大鼠颈静脉埋管二种方法比较

大鼠颈静脉埋管二种方法比较
大鼠颈静脉埋管二种方法比较

大鼠解剖图

图Ⅷ-31左心房与左心室The left atrium and left ventricle 11左心房left atrium 12左心室left ventricle 13肺动脉右支right branch of pulmonary artery 14肺静脉pulmonary vein 15前腔静脉precavalvein 16肺动脉左支left branch of pulmonary art 7tery 17后腔静脉postcaval vein 18心中静脉 middle cardiac vein 19头臂动脉brachiocephalic artery 20主动脉弓aortic arch 21乳头肌papillary muscles 22左颈总动脉left common carotid artery 23左锁骨下动脉left subclavian artery 24右前腔静脉right precaval vein 25心外膜extracardium

图Ⅷ-56前肢内侧面The anterior limb. Medial aspect

图Ⅷ-57后肢内侧面(1)The posterior limb. Medial aspect(1) 1腋神经axillary nerve 2桡神经radial nerve 3头静脉cephalic vein 4正中神经median nerve 5正中动脉median artery 6肌支muscular branch 7尺神经ulnar nerve 8臂动脉brachial artery 9胸长神经long thoracic nerve 10胸外侧动脉external thoracic artery I1颈总动脉common carotid artery 12主动脉弓aorta arch 13左心耳left auricle 14右心耳right auricle 15食管esophagus 16胸主动脉thoracic aorta 17腹壁浅动脉superficial epigastric artery 18腹壁浅静脉superficial epigastric vein 19隐动脉saphenous artery 20隐大静脉great saphenous vein

常见小鼠给药和采血方法

小鼠灌胃 小鼠灌胃方法比较简单,需要关注的只有两点: 一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入; 二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。 具体操作过程如下: 1.准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到,实在没有的话,可以用12号的针头,剪去针尖,用砂纸将头端磨平,也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口,自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉,用这样的针头灌胃,损失小鼠食道的可能性比较大。 2.抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中,若一次抓的感觉不是很顺手,要放开重新抓,不要逞强进行下一步操作。 3.抓好小鼠就可以灌胃了,一般用1ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后就可以推注药液了。(我认为,所谓的灌胃,不必要灌胃针头进入小鼠的胃部,进入食管后就可以推药了,这样对小鼠食道的损伤要小点,特别是要长期灌胃给药的情况下。)当然,灌胃针头也可以再往里面深入一点,防止药液从口中流出。 4.灌胃容积一般是0.1~0.2ml/10g,最大0.35ml/10g,每只小鼠的灌胃最大容积不超过0.8ml。 小鼠腹腔注射 腹腔注射是常见的给药方式,尤其是在麻醉时。常见的麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射。 1.小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器,配合4号针头。

2.腹腔注射时右手持注射器,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部,使小鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部,防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔,防止刺伤腹部器官。 3.尤其是对于体重较小的小鼠,腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离,最好是从腹部一侧进针,穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔,注射完药物后,缓缓拔出针头,并轻微旋转针头,防止漏液。 4.小鼠腹腔注射的给药容积一般为5~10ml/kg。 小鼠静脉注射 这也是常见的操作,稍微有点难度,没有指导的话,一开始可能会感觉有点手足无措。但是可以肯定的说,只要掌握了方法,小鼠的尾静脉注射还是很容易的。 操作步骤: 1.首先要固定小鼠,最简单的固定方法就是把小鼠放在盒子里面,让它的尾巴伸在盒盖的外面,用手抓住小鼠尾巴,轻轻往外拽,就可以固定好小鼠了。这种固定方法,小鼠可以在盒子里面活动,固定的也不是很牢固,但是只要你尾静脉注射的手法很熟练,就足以用来注射了。 还有的固定方法就是用一个小的圆筒,最好是金属做的,(可以在当地的铁匠铺,或者买白铁铺里面定做)首先是金属比较结实,而且可以用来固定在铁架台上,方便操作。圆筒的一段有个盖子可以拿下来,盖子中间有个小孔,可以让小鼠的尾巴伸出来(中间的小孔可以用胶布缠一下,防止锐利的边缘割伤小鼠尾巴)。另外一段可以用金属网的结构,网的形状可以做成子弹头的头端形状。网状结构可以让光线透近来,方便小鼠钻进圆筒里面。圆筒的长度约10cm,直径约3~4cm,可以做个系列长度和直径的圆筒,适合不同大小的小鼠。 2.固定好小鼠后就是注射了,一般用一次性的1ml的注射器就可以了,玻璃的1ml的注射器也可以用,针头用4号的就可以了。

小鼠、大鼠采血法介绍

小鼠、大鼠采血法 1.剪尾采血 当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。 2.鼠尾刺血法 大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血 采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。 5.心脏采血 鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血 先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血

牛磺酸对四氯化碳所致大鼠肝硬化门静脉高压的影响

牛磺酸对四氯化碳所致大鼠肝硬化门静脉高压的影响 目的观察牛磺酸對四氯化碳所致大鼠肝硬化门静脉高压的影响,探讨其作用机制。方法采用四氯化碳复合法制备肝硬化门静脉高压大鼠模型。实验大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和牛磺酸低、中、高剂量组,各给药组给予相应药物灌胃。治疗4周后,生化分析仪测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)含量;ELISA测定大鼠血清肝纤4项[Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)]含量以及肝组织羟脯氨酸(HYP)水平;血流动力学法测定大鼠门静脉压(PVP)、门静脉血流量(PVF)、平均动脉压(MAP)并测定心率(HR);硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)含量,化学比色法测定内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性,放射免疫法测定环鸟苷酸(cGMP),紫外-可见分光光度计测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色观察大鼠肝组织病理形态。结果与模型组比较,牛磺酸中、高剂量组大鼠血清ALT、AST和TBIL含量显著降低(P<0.05,P<0.01),CⅣ、PC Ⅲ、HA及HYP含量显著降低(P<0.05,P<0.01),牛磺酸高剂量组LN含量显著降低(P<0.05);牛磺酸中、高剂量组大鼠PVP、PVF显著降低(P<0.05),牛磺酸高剂量组MAP显著升高且HR显著降低(P<0.05);牛磺酸中、高剂量组大鼠肝组织NO含量显著升高(P<0.05,P<0.01),牛磺酸高剂量组eNOS活性、cGMP含量显著升高(P<0.05);牛磺酸中、高剂量组大鼠肝组织SOD、GSH-Px活性显著升高且MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01);牛磺酸各剂量组大鼠肝组织病变明显改善,其中牛磺酸高剂量组效果最为显著。结论牛磺酸对肝硬化门静脉高压大鼠具有抑制作用,其机制可能与牛磺酸保肝降酶,抑制氧化应激损伤,上调eNOS表达、提高NO含量,改善肝功能有关。 Abstract:Objective To investigate the effects of taurine on rats with CCl4-induced portal hypertension;To discuss its mechanism of action. Methods CCl4 compound method was used to prepare portal hypertension rat models. Experimental rats were randomly divided into normal group,model group,positive medicine group and low-,medium- and high-dose taurine groups. Each medication group was given relevant medicine for gavage. After four-week treatment,biochemical analyzer was used to detect the contents of ALT,AST and TBIL;ELISA was used to detect the contents of CⅣ,PCⅢ,LN,HA and the level of HYP in serum;hemodynamic method was used to detect PVP,PVF,MAP and HR;nitrate reduction method was used to detect the contents of NO,chemical colorimetry was used to detect the activity of eNOS,hepatic tissue;the activity of SOD,GSH-Px and the content of MDA in hepatic tissue;HE staining was used to observe the histopathological changes of the hepatic tissue. Results Compared with the model group,the contents of ALT,AST and TBIL in serum in medium- and high-dose taurine groups decreased significantly (P<0.05,P<0.01);the contents of CⅣ,PCⅢ,HA and HYP in serum in medium- and high-dose taurine groups decreased significantly,and LN in high-dose taurine group decreased significantly (P<0.05,P<0.01);the PVP,PVF in medium- and high-dose taurine groups

大鼠和小鼠尾静脉注射技巧与心得

1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧,这是成功的第一步。 小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 或者用这个方法: 1 小鼠要固定好,自制一个笼子,前面通气,中间最好有一个挡板,让小鼠不能后退,筒子后面开一个口,尾巴从这里出来,这样固定牢靠; 2、注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射; 3、先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办; 4、进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。至于能否穿进,个人手感如何,全靠自己啦。多练习,一定很快掌握的,不难,绝对不难!我练习10余只小鼠就比较熟练了2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张;或者用热水或者热毛巾焐热,使静脉扩张;选用适当的针头,越细越好;在尾部较靠近上段的地方注射,这里血管比较大。用酒精或热水擦拭,擦拭的时候,可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白,紧靠白色的尾骨两侧清晰可见两根红色静脉。 3. 用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定,; 手法:握住1ml注射器前面0.1ml 处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处按此手形进针;看针尖前面那个斜面有3/4(关键),如果血管充盈则进1/2,进入,停,上挑针头,进针;左右轻摆动,如可动,可注射。 原则是:把你第一次打进的手形,完全固定下来,每次都重复。 4. 注射注射时左手扯尾,使尾巴紧贴桌面,尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位,一般选择距尾尖1/4或1/3处进针,此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易。进针时针头与桌面平行,针尖稍稍朝下,从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针,一旦进入,须将针头稍稍上挑进入,针头沿血管进入,肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力。若针头不在血管中,手感针行有阻力,有一种堵的感觉。进针时不要太深,针头入皮肤后马上把针头略往上,平行进针,针扎入时有落空感,推液时无阻力则说明成功了!如针头处出现皮丘则说明在皮下,推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处,甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来,不要马上在最高处打,因为你们要打这么多天。要为以后作准备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之,最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天,真的很难打的。 2注射:针进入后,切记手不可发抖,因为血管壁非常薄,容易扎穿。推药时,要缓推。若进针成功,推药顺畅,无阻力;若推药时感觉有阻力,说明针头不在血管中,须及时拔出,重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难,主要是一种感觉。若用上十只鼠练手,你必会找到感觉。心要静,手要稳,要有耐心。我研一的时候尾静脉注射让我头疼万分,越急越打不进去。后来静下心来,边注射边找感觉,很快就熟练了。 祝你找到感觉 5 通过看有无回血来测试针是否在静脉内; 6 .注射. 做到以上步骤,保证注射成功!

实验动物采血指南汇总

实验动物采血指南 采血方法的选择,决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂. 1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~

0.5ml。 2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。 5.心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。 8.股动(静)脉采血先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。 (二)豚鼠采血法 1.耳缘剪口采血将耳消毒后,用锐器(刀或刀片)割破耳缘,在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液,阻止血凝,则血可自切口自动流出,进入盛器。操作时,使耳充血效果较好。此法能采血0.5ml左右。 2.心脏采血取血前应探明心脏搏动最强部位,通常在胸骨左缘的正中,选心跳最显的部位作穿刺。针头宜稍细长些,以免发生手术后穿刺孔出血,其操作手法详见兔心脏采血。因豚鼠身体较小,一般可不必将动物固定在解剖台上,而可由助手握住前后肢进行采血即可。成年豚鼠每周采血应不超过10ml为宜。 3.肌动脉采血将动脉仰位固定在手术台上,剪去腹股沟区的毛,麻醉后,局部用碘酒消毒。切开长约2-3cm的皮肤,使股动脉暴露及分离。然后,用镊子提起股动脉,远端结扎,近端用止血钳夹住,在动脉中央剪一小孔,用无菌玻璃小导管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入,放开止血钳,血液即导管口流出。一次可采血10-20ml。 4.背中足静脉取血助手固定动物,将其右或左右膝关节伸直提到术者面前。术者将

小鼠尾静脉注射的心得体会

小鼠尾静脉注射的心得体会 IV 比IP 困难许多,我练习了非常久了之后,才抓到窍门。由于当时没有一个人能指导我,所以我的IV 技术可说是完全自己摸索出来的。当我遇到困难时,找了许多课本、网络,可是读了却做不出来,果然theory 跟practical 之间还是有差距的。一般书本所形容的IV 很简洁,但实际情况要复杂许多,因此不先训练,是一定打不好静脉针的。照例,打针之前,先量体重、准备要打的液体、做好稀释、准备好完这些 load 好进针筒里面。后,就开始要抓老鼠了。 但打IV 不能靠普通的restraint 方法,因为打静脉要很固定的,不能有丝毫动摇。因此需要一个restrainer ,就是一个小小的塑胶东东,来困住老鼠,但它的尾巴可以掉出来。你就抓住它的尾巴,然后往尾巴上的静脉打针。 这个restrainer 一定要把老鼠牢牢地关在里面,一点都不能动才可以。这时就要尽量把老鼠压在里面,压成一团也没问题,只要不要弄到它骨折,或者呼吸困难就可以了。 一般老鼠虽然喜欢关在一个圆圆的筒子里,但因为IV 需要的是绝对的动弹不得,所以它会被关压到蛮不舒服的。而且老鼠不喜欢别人去碰它的尾巴的,所以打尾巴针对它们来说是相当痛的。如果不牢牢困住,就算有一点点的位置,它也会挣扎的,它一挣扎,你就打不到了。 为什么那么困难呢?就是因为老鼠尾巴的静脉其实不大,很小而已,只要稍微移动,很容易就打错地方了。 打静脉的针头我一般用30G是比26G更加细的针头。 我把步骤简化如下:

1)把针尖向下,即bevel up ,这样比较容易刺进去,位置也能很精准 2)从尾巴的最后面开始试,不要一开始就刺比较靠近身体的部位,因为如果弄错了,还可以一直往上继续试,但如果一刺就刺靠近身体的,就没办法再上了 3)老鼠尾巴有静脉的地方会泛有红色的,就对准红色的线条 4)尾巴要抓紧,不要有丝毫动摇,有时候老鼠会挣扎,就要大力一点抓尾巴 5)刺进去时,尽量把针摆得跟尾巴越平行越好,因为稍微有一点角度就打不进去了(平行的话针就会在血管里面,如果有角度可能会刺过血管到血管下面的组织去)6)可以尽量刺深一点,只要是平行就好,刺得够深的话整支针可以挂在那里不会掉下来的 7)往后拉一拉plunger ,如果看到血,位置就对了! 8)位置对的话,保持针的不动,然后注射,注射的时候会觉得很顺畅,而且可以亲眼看到红色的血管慢慢被你所注射的液体所flushed ,所以红色就会慢慢变成白色 9)最后把针拉出来,针口的位置会流一点血(代表真的是血管嘛),然后用一块棉花按按扎针的部位就可以了

大鼠取血方法

大鼠取血方法 1. 割(剪)尾采血:当所需血量很少时采用本法。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取 血0.1ml,大鼠0.3?0.5ml。 1.4見尖采血才法 将大杖囲進好?阳50乜左右SL水根池城部妁2 血骨 充血后?用球消黑、擦干BU匕用消澎手术旳的去尾尖3 ■ 10 mi叭魅后从用根那向尼尖檢忙血fl朋尖流岀。此法町采L5 -2 mL 2. 鼠尾刺血法:大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉, 拔出针头时即有血滴出,一次可采集10?50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端 穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3. 眼眶静脉丛采血:体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml ;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 将天M冊建庄实验台边Sfir左手抓囂大區拥那皮肤囿定头 部,井轻轻向下压迫用導先稚备好的io 号舍JM甘头顶蝎(怦尖斛閒朝内人垂氏插人内就并向眼底方向转动以便切开押体丛「血敕便会连缨不斷地溝人采血用此法大约可取?-3 取血宪毕?立刻用脱册郴压迫也 环境材料 0.9mm x 100mm,背牛人习櫃便用丫 经常骨—断.30mm晴、弁去屮阀段= EP 曲虻人0.1% IH-比钠< >150U/mgJ 0J mL-均匀涧湿? 50P减下I輻 适帀1mL伞血的抗甌效果肛人 取血则感须熒I R J衿住骨的质昂.杯号井汕. 邀当劣备. 1 Mi ■. ■■ iV ■■■. >■ -K> ■宽敬台曲*輕了F组多步驟同时操作] | ■ cm ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■■ ■琴 L9tt?EP &J

尾静脉注射

大鼠和小鼠尾静脉注射技巧与心得 2009/04/01 16:02[分子|细胞|病毒|免疫 ] 1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直,绷紧,这是成功的第一步。 小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 或者用这个方法:1 小鼠要固定好,自制一个笼子,前面通气,中间最好有一个挡板,让小鼠不能后退,筒子后面开一个口,尾巴从这里出来,这样固定牢靠;2、注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射;3、先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办;4、进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。至于能否穿进,个人手感如何,全靠自己啦。多练习,一定很快掌握的,不难,绝对不难!我练习10余只小鼠就比较熟练了 2. 用酒精棉球擦拭尾巴,使血管扩张;或者用热水或者热毛巾焐热,使静脉扩张;选用适当的针头,越细越好;在尾部较靠近上段的地方注射,这里血管比较大。用酒精或热水擦拭,擦拭的时候,可把尾巴用力扯在桌面上。注射状态为尾巴发白,紧靠白色的尾骨两侧清晰可见两根红色静脉。 3.用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定,; 手法:握住1ml注射器前面0.1ml处。右手小指搭在拽着鼠尾的左手拇指处按此手形进针;看针尖前面那个斜面有3/4(关键),如果血管充盈则进1/2,进入,停,上挑针头,进针;左右轻摆动,如可动,可注射。 原则是:把你第一次打进的手形,完全固定下来,每次都重复。 4.注射:注射时左手扯尾,使尾巴紧贴桌面,尾巴与桌边紧贴转弯处为进针部位,一般选择距尾尖1/4或1/3处进针,此处皮肤较薄,血管清晰,进针容易。进针时针头与桌面平行,针尖稍稍朝下,从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针,一旦进入,须将针头稍稍上挑进入,针头沿血管进入,肉眼可关察到针头前进。如果针头在血管中前进,可明显地感觉到针行通畅,毫无阻力。若针头不在血管中,手感针行有阻力,有一种堵的感觉。进针时不要太深,针头入皮肤后马上把针头略往上,平行进针,针扎入时有落空感,推液时无阻力则说明成功了!如针头处出现皮丘则说明在皮下,推出重来。进针处最好在尾巴的1/3-1/2处,甚至可以更下一点。这样一次失败了还可以往上再来,不要马上在最高处打,因为你们要打这么多天。要为以后作准备。用热水、酒精、红外都可以扩张血管。可以视情况而用。总而言之,最重要的是“熟能生巧”。你最好先练习一下或请高手相助。不然到了最后几天,真的很难打的。 2。注射:针进入后,切记手不可发抖,因为血管壁非常薄,容易扎穿。推药时,要缓推。若进针成功,推药顺畅,无阻力;若推药时感觉有阻力,说明针头不在血管中,须及时拔出,重新进针。一般选用4号或4号半针头。最好用打疫苗的2毫升一次性注射器。尾静脉注射并不难,主要是一种感觉。若用上十只鼠练手,你必会找到感觉。心要静,手要稳,要有耐心。我研一的时候尾静脉注射让我头疼万分,越急越打不进去。后来静下心来,边注射边找感觉,很快就熟练了。 祝你找到感觉 5.通过看有无回血来测试针是否在静脉内; 6.注射. 做到以上步骤,保证注射成功! 注:(1)如果做细胞移植时,应该尽量把细胞打散,不然很容易引起栓塞! (2)练习:建议你先用蓝墨水练手,因为新手往往看不出打入的是皮下还是静脉 其实真的只能熟能生巧一般推荐在尾下1/3处进针,但是我觉得1/2处准确度较好,个人经验针头可以插深入些,防止意外摆动戳破静脉而注入皮下,很多时候你觉得进了血管打的却是皮下,就是因为这个原因。 或者用:经常尾经脉注射胎盘兰,比较容易,静脉在侧面比较粗的那个,可以做个容器,我们是用一个50ml的离心管前面弄个开口,后面的螺盖弄个洞,把老鼠装进去,比较容易,把都对准管小鼠自动进去,把尾巴从盖子的洞穿出来,操作极为方便。刮毛,用热水烫一下,血管涨起来就可以,具体的感觉还要自己实践一下掌握,不过还容易,有3-4只就可以掌握。

小鼠取血方法

1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。 2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。 5.心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。 8.股动(静)脉采血先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。

实验动物采血完全指南

实验动物采血完全指南 凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂. 1.取少量血 a.尾静脉大鼠、小鼠 b.耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 c.眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠 c.舌下静脉兔 d.腹壁静脉青蛙、蟾蜍 e.冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅 2.取中量血 a.后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫 b.前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫 c.耳中央动脉兔 d.颈静脉狗、猫、兔 e.心脏豚鼠、大鼠、小鼠 f.断头大鼠、小鼠 g.翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅 h.颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅 3.取大量血 a.股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔 b.心脏狗、猴、猫、兔 c.颈静脉马、牛、山羊、绵羊 d.摘眼球大鼠、小鼠

采动物品种最大安全采血量(ml) 最小致死采血量(ml) 小鼠0.2 0.3 大鼠 1 2 豚鼠 5 10 兔10 40 狼狗100 500 猎狗50 200 猴15 60 1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃ 左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠 0.3~0.5ml。 2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦 拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手 套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。 左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血 0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿 势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml; 大鼠约5-10ml。 5.心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。 若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。 小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注 射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清 楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术

实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项

实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项 [取材内容] 大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。 [试剂及药品] 戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液 [器材] 备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、 2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐 [取材动物] 大鼠 [取材步骤] 1. 取材前夜禁食,自由饮水。 2. 小鼠称重,按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。 3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴,另外三个手指抓住大鼠的颈部,使大鼠头部向向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部,防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。右手持注射器,从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入,动作轻柔,缓慢注射。注射完药物后,缓缓拔出针头,手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩,促进麻醉药物的吸收,掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。 4.将小鼠四肢固定于解剖台上,暴露小鼠整个胸部和腹部,修剪去腹部毛发,75%酒精消毒。 5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突,向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织,暴露腹壁浅肌层。沿白线钝性分离腹壁肌肉,剪开腹膜,暴露腹腔,将肝脏向上翻起,显露肝门。 6.门静脉血采集:将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉,抽取门静脉血2ml,无创血管夹夹闭门静脉止血。将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜,4℃离心,3000-3500/min,10分钟,吸出上清液,分装,-80摄氏度保存备用。 7.肝脏取材:结扎剪断肝门管道系统,钝锐结合完整取出大鼠肝脏,放置于无菌培养皿,生理盐水冲洗,称重并记录。①切取肝左叶约1mm×1mm×1mm组织3

小鼠尾静脉注射的心得体会

小鼠尾静脉注射的心得体 会 Prepared on 22 November 2020

小鼠尾静脉注射的心得体会 IV比IP困难许多,我练习了非常久了之后,才抓到窍门。由于当时没有一个人能指导我,所以我的IV技术可说是完全自己摸索出来的。当我遇到困难时,找了许多课本、网络,可是读了却做不出来,果然theory跟practical之间还是有差距的。一般书本所形容的IV很简洁,但实际情况要复杂许多,因此不先训练,是一定打不好静脉针的。 照例,打针之前,先量体重、准备要打的液体、做好稀释、load好进针筒里面。准备好完这些后,就开始要抓老鼠了。 但打IV不能靠普通的restraint方法,因为打静脉要很固定的,不能有丝毫动摇。因此需要一个restrainer,就是一个小小的塑胶东东,来困住老鼠,但它的尾巴可以掉出来。你就抓住它的尾巴,然后往尾巴上的静脉打针。 这个restrainer一定要把老鼠牢牢地关在里面,一点都不能动才可以。这时就要尽量把老鼠压在里面,压成一团也没问题,只要不要弄到它骨折,或者呼吸困难就可以了。

一般老鼠虽然喜欢关在一个圆圆的筒子里,但因为IV需要的是绝对的动弹不得,所以它会被关压到蛮不舒服的。而且老鼠不喜欢别人去碰它的尾巴的,所以打尾巴针对它们来说是相当痛的。如果不牢牢困住,就算有一点点的位置,它也会挣扎的,它一挣扎,你就打不到了。 为什么那么困难呢就是因为老鼠尾巴的静脉其实不大,很小而已,只要稍微移动,很容易就打错地方了。 打静脉的针头我一般用30G,是比26G更加细的针头。 我把步骤简化如下: 1)把针尖向下,即bevelup,这样比较容易刺进去,位置也能很精准

大鼠和小鼠的采血方法

大鼠和小鼠的采血方法(最全) 这里主要介绍几种大小鼠的采血方法,以帮助试验中需要用到相关技术的人员。 1)尾尖取血: 当所需血量很少时采用本法。固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在 45 C温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使局新血管 扩张。将鼠尾擦干,剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。如需间隔一定时间,多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾势脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向切割,每次可取0.2?0.3ml血,切割后用棉球压迫止血。这种采血方法在大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。 (2)眼眶后静脉丛取血: 当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突(示眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。刺入深度小鼠2?3mm ,大鼠4?5mm。当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流人玻璃管中。得到所需的血量后,拨出毛细管。若手法恰当,小鼠约可采血0.2?0.3ml,大鼠约可采血0.4?

0.6ml。 (3)断头取血: 当需要较大量的血液,而又不需继续保存动物生命时采用此法。左手捉持动物,使其头略向下倾,右手持剪刀猛力剪掉鼠头,让血液滴入盛器。小鼠可采血0.8?1.0ml,大鼠可采用5?8ml。 (4)眶动脉和眶静脉取血: 此法既能采取较大量的血液,又可避免断头取血法中因组织液的混入导致溶血的现象,现常取代断头取血法。先使动物眼球突出充血后,以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,眼眶内很快流出血液,让血液滴入盛器,直至不流为止。此法由于取血过程中动物未死,心脏不断在跳动,因此取血量比断头法多,一般可取鼠体重4?5 %的血液量,是一种较好的取血方法。 (5)心脏取血: 动物仰卧固定在固定板上,剪去心前区部位的被毛,用碘酒酒精消毒皮肤。在左侧第3?4肋间,用左手食指摸到心搏处,右手取连有4?5号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当针刺入心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进人注射器。此法要求实验者掌握以下要点:要迅速而直接插入心脏,否则,心脏将从针尖处滑脱;如第一次没刺准,将针头抽出重刺,不要在心脏周围乱探,以免损伤心、肺; 要缓慢而稳定的抽吸,否则,太多的真空反而使心脏塌陷。若不需保留动物生命 时,也可麻*醉后切开动物胸部,将注射器直接刺人心脏抽吸血液。(6)大血管取血:

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