序列超速离心分离血浆脂蛋白
血脂的生物化学检验练习题
血脂的生物化学检验练习题一、单选题1、HDL中存在的主要载脂蛋白是（）A、ApoAB、ApoB100C、ApoCD、ApoEE、Apo(a)正确答案：A2、血浆脂类的运输形式是（）A、脂蛋白B、载脂蛋白C、糖蛋白D、球蛋白E、免疫球蛋白正确答案：A3、试述血浆脂蛋白超速离心法，脂蛋白密度由大到小顺序是（）A、LDL、VLDL、CM、HDLB、HDL、LDL、VLDL、CMC、VLDL、LDL、HDL、CMD、CM、VLDL、LDL、HDLE、HDL、VLDL、LDL、CM正确答案：B4、下列各种脂蛋白中，TG含量最多的脂蛋白是（）A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、Lp(a)正确答案：A5、胆固醇是下列化合物体物，但除外（）A、胆汁酸B、细胞膜C、雄激素D、雌激素E、胰岛素正确答案：E6、下列各种脂蛋白中，能够抑制纤溶酶活性的脂蛋白是（）A、VLDLB、LDLC、HDLD、Lp(a)E、MDL正确答案：D7、运输内源性甘油三脂的脂蛋白主要是下列哪一种（）A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、Lp（a）正确答案：B8、下列哪一项是肝脏清除胆固醇的主要方式（）A、转变成类固醇B、转变成维生素DC、在肝细胞内转变成胆汁酸D、合成低密度脂蛋白E、转变成粪固醇正确答案：C9、不属于血浆脂蛋白组成成分的是（）A、糖脂B、磷脂C、胆固醇D、载脂蛋白E、三酯甘油正确答案：A10、载脂蛋白B族中主要成分是（）A、ApoB48B、ApoB75C、ApoB100D、ApoB41E、ApoB36正确答案：C11、目前常规检验方法中通常测定下述何种物质来反映人体内HDL的含量（）A、HDL中的甘油三酯B、HDL中的胆固醇C、HDL中的磷脂D、HDL中的载脂蛋白E、HDL中的脂蛋白（α）正确答案：B12、密度最低的脂蛋白是（）A、CMB、前β－LρC、β－LρD、α－LρE、HDL正确答案：A13、脂蛋白各组份中密度最低的是（）A、LDLB、HDLC、IDLD、CME、VLDL正确答案：D14、运输内源性胆固醇的脂蛋白主要是下列哪一种（）A、HDLB、VLDLC、LDLD、CME、Lp（a）正确答案：C15、1970年以后世界卫生组织把高脂蛋白血症分为几型（）A、2型B、5型C、6型D、7型E、8种正确答案：C16、下列哪项比值降低表示心血管疾病危险度加大（）A、ApoAⅠ/ApoAⅡB、ApoAⅡ/ApocⅢC、ApoB/ApoCⅠD、ApoAⅠ/ApoBE、ApoAⅡ/ApoB正确答案：D17、LDL中存在的主要载脂蛋白是（）A、ApoAB、ApoB100C、ApoCD、ApoE正确答案：B18、脂肪酸主要是以下列何种形式运输的（）A、与LDL结合的形式B、与VLDL结合的形式C、与球蛋白结合的形式D、与CM结合的形式E、与脂蛋白结合的形式正确答案：E二、多选题1、下列哪些不是脂蛋白参与胆固醇的逆向转运（）A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、Lp(a)正确答案：ABCE2、下列关于HDL的叙述正确的是（）A、主要在肝中合成B、肾不能合成C、将外周组织的游离胆固醇转运到肝内处理D、主要结合蛋白为ApoA1E、LCAT通过转醋化反应将基中的游离胆固醇转化成胆固醇酯正确答案：ACDE3、关于Lp（a）叙述正确的是（）A、Lp（a）是动脉粥样硬化的独立危险因子B、Lp（a）含有ApoB100和Apo（a）C、Apo(a)与纤溶酶原具有高度同源性D、Lp（a）在脂蛋白电泳时多位于α与前-β脂蛋白之间E、Apo(a)可从Lp（a）上脱落下来，剩下仅含ApB100的颗粒称LDL 正确答案：ABCD4、对LDL描叙错误的是（）A、运输内源性胆固醇B、运输内源性甘油三酯C、运输外源性胆固醇D、运输外源性甘油三酯E、既有内源性胆固醇，又有外源性胆固醇正确答案：BCDE5、胆固醇是下列哪些化合物体物（）B、细胞膜C、雄激素D、雌激素E、胰岛素正确答案：ABCD6、下列哪些脂蛋白不具有抗动脉粥样硬化作用（）A、LDLB、β-VLDLC、ox-LDLD、HDLE、Lp(a)正确答案：ABCE7、下列哪些不是肝脏清除胆固醇的主要方式（）A、转变成类固醇B、转变成维生素DC、在肝细胞内转变成胆汁酸D、合成低密度脂蛋白E、转变成脂肪正确答案：ABDE8、不能反映HDL水平的载脂蛋白是（）A、ApoA IB、ApoAⅡC、ApoBD、ApoCⅠE、ApoCⅢ正确答案：BCDE三、填空题1、血浆脂蛋白密度分离法的VLDL相当于电泳法的（）正确答案：前β－Lρ2、与动脉粥样硬化发生率呈负相关的脂蛋白是（）正确答案：HDL3、载脂蛋白B是何种脂蛋白的主要蛋白南（）正确答案：LDL4、与动脉粥样硬化发生率呈负相关的脂蛋白是（）正确答案：HDL5、脂蛋白各组份中密度最大的是（）正确答案：HDL6、将乳糜血浆放置4℃环境中过奖，次晨血浆出现“奶油样”上层，说明下列何种脂蛋白增多（）正确答案：CM7、HDL中存在的主要载脂蛋白是（）正确答案：A18、载脂蛋白AI是下列哪种脂蛋白的主要结构蛋白（）正确答案：HDL。
血浆脂蛋白亚组分检测方法的研究进展与评价
·161·血浆脂蛋白亚组分检测方法的研究进展与评价潘富根 浙江大学医学院附属第四医院 浙江义乌 322000摘 要：血浆脂蛋白存在许多亚组分型，如脂蛋白残留颗粒（RLP）、脂蛋白a[Lp（a）]、高密度脂蛋白（HDL）亚型（HDL2，HDL3））和颗粒浓度，例如小而密低密度脂蛋白颗粒（sd-LDL-P）等，在心血管疾病（CVD）的进展中起关键作用。
其类型和数量与CVD 风险和治疗选择密切相关。
本文将综述目前实验室中血浆脂蛋白亚组分检测方法的研究进展。
关键词：血浆脂蛋白 亚组检测 研究进展血浆脂蛋白是异质的血液颗粒，在体内运输或吸收特定的脂质，因此在脂质代谢、信号转导和调节中起着至关重要的作用。
LDL和HDL大小及颗粒浓度是预测未来CVD风险的重要检测指标[1]。
目前有许多分离、测量和定量脂蛋白的新方法，为早期筛查相关疾病和风险评估提供了全面的数据。
本文对既往应用检测方法及相关的新型检测方法进行综述。
1 LDL相关检测1.1…电泳法主要脂蛋白被定量检测，并且不同的脂蛋白变化也可以直接观察到。
该方法是一种确定性测试，可检测III型高脂蛋白血症患者的特征性宽β带。
利用酶和免疫化学方法检测脂蛋白。
与自动化仪器相比，电泳法对脂蛋白的检测需要更多的人员和更高的技术要求，因此不适用于样品量大的常规实验室。
1.2…Friedward计算法（间接法）使用Friedward计算方法来检测TG<2,000…mg/L的样品中的LDL-C结果可靠。
TG浓度在2,000和4,000…mg/L之间的样品大多可靠。
TG>4,000…mg/L且存在木糖颗粒或III型高脂蛋白血症的患者样品结果不可靠。
尽管Friedward方法有很多局限性并有待改进，但仍被大多数常规临床实验室广泛使用。
1.3…均相法HDL-C均质方法问世后，日本科学Sugiuchi等首先报道使用均质测量LDLC。
该方法可以实现LDL-C检测的完全自动化。
两种血浆脂蛋白分类的方法
两种血浆脂蛋白分类的方法
血浆脂蛋白是指血液中的脂肪和蛋白质的结合物，它们是营养物质运输和代谢的重要载体。
以下是两种常见的血浆脂蛋白分类方法：
1. 电泳法(Electrophoresis)：电泳法是一种利用电场分离带电颗粒的技术，它可以用于分离和鉴定血浆脂蛋白。
在电泳过程中，血浆脂蛋白会根据其电荷和大小在电场的作用下移动到不同的位置，从而被分离和分类。
电泳法可以将血浆脂蛋白分为乳糜微粒(Chylomicron)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)等几大类。
2. 超速离心法(Ultra-centrifugation)：超速离心法是一种利用离心机分离和纯化颗粒的技术，它可以用于分离和鉴定血浆脂蛋白。
在超速离心过程中，血浆脂蛋白会根据其密度和大小在离心力的作用下沉淀到不同的位置，从而被分离和分类。
超速离心法可以将血浆脂蛋白分为乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白等几大类。
以上两种方法都可以将血浆脂蛋白进行分类，但是它们的原理和应用略有不同。
在实际应用中，可以根据实验目的和要求选择合适的方法进行血浆脂蛋白的分离和鉴定。
血浆脂蛋白密度由低到高的顺序
问题：[单选] 正常血浆脂蛋白按照密度由低到高顺序的排列为（）A . VLDL-IDL-LDL-HDLB . CM-VLDL-IDL-LDLC . VLDL-CM-LDL-HDLD . VLDL-LDL-IDL-HDLE . CM-VLDL-LDL-HDL参考答案：E●参考解析由于脂蛋白的蛋白质和脂质的组成、比例不同，它们的颗粒大小、表面电荷及密度均有差异。
因此可用电泳法和超速离心法将它们分离。
用电泳法后，按迁移率的快慢依次分为。
α-脂蛋白、前β-脂蛋白、β-脂蛋白和位于点样原点的乳糜微粒四种。
α-脂蛋白最快，CM最慢。
用超速离心法，按密度高低依次分为高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒(GM)四种。
血浆脂蛋白：是指哺乳动物血浆（尤其是人血浆）中的脂蛋白复合物。
血浆脂蛋白可以将脂质（甘油三酸酯，磷脂，胆固醇）从一个器官转运到另一个器官。
血浆脂蛋白根据密度分类：（1）乳糜微粒（<0.95 g / cm3），密度非常低，可将甘油三酸酯和胆固醇酯从小肠运输到组织，肌肉和脂肪组织。
（2）VLDL（0.95-1.006g / cm3）在肝脏中产生，并将脂质转运至组织。
当VLDL转运至全身组织时，它会分解为三酰基甘油，载脂蛋白和磷脂。
最终，VLDL被转化为低密度脂蛋白。
（3）低密度脂蛋白（LDL，1.006-1.063g / cm3）将胆固醇运输到组织。
经过一系列复杂的过程，LDL与LDL受体结合并被细胞吞噬。
（4）肝脏中还会产生高密度脂蛋白（HDL，1.063-1.210 g / cm3），可能负责清除细胞膜上多余的胆固醇。
当血浆中的卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）将脂肪酸残基从卵磷脂转移至胆固醇形成胆固醇脂质时，HDL将这些胆固醇脂质转运至肝脏。
肝脏将多余的胆固醇转化为胆汁酸。
组成结构脂蛋白中的脂与脂之间没有共价键。
它们中的大多数受脂质的非极性部分与蛋白质成分之间的疏水相互作用的束缚。
血浆脂蛋白的分类、产生部位、组成特点、功能6讲解学习
目录
血浆脂蛋白的分类 血浆脂蛋白的产生部位
血浆脂蛋白的组成特点 血浆脂蛋白的功能
血浆脂蛋白的分类
• 血浆脂蛋白是脂类在血浆中的存在与运输 形式。
• ㈠血浆脂蛋白的分类 • ⑴电泳法： • (2)超速离心法：
电泳法
• 电泳法：按血浆脂蛋白移动的 • 快慢可分为-脂蛋白、前-脂蛋白、 • -脂蛋白、CM。
CM的生理功能 运输外源性TG。
（二）极低密度脂蛋白
来源
VLDL是由肝脏合成的
肝细胞合成的TG 磷脂、胆固醇及其酯
代谢
+ apo B100、E
LPL VLDL
VLDL LPL、HL LDL 残粒
FFA
FFA
外周组织
LPL——脂蛋白脂肪酶 HL—— 肝脂肪酶
内 源 性 VLDL 的 代 谢
VLDL的生理功能： 运输内源性TG
（一）乳糜微粒
来源
小肠合成的TG
apo B48 、 AⅠ、
和合成及吸收的 +
AⅡ、 AⅣ
磷脂、胆固醇
代谢
血液 新生CM
成熟CM
FFA
外周组织
CM残粒 LPL
肝细胞摄取（ apoE受体）
LPL（脂蛋白脂肪酶）
• 存在于组织毛细血管内皮细胞表面 • 使CM中的TG、磷脂逐步水解，产生甘油、
FA及溶血磷脂等。
② 使胆固醇酯进入HDL内核逐渐增多
③ 使新生HDL成熟
成熟HDL可与肝细胞膜SR-B1受体结合 而被摄取。
胆固醇在肝内转变成胆汁酸或直接通过 胆汁排出体外。
胆固醇酯 部分由 HDL 转移到 VLDL 少量由 HDL 转移到肝
临床生物化学检验考试必备名解问答【超重点知识归纳】
胰岛素原被分解为胰岛素与31个氨基酸的C肽，二者以等摩尔数分泌入血，C肽虽然没有生物学活性但对于保证胰岛素的正常结构是必需的。C肽的半寿期约35min，比胰岛素更长，且其降解不在肝脏而在肾脏，肝脏的代谢可以忽略，所以与外周血胰岛素浓度相比，可更好地反映胰岛β细胞功能。而且C肽不受外源性胰岛素干扰，也不与胰岛素抗体反应
3.低血糖,,指血糖浓度低于空腹参考水平下限。低血糖由多种原因引起，其症状主要是由交感神经兴奋和脑缺血所致，临床分为空腹性低血糖和反应性低血糖。其诊断主要依据多次连续测定等其他相关指标。
4.反应性低血糖，一种临床疾病，病人在日常生活中有餐后症状，毛细血管血或动脉血浆葡萄糖浓度低于2.5～2.8mmol/L。
1.糖尿病,是一组由于胰岛素分泌不足或（和）胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病，高血糖是其特征。长期高血糖将导致多种器官的损害、功能紊乱和衰竭，尤其是眼、肾、神经、心脏和血管系统。两种病理过程参与糖尿病的发病机制：胰腺ß细胞的自身免疫性损伤及机体对胰岛素的作用产生抵抗。
2.妊娠期糖尿病,指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作。
2．C反应蛋白,在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质，是急性时相反应时极灵敏的指标，升高早且程度高。
3．急性时相反应蛋白,在炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下，血浆中一系列浓度发生变化的蛋白质的总称，其中大部分蛋白质如AAT、AAG、Hp、Cp、CRP、C3和C4等浓度升高，PA、ALB和TRF等浓度下降。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白
4．血浆运载蛋白,在血浆中能结合其他物质并对之起运输载体作用的蛋白质，如ALB、PA、HDL、LDL、TRF等。
血清高密度脂蛋白的超速离心、氧化修饰及DiI标志
（ ｘ ＨＤ ）标记 的 ＨＤ （ ｉ Ｈ Ｌ ｏ ． Ｌ； Ｌ ＤＩ Ｄ ）结合到体 外培 养的 Ｅ Ｖ．０ ． Ｃ ３４细胞 。 明 Ｄ Ｉ Ｄ 表 ｉ Ｈ Ｌ保持 了正常 脂蛋 白的配体功 ．
能 结 论 ： 方 法 缩 短 了超 速 离心 时 间 并 降 低 了标 记 成 本 ． 果 理 想 。 成 功 应 用 于 脂 蛋 白 受体 的研 究 。 本 效 可 关键词 脂 蛋 白类 ．Ｈ Ｌ 超 速 离 心 法 Ｄ 氧 化 ＤＩ ｉ
维普资讯
实用 医学 杂志 ２ ０ ０ ７年第 ２ 卷 第 ７ ３ 期
９７ ３
・
基 础 研 究 ・
血清高密度脂蛋 白的超速离心 、 氧化 修 饰 及 ＤＩ 志 ｉ标
周 立尧 陈 爱华 宋旭 东
摘 要 目的 ： 讨一种方便 快捷 地从 血浆 中分 离高密度脂蛋 白（ Ｌ 及 氧化修饰 、 探 ＨＤ ） 荧光标记 的方法 。方法 ：
Ａ －ｕ ，Ｏ Ｇ Ｘｕ ｉ ａＳ Ｎ 一 ｈ
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简述超速离心法血浆脂蛋白的种类及其功能
简述超速离心法血浆脂蛋白的种类及其功能
超速离心法血浆脂蛋白可分为四种：
1. 低密度脂蛋白(LDL)：LDL是一种脂蛋白，它主要负责将胆固醇从肝脏转运到全身其他组织和细胞，以满足各细胞的胆固醇需求，同时也是血液中胆固醇含量最多的脂蛋白。
2. 高密度脂蛋白(HDL)：HDL是一种脂蛋白，它主要负责将血液中多余的胆固醇从组织和细胞转运回肝脏，以减少血液中胆固醇的含量，同时也是血液中胆固醇含量最少的脂蛋白。
3. 中密度脂蛋白(VLDL)：VLDL是一种脂蛋白，它主要负责将肝脏合成的甘油三酯从肝脏转运到全身其他组织和细胞，以满足各细胞的甘油三酯需求，同时也是血液中甘油三酯含量最多的脂蛋白。
4. 载脂蛋白A1(ApoA1)：ApoA1是一种脂蛋白，它主要负责将血液中多余的甘油三酯从组织和细胞转运回肝脏，以减少血液中甘油三酯的含量，同时也是血液中甘油三酯含量最少的脂蛋白。
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序列超速离心分离血浆脂蛋白
[目的与要求]
了解超速离心分离技术的原理，掌握制备性分离血浆脂蛋白的方法。
[原理]
基本原理见第六章6.1、6.2节。
本实验采用正常人抗凝血浆，以NaBr为密度介质，利用各脂蛋白颗粒密度不同，经过序列超速离心大量制备各血浆脂蛋白，经透析脱盐、PEG20000浓缩后保存备用。
[操作步骤]
1．血浆制备：取献血员全血400mL，EDTANa2抗凝，1000rpm离心15min，分离
血浆。
根据血浆体积，加入0.015%的苯甲基氟磺酰（PMSF），防止脂蛋白变性。
2．CM和VLDL分离：血浆中加入适量的NaBr，调节密度至1.019g/ml，分置于离心管（38.5ml/管）中，加盖，用1.019g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下30，000rpm （100，000×g）离心20小时。
CM和VLDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
3．LDL分离：下层溶液中加入适量的NaBr，调节密度至1.060g/ml，分置于离心管中，加盖，用1.060g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下40，000rpm（170，000×g）离心24小时。
LDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
4．Lp（a）和HDL分离：下层溶液中加入适量的NaBr，调节密度至1.125g/ml，分
置于离心管中，加盖，用1.125g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下45，000rpm （225,000×g）离心24小时。
Lp（a）、HDL和少量LDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
5．HDL分离：下层溶液中加入适量的NaBr，调节密度至1.21g/ml，分置于离心管中，加盖，用1.21g/ml密度液平衡，放入60Ti转头，在10℃下50，000rpm（280，000×g）离心24小时。
HDL浮于离心管上层，用吸管小心吸取。
下层含有总量的50%的游离apoA-Ⅳ，可用于分离apoA-Ⅳ。
6．透析：已分离好的各部分脂蛋白含有大量的NaBr，需要透析脱盐。
将各脂蛋白
溶液分别装入透析袋中，对抗0.01mol/L PBS（pH7.4）溶液透析过夜。
7．浓缩：将透析过夜的脂蛋白溶液连同透析袋一起放入盛有40%的PEG20000的
烧杯中，浓缩至适当体积。
[试剂]
1．NaBr
2．密度液：以NaBr与双蒸水配制，以比重计测定密度。
配制成1）1.019g/ml； 2）
1.060g/ml；3）1.125g/ml；4）1.21g/ml 四种密度液。
3．苯甲基氟磺酰（PMSF）
4． 0.01mol/L PBS（pH7.4） 5. 40% PEG20000
[材料]
1．比重计： 1.000-1.100g/ml和1.100-1.200g/ml比重计
2．离心管：聚碳酸酯厚壁离心管，Beckman
3．角度转头： 60Ti Beckman
4．超速离心机：Beckman LM-80
5.平衡天平。