ELISA说明书翻译
实验步骤
1.开始ELISA前一天，稀释包被抗体，取酶标板每孔加入100ul包被抗体溶液，4度过夜
2.使用前将所有试剂放置室温，强烈建议所有标准品和样品做复孔或三孔，各次检测均要
求做标准曲线
3.洗涤液不少于300ul洗板4次，并在吸水纸上拍干板子，后续洗涤液同此
4.为了阻断非特异性结合和减少背景，每孔加200ul样品稀释液
5.封板并在摇床上室温孵育1h
6.在上述期间，准备标准品稀释液和适当的样品稀释液（如必需）
7.标准品稀释：500 pg/ml, 250 pg/ml, 125 pg/ml,62.5 pg/ml, 31.25 pg/ml, 15.6 pg/ml,
7.8pg/ml 和0 pg/ml
8.如步骤3洗板4次
9.每孔加入100ul标准品稀释液和样品到对应孔，如有需要可对样品进行稀释
10.封板并在摇床上室温孵育2h
11.如步骤3洗板4次
12.每孔加入100ul已稀释的二抗，封板并在摇床上室温孵育1h
13.如步骤3洗板4次
14.每孔加入100ul 稀释的HRP，封板并在摇床上室温孵育30min
15.如步骤3洗板5次，每次洗涤洗涤液浸泡30s至1min，有利于减少背景
16.每孔加入100ulTMB显色液，并在摇床孵育15-30min，阳性孔将变为淡蓝色，此步无需
封板
17.每孔加入100ul终止液终止反应，阳性孔将由蓝色变为黄色
18.终止反应半小时内测定OD值（450nm）
ELISA实验基本原理
基本原理
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
方法类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）双抗体夹心法
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：
（1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。
（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
（3）加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
（4）加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
（二）双位点一步法
在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步（图15-5）。这种双位点
一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显着提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法测定中，应注意钩状效应（hookeffect），类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。
（三）间接法测抗体
间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下：
（1）将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。
（2）加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。
（3）加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。
（4）加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。
本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。
（四）竞争法
竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下：
（1）将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤。
（2）待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原，则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原，则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合，竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会，使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原，保温后，酶标抗原与固相抗体的结合可达最充分的量。洗涤。（3）加底物显色：参考管中由于结合的酶标抗原最多，故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。
（五）捕获法测IgM抗体
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗本多用捕获法，先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，在去除IgG 后再测定特异性IgM.操作步骤如下：
（1）将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM.洗涤。
（2）加入稀释的血清标本：保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。
（3）加入特异性抗原试剂：它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。
（4）加入针对特异性的酶标抗体：使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。
（5）加底物显色：如有颜色显示，则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在，是为阳性反应。
（六）应用亲和素和生物素的ELISA
亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成，可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉和素（strepavidin）。生物素（biotin）又称维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，生物素-羟基琥珀亚胺酯（biotin-hydroxys uccinimide,BNHS）可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合，虽不属免疫反应，但特异性强，亲和力大，两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置，可以连接更多的生物素化的分子，形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELIS偶联起来，就可大提高ELISA的敏感度。
亲和素-生物素系统在ELISA中的应用有多种形式，可用于间接包被，亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素，原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合，通过亲和素-生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的抗体或抗原量，而且使其结合点充分暴露。另外，在常规ELISA中的酶标抗体也可用生物素化的抗体替代，然后连接亲和素-酶结合物，以放大反应信号。
ELISA 普遍用作非放射性同位素的成键化验。在这种方法中，通常标准配体是固定的，通过加入溶液相受体或蛋白质来使之成键。通过加入与受体特异性反应的抗体来定量成键的受体，而且最初抗体的量以加入第二种能显色的抗体测量。第二种抗体能识别抗体的末端，在其末端的碱性磷酸酯或过氧化物酶等与酶发生反应，从而使溶液显色。
间接ELISA
1. 溶液准备：包被液：50mM Na2CO3 （pH9.6 ），20mMTris-HCl （pH8.5 ）或10mM PBS （pH7.2 ）
封闭液：一般封闭用BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶等
洗涤液：0.02-0.05%Tween-20的0.1M磷酸盐缓冲液或者Tris盐缓冲液（pH7.4 ）
2. 实验程序：
1 ）将抗原按适当浓度溶解于包被液中。
2 ）在对应的孔中加入100μl抗原，室温孵育2h或4℃过夜。
3 ）倒空液体并拍干残留液体，用300μl洗涤液清洗两次。
4 ）每个孔中加300μl封闭液，孵育1h.
5 ）倒空液体并拍干残留液体，用300μl洗涤液清洗两次。
6 ）每个孔中加100μl一抗，37℃孵育1h或室温孵育3h.
7 ）倒空液体并拍干残留液体，每个孔中加满洗涤液，倒空液体并拍干残留液体，重复3次。
8 ）每个孔中加100μl二抗，室温孵育1h.
9 ）倒空液体并拍干残留液体，每个孔中加满洗涤液，倒空液体并拍干残留液体，重复3次。
10 ）用洗涤液浸泡5min,拍干残留液体，这次的洗涤步骤对于减少背景信号是很重要的。
11 ）每个孔中加满洗涤液，倒空液体并拍干残留液体，重复5次。
12 ）每个孔中加100μl底物，显色30min并立即在405-410nm读数。
夹心ELISA
1. 溶液准备：
包被液：50mM Na2CO3 （pH9.6 ），20mMTris-HCl （pH8.5 ）或10mM PBS （pH7.2 ）封闭液：一般封闭用BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶等
洗涤液：0.02-0.05%Tween-20的0.1M磷酸盐缓冲液或者Tris盐缓冲液（pH7.4 ）
AKP偶联的链球菌亲和素溶液：用1×封闭液稀释酶偶联物
2. 实验程序：
1 ）将捕获抗体包被液稀释至相应的浓度。
2 ）在对应的孔中加入100μl抗体溶解液，室温孵育2h或4℃过夜。
3 ）倒空液体并拍干残留液体，用300μl洗涤液清洗两次。
4 ）每个孔中加300μl封闭液，孵育1h.
5 ）倒空液体并拍干残留液体，用300μl洗脱液清洗两次。
6 ）每个孔中加100μl生物素标记的检测抗体，37℃孵育1h或室温孵育3h.
7 ）倒空液体并拍干残留液体，每个孔中加满洗涤液，倒空液体并拍干残留液体，重复3次。
8 ）每个孔中加100μl AKP偶联的链球菌亲和素，室温孵育1h.
9 ）倒空液体并拍干残留液体，每个孔中加满洗脱液，倒空液体并拍干残留液体，重复3次。
10 ）用洗涤液浸泡5min，拍干残留液体，这一步对于减少背景信号是很重要的。
11 ）每个孔中加满洗涤液，倒空液体并拍干残留液体，重复5次。
12 ）每个孔中加100μl底物，显色30min并立即在405-410nm读数。
ELISA测定操作规程（以小鼠TNF-a为例）
一、原理与意义
通过抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象,对样品中的抗原或抗体进行定性和定量检测。本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法,用抗小鼠TNF-a单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TNF-a与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠TNF-a抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin)与生物素结合,加入酶底物邻苯二胺(OPD),出现黄色,加终止液浓硫酸,颜色变深,在492nm处测OD值,TNF-a浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中TNF-a浓度。它是样品中蛋白质含量检测的定性和定量方法。
二、试剂盒的组成
96/48微孔板(1块,已包被抗小鼠TNF-a单抗)、样品稀释液(1瓶)、第一抗体工作液(1瓶)、酶标抗体工作液(1瓶)、底物稀释液(1瓶)、终止液(1瓶)、洗涤液(20×,1瓶)、标准品(2000 pg/ml,2管,冻干粉)、OP D片(3片)、坐标纸(1张)。
三、实验准备工作
1、试剂配制:洗涤液按1:20三蒸水稀释;标准品在用前每管加入200 ?l蒸馏水溶解即可(具体见说明书);底物工作液应在显色前5-10 min将OPD片放入底物稀释液中溶解,每片加5 ml液。
2、标本收集:采集血清或体液尽早检测,2~8 ℃保存一天需更长时间须冷冻(-20℃)保存,避免反复冻融;组织(胎肝、胎脑等)实验前一天组织匀浆,用90%体积RIPA裂解液(PH 8.0,50 mM Tris HCl、1% NP-40、, 0.25% sodium deoxycholate、150 mM NaCl、1 mM EDTA)和10%体积的10 mM PMSF进行组织匀浆(10%),冰上裂解30 min,12000×20min后取上清,4℃待用。
3、器材准备:酶标仪、37 ℃恒温烤箱、滤纸、托盘、量筒、烧杯、各种规格的移液器、离心管、管架和废液缸等。三蒸水自备。
四、操作步骤
1、设立标准孔8孔(根据样品蛋白浓度可调整为6孔),每孔中先各加入样品稀释液100 ul,第一孔再加标准品100 ul,混匀后用移液器吸出100 ul,移至第二孔,如此反复作对倍稀释至第7孔,最后,从第7孔中吸出100 ul弃去,使之体积均为100 ul。第8孔为空白对照。
2、加样:待测样品孔中每孔各加入待测样品100ul。
3、将反应板置于37 ℃×120 min。
4、洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上扣干。
5、每孔中加入第一抗体工作液50ul。
6、将反应板充分混匀后置37 ℃×60 min。
7、洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4~6次,向滤纸上扣干。
8、每孔加酶标抗体工作液100ul。
9、将反应板置于37 ℃120 min。
10、洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4~6次,向滤纸上扣干。
11、每孔中加入底物工作液100ul, 置于37 ℃暗处反应5~10 min。
12、每孔中加入50ul终止液混匀。
13、用酶标仪在492 nm处测吸光值。
五、计算结果与判断
1、以标准品1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、0 pg/ml之OD值在半对数纸上作图,画出标准曲线。
2、所有OD值都应减去空白管值后再计算。
根据样品OD值在该标准曲线图上查出或根据标准曲线公式换算出相应样品中TNF-a含量。
六、注意事项
1、以上标准孔及待查样品均建议做复孔,每次测定均要做标准孔。
2、本试剂盒宜置-20 ℃冷藏保存。
3、本试剂盒取出的试剂在室温(20~25 ℃)环境下使用,溶液应轻轻摇匀后使用。
4、本试剂盒含2M硫酸,不要将它与含叠氮化钠的废物混在一起。
5、板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。
6、避免交叉污染。如洗涤时向样品待测蛋白含量可能高的一侧倾倒。
7、提前24 h打开烤箱预热。
8、底物工作液应在显色前5~10 min配制。若配制时间过长,会变质。
9、甩尽孔内液体,每孔加350 ul左右洗涤液,静止30 s后甩尽。尤其加抗体工作液或底物时尽量弄干孔内液体。且孵育过程中要盖住各反应孔,防止液体恢复。
10、尽量防止样品待测蛋白浓度过高而出现酶标仪显示out。当酶标仪测定值出现许多out时,可通过稀释一定倍数后用可见光分光计测定,所有孔均同时测定。
ELISA的操作要点
优质的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出准确的结果。
一、标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外，在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以H RP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂。
二、试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
三、加样
在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA 板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴，以免发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定（如间接法ELISA）需用稀释的血清，可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。
四、保温
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育(incubation)，有人称之为孵育，在ELISA中似不恰当。
ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程，因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃（冰箱温度）等。37℃是实验室中常用的保温温度，也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时，实验表明，两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时，产物的生成可达顶峰。为加速反应，可提高反应的温度，有些试验在43℃
进行，但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底，在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜，以形成最多的沉淀。但因所需时间太长，在ELISA中一般不予采用。
保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应，操作时的室温应严格限制在规定的范围内，标准室温温度是指20-25℃，但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时，ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点，一个人操作时，一次不宜多于两块板同时测定。
五、洗涤
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中，洗涤是最主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。
洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种，过程如下：
（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液；b.用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去）；c.浸泡，即将洗涤液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇动，浸泡时间不可随意缩短；d.吸干孔内液体。吸干应彻底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；e.重复操作c和d，洗涤3 -4次（或按说明规定）。在间接法中如本底较高，可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从而削弱蛋白质与固相载体的结合，并借助于亲水基团和水分子的结合作用，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20，其浓度可在0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
（2）流水冲洗式流水冲洗法最初用于小珠载体的洗涤，洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置，使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗，持续冲洗2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲洗式则好比淋浴，其洗涤效果更为彻底，且也简便、快速。已有实验表明，流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。
六、显色和比色
（一）显色
显色是ELISA中的最后一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内，阴性孔可保持无色，而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行，时间一般不需要严格控制，有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间，及时判断。
OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深，再延长反应时间，可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD 产物用硫酸终止后，显色由橙黄色转向棕黄色。
TMB受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性，宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后，约40分钟显色达顶峰，随即逐渐减弱，至2小时后即可完全消退至无色。TMB的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠（SDS）等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24小时）不褪，是目视判断的良好终止剂。此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。
（二）比色
比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。以软板为载体的试验，需先将板置于标准96孔的座架中，才可进行比色。最好在加底物液显色前，先将软板边缘剪净，这样，此板就可完全平妥坐入座架中。比色时应先以蒸馏水校零点，测读底物孔（未经任何反应仅加底物液的孔）和空白孔（以生理盐水或稀释液代替标本作全过程的孔），以记录本次试验的试剂状况。其后可用空白孔以蒸馏水校零点，以上各孔的吸光度需减去空白孔的吸光度，然后进行计算。
比色结果的表达以往通用光密度（oplical density，OD），现按规定用吸光度（absorbence，A），两者含义相同。通常的表示方法是，将吸收波长写于A字母的右下角，如OPD的吸收波长为492nm，表示方法为"A492nm"或"OD492nm"。
（三）酶标仪
酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读ELISA结果吸光度的光度计。针对固相载体形式的不同，各有特制的适用于板、珠和小试管的设计。许多试剂公司配套供应酶标仪。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准确性、重复性、精确度和可测范围、线性等等。优良的酶标仪的读数一般可精确到0.00 1，准确性为±1%，重复性达0.5%。举例说，若某孔测得的A值为1.083，则该孔相对于空气的真实A值应为1.083±0.01（1.073~1.093），重复测定数次，其A值均应1.083±0.05（1.078~1.088）在之间。酶标仪的可测范围视各酶标仪的性能而不同。普通的酶标仪在0.000~2.000，新型号的酶标
仪上限拓宽达2.900，甚至更高。超出可测上限的A值常以"*"或"over"或其它符号表示。应注意可测范围与线性范围的不同，线性范围常小于可测范围，比如某一酶标仪的可测范围为0.000~2.900，而其线性范围仅0.000~2.000，这在定量ELISA中制作标准曲线时应予注意。
酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15~30℃，使用前先预热仪器15-30分钟，测读结果更稳定。
测读A值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，第一次在最适波长（W1），第二次在不敏感波长（W2），两次测定间不移动ELI SA板的位置。例如OPD用492nm为W1，630nm为W2，最终测得的A值为两者之差（W1-W2）。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
各种酶标仪性能有所不同，使用中应详细新闻记者说明书。
七、结果判断
1、定性测定
定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答，分别用"
阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中，将标本作一系列稀释后进行试验，呈阳性反应的最高稀释度即为滴度。根据滴度的高低，可以判断标本反应性的强弱，这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。
在间接法和夹心法ELSIA中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。两类反应的结果判断方法不同，分述于下。
（1）间接法和夹心法
这类反应的定性结果可以用肉眼判断。目视标本也无色或近于无色者判为阴性，显色清晰者为阳性。但在ELSIA中，正常人血清反应后常可出现呈色的本底，此本底的深浅因试剂的组成和实验的条件不同而异，因此实验中必须加测阴性对照。阴性对照的组成应为不含受检物的正常血清或类似物（见3.6）。在用肉眼判断结果时，更宜用显色深于阴性对照作为标本阳性的指标。
目视法简捷明了，但颇具主观性。在条件许可下，应该用比色计测定吸光值，这样可以得到客观的数据。先读出标本（sample，S）、阳性对照（P）、和阴性对照（N）的吸光值，然后进行计算。计算方法有多种，大致可分为阳性判定值法和标本与阴性对照比值法两类。
a．阳性判定值
阳性判定值（cut-off value）一般为阴性对照A值加上一个特定的常数，以此作为判断结果阳性或阴性的标准。
用此法判断结果要求实验条件十分恒定，试剂的制备必须标准化，阳性和阴性的对照品应符合一定的规格，须配用精密的仪器，并严格按规定操作。阳性判定值公式中的常数是在这特定的系统中通过对大量标本的实验检测而得到的。现举某种检测HBsAg的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照品为不含HBsAg 的复钙人血浆，阳性对照品HBsAg的含量标明为P=9±2ng/ml.每次试验设2个阳性对照和3个阴性对照。测得A值后，先计算阴性对照A值的平均数（NCX）和阳性对照A值的平均数（PCX），两个平均数的差（P-N）必须大于一个特定的数值（例0.400），试验才有效。3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX，并≤1. 5×NCX，如其中之一超出此范围，则弃去，而已另两个阴性对照重新计算NCX；如有两个阴性对照A值超出以上范围，则该次实验无效。阳性判定值按下式计算：阳性判定值=NCX+0.05标本A值＞阳性判定值的为阳性，小于阳性判定值的为阴性。应注意的是，式中0.05为该试剂盒的常数，只适合于该特定条件下，而不是对各种试剂均可通用。
根据以上叙述可以看出，在这种方法中阴性对照和阳性对照也起到试验的质控作用，试剂变质和操作不当均会产生"试验无效"的后果。
b.标本/阴性对照比值
在实验条件（包括试剂）较难保证恒定的情况下，这种判断法较为合适。在得出标本（S）和阴性对照（N）的A值后，计算S/N值。也有写作P/N的，这里的P不代表阳性(positive)，而是病人（patient）的缩写，不应误解。为避免混淆，更宜用S/N表示。在早期的间接法ELISA中，有些作者定出S/N为阳性标准，现多为各种测定所沿用。实际上每一测定系统应该用实验求出各自的S/N的阈值。更应注意的是，N所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。有的试剂盒中所设阴性对照为不含蛋白质或蛋白质含量较底的缓冲液，以致反应后产生的本底可能较正常人血清的本底低得多。因此，这类试剂盒规，如N<0.05（或其他数值），则按0.05计算，否则将出现假阳性结果。
（2）竞争法
在竞争法ELISA中，阴性孔呈色深于阳性孔。阴性呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争抑制物的量，一般调节阴性对照的吸光度在1.0-1.5之间，此时反应最为敏感。
竞争法ELISA不易用自视判断结果，因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异，一般均用比色计测定，读出S、P和N的吸光值。计算方法主要也有两种，即阳性判定值法和抑制率法。
a. 阳性判定值法
与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同，但在计算公式中引入阳性对照A值，现举某种检测抗HBc的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗HBc的复钙人血浆，阳性对照中抗HBc含量为125±100u/ml.每次试验设2个阳性对照和3个阴性对照。测得A值后，先计算阴性对照A值的平均值（NCX）和阳性对照A值的平均数（PCX），两个平均数的差（N-P）必须大于一个特定的数值（例如0.300），试验才有效。3个阴性对照A值均应小于2.000，而且应≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范围，则弃去，而以另2个阴性对照重新计算×NCX；如有2个阴性对照A超出以上范围，则该次实验无效。阳性判定值按下式计算：
阴性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX
标本A值≤阳性判定值的反应为阳性，A＞阳性判定值的反应为阴性。
b. 抑制率法
抑制率表示标本在竞争结合中标本对阴性反应显色的抑制程度，按下式计算：
抑制率（%）= （阴性对照A值-标本A值）×100%/阴性对照A值
一般规定抑制率≥50%为阳性，＜50%为阴性。
2、定量测定
ELSIA操作步骤复杂，影响反应因素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线最高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数纸，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是最理想的检测区域。甲胎蛋白质ELISA测定的标准曲线示例见图4-1。
测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线示例见图4-2.注意图中横坐标为对数关系，这更有利于测定系统的表达。
新型酶标仪一般带有自动软件可进行定量分析。
电器电子的英文说明书写法
电器、电子产品说明书英译的特点和技巧。 (参考教材P202-210) 1 概述 电器、电子产品说明书是科技文体的一种，它以传递产品的有用信息为主要目的，内容主要包括： 前言、部件、基本功能、使用指南，故障排除等。 其中，基本功能和使用指南是主体部分。 一些简单易用的电器、电子产品，其说明书也相对简略。电器、电子产品说明书译文的预期功能主要是提供商品特点和使用信息，通过让译语用户了解产品的性能、特点、用途、使用和保管等方面，促使其完成购买行为。 2 电器、电子产品说明书英译的特点 特点概括起来包括： 准确性(accuracy)、 简明性(conciseness)、 客观性(objectivity)等。 2.1 准确性 电器、电子产品说明书是为了指导读者正确使用产品而写，它传递的信息（例如：各种数据、图表）首先必须科学准确。在英译过程中，必须
把信息内容如实准确地翻译出来，显化原文隐含的信息，消除歧义。一些专业术语、固定用语和习惯说法必须表达得准确、地道，例如在翻译数码相机说明书时会遇到这样一些术语： 镜头后盖（ear lens cap）、 三角架（tripod）、 数码变焦（digital zoom）、 快门帘幕（shutter curtain）、曝光不足（under exposure）、取景器（view finder）等，需按专业说法表达出来，不可任意生造。 2.2 简明性 简明性特点表现为： (1)内容条目简洁明了，步骤清晰，逻辑性强。 (2)常用缩略形式。例如：液晶显示（Liquid Crystal Display) 常缩写成LCD; 发光二极管(Light Emitting Diode) 常缩写成LED; 中央处理器(Central Processing Unit) 常缩写成CPU; 自动对焦（Auto focus）常缩写成AF; 手动对焦（Manual focus）常缩写成MF 2.3 客观性 电器、电子产品说明书将该产品的相关内容客观地呈现出来，引导读者按照一定的思维逻辑循序渐进，知道该做什么，怎么做，进而了解和正确使用该产品。这些内容带有描述说明的性质，客观而不带有感情色彩。例如：原文：紧急退出功能键可让使用者在电源故障时，以手动方式打开
四种翻译方法,十种翻译技巧
四种翻译方法 1.直译和意译 所谓直译，就是在译文语言条件许可时，在译文中既保持原文的内容，又保持原文的形式——特别指保持原文的比喻、形象和民族、地方色彩等。 每一个民族语言都有它自己的词汇、句法结构和表达方法。当原文的思想内容与译文的表达形式有矛盾不宜采用直译法处理时，就应采用意译法。意译要求译文能正确表达原文的内容，但可以不拘泥与原文的形式。（张培基） 应当指出，在再能确切的表达原作思想内容和不违背译文语言规范的条件下，直译有其可取之处，一方面有助于保存原著的格调，另一方面可以进新鲜的表达方法。 Literal translation refers to an adequate representation of the original. When the original coincides or almost tallies with the Chinese language in the sequence of vocabulary, in grammatical structure and rhetorical device, literal translation must be used. Free translation is also called liberal translation, which does not adhere strictly to the form or word order of the original.（郭著章） 直译法是指在不违背英语文化的前提下，在英译文中完全保留汉语词语的指称意义，求得内容和形式相符的方法。
K-S旋转雾化器操作说明书翻译
. . . . 900系列喷雾器说明书 喷雾器系统操作手册
目录 1.0. 收货、储存和设备介绍 (4) 1.1. 收货和储存 (5) 1.2. 设备介绍 (5) 1.2.0 概述‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 5 1.2.1 喷雾器控制系统（ASC）‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥ 6 1.2.2 喷雾器电机‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥7 1.2.3 变频驱动（VFD）‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥7 1.2.4 设备固定‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥7 2.0. 系统说明‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥7 2.1. 喷雾器基本设计原理‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥7 2.2. 喷雾器（电机）-机械部分‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥8 2.3. 喷雾器（电机）-电器部分‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥10 2.4. 变频驱动（VFD）‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥12 2.5. 喷雾器控制系统（ASC）—基本操作‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥12 2.5.0 程序和指令概述‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥12 2.5.1 润滑油系统‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥14 2.5.2 润滑油回路系统‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥15 2.5.3 喷雾器冷却系统‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥16 2.5.4 清扫风，喷雾盘&轴冷却/清洗用水‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥16 2.6. 喷雾器控制系统（ASC）操作原理‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥17 2.6.0 参数编号‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥17 2.6.1 VFD故障‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥17 2.6.2 冷却水流量开关‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥17 2.6.3 润滑油料位开关‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥18 2.6.4 压力传感器‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥18 2.6.5 振动元件/传送装置‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥18 2.6.6 上部轴承RTD元件/温度传送器‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥19 2.6.7 警报一览表‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥19 2.6.8 警报忽略‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥21 2.7. 喷雾器服务系统介绍‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥22 2.7.0 概述‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥22 2.7.1 仪表气‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥22 2.7.2 润滑油‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥22
大学英语六级翻译分项训练(含答案及详解)
大学英语六级翻译分项训练（含答案及详解） 一、倍数增减的表示法 1)Force N1_______________(比力N2大2.5倍). 2)This substance_______________(反应速度是另外那种物质的三倍). 3)The earth_______________(是月球大小的49倍). 4)The landlord_______________(想将租金提高三分之一). 5)They_______________(计划将投资增加一倍). 二、时态 1)Be quick,_______________(否则等我们到达教 结束了). 2)When she got home,_______________(孩子们已经睡着了). 3)When I prepare for the college entrance examination,_______________(我姐姐将在海边度假). 4)I_______________(一上午都在修改我的简历). 5)Do you often go on holiday?_______________(不，我已经有五年没有度假了). 6)He joined the army in October,2001._______________(他参军已五年了). 三、被动语态 1)The blackboard and chalk_______________(正在被电脑和投影机所取代). 2)The book_______________(到今年年底就将已出版). 3)Computer models_______________(可以用来演示细胞工作的方式). 4)When the bill of fare was brought,_______________(我惊呆了，价格大大超出了我的预料). 5)_______________(必须立即采取有效措施)to eliminate sandy storms. 四、情态动词 1)The phone is ringing,_______________(但是没人接听。她一定不在家). 2)I can’t find my sunglasses._______________(我可能昨天落在咖啡店里了). 3)You screamed in your sleep last night._______________(你一定梦见什么可怕的东西了). 4)It’s a pity._______________(你本应该邀请她来参加你的毕业典礼的). 5)_______________(其实我没必要穿上我最好的套装去参加那次聚会的);most of the guests were wearing jeans and sweaters. 五、虚拟语气 1)I wish_______________(我年轻的时候有你们这样的机会). 2)If only_______________(他知道这病是可以治好的)!Then he would not have killed himself. 3)——Would you like him to paint your door with yellow stars? ——I’d rather he_______________(漆成蓝色的，而且不带任何装饰). 4)It’s high time that_______________(采取措施解决交通堵塞的问题). 5)Hugh usually talks_______________(仿佛在大会上发表演说似的). 6)We insist that_______________(让杰克立刻进医院）. 7)It was advised that_______________(在居民区设立更多的流动商店). 8)His proposal was that_______________(他们成立一个专门委员会来检查这个问题). 9)We are going to discuss his suggestion that_______________(取消期中考试). 10)It is ridiculous that_______________(我们在一个总是下雨的国家还缺水). 11)It is essential that_______________(每个人都为紧急情况做好准备). 12)_______________(如果他按照我告诉他的办法订票),we would have had quite a comfortable journey. 13)I was to have made a speech_______________(要不是有人把我的话打断了). 14)It didn’t rain last night._______________(要是下了，地就会湿的). 15)_______________(如果我一直住在纽约),I would know the U.S.well now. 16)If the doctor had not come in time,_______________(他现在就不在人间了). 17)But for his help,_______________(我们就不会以这么低的价格租到房子了). 18)I used my calculator;_______________(否则，我会花更长的时间才能算出这道题). 19)Were I in your place,_______________(我会毫不犹豫地抓住机会). 20)Had it not been for their opposition,_______________(这项法案早就通过了). 21)Should there be another world war,_______________(人类的继续存在就会有危险). 22)He walked lightly_______________(以免惊醒婴儿). 六、不定式
1英语说明书翻译
目前，我国的产品说明书的翻译有许多不尽如人意的地方，概括起来，是由于不懂英语说明书的句型和选词不当所致。以下，我们就来讨论一下说明书的句型和选词问题。 一、产品说明书的若干句型 句型是语言结构的要素。无论英译汉还是汉译英都离不开句型。学习、掌握和使用句型是翻译工作者的必由之路。现将英文产品说明书的若干常见句型说明如下： 1．（情态动词）be＋形容词（或过去分词）＋目的状语 这种句型用语文章开头，说明该产品是做什么用的，例如： 1）本冲床主要用于冲孔、落料、弯曲、浅拉伸、剪切等冷冲工艺。 This press is mainly suitable for cold working operations, such as punching, blanking, bending, shallow drawing, cutting and so on. 2）该产品用于温度225℃以下的热水管或蒸汽管道上。 1
This product can be used in hot water or steam line with the temperature limited to 225℃. 类似常见的类型还有： ... is used for... ... is used to ... ... is used as... ... is designed to... ... is suitable to be used in... ...is available for (to)... ...may be applicable to... ...may be used to... ...can be used as... ...can be designed as... ...is adapted for (to)... 2
翻译研究中的概念混淆(翻译策略、方法与技巧)).
翻译研究中的概念混淆 ——以“翻译策略”、“翻译方法”和“翻译技巧”为例 熊兵华中师范大学 《中国翻译》2014（3）82-88 摘要：本文对学界在“翻译策略”、“翻译方法”和“翻译技巧”这三个基本概念上所存在的普遍的混淆进行了剖析，提出应对这三个概念进行明确区分。在此基础上论文对这三个概念的定义、特性、相互关系及其各自的分类体系进行了系统阐述。 关键词：翻译策略；翻译方法；翻译技巧；混淆；定义；分类 1．话题缘起 在翻译研究中，有一个问题一直以来都未引起学界足够的重视，并因此在一定程度上妨碍了翻译研究的进一步发展，这个问题即为翻译研究中的概念混淆，其中又尤以“翻译策略”、“翻译方法”和“翻译技巧”这三个概念的混淆为甚。一方面，学界对翻译“策略”、“方法”和“技巧”的讨论虽多如牛毛，但把它们作为一个方法论系统的关键要素进行综合研究，深入考察其各自的内涵、相互关系及分类体系的系统性研究还相当少见。另一方面，学界在对这三个术语的认识和使用上普遍存在着定义不明、分类不当、概念混淆不清的问题。例如，在一些翻译教材中中，“归化”与“异化”一方面被作为“翻译方法”加以讨论(如龚芬，2011：79—81)，另一方面又被视为“翻译策略”进行阐述(同上：93—106)。一些翻译论文把本应属于翻译技巧层面的增补型翻译(类似于增译)、浓缩型翻译(类似于减译)划归为“翻译策略”的类别(如李克兴，2004：66—67)。在一些翻译方向的硕士研究生论文中，把翻译“策略”、“方法”、“技巧”混为一谈的更是比比皆是。甚至翻译专业的老师对此问题也存在一些模糊的、甚至是错误的看法(如把归化等同于意译，把异化等同于直译)。 国外学界对此也存在一些模糊或混淆(或未予严格区分。比如Shuttleworth & Cowie (2004：44，59)一方面把domestication／foreignization称作是“strategy”，另一方面却又把free／literal translation也视为“strategy”(同上：63，96 )。Vinay & Darbelnet (1958／2000：84—93) 把翻译方法(method)分为两类：直接翻译(direct translation)和间接翻译(oblique translation)，前者包括三种处理方式(procedures)，即借译，拟译，直译，后者包括四种处理方式，即词类转换，视点转换，等值翻译，顺应翻译。可在论述中却经常把其划分出来的“方法”(methods)和“处理方式”(procedures)混为一谈。另外，他们把“借译、拟译、直译、等值翻译、顺应翻译”和“词类转换、视角转换”划归为一类(同属procedures)也欠妥当，因为前者应属“翻译方法”的范畴，而后者则应属“翻译技巧”的范畴。实际上，这里Vinay ＆Darbelnet的分类涉及到三个层面：翻译策略、翻译方法和翻译技巧。其划分出来的两大“翻译方法”(直接翻译和间接翻译)其实应为“翻译策略”(所以Munday说，“The two general translation strategies identified by Vinay ＆Darbelnet are direct translation and oblique translation”，见Munday，2008：56)，而在其划分出来的七类“处理方式”中，前三类和最后两类属于“翻译方法”，第四、第五类则属于“翻译技巧”。总之，Vinay ＆Darbelnet在其分类中把翻译“策略、方法、技巧”混淆在一起，这也导致后来很长时间学界在这几个概念上的混淆(Molina ＆Albir，2002：506 0 关于国外译学界在译学术语，特别是在“翻译策略、翻译方法、翻译技巧”三个术语上所存在的概念混淆、使用混乱的问题，Chesterman(2005)和Molina & Albir(2002)曾专门撰文予以讨论。如Chesterman指出，学界用于描述文本操作过程的术语除翻译“策略”外，其他还有“技巧、方法、转换、转化、变易”等等(2005：17)。他认为这种众多术语相互混用
博世同传操作说明书
博世操作说明1、数字会议系统操作说明 系统简介 会议发言系统采用DCN系统模块化的设计，根据不同的需求配备相应的功能模块，设计、实施与使用灵活。可以达到发言的效果。 调节中央控制器高、低音音调旋钮。 持续按下主席机优先控制键（蓝色键），可暂时关闭所有话筒，此时只有主席机可以发言。 松开此键，恢复原先的话筒状态。 在“OPEN”状态下（申请状态）
●最多可同时打开的代表机数量为设定的话筒同时启用数量。 ●已打开的话筒红色“光环”指示器亮，话筒键LED指示器为红色。 ●后按键的代表机处于等待申请状态，话筒键LED指示器为绿色。 ●当关闭一个打开的话筒时，首先处于申请状态的代表机自动打开。 以申请的时间先后顺序为准。 * 在 量。 为红 ，以 在 量。 恢复 *建议：不要使用该状态，以免产生不必要的麻烦。 2、同声传译设备操作说明 （1）红外发射机 打开设备电源（注意：此电源在设备的后面）。 把所有的通道全部打开（此时的四个小液晶显示屏上自上而下分别显示——0，1，2，3）。
拨位开关状态设置成“NORMAL ”（如下图）。 （2）红外发射板 确保该设备通电。通电时，发射板左上角的指示灯亮。 设备安装在会场里（如下图）。 （3）红外接收机 ON ” use ‘Relay select’ knob to select option and B -select ‘<>’ keys to select next or previous Function. select ’旋钮选项，用B-select 的‘ ’键和‘ ’键选择下一个或前一个菜单。 第二步：按B-select 的‘ ’键选择下一个菜单，显示
大学英语六级翻译集训 整理版
中国人对玉(jade) —向有着特殊的尊爱之情，从而延伸发展出一种优秀而古老的玉石文化。作为配饰供人赏玩是玉器的原始功能之一，也是玉器最广泛的一种用途。玉器作为一种文物，它也是历史的见证，有着不可复制的唯一性，更为当今世人所器重。玉器从一种美化生活的装饰品，到简单的生产工具，然后被融入各种礼节(ritual)内容，被人格化、道德化，继而被看成是财富的象征、宗教图腾(totem)的崇拜……这些无不反映出中国传统文化和中华民族爱玉的心理。 Chinese people always show special respect and love for jade, thus deriving and excellent and ancient jade culture. Being used for decoration and admiration is one of the original functions of jade, and is also the most widely used one. As a cultural relic，jade is also the witness of history，the uniqueness of which cannot be copied,making it valued more by people around the world today. From ornaments that beautify our life，to simple instrument of production, and then being integrated into a variety of rituals, jade has been personified, moralized and further regarded as a symbol of wealth and worship for religious totems…All of these reflect Chinese traditional culture and Chinese people s love for jade. 1.延伸发展出:即“衍生出”，翻译时可以使用derive—词来表达。 2.配饰供人赏玩:“配饰”可译为decoration, “赏玩”可译为admiration。 3.历史的见证:可译为the witness of history。 4.美化生活的装饰品:可译为ornaments that beautify our life。 5.融入:可译为integrate into或blend into。 6.被人格化、道德化:可译为be personified and moralized。 7.宗教图腾的崇拜:可译为worship for religioiis totems。 8.反映出:可译为reflect,或者使用mirror—词来表达。 传统的中国婚俗被视为中国传统文化礼仪的基础。通常，婚礼是隆重场合，有很多的礼节。婚礼有八大程序，包括求婚、生辰匹配、合婚（marriage divination),下聘礼（betrothal gifts presenting)、确定婚期、置办嫁妆（dowry urging)、迎娶新娘、举行正式的结婚仪式。在中国传统的婚礼中，新娘由新郎牵着。她头顶红盖头，全程都垂在肩上。传统的中国婚俗已经实行了几千年。它们可能会因时间和地点而异，但在中国人的生活中一直占据着重要地位，对中国人的生活方式产生着深远的影响。 参考译文： Traditional Chinese wedding customs are considered as the foundation of rites in traditional Chinese culture.A wedding is usually a grand occasion with so many formalities.There are eight major procedures of a wedding,including proposal making,birthday matching,marriage divination,betrothal gifts presenting,wedding date fixing,dowry urging,welcoming the bride to the wedding and performing the formal wedding ceremony.During the traditional Chinese wedding ceremony,the bride is led by her groom.Her head is covered by a red veil which is Ming down to her shoulder during the whole period.Traditional Chinese wedding customs have been running for thousands of years.They may vary from place to place and from time to time,but they have been holding an important position in the life of Chinese people,having a far-reaching impact on Chinese people's lifestyle. 1.隆重场合:可译为a grand occasion。grand意为“重大的，盛大的”。 2.求婚:可译为名词结构proposal making。 3.生辰匹配:可译为birthday matching。 4.合婚:八字合婚是中国民间的一种旧俗，即婚前男女双方交换庚帖，以卜八字是否相配来确
大学英语六级翻译策略之汉语主动句译成英语被动句
大学英语六级翻译策略之汉语主动句译成英语被动句 我们在汉译英时，往往也需要把汉语主动句译成被动句。这是因为：为了保证上下文连贯，使衔接更紧密，句子更自然;或强调动作承受者;或使语气婉转、措辞恰当。具体转换方法有如下两种。 1)把汉语主动句的宾语译成英语被动句的主语。 例1____________(将领你们去参观我们的新车间)by the secretary.来自https://www.360docs.net/doc/d59149918.html, 译文：You will be shown our new workshop. 简评：如果这句话不是划线填内容，你完全可以将它翻译成The secretary will show you our new workshop。正是因为题型是补全句子，这就给翻译带来了一定的难度，你必须去适应题型要求而不是让题型来适应你。让我们看看译文已给出部分：by the secretary显然是一个被动语态特征，“秘书”在译文里已经由原来的主语变成了译文句子的补足成分。所以，题目是暗示我们要把原句中“你们”转换成译句里的主语，这样才符合出题要求。 例2You__________(我们期待你能组织贸易推广活动)this time. 译文：are expected to organize the trade publicity campaigns. 简评：根据题目可推知全句意思是：我们期望你能组织这次的贸易推广活动。中文句子主语、谓语、宾语分别是：我们、期望、你。但是在英文译文的给出部分中我们看到句子以you开头，也就是说“你被期望能组织这次贸易推广活动”。中文的宾语变成了英文的主语，这就要求我们在翻译时要使用被动语态。全句完整答案是：You are expected to organize the trade publicity campaigns this time. 2)当汉语句以“我们”、“人们”、“大家”等泛指性代词作主语时，在翻译成英文的时候常常可以忽略主语不译，并把英文译句处理成被动语态。处理后的英文译句往往带有know，see，find，say，suppose，estimate，report，suggest，stress，consider，expect，admit，point，understand等动词。 例3如果原子失去一个或多个电子，我们就说这个原子带正电荷。 译文：If one or more electrons are removed，the atom is said/believed/thought to be positively charged. 简评：这句话是一个条件从句。即：在原子失去一个或多个电子的情况下，这个电子带正电荷。“我们就说这个原子带正电荷”可理解为“这个原子被认为/被确信/被说成
化妆品说明书英文翻译
Product characteristics: It replenishes sufficient water to creat a moisturizing and water-locking membrane on the skin to maintain the normal water content of the cuticle ,banlance the PH value of the skin and keep the skin healthier. Containing rich fibroin extract and varirties of valued herbal essences,it strengthens the whitening function as well as tone the dark complexion and soften the coticle to build sparking,white ,bright,hydrous and transparent skin. 活肌盈白滋润爽肤水 产品特点：外界的污染，日光的照射，生活和工作的压力另肌肤干燥粗糙，色素沉浊，暗沉无光泽，各种肌肤问题也随之而来，需要及时为肌肤补充大量水分，促进美白营养成分的吸收。 活肌盈白滋润爽肤水触感清爽、柔滑，为肌肤注入充足的水分，并形成保湿锁水薄膜，维持角质层正常含水量，平衡皮肤酸碱值，另肌肤更健康；富含蚕丝蛋白、甘草、海藻精华，提升肌肤美白原动力，改善暗沉肤色，软化角质，重塑肌肤的盈白亮丽，水凝通透。 product characteristics: Being refreshing,it slowers the oxidation caused by free radicals and blocks kinds of radiation to strengthen the resistivity of the skin. Containing rich fibroin extract and varieties of valued herbal essences, it strengthens the whitening funtion as well as concealing the dark and rough state of the skin and marking it white, smooth and fine naturally. 活肌盈BB霜 产品特点：偏黄，暗沉等肌肤问题给生活带来尴尬，需要咋打造清新裸妆的同时给肌肤提供一层保护伞，让你时刻保持自信妆容。 肌活盈白BB霜含有丰富蚕丝蛋白、甘草萃取精华能修复问题肌肤，呈现最时尚的薄透裸妆。添加高保湿美容圣品的霍霍巴油，让基督保有水润明亮，智慧型的抑油功能，维持整天完美的轻透亮。 ACTIVE WHITE MOISTURIZING LOTION Product Charateristics:with natural moisturizing factors,it keeps replenishing water an increase the elasticty of the skin to keep it more moisturized. Containing rich fibroin extract and varieties of valued herbal essences,it strenthens whitening funtion as well as toning the dark and unevening complexion to keep it moisturized,white,graceful and attractive. 肌活盈白润肤乳 产品特点：质地清透幼滑，迅速渗透，持续给予肌肤充分滋养，让干燥粗糙的肌肤变得明亮润滑，显着改善肤色，用后肌肤清透柔亮，犹如出水芙蓉般水润透白。 蕴含蚕丝蛋白、洛神花和透明质酸，深层保湿，并在肌肤表明形成锁
英语翻译方法和技巧归纳
英语翻译方法和技巧归纳 一、词汇方面 ㈠.词义选择 大多数英语词汇是多义的，翻译时必须选择正确的词义。词义选择的方法有三:根据上下文和词的搭配选择、根据词类选择、根据专业选择。 ㈡.词义转换 在理解英文词汇的原始意义基础上，翻译时可根据汉语的习惯按引伸义译出；或用反义词语译出，即所谓的正文反译、反文正译。 ㈢.词类转换
英语中很多由动词转化而成的名词、以及动名词、非谓语动词等，汉译时可将它们转换成动词。 ㈣.补词 是指原文已有某种含义但未用词汇直接表达，译文中需将这些含义补充进去，这样才更通顺易读，如：英语中数词与名词之间没有量词，而译成汉语时可酌情增加。 ㈤.省略 是指原文中某些词在译文中省略不译，只要并不影响意义的完整。如：上面讲的汉语“量词”，译成英语时则可以省略；又如：英语中大量使用物主代词而汉语中往往省略不用。 ㈥.并列与重复
英语在表达重复含义的并列结构中常采用共享、替代、转换等形式来避免重复，而汉语却常常有意重复表达以加强文字的力度，如：英语的物主代词替代前面的名词，短语动词只重复介词而省略主动词，汉译时可考虑重复表达。 二、句子结构方面 子结构方面的翻译技巧，主要有三种类型：语序类、组合类和转换类。 ㈠.语序类 1. 顺译法与逆译法 英语时间状语可前可后。不仅如此，英语在表达结果、条件、说明等定语从句、状语从句也很灵活，既可以先述也可以后述。而汉语
表达往往是按时间或逻辑的顺序进行的，因此，顺译法也罢逆译法也罢，其实都是为了与汉语的习惯相一致。英语表达与汉语一致的就顺译，相反的则逆译。 有时候顺译法与逆译法的差别,就象前面谈的正译与反译,依译者的爱好而定。 2. 前置法 英语中较短的限定性定语从句、表身份特征等的同位语在译成汉语时，往往可以提到先行词（中心词）的前面。 3. 分起总叙与总起分叙 长句子和句子嵌套现象在英语中比较普遍，这是因为英语的连词、关系代词、关系副词等虚词比较活跃、生成能力强，可构成并列句、复合句以及它们的组合形式。
英语六级翻译真题
Translation 2006年12月 If you had (听从了我的忠告，你就不会陷入麻烦). followed my advice, you would not be in trouble now With tears on her face, the lady (看着她受伤的儿子被送进手术室). watched her injured son being sent into the operation room After the terrorist attack, tourists (被劝告暂时不要去该国旅游). were advised not to travel to that country at the moment I prefer to communicate with my customers (通过写电子邮件而不是打电话). via e-mail instead of telephone (直到截止日他才寄出) his application form. Not until the deadline came, did he send out 2007年6月 The auto manufacturers found themselves (正在同外国公司竞争市场份额). competing with foreign firms for market share Only in the small town (他才感到安全和放松). does he feel secure and relaxed It is absolutely unfair that these children (被剥夺了受教育的权利). are deprived of the rights to receive education Our years of hard work are all in vain, (更别提我们所花费的大量金钱了). not to mention the large amount of money we have spent The problems of blacks and women (最近几十年受到公众相当大的关注). have gained considerable public concern in recent decades 2007年12月 But for mobile phones, (我们的通讯就不可能如此迅速和方便). our communication would not have been so efficient and convenient In handling an embarrassing situation, (没有什么比幽默感更有帮助的了). nothing is more helpful than humor The Foreign Minister said he was resigning, (但他拒绝进一步解释这样做的原因). but he refused to make further explanation
产品说明书英文版V完整版
产品说明书英文版V HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
X-Link PRODUCT MANUALS FOR MULTIVIEW CONTROLER
This manual applies to the following models: 3UA Multiview CONTROLER ( Optional Front Panal,LCD Console ) 3UB Multiview CONTROLER ( Optional Front Panal,LCD Console ) 8U Multiview CONTROLER ( Optional Front Panal ) 8U-S Multiview CONTROLER( Optional Front Panal ) 12U Multiview CONTROLER LED Very-large Dot Matrix Screen Multiview CONTROLER ( K Series ) Monitoring Multiview CONTROLER ( N Series ) 3D Multiview CONTROLER ( 3D Series ) 4K Multiview CONTROLER (4k Series ) IMPORTANT NOTICE The company reserves the right to update the manual according to improvement of products without any prior notice. In the process of using, if any content in this manual is inconsistent with actual products or there is any further question during use, please contact document information department of our company. Please read this manual carefully before using the CONTROLER and properly file it after reading for future reference. Pictures are for reference only, subject to our available products. Please pay close attention to those with the Icon of in the article.
2016英语六级翻译、阅读真题解析
Directions:For this part, you are allowed 30 minutes to translate a passage from Chinese into English. 中国是四大文明古国之一，有着五千多年的灿烂文化。尊老爱幼是中华民族的传统美德。早在汉朝时期(the Han Dynasty), 政府就曾多次颁布法令，提倡并奖励孝敬老人的行为。中国人以爱、友善和严格的方式对待子孙后代，体现了强烈的道德责任感。尊老爱幼的传统在现代社会得到了发扬。现在，中国的老人和儿童都有法定节日——老人节和儿童节。除此之外，政府还颁布特定的法律保护妇女儿童，法律也明确规定中国公民有义务赡养父母、抚养子女。 参考译文： As one of the four ancient civilizations, China has a splendid culture of more than 5,000 years. Respecting the old and caring for the young is a traditional Chinese virtue. As early as the Han Dynasty, the government issued laws many times to advocate and reward behavior relating to treating the old with filial respect. The Chinese people treat their offspring with love, kindness and strictness, embodying a strong sense of moral responsibility. The tradition of respecting the old and taking care of the young has been carried forward in modern times. At present, the old and the young in China have their own legal holidays—Elders’ Day and Children’s Day. Besides, the government has issued specific laws to protect women and children; and some laws also stipulate in explicit terms that Chinese citizens have obligations to support parents and rear children. 要点点拨： 1.四大文明古国：four ancient civilizations 2.尊老爱幼：respect the old and care for the young 3.道德责任感：a sense of moral responsibility 4.发扬：carry forward 5.法定节日：legal holiday 6.赡养父母、抚养子女：support parents and rear children Section A Directions: In this section, there is a passage with ten blanks. You are required to select one word for each blank from a list of choices given in a word bank following the passage. Read the passage through carefully before making your choices. Each choice in the bank is identified by a letter. Please mark the corresponding letter for each item on Answer Sheet 2 with a single line through the centre. You may not use any of the words in the bank more than once. Questions 36 to 45 are based on the following passage. For investors who desire low risk and guaranteed income, U.S. government bonds are a secure investment because these bonds have the financial backing and full faith and credit of the federal government. Municipal bonds, also secure, are offered by local governments and often have 36 such as tax-free interest. Some may even be 37 . Corporate bonds are a bit more risky.