庄浪县2014年重大动物疫病免疫抗体监测分析评估

甘肃畜牧兽医

（２０１４年第４４卷

·第１１期）◆

治疫病防

ＹｉＢｉｎｇＦａｎｇＺｈｉ

重大动物疫病春秋集中免疫是防控动物疫病的重点工作，开展免疫抗体监测，是掌握免疫效果指导科学免疫的重要手段，正确分析和评估免疫效果，为进一步做好重大动物疫病免疫工作提供科学依据。庄浪县多年来狠抓免疫抗体监测工作，对保证畜禽春秋免疫和常年免疫质量发挥了积极的作用。本文分析评估了庄浪县２０１４年畜禽春秋集中免疫后口蹄疫（ＦＭＤ）、猪瘟（ＣＳＦ）、猪繁殖障碍与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）、禽流感（ＡＩ）、新城疫（ＮＤ）抗体监测结果，并对结果进行分析和探讨，总结出了结果提示的一些问题和免疫工作中值得肯定的一些做法，现报告如下。

１基本情况

按照庄浪县畜牧兽医局、庄浪县动物疫病预防控制中心安排，每年的４月份和１０月份，对全县１８个乡镇进行春秋两季重大动物疫病抗体效价抽样检测。每个乡镇在春秋集中免疫２８ｄ后随机抽取２户散养户和２个规模养殖场。由疫控中心动物防疫包乡人员和乡镇畜牧兽医站人员负责实施畜禽血清样品采集，疫控中心实验室进行集中检测。２０１４年全年共采集１５９８份畜禽血清样品，分别进行了口蹄疫、猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸综合征、禽流感、鸡新城疫的免疫抗体效价监测。

免疫抗体监测严格按照国家推荐标准或农业部发

布的行业标准以及实验室检验操作规程进行，猪瘟、牛Ｏ型口蹄疫采用正向间接血凝试验（ＩＨＡ），禽流感Ｈ５亚型、鸡新城疫采用血凝和血凝抑制试验（ＨＡ－ＨＩ），猪Ｏ型口蹄疫合成肽免疫采用ＶＰ１结构蛋白抗体间接ＥＬＳＩＡ，猪繁殖障碍与呼吸综合征采用间接ＥＬＳＩＡ方法。２

结果分析

2.15种重大动物疫病监测情况及合格率统计（表1）2.25种重大动物疫病之间抗体合格率比较（图1）

2.35种重大动物疫病抗体合格乡镇占比（图2）

2.4猪瘟监测结果

将各乡镇平均效价值在ＳＰＳＳ软件中与要求达标的效价值５ｌｏｇ２进行单样本ｔ（ｔ＝５）检验，结果Ｐ＝０．９８７，

庄浪县２０１４年重大动物疫病免疫

抗体监测分析评估

王建明，

胡江（甘肃农业大学动物科学技术学院，甘肃兰州

730070）

摘要：本文就庄浪县2014年猪瘟、口蹄疫、猪繁殖障碍与呼吸综合征、禽流感、鸡新城疫5种重大动物疫病免疫抗

体监测情况进行分析评估，总结了监测结果提示的问题。

关键词：庄浪县；免疫抗体；分析

中图分类号：S851.3

文献标识码：B

文章编号：1006-799X(2014)11-0071-02

作者简介：王建明（1983-），男，甘肃庄浪人，助理畜牧师，主要

从事动物疫病防控畜牧技术推广工作。通讯作者：胡江

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甘肃畜牧兽医

（２０１４年第４４卷

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难消化饲料的供给，要做到定槽、定时、定量，避免突然

更换饲料，避免采食难消化的、酸的、腐败的饲料，适当加大奶牛的运动量，给予足够的饮水。应按日粮标准定时定量饲喂，防止突然变换饲料。尽可能减少导致该病发生的因素，经常性观察牛群运动及饮食情况，做到及时发现病牛，尽早治疗。

病愈初期应该停止喂饲料，勤饮少量水，当脾胃运化功能痊愈后，再将饲料喂量逐渐增多，且多给干草，以免脾胃运化功能尚未彻底恢复，却因大量饲喂而招致积食复发。另外，瘤胃积食患牛最易引起感染，因此，应注意预防感染。病牛恢复采食后，要逐渐增加各种饲料的供给量，以恢复其消化机能。

Ｏｎｅ－ＳａｍｐｌｅＴｅｓｔ

ＴｅｓｔＶａｌｕｅ＝５

ｔ

ｄｆＳｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ）

ＭｅａｎＤｉｆｆｅｒｅｎｃｅ

９５％ＣｏｎｆｉｄｅｎｃｅＩｎｔｅｒｖａｌｏｆｔｈｅ

ＬｏｗｅｒＵｐｐｅｒ猪瘟效价

０．０１７

１８

０．９８７

０．０１４３

－２．０６９

２．０９８

疫病种类监测村数

场（户）数

试验方法样品数合格数合格率ＣＳＦ５６５０ＩＨＡ３０７２７６８９．９％Ｏ型ＦＭＤ９８６８牛羊ＩＨＡ、猪４９６４５２９１．１％ＰＲＲＳ

５６５０ｉ－ＥＬＩＳＡ３０７２５１８１．８％ＡＩ１０４１２ＨＡ－ＨＩ２４４２０５８４．０％ＮＤ

１０４

１２

ＨＡ－ＨＩ

２４４

１８７

７６．６％

表１２０１４动物疫病免疫抗体监测情况及合格率

Ｐ＞０．０５（见表２），所以差异不显著，即可以近似认为

猪瘟免疫是达到判定值５ｌｏｇ２的，

检验结果与平均效价４．９相佐证。且平均合格率达到８９．９％高于农业部要求的标准。根据以上统计信息可以推断合格率高，但平均效价较低，是由于抗体效价参差不齐所致。

2.5牛O 型口蹄疫

将各乡镇平均效价值在ＳＰＳＳ软件中与要求达标的效价值５ｌｏｇ２进行单样本ｔ检验，结果Ｐ＝０．１０８，Ｐ＞０．０５

（见表３），所以差异不显著，即可以认为整个规模场的免疫是达标的，检验结果与平均效价５．８相佐证，通过分析比较发现牛Ｏ型口蹄疫免疫整体情况较好。

综合分析可知，口蹄疫、猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸综合征、禽流感、鸡新城疫个体阳性率均达到７０％以上的国家标准。全县口蹄疫、猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸综合征、禽流感、鸡新城疫抗体水平全年均保持在较高的水平。对畜禽抗体乡镇合格比例分析可知，全年

中只有鸡新城疫乡镇合格比例较低，口蹄疫、猪瘟、禽流感乡镇合格率都较高，但猪瘟抗体水品参差不齐。

３结论

通过分析表明，庄浪县春秋集中免疫抗体监测，口蹄疫、猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸综合征、禽流感、鸡新城疫免疫抗体平均合格率、乡镇合格率均达到国家规定标准，发生口蹄疫、猪瘟、猪繁殖障碍与呼吸综合征、禽流感的风险极小。但鸡新城疫免疫抗体乡镇合格率较低，部分乡镇有发生鸡新城疫的潜在风险。建议抗体监测不合格乡镇要加强免疫“补针”，提高整体抗体水平。

针对部分养殖户、规模场对抗体监测的重要性不认识，对采样工作有排斥和抵触，应加强免疫监测的宣传和推广工作，使各规模场认识到免疫监测的重要性，使其明白免疫监测不只是检验防疫工作的一种手段，更是提高防疫水平的一种措施，从而减少采样过程中的阻力。

Ｏｎｅ－ＳａｍｐｌｅＴｅｓｔ

ＴｅｓｔＶａｌｕｅ＝５

ｔ

ｄｆ

Ｓｉｇ．（２－ｔａｉｌｅｄ）

ＭｅａｎＤｉｆｆｅｒｅｎｃｅ

９５％ＣｏｎｆｉｄｅｎｃｅＩｎｔｅｒｖａｌｏｆｔｈｅ

Ｌｏｗｅｒ

Ｕｐｐｅｒ

牛Ｏ－ＦＭＤ１．９５８１８０．１０８０．８５０－０．２６６１．９６６

（上接第67页）

疫

病防治

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表２猪瘟检测结果ＳＰＳＳ软件统计分析表

表３牛Ｏ型口蹄疫检测结果ＳＰＳＳ软件统计分析表

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动物微生物及免疫学复习题

《动物微生物及免疫学》复习题一、多选题 1.中枢免疫器官有ABD A 胸腺 B 腔上囊 C 脾脏 D 骨髓 2.中枢免疫器官的特点有ACD A 胚胎早期出现 B 胚胎晚期出现 C 控制机体免疫反应 D 能诱导淋巴细胞分化 3.抗原具有BD A 特异性 B 免疫原性 C 专一性 D 反应原性 4.抗原按性质分为AC A 完全抗原 B 自身抗原 C 不完全抗原 D 异嗜抗原 5. 全菌抗原或整个病毒粒子抗原所制备的血清为C A 多联血清 B 单价血清 C多价血清D --- 6.免疫球蛋白的种类有ABCD A IgG B IgM C IgA D IgE 7.单克隆抗体的特点ABCD A纯度高 B专一性强 C 重复性好 D能在动物体内外持续产生同质性抗体 8.抗体具有亲细胞性质，能与下列细胞结合ABC A 肥大细胞 B T细胞 C B细胞 D 神经细胞 9. 血清学反应的类型有ABCD A 凝集反应 B 沉淀反应 C 中和反应 D 补体结合反应 10.沉淀反应的类型有ABC A 电泳 B 琼脂扩散试验 C 环状沉淀试验 D ELISA 11.试管凝集的特点有ACD A 方法简单 B 特异性不强 C 可定性 D 可定量 12.常用于检测炭疽病的实验方法是B A 琼脂扩散试验 B 环状沉淀反应 C 对流免疫电泳 D 血凝试验 13.间接凝集反应的类型有AD A 乳胶凝集 B 试管凝集 C 平板凝集 D 间接血凝 14.补体结合实验中，如果最终出现溶血现象，其结果应为C A 阳性 B 不确定 C 阴性 D A或B 15.血清学反应的一般特点 AC A 特异性强 B 特异性不强 C 抗原间血缘越近交叉程度越高 D 不会出现带现象 16.免疫原性:能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞的特性 17.下列有关非特异性免疫应答说法正确的有AC A 先天的,遗传的 B 作用慢,范围窄 C 为第一线防御作用 D 有再次反应的能力,有记忆 18.干扰素的特性有AC A 可溶性蛋白 B 对热不稳定 C 对酶敏感 D 对病毒种类有特异性 19.非特异性免疫的防御屏障有BD A 血脑屏障 B 皮肤 C 胎盘屏障 D 黏膜 20.影响非特异性免疫的因素有ABCD A 遗传 B 年龄 C 环境（温度、湿度） D 动物种类二、名词解释

间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析

间接免疫荧光法检测抗核抗体的结果分析目的探讨间接免疫荧光法（IIFA）检测抗核抗体在自身免疫性疾病（AID）患者中的结果应用分析。方法分别采用IIFA和胶乳法检测50例自身免疫性疾病患者血清样本抗核抗体（ANA）。结果IIFA法检测血清ANA的灵敏度为76%，胶乳法检测血清ANA的灵敏度为58%，差异有统计学意义（P＜0.01）。结论IIFA 法检测ANA的敏感度明显高于胶乳法，提高了临床的阳性检出率。IIFA法用于ANA的筛查，阳性标本在进行滴度检测，有助于临床诊断。标签：抗核抗体；间接免疫荧光法；胶乳法 [Abstract] Objective To discuss the results of indirect immunofluorescence in detecting the antinuclear antibodies in patients with autoimmune diseases. Methods The antinuclear antibodies of serum samples of 50 cases of patients with autoimmune diseases were detected respectively by the IIFA and emulsion method. Results The difference in the sensitivity degree of ANA detected by IIFA method and emulsion method had statistical significance（76% vs 58%）（P＜0.01）. Conclusion The sensitivity degree of ANA detected by IIFA method is obviously higher than that detected by the emulsion method，which improves the positive detection rate in clinic，the application of IIFA method for ANA screening and the application of positive specimens for titer detection contribute to clinical diagnosis. [Key words] Antinuclear antibodies；Indirect immunofluorescence；Emulsion method 抗核抗体（ANA）包括细胞核的自身抗体和细胞质内的核酸和核蛋白的所有成分的自身抗体，是指哺乳动物的细胞中以细胞核为靶抗原的自身抗体的总称[1]。ANA在系统性红斑狼疮、干燥综合征、硬皮病、慢性活动性肝炎等自身免疫疾病中均呈不同程度的阳性。因此在自身免疫性疾病的临床诊断、鉴别以及评价预后中，ANA检测已成为重要的筛查指标[2]。临床上ANA检测方法较多，现阶段最常用、最有效的检测方法是IIFA法。由于不同检测方法检测灵敏性、准确性不同，往往影响到检测结果，使检测结果存在一定的差异，尤其在ANA 呈弱阳性的标本中，不同检测方法的检测成为争议的焦点。为进一步确认IIFA 法和乳胶法检测ANA的效果，进而客观评价该两种检测方法差异性，该文2015年10—12月间选取该院确诊或疑似为AID的患者50例作为观察对象，同时采用IIFA法和乳胶法检测，报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料所有标本均来自2015年10—12月到该院确诊或疑似AID的门诊和住院患者50例，男性15例，女性35例，年龄15～65岁。

畜禽养殖场免疫程序

畜禽养殖场养殖档案单位名称：银川金顺友农林牧业有限公司动物防疫合格证编号：GB/T2260-2007502140017 畜禽种类：肉牛

（一）畜禽养殖场平面图

（二）金顺友肉牛养殖厂免疫程序日龄疫苗名称剂量免疫方式备注 4月龄口蹄疫疫苗1ML/头注射 10月龄口蹄疫疫苗2ML/头注射 16月龄口蹄疫疫苗2ML/头次注射 22月龄口蹄疫疫苗2ML/头次注射加强免疫（三）饲料、饲料添加剂和兽药使用记录开始使用时间投入产品名称生产厂家批号/ 加工日期用量停止使用时间备注 2015年1月碳酸氢钠1% 2015年10月2015年2月1日伊维菌素1‰2015年2月8日2015年2月20日伊维菌素1‰2015年2月27日2015年11月1日伊维菌素1‰2015年11月7日 2015年11月16日伊维菌素1‰2015年11月23 日注：1、养殖场外购的饲料应在备注栏注明原料组成。 2、养殖场自加工的饲料在生产厂家栏填写自加工，并在备注栏写明使用的药物饲料添加剂的详细成分。

（四）消毒记录日期消毒场所消毒药名称用药剂量消毒方法操作员签字 2015年6月1日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年6月16日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年7月1日圈舍白灰500公斤执洒2015年7月16日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年8月1日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年8月16日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年9月1日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年9月16日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年10月1日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年10月16日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年11月1日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒2015年11月15日圈舍强力消毒粉1200ml 喷洒注：1、时间：填写实施消毒的时间。 2、消毒场所：填写圈舍、人员出入通道和附属设施等场所。 3、消毒药名称：填写消毒药的化学名称。 4、用药剂量：填写消毒药的使用量和使用浓度。 5、消毒方法：填写熏蒸、喷洒、浸泡、焚烧等。

鸡免疫接种技术要点

鸡免疫接种技术要点由于饲养管理不善或免疫方法不当等方面的原因，鸡在免疫接种后，容易引起一些不良反应，导致鸡生产性能下降、体质虚弱，甚至出现死亡，给养鸡户带来不必要的损失。一、常见不良反应及原因 1、呼吸道不良反应。雏鸡在接种传染性支气管炎疫苗发生呼吸道免疫反应，一般在寒冷的冬季易发生。因为养鸡场为保暖而紧闭门窗，致使鸡舍内空气污浊，有害气体增多，此时给鸡进行呼吸道病免疫接种，就会引起严重呼吸道免疫反应，常表现呼吸罗音、摇头和水样眼等症状。 2、头颈部不良反应。选择在颈背部皮下注射疫苗时，因注射部位不当，针头刺到肌肉或神经，或将疫苗注入颈部肌肉，引起颈部活动僵硬，表现为扭曲状。 3、腿部不良反应。选择在腿部肌肉注射疫苗时，因失手易造成血管或神经损伤，或注射疫苗的用量过大，或带菌免疫，引起腿部注射部位发炎，出现肿胀、跛行症状。 4、免疫后不良反应。出现鸡免疫接种后反而发病了，主要原因：⑴接种时鸡群内已潜伏有强毒病原微生物，只是未表现明显的临诊症状；⑵疫苗免疫剂量过大。例如雏鸡大剂量使用新城疫Ⅱ系疫苗或鸡新城疫Ⅳ系（Lasota株）疫苗会导致扭头、转圈等神经症状。大剂量使用传染性喉气管炎疫苗会出现流泪、喉头出血等传染性喉气管炎症状；⑶引起并发症状。例如鸡新城疫Ⅱ系（或Ⅳ系）疫苗、鸡传染性支气管炎疫苗、法氏囊病疫苗的接种，可能造成本来不明显的败血性支原体病的爆发；⑷不同种类疫苗间的相互干扰作用。一个养鸡场往往不止进行一种疫苗的免疫接种，往往几种疫苗同时使用，例如有的养鸡户同时接种鸡新城疫Ⅰ系疫苗和鸡痘疫苗，由于鸡新城疫Ⅰ系苗具有很强的干扰作用，可导致鸡痘疫苗免疫失败，从而有可能感染并发生鸡痘；⑸由于消毒不严，使鸡舍内漂浮大量的有害细菌或病毒，当进行接种时，易使细菌或病毒从伤口进入体内，发生疾病；⑹对无母源抗体或母源抗体水平较低的雏鸡，选用毒力较强毒株的疫苗免疫，使免疫的鸡群发病；⑺雏鸡在免疫前，由于母源抗体水平低，遭受外界环境中强毒的感染，免疫接种后激发已感染鸡发病。⑻在未发病的鸡场，使用毒力较强的疫苗免疫时，可引起鸡群发病；⑼鸡群体质较弱，接种疫苗后，易发生疾病；⑽接种疫苗后，因饲养管理不善，使鸡体质下降导致发病。二、预防措施 1、保持良好环境。鸡舍应干净卫生、通风良好，日照充足，饲养密度合理，为鸡群生长提供良好的环境。 2、建立定期消毒制度。对孵化设备、鸡场饲养用具及环境进行定期消毒，防止有害病菌及其它强毒感染。对注射器械也要严格消毒。

免疫组化和免疫荧光的区别[参照材料]

请问你曾经被IHC、ICC和IF所困扰过吗？作者：北京义翘神州在实验中，有没有一种感觉，就是对免疫组化(IHC)，免疫细胞(ICC)，以及免疫荧光(IF)傻傻分不清，那么今天我们就来讨论一下这三者的区别，先贴图上来以便有个大致的区分。从图中我们可以看出，免疫检测技术可以根据报告标签的不同，分为免疫化学和免疫荧光两类，而根据样品类型不同，可以分为组织和细胞检测技术。因此，才会延伸出三个相近的概念。为了更好的区分这三个概念，我们还可以根据他们的英文词根来分析一下，他们的英文名分别是免疫组织化学Immunohistochemistry (IHC)，免疫细胞化学Immunocytochemistry (ICC)，免疫荧光Immunofluorescence (IF)。词根分析： Immuno-指的是免疫技术（例如，抗体和抗原的结合） Histo-指的是组织（细胞以及它周围的细胞外基质） Cyto-指的是细胞（不包含细胞外的基质） Chemistry-在这里指的是化学检测方法（例如，颜色的变化）

Fluorescence-对被激发的荧光团的检测通过对词根的解释，相信你在心中不再迷茫了吧。这三个应用技术都属于免疫技术，都是将抗原与抗体的结合可视化，即通过一定的方法可以直接看到实验结果。而常用的方法就是化学显色和荧光显色。如果报告标签是酶促的，就是免疫化学，如果是荧光的，就是免疫荧光。其实我们纠结免疫荧光的一个原因还在于免疫荧光的英文名字Immunofluorescence (IF)，但若是写成免疫组织荧光(IHF)或是免疫细胞荧光(ICF)，那我们是不是就豁然开朗了。虽然这两个词汇在英文文献中应用的还不是很广泛，但绝对不是我自己杜撰的哦，已经有些学者在使用了，规范化应该也只是时间的问题。可能文字描述还是有些晦涩难懂，那我们就直接上图吧。先不看下面答案，仅从几张图片，你能明白哪张图代表哪种应用吗？ A免疫组织化学：兔EGFR单克隆抗体（10001-R043-50）—人胎盘

种鸭参考免疫程序

种鸭参考免疫程序（番鸭除外） 1～3日龄鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒苗（3～4头份/羽）口服免疫 8～14日龄禽流感（H5N1+H9N2)二联油乳剂灭活苗0.5ml 腿根内侧皮下注射，鸭传染性浆膜炎（鸭疫巴氏杆菌病）—雏鸭大肠杆菌病多价蜂胶复合佐剂灭活苗皮下内侧注射0.3～0.5ml 15～21日龄禽流感（H5N1+H9N2)二联油乳剂灭活苗1ml 腿根内侧皮下注射，二次免疫鸭传染性浆膜炎（鸭疫巴氏杆菌病）—雏鸭大肠杆菌病多价蜂胶复合佐剂灭活苗皮下内侧注射0.5～1ml ，二次免疫； 25～30日龄鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒苗（2～4头份/羽）皮下注射免疫鸭巴氏杆菌蜂胶灭活苗0.5ml/羽肌内或皮下注射 50～60日龄禽流感（H5N1+H9N2)二联油乳剂灭活苗1.5ml 腿根内侧皮下注射，三次免疫鸭传染性浆膜炎（鸭疫巴氏杆菌病）—雏鸭大肠杆菌病多价蜂胶复合佐剂灭活苗皮下内侧注射1ml ，三次免疫；（同时应用“芬易达II”驱绦虫） 120～130日龄禽流感（H5N1+H9N2)二联油乳剂灭活苗1.5ml 腿根内侧皮下注射，四次免疫鸭传染性浆膜炎（鸭疫巴氏杆菌病）—雏鸭大肠杆菌病多价蜂胶复合佐剂灭活苗皮下内侧注射1ml ，四次免疫；（同时应用“芬易达II”驱绦虫）鸡产蛋下降综合征灭活疫苗0.5ml/羽皮下注射鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒苗（2～4头份/羽）皮下注射免疫； 140～150日龄鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒苗（2～4头份/羽）皮下注射免疫鸭巴氏杆菌蜂胶灭活苗2ml/羽肌内或皮下注射以后，每隔5～6个月（鸭瘟、鸭病毒性肝炎、禽流感、鸭传染性浆膜炎、鸭巴氏杆菌病、大肠杆菌病苗）免疫1次，剂量为每羽2ml，此时注射疫苗对鸭只应尽量轻抓轻放，以免因应激而造成短期减蛋。商品代肉鸭基础免疫参考程序（番鸭除外） 1～3日龄鸭瘟鸭病毒性肝炎二联弱毒苗（3～4头份/羽）口服免疫 8～14日龄禽流感（H5N1+H9N2)二联油乳剂灭活苗0.5ml 腿根内侧皮下注射，鸭传染性浆膜炎（鸭疫巴氏杆菌病）—雏鸭大肠杆菌病多价蜂胶复合佐剂灭活苗皮下内侧注射0.3～0.5ml 番鸭、半番鸭、麻鸭参考免疫程序（待修订） 1～3日龄番鸭细小病毒病小鹅瘟二联弱毒苗(或超免蛋黄）1～2头份/羽肌内或皮下注射 7～10日龄雏番鸭呼肠弧病毒性肝炎（花肝病）+鸭疱疹病毒性出血症二联油乳剂灭活苗0.3～0.5ml/羽，皮下注射；同时鸭疱疹病毒性出血症弱毒疫苗0.2～0.5ml/羽，皮下注射 15～21日龄禽流感（H5N1+H9N2)二联油乳剂灭活苗1ml 腿根内侧皮下注射，二次免疫鸭传染性浆膜炎（鸭疫巴氏杆菌病）—雏鸭大肠杆菌病多价蜂胶复合佐剂灭活

规模养猪场中常用的18种疫苗及免疫程序

猪瘟兔化弱毒疫苗的免疫程序应根据猪场猪瘟的流行与发生情况和母源抗体水平等因素而制定。同时，应加强环境、猪舍的消毒卫生，以减少或杜绝猪瘟强毒的污染。 2.猪伪狂犬病疫苗 ⑴灭活疫苗。用猪伪狂犬病病毒鄂A株接种金黄地鼠肾成纤维细胞细胞单层，收获后，经甲醛溶液灭活，加油佐剂乳化制成的灭活疫苗。该疫苗的免疫期为6个月。采用颈部肌肉注射。免疫程序：①育肥仔猪断奶时每头3毫升;②种用仔猪断奶时每头接种3毫升，间隔28～42日，加强免疫接种1次，每头5毫升。以后每隔半年加强免疫接种1次;③妊娠母猪，产前1个月加强免疫接种1次。

⑵弱毒活疫苗。猪伪狂犬病弱毒活疫苗是利用匈牙利的 Barth-K61毒株或罗马尼亚的布加勒斯毒株，接种鸡胚成纤维细胞制成的冻干活疫苗。国内外都有相应的产品。采用肌肉注射。免疫程序：①繁殖母猪在产前1个月接种，注射2毫升;②免疫母猪所产仔猪可在8～10周龄进行接种。后备种猪应在配种前1个月再接种1次;③种公猪每年接种2次。 ⑶基因缺失疫苗。基因工程缺失疫苗的优点是它不仅安全有效而且能够区分免疫接种猪和野毒感染猪，它为该病的控制与净化提供了有效的手段。 4.猪细小病毒灭活疫苗免疫程序：猪细小病毒灭活疫苗主要用于初产后备母猪的免疫接种，一般在后备母猪配种前1个月免疫2次，间隔2周。

5.猪流行性脑炎疫苗免疫程序：种猪于配种前或在蚊虫到来之前(每年的4～5月份)45天，免疫接种2次，间隔2周。经产母猪和种公猪可每年注射1次。 7.仔猪大肠杆菌病K88、K99双价基因工程灭活疫苗免疫程序：母猪产前2周肌肉注射1次。 8.猪传染性萎缩性鼻炎灭活疫苗免疫程序：①商品猪场：妊娠母猪产前1个月颈部皮下注射疫苗2毫升，仔猪可通过初乳获得被动免疫力;②种猪场：除免疫妊娠母猪外，可对免疫母猪所产仔猪进行免疫接种，于7日龄和21～28日龄分别(颈部皮下注射)接种1次。

猪用疫苗免疫副反应发生原因

猪用疫苗免疫副反应发生原因郑杰朱文革韩莉朱秀芝王妍于凤林陈蔚张连祥 (北京市兽医生物药品厂北京昌平; 102209) 摘要：通过可能引起发生免疫副反应的因素，如疫苗、动物有机体、防腐剂、使用方式、包装乳胶和抗体依赖效应等六个方面进行了汇总和综述，同时对可能引起免疫副反应的疫苗方面的影响因素，如外源病毒污染、抗原灭活不彻底、异源蛋白、细菌污染、灭活剂、抗生素和佐剂等六个方面进行了进一步细分。最后简要提出了预防方法。关键词：疫苗、免疫副反应、动物有机体、使用方式、防腐剂、乳胶。疫苗的研发、产业化和应用,极大地降低了传染病的发病率和死亡率,拯救了无数人和动物的生命，所以疫苗在疫病的预防和控制中具有不可替代的作用。疫苗的大量使用，逐步降低了养殖业对抗生素、化学药物的使用量，增加了肉类食品的安全性。随着人民生活水平的提高，对肉食的需求在不断增加,同时随着人员成本的提高、土地获取和融资难度越来越大、环境保护体系逐步健全，共同促进了养猪生产的集约化,集约化的发展进一步推进疫苗品种的增多和疫苗使用量稳步增加。疫苗在田间使用时能引起正常的免疫反应，也可能会引起与免疫作用无关的免疫副反应。 1、免疫副反应及其类型疫苗接种到动物体内所产生与免疫作用无关的，且有损于机体的不良反应称为免疫副反应。免疫副反应一般分为：一般副反应、严重副反应和副反应致死三种；一般副反应不会造成生理功能障碍，无需进行处理，反应持续1~2天后可自行消退，这是疫苗的生物学特性决

定的，如牲猪接种活疫苗后，疫苗毒株可在体内繁殖和复制，出现类似轻度自然感染的临床症状；畜禽一旦发生严重反应，要及时对症治疗和抢救，否则会造成严重后果。按照农业部的要求，每一批疫苗在出厂前必须进行严格的安全试验和效力试验，检验合格后方可进行批签发，所以说对于出厂的每一批产品，公司都会进行严格的检验，检验合格的产品在现场使用时却可能会出现免疫副反应，这可能与质检实验室使用靶动物少，检疫严格、动物房环境控制好，影响因素少等原因有关。 2、免疫副反应的原因分析疫苗在田间使用时发生免疫副反应，可能与以下几种因素有关。 2.1、疫苗抗原在生产过程中，可能存在灭活不彻底、外源病毒污染、细菌污染（内毒素含量高）、血清用量大，使用抗生素、灭活剂和防腐剂等,这些因素可能会造成疫苗在接种后发生免疫副反应；同时作为免疫增强剂的佐剂，也可能是造成免疫副反应的因素之一。 2.1.1、抗原灭活不彻底和外源病毒污染在动物疫苗历史上，发生过多次疫苗事故和灾难；灭活疫苗的抗原灭活不彻底，曾导致历史上数次口蹄疫疫情暴发，欧洲20世纪80年代前后发生几次口蹄疫疫情均与疫苗灭活不彻底有关；2004年肯尼亚,2011年巴拉圭发生的口蹄疫疫情也与使用疫苗有关。在中国猪瘟疫苗的生产历史中，有使用猪睾丸原代细胞生产疫苗的历史阶段，由于供体动物检验不严格，造成猪瘟强毒污染疫苗而发

动物微生物及免疫

动物微生物检验及免疫检测技术牧医1302李光明微生物概念及分类微生物是广泛存在于自然界中的一群肉眼看不见的必须借助光学显微镜观察或电子显微镜才能观察到的微小生物总称分类形态球形菌杆菌螺旋菌基本结构细胞壁细胞膜细胞质核质（核区）细胞质特殊结构荚膜（抵抗吞噬增强侵袭力提供营养水分用于鉴定具有抗原性）鞭毛（运动）牙孢（抵抗外界不良环境的休眠体）菌毛的作用普通菌毛粘附力性菌毛传递质粒耐药性有关革兰氏染色把细菌分为革兰氏阳性（蓝紫色）阴性（红色）病毒概念及特点寄生于活细胞内的非细胞型微生物形态微小能通过细菌滤器需借助电子显微镜观察只有一种核酸(DNA 或RNA) 只能寄生于活细胞内繁殖方式复制对抗生素不敏感对干扰素敏感单位nm 纳米光学显微镜 10乘以100能看清细菌细菌单位微米μm 光学真菌400倍免疫概念是机体识别自身于非自身物质消灭非自身物质的一种生理机能免疫的功能（基本生理机能） 1抵抗感染2免疫监视 3自身稳定中枢免疫器官免疫细胞分化成熟的场所 B 细胞骨髓中分化成熟 T 骨髓或法氏囊（禽免疫活性细胞包括 T 淋巴细胞 B 淋巴细胞完全抗原同时具有免疫原性和反应原性的物质称完全抗原抗原构成的条件 1异源性((异物性) ①异种物质②同种异体物质③自身组织 2分子大小 3化学组成和成分结构的复杂性 \ 4抗原的物理状态抗原的特异性由决定簇决定

抗体概念抗体是有抗原进入机体后刺激B细胞分化增殖为浆细胞进而合成并分泌的一类能与相应抗原发生特异性结和并产生免疫效应的免疫球蛋白根据免疫球蛋白的化学结构及其抗原性差异可分为免疫应答过程识别阶段抗原进入机体后被巨噬细胞吞噬加工处理呈递给T 细胞 B细胞反应阶段 T胞活化增殖一小部分分化为t记忆细胞绝大部分分化为致敏T 细胞最终产生直接杀伤性细胞和淋巴因子 B细胞活化增殖一小部分化为B细胞绝大部分分化为浆细胞最终产生抗体效应阶段直接杀伤性细胞在淋巴因子帮助下杀灭抗原抗体和抗原结婚激活K NK 细胞（或补体）消灭血清学实验概念抗原和与相应的抗体无论在体内还是体外均能发生特异性结合反应并表现出特定的现象人工主动免疫注射疫苗细菌吸收营养物质的方式被动扩散促进扩散

免疫荧光检测

免疫荧光技术（检测抗核抗体（ANA）的实验方案）荧光免疫技术是以荧光物质标记的特异性抗体或抗原作为标准试剂，用于相应抗原或抗体的分析鉴定和定量测定。荧光免疫技术包括荧光抗体染色技术和荧光免疫测定两大类。荧光抗体染色技术是用荧光抗体对细胞、组织切片或其他标本中的抗原或抗体进行鉴定和定位检测，可在荧光显微镜下直接观察结果，称为荧光免疫显微技术，或是应用流式细胞仪进行自动分析检测，称为流式荧光免疫技术。荧光免疫测定主要有时间分辨荧光免疫测定和荧光偏振免疫测定等。本次实验以荧光免疫显微技术检测抗核抗体(ANA)为例进行实习。抗核抗体(antinuclear antibody，ANA)又称抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗原(ENA)和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称，能与所有动物的细胞核发生反应，主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。抗核抗体实验原理以小鼠肝细胞或某些培养细胞(如Hep-2)作抗原片，将病人血清加到抗原片上。如果血清中含有ANA，就会与细胞核成分特异性结合。加入荧光素标记的抗人IgG抗体又可与ANA结合，在荧光显微镜下可见细胞核部位呈现荧光。试剂与器材 1．抗原片现多用商品试剂。如需自行制备，方法如下： (1)肝印片制备：取4-8周龄小鼠，断颈杀死后，剖腹取肝。将肝脏剪成平面块，用生理盐水洗去血细胞，用滤纸吸干渗出的浆液。将切面轻压于载玻片上，使其在载玻片上留下薄层肝细胞。冷风吹干，乙醇固定，冰箱可保存1周。

(2)Hep-2细胞抗原片制备：Hep-2细胞是建株的人喉癌上皮细胞。经适宜培养在载玻片上形成单层细胞抗原片，用洗涤洗去培养基。干燥后，用无水乙醇固定。 (3)肝切片制备：取小鼠肝组织作冰冻切片，厚4μl。-30℃保存备用。 2．异硫氰酸荧光素(FITC)标记的抗人IgG抗体(FITC-抗人IgG抗体)有商品供应，临用时按效价稀释。 3．L PBS 4．缓冲甘油取甘油9份加PBS 1份。 5.待测血清、阳性和阴性对照血清临床标本筛选获得。 6．器材荧光显微镜、孵箱、有盖湿盒、染色缸、吸管、试管等操作方法 1．准备：检查加样板，生物载片恢复室温，标记。 2．稀释：PBS-Tween缓冲液稀释血清，设阴阳性对照。 3．加样：加样板放于泡沫塑料板上，加25μl稀释后血清，至加样板的每一反应区，避免气泡。加完所有标本后开始温育。 4．温育：将生物薄片盖于加样板的凹槽里，反应开始，室温温育30分钟。 5．冲洗：用烧杯盛PBS-Tween缓冲液流水冲洗生物薄片，然后立即将其浸入盛有PBS-Tween缓冲液的小杯中至少1分钟。不必混摇。 6．加样：滴加20μl荧光素标记的抗人球蛋白（结合物）至一洁净加样板的反应区，完全加完方可继续温育。荧光素标记的抗人球蛋白用前需混匀并以PBS-Tween缓冲液稀释。

幼犬的免疫程序及常见疾病的处理

幼犬的免疫程序及常见疾病的处理为了更多的新手能帮助宝宝们做好免疫这一重要环节，特再将这些基本常识汇总首先免疫的最佳时间是8周龄，即小狗刚满2个月时，因为自狗出生从母狗初乳得到的抗体到了8周才消失 8周进行第1次免疫 11周第2次免疫 14周第3次免疫疫苗的品种荷兰英特威美国富道法国维克及国产疫苗（以上是普遍选用的）最常用的疫苗种类犬窝咳疫苗进口犬6联疫苗（预防犬瘟热，传染性肝炎，腺病毒，副流感，钩端螺旋体和细小病毒），进口犬7联疫苗（6联加冠状病毒），狂犬疫苗疫苗是披羊皮的狼-------很多人认为疫苗是很好的药物，其实疫苗是经过弱化，降低活力的病毒，注射疫苗是要在狗体内产生的抗体，从而预防，所以给狗注射疫苗的前提也是很重要的，必须在狗本身健康的前提条件下进行免疫 1 最近很多朋友的爱犬患了各种各样的皮肤病我在这里罗列个自我诊断表，用来帮助大家自己确诊症状主要感染部位可能的原因治疗方法黑色斑点侵扰或舔口允，局部秃毛，溃烂臀部后退尾根跳蚤除虫药切断跳蚤的繁殖循环极度痒痛耳部肘部后退疥疮或疥癣传染内性很强，对环境进行杀螨预防措施摇头晃脑耳部耳螨除虫滴液或针剂毛皮出现疥癣或头皮屑全身毛皮螨有传染性，同上皮肤红肿，持续吸吮受感染处全身，尤其耳爪腹股沟无毛处过敏注射过敏针剂服用消炎药局部红肿抓挠全身昆虫叮咬消炎药皮肤局部湿臭痛痒全身尤其脸脖子湿疹抗生素消炎药蜂巢状凸起肿块急性疥癣身体任何部位过敏反应消炎药

2 腹泻腹泻是表现在消化道的一个症状，但腹泻的原发病不一定就在消化道，根据致病因素，腹泻主要可分为营养性腹泻和病原微生物引起的腹泻先说营养性腹泻大B中含有大量未消化的食物，有厌食，呕吐症状原因有食物突然改变进食过多蛋白质过多再说病原微生物引起的腹泻又分3大类1病毒性腹泻犬细小病毒冠状病毒轮状病毒疱疹病毒引起 2细菌性腹泻沙门氏菌大肠杆菌引起 3 寄生虫性腹泻蛔虫绦虫球虫希望新手们不要认为吃的多吃的好就是营养，相反因为自己肆意胡乱喂养带来的腹泻是更严重的，往往造成很严重的后果萨摩容易患的疾病 1 股关节发育不全（HD症）股关节发育不全是萨摩多法的骨关节疾病，重症是病狗完全不能动，因而及时的发现，早治疗，早康复原因狗狗的股关节位于后腿的大腿根部，正常情况下，大腿骨应正好镶嵌在骨盆的凹陷处，形成关节。但是，股关节发育不全时，因髋臼浅，关节不能很好的吻合在一起，由因大腿骨形状歪曲，而不能够咬合。当咬合进一步恶化时，关节完全脱落，就会出现股关节脱臼。遗传性因素占70%，剩下的30￥是肥胖负担超重或肌肉不发达引起主要症状 1走路时2后腿一起动象兔子跳 2脚尖朝里走 3走路时腰部左右扭摆 4不愿意活动，喜欢坐着 5起立动作不够流畅 6不愿意上台阶预防和治疗脱臼程度浅，症状不明显时，控制运动和体重，可根据需要使用止痛药，以致关节炎症的药

家禽免疫接种技术及注意事项

家禽免疫接种技术及注意事项近年来，随着重大动物疫病防控工作的开展，家禽免疫技术越来越得到重视。家禽免疫已成为禽病防制的主要手段，多种重大禽病通过免疫接种得到了控制。但是事物总存在两个方面。同是免疫，效果就参差不齐。有的农户运用自如，效果良好，有的农户实现不了初衷。血清学监测时抗体滴度总差1～2个单位甚至更多。显然这部分农户免疫技术不规范或某些环节存在问题。为帮助农户更好地开展免疫工作，笔者在本文中尽可能将免疫技术及应注意的问题提出，供农户免疫时参考。一、家禽免疫技术家禽免疫技术主要有以下几种方法：饮水免疫、气雾免疫、注射免疫、点眼滴鼻免疫、刺种免疫、拌料免疫、涂肛或擦肛免疫等等。现分别予以介绍：（一）饮水免疫饮水免疫是将可供口服的疫苗溶于水中，家禽通过饮水，疫苗病毒经腭裂、鼻腔和肠道而获得的局部和全身免疫。优点是省时省力、操作简单、应激小。不足是每只禽饮入的疫苗量不一，免疫效果参差不齐。饮水免疫要达到最佳的免疫效果有以下要求： 1．疫苗要求：疫苗必须高效价且适于饮水免疫，用量一般加倍或3～4倍量即可。 2．水质要求：洁净凉爽pH值适中。即饮水中不含任何对疫苗有害的物质，水温在1 8℃～22℃之间，pH值6.8～7.4为宜。 3．停水要求：免前适时停水，一般春秋季停水＜5小时，炎夏停水＜3小时，冬季停水时间可稍长些。停水时间应视季节、气温和饲料干温度灵活掌握，以便使禽只能尽快而又一致地饮用到疫苗溶液。但若气温过高又是高峰期产蛋鸡不宜停水。 4．水量要求：饮水免疫的用水量一般是禽群在断水后1.5小时左右能够饮用完毕的水量。水量确定的方法：①日龄法：1～2周龄，8～10 ml/只；3～4周龄，15～20 ml/只；5～6周龄，20～30 ml/只；7～8周龄，30～40 ml/只；9～10周龄，40～50 ml/只；10～11 周龄，50～60 ml/只。②经验法：对21日龄以下的商品肉鸡群进行饮水免疫时，用水量多少的一个经验公式是：每1 000只鸡用水量的公升数约等于免疫时的日龄。③实测法：在用疫苗前3天连续记录鸡的饮水量，取其平均值以确定饮水量。更准确的方法应是在接种疫苗前一天，预先测量被免疫鸡群在断水适宜时间后约1.5小时的时间内所实际消耗的饮水量，并据此准备相应的饮水进行次日的饮水免疫。 5．器具要求：①清洁不含消毒剂和洗涤剂。②非金属制品，可用塑料或陶瓷容器。 ③数量充足，以使所有禽能在短时间内同时饮到足够的免疫量。一般50～100只鸡应有一个饮水器。④鸡群大，饮水器不足时可分批进行。 6．操作要求：①疫苗溶液必须充分混匀。.②疫苗稀释不得暴露在阳光下。③冰冻疫苗令其自然融化，不能用火烤、用温水、光照加温。④疫苗液应尽量装满饮水器，以增加对鸡鼻腔、眼的免疫机会。⑤炎热季节饮水免疫应在清晨或傍晚进行。 7．时间要求：从稀释疫苗起到饮用完毕控制在1～2 h之间。 8．其他要求：①为避免意外，较大规模禽群免疫应先进行小群实验，经1 d左右未见异常，再大批饮水免疫。②饮水免疫接种的间隔时间不宜太长，因为饮水免疫不能产生足够的免疫力，不能抵御毒力较强的毒株引起的疫病流行。③小于4日龄的雏鸡不进行饮水免疫，因为太小饮水量不定且常找不到饮水器。 (二)气雾免疫气雾免疫是通过气雾发生器将稀释的疫苗喷射出去，使疫苗雾化粒子均匀地悬浮于空气中，家禽通过呼吸吸入肺内获得免疫的方法。气雾免疫不仅可诱导鸡的呼吸道局部免疫，又可引起全身性的免疫应答，且产生免疫力的时间要比其它方法快。对

常用畜禽参考免疫程序

常用畜禽参考免疫程序（一）、肉鸡免疫程序（包括乌骨鸡、雉、鹌鹑、珍珠鸡） 1日龄：马立克疫苗（CVt988或HVT），皮下注射； 8—10日龄：新城疫（IV系或克隆30）、传支（H120）二联弱毒疫苗，滴眼鼻或气雾免疫；新城疫---禽流感（H9）二联灭活疫苗颈部皮下注射0.3ml。 13---15日龄：传染性囊病弱毒疫苗，饮水（2倍量）。 20—21日龄：新城疫（IV系或克隆30）弱毒疫苗，滴鼻眼。 28-30日龄：传支(Hs2)弱毒疫苗、传染性囊病弱毒疫苗，饮水（2倍量）。（二）蛋鸡免疫程序 1日龄：马立克病双价苗颈部皮下注射0.2ml。 7日龄：预防新城疫，用IV系苗1头份滴鼻点眼。 10日龄：预防传染性支气管炎，用传染性支气管炎（H120） 1头份滴口、滴鼻。 14日龄：预防法氏囊炎，用中毒珠疫苗饮水。 18日龄：预防传染性支气管炎，用呼吸型、肾型、腺胃型传染性支气管炎油乳剂灭活苗0.3ml肌肉注射。 22日龄：预防法氏囊炎，用中毒珠法氏囊炎疫苗2倍量饮水。 27日龄：新城疫活苗2头份饮水，新城疫油乳剂苗0.2ml肌肉注射。鸡痘苗于翅膀下穿刺接种。 50日龄：鸡传染性喉气管炎活疫苗滴鼻、滴口、滴眼。 60日龄：用新城疫-传染性支气管炎油乳剂灭活苗（小二联）0.5ml 肌肉注射。 90日龄：鸡大肠杆菌灭活苗1ml肌肉注射。 120日龄：新城疫、传支、减蛋综合症油乳剂灭活苗（大三联）0.5ml 肌肉注射。

（三）猪的免疫程序 1、生长育肥猪的免疫程序 1日龄：猪瘟常发猪场，猪瘟弱毒苗超前免疫，即仔猪生后在未采食初乳前，先肌肉注射1头份猪瘟弱毒苗，隔1—2小时后再让仔猪吃初乳。 3日龄：鼻内接种伪狂犬病弱毒疫苗。 7-15日龄：肌肉注射气喘病灭活菌苗，蓝耳病弱毒苗。 20日龄：肌肉注射猪瘟、猪丹毒二联苗（或加猪肺疫三联苗）。 25-30日龄：肌肉注射伪狂犬病弱毒疫苗。 30日龄：肌肉或皮下注射传染性萎缩性鼻炎疫苗。 30日龄：肌肉注射仔猪水肿病菌苗。 35-40日龄：仔猪副伤寒菌苗，口服或肌注（在疫区首免后，隔3-4周再二免）。 60日龄：猪瘟、肺疫、丹毒三联苗，2倍量肌注。生长育肥期肌注两次口蹄疫疫苗。 2、后备公、母猪的免疫程序配种前1个月肌肉注射细小病毒、乙型脑炎疫苗。配种前20-30天肌肉注射猪瘟、猪丹毒二联苗（或加猪肺疫的三联苗）配种前1个月肌肉注射伪狂犬病弱毒、口蹄疫、蓝耳病疫苗。 3、经产母猪免疫程序：空怀期：肌肉注射猪瘟、猪丹毒三联苗（或加猪肺疫的三联苗）初产猪：肌注1次细小病毒灭活苗，以后可不注。头三年：每年3-4月份肌注1次乙脑苗，3年后可不注。每年肌肉注射3-4次猪伪狂犬病弱毒疫苗。产前45天、15天：分别注射K88、K99、987p大肠杆菌腹泻菌苗。产前45天：肌注传染性胃肠炎、流行性腹泻、轮状病毒三联疫苗。产前35天：皮下注射传染性萎缩性鼻炎灭活苗。产前30天：肌注仔猪红痢疫苗。产前25天，肌注传染性胃肠炎-流行性腹泻-轮状病毒三联疫苗。

动物微生物与免疫试题

动物微生物与免疫试题（参考答案）一、名词解释 1. 细菌L型答：L型细菌细胞壁缺损，但在一定的条件下仍能够生长和分裂者称为细菌L型。 2. 消毒答：杀死物体上的病原微生物，但不一定杀死全部微生物的方法。 3 类毒素答：外毒素在0.4%的甲醛溶液作用下，经过一段时间可以脱毒，但仍保留原有的抗原性，称为类毒素。 4. 芽孢答：某些细菌在一定环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，称为内芽胞或芽胞。 5. 菌落答：单个细菌繁殖成一堆肉眼可见的细菌集落，称为菌落。 6. 鉴别培养基答：利用各种细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物，观察细菌在其生长后分解底物的作用如何，从而鉴别细菌。 7. 炭疽杆菌“串珠反应” 答：在含有0.5IU/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串，称为“串珠反应”。二、填空

1. 细菌按其外形分为__________ 、__________ 和 __________ 三种类型及某些其他形态。球菌，杆菌，螺菌 2. 细菌细胞的基本结构包括________ 、________ 、 ________ 、________ 和________ 。细胞壁，细胞膜，细胞质，染色质，核糖体 3. 用于消毒灭菌的物理因素有________ 、________ 、 ________ 和________ 等。温度，辐射，干燥，滤过 4. 细菌培养基按其营养组成和用途不同可以分为________ 、________ 、________ 、________ 、________等。基础培养基，增菌培养基，选择性培养基，鉴别培养基，厌氧培养基 5 细菌细胞除了与其生命活动密切相关的基本结构外，某些细菌还具有________ 、________ 、________ 、________ 等特殊的功能结构。荚膜，菌毛，芽胞，质粒 6. 病毒按其核酸类型分为____________ 和____________ 两大类。 DNA病毒，RNA病毒三、选择题（单选或多选） 1. 广义的细菌包括下列那些微生物？A、B、C、D、E。 A、细菌 B、衣原体 C、支原体 D、螺旋体 E、立克次体 2. 细菌的基本结构包括：ACDE A、细胞壁 B、荚膜 C、细胞膜 D、细胞质 E、核质

免疫荧光技术的实验方法及其分类

免疫荧光技术的实验方法及其分类一、免疫标记法及其分类 1.荧光免疫法原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮，检测产物发出的荧光，荧光强度与Mb浓度呈正比，可在8min 内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△Mb)表示。该法重复性好，线性范围宽，具有快速、敏感、准确的特点。以双抗夹心法为例，首先将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体。除去未结合抗体，然后加受检标本，使其中的蛋白抗原与固相抗体形成抗原抗体复合物。洗涤除去未结合物，接着加入荧光标记的抗体，使之与抗原特异性结合，形成抗体—抗原—抗体复合物。最后根据荧光强度，即可对蛋白抗原进行定量。传统的荧光免疫法受本底荧光的干扰较大，时间分辨荧光免疫测定法是以具有特长寿命的稀土金属如铕，作为标记物，加入正常液后激发测定，能有效去除短寿命本底荧光的干扰。

2.放射免疫法放射免疫法是以过量的未标记抗原与放射性物质标记的抗原，竞争性地与抗体结合，形成有放射性的抗原—抗体复合物与无放射性的抗原—抗体复合物，并有过剩的标记抗原与未标记的抗原。然后通过离心沉淀等方法，将抗原—抗体复合物与游离抗原分离，分别测定其放射性强度与标准曲线比较，即可对未标记的待测抗原进行定量。 RIA法测定血清蛋白灵敏度高、特异性强，可准确定量到ng/ml 水平。但早期的方法操作麻烦，耗时长，且有放射性污染。近年来，随着单克隆抗体的应用，RIA的灵敏度又有了较大提高，且操作大为简化，并已有商品试剂盒供应，使用方便。 3.酶联免疫法(ELISA) ELISA法有竞争法和夹心法两种。竞争法是基于标准或血清Mb 和微孑L板上包被的Mb竞争性地与单克隆抗体相结合的原理而建立，该法的最低检测限为10μg/L，线性范围达1 000ug/L。夹心ELISA 法与EIA具有良好的相关性(r=0.92)。ELISA法具有灵敏度高，特异性强，精密度好，操作简单，适用于多份标本的检测，不需特殊仪器设备等优点，易于推广普及。但不适合急诊的快速检测。

(整理)养猪场免疫程序和怎样使用疫苗

养猪场免疫程序和怎样使用疫苗动物用的疫苗(生物制品)，是用微生物(细菌、病毒、支原体、衣原体、钩端螺旋体等)、微生物代谢产物、原虫、动物血液或组织等，经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。动物用的疫苗，所应用的病原微生物应具有良好的免疫原性，经繁殖和处理后制成的制品，用以接种动物能产生相应的良好免疫力。 1.疫苗的类型 (1)传统疫苗传统疫苗是指以传统的常规方法，用细菌或病毒培养液或含毒组织制成的疫苗。传统疫苗在防制畜禽传染病中，起到重要的作用。我们目前所使用的疫苗，主要是传统疫苗。传统疫苗，包括有如下主要的类型： ①灭活疫苗：又称死疫苗，以含有细菌或病毒的材料利用物理或化学的方法处理，使其丧失感染性或毒性而保持有良好的免疫原性，接种动物后能产生主动免疫或被动免疫。灭活苗又分为组织灭活苗(如猪瘟结晶紫疫苗)、培养物灭活苗(猪丹毒氢氧化铝疫苗、猪细小病毒疫苗)。此种疫苗无毒、安全、疫苗性能稳定，易于保存和运输。是疫苗发展的方向。 ②弱毒疫苗：又称活疫苗，是微生物的自然强毒通过物理、化学方法处理和生物的连续继代，使其对原宿主动物丧失致病力或只引起轻

微的亚临床反应，但仍保存良好的免疫原性的毒株，用以制备的疫苗(如猪丹毒弱毒疫苗、猪瘟兔化弱毒疫苗等)。此外，从自然界筛选的自然弱毒株，同样可以制备弱毒疫苗。 ③单价疫苗：利用同一种微生物菌(毒)株或一种微生物中的单一血清型菌(毒)株的增殖培养物所制备的疫苗称为单价疫苗。单价苗对相应之单一血清型微生物所致的疾病有良好的免疫保护效能(如猪肺疫氢氧化铝菌苗、系由6:B血清型猪源多杀性巴氏杆菌强毒株制造，对由A型多杀性巴氏杆菌引起的猪肺疫无免疫保护作用)。 ④多价疫苗：指同一种微生物中若干血清型菌(毒)株的增殖培养物制备的疫苗。多价疫苗能使免疫动物获得完全的保护(如猪多价副伤寒死菌苗)。 ⑤混合疫苗：即多联苗，指利用不同微生物增殖培养物，根据病性特点，按免疫学原理和方法，组配而成。接种动物后，能产生对相应疾病的免疫保护，可以达到一针防多病的目的(如猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗)。 ⑥同源疫苗：指利用同种、同型或同源微生物制备的、而又应用于同种类动物免疫预防的疫苗(如猪瘟兔化弱毒苗、猪流行性腹泻疫苗，可用于预防各种品种猪的猪瘟和猪流行性腹泻症)。