山羊痘病毒疫苗株与野毒株PCR-RFLP鉴别方法的建立及应用

山羊痘病毒疫苗株与野毒株PCR-RFLP鉴别方法的建立及

应用

作者：朱伟;熊毅;付薇;刘棋

作者机构：广西动物疫病预防控制中心,广西,南宁,530001;广西动物疫病预防控制中心,广西,南宁,530001;广西动物疫病预防控制中心,广西,南宁,530001;广西动物疫病预防控制中心,广西,南宁,530001

来源：动物医学进展

ISSN：1007-5038

年：2008

卷：029

期：012

页码：17-19

页数：3

中图分类：S852.659.1;S854.43

正文语种：chi

关键词：山羊痘病毒;野毒株;疫苗株;聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测法

摘要：为了建立区分疫苗株与广西分离株的检测方法,根据GenBank上的山羊痘病毒序列设计1对引物,用来扩增山羊痘病毒P32基因,通过对国内疫苗株及6株广西分离株的P32基因进行克隆、测序比较发现,所有广西分离株核苷酸651位的碱基全部由T变为C, 647位～652位核苷酸构成由TGTATA变异为TGTACA,多了1个限制性内切酶Bsp1407Ⅰ位点,因此用特异性引物扩增出739 bp的目的片段后,再用限制性内切酶Bsp1407Ⅰ进行酶切分析,疫苗株可以切成135 bp和604 bp 3个片段,广西分离株可以切成135、226 、378 bp 3个片段.结果表明,所建立的PCR-RFLP方法可以区分疫苗株和广西分离株.