第二十五章 克隆动物培育技术
克隆技术在动植物育种上的应用案例分析
克隆技术在动植物育种上的应用案例分析引言近年来，克隆技术在动植物育种上的应用越来越广泛，对农业、畜牧业以及环境保护等领域产生了深远的影响。
本文将通过分析几个克隆技术在动植物育种上的具体应用案例，探讨其应用的优势和局限性，以期更好地理解克隆技术在育种领域的潜力和挑战。
一、动物育种中的克隆技术应用案例1. 羊“多莉”的克隆羊“多莉”是1996年由苏格兰罗斯林研究所成功克隆的一只绵羊。
多莉的克隆开创了克隆动物的先河，引起了全球范围的轰动。
多莉的克隆通过重编程成体细胞遗传物质，将其转移到受卵母细胞中，进而发育为胚胎，最终移植到代孕母羊中。
多莉的成功克隆突破了传统的动物育种限制，为改良种畜以及保护濒危物种提供了新思路。
2. 克隆技术在犬科动物育种中的应用克隆技术在犬科动物育种中的应用也取得了显著的成果。
例如，韩国首尔国立大学克隆研究所成功克隆了一只命名为“Snuppy”的阿富汗猎犬，它是全球首只经克隆技术诞生的犬科动物。
通过克隆技术，可以复制优秀的犬种基因，确保优质犬类品种的延续。
二、植物育种中的克隆技术应用案例1. 克隆苗技术在经济作物育种中的应用克隆苗技术是一种用于扩繁特定种类植物的方法，具有较高的效率和准确性。
例如，台湾水果出口商将克隆苗技术应用于香蕉的育种中。
克隆苗技术可以确保下一代植物具有预期的产量、品质和特性，从而提高了经济作物的产量和市场竞争力。
2. 克隆技术在植物保护和环境修复中的应用克隆技术在植物保护和环境修复方面也有广泛的应用潜力。
例如，研究人员可以利用克隆技术培育抗病、抗虫或耐盐碱的植株，以提高农作物的抗病虫害能力和适应环境的能力。
此外，通过克隆技术可以快速繁殖罕见濒危植物，以保护这些宝贵的生态资源。
三、克隆技术应用的优势和局限性克隆技术在动植物育种中有许多优势，但同时也存在一些局限性。
1. 优势首先，克隆技术可以复制具有优良基因的个体，实现优质繁殖。
其次，克隆技术可以在短时间内大量复制出相同的个体，提高了传统育种方法所无法比拟的繁殖效率。
第二节克隆技术课件2022-2023学年北师大版生物八年级下册
学家认为，下列哪种技术为挽救珍稀动物提供了切实可 行的途径 ( B )
A.转基因技术
B.克隆技术
C.发酵技术
D.酶工程
2.下列现代生物技术，在目前条件下不宜推广的是( B ) A.克隆病人的组织或器官用于移植 B.克隆人的新个体 C.基因诊断和基因治疗 D.用克隆技术拯救濒危动物
3.下图是克隆羊“多莉"的培育过程示意图。
应用1：保护和拯救濒危动物 应用2：快速培养优良品质的家畜，防家禽和家畜良种 的退化 应用3：生产可供人体移植的器官
最好的办法
克隆
四、克隆技术引起伦理之争
科学技术就像一把“双刃剑”
你愿意被克隆吗或者你赞成克隆人吗？
剑柄掌握在人类手中，
只要大家共同遵守伦理道德，合
正 理的开发和利用克隆技术，我们
反
母羊B
（提供细 胞核）
卵细胞
取核植入
乳腺细胞
去核
重组卵细胞
体外培养
2.细胞培养
早期胚胎 3.胚胎移植
母羊C
移植入代孕母羊C子 宫内,母羊C怀孕
克隆羊 分娩 多莉
分析讨论
1. 多莉有几个母亲，它的性状与哪只母羊最相似？
多莉的性状与母羊B最相似，母羊B提供细胞核，细胞 核是遗传的控制中心，遗传物质主要存在于细胞核中。 2. 你认为科学家利用的哪些生物技术是取得动物克隆成功的 “秘诀” ？ 核移植技术、细胞培养技术，胚胎移植技术是取得动物克 隆成功的“秘诀”。
草莓的无性生殖
第25章生物技术
第二节 现代生物技术
（第二课时 克隆技术）
一、克隆技术的概念
什么是克隆？
“克隆”是生物体通过体细胞进行的无性 生殖，从而形成的遗传物质完全相同的后 代个体，克隆属于无性生殖”。
克隆技术在动植物育种中的应用
克隆技术在动植物育种中的应用近年来，克隆技术成为了人们关注的焦点，它对于改善农业生产和保护生态环境，发挥着越来越重要的作用。
尤其是在动植物育种方面，克隆技术的应用正逐渐成熟。
本文将着重介绍克隆技术在动植物育种中的应用及其优势。
一、动物育种中克隆技术的应用克隆技术在动物育种中的应用，主要体现在两个方面：一是对优良品种个体的复制繁殖；二是对基因重组体的构建和功能研究。
1.优良品种的复制繁殖在动物的育种中，优良品种的培育是非常重要且复杂的一个问题。
而克隆技术的出现，使得这一问题得到了很好的解决。
如在奶牛、绵羊、猪等畜牧动物方面，通过克隆技术可以复制出高产、良种、品质优良的优秀个体。
可以说，这种方式比传统的繁殖方式效果更为明显。
2.基因重组体的构建和功能研究动物育种中除了优良品种的培育之外，还需要对基因重组体进行构建和功能研究。
通过克隆技术，可以将某种基因序列剪切下来，然后通过载体回转到目标细胞体内，从而制备出新的基因重组体，探究其功能，这对于兽医学研究和动物生产实践非常有意义。
二、植物育种中克隆技术的应用克隆技术在植物育种中的应用，主要体现在两个方面：一是对超级植物的育成；二是对遗传物质的筛选、改造和繁殖。
1.超级植物的育成植物育种中，超级植物是指那些效益高、适应性强、能够在多种非适宜条件下生长的植物。
利用克隆技术，可以通过多种方式，如单细胞分裂、愈伤组织培养等方案，高效快速地繁殖超级植物。
2.植物遗传物质的筛选、改造和繁殖克隆技术在植物育种中的另一个重要应用是，筛选、改造和繁殖遗传物质。
利用克隆技术可以精确地选择优势基因，同时还能通过遗传技术改变植物的基因组，实现功能上或是形态上的改造，从而提高植物的质量。
三、克隆技术应用的优势从以上的介绍可以看出，克隆技术在动植物育种中的应用是非常广泛的。
那么，克隆技术的应用又有哪些优势呢？1.提高遗传物质的稳定性和纯度克隆技术在造新种是很有优势的，克隆出来的植物或者动物的遗传物质是非常稳定的，有助于保证新种的基本稳定性。
经典：第二十五章-克隆动物培育技术
克隆绵羊——多莉（Dolly）的培育示意图
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二、人工诱导雌核发育技术
• 技术关键：一是使精子的遗传物质失活且保持精 子激活卵子发育的能力；二是诱导卵子二倍体形 成。
• 使精子遗传物质失活的办法一般是采用辐射处理 (如γ线、X射线、紫外线等)。
• 诱导卵子二倍体形成的办法，一是在受精后不久 抑制第二极体排出；二是在受精卵第一次卵裂时， 抑制有丝分裂。可以用温度(冷休克或热休克)、 静水压和化学(秋水仙素、细胞松弛素B等)等方法。
供体细胞的准备方面，通常采用建立细胞系的办法 。 包括：① 胚胎干细胞系的建立。② TNT4细胞系的建 立。 将供体细胞的细胞周期做同步法处理，即G0期的诱导。 方法是：在5d内将培养液的血清浓度由10.0%降至 0.5%。
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2、受体细胞的准备
受体细胞有3类：卵母细胞、原核期受精卵和2 细胞期胚胎细胞。 获得卵母细胞多采用活体超排的方法。 卵母细胞的去核目前多采用显微操作法，即在 显微镜下用外径为20μm的微细玻璃管吸管吸 取细胞核。常用的去核方法有盲吸法、半卵法 和功能去核法等。
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• 动物克隆技术方法可分为胚胎分割、胚胎 嵌合、细胞核移植、雌核或雄核发育等。
• 细胞核移植方法又分为胚胎细胞核移植、 胚胎干细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移 植和体细胞核移植等。
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一、细胞核移植克隆技术
其基本技术环节除显微操作技术外，主要包括 ： 1. 供体细胞（核供体）的准备。 2. 受体细胞（细胞质受体）的准备。 3. 核移植。 4. 核质融合及卵母细胞质的激活。 5. 重构胚的培养和移植。 6. 重复克隆。 7. 克隆动物的鉴定。
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⑵ 哺乳类的核移植实验
1997年，英国 Roslin研究所的Wilmut等用乳腺细 胞核移植培育克隆绵羊——“多莉 (Dolly)”。 Wilmut等采用6岁母羊（白面）怀孕3个月时的乳 腺细胞进行核移植。供体核在血清浓度从10％降 至0.5％的培养液中诱导至静止期，然后移入去核 卵母细胞，发育为桑椹胚和囊胚再移植到受体母 羊（黑面），结果产羔l头（白面） ，即著名的 “多莉”。 这是世界上首次用体细胞克隆获得的后代，划时 代意义在于证明动物成体细胞核仍具有发育全能 性。
克隆动物养殖技术现状及未来发展趋势展望
克隆动物养殖技术现状及未来发展趋势展望克隆动物养殖技术自从首次成功应用于动物克隆诞生的“多利羊”以来，已经取得了显著的进展和许多重要的突破。
近年来，克隆技术的发展日益迅猛，成为生物科学中备受关注的热点领域之一。
本文将深入分析克隆动物养殖技术的现状，并展望其未来发展趋势。
首先，我们来看克隆动物养殖技术的现状。
克隆技术是一种通过细胞核转移或胚胎分裂等方法，使得新生个体与原个体的基因完全一致的技术。
通过这种技术，科学家们成功地克隆了多种动物，包括羊、猪、猫、狗等。
克隆动物养殖技术的成功应用使得在畜牧业、医学研究和基因工程等领域都具有巨大的潜力。
在畜牧业方面，克隆技术可用于提高畜禽的遗传品质，加速育种进程，增加畜禽的生产效益。
例如，通过克隆技术可以复制高产奶牛，提高乳制品的生产量，同时减少繁殖时间和成本。
在医学研究领域，克隆动物可以作为疾病模型进行研究，探索基因在疾病发生和发展中的作用。
此外，在基因工程领域，克隆技术也为研究人员提供了更多的研究材料和手段，有助于加速新药的研发和生产。
然而，克隆动物养殖技术也面临着一些挑战和争议。
首先，克隆动物的健康问题是人们最关心的事项之一。
相对于自然繁殖，克隆动物的健康状况可能存在一些不确定因素，包括发育异常、免疫功能缺陷等。
此外，克隆动物养殖技术的高昂成本也限制了其在大规模商业应用中的推广。
目前，克隆动物的成本仍然较高，远超过传统的繁殖方式，限制了其在畜牧业中的普及。
然而，尽管存在一些困难和挑战，克隆动物养殖技术仍然有着良好的发展前景。
未来的发展趋势主要体现在以下几个方面：首先，随着技术的进一步发展和成本的降低，克隆动物养殖技术将逐渐普及。
随着克隆技术的不断突破与完善，未来可以预见，其成本将会逐渐降低，从而实现在畜牧业中的大规模商业应用。
这将极大地推动畜牧业的发展，提高生产效益。
其次，克隆技术在医学研究和基因工程领域将发挥更大的作用。
克隆动物可以作为疾病模型进行研究，加深对基因在疾病发生和发展中的理解。
克隆动物培育流程及方案
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克隆动物技术在畜牧养殖中的应用
克隆动物技术在畜牧养殖中的应用克隆动物技术是指通过核移植等手段制造与生物个体相同或相似的新个体技术。
利用克隆技术可以创造胚胎、干细胞、完整个体及其组织等多种生物。
随着科技的发展，克隆技术也逐渐被应用于动物育种中，带来了非常丰富的成果。
一、克隆动物技术的发展历程克隆技术最初是在1962年由英国科学家约翰·格尔德提出。
1984年苏格兰罗斯林研究所的基思·坎贝尔、伊恩·威尔穆特和劳伦斯·史密斯发表了一篇关于绵羊克隆的研究论文，首次证明了哺乳动物也可以通过克隆来获得新生命。
此后，美国陈新俭博士在1996年成功克隆一只名为多莉的羊，成功率只有1%，但这一事件被全世界所关注。
二、克隆动物技术在畜牧养殖中的应用在畜牧养殖中，克隆细胞能够提供一个繁殖动物群体的新途径。
这种技术可以帮助培育存活率高、五官端正、肩背宽厚等最完美的克隆动物，这对于群体生产、动物的种质资源保护、个体农民的名优杂交新品种繁种技术应用都是至关重要的。
1. 建立可靠的家系育种目前家畜的种群繁殖，基本上都采用了自然繁殖的方式，而克隆动物技术则可以提供一种新途径，使得育种人员可以通过传递性更好的育种方式，建立可靠的家系育种。
2. 优良牲畜的复制借助克隆技术，我们可以复制出一只品质优良的畜生，这不仅可以更好的保护优良动种资源，而且还可以大大节省育种成本，推动畜牧业的发展。
3. 遗传纯度的保证在传统育种中，由于基因的杂交和混合，在繁殖后代时牲畜的遗传性状是不一定能够得到保证的，而克隆动物技术可以通过直接复制个体，避免了基因的混合和杂合，保证了遗传纯度的同时还能获得更稳定的繁殖效果。
4. 节约育种时间传统的育种方式需要较长时间才能获得适合生产的优良品种，而克隆动物技术可以大大节约育种的时间，将传统育种需要几十年的过程缩短到几年以内，有助于加快畜牧业的发展。
三、克隆动物技术在畜牧养殖中的挑战虽然克隆技术已经在畜牧业中得到了广泛应用并取得了优秀的成果，但它仍面临着一些技术瓶颈和伦理争议，如遗传缺陷、克隆动物的健康问题等。
克隆动物养殖技术现状及未来发展趋势展望
克隆动物养殖技术现状及未来发展趋势展望序言近年来，随着生物科技的进步和发展，克隆动物养殖技术成为生物科学领域一项引人注目的研究主题。
克隆技术的出现为动物繁殖和保护提供了新的思路和方法。
本文将探讨克隆动物养殖技术的现状，并展望其未来发展趋势。
一、克隆动物养殖技术的现状1. 克隆动物的定义及发展历程克隆动物是指通过核移植等技术，将体细胞核（非生殖细胞）植入受体细胞中，再经发育过程形成的与体细胞提供者基因完全或高度一致的动物。
克隆技术的发展可追溯到1996年的多莉羊，随后相继克隆了多种动物，如猪、猫、马等。
2. 克隆动物养殖技术的原理及过程克隆动物养殖技术主要包括体细胞核移植和胚胎分裂。
体细胞核移植是将捐赠体细胞核（非生殖细胞）植入受体细胞中，通过调控诱导去核化等方法，形成克隆胚胎并植入代孕动物体内；胚胎分裂则是通过胚胎发育过程中内外细胞质转移或胚胎体细胞的植入，进而形成克隆动物。
3. 克隆动物养殖技术的应用领域克隆动物养殖技术的应用领域广泛，包括但不限于畜牧业、医药研究、动物保护等方面。
在畜牧业中，克隆技术可以用于品种改良、提高繁殖效率、保护濒危动物等方面。
在医药研究中，通过克隆技术可以获得合适的医学模型动物，用于疾病研究和药物测试。
在动物保护方面，克隆技术可以帮助保存濒危物种，恢复生态平衡。
二、克隆动物养殖技术未来发展趋势展望1. 技术的进一步提升随着科技的进步，克隆动物的成功率和效率得到了很大的提高。
未来，科学家将继续完善克隆技术，提高成功率，并降低克隆动物的健康风险。
同时，研究人员还将致力于开发更加高效和精确的克隆技术，以实现克隆过程的智能化和自动化。
2. 克隆技术在畜牧业中的应用在畜牧业中，克隆技术将发挥越来越大的作用。
通过克隆技术，可以复制优质畜禽品种，提高畜禽的育种效果和生产效率。
同时，克隆技术还可以用于获取高产乳牛、优良肉牛等，助力畜牧业的发展。
3. 克隆技术在医药研究中的应用克隆动物在医药研究中的应用前景广阔。
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⑵ 哺乳类的核移植实验
(棕色 棕色) 棕色 (黑色 黑色) 黑色
ICR(白色 白色) 白色 ICR(白色 白色) 白色
1981年，瑞 士科学家 Illmensee 和美国科学 家Hoppe首 次报道哺乳 动物细胞核 移植获得成 功。
⑵ 哺乳类的核移植实验
1983年，McGrath和Solt结合显微技术与细 胞融合技术，将单细胞期小鼠胚胎与未受 精卵用病毒诱导融合的方法获得了后代 。 1996年，Campbell等采集9d龄的绵羊胚胎 进行传代培养，以培养液中血清浓度递减 的饥饿培养，诱导6-13代细胞进入静止期， 移入去核的卵母细胞，产下了克隆羊。这 是用已分化细胞系经诱导进入Go期核移植 产下的首例克隆羊。
3、细胞周期
细胞周期分四个时期，包括G1期，S期，G2期， M期。有丝分裂中，成熟促进因子（也叫M期促 进因子MPF ）调控细胞由间期向M期转变。 核受体一般是MⅡ期卵母细胞，但是MⅡ期卵母 M M 细胞MPF的含量依然很高，将诱导移植核发生一 系列的形态变化，包括核膜破裂(NEBD)，早熟染 色体凝集(PCC)。只能将G1期(二倍体)的核移入 未经活化的MⅡ期的卵母细胞的细胞质，才能获 得染色体倍体正常且能正常发育的重组胚胎。
体细胞克隆猪图解
细胞核移植 技术进行动物 克隆的主要步 骤，包括供体 细胞的选择、 受体细胞的 去核、核移植、 胚胎融合、重 构胚胎移植， 以及连续核移 植等等。
1、供体细胞的准备
常用的供体细胞有3大类：早期胚胎细胞、 常用的供体细胞有 大类：早期胚胎细胞、胚胎干细胞 大类 和体细胞。核移植时可以将整个细胞作为供体， 和体细胞。核移植时可以将整个细胞作为供体，也可以 挑取细胞核或含有少量细胞质的细胞移植到受体中 供体细胞的准备方面， 供体细胞的准备方面，通常采用建立细胞系的办法 。 包括： 胚胎干细胞系的建立。 TNT4细胞系的建 包括：① 胚胎干细胞系的建立。② TNT4细胞系的建 立。 将供体细胞的细胞周期做同步法处理， 期的诱导。 将供体细胞的细胞周期做同步法处理，即G0期的诱导。 期的诱导 方法是： 内将培养液的血清浓度由10.0%降至 方法是：在5d内将培养液的血清浓度由 内将培养液的血清浓度由 降至 0.5%。 。
（2）核重编程
核重编程的过程就是基因重新被激活的过程。 体细胞去分化过程伴随着与染色质相关的蛋白 (如连接组蛋白、转录因子)的重构、基因组甲 基化变化、组蛋白组装及核小体形成等。染色 质解聚对核重编程可能是必须的。 核重编程涉及到基因组DNA甲基/去甲基化和 组蛋白乙酰化。通过基因组甲基化来改变 DNA与蛋白质间的作用。
第二十五章
动物克隆技术
克隆动物(clonal animal)是指人们采用动物克 克隆动物(clonal animal)是指人们采用动物克 隆技术得到无性繁殖的在遗传上与亲本动物完 全相同的动物。 全相同的动物。 1997年世界卫生组织解释克隆为遗传上同一 1997年世界卫生组织解释克隆为遗传上同一 的机体或细胞系( 的无性生殖。 的机体或细胞系(株)的无性生殖。 分子水平上的克隆是指DNA分子的复制。 分子水平上的克隆是指DNA分子的复制。 分子的复制 细胞水平上的克隆是指细胞或组织培养。 细胞水平上的克隆是指细胞或组织培养。 个体水平上的克隆是指动、植物的无性繁殖， 个体水平上的克隆是指动、植物的无性繁殖， 其中，动物克隆偏重于指细胞核移植。 其中，动物克隆偏重于指细胞核移植。
体细胞核移植法培育克隆绵羊一多莉
二、供体核重新编程
1、受体细胞的来源 早期使用原核期的受精卵和2细胞胚胎。 1986年后采用去核的处在MⅡ期(第二 次分裂中期)的成熟卵母细胞作胞质受 体。
2、重构胚核质适应机理 （1） 核质互作
Gurdon（1966）研究发现，核在移植前转录 rRNA基因，移入卵后，核仁消失，rRNA基因失 活；随着胚胎的发育，rRNA基因活性恢复，核仁 重现。表明卵细胞质对核活性有重构效应。 事实上，核重编程同核质间蛋白质交换有关。许 多细胞质因子，如组蛋白(去)、乙酰化酶、DNA 甲基化/去甲基化酶等进入核内；核内转录因子， 如异染色质蛋白、组蛋白H1等输出核外。
1962年， 1962年， Gurdon 通过连续核移植， 将爪蟾蝌蚪已经 分化的肠上皮细 胞核移植到去核 的卵母细7年 1977年， Gurdon以一只 Gurdon以一只 白化爪蟾蝌蚪细 胞为供体，克隆 胞为供体， 到了30只白化非 到了30只白化非 洲爪蟾。 洲爪蟾。
供体核重新编程的机理
具有全能性的细胞核是否具有重编程的能力， 主要取决于细胞质启动供体核重新编程的因 子。 核重编程涉及到基因组DNA甲基/去甲基化 和组蛋白乙酰化。 在细胞分化过程中，核重编程须去除染色质 上的获得性修饰。与端粒酶活性降低、端粒 缩短有关 。
第二节 动物克隆技术方法
动物克隆技术方法可分为胚胎分割、胚胎 嵌合、细胞核移植、雌核或雄核发育等。 细胞核移植方法又分为胚胎细胞核移植、 胚胎干细胞核移植、胎儿成纤维细胞核移 植和体细胞核移植等。
⑵ 哺乳类的核移植实验
1997年，英国 Roslin研究所的Wilmut等用乳腺细 胞核移植培育克隆绵羊——“多莉 (Dolly)”。 Wilmut等采用6岁母羊（白面）怀孕3个月时的乳 腺细胞进行核移植。供体核在血清浓度从10％降 至0.5％的培养液中诱导至静止期，然后移入去核 卵母细胞，发育为桑椹胚和囊胚再移植到受体母 羊（黑面），结果产羔l头（白面） ，即著名的 “多莉”。 这是世界上首次用体细胞克隆获得的后代，划时 意义在于证明动物成体细胞核仍具有发育全能 代意义在于证明动物成体细胞核仍具有发育全能 性。
2、受体细胞的准备
受体细胞有3类：卵母细胞、原核期受精卵和2 细胞期胚胎细胞。 获得卵母细胞多采用活体超排的方法。 卵母细胞的去核目前多采用显微操作法，即在 显微镜下用外径为20m的微细玻璃管吸管吸 取细胞核。常用的去核方法有盲吸法、半卵法 和功能去核法等。
3、核移植
在显微操作仪下将供体细胞核移入受体细 胞中。根据供体移入到受体细胞的不同部 位，可以分为带下（透明带下）注射和细 胞质内注射。
Roux(1888)用烧烫的针破坏蛙 细 用烧烫的针破坏蛙2细 用烧烫的针破坏蛙 胞胚胎观察胚胎发育情况
2、已分化的动物细胞的全能性 ⑴ 两栖类的核移植实验
Spemann 蝾螈受精卵结扎实验
Spemann的蝾螈受精卵结扎实验 的蝾螈受精卵结扎实验(1938) 的蝾螈受精卵结扎实验 用头发将受精卵沿第一次卵裂面结扎成2个半球，使细 胞核留在其中的一个半球中，两半球之间留有一条小 缝隙，当有核的一侧发育到8细胞期时，另一侧还未开 始分裂；当有核的一侧发育到16细胞期时，一个细胞 核进入无核的一侧，此时将胚胎完全结扎；140 d后， 每一侧都发育成为一个完整的胚胎。
5、重构胚的培养和移植
一种是体外培养，在适当的培养条件下培 养到一定时期，然后进行胚胎移植。 另一种方法是采用中间受体培养，在核质 融合后，将重构胚用琼脂糖包埋，移入动 物的输卵管或子宫，发育到桑椹胚或囊胚 后，再重新移入假孕受体子宫。
6、重复克隆(连续核移植) 重复克隆(连续核移植)
如有必要，将核移植胚胎培养至桑椹胚或 囊胚后继续做核供体重复克隆，可以显著 提高克隆成活率。
2、细胞核的全能性
细胞核的全能性是指一个细胞核具有该物 种完整的遗传信息，在适当条件下能够发 育成一个完整个体的能力。 将分化的细胞的细胞核导入去核的卵细胞 或受精卵，发育成一个完整的个体（如体 细胞克隆动物），就是细胞核全能性。
（二）证明细胞全能性的研究事例 1、动物早期胚胎细胞的全能性
德国Virchow R. 论断“细胞来自细胞”。 Roux(1888) 用烧烫的针破坏蛙2细胞胚胎。 Driesch(1892)以海胆做实验。 Spemann（1901～1903） 用细发结扎蝾螈受精卵。
一、细胞发育的全能性
（一）全能性的概念
全能性(totipotency) 全能性(totipotency) 是指分裂球发育成 为完整胚胎的能力。 为完整胚胎的能力。包括细胞发育全能性 和细胞核发育全能性。 和细胞核发育全能性。
1、细胞的全能性
细胞分化能力的强弱称为发育潜能。 根据发育潜能可以将细胞分成全能性、多能性、 单能性细胞及终末分化细胞。 受精卵以及胚胎干细胞的发育具有全能性；多能 造血干细胞具有的发育潜能称为多能性 ；终末分 化细胞，如人的成熟红细胞 。 细胞全能性的基础在于所有细胞的细胞核包含一 个物种的全套染色体组，具有发育成一个完整个 体所需要的全部遗传物质。
7、克隆动物的鉴定
克隆动物出生后，从形态、性别上和分子 生物学水平上鉴定，以确定所克隆的动物 在遗传上是否真的来源于供体细胞系。 分子生物学鉴定方法有PCR、Southern、 Northern等。
克隆绵羊——多莉（Dolly）的培育示意图
二、人工诱导雌核发育技术
技术关键：一是使精子的遗传物质失活且保持精 技术关键： 子激活卵子发育的能力； 子激活卵子发育的能力；二是诱导卵子二倍体形 成。 使精子遗传物质失活的办法一般是采用辐射处理 (如γ线、X射线、紫外线等 。 射线、 如 线 射线 紫外线等)。 诱导卵子二倍体形成的办法，一是在受精后不久 诱导卵子二倍体形成的办法， 抑制第二极体排出；二是在受精卵第一次卵裂时， 抑制第二极体排出；二是在受精卵第一次卵裂时， 抑制有丝分裂。可以用温度(冷休克或热休克 冷休克或热休克)、 抑制有丝分裂。可以用温度 冷休克或热休克 、 静水压和化学(秋水仙素 细胞松弛素B等 等方法 秋水仙素、 等方法。 静水压和化学 秋水仙素、细胞松弛素 等)等方法。
4、核质融合及卵母细胞质的激活
核质融合的方法有： (1)病毒融合法 如将仙台病毒与供体核一起注 入去核的受精卵中，促进细胞融合。 (2)电融合法 将重构胚置于电场下，以电脉冲 促进融合。 (3)Honolulu技术 利用吸液管将遗传物质取出， 然后注入卵细胞中。以机械和化学激活方 式促使重构胚的融合。