乙酸凝胶缓冲液(4×)
醋酸缓冲液的配制表

醋酸缓冲液的配制表1. 引言醋酸缓冲液是一种常用的实验试剂,它可以稳定溶液的pH值。
在许多生化实验中,pH值的稳定对于保证实验结果的准确性至关重要。
本文将介绍醋酸缓冲液的配制方法及其应用。
2. 醋酸缓冲液的原理醋酸缓冲液是由醋酸和其共轭碱乙酸钠(或乙酸钾)组成的溶液。
当醋酸和乙酸钠(或乙酸钾)混合时,它们会发生如下反应:CH3COOH + CH3COONa (或CH3COOK) ⇌ CH3COO- + CH3COOH2+在该反应中,CH3COOH是弱酸,而CH3COO-是其共轭碱。
当溶液中同时存在CH3COOH和CH3COO-时,它们会形成一个平衡系统,可以稳定溶液的pH值。
3. 醋酸缓冲液的配制方法配制醋酸缓冲液的方法如下:3.1 配制所需试剂•醋酸(纯度为99%以上)•乙酸钠(或乙酸钾)(纯度为99%以上)•蒸馏水(或去离子水)3.2 配制步骤1.使用天平称取适量的醋酸和乙酸钠。
通常情况下,醋酸和乙酸钠的摩尔比应为1:1,以保证缓冲液在pH=4.7左右。
2.将称取的醋酸和乙酸钠分别溶解在蒸馏水中,得到两个独立的溶液。
3.将两个溶液混合,搅拌均匀。
4.使用pH计检测溶液的pH值,根据需要可以进行微调。
如果pH值偏高,可以添加少量乙酸钠;如果pH值偏低,可以添加少量醋酸。
4. 醋酸缓冲液的应用由于其稳定性和易于配制的特点,醋酸缓冲液被广泛应用于许多生化实验中。
以下是一些常见的应用场景:4.1 蛋白质电泳在蛋白质电泳实验中,醋酸缓冲液可以用作凝胶缓冲液和电泳缓冲液。
它可以稳定凝胶的pH值,保证蛋白质在电泳过程中的稳定性和迁移性。
4.2 DNA/RNA提取在DNA/RNA提取实验中,醋酸缓冲液可以用作细胞裂解液的成分之一。
它可以调节细胞裂解液的pH值,促进DNA/RNA的释放和稳定。
4.3 酶反应在许多酶反应中,pH值对于酶的催化活性至关重要。
醋酸缓冲液可以提供稳定的pH环境,确保酶反应能够正常进行。
凝胶载样缓冲液的作用

凝胶载样缓冲液的作用凝胶载样缓冲液在生物科学实验中起着至关重要的作用。
它是一种用于凝胶电泳实验中的缓冲液溶液,用于调节样本和凝胶电泳系统之间的 pH 值,并提供必要的离子强度,以确保准确的分离和检测。
在凝胶电泳实验中,凝胶载样缓冲液的作用有以下几个方面:1. 调节 pH 值:pH 值是指溶液的酸碱度。
对于凝胶电泳实验来说,pH 值的准确性对于样本的迁移速度和分离效果至关重要。
凝胶载样缓冲液通过调节 pH 值,使其适合于样品的迁移和分离。
2. 提供离子强度:凝胶电泳需要合适的离子强度来维持电化学平衡,并影响样品的迁移速度和准确性。
凝胶载样缓冲液中的盐类提供了必要的离子强度,确保样品能够有效地在凝胶上迁移。
3. 保持稳定的温度:凝胶载样缓冲液还可以作为样品和凝胶间的热传导介质,帮助维持实验的稳定温度。
稳定的温度对于凝胶电泳实验的结果和准确性至关重要。
凝胶载样缓冲液的配方通常包含缓冲剂、离子强度调节剂和 pH 调节剂。
一些常用的凝胶载样缓冲液包括 Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液、Tris-Acetate-EDTA(TAE)缓冲液和磷酸缓冲液等。
除了上述作用之外,凝胶载样缓冲液还可以在凝胶电泳实验中提供其他功能,例如:1. DNA 凝胶电泳中,凝胶载样缓冲液可以用于溶解 DNA 样本并防止其降解。
2. 蛋白质凝胶电泳中,凝胶载样缓冲液可以提供必要的离子强度和 pH 条件,确保蛋白质在凝胶上正确地迁移和分离。
3. RNA 凝胶电泳中,凝胶载样缓冲液可以用于稳定RNA 样本的结构,并提供必要的离子强度和 pH 条件,以确保准确的结果。
总结起来,凝胶载样缓冲液在凝胶电泳实验中起着至关重要的作用。
它通过调节 pH 值、提供离子强度和维持稳定温度,确保样品能够准确、有效地在凝胶上迁移和分离。
使用合适的凝胶载样缓冲液可以提高实验结果的准确性,并为后续的数据分析和解读提供可靠的基础。
凝胶电泳实验是生物学研究中常用的重要技术手段,它可以用来分析和分离 DNA、RNA 和蛋白质等生物分子。
凝胶电泳缓冲液的配制

2.测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,无须再进行处理。
不过,一旦略呈黄色,则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与D owexXG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理,并用What man 1号滤纸过滤2次,去离子甲酰胺分装成小份,充氮存于-70℃。
3.常用的电泳缓冲液说明:①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物,为避免这一问题,可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液,出现沉淀后则予以废弃。
以片都以1×TBE作为使用液(即1:5稀释浓贮液)进行琼脂糖凝胶电泳。
但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。
目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1:10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小,故通过缓冲液的电流量通常较大,需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。
②碱性电泳缓冲液应现用现配。
③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
4.2×SDS凝胶加样缓冲液100mmo l/L Tris·HCl(6.8)200mmo l/L二硫苏糖醇(DTT)4%SDS(电泳级)0.2%溴酚蓝20%甘油不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温,应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。
5.凝胶加样缓冲液使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三:增大样品密度;以确保DNA均匀进入样品孔内;使样品呈现颜色,从而使加样操作更为便利,含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。
溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2. 2倍,而与琼脂糖浓度无关。
缓冲液的配制方法

缓冲液的配制方法(总14页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入 ml的乙酸,充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。
10×TBE Buffer组份浓度 890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度 200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称 g MOPS,置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水,搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至。
6.用 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用,但变黑时不要使用。
溴乙锭 (10 mg/ml)组份浓度 10 mg/ml溴乙锭配制量 100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭,加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml,充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为 g/ml。
注意:溴乙锭是一种致癌物质,必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套。
常用缓冲液配方及缓冲范围

常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种水溶液,其中含有在酸性或碱性条件下能够保持pH稳定的化学物质。
缓冲液广泛应用于生物化学、分子生物学、生物技术和医学等领域的实验和研究中。
下面是一些常用的缓冲液配方及其应用范围。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种中性缓冲液,常用于生物化学和分子生物学实验。
它的配方通常为:- 10 mM Tris base-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至7.4Tris缓冲液可用于DNA和RNA的电泳、酶反应、细胞培养等实验中。
2.PBS缓冲液PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物学缓冲液,具有缓冲能力强和与生物体液成分相似的特点。
它的配方通常为:-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-向溶剂中调整pH至7.4PBS缓冲液可用于细胞培养、免疫荧光染色、蛋白质凝胶电泳等实验中。
3.TAE缓冲液TAE(三乙酸缓冲液)是一种常用的核酸电泳缓冲液,其配方为:- 40 mM Tris base-20mM醋酸-1mMEDTA-向溶剂中调整pH至8.0TAE缓冲液可用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳,如聚丙烯酰胺凝胶电泳()和琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液是一种常用的酸性或碱性缓冲液。
它的配方基于Tris缓冲液,在Tris缓冲液基础上调整pH的方法是在配方中加入稀盐酸或稀氢氧化钠。
例如,对于Tris-HCl缓冲液的配方为:- 50 mM Tris base-向溶剂中加入HCl调整pH至所需的值(通常为7.2至9.0)Tris-HCl缓冲液可用于酶反应、蛋白质组学研究、PCR等实验中。
这只是一些常用的缓冲液配方,根据不同实验需求和物质稀释要求,还有其他许多缓冲液的配方。
对于缓冲液的选择,关键在于根据实验要求选取适当的缓冲体系,并对缓冲液中所需的化学物质浓度、pH值等进行精确调整。
常用缓冲液配置

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 参加约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量参加浓盐酸调节所需要的pH值。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA 配制量:1 L配制方法:1. 量取以下溶液,置于1 L烧杯中。
3. 将溶液定容至1 L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 参加约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
4)3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度:3M醋酸钠配制量:100ml配制方法:1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中,参加月40ml的去离子水搅拌溶解2.参加冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBS Buffer组份浓度:137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4 配制量:1 L配制方法:1. 称量以下试剂,置于1 L烧杯中。
各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法缓冲液(Buffer)在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用,它可以维持溶液的稳定性,调节pH值,同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法:- 配制0.1 M Tris缓冲液(pH 7.4):a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane)粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器,并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器,加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌,使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4,直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法:-配制10×PBS缓冲液:a.在1L去离子水中加入80gNaCl,2gKCl,14.4gNa2HPO4,2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液:a.取10×PBS缓冲液100mL,用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法:-配制50×TAE缓冲液:a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base,57.1 mL 0.5 M EDTA,100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液:a.取50×TAE缓冲液20mL,用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
磷酸盐-SDS电泳缓冲液(4×)

北京雷根生物技术有限公司
磷酸盐-SDS 电泳缓冲液(4×)
简介:
磷酸盐-SDS 电泳缓冲液(4×)由磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、SDS 等组成,用于SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳,使用时需用蒸馏水或去离子水稀释4倍后使用。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、用蒸馏水或去离子水稀释到1×后使用。
注意事项:
1、如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:编号
名称PE0165
Storage 磷酸盐-SDS 电泳缓冲液(4×)
500ml RT 使用说明书1份编号
名称DC0032
Masson 三色染色液NA0034
Tris-硼酸电泳缓冲液(5×TBE)PE0025
SDS-PAGE 蛋白加样缓冲液(5×)PT0001
BCA 蛋白定量试剂盒PT0013
考马斯亮蓝快速染色液PW0053
Western 抗体洗脱液(碱性)TO1013丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
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北京雷根生物技术有限公司
乙酸凝胶缓冲液(4×)
简介:
乙酸凝胶缓冲液(4×)由乙酸、去离子水等组成,调pH ,用于非变性条件下的单向凝胶电泳即乙酸非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 组装凝胶电泳玻璃板夹层并并固定于支架上。
2、 在烧杯中混匀丙烯酰胺亚甲基双丙烯酰胺溶液、亚硫酸钠、乙酸凝胶缓冲液(4×)等,如
需迅速凝固,在使用前加入过硫酸铵和TEMED 。
注意事项:
1、 如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
附表:
储存液
丙烯酰胺浓度/% 5
7.5 10 12.5 15 17.5
20
30%Acr/0.8%Bis 6.7 10 13.3 16.8 20 23.32 26.6 300Mm 亚硫酸钠 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 乙酸凝胶缓冲液(4×) 10
10
10
10
10
10 10 水 22.58 19.28 15.98 12.48 9.28 5.96 2.68 APS 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 TEMED 0.02
0.02
0.02
0.02
0.02
0.02
0.02
编号 名称
PE0060 Storage
乙酸凝胶缓冲液(4×) 100ml
RT
使用说明书
1份。