细胞膜渗透率的测定(精)
第6章 医用薄膜渗透率的
达到最小。 达到最小。
其中δi为点（xi,yi）与曲线y=f(x)的距离。曲线拟合的实 际含义是寻求一个函数y=f(x)，使f(x)在某种准则下与所 有数据点最为接近，即曲线拟合得最好。
10
6.3 一元最小二乘法简介
设拟合函数可由一些简单的“基函数”（如幂函数，三角 函 数等） 来线性表示：
现在要确定系数c0,c1,…cm,使δ达到最小
代入(6.1)得 得 代入
再利用初始条件
解出
8
6.2 确定医用薄膜渗透率的数学模型
数学模型
问题归结为利用CB在时刻tj的测量数据Cj(j=1,2,…,N)来辨识参 数K和αA，αB，对应的数学模型变为使函数
达到最小 令 问题转化为如下最优化问题
9
6.3 一元最小二乘法简介
最小二乘法
给定平面上的点(xi,yi),i=1,2,…n，求f(x)，使 ， 给定平面上的点 ，
第6章 医用薄膜渗透率的确定 章
——曲线拟合 曲线拟合
1
概述
利用数据确定方程的参数
如：刹车距离与刹车速度的有如下关系 d=Cv2 其中， 表示刹车距离 表示刹车距离， 表示刹车时的速度 表示刹车时的速度， 其中，d表示刹车距离，v表示刹车时的速度，需要确定 常数C。 常数 。
根据一组二维数据，即平面上的若干点，要求确定 根据一组二维数据，即平面上的若干点， 一个一元函数y=f(x)，使这些点与曲线总体来说 一个一元函数 ， 尽量接近，这就是数据拟合曲线的基本思想， 尽量接近，这就是数据拟合曲线的基本思想，简称 曲线拟合(fitting a curve)。 曲线拟合 。
21
6.4 用曲线拟合方法确定医用薄膜渗透率
拟合数据与实测数据比较
细胞膜渗透率的测定
三、材料与仪器设备 1.材料 低温处理过的黄瓜、番茄。 去离子水。 2.仪器设备 DDS——11A型电导仪；751——型紫外分光 光度计；真空泵；真空干燥器；三用水浴； 打孔器；剪刀；洗瓶；试管；移液管；玻 棒；滤纸。
四、方法与步骤 1.清洗器具：由于电导仪变化非常灵敏，稍有杂质即产生很大误差。因 此所用玻璃器具均需先用热肥皂水洗，再用洗液洗涤，然后用自来水、 无离子水各冲四到五遍（最好是容器口朝下用水冲）。向洗净的试管 中加入去离子水，用电导仪测定电导值，检查试管是否确实冼净。 2.取样及处理：自购样品，设计不同贮藏条件，作为处理。用打孔器及 切片器将样品制成厚薄均匀，大小一致的组织圆片，精确称取2g（或 10个圆片），放入试管内，用去离子水冲洗三次，然后加入20mL去离 子水。对照和处理均设3～4个重复。 将试管放入真空干燥器内，开动真空泵抽气10min，压力控制在 0.04-0.06MPa，以抽出细胞间隙空气。缓慢放入空气，水即渗入细胞 间隙，组织圆片变成透明状，细胞内溶质易于渗出，取出试管，间隔 几分钟振荡一次，在室温下保持30min。 3.测定：将DDS——11A型电导仪电极插入试管，测定外渗液的电导值。 测定之后，将试管放入水浴锅沸水中5min 以杀死组织。待冷至室温后， 再次测定外渗液的电导值。
细胞膜相对透性（%） =
L1 L2
100
五.计算： 以细胞膜相对透性大小表示细胞受害的程度。通常 按下式计算： 式中：L1—组织杀死前外渗液的电导值；L2—组织 杀死后外渗液的电导值。 细胞膜相对透性（%）= L1/ L2
附电导仪使用方法： （1）将电极引线接到仪器相应接线柱上。 （2）接上稳压器，接通电源，打开电源开关。 （3）将开关拨向“校正”位置，调整调节器，使指针达到 满偏。 （4）将开关拨向“测定”位置。指针应回到0点。 （5）拨动选择测定范围旋钮，使其处于测定范围之内，如 不知测量范围，应先放在最大量程位置上，由大到小逐级 调整。 （6）将电极用量蒸馏水冲洗干净，并用滤纸吸去附着的水 分。放在需测组织提取液中，待指针稳定后，读出指针所 指数值，此数值即该提取液的电导度。 （7）按上述方法测定组织圆片杀死后提取液电导度。 （8）将电极用蒸馏水冲洗干净，放在水中，如长期不用， 则应将电极洗净晾干包装收藏。
细胞渗透性实验步骤
细胞渗透性实验实验材料：1.Caco-2细胞；2.培养基DMEM(高糖，含Gln，无丙酮酸，Gibco/Invitrogen, cat. no. 41965-039)；a)完全培养基DMEM+10% FCS + 1% NEAA (Gibco/Invitrogen, cat. no. 11140-035)；b)DMEM-双抗培养基DMEM+10% FCS+1% NEAA+1%双抗〔Gibco/Invitrogen, cat. no. 15140-122〕；3.0.25%胰酶+EDTA；4.HBSS〔Hank’s balanced salt solution〕(cat. no. H1387)配制1L，加入HEPES〔终浓度25mM〕和NaHCO3〔终浓度0.35g/L〕,调整PH=7.4并过滤除菌〔如果要模拟小肠酸环境或研究质子依赖的转运机制，则以PH=6.5的甲磺酸代替HEPES，终浓度10mM，调整PH=6.5〕；5.DMSO〔在药物不溶于HBSS时使用，99.5%纯度，作为共溶剂，使用时DMSO终浓度不能超过1%〕；6.[14C]mannitol〔supplied by NEN Life Science Products，具有放射性〕或用fluorescentcompound lucifer yellow〔需要的药物浓度高于[14C]mannitol〕7.分析药物含量的溶剂，如HPLC溶剂；8.BSA，如检测脂溶性化合物则需要BSA；9.配制药物，用上述HBSS溶液按需要的浓度溶解药物，使用前检查配制后的溶液PH值，如PH改变，则调整相应的至7.4或6.5。
要点：1.有些药物可能会破坏Caco-2细胞层的完整性，造成通透性升高，一般以[14C]mannitol作为marker，通常完整的Caco-2细胞层通透性为1.2 ± 0.5×10-7 cm s-1，如果通透系数大于5×10-7 cm s-1，则认为单细胞层受到了药物的影响，若通透系数大于1×10-6 cm s-1，则认为单细胞层遭到破坏；2.对于主动转运，首先使用低浓度药物如10μM或更低的浓度进行实验以避免转运蛋白的饱和转运；对于被动运输mM数量级的浓度进行实验，这样，主动运输饱和，此时的运输主要是被动运输。
苹果出库后生理指标比较测定
苹果出库后生理指标比较测定—果蔬采后生理设计性实验摘要：此设计性实验测定了经乙烯利处理和低温贮藏的红富士苹果的呼吸强度、有机酸含量、细胞膜渗透率，以及多酚氧化酶（PPO）、过氧化氢酶(POD)活性的测定和丙二醛(MDA)含量的测定。
关键词：苹果出库生理指标比较测定前言：红富士是从普通富士的芽（枝）变中选育出的着色系富的统称。
富士苹果是日本农林水产省果树试验场盛冈分场于1939年以国光为母本，元帅为父本进行杂交，历经20余年,选育出的苹果优良品种，具有晚熟、质优、味美、耐贮等优点,于1962年正式命名，是世界上最著名的晚熟苹果品种。
富士果实虽有风味好、晚熟、耐贮等优点，但也存在着果实着色差的缺点。
为此，日本各地又从富士当中选出了许多着色好的富士芽变，统称为红富士。
红富士苹果在渭北平原，陕北黄土高原一些地区以及秦岭以北麓地区均能正常生长，并能早实丰产稳产，色艳质优。
红富士的经济栽培北界在白于山、横山以南，西起吴旗的油城子，经过志丹县的桑园沟，冬至清涧。
在北纬37°以北，榆林县以南地区，选用适宜的地形和小气候条件，也可少量栽培，但需注意防冻防霜。
乙烯利也叫一催磷，乙烯磷。
具有抑制新梢生长，促进成花结果，果实着色成熟等作用。
苹果成熟前3 至 4周，用纯量的320至800毫克/千克浓度溶液喷布全树，可使果实提早10至15天成熟。
苹果花前10天，全树喷100至200毫克/千克浓度溶液，可提高果实品质。
此设计性实验测定了经乙烯利处理和低温贮藏的苹果的呼吸强度、有机酸含量、细胞膜渗透率，以及多酚氧化酶（PPO）、过氧化氢酶(POD)活性的测定和丙二醛(MDA)含量的测定。
了解果蔬采后生理变化和生产上减少果蔬采后损失的操作技术。
1.试验材料与方法1.1 试验材料与处理1.1.1 试验材料红富士苹果：2010年5月26日购于新北园春水果批发市场，产地陕西。
1.1.2材料处理：1、冰箱（4℃）贮藏；2、室温（20℃）贮藏（乙烯利0.2%处理3天）1.2 试剂与仪器1.2.1 试剂： 0.4mol/L的氢氧化钠溶液、0.1 mol/L的氢氧化钠溶液、Bacl2溶液、酚酞、0.1mol•L-1的草酸溶液、蒸馏水、0.2 mol·L-1 pH=6.2 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液、0.1 mol·L-1邻苯二酚、5.0%三氯乙酸、0.5%硫代巴比妥酸、H2O20.1mol•L-1愈创木酚1.2.2 仪器：电子天平、培养皿、干燥器、50ml或100ml碱式滴定管、酸式滴定管、试管、研钵、烧杯、锥形瓶、漏斗、电炉、移液管（1ml、5ml，10ml，20ml）、离心机、脱脂棉、电导仪、恒温水浴锅、分光光度计。
细胞膜渗透率的测定
三、材料与仪器设备 1.材料 低温处理过的黄瓜、番茄。 去离子水。 2.仪器设备 DDS——11A型电导仪；751——型紫外分光 光度计；真空泵；真空干燥器；三用水浴； 打孔器；剪刀；洗瓶；试管；移液管；玻 棒；滤纸。
三、方法与步骤 1.清洗器具：由于电导仪变化非常灵敏，稍有杂质即产生很大误差。因 此所用玻璃器具均需先用热肥皂水洗，再用洗液洗涤，然后用自来水、 无离子水各冲四到五遍（最好是容器口朝下用水冲）。向洗净的试管 中加入去离子水，用电导仪测定电导值，检查试管是否确实冼净。 2.取样及处理：自购样品，设计不同贮藏条件，作为处理。用打孔器及 切片器将样品制成厚薄均匀，大小一致的组织圆片，精确称取2g（或 10个圆片），放入试管内，用去离子水冲洗三次，然后加入20mL去离 子水。对照和处理均设3～4个重复。 将试管放入真空干燥器内，开动真空泵抽气10min，压力控制在 0.04-0.06MPa，以抽出细胞间隙空气。缓慢放入空气，水即渗入细胞 间隙，组织圆片变成透明状，细胞内溶质易于渗出，取出试管，间隔 几分钟振荡一次，在室温下保持30min。 3.测定：将DDS——11A型电导仪电极插入试管，测定外渗液的电导值。 测定之后，将试管放入水浴锅沸水中5min 以杀死组织。待冷至室温后， 再次测定外渗液的电导值。
注意事项：
电导率测定的整个过程均需在恒温下进行， 因为温度不仅影响细胞内离子内外渗透速 度，而且影响提取的电导率，一般每升高 1℃，电导率约增加2%，通常以25℃为标准 温度，如不在25℃下测定，则要求把电导率 换算为标准温度25℃的电导率。
实验六 细胞膜渗透率的测定 一.目的：
了解测定果蔬细胞膜渗透率的意义，果蔬成 熟衰老或受到外界环境影响是细胞膜渗透率 变化规律，掌握果蔬组织细胞膜渗透率的测 定原理和方法。
金针菇保鲜贮藏技术
金针菇保鲜实用技术一、低温贮藏法(1) 常温保鲜采收后的新鲜金针菇经整理后，立即放入筐、篮中。
其上覆盖多层湿纱布或塑料薄膜，置于冷凉处（自然气温20℃以下），一般可保鲜1-2天。
(2) 简易包装后低温保藏新采收的金针菇经整理后，用低密度聚乙烯薄膜袋（DPE）袋膜厚20毫米，分装，抽真空封口，将包装袋竖立放入专用筐或纸箱内，1-3℃低温冷藏。
可保鲜13天左右。
2.化学保鲜法采用对人畜安全，无毒的化学物质用于浸泡或喷洒在金针菇表面，以达到延长金针菇新鲜的目的。
可用于金针菇保鲜的化学物质有：焦亚硫酸钠、氯化纳、稀盐酸、高浓度的二氧化碳、保鲜剂、抗坏血酸及比久等。
(1) 焦亚硫酸钠喷洒保鲜用0.02%焦亚硫酸钠溶液漂洗金针菇以除去泥沙碎屑，再用0.05%焦亚硫酸钠溶液浸泡10分钟护色，捞出沥干后分装塑料袋中可保鲜数天。
(2) 氯化钠（即食盐）、氯化钙液保鲜用0.2%食盐液加0.1% 氯化钙制成混合浸泡液，将刚采收整理好的金针菇浸泡上述混合液中，要求菇体浸入液面以下30分钟，捞出沥干分装塑料袋中，可保鲜数天二、化学指标1.呼吸强度的测定（1）实验原理：呼吸强度的测定通常是采用定量碱液吸收样品在一定时间内呼吸所释放出来的CO2，再用酸滴定剩余的碱，即可计算出呼吸所释放出来的CO2量，求出其呼吸强度。
单位通常用每公斤每小时释放CO2毫克数（mgCO2/kg·h）表示。
反应如下：2NaOH+CO2→Na2CO3+H2ONa2CO3+BaCl2→BaCO3+2NaCl2NaOH+H2C2O4→Na2C2O4+2H2O测定可分为气流法和静置法两种。
气流法设备较复杂，结果准确。
静置法简便，但准确性较差。
静置法比较简便，不需特殊设备。
测定时将样品置于干燥器中，干燥器底部放入定量碱液，果蔬呼吸释放出的CO2自然下沉而被碱液吸收，静置一定时间后取出碱液，用酸滴定，求出样品的呼吸强度。
（2）实验材料、用具与试剂a.材料：金针菇b.用具滴定管夹，铁架台，酸式滴定管，250mL三角瓶，250mL烧杯，移液管，吸耳球，100mL容量瓶，电子天平等。
果蔬实验
苹果出库后生理指标比较测定——果蔬采后生理设计性实验摘要：将红富士苹果进行0.2%的乙烯利喷施处理并放在4℃冰箱内冷藏一星期后，并以4℃冷藏但未经乙烯利处理的相同的苹果进行对照。
在一定条件下的呼吸强度、可滴定酸含量、细胞膜渗透率（电导率）、多酚氧化酶(PPO)活性、丙二醛(MDA)含量、过氧化物酶(POD)活性等生理指标进行了测定。
其结果为呼吸强度有所降低、可滴定酸含量降低、电导率增强、多酚氧化酶(PPO)活性增强、丙二醛(MDA)含量增加、过氧化物酶(POD)活性减弱。
果实成熟度大大提高。
关键词：苹果，乙烯利，指标测定，呼吸强度，酶活性前言：苹果，属于蔷薇科大宗水果，不仅是我国最主要的果品，也是世界上种植最广、产量最多的果品。
其味道酸甜适口，营养丰富，具有降低胆固醇含量的功效，还具有通便和止泻的双重功效，以及降低血压的作用等。
据测定，每百克苹果含果糖6.5～11.2克，葡萄糖2.5～3.5克，蔗糖1.0～5.2克；还含有微量元素锌、钙、磷、铁、钾及维生素Ｂ1、维生素Ｂ2、维生素Ｃ和胡萝卜素等，故有“智慧果”、“记忆果”、“大夫第一药”的美称。
苹果的营养和药用价值由此可窥见一斑。
又因苹果所含的营养既全面又易被人体消化吸收，所以，非常适合婴幼儿、老人和病人食用。
1.试验材料与方法1.1 试验材料与处理1.1.1 试验材料于处理采收后运回实验室，并挑选大小均匀、无病虫害和机械损伤的果实，喷洒0.2%的乙烯利以及未喷洒的置于4℃温度储藏的苹果，定期取样测定相关生理和品质指标1.2 试剂与仪器1.2.1 试剂：0.2%的乙烯利、0.4mol•L-1的NaOH溶液、Bacl2溶液、酚酞、0.1mol•L草酸溶液、蒸馏水、0.2 mol·L-1 pH=6.2 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液、0.1 mol·L-1邻苯二酚、5%三氯乙酸（TCA）、0.5%硫代巴比妥酸、2.0% H2O2、0.1 mol·L-1愈创木酚。
薄膜渗透率的测定
薄膜渗透率的测定摘要根据问题的要求，我们对题目进行恰当的分析，通过合理的假设，们建立微积分数学模型和数据拟合数学模型，求出不同关系量之间的关系。
对于问题，我们运用高等数学和高中物理和生物学的相关知识，同时也用MATLAB进行求解，得出A=0.00006985525148 B=-0.00002994067803 K=0.10117070586401关键词：数据拟合，渗透率，质量守恒一、问题的重述某种医用薄膜有允许一种物质的分子穿透它，从高浓度的溶液向低浓度的溶液扩散的功能，在试制时，需要测定薄膜被这种分子穿透的能力。
测定方法如下：用面积S的薄膜将容器分成体积分别为V A，V B的两部分，在两部分中分别注满该物质的两种不同浓度的溶液。
此时该物质分子就会从高浓度溶液穿过薄膜向低浓度溶液中扩散。
通过单位面积膜分子扩散的速度与膜两侧溶液的浓度差成正比，比例系数K表示薄膜被该物质分子穿透的能力，称为渗透率。
V A=V B=1000cm3,S=10cm2,求容器的B部分溶液浓度 V A的测试结果如下表（其中C j的单位为毫克/cm3）SV B1、2、物质从膜的任何一侧向另一侧渗透的性能是相同的。
三、符号说明：t: 时间CA（t）：t时刻A侧溶液的浓度。
CB（t）：t时刻B侧溶液的浓度。
aA：A侧初始时刻的浓度aB:：B侧初始时刻的浓度Cj:：B侧在j时刻测得的浓度V：体积SK：物质质量的增加四、问题的分析渗透率和浓度差是本文所要求的关系量，我们先用质量守恒建立溶质间的渗透关系，用微分方程，建立微分数学模型来求t时刻薄膜两侧的浓度，体积差。
最后通过数据拟合，得出K的值。
四、模型的建立与求解令时刻t，膜两侧溶液的浓度分别为CA（t）和CB(t), 初始时刻两侧的浓度分别为aA和aB,单位为 mg/cm3. 又设B侧在tj时刻测得的浓度为cj(j=1,2,3……n).在A侧经△t 物质质量增加为：VACA(t+△t)-VACA(t)从B侧渗透到A侧的物质质量为：SK(CB-CA)△t.由质量守恒：V(CA(t+△t)-CA(t))=SK(CB-CA)△t两边同除VA△t 得：dCA/dt=SK(CB-CA)/VA (1)在B侧，经△t 物质增加为：VBCB(t+△t)-VBCB(t)从A侧渗透到B侧的物质质量为：SK(CA-CB)△t由质量守恒定律得：VB(CB(t+△t)-CB(t))=SK(CA-CB)△tdCB/dt=SK(CA-CB)/VB (2)得到薄膜两侧溶液满足微分方程组的初值问题：dCA/dt=SK(CB-CA)/VA (1)dCB/dt=SK(CA-CB)/VB (2)CA（0）=Aa， CB(0)=aB又能有整个容器的溶液中含有该物质的质量不变，即成立VACA(t)+VBCB(t)=常数=VAaA+VbaB (3)即：CA(t)=Aa+VB*Ab/VA-VB*CB(t)/VA (4)将（4）式代入（2 ）式；根据积分中值定理：dCB/dt=SK(Aa+VB*Ab/VA-VB*CB(t)/VA -CB)/VB (5)dCB/dt=a-bCBCB(0)=aB其中a= SK(Aa/VB+Ab/VA)b=SK(1/VA+1/VB);解得：CB(t)=(aAVA+aBVB)/(VA+VB)+(VA(aB-aA)/(VA+VB))*e.^(-sk(1/VA+1/VB)*t 令A=(aAVA+aBVB)/(VA+VB)=0.2B=VA(aB-aA)/(VA+VB)=0.05CB(t)=A+B*E.^(-SK(1/VA+1/VB)*t将已知数据代入,通过数据拟合求参数k ：s=10,VA==VB=1000A=0.00006985525148 B=-0.00002994067803 K=0.10117070586401附录：运用MATLAB：函数一：function f=curvefun1(x,tdata)f=x(1)+x(2)*exp(-0.02*x(3)*tdata) %其中x(1)=a;x(2)=b;x(3)=k;调用函数一：tdata=100:100:1000;cdata=1e-05*[4.54,4.99,5.35,5.65,5.90,6.10,6.26,6.39,6.50,6.59];x0=[0.2,0.05,0.05];x=curvefit('curvefun1',x0,tdata,cdata);f=curvefun1(x,tdata);x,fx =0.00006985525148 -0.00002994067803 0.10117070586401f =1.0e-004 *0.45399226319512 0.49879178593386 0.53538475333677 0.565274474956340.58968887810267 0.60963095346149 0.62591995988254 0.639225081110450.65009291714129 0.65896993960280（注：本资料素材和资料部分来自网络，仅供参考。
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二.原理 果蔬细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。细胞膜 具有选择透过性功能，果蔬细胞之间以及细胞与外界环境之间发生的一切物 质交换都必须通过质膜进行。果蔬组织后熟衰老过程中，细胞质膜功能活性 下降，膜通透性增加，出现细胞内电解质向外渗漏。植物组织在受到各种不 利的环境条件（如干旱、低温、高温、盐渍和大气污染）危害时，细胞膜的 结构和功能首先受到伤害，细胞膜透性增大。若将受伤害的组织浸入无离子 水中，其外渗液中电解质（主要是钾离子）的含量比正常组织外渗液中含量 增加，组织受伤害越严重，电解质含量增加越多。通过测定果蔬组织浸提液 或外渗液的电导率，可以了解果蔬细胞膜通透性变化，反映果蔬抗逆性强弱 或受到伤害的程度。一般利用相对电导率表示细胞膜渗透率以及细胞膜受到 伤害的程度。 在电解质外渗透的同时，细胞内可溶性有机物也随之渗出，引起外渗液 可溶性糖、氨基酸、核苷酸等含量增加，氨基酸和核苷酸对紫外光有吸收， 用紫外分光光度计测定受伤害组织外渗液消光值，同样可反映出质膜受伤害 的程度。 用电导仪法和紫外法测定结果有很好的一致性。
注意事项：
电导率测定的整个过程均需在恒温下进行， 因为温度不仅影响细胞内离子内外渗透速 度，而且影响提取的电导率，一般每升高 1℃，电导率约增加2%，通常以25℃为标准 温度，如不在25℃下测定，则要求把电导率 换算为标准温度25℃的电导率。
细胞膜相对透性（%） =
L1 L2
100
五.计算： 以细胞膜相对透性大小表示细胞受害的程度。通常 按下式计算： 式中：L1—组织杀死前外渗液的电导值；L2—组织 杀死后外渗液的电导值。 细胞膜相对透性（%）= L1/ L2
附电导仪使用方法： （1）将电极引线接到仪器相应接线柱上。 （2）接上稳压器，接通电源，打开电源开关。 （3）将开关拨向“校正”位置，调整调节器，使指针达到 满偏。 （4）将开关拨向“测定”位置。指针应回到0点。 （5）拨动选择测定范大量程位置上，由大到小逐级 调整。 （6）将电极用量蒸馏水冲洗干净，并用滤纸吸去附着的水 分。放在需测组织提取液中，待指针稳定后，读出指针所 指数值，此数值即该提取液的电导度。 （7）按上述方法测定组织圆片杀死后提取液电导度。 （8）将电极用蒸馏水冲洗干净，放在水中，如长期不用， 则应将电极洗净晾干包装收藏。
三、材料与仪器设备 1.材料 低温处理过的黄瓜、番茄。 去离子水。 2.仪器设备 DDS——11A型电导仪；751——型紫外分光 光度计；真空泵；真空干燥器；三用水浴； 打孔器；剪刀；洗瓶；试管；移液管；玻 棒；滤纸。
四、方法与步骤 1.清洗器具：由于电导仪变化非常灵敏，稍有杂质即产生很大误差。因 此所用玻璃器具均需先用热肥皂水洗，再用洗液洗涤，然后用自来水、 无离子水各冲四到五遍（最好是容器口朝下用水冲）。向洗净的试管 中加入去离子水，用电导仪测定电导值，检查试管是否确实冼净。 2.取样及处理：自购样品，设计不同贮藏条件，作为处理。用打孔器及 切片器将样品制成厚薄均匀，大小一致的组织圆片，精确称取2g（或 10个圆片），放入试管内，用去离子水冲洗三次，然后加入20mL去离 子水。对照和处理均设3～4个重复。 将试管放入真空干燥器内，开动真空泵抽气10min，压力控制在 0.04-0.06MPa，以抽出细胞间隙空气。缓慢放入空气，水即渗入细胞 间隙，组织圆片变成透明状，细胞内溶质易于渗出，取出试管，间隔 几分钟振荡一次，在室温下保持30min。 3.测定：将DDS——11A型电导仪电极插入试管，测定外渗液的电导值。 测定之后，将试管放入水浴锅沸水中5min 以杀死组织。待冷至室温后， 再次测定外渗液的电导值。