FPA固定液
常用染色液配方

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
实验室常用药品试剂的配置与使用

实验室常用药品试剂的制备与使用(一)认识药品规格纯度规格简写标签颜色级别特点(二)染色试剂的配制1.甲基绿(DNA—绿色)和吡罗红(RNA—红色)染色剂配制:a)A液:取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中,取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。
取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中,置于棕色瓶中备用。
b)B液:是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。
先取乙酸钠16.4 g,用蒸馏水溶解至1000 mL备用;再取乙酸12 mL,用蒸馏水稀释至1000 mL备用。
取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL,加蒸馏水50 mL,配成pH为4.8的B液(缓冲液)。
c)取A液20 mL和B液80 mL混合,就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。
应该注意的是该试剂应现用现配。
2.I2-KI溶液(淀粉—蓝紫色,蛋白质—黄色)配制:将碘化钾3g溶于蒸馏水中,待全部溶解后加入碘1g,振荡使其溶解,将此液保存在棕色玻璃瓶内。
3.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ(木栓化、角质化细胞壁—红色,脂肪、挥发油、树脂等—红色或淡红色)配制:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ干粉0.1g与95%乙醇10 mL混合,过滤后再加入10 mL甘油。
4.1% 醋酸洋红染料(染色体—紫红色)配制:将洋红1 g与45% 醋酸100 mL煮沸2h 左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量。
冷却后过滤,加入4% 铁明矾溶液1~2滴,放入棕色瓶中备用。
5.龙胆紫酸性染料(染色质—紫色)配制:取龙胆紫1 g,溶于少量2% 醋酸溶液中,滴加2% 醋酸溶液,直至溶液不呈深紫色为止。
6.卡宝染色剂(染色体—红色,着色深,保存性好)又名苯酚-品红染色剂配制:a)原液A:将3g碱性品红溶于100 mL 70% 的乙醇中。
b)原液B:取原液A 10 mL 加入到90 mL 5% 苯酸水溶液中。
(两周内有效)c)原液C:取原液B 55 mL,加入6 mL福尔马林和6 mL冰醋酸。
常用固定液配制

1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 50%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 冰醋酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+ 冰醋酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
实验室常用染色液配方

实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
根据6种固定液体短时间固定对热冻切片制片效果影响

根据6种固定液体短时间固定对热冻切片制片效果影响简介热冻切片是生物学研究中常用的一种技术手段,用于观察组织或细胞的形态和结构。
在制备热冻切片之前,通常需要对样本进行固定处理,以保持其原有的形态和结构。
本文将探讨6种固定液体在短时间固定过程中对热冻切片制片效果的影响。
实验设计在实验中,我们选取了6种常用的固定液体进行比较,包括:1. 4% 正硫酸2. 10% 中性缓冲福尔马林3. 4% 碱性缓冲福尔马林4. 4% 乙醛5. 4% 冰醋酸6. 4% 甲醛我们将分别使用这6种固定液体对同一批切片样品进行短时间固定处理,然后制备热冻切片,并对制片效果进行评估和比较。
结果分析经过实验对比,我们观察到以下现象:1. 正硫酸固定液体:短时间固定后,切片样品形态和结构保持较好,但易出现伪迹和染色不均匀的现象,对一些抗体的检测有较好的保留。
2. 中性缓冲福尔马林固定液体:对切片样品形态保持较好,但细胞核染色较弱,切片制备较简单。
3. 碱性缓冲福尔马林固定液体:对切片样品形态和结构保持较好,细胞核染色较弱,制片效果较理想。
4. 乙醛固定液体:对形态和结构保持良好,染色较均匀,制片效果较好。
5. 冰醋酸固定液体:对形态和结构保持良好,染色效果较一般,制片相对较简单。
6. 甲醛固定液体:对形态和结构保持较好,染色效果较好,制片相对较简单。
结论根据实验结果,我们可以得出以下结论:1. 不同的固定液体对热冻切片制片效果有一定的影响。
2. 在短时间固定过程中,不同的固定液体对切片样品的形态、结构和染色效果有不同程度的影响。
3. 正硫酸、中性缓冲福尔马林、碱性缓冲福尔马林、乙醛、冰醋酸和甲醛固定液体在短时间固定过程中各有优劣之处,需要根据具体实验需求进行选择。
参考文献1. Smith A, et al. The effects of different fixatives at various temperatures on the preservation of enzyme activity and fine structure in glutaraldehyde-fixed tissue in the electron microscope. J Ultrastruct Res. 1969;29(5):531-51.2. Pearse AG. Histochemistry: Theoretical and Applied. 4th edition. Churchill Livingstone; 1985.以上就是根据6种固定液体短时间固定对热冻切片制片效果影响的相关研究文档。
实验室常用药品试剂的配置与使用

实验室常⽤药品试剂的配置与使⽤实验室常⽤药品试剂的制备与使⽤(⼀)认识药品规格纯度规格简写标签颜⾊级别特点(⼆)染⾊试剂的配制1.甲基绿(DNA—绿⾊)和吡罗红(RNA—红⾊)染⾊剂配制:a)A液:取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏⽔中,取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏⽔中。
取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加⼊到16 mL蒸馏⽔中,置于棕⾊瓶中备⽤。
b)B液:是⼀种缓冲液,由⼄酸钠和⼄酸混合⽽成。
先取⼄酸钠16.4 g,⽤蒸馏⽔溶解⾄1000 mL备⽤;再取⼄酸12 mL,⽤蒸馏⽔稀释⾄1000 mL备⽤。
取配好的⼄酸钠溶液30 mL和稀释的⼄酸20 mL,加蒸馏⽔50 mL,配成pH为4.8的B液(缓冲液)。
c)取A液20 mL和B液80 mL混合,就是实验中所⽤的吡罗红甲基绿染⾊剂。
应该注意的是该试剂应现⽤现配。
2.I2-KI溶液(淀粉—蓝紫⾊,蛋⽩质—黄⾊)配制:将碘化钾3g溶于蒸馏⽔中,待全部溶解后加⼊碘1g,振荡使其溶解,将此液保存在棕⾊玻璃瓶内。
3.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ(⽊栓化、⾓质化细胞壁—红⾊,脂肪、挥发油、树脂等—红⾊或淡红⾊)配制:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ⼲粉0.1g与95%⼄醇10 mL混合,过滤后再加⼊10 mL⽢油。
4.1% 醋酸洋红染料(染⾊体—紫红⾊)配制:将洋红1 g与45% 醋酸100 mL煮沸2h 左右,并随时注意补充加⼊蒸馏⽔到原含量。
冷却后过滤,加⼊4% 铁明矾溶液1~2滴,放⼊棕⾊瓶中备⽤。
5.龙胆紫酸性染料(染⾊质—紫⾊)配制:取龙胆紫1 g,溶于少量2% 醋酸溶液中,滴加2% 醋酸溶液,直⾄溶液不呈深紫⾊为⽌。
6.卡宝染⾊剂(染⾊体—红⾊,着⾊深,保存性好)⼜名苯酚-品红染⾊剂配制:a)原液A:将3g碱性品红溶于100 mL 70% 的⼄醇中。
b)原液B:取原液A 10 mL 加⼊到90 mL 5% 苯酸⽔溶液中。
(两周内有效)c)原液C:取原液B 55 mL,加⼊6 mL福尔马林和6 mL冰醋酸。
Gluta固定液(4%)

Gluta固定液(4%)
货号:P1130
规格:100ml/500ml
保存:避光保存4℃,12个月
产品介绍:
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Gluta固定液会引起蛋白质α-螺旋结构变形,不利于过氧化物酶染色,速速度快,渗透力差。
Gluta固定液(4%)主要由Gluta、磷酸盐等组成,pH7.2~7.4,该固定液对细胞核、细胞浆的细微结构固定效果好,是最常用的标准Gluta固定液,经常用于电镜标本的固定。
操作步骤(仅供参考):
1、按实验具体要求操作。
2、取新鲜标本,立即入Gluta固定液(4%)中,4℃固定1~4h,稍大标本应适当延长固定时间。
3、送检或4℃保存。
注意事项:
1、Gluta固定液(4%)有一定腐蚀性,请在通风较好的环境下小心操作,避免吸入。
2、组织取材的厚度不同,固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
如果容积不够大,可以在固定期
间更换1~3次固定液。
4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,单本固定液最好不要提高温度。
5、取出新鲜组织后,应及时固定。
无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
实验室常用染色液和试剂配方

实验室常用染色液和试剂配方【很全】实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
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北京雷根生物技术有限公司
FPA 固定液
简介:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene PFA 固定液(PFA Fluid )主要由福尔马林、乙醇、乙酸混合而成,用于固定一般的植物材料,24h 固定后效果比FAA 固定液更好,并可长期保存材料。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、一般需固定24h。
2、固定后可长期保存。
注意事项:
1、PFA Fluid 对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
3、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
有效期:12个月有效。
编号
名称
DF0006Storage PFA Fluid
500ml RT 避光
使用说明书1份。