培养瓶、培养皿规格及面积
细胞培养器材细胞培养皿:
细胞培养瓶:
细胞培养板的选择
24孔板：PLL 100-200μl（200μl）即可，铺板2h后，吸出PLL（回收），PBS冲洗2次，晾干备用或不晾干直接用。加培养液量1ml ，注意调整细胞密度。
25cm2（5ml）→（1:2）50cm2（10ml）——（1:3）75cm2（15ml）
2cm2（1ml）→1/25——1/40总细胞悬液
96孔板：PLL 20-40μl（40μl）即可，铺板2h后，吸出PLL（回收），PBS冲洗2次，晾干备用或不晾干直接用。加培养液量0.1ml-0.2ml ，注意调整细胞密度。
25cm2（5ml）→（1:2）50cm2（10ml）——（1:3）75cm2（15ml）
0.32cm2（0.1-0.2ml）→1/150——1/250总细胞悬液
培养皿规格细胞计数
https://www.360docs.net/doc/e77824561.html,/item.htm?id=131********&ad_id=&am_id=&cm_id=&pm_id= 培养器皿面积（cm2）培养液量（ml）细胞量 96 孔培养板0.32 0.1 105 24孔培养板 2 1.0 5×105 12孔培养板 4.5 2.0 106 6孔培养板9.6 2.5 2.5×106 3.5 cm 培养皿8 3.0 2×106 6 cm 培养皿21 5.0 5.2×106 10 cm 培养皿55 10.0 13.7×106 25cm2 培养瓶25 5.0 5×106 75cm2 培养瓶75 15～30 2×107 细胞计数（转载） 来源：苌生科的日志 实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 具体操作： 一、准备工作： 取一瓶传代的细胞，待长成单层后以备使用。 二、细胞悬液制备： 细胞悬液的制备方法是用0.25％的胰蛋白酶液消化、PBS液洗涤后，加入培养液（或Hanks液或PBS等平衡盐溶液），吹打制成待测细胞悬液。 三、细胞计数： 1.盖好盖玻片：取一套血球计数板，将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。 2.制备计数用的细胞悬液：用吸管吸5滴细胞悬液到一离心管中，加入5滴台盼蓝染液（0.4％）或苯胺黑，活细胞不会被染色，加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。 3.将细胞悬液滴入计数板：将待测细胞悬液吹均匀，然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入，要保证盖片下充满悬液，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。 4.统计四个大格的细胞数：将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察，并移动计数板，当看到镜中出现计数方格后，数出四角的四个大格（每个大格含有16个中格）中没有被染液染上色的细胞数目。 5.计算原细胞悬液的细胞数L：按照下面公式计算细胞密度： （细胞悬液的细胞数）/ml＝（四个大格子细胞数/4)×2×104 说明：公式中除以4因为计数了4个大格的细胞数。 公式中乘以2因为细胞悬液与染液是1：1稀释。 公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为1.0mm（长）×1.0mm（宽） ×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3。 四、细胞计数要点： 1.进行细胞计数时，要求悬液中细胞数目不低于104个/ml，如果细胞数目很少要进行离心再悬浮于少量培养液中；
细胞培养皿规格
细胞培养皿规格 订货信息： 货号品名规格包装备注售价(元)是否现货订购10188细胞培养板6孔，孔直径 34.8mm，生长面积 9.5cm2 5只/包. 97.00现货10192细胞培养板12孔，孔直径 22.1mm，生长面积 3.8cm2 50只/箱. 1000.00现货10194细胞培养板24孔，孔直径 15.6mm，生长面积 1.9cm2 5只组. 110.00现货10196细胞培养板48孔，孔直径 10.2mm，生长面积 0.8cm2 100只/箱. 2400.00现货10198细胞培养板96平底，孔直径 6.4mm，生长面积 0.32cm2 5只组. 110.00现货10200细胞培养板96U底，孔直径 6.4mm，生长面积n/acm2 5只组. 132.00现货110202细胞培养板96V底，孔直径
6.4mm，生长面积 0.38 cm2 50只/箱. 1650.00现货10204细胞培养板96半孔板，孔直径 4.5mm，生长面积 0.16 cm2 5只组. 182.00现货10206细胞培养板384孔，125μl 20只/包. 968.00现货10208细胞培养板1536孔， 2.3μl 20只/箱. 4500.00现货10209细胞培养板1536孔， 2.3μl 1只/包. 248.00现货培养器皿96孔培养板24孔培养板12孔培养板6孔培养板 3.5 cm培养皿6 cm培养皿10 cm培养皿25cm2培养瓶75cm2培养瓶面积（cm2） 0.3 224.5 9.75培养液量（ml） 0.1 1.0 2.0 2.5 3.0
5.0 10.0 5.015～30细胞量1055× .5×1062× 1065.2× 10613.7×1065×1062×107
细胞计数及铺板
用于侵袭、迁移等试验的细胞计数及铺板 [实验步骤] 1、准备工作用75% 的酒精擦拭双手，同时用酒精棉球擦拭超净台。2）将培养液、实验所需材料也放入超净台进行灭菌（血清、培养基除外）3）倒置显微镜下，观察细胞的状态，是否已经长满培养瓶，需要进行分瓶。 2、弃去培养基，用枪尽量去培养基。贴壁加入5mlPBS液清洗一遍，四个方向晃动倒掉。 3、将0.25%胰酶600ul加入培养皿内,拍皿，上下左右铺匀，37°消化30分钟左右，随时观察，见到细胞泥沙状留下时，即消化完全. 4、加入4ml的含5%血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，制成细胞悬液，然后装到15ml离心管中。1000rpm,3min. 5、弃上清。用PBS 3ml 洗细胞，吹打或涡旋混匀，洗2次，离心1000rpm,3min.弃上清。 6、配细胞稀释液（BSA 终浓度为0.1%）.每种细胞需3ml稀释液,共6个样品，所以配20ml稀释液(无血培20ml+10%BSA 200ul.) 7、细胞沉淀中加3ml细胞稀释液，吹打混匀，即得稀释过的细胞悬液。 8、细胞计数板每孔加15ul悬液。每个样品计数2次，算均值。（8个大格总数/8=数值*104） 9、根据铺板密度，计算稀释过的细胞悬液用量，剩余体积用细胞稀释液补。 普通的细胞计数及铺板(免疫荧光，WB等不需定量) [实验步骤] 1、准备工作用75% 的酒精擦拭双手，同时用酒精棉球擦拭超净台。2）将培养液、实验所需材料也放入超净台进行灭菌（血清、培养基除外）3）倒置显微镜下，观察细胞的状态，是否已经长满培养瓶，需要进行分瓶。 2、弃去培养基，用枪尽量去培养基。贴壁加入5mlPBS液清洗一遍，四个方向晃动倒掉。 3、将0.25%胰酶600ul加入培养皿内,拍皿，上下左右铺匀，37°消化30分钟左右，随时观察，见到细胞泥沙状留下时，即消化完全.
实验五--培养基的配制
实验五培养基的配制 （基础实验，4学时） 一、实验目的和要求 学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤 二、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素及水分等。琼脂是应用最广的凝固剂，培养基一经制成就应及时灭菌，一般采用高压蒸汽灭菌器灭菌。 牛肉膏蛋白胨培养基是细菌学中最常用的基础培养基，加琼脂制成的固体培养基常用于细菌的分离和培养。配方：牛肉膏0.3g,蛋白胨1g，NaCl 0.5g，水100ml，琼脂1.5～ 2.0g，pH 7.2～7.6 三、实验用具 高压灭菌器、电热板、恒温培养箱、电子天平、500ml刻度搪瓷杯、称量纸、三角瓶、量筒、试管、培养皿、玻璃棒、pH试纸、记号笔、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/LNaOH、1mol/LHCl 四、实验步骤 1、称药品按配方依次称取，放入具刻度搪瓷杯中，牛肉膏可用表面皿或小烧杯称量，热水溶解后倒入搪瓷杯中，蛋白胨极易吸潮，称量要迅速。 2、溶解在具刻度搪瓷杯中加入少于所需要的水量，加热，用玻璃棒搅拌，溶解后加入琼脂，熔化后补充水至所需量。 3、调pH用1mol/L NaOH和1mol/LHCl调，用pH试纸检测。 4、分装液体培养基分装高度以试管高度的左右为宜，三角瓶不超过容积的一半为好，固体培养基＜试管高度的，灭菌后制成斜面。
5、加塞用棉花制作塞 6、包扎三角瓶用牛皮纸或双层报纸包在棉塞外，以防止灭菌时冷凝水沾湿棉塞。试管先扎成捆后，在棉塞外用纸包。标明组别、培养基名称、日期。 7、灭菌0.103MPa，121℃，湿热灭菌20min。 8、摆斜面趁热将试管口搁在一根长木条上，使斜面长度不超过试管总长的。 9、平板制作灭菌后冷至50℃～60℃，取下棉塞，通过火焰，倒在已灭菌的平皿中，平皿制好后通常倒置 10、无菌检查将灭菌的培养基放在37℃恒温箱中培养24～48h，无菌生长可使用。 六、注意事项 1、分装时可用滤斗，避免培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。 2、称药品用的牛角匙不要混用；称完药品及时盖紧瓶盖。 七、思考题 高压蒸汽灭菌器如何使用？ 3、通过活动，使学生养成博览群书的好习惯。 B比率分析法和比较分析法不能测算出各因素的影响程度。√ C采用约当产量比例法，分配原材料费用与分配加工费用所用的完工率都是一致的。Ｘ C采用直接分配法分配辅助生产费用时，应考虑各辅助生产车间之间相互提供产品或劳务的情况。错C产品的实际生产成本包括废品损失和停工损失。√ C成本报表是对外报告的会计报表。× C成本分析的首要程序是发现问题、分析原因。×
常见化学实验室玻璃仪器
一、玻璃仪器分类 化学实验常用的仪器中，大部分为玻璃制品和一些瓷质类仪器。瓷质类仪器包括蒸发皿、布氏漏斗、瓷坩埚、瓷研钵等。玻璃仪器种类很多，按用途大体可分为容器类、量器类和其他仪器类。 容器类包括试剂瓶、烧杯、烧瓶等。根据它们能否受热又可分为可加热的仪器和不宜加热的仪器。 量器类有量筒、移液管、滴定管、容量瓶等。量器类一律不能受热。 其他仪器包括具有特殊用途的玻璃仪器，如冷凝管、分液漏斗、干燥器、分馏柱、砂芯漏斗、标准磨口玻璃仪器等。 标准磨口玻璃仪器，是具有标准内磨口和外磨口的玻璃仪器。标准磨口是根据国际通用技术标准制造的，国内已经普遍生产和使用。使用时根据实验的需要选择合适的容量和口径。相同编号的磨口仪器，它们的口径是统一的，连接是紧密的，使用时可以互换，用少量的仪器可以组装多种不同的实验装置，通常应用在有机化学实验中。目前常用的是锥形标准磨口，其锥度为1：10，即锥体大端直径与锥体小端直径之差：磨面锥体的轴向长度为1：10。根据需要，标准磨口制作成不同的大小。通常以整数数字表示标准磨口的系列编号，这个数字是锥体大端直径(以为单位)最接近的整数。常用标准磨口系列见表1。 表1常用标准磨口系列 有时也用两个数字表示标准磨口的规格，如14/23，即大端直径为14．5，锥体长度为23。 二、常见的玻璃仪器 化学实验室常用的玻璃仪器的主要用途及使用注意事项。
试管 规格及表示方法： 烧杯 规格及表示方法： 玻璃质。以容积（）表示，如硬质烧杯400。有一般型、高型；有刻度和无刻度几种。 一般用途： １、反应容器，尤其在反应物较多时用，易混合均匀。 ２、也用作配制溶液时的容器或简易水浴的盛水器。 使用方法及注意事项： １、反应液体不能超过烧杯用量的2/3。 ２、加热时放在石棉网上，使受热均匀。刚加热后不能直接置于桌面上，应垫以石棉网。