标准曲线的绘制课件

3-技能点2：铁标准溶液的配制及标准曲线的绘制

λmax 为510nm
0.6
最大吸收波长，max
0.5
0.4
A
0.3 0.2 0.1 440 460 480 500 520 540 560
λ
nm
吸收曲线：测定某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图。

二、铁标准溶液的配制
在 6 个 50mL 比色管中，用吸量管分别加入 0.0,
用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
溶液，在 440 ～ 560nm 之间，每隔 10nm 测一次吸光度，在
最大吸收峰附近，每隔5nm测定一次吸光度。以波长λ为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制 A 和λ关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定 Fe 的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax。

2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0mL 10μg· mL-1 铁标
准溶液，分别加入 1mL 盐酸羟胺， 2mL Phen ，
5mL NaAc 溶液，每加一种试剂后摇匀。然后，
用水稀释至刻度，摇匀后放置10min。

观察并思考：
一、吸收曲线的绘制及测量波长的选择：
用吸量管吸取 0.0 ， 1.0mL 铁标准溶液，分别注入两个
50mL 比色管中，各加入 1mL 盐酸羟胺溶液， 2mL 邻二氮菲，
5mL NaAc ，用水稀释至刻度，摇匀。放置 10min 后，用 1cm 比色皿，以试剂空白（即 0.0mL 铁标准溶液）为参比

怎样绘制标准曲线

怎样绘制标准曲线
首先，准备实验所需的材料和仪器。

通常情况下，我们需要准备标准样品、实验室常用的仪器（比如分光光度计、色谱仪等）、实验室常用的试剂和溶剂等。

确保所有的材料和仪器都是干净的，并且处于良好的工作状态。

其次，根据实验的需要选择合适的标准样品。

标准样品的选择应当与待测样品的性质相符合，确保标准样品的浓度范围覆盖到待测样品的浓度范围内。

这样才能够绘制出准确的标准曲线。

然后，按照实验的要求进行标准样品的稀释。

通常情况下，标准样品的浓度会比较高，需要进行适当的稀释，使得标准样品的浓度可以覆盖到待测样品的浓度范围内。

在进行稀释的过程中，需要注意精确的操作，避免出现误差。

接着，进行实验测量。

将稀释后的标准样品依次放入仪器中进行测量，记录下每个标准样品的测量数值。

在记录数据的过程中，需要注意保持仪器的稳定，避免外界因素对实验结果的影响。

最后，根据实验测量得到的数据绘制标准曲线。

通常情况下，
我们会将标准样品的浓度作为自变量，测量数值作为因变量，绘制
出标准曲线的图像。

在绘制曲线的过程中，需要选择合适的曲线拟
合方法，确保曲线能够准确地反映出标准样品浓度与测量数值之间
的关系。

绘制标准曲线是实验室工作中非常重要的一环，准确的标准曲
线可以帮助我们准确地测量和分析样品中的成分。

通过以上的步骤，我们可以清晰地了解到如何绘制标准曲线，希望这些内容对你有所
帮助。

标准曲线的绘制-土木工程试验教学中心

Σ t lg Da/ Dt=
实验结果
（1）用最小二乘法计算Kla值，将上表中有关数据列入下列公式求Kla值。
138.2 t lg K la t 2 Da Dt ( L / h)
2.求充氧量R0
式中 3.求氧的利用率Ea
R0
K la( 20 ) V 9.17 1000
K la(T ) 1.024(T 20 )
实验结果
1 亚甲基蓝标准曲线绘制根据前述实验结果绘制亚甲基蓝浓度（横坐标）-吸光度（纵坐标）关系曲线。表1-亚甲基蓝浓度与吸光度序号 1 2 3 4 5
浓度mg/l
5
10
20
30
40
吸光度A1
2、活性炭吸附实验结果
活性炭投加量 /m logC 原亚甲基蓝浓度C0/(mg/L) 吸附平衡后亚甲基蓝浓度C/(mg/L) 平均值 C0-C C0-C/m logC0-C/m
未被移除颗粒百分比
（mm/s）
u u
3．以颗粒沉速为横坐标，以P为纵坐标，绘制U~P关系曲线。
P
4．利用图解法计算沉速u＝6.0m/h的沉淀总效率。
实验3 活性炭吸附实验
实验原理
活性炭对水中所含杂质的吸附既有物理吸附现象，也有化学吸着作用，当活性炭对水中所含杂质吸附时，水中溶解性杂质在活性炭表面积聚而被吸附。与此同时也有一些被吸附物质由于分子运动而离开活性炭表面，重新进入水中，即同时发生解吸现象，当吸附和解吸处于动态平衡状态时，称为吸附平衡。这时活性炭和水相之间的溶质浓度具有一定的分布比值。此时，单位重量的活性炭所吸附溶质数量称为吸附容量qe ，可表示为
ti
2．实验数据整理将实验原始数据按表2-2整理，以备计算分析之用。表中不同沉淀时间时，沉淀管内未被移除的悬浮物的百分比及颗粒沉速 ti 分别按下式计算 C p 未被移除悬浮物的百分比 C

标准加入法绘制标准曲线

标准加入法绘制标准曲线
标准加入法是一种常用的实验方法，可以用于测定样品中某种成分的含量。

在进行标准加入法实验时，需要绘制标准曲线，以便计算出样品中目标成分的含量。

本文将介绍如何使用标准加入法绘制标准曲线。

第一步，准备标准品溶液。

选择一种已知浓度的标准品，将其加入到一系列试管中，浓度逐渐加大，例如0.1mol/L、0.2mol/L、
0.3mol/L等。

第二步，加入试剂。

将每个试管中的标准品溶液加入一定量的试剂，使其发生反应，产生可测量的信号。

例如，可以加入一定量的指示剂或者反应剂。

第三步，测量信号强度。

使用光谱仪、电化学分析仪等设备，测量每个试管中的信号强度。

例如，可以测量吸光度、电位等。

第四步，绘制标准曲线。

将每个试管中的信号强度与其对应的标准品浓度绘制到图表上，可以得到一条标准曲线。

第五步，测量样品信号强度。

将待测样品加入到一个新的试管中，加入相同的试剂，测量其信号强度。

第六步，计算样品中目标成分的含量。

根据标准曲线，可以计算出样品中目标成分的含量。

总之，标准加入法绘制标准曲线是一个重要的实验步骤，需要仔细操作。

通过合理地设置标准品浓度、试剂种类和测量方法，可以得到准确可靠的标准曲线，用于测定样品中目标成分的含量。

标准曲线的绘制吸光度标准曲线绘制

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。

另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。

甲醛标准曲线的绘制

将甲醛标准样品稀释成10 ug/ml，2~5℃贮存。

取7支25ml具塞比色管按下表绘制标准色列：
于上述标准系列中，用水稀释定容至10.0ml刻线，加0.25%乙酰丙酮溶液2.0ml，混匀，置于沸水浴中加热3min，取出冷却至室温，用1cm吸收池，以水为参比，于波长413nm处测定吸光度。

将上述系列标准溶液测得的吸光度A值扣
值，便得到校准吸光度y值，以标准吸光度y 除试剂空白（零浓度）的吸光度A
为纵坐标，以甲醛含量x（ug）为横坐标，绘制标准曲线，或用最小二乘法计算其回归方程式。

注意零浓度不参与计算。

y=bx+a
式中：a——校准曲线截距；
B——标准曲线斜率。

由斜率倒数求得校准因子：Ba=1//b
样品测定
将吸收后的样品溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水稀释定容，取少于10ml试样（吸取量视溶液浓度而定），于25ml比色管中，用水定容至10.0ml刻线，以下步骤按标准曲线的绘制过程进行分光光度测定。

标准曲线的绘制吸光度标准曲线绘制

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。

另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。

化学分析中的标准曲线绘制方法

化学分析中的标准曲线绘制方法在化学分析中，标准曲线是一种非常重要的方法，用于量化分析样品中某种物质的含量。

标准曲线的绘制是分析师在实验室工作中必备的技能之一。

它不仅能够提高分析数据的准确性，还可以帮助我们了解待测物质与信号之间的关系，从而更好地理解样品中的化学成分。

首先，我们需要明白标准曲线的基本原理。

标准曲线是通过制备一系列不同浓度的标准溶液，测量其对应的信号强度，并将这些数据绘制在一张图上得到的。

通常情况下，我们认为标准溶液中待测物质的浓度与信号强度之间存在线性关系。

因此，标准曲线呈现为一条直线。

在实验中，首先我们需要制备一系列的标准溶液。

这些标准溶液的浓度范围应该尽量覆盖我们要测试的样品中待测物质的浓度范围。

制备标准溶液时，我们需要注意控制好实验条件，确保每个标准溶液的制备过程相同，这样才能保证标准曲线的可靠性。

此外，我们还需要使用纯净的溶剂和准确的浓度计量器具，以保证标准溶液的准确性。

接下来，我们需要使用适当的仪器仪表对这些标准溶液进行测量。

仪器的选择应根据待测物质的属性来确定。

如对于紫外-可见吸收光谱分析，我们可以使用紫外-可见分光光度计，通过测量标准溶液在特定波长下的吸光度来获取信号强度。

对于色谱分析，我们可以使用气相色谱仪或液相色谱仪，根据样品中化合物的保留时间来获得信号强度。

不同仪器仪表对应的信号强度也是不同的，因此在绘制标准曲线时需要注意选择适当的仪器仪表。

测量完标准溶液各个浓度对应的信号强度后，我们需要将这些数据绘制在一张图上。

横轴通常表示待测物质的浓度，纵轴表示信号强度。

对于线性关系，我们可以使用最小二乘法进行数据拟合，得到一条直线。

拟合直线的斜率和截距分别代表了信号强度与浓度之间的比例关系和零浓度时的信号强度。

这样，当我们需要测量待测样品中待测物质的浓度时，只需要通过测量其对应的信号强度，然后利用拟合直线的方程进行计算即可。

需要注意的是，绘制标准曲线时应尽量采用多个浓度点，以提高拟合直线的准确性。