乙酸钠缓冲液(0.05molL,pH3.6-5.6)
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乙酸钠缓冲液(0.05mol/L,pH3.6-5.6)
简介：
乙酸钠缓冲液(0.05mol/L,pH3.6-5.6)是乙酸与乙酸钠按照不同比例混合而得，其乙酸根浓度为0.05mol/L ，主要提供乙酸根，分析试剂，调节pH 值。客户根据需要可选pH 3.6、
3.8、
4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、
5.0、5.2、5.6。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、根据实验具体要求操作。
注意事项：
1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
相关：
编号 名称 R00749 Storage 乙酸钠缓冲液(0.05mol/L,pH3.6-5.6) 500ml RT 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) DH0006
苏木素伊红(HE)染色液 DF0135
多聚甲醛溶液(4% PFA) NA0030
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE) NR0003
Lezol(总RNA 提取试剂) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)
各种缓冲液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 24 Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 ② 687·H2 柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12 ，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 7．磷酸盐缓冲液
2 4·2H 2Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。 24·2H 2KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）
10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃） C HOCH2 NH2 分子量=121.14; 0. 1M 溶液为12.114克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 247·H 2硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
247·10H 2硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（ 0.05M ） 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根） 2 47·10H 2 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+22·10H 2
常见缓冲溶液的配制
常见缓冲溶液的配制 缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。PH缓冲系统对维持生物的正常pH 值，正常生理环境起重要作用。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。 在生化研究工作中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH 值的变化往往直接影响到我们工作的成效。如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大，会使酶活性下降甚至完全失活。所以我们要学会配制缓冲溶液。 由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。 柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris一缓冲液，在4℃时是8.4，在37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，缓冲能力很差。 缓冲液的pH值由哪些因素决定？ 设缓冲系统的弱酸的电离常数为K（平衡常数），平衡时弱酸的浓度为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式： 根据此式可得出下列几点结论： （1）缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关。弱酸一定，但酸和盐的比例不同时，可以得到不同的pH值。当酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同。 （2）酸和盐浓度等比例也增减时，溶液的pH值不便。 （3）酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，一般地说缓冲液有效缓冲范围为PK±1pH。 从上述可知，只要知道缓冲对的PK值，和要配制的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度）时，可按公式计算出[盐]和[酸]的量。这样算涉及到对数的换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，经计算已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了表格。讲义附录部分节录有磷酸缓冲液的配制表。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算处所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。 经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。 所以500ml 0.1M磷酸缓冲液需要Na2HPO4量为: 需Na2HPO4量为 : 计算好后，按计算结果称好药品，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，便得所需的缓冲液。 各种缓冲溶液的配制，均按下表按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确的浓度才能进行，如醋酸、NaOH等 常用体系 1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M） X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200ml pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml 2.2 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0
(最全)常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml 使精品文档，你值得期待 溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。 乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过。 巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000ml，混匀。 枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)：取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2。 枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0)：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml 混合，摇匀。 氨－氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0。 氨－氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。 硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0)：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml。 硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。 硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0)：取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L 氢氧化钠溶液210ml。 醋酸盐缓冲液(pH3.5)：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示)，用水稀释至100ml，即得。 醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)：取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)：取醋酸钠5.1g，加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)：取无水醋酸钠20g，加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)：取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml，加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml，再加水稀释至1000ml。
常见缓冲液的配方
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性， 须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA?2H2O和20g的NaOH，
各种缓冲液配制方法
不同缓冲液的缓冲范围 pH缓冲液 六十一秒的常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理（2007年6月16日更新）（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 甘氨酸分子量＝75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 （二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 ①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。 （六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L） NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。 （七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
（八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L） Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。 （九）巴比妥纳-盐酸缓冲液 巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。 （十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L） 50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100
常见缓冲液配制大全
常见缓冲液配制大全 缓冲液 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸 3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。 乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。 巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用 2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。 巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成 2000ml，即得。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。 甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L 氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH 值至3.25～3.30,即得。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。 枸橼酸盐缓冲液 取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。
各种缓冲液的配制方法大全
磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2mol/L 溶液为28.40克/升。 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，0.2mol/L 溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O 分子量 = 210.14，0.1mol/L 溶液为21.01克/升 20%盐酸溶液如何配置： 取浓盐酸（质量百分比浓度为36.5%）一个体积（如100毫升），加入到96.5毫升水中就可以了。36.5%*100*1.17=20%*mm=213.5(克)所需水的质量为;213.5-117=96.5克，也就是96.5毫升水。 PH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 1 9.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
生物化学实验常用缓冲液的配制方法 1、0.2mol/L 磷酸缓冲液 *组份浓度0.2mol/L （pH 6.0）*配制量1L *配置方法 1. 称取磷酸氢二钠.12水8.82 g。 2. 称取磷酸二氢钠.2水27.34g。 3. 用去离子水溶解并定容至1L。室温保存。 注意：此为母液，使用时稀释40倍使用。 2、洗脱液*组份浓度0.15mol/L （含0.15mol/L 氯化钠的 0.005mol/L pH 6.0的磷酸缓冲液）*配制量10L *配置方法 1.称取氯化钠87.66g。 2.用0.2mol/L pH6.0的磷酸缓冲液250mL溶解。 3.用去离子水稀释至10L。室温保存。 3、0.3mol/L 磷酸缓冲液*组份浓度0.3mol/L （pH7.8）*配制量0.5L *配置方法 1.准确称取磷酸氢二钠.12水49.150g。 2.磷酸二氢钠.2水2.000g。 3.用去离子水溶解并定容至0.5L。室温保存。 注意：此为母液，使用时稀释10 倍使用。 4、0.2mol/L 乙酸缓冲液*组份浓度0.2mol/L （pH4.6）*配制量2L *配置方法 1.准确称取乙酸钠.3水54.44g。 2.加入23mL冰乙酸，溶解。 3.用去离子水溶解并定容至2L。 4℃保存。 5、0.2mol/L 磷酸-柠檬酸缓冲液（pH 2. 6、4.6、6.6）*组份浓度0.2mol/L *配制量各1L *配置方法 1.母液A（0.2mol/L 的Na2HPO4溶液）：称取Na2HPO4.12 水143.256g，用去离子水定容至2L。 2.母液B（0.1mol/L 的柠檬酸溶液）：称取柠檬酸.1水42.028g 用去离子水溶解定容至2L。 3. pH2.6、 4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制： pH值A（mL）B（mL） 2.6 109.0 891.0 4.6 467.5 532.5 6.6 72 7.5 272.5 4.按上表混匀后，4℃保存。 6、20×SSC 缓冲液*配制量1L（pH7.0） *配置方法 1.准确称取175.2g氯化钠。 2.准确称取88.2g柠檬酸钠.2水。 3.溶解于800mL去离子水中。 4.加入数滴10mol/L 氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。
常见缓冲液配制
常用缓冲溶液的配制 （一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。 甘氨酸分子量＝75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 （二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。
邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。 （三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 （四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 ① 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 （五）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）
柠檬酸：C6H8O7·H2O分子量＝210.14 ；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。 （六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L） NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸11.8 mL 稀释至1 L（需标定）。 （七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升 0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
常见缓冲液配制与作用
CONTENTS PROTOCOLS & APPLICATIONS GUIDE I.What a Buffer System Is and How It Works1 II.What Makes a "Good" Buffer1 III.Preparing Buffers2 A.Prepare Buffers at the Appropriate Temperature and Concentration.2 B.Adjust the pH of the Buffer System Correctly.2 C.Take Care of and Use the pH Meter Correctly.2 D.Random Tips about Buffer Preparation2 IV.Appendix A: The Henderson-Hasselbalch Equation3 V.Appendix B: Composition and Preparation of Common Buffers and Solutions4 A.Preparation of Bicarbonate-Carbonate Buffer (pH 9.2–10.8)4 B.Preparation of Citrate Buffer (pH 3.0–6.2)4 C.Preparation of Phosphate Buffer (pH 5.8–8.0 at 25°C)4 https://www.360docs.net/doc/ed17476077.html,position of Additional Buffers and Solutions4 VI.References5 Protocols & Applications Guide https://www.360docs.net/doc/ed17476077.html,
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 24 Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
液或浓盐酸调节，冰箱保存。 6872 柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12 ，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
7．磷酸盐缓冲液 242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。 NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。 磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32 配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4， 配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。 用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。 其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法 Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液 Na2HPO4。2H2O，分子量=178.05 0.2mol/L溶液含35.61g/L 柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L 2 柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L
NaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L （1）醋酸盐溶液的配制： 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8) 取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。 用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L） 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（mol/L） 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 24 Na2HPO4·2H2O分子量= ，mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O分子量= ，mol/L溶液为21.01克/升。4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液 或浓盐酸调节，冰箱保存。 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L ） 6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量， mol/L 溶液为29.41克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L ） 22 7．磷酸盐缓冲液 （1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）
242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液为克/升。 NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = ， mol/L 溶液为克/升。 磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝，pKa2＝； Na 2HPO 4：pKa1＝，pKa2＝ 配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4， 配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。 用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于。 其缺点为：①易与常见的钙 Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。 11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根）
各种缓冲液的配制方法-
各种缓冲液的配制方法 24 O.1mol/L 溶液含 21.01g/L O.1mol/L 溶液含 21.01g/L Na 2HP6 2H 2O,分子量=178.05 0.2mol/L 溶液含 35.61g/L 柠檬 酸.H 2O ，分子量=210.14 柠檬酸.H 2O ，分子量=210.14
0.2mol/L 溶液含27.22g/L NaAC.3 HO,分子量=136.09 (1)醋酸盐溶液的配制： 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH 3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH 3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60?80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH 3.8) 取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH 4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH 4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml, 即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH 6.0) 取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。 用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)](在此，C(HAc)指醋酸的 浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度，Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5 (1.8乘10的-5次方)，PKa=- lgKa=4.75,将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L ,或是 C(HAc)=0.2mol/L 等。若是配制C(HAc)=0.1mol/L ,则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为 82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/ 17.5=5.7mL。将称好的 醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。当然若想配制其它的浓度， 也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。 0.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶 于水中，稀释至500ml。
各种缓冲液配方
各种缓冲液配方 三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 50×TAE Ｂuffeｒ（pH8。５） 组份浓度 2 M Ｔris－醋酸，1００ mM EDＴA 配制量１ L 配制方法 1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中。 Tris24２ｇ ３７。２ｇ Nａ2ＥＤTA·２ H2O 2。向烧杯中加入约8０0 ml的去离子水，充分搅拌溶解. 3。加入５7．1 ml的乙酸，充分搅拌。 4.加去离子水将溶液定容至l Ｌ后，室温保存。 １0×ＴＢＥ Bufｆer （pH8。3） 组份浓度 890 mM Tris—硼酸，２０ mＭ EＤＴA 配制量 1 Ｌ 配制方法l.称量下列试剂,置于ｌL烧杯中。 Tris1０8 g ７．44 ｇ Na2ＥDＴ Ａ·2H2O 硼酸55 g 2.向烧杯中加入约8０0 mｌ的去离子水,充分搅拌溶解。 ３．加去离子水将溶液定容至ｌ L后，室温保存。1０×MOＰS（3－吗啉基丙磺酸）Buffeｒ 组份浓度 200 rnＭMOPS,20 mM ＮaＯAｃ,10 ｍM EＤTA 配制量 1 L 配制方法 1．称41．８ g MOＰＳ，置于1 L烧杯中。 2.加约７０0 ml DＥPC处理水，搅拌溶解. 3。使用２ N NaOH调节pH值至7．0。 4。再向溶液中加入下列试剂。 20 ml 1 ＭNaＯAｃ(DＥP Ｃ处理）
0。５Ｍ EDTA（ｐH8。 20 ml 0)(ＤEＰC处理） 5．用DEPC处理水将溶液定容至1 L。 6．用0。４5 m滤膜过滤除去杂质。 7。室温避光保存。 注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。变黄时也可使用,但变黑时不要使用. 溴乙锭 (10 mg／mｌ） 组份浓度10 ｍg/mｌ溴乙锭 配制量１０0 ｍl 配制方法 1。称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。 2.加入去离子水100 ｍl,充分搅拌数h完全溶解溴乙锭. 3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。 4。溴乙锭的工作浓度为０。5 g/ml。 注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。 Agarｏｓｅ凝胶 配制方法 1．配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0。5×TBE或１×TＡE）. 2．根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中。 3．加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50％容量）。 注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。 4。在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔, 然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。加热过程中，当 溶液沸腾后，请戴上防热手套.小心摇动锥形瓶。使 琼脂糖充分均匀熔化。此操作重复数次，直至琼脂 糖完全熔化。必须注意,在微波炉中加热时间不宜过 长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起 溶液过热暴沸,造成琼脂糖凝胶浓度不准，也会损坏 微波炉.熔化琼脂糖时,必须保证琼脂糖充分完全熔 化,否则，会造成电泳图像模糊不清....文档交流 仅供参考...
常用缓冲液配方及缓冲范围
常见缓冲液的缓冲范围
参考下图：常见缓冲液的缓冲范围
常用缓冲液的配制方法 1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M） 甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L 2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M） 邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L 3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/L Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L C6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L 4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 节，冰箱保存。 5.柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1M） C6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 0.1M溶液含29.41g/L
6.乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2M） NaAc分子量＝136.09 0.2M溶液为27.22g/L 7.磷酸盐缓冲液 (1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2M） Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/L Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22 0.2M溶液含71.64g/L NaH2PO4·H2O分子量＝138.01 0.2M溶液含27.6g/L NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03 0.2M溶液含31.21g/L
(2) 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15M） KH2PO4分子量＝136.09 1/15M溶液含9.078g/L 8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05M） 9.巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）
常用缓冲液配方
常见缓冲液的缓冲范围 缓冲液名称及常用浓度缓冲pH范围主要物质分子量 MES (2吗啉代乙磺酸) 5.5-6.7 195.2 Bis-Tris 5.8-7.2 209.2 HEPES 6.8-8.2 238.3 PIPES 6.1-7.5 302.4 MOPS 6.5-7.9 209.3 Tricine 7.4-8.8 179.2 TEA (三乙醇胺) 7.4-8.3 149.2 甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2.2-5.0 甘氨酸Mr=75.07 邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）2.2-3.8 邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 2.2-8.0 磷酸氢二钠Mr=141.98 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 2.2-6.5 柠檬酸Mr=192.06 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）3.0-6.6 柠檬酸Mr=192.06 柠檬酸钠Mr=257.96 乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2mol/L） 3.6-5.8 乙酸钠Mr=81.76 乙酸Mr=60.05 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液 4.1-5.9 氢钾Mr=204.23 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L） 5.8-8.0 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15 molL） 4.92-8.18 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L） 5.8-8.0 巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃) 6.8-9.6 巴比妥钠Mr=206.18 Tris-盐酸缓冲液(0.05mol/L 25℃) 7.10-9.00 三羟甲基氨基甲烷（Tris）Mr=121.14 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 8.6-10.6 甘氨酸Mr=75.07 硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 9.3-10.1 硼砂Na2B4O7?10H2O Mr=381.43 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol/L) 9.16-10.83 碳酸钠Mr=286.2 碳酸氢钠Mr=84.0 碳酸钠-氢氧化钠缓冲液(0.025mol/L) 9.6-11.0 磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液10.9-12.0 氯化钾-盐酸缓冲液（0.2mol/L） 1.0-2.2 氯化钾Mr=74.55 氯化钾-氢氧化钠缓冲液（0.2mol/L）12.0-13.0 氯化钾Mr=74.55 参考下图：常见缓冲液的缓冲范围 参考下图：常见缓冲液的缓冲范围
常见缓冲液的配制
附溶液配制方法： pH7.2 0.01mol/L PBS KH2PO40.38g Na2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g 蒸馏水加至1000mL pH7.4 PBS/T NaCl8.0g KH2PO40.2g Na2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g） KCl0.2g 吐温200.5mL 蒸馏水加至1000mL pH9.6碳酸盐缓冲液 Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL 0.075mol/L氯化钾低渗液 氯化钾0.559g，蒸馏水100ml 甲醇冰醋酸（3:1）固定液 甲醇3份 冰醋（乙）酸1份 姬姆萨染液 Giemsa原液1ml 1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml 2.3% 柠檬酸钠溶液 柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g 蒸馏水100ml 明胶显影液 明胶粉0.2g 三蒸水10ml 甲酸0.1ml 1% 醋酸 冰醋（乙）酸1ml 蒸馏水99ml
H"o"33342-若丹明123染液 H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1ml DPH贮备液 DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg） 四氢呋喃10ml DPH工作液(2×10-6mol/L) DPH贮备液0.1ml PBS 100ml FDA贮备液 二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg 丙酮1ml FDA工作液 FDA贮备液0.1ml PBS 100ml M-缓冲液（pH7.2） 咪唑50mmol/L 3.404g 氯化钾50mmol/L 3.7g 氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mg EGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg 疏基乙醇1mmol 0.07ml 4mol/L甘油292ml 蒸馏水加至1000ml 1% TritonX-100液 Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1ml M-缓冲液99ml 3% 戊二醛液 戊二醛25% 3ml PBS 液（pH7.2）97ml 0.2% 考马斯亮蓝R250染液 考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml 冰醋（乙）酸7ml 蒸馏水46.5ml 生理盐水(0.85%氯化钠) 氯化钠8.5g 三蒸水1000ml