保加利亚乳杆菌

保加利亚乳杆菌
保加利亚乳杆菌

保加利亚乳杆菌

录入时间:2009-8-7 10:26:06 来源:食品微生物学

保加利亚乳杆菌是革兰氏阳性菌,微厌氧,最适生长温度为40~43℃.能发酵葡萄糖、果糖和乳糖,但不能利用蔗糖。对热的耐受性差,个别菌株在75℃.条件下能耐受20min。蛋白质分解能力弱。对抗生素不如嗜热链球菌敏感。细胞两端钝圆,呈细杆状,单个或成链,频繁传代会变形。培养基和培养温度对细胞形态影响很大。在20℃.乳中培养,细胞可成为长的纤维状菌;在50℃.下培养,细胞停止生长,如在此温度下继续培养,细胞性状变得不规则。在冷的酸奶中,由于温度和高酸度的影响,会有异常杆菌出现,可能是由于氧的阻碍作用或者氮源不适合。在琼脂平板上培养时,细胞形状不规则。属同型乳酸发酵菌,产生D(-)-乳酸;将嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌混合培养,两者的生长情况都比各自单独培养时好。这是因为保加利亚乳杆菌分解酪蛋白,游离出的氨基酸为嗜热链球菌的生长提供了营养物质,而嗜热链球菌产生的甲酸,能促进保加利亚乳杆菌的生长。对牛乳进行杀菌处理时,如采用90℃.加热5min或85℃.加热20~30min,牛奶中甲酸的含量比较多,用这样的牛奶来培养保加利亚乳杆菌可得到满意的结果。在发酵过程中可产生香味物质乙醛。

Yogurt(酸奶酪,也写作Yoghurt)一词就是色雷斯语。Yog意为“凝稠”,Urt意思是“奶”。据历史记载色雷斯人在公元前3500年左右就生活在这片土地上,在公元前5世纪建立了第一个色雷斯国家。据说酸奶是色雷斯人用羊皮口袋装牛奶系在腰上,体温使牛奶里的细菌繁殖、发酵而生成的。

但是要说只有保加利亚先民发明了酸奶,“仅此一家,别无他店”,恐怕也不完全正确。因为据史书记载,我国蒙古族早在汉代以前就已掌握了制奶技术,公元641年大唐文成公主进藏时,也有“酸奶”的记载。1958年我第一次到新疆时,在哈萨克牧民家看到,他们就是用羊皮口袋装酸马奶。在我国牧区,酸马奶、酸羊奶、酸牛奶是生活中常见的饮料,牧民喝酸牛奶者少,却离不开酸马奶;酸马奶还是牧民招待贵宾必备之物。干奶酪乃是牧民放牧时携带的日常“干粮”。因此,传说酸奶和干奶酪是当年成吉思汗蒙古部队的军粮之一,是顺理成章的事情,勿庸置疑。可是为什么保加利亚酸奶名扬四海呢?

保加利亚是巴尔干半岛国家,位于东南欧黑海之滨,国土的1/3为林地,1/5为牧草地,山川秀丽,气候宜人,居民的寿命长。这引起了科学家的注意。20世纪初,俄国著名的免疫学家伊里亚·梅契尼可夫(1908年获诺贝尔奖)在研究36个国家的人口数据时发现,保加利亚百岁老人的数目居各国之首。进一步

研究保加利亚人的生活与其他因素之后,梅契尼可夫认为保加利亚人长寿的原因在于他们长期、大量地饮用酸奶。神奇地是,近来的资料表明,上世纪80年代,保加利亚的酸奶人均年消费量为40升,可是到2001年却下降至22升,在酸奶消费量下降的过程中,百岁老人也显著减少了(2001年还有187人)。

茫茫宇宙,奥妙无穷;微观世界,五光十色。看不见的细菌,也竟有与人类“为善”或“为恶”之分。乳酸菌就是一组对人体有益的细菌,广泛存在于自然界,在人类和牲畜的口腔、肠道、阴道中也都有乳酸菌长驻,保护着机体健康。不同的民族早就创造了自己的发酵食品,如奶制品、食醋、酸菜、泡菜等,但直到1857年,才由法国微生物学家巴斯德弄清楚,引起发酵作用的是乳酸菌。后来,又不断有人发现了乳球菌、高加索乳杆菌、双歧杆菌等许多乳酸菌。保加利亚酸奶中的乳酸菌,在分类上属于乳酸杆菌,因其菌种产地、微生物特性、效能优异等特点,被微生物学家命名为德氏乳杆菌保加利亚亚种(简称保加利亚乳杆菌)。一种细菌被冠以国名,而且传宗接代,繁衍至今,遍布全世界,又效能优异,助人健康长寿,确实不能不令人感到神奇。

乳酸菌是一组菌的总称,其中包括乳球菌、片球菌、明串球菌、乳杆菌(其中以保加利亚乳杆菌为代表)和双歧杆菌。它们有一个共同的本领,就是能发酵糖而获得能量,产生大量乳酸。乳酸菌的乳酸发酵,是采取同化乳酸发酵(糖类只产生乳酸)和异化乳酸发酵(从糖产生50%以上的乳酸及其他物质)两种方式进行的。不同的杆菌和球菌,各自掌握着不同的发酵方式,各有各的看家本领。

科学家已经指出,保加利亚人长寿的原因在于他们长时间、大量地喝酸奶。那么酸奶有什么奥秘呢?

现在,工业生产最常用的乳酸菌是保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等。

首先,牛奶(或其他奶)经过发酵,改善了营养成分并提高了利用率。同时,抑制有害的细菌和有毒物质,保护了人体健康。

乳酸菌的第一个本事是能发酵乳糖。经过复杂的化学反应过程,先把乳糖分解成葡萄糖和半乳糖,最后把它变成乳酸。中国有许多人肠中的乳糖酶低,难于分解、吸收奶中的乳糖,所以喝牛奶后容易引起腹胀、腹泻。而经乳酸菌发酵后产生的半乳糖、葡萄糖,不但容易吸收,还是人脑和神经发育所需,尤对婴儿脑发育有益;所产生的乳酸,能促进胃内容物清空,减少胃酸过多分泌,提高钙、磷、铁的利用率,抑制胃肠中的有害细菌。

乳酸菌的第二个本事是分解乳蛋白。牛奶中的游离氨基酸(组成蛋白质的成分)很少,而乳蛋白的颗粒较大,较难吸收。乳酸菌为了生存,就必须分解蛋白,以得到所需的氨基酸。在乳酸菌的细胞壁上就存在着蛋白酶,能将蛋白质分解成肽,然后把肽吞噬到细胞内,用细胞内肤酶把肽再分解成各种氨基酸。这时乳蛋白就成为细微的凝固奶酪;肽和氨基酸易于消化、吸收,提高了蛋白的利用率。奶中的脂肪由于发酵,脂质被分解,因而脂肪酸增加,可比原奶中的脂肪酸多2倍,在成熟奶酪中一脂肪酸增加6倍。奶中脂肪本来就是易消化的细微脂肪球,还含有不饱和脂肪酸和卵磷脂,均对心血管有益,再加上乳酸菌的作用,其营养价值更佳。牛奶中的微量元素含量在发酵过程中没有变化,但发酵提高了钙磷的吸收率。

乳酸菌的第三个本事是能产生特殊的香气,使酸奶、干奶酪有一种独具的风味。据研究,这种特有的风味是由于乳酸菌在发酵过程中产生的二乙酰和乙醛造成的(主要是由乙醛)。在酸奶中,此物质基本上是保加利亚乳杆菌产生的。

其次,酸奶能抑制肠道中的致病菌和腐败菌的繁殖,饮用酸奶后,粪便中的大肠杆菌、产气荚膜梭形菌数量减少,产生寡糖,改善通便,缩短粪便在大肠中的时间。乳酸菌发酵产生的乳酸和乙酸,有杀菌作用,而且有些菌种如保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌还能产生过氧化氢(H2O2),有抑菌作用;有些菌种如保加利亚乳杆菌等还能产生多种抗菌素,这些抗菌素对沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌、需氧芽抱杆菌、梭形菌、假单胞菌等有拮抗作用。因此,酸奶能调整肠道中菌群之间的平衡,抑制有害细菌生长,有预防条件致病菌在人体免疫力低时发生感染的作用,从而对人体起到保护作用。大量服用抗生素的病人饮用酸奶,可以预防或减轻肠道菌群紊乱。

再次,酸奶有降低血中胆固醇的作用。在进食高胆固醇食物但同时大量饮用酸奶的民族中,其血中胆固醇水平并不高。

还有,酸奶具有抗癌作用。主要是由于肠道菌群状况改善,抑制了致癌物质产生,降低肠中靛基质和酚的含量;活化了免疫功能,抑制癌细胞增殖。另外,自保加利亚科学家博格达诺夫报告酸奶有直接抑制癌细胞的作用后,不断有人进行研究,在实验中发现,保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌发酵的酸奶对实验动物体内的癌细胞均有抑制作用。

【CN109811031A】一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910162463.0 (22)申请日 2019.03.05 (71)申请人 扬州大学 地址 225009 江苏省扬州市大学南路88号 申请人 丹阳市康力乳制品有限公司 (72)发明人 顾瑞霞 张玉律 张臣臣 黄玉军  陈霞 陈大卫 印伯星 管玉新  张兆俊  (74)专利代理机构 扬州苏中专利事务所(普通 合伙) 32222 代理人 沈志海 (51)Int.Cl. C12Q 1/04(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法(57)摘要一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法,属于微生物发酵及食品加工领域,利用生长曲线对本实验室保藏的12株鼠李糖乳杆菌进行区分,严格限定菌株传代时间,对12株菌进行3次传代,使菌株的生长状态稳定,利用自动生长曲线分析仪在600nm波长处测定12株菌在不同碳源条件下的光密度值,连续测定48小时,采用主成分分析法对测得的生长曲线进行分析,综合考虑3种碳源,鉴定方法科学,原理清晰,与现有的核糖体分型技术操作流程相比,本发明操作流程为菌株纯化-同步-生长曲线测定-分析,操作简单,成本较低,建立了快捷可靠的株水平上的鼠李糖乳杆菌区 分手段。权利要求书1页 说明书7页 附图2页CN 109811031 A 2019.05.28 C N 109811031 A

权 利 要 求 书1/1页CN 109811031 A 1.一种新型鼠李糖乳杆菌鉴定方法,其特征在于,所述鉴定方法如下: (1)鼠李糖乳杆菌培养 利用生长曲线对12株鼠李糖乳杆菌进行区分,无菌条件下,将12株菌的菌粉接种于MRS 肉汤培养基,37℃培养24小时,将复苏的菌液在MRS固体培养基上划线纯化; (2)鼠李糖乳杆菌形态观察 将纯化的菌落转接至MRS培养基,37℃培养24小时,收集1mL菌液,6000g离心5分钟,用纯净水重悬菌体;吸取10μL至载玻片,固定制片,染色,在光学显微镜100倍油镜下观察菌体形态; (3)鼠李糖乳杆菌生长曲线测定 严格限定菌株传代时间,对12株菌进行3次传代,使菌株的生长状态稳定,将活化的菌液按3%的接种量接种到不同碳源的MRS肉汤培养基中,混匀后用移液枪精确吸取300μL至蜂窝培养板,每株菌做三个平行样,然后放入微生物自动生长曲线分析仪,参数设置为37℃培养48h,每隔15min读取一次数据,重复试验5次; (4)鼠李糖乳杆菌生长曲线比较 选取所有测定的时间点及其对应的OD600nm值,利用SIMCA 14.1软件进行分类主成分分析,考察不同菌株之间的生长情况的差异,采用分类PCA的方法对各个菌株所有时间点的OD600nm值进行处理,将每一株鼠李糖乳杆菌分为一类,共12类,直观考察各组之间的相似和差异情况,样本与所选模型的相似度>0.05,记为“×”,相似度<0.05,记为“√”; (4-1)葡萄糖作碳源,PCA分类法的比较 在葡萄糖作碳源时,PCA分类法的效果较差,151m和hsryfm1301相似度高,BG和F相似度高,Bm01和F、grx19、LV1、SP1相似度高,CRL1505和F相似度高,F和grx19、hsryfm1301、LV1相似度高,grx19和LV1、SP1相似度高,LV1和SP1相似度高,其它菌株均可区分,将12株菌分为5个类型; (4-2)乳糖作碳源,PCA分类法的比较 在乳糖作碳源时,Bm01和F、LV1相似度高,F和grx10、grx19、LV1相似度高,其它菌株均可区分,将12株菌分为9个类型; (4-3)蔗糖作碳源,PCA分类法的比较 在蔗糖作碳源时,只有151m和hsryfm1301相似度高,BG和grx10相似度高,其它菌株均可区分,将12株菌分为10个类型; (5)鼠李糖乳杆菌菌株的区分 葡萄糖是大多数乳酸菌的偏爱碳源,因而葡萄糖对菌株的区分能力不佳,乳糖和蔗糖的区分能力较好,综合三种碳源下,在试验进行的12株鼠李糖乳杆菌菌株中,均可利用生长曲线数据进行区分。 2

丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌体外混合培养对肠道致病菌的影响

丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌体外混合培养对肠道致病菌的影响 [摘要] 本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养对肠道中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌和大肠杆菌4种致病菌的影响。结果表明:丁酸梭菌对这4种菌均有明显的抑制作用,可使其菌落数下降3~5个数量级;鼠李糖乳杆菌可降低产气荚膜梭菌、沙门氏菌菌落数;丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养可使4种致病菌菌落数均下降3~4个数量级。由此可见,两种菌混合培养对 4 种病原微生物的抑制无协同作用。 [关键词] 丁酸梭菌;鼠李糖乳杆菌;混合培养;肠道致病菌 [Abstract] This experiment was conducted to study the effects of the mixed culture of Clostridium butyricum and Lac- tobacillus rhamnosus on intestinal pathogens,including Salmonella gallinarum,Staphylococcus aureus,Clostridium perfrin- gens and Escherichia coli.The results showed that:the Clostridium butyricum significantly inhibited the number of these four types of bacteria and made them down 3 ~ 5 orders of magnitude;Lactobacillus rhamnosus reduced Clostridium per- fringens,Salmonella gallinarum colonies;the mixed culture of Clostridium butyricum and Lactobacillus rhamnosus made four kinds of bacteria down 3 ~ 4 orders of magnitude.The results indicated that the mixed culture of strains had no syner- gistic inhibition effect on the four kinds of pathogenic microorganisms. [Key words] Clostridium butyricum;Lactobacillus rhamnosus;mixed culture;enteric pathogens 丁酸梭菌属于梭菌属,是一种专性厌氧的革 兰氏阳性芽孢杆菌,其广泛分布于土壤,也能从 健康动物的肠道中分离出来。丁酸梭菌适合动物 的肠道厌氧环境(呼慧娟等,2011),可以控制消 化道紊乱(张晓阳等,2012),有效抑制有害菌(曹 广添等,2012)。鼠李糖乳杆菌属于乳杆菌,具有 较强的酸及胆碱耐受能力(王玉华等,2008),有 抑制有害菌的作用(吴光伟和韩建春,2009),具 有抗氧化活性,并且可以影响机体免疫功能。目 前丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌均被广泛用作饲料 添加剂,本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌 联合培养对产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌、沙 门氏菌、大肠杆菌的抑制作用,为微生物制剂联 和使用提供理论依据。 1 材料与方法

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