，氰化钾（KCN）生长，以及水杨苷和七叶苷的分解。除宋内氏菌和鲍氏13型为乌氨酸阳性外，志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。必要时还应做革兰氏染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反应不符合的菌株，即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集，仍不得判定为志贺氏菌属的培养物。已判定为志贺氏菌属的培养物，应进一步做5％乳糖发酵，甘露醇、棉子糖和甘油的发酵和靛墓质试验。志贺氏菌属四个生化群的培养物，应符合该群的生化特性。但福氏6型的生化特性与A群或C群相似。
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序 一、目的 本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法，以规范操作程序，保证检测数据的有效性。 二、适用范围： 本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。 三、生物安全要求 标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。 四、试剂及仪器设备 试剂 采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液（SF）、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD）、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基（YS）、三糖铁（TSI）、动力-吲哚-尿素培养基（MIU）、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管 仪器设备 恒温培养箱、微生物鉴定仪 五、采样方法 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。肛拭子不是
最佳标本，仅在病人无粪便标本时采用。 粪便标本：应采集自然排出的新鲜粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样部分。盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器，避免混入尿液、水和其他物质。 肛拭标本：若无法获得粪便（如排便困难或婴幼儿），也可以采用肛拭子，即无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm处〈儿童约2-3cm），同一方向轻轻旋转2-3周。以目测能见到粪便为准。插入Cary-Blair运送培养基。 标本采集后立即送至实验室进行检测，若室温保存，不能超过1h；如不能立即送检，应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。 六、检验程序 七、操作步骤
20041126_志贺氏菌属
志贺氏菌属 志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。 一、生物学性状 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μm ,宽 m 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C为49-53克分子%（Tm法）。 需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。 本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛基质产生不定，甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H S。根据生化反应可进行初步分类。 2 志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同，可分为二大组。 A、不分解甘露醇组：主要为志贺氏菌。又根据能否产生靛基质，进一步分靛基质阳性（1、3、4、5、6、9、10型）和靛基质阴性（2、7、8型）的志贺氏痢疾菌。 B、分解甘露醇组：包括福氏、鲍氏、宋内氏菌。再按乳糖分解情况，分为迟缓分解乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。后者进一步再根据靛基质产生与否，分靛基质阳性（福氏菌1、2、3、4、5型和鲍氏菌5、7、9、11、13、15型）和靛基质阴性（福氏菌6型和鲍氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14）二类（见表一） 表一志贺氏菌属生化反应的分类 葡萄糖（+） 甘露醇（-）甘露醇（+） 志贺氏菌志贺氏菌乳糖（-）乳糖（+）（1、3、4、（2、7、8型） 5、6、9、10型）靛基质（-）靛基质（+）靛基质（-） 福氏菌6型福氏菌（1、2、宋内氏菌 鲍氏菌（1、2、 3、4、5型）， 3、4、6、8 鲍氏菌（5、7、9、 10、12、14型） 11、13、15型） 抗原构造与分型：志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）组成。主要抗原有三种。 型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是光滑型菌株所含有的重要
志贺氏菌检测
志贺氏菌检测
3.12 西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录中12。 3.13 粘液酸盐培养基：见附录中13。 3.14 蛋白胨水、靛基质试剂：见附录中14。 3.15 志贺氏菌属诊断血清。 3.16 生化鉴定试剂盒。 4 操作步骤 4.1 增菌 以无菌操作取检样25g（ml），加入装有灭菌225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质杯，用旋转刀片式均质器以8000r/min～10000r/min均质；或加入装有225ml 志贺氏菌增菌肉汤的均质袋中，用拍击式均质器连续均质1min～2min，液体样品振荡混匀即可。于41.5℃±１℃，厌氧培养16h～20h。 4.2 分离 取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36℃±1℃培养20h～24h，观察各个平板上生长的菌落形态。宋内氏志贺氏菌的单个菌落直径大于其他志贺氏菌。若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h再进行观察。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征见表1。 表1 志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 选择性琼 脂平板 志贺氏菌的菌落特征 MAC琼脂无色至浅粉红色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐 XLD琼脂粉红色至无色，半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐 4.3 初步生化试验 4.3.1 自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI、半固体和营养琼脂斜面各一管，置36℃±1℃培养20h～24h，分别观察结果。
4.3.2 凡是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸（发酵葡萄糖，不发酵乳糖，蔗糖）、不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）、不产硫化氢、半固体管中无动力的菌株，挑取其4.3.1中已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验和血清学分型。 4.4 生化试验及附加生化试验 4.4.1 生化试验 用4.3.1中已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验，即β-半乳糖苷酶、尿素、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶以及水杨苷和七叶苷的分解试验。除宋内氏志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌13型的鸟氨酸阳性；宋内氏菌和痢疾志贺氏菌1型，鲍氏志贺氏菌13型的β-半乳糖苷酶为阳性以外，其余生化试验志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。另外由于福氏志贺氏菌6型的生化特性和痢疾志贺氏菌或鲍氏志贺氏菌相似，必要时还需加做靛基质、甘露醇、棉子糖、甘油试验，也可做革兰氏染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反应不符合的菌株，即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集，仍不得判定为志贺氏菌属。志贺氏菌属生化特性见表2。 表2 志贺氏菌属四个群的生化特征 生化反应A群：痢疾 志贺氏菌 B群：福氏 志贺氏菌 C群：鲍氏 志贺氏菌 D群：宋内 氏志贺氏 菌 β-半乳 糖苷酶 －a－－a+ 尿素－－－－赖氨酸 脱羧酶 －－－－鸟氨酸 脱羧酶 －－－b+
志贺氏菌检测
志贺氏菌检测 1 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： 1.1 恒温培养箱：36℃±1℃； 1.2 冰箱：2℃～5℃； 1.3 膜过滤系统； 1.4 厌氧培养装置：41.5℃±1℃； 1.5 电子天平：感量0.1g； 1.6 显微镜：10×～100×； 1.7 均质器； 1.8 振荡器； 1.9 无菌吸管：1ml（具0.01ml刻度）、10ml（具0.1ml刻度）或微量移液器及吸头； 1.10 无菌均质杯或无菌均质袋：容量500ml； 1.11 无菌培养皿：直径90mm； 1.12 pH计或pH比色管或精密pH试纸； 1.13 全自动微生物生化鉴定系统。 2 培养基和试剂 3.1 志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素：见附录中1。 3.2 麦康凯（MAC）琼脂：见附录中2。 3.3 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐（XLD）琼脂：见附录中3。 3.4 三糖铁（TSI）琼脂：见附录中4。 3.5 营养琼脂斜面：见附录中5。 3.6 半固体琼脂：见附录中6。 3.7 葡萄糖铵培养基：见附录中7。 3.8 尿素琼脂：见附录中8。 3.9 β-半乳糖苷酶培养基：见附录中9。 3.10 氨基酸脱羧酶试验培养基：见附录中10。 3.11 糖发酵管：见附录中11。
3.12 西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录中12。 3.13 粘液酸盐培养基：见附录中13。 3.14 蛋白胨水、靛基质试剂：见附录中14。 3.15 志贺氏菌属诊断血清。 3.16 生化鉴定试剂盒。 4 操作步骤 4.1 增菌 以无菌操作取检样25g（ml），加入装有灭菌225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质杯，用旋转刀片式均质器以8000r/min～10000r/min均质；或加入装有225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质袋中，用拍击式均质器连续均质1min～2min，液体样品振荡混匀即可。于41.5℃±１℃，厌氧培养16h～20h。 4.2 分离 取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36℃±1℃培养20h～24h，观察各个平板上生长的菌落形态。宋内氏志贺氏菌的单个菌落直径大于其他志贺氏菌。若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h再进行观察。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征见表1。 表1 志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 4.3 初步生化试验 4.3.1 自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI、半固体和营养琼脂斜面各一管，置36℃±1℃培养20h～24h，分别观察结果。 4.3.2 凡是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸（发酵葡萄糖，不发酵乳糖，蔗糖）、不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）、不产硫化氢、半固体管中无动力的菌株，挑取其4.3.1中已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验和血清学分型。 4.4 生化试验及附加生化试验
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)教学文案
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序(讨论稿)
从业人员健康体检沙门氏菌、志贺氏菌检测操作程序一、目的 本程序用于对从业人员健康体检进行沙门氏菌、志贺氏菌检测等致病菌检测的方法，以规范操作程序，保证检测数据的有效性。 二、适用范围： 本方法适用于从人体粪便中沙沙门氏菌、志贺氏菌的分离、鉴定及保存的梯相关操作。 三、生物安全要求 标本及相应的致病菌操作必须在BSL-2生物安全实验室的生物安全柜中进行。 四、试剂及仪器设备 4.1试剂 采便盒、Cary-Blair运送培养基、亚硒酸增菌液（SF）、改良亚硒酸盐磺绿增菌肉汤（SBG）、沙门志贺培养液、木糖-赖氨酸-脱氧胆酸琼脂（XLD）、麦康凯琼脂、沙门显色培养基、结晶紫沙门培养基（YS）、三糖铁（TSI）、动力-吲哚-尿素培养基（MIU）、沙门氏菌属诊断血清、志贺氏菌属诊断血清、API20E生化试剂条、磁珠菌种保存管 4.2 仪器设备 恒温培养箱、微生物鉴定仪 五、采样方法
5.1 标本应为新鲜的或转移至Cary-Blair运送培养基的粪便或肛拭子，最优标本是转移到Cary-Blair运送培养基的粪便拭子。肛拭子不是最佳标本，仅在病人无粪便标本时采用。 5.2 粪便标本：应采集自然排出的新鲜粪便，取稀水样、粘血样、脓血样，黏液样部分。盛于清洁、干燥、无吸水性的无菌容器，避免混入尿液、水和其他物质。 5.3肛拭标本：若无法获得粪便（如排便困难或婴幼儿），也可以采用肛拭子，即无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm 处〈儿童约2-3cm），同一方向轻轻旋转2-3周。以目测能见到粪便为准。插入Cary-Blair运送培养基。 5.4 标本采集后立即送至实验室进行检测，若室温保存，不能超过 1h；如不能立即送检，应放入Cary-Blair运送培养基中冷藏条件下24小时内送检。 六、检验程序
志贺氏菌检测
志贺氏菌的检验（国标法） 一、增菌 称取检样25g，加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器以8000-10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培养6~8h。 培养时间视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微混浊时即应中止培养。 二、分离和初步生化试验 取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板1个；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板各1个，于36℃培养18~24h。 志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。 挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经36℃培养18~24h，分别观察结果。 下述培养物可以弃去： a. 在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长的培养物； b. 在18~24h内发酵乳糖、蔗糖的培养物； c. 不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培养物； d. 产气的培养物； e. 有动力的培养物； f. 产生硫化氢的培养物。 凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体)，无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验。 三、血清学分型 挑取三糖铁琼脂上的培养物，做玻片凝集试验。 先用4种志贺氏菌多价血清检查，如果由于K抗原的存在而不出现凝集，应将菌液煮沸后再检查； 如果呈现凝集，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。 如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。可先用群因子血清检查，再根据群因子血清出现凝集的结果，依次选用型因子血清检查。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1~15各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集，可用痢疾志贺氏菌3~12型多价血清及各型因子血清检查。 四、进一步的生化试验 在做血清学分型的同时，应做进一步的生化试验，即： 葡萄糖铵 西蒙氏柠檬酸盐 赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶 pH7.2尿素 KCN生长 水杨苷和七叶苷的分解 除宋内氏菌和鲍氏13型为乌氨酸阳性外，志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。。必要时还应做革兰氏染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反应不符合的菌株，即使能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集，仍不得判定为志贺氏菌属的培养物。
食品微生物学检验 志贺氏菌检验作业指导书
食品微生物学检验志贺氏菌检验 1、范围 适用于食品中志贺氏菌的检验 2、设备和材料 2.1恒温培养箱：36℃±1℃ 2.2冰箱：2℃—5℃ 2.3厌氧培养装置：41.5℃±1℃ 2.4电子天平； 2.5显微镜 2.6均质器； 2.7无菌吸管； 2.8无菌均质杯； 2.9无菌培养皿，直径90mm； 2.10生化鉴定试剂盒； 2.11比浊管及比浊管架； 3、培养基和试剂 3.1志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素 3.2麦康凯琼脂（MAC） 3.3木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂（XLD） 3.4志贺氏菌显色培养基 3.5三糖铁琼脂 3.6营养琼脂平面 4、操作步骤 4.1增菌 以无菌操作取检样25g（mL），加入装有灭菌225mL志贺氏菌增菌肉汤的均质杯，用旋转刀片均质器以8000r/min~10000r/min均质，于41.5℃±1℃厌氧培养16h~20h。 4.2分离 取增菌后的志贺氏菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36℃±1℃培养20h~24h，观察各个平板上生长的菌落形态，若出现的菌落不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h进行观察。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征见表1. 表1 志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征
4.3 初步生化试验 (1)自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI.半固体和营养琼脂斜面各一管。置36℃±1℃培养20h～24h，分别观察结果。 (2)凡是三糖铁琼脂中斜面产碱，底层产酸（发酵葡萄糖，不发酵乳糖，蔗糖）.不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体），不产硫化氢，半固体管中无动力的菌株，挑取其5.3.1中已培养的琼脂斜面上长的菌落，进行生化试验和血清学分型。 5、生化试验 (1)生化试验（生化鉴定试剂盒） a.菌悬液的制备 取一支盛有2ml无菌水的试管；用接种针挑取可疑菌落至无菌水中；仔细研磨，与标准浊度管比较，制成0.5个麦氏浊度的均匀菌悬液。 b.接种与培养 用产品中提供的一次性吸管吸取菌悬液依次滴入瓶中（三糖铁需穿刺划线接种，半固体和葡萄糖铵需穿刺接种），每瓶3滴；如特殊说明，培养温度均为36℃±1℃（无需加盖）。 C.结果判定如下：
实验六 食品中志贺氏菌的检验
实验六食品中志贺氏菌的检验 一、实验目的要求 1、了解食品的质量与志贺氏菌检验的意义。 2、掌握志贺氏菌的生物学特性。 3、掌握志贺氏菌检验的生化试验的操作方法和结果的判断。 4、掌握志贺氏菌属血清学试方法。 5、掌握食品中志贺氏菌检验的方法和技术。 二、原理 志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。所以在食物和饮用水的卫生检验时，常以是否含有志贺氏作为指标。 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μ m ,宽0.5-0.7μ m 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，不运动，有菌毛。志贺氏菌属的主要鉴别特征为：无鞭毛，不运动，对各种糖的利用能力较差，并且在含糖的培养基内一般不产生气体。志贺氏菌的进一步分群分型有赖于血清学试验。 三、试剂和仪器 （一）最先准备的器材 规格名称数量用途 1、500ml广口瓶1个稀释样品 2、500ml三角瓶1个制增菌液 3、250ml三角瓶6个制培养基 4、18×180mm试管8支制三糖铁培养基 5、13×100mm试管40支制蛋白胨水等 6、1ml移液管2支 7、10ml移液管 2 支 8、直径为90 mm平皿12套制SS、EMB平板 9、250ml量筒1支 （二）应灭菌的其它器材 剪刀1把不锈钢汤匙1把称量纸适量 （三）应准备的培养基和试剂 培养基总量所用容器 1.GN 增菌液225ml/瓶1瓶500ml三角瓶 2.EMB培养基100ml/瓶1瓶250ml三角瓶 3.SS琼脂100ml/瓶1瓶250ml三角瓶
志贺氏菌属诊断血清说明书
志贺氏菌属诊断血清学试验操作程序 1.目的 制定标准化的志贺氏菌属诊断血清操作程序，指导对志贺氏菌属的检测2.原理 用志贺氏菌属的代表菌株制成灭活菌抗原分别或混合免疫家兔所得的血清，经吸收出去非特异性凝集素后制成，通过凝集试验原理诊断各型志贺氏菌。3.试剂及实验设备 3.1志贺氏菌属诊断血清：宁波天润生物药业有限公司生产的规格为22种的志 贺氏菌属诊断血清 3.2试剂保存：2~8°C避光保存，防止冻结，在有效期内使用。 3.3实验设备：玻片、吸样枪、接种环、水浴箱、玻璃管、血平板、营养琼脂、 电热高温接种灭菌器。 4.程序步骤 4.1将诊断血清于冰箱取出后平衡至室温。 4.2选择符合志贺氏菌属培养特性，并经初步生化检测符合志贺菌属生物特性的 疑似菌落。 4.3菌群分析 将经18~24h血平板上纯培养的待检菌，分别用志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验，凝集阳性时，再分别用群多价血清做玻片凝集试验，群多价血清凝集阳性时，再分别与相应的单价血清做玻片凝集试验，最终确定其血清分型。如果志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验均为阴性，可能有以下3种可能性：①K抗原的存在，处理方法：取待检菌的纯菌落于生理盐水中制成浓度约2麦氏单位的菌悬液，置于100°C水浴中煮沸30min，泠却至室温后再用诊断血清进行玻片凝集试验；②非典型菌落，处理方法：通过在营养琼脂平板上的传代让其恢复抗原性，再用诊断血清进行玻片凝集试验；③诊断血清型以外的可送市或省CDC检测。 4.4玻片凝集试验法取18~24h血平板上纯培养的待检菌，用生理盐水制成2麦 氏单位的菌悬液，取诊断血清20μL于洁净玻片上，然后取20μL待检菌悬
志贺氏菌检测
志贺氏菌检测 1 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：1.1恒温培养箱：36C±「C； 1.2冰箱：2C?5C； 1.3 膜过滤系统； 1.4 厌氧培养装置：41.5C±1C； 1.5 电子天平：感量0.1g； 1.6显微镜：10X?100X； 1.7 均质器； 1.8 振荡器； 1.9无菌吸管：1ml （具0.01ml刻度）、10ml （具0.1ml刻度）或微量移液器及吸头； 1.10 无菌均质杯或无菌均质袋：容量500ml； 1.11 无菌培养皿：直径90mm； 1.12 pH计或pH比色管或精密pH试纸； 1.13 全自动微生物生化鉴定系统。 2 培养基和试剂 3.1 志贺氏菌增菌肉汤-新生霉素：见附录中1。 3.2 麦康凯（MAC ）琼脂：见附录中2。 3.3 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐（XLD ）琼脂：见附录中3。 3.4三糖铁（TSI）琼脂：见附录中4。 3.5 营养琼脂斜面：见附录中5。 3.6 半固体琼脂：见附录中6。 3.7 葡萄糖铵培养基：见附录中7。 3.8 尿素琼脂：见附录中8。 3.9 B -半乳糖苷酶培养基：见附录中9。 3.10 氨基酸脱羧酶试验培养基：见附录中10。 3.11 糖发酵管：见附录中11。
3.12西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录中12。 3.13粘液酸盐培养基: 见附录中13。 3.14蛋白胨水、靛基质试剂：见附录中14。 3.15志贺氏菌属诊断血清。 3.16生化鉴定试剂盒。 4操作步骤 4.1增菌 以无菌操作取检样25g （ml），加入装有灭菌225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质杯，用旋转刀片式均质器以8000r/min?10000r/min均质；或加入装有225ml志贺氏菌增菌肉汤的均质袋中，用拍击式均质器连续均质1min?2min，液体样品振荡混匀即可。于415C±1C，厌氧培养16h?20h。 4.2分离 取增菌后的志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板和MAC琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36C±1C培养20h?24h，观察各个平板上生长的菌落形态。宋内氏志贺氏菌的单个菌落直径大于其他志贺氏菌。若出现的菌落 不典型或菌落较小不易观察，则继续培养至48h再进行观察。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征见表1。 表1志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 4.3初步生化试验 4.3.1自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，分别接种TSI、半固体和营养琼脂斜面各一管，置36C±1C培养20h?24h，分别观察结果。 4.3.2凡是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸（发酵葡萄糖，不发酵乳糖，蔗糖）、不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）、不产硫化氢、半固体管中无动力的菌株，挑取其4.3.1中已培养的营养琼脂斜面上生长的菌苔，进行生化试验和血 清学分型。 4.4生化试验及附加生化试验
志贺氏菌的检测
图书分类号： 密级： 毕业设计(论文) 志贺氏菌的检测方法SHIGELLA DETECTION METHOD 学生姓名冯圣军 学院名称食品生物工程学院 专业名称生物技术及应用 指导教师李文 2010年4月18日
徐州工程学院学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用或参考的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标注。 本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 论文作者签名：日期：年月日 徐州工程学院学位论文版权协议书 本人完全了解徐州工程学院关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：本校学生在学习期间所完成的学位论文的知识产权归徐州工程学院所拥有。徐州工程学院有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的纸本复印件和电子文档拷贝，允许论文被查阅和借阅。徐州工程学院可以公布学位论文的全部或部分内容，可以将本学位论文的全部或部分内容提交至各类数据库进行发布和检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 论文作者签名：导师签名： 日期：年月日日期：年月日
摘要 志贺氏菌是引起人类肠道疾病常见的病原菌，在我国感染性腹泻病原菌中高居首位。为了能够有效地预防、治疗和控制水或食源性传染病，对水或食品中志贺氏菌的快速检测与鉴定显得十分重要。本文主要介绍了志贺氏菌的各项检测技术及其优缺点，并对志贺氏菌的检验技术进行了展望。 关键词志贺氏菌；检测技术；展望
Abstract Shigella is a common disease caused by human intestinal bacteria, pathogens of infectious diarrhea in China topped the rankings. In order to effectively prevent, treat and control water or food-borne diseases, water or food in Shigella rapid detection and identification is very important. This paper describes the Shigella detection technology and its strengths and weaknesses, and Shigella inspection techniques were reviewed. Keywords Shigella detection methods food safety
志贺氏菌属及检验
志贺氏菌属及检验 志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。 一、生物学性状 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μ m ,宽0.5-0.7μ m 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C为49-53克分子%（Tm法）。 需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。37℃培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。 本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛基质产生不定， S。根据生化反应可进行初步分类。 甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H 2 志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同，可分为二大组。 A、不分解甘露醇组：主要为志贺氏菌。又根据能否产生靛基质，进一步分靛基质阳性（1、3、4、5、 6、9、10型）和靛基质阴性（2、 7、8型）的志贺氏痢疾菌。 B、分解甘露醇组：包括福氏、鲍氏、宋内氏菌。再按乳糖分解情况，分为迟缓分解乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。后者进一步再根据靛基质产生与否，分靛基质阳性（福氏菌1、2、3、4、5型和鲍氏菌5、7、9、11、13、15型）和靛基质阴性（福氏菌6型和鲍氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14）二类（见表一） 抗原构造与分型：志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）组成。主要抗原有三种。 型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是光滑型菌株所含有的重要抗原。当菌株变为粗糙型时，此抗原也常随之消失，各菌型所含的型抗原不同，可用于区别菌种的型别。 群特异性抗原：为光滑型菌株的次要抗原，也是菌体抗原的一种。特异性较低，常在数种近似的菌内出现。在福氏菌株中，由于所含群抗原不同，可将某些菌型分为多种亚型，如福氏菌2型，根据群抗原不同，
志贺氏菌检测新国标要求厌氧条件增菌的解决方案.
志贺氏菌新国标要求厌氧条件增菌的解决方案 最新发布的志贺氏菌国标GB_4789.5-2012(食品安全国家标准_食品微生物学 检验_志贺氏菌检验方法即将于2012年7月17日实施,新国标中关于增菌部分有重大改变,要求在厌氧条件下增菌过夜,由于增菌通常在500mL三角瓶或均质袋中进行,这就对所有检测志贺氏菌的政府检测机构和企业提出更高的硬件要求。 由于志贺氏菌是兼性厌氧菌,此次国标变更增菌方法为厌氧条件下增菌,目的是想在增菌时抑制部分好氧菌的生长,提高志贺氏菌的检出率,提出灵敏度。 很多微生物工作者在讨论用什么方法来实现厌氧增菌,由于增菌时可采用三角瓶、试剂瓶或均质袋,放在何种容器中进行增菌,要根据样品容量、增置设备的承受能力等各种因素进行综合考虑。 现本人给广大有检测志贺氏菌需求的客户推荐几种解决方案: 1 大培养空间的方案—各种大型厌氧工作站,如英国DWS公司的A35新型厌氧工作站(带触摸屏:适合每日检测量大于50个样品/以上的检测机构和企业。可以方便转入三角瓶(瓶子高度要求小于185mm和均质袋,内部培养空间至少可以放置60个500mL三角瓶,提供精确的温度、湿度和气体控制,触摸屏控制系统。 2中等培养空间的方案—各种紧凑型厌氧培养箱,如DG250厌氧工作站:适合每日检测量20-30个左右的检测机构和企业。提供精确的温度、湿度和气体控制。 3最小培养空间的方案—各类厌氧罐系统,如Jar Gassing system(厌氧罐气体控制系统:适合每日检测量小于10个的检测机构。样品放入厌氧罐中(可选放一个瓶 子或4个瓶子的厌氧罐,通过抽真空和充混合气体,将内部的氧气降至1%左右,然后通过混合气体中的氢气,在钯催化条件下将微量的氧气反应生成水,达到厌氧条件。此方案只提供抽真空和充气系统及厌氧罐,客户需要将厌氧罐放入其它培养箱中培养。
志贺氏菌检测
志贺氏菌检测 1 设备与材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其她设备与材料如下： 1、1 恒温培养箱:36℃±1℃； 1、2 冰箱：2℃~５℃; 1、3 膜过滤系统； 1、4 厌氧培养装置：4１、５℃±１℃; 1、5电子天平：感量0。1g； １、6显微镜:１0×~100×; 1、７均质器； １、８振荡器; 1、9 无菌吸管:1ml（具0、０１ml刻度)、10mｌ（具0、1ｍl刻度)或微量移液器及吸头； 1、1０无菌均质杯或无菌均质袋：容量５０0ml； １、11无菌培养皿:直径９0mm； 1、1２ｐＨ计或pＨ比色管或精密pＨ试纸; 1、１3全自动微生物生化鉴定系统。 2培养基与试剂 3、１志贺氏菌增菌肉汤—新生霉素：见附录中１。 3、２麦康凯(MAC）琼脂：见附录中2. 3、3 木糖赖氨酸脱氧胆酸盐(XLD)琼脂：见附录中3。 3、4 三糖铁（TSI）琼脂:见附录中4。 3、5 营养琼脂斜面：见附录中5。 3、6 半固体琼脂:见附录中6． 3、7 葡萄糖铵培养基：见附录中7。 3、8尿素琼脂：见附录中8。 3、9 β－半乳糖苷酶培养基:见附录中9。 ３、10氨基酸脱羧酶试验培养基:见附录中１０。 ３、11 糖发酵管:见附录中11。
3、１2 西蒙氏柠檬酸盐培养基:见附录中12. 3、1３粘液酸盐培养基:见附录中１3。 ３、14蛋白胨水、靛基质试剂：见附录中14。 3、15 志贺氏菌属诊断血清. 3、１6 生化鉴定试剂盒。 4 操作步骤 4、1 增菌 以无菌操作取检样25g(ml）,加入装有灭菌２25mｌ志贺氏菌增菌肉汤得均质杯,用旋转刀片式均质器以8００0ｒ／mｉn~10000r/ｍin均质;或加入装有225ｍｌ志贺氏菌增菌肉汤得均质袋中，用拍击式均质器连续均质1ｍiｎ~2min，液体样品振荡混匀即可。于４1、５℃±１℃，厌氧培养16h～20h。 ４、２分离 取增菌后得志贺氏增菌液分别划线接种于XLD琼脂平板与MAＣ琼脂平板或志贺氏菌显色培养基平板上，于36℃±1℃培养２０h~24h，观察各个平板上生长得菌落形态。宋内氏志贺氏菌得单个菌落直径大于其她志贺氏菌.若出现得菌落不典型或菌落较小不易观察,则继续培养至48h再进行观察。志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上得菌落特征见表1. 表1 志贺氏菌在不同选择性琼脂平板上得菌落特征 4、3初步生化试验 4。3.1 自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落,分别接种ＴＳI、半固体与营养琼脂斜面各一管，置36℃±1℃培养２0ｈ～２4h,分别观察结果。４．3。2 凡就是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸(发酵葡萄糖,不发酵乳糖,蔗糖）、不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体）、不产硫化氢、半固体管中无动力得菌株,挑取其４、3、1中已培养得营养琼脂斜面上生长得菌苔，进行生化试验与血清学分型。 4、４生化试验及附加生化试验
志贺氏菌,的监测方法,
志贺氏菌是引起人类肠道疾病常见的病原菌，在我国感染性腹泻病原菌中高居首位。为了能够有效地预防、治疗和控制水或食源性传染病，对水或食品中志贺氏菌的快速检测与鉴定显得十分重要。本文主要介绍了志贺氏菌的各项检测技术及其优缺点，并对志贺氏菌的检验技术进行了展望 志贺氏菌的检测方法 随着生物实验技术的发展，志贺氏菌的检测和鉴定技术也在不断的完善，大致可分为三大类：常规生化鉴定方法、免疫学方法以及分子生物学方法。其中最为常用的是分子生物学上的常规PCR检测。 2.1 常规生化鉴定方法 常规生化检测须经过增殖培养、分离纯化、生化试验、血清学实验等，检验步骤繁琐、耗时长、准确性低，且一次检测完成样品项数较少[5]，不能应对市场需求的快速准确检验方法的要求。但这种方法具有直观、准确、稳定性好且假阳性率低等特点，因此一直被沿用至今。国家标准方法[6]中采用常规生化鉴定方法对志贺氏菌进行检测，整个过程需要4～5d。通过对SS 培养基、Mac 培养基、HE 培养基和MT 培养基进行比较，发现SS 培养基对志贺氏菌的检出率最高。为防止漏检其他菌型，可同时采用Mac 培养基来提高检出率。 2.2 免疫学方法 免疫学的发展为致病菌的快速检测提供了新方法，同时大大提高了致病菌检测的灵敏性和特异性。除了凝集实验、沉淀实验和补体实验等经典的免疫学检测方法，以免疫学方法为基础建立起来的检测技术也已被应用于志贺氏菌的检测。 2.2.1 酶联免疫技术 酶联免疫技术 (enzyme linked immunosorbent assay，ELISA) 是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技术。建立间接 ELISA 方法以检测检测志贺菌纯培养液，其检出限为105～106CFU/ml；建立双抗夹心 ELISA 方法检测含0.1～1CFU/ml 志贺氏菌的样品在增菌13h 后可检出阳性反应，含1～10CFU/ml志贺氏菌的样品在增菌11h 后可检出阳性；用间接 Dot-ELISA 方法检测志贺氏菌的检出限可达106CFU/ml。E L ISA 法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点，适用于志贺氏菌的快速检测，但ELISA 方法影响因素多，假阳性率高且不易确定，还需要其他方法辅助检测。 2.2.2 SPA协同凝集法 金黄色葡萄球菌 A 蛋白(Staphylococcal protein A，SPA)是某些金黄色葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白，具有同人和多种哺乳动物血清IgG分子中的Fc片段结合的能力。SPA 协同凝集法是用已知标准血清吸附到含 A 蛋白的金黄色葡萄球菌表面，使之成为吸附抗体的载体，再以此去诊断相应未知抗原产生的肉眼可见的凝集颗粒。用含 A 蛋白丰富的金黄色葡萄球菌菌体与志贺氏菌抗血清在一定条件下混合致敏，让抗体结合到金黄色葡萄球菌细胞壁的A 蛋白上制成SPA 诊断试剂，样品经增菌后即可用SPA 诊断试剂来检验。SPA 协同凝集法在 24～48h 内即可得到检测结果，且检出率高，可作为一种快速灵敏的检验方法。由于SPA 能结合大量抗体，大大提高了灵敏性，缩短了检验周期。 2.3 分子生物学方法 以分子生物学为基础建立的众多检测技术以其敏感、快速、高特异等特点成为生物技术革命的新产物,已经应用于食源性致病菌的检测。检测志贺氏菌的分子生物学技术主要包括：聚合酶链反应、脉冲场凝胶电泳、基因芯片和探针技术等。 2.3.1 聚合酶链式反应 志贺氏菌的传统检测方法耗时长，操作繁琐，已不能满足食品安全控制的需要。分子生物学尤其是 PCR技术的发展给志贺氏菌的快速检测提供了广阔的空间。在此主要介绍用于志贺
志贺氏菌属
志贺氏菌属 志贺氏菌属（Shigella ）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临床上能引起痢疾症状的病原生物很多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可引起人类痢疾，其中以志贺氏菌引起的细菌性痢疾最为常见。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可引起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。 一、生物学性状志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3 μm, 宽0.5-0.7 μm 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C 为49-53 克分子%（Tm法）。 需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在普通培养基上生长，最适温度为37℃，最适pH 为6.4-7.8 。37℃培养18-24 小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长，无菌膜形成。 本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌迟缓发酵乳糖。靛基质产生不定，甲基红阳性，VP 试验阴性，不分解尿素，不产生H2S。根据生化反应可进行初步分类。 志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同，可分为二大组。A、不分解甘露醇组：主要为志贺氏菌。又根据能否产生靛基质，进一步分靛基质阳性（1、3、4、5、6、9、10型）和靛基质阴性（2、7、8 型）的志贺氏痢疾菌。 B、分解甘露醇组：包括福氏、鲍氏、宋内氏菌。再按乳糖分解情况，分为迟缓分解乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。后者进一步再根据靛基质产生与否，分靛基质阳性（福氏菌1、2、3、4、5 型和鲍氏菌5、7、9、11、13、15 型）和靛基质阴性（福氏菌6 型和鲍氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14）二类（见表一） 表一志贺氏菌属生化反应的分类 葡萄糖（+） 福氏菌6 型福氏菌（1、2、宋内氏菌 鲍氏菌（1、2、3 、4、5 型）， 3、4、6、8 鲍氏菌（5、7、9、10、12、14 型）11 、13、15型）抗原构造与分型：志贺氏菌属细菌的抗 原结构由菌体抗原（O）及表面抗原K）组成。主要抗原有三种。 型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是光滑型菌株所含有的重要抗原。当菌株变为粗糙型时，此抗原也常随之消失，各菌型所含的型抗