实验4 食品中常见霉菌形态及微生物菌落 特征观察共20页
霉菌形态观察实验
霉菌的形态观察实验一．实验目的1．掌握配制合成马铃薯培养基（PDA）的一般方法。
2．学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
3．了解并掌握四类霉菌（根霉、毛霉、曲霉、青霉）的基本形态特征。
二．实验原理1．霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3-10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本节课用载玻片培养观察法。
2．载玻片培养法（小培养法）用无菌操作将培养基琼脂薄层小块（约1cm2）置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。
三．实验器材1．菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉（Penicillium sp.），根霉( Rhizopus sp. ) 和毛霉（Mucor sp. ）培养 2-5d 的斜面培养物。
2. 培养基：马铃薯培养基（PDA）3. 仪器或其他用具：超净台，无菌吸管，接种环，酒精灯，平皿，载玻片，盖玻片， U 型玻棒，解剖刀，镊子， 50% 乙醇， 20%的甘油，滤纸片，以及显微镜等。
四．实验步骤载玻片培养观察法（小培养法）1．培养小室的准备及灭菌在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一 U 形玻棒，其上放一块洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖、包扎后于 110 ℃ 灭菌20-30min ，不烘干，备用。
2．琼脂块的制作取已灭菌的马铃薯培养基（PDA）无菌操作注入两个已灭菌平皿中，使之凝固成薄层。
霉菌的培养及形态观察实验报告
山东大学实验报告2017年11月6日________________________________________ _________________________ 科目：微生物学实验题目：霉菌的培养及形态观察姓名：丁志康一、目的要求1.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
2.了解四类常见霉菌的基本形态特征。
二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗的多（约为3-10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍镜即可观察。
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有下列三种：1. 直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石碳酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片镜检。
用此染色制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形；具有防腐作用，不易干燥，能保持较长时间；能防止孢子飞散；染色的蓝色能增强反差。
必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。
2．载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌就在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。
3．玻璃纸培养观察法：玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将霉菌接种于玻璃纸上，经培养，霉菌在玻璃纸上生长形成菌苔。
观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。
这种方法既能保持霉菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。
本次试验使用的是第二种方法，即载玻片培养观察法。
三、器材1、菌种：曲霉，青霉，根霉和毛霉培养2-5d的马铃薯斜面培养物。
2、培养基：土豆琼脂培养基。
3、溶液或试剂：蒸馏水。
4、仪器或其他用具：无菌吸管，平皿，载玻片，盖玻片，U形玻棒，解剖针，解剖刀，镊子，95%乙醇以及显微镜等。
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察（一）放线菌的形态观察1 目的观察放线菌的基本形态特征掌握培养放线菌的几种方法2 原理放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
3 材料3.1 菌种灰色链霉菌(Str. griseus),天蓝色链霉菌(Str. coelicolor),细黄链霉菌（Str.microflavus）。
3.2 培养基高氏1号培养基。
3.3 器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4 流程4.1插片法: 倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图4.2压印法: 倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图4.3埋片法: 倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图5 步骤5.1插片法5.1.1倒平板将高氏1号培养基熔化后，倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内，凝固后使用.5.1.2插片将灭菌的盖玻片以45度角插入培养皿内的培养基中，插入深约为1/2或1/3(图5-1)。
5.1.3接种与培养用接种环将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线，放置28℃培养3～7天。
5.1.4观察培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小心用镊子将盖玻片抽出，轻轻擦去生长较差的一面的菌丝体，将生长良好的菌丝体面向的载玻片，压放于载玻片上。
直接在显微镜下观察。
5.2压印法5.2.1制备放线菌平板同5.1.1。
在凝固的高氏1号培养基平板上用划线分离法得到单一的放线菌菌落。
霉菌放线菌形态观察及微生物菌落观察
观测黑曲霉菌丝 分隔状况和分生 孢子着生状况 （着重辨认分生 孢子梗、足细胞 和分生孢子）：
第10页
观测青霉菌 丝和分生孢 子着生状况：
1.单轮生青霉群；2.对称二轮 生青霉群；3.多轮生青霉群；4. 不对称生青霉群
第11页பைடு நூலகம்
担子菌担孢子旳观测
切片标本旳制作：现场演示
第12页
下次实验准备
每组两个平板，分别是马铃薯培养基（培养 真菌），另一种高氏培养基（培养放线菌）
常见大型真菌：在分类上属于子囊菌纲和担子菌纲，
均为丝状真菌。
第4页
三、实验材料
放线菌和真菌培养物
1. 放线菌培养物：青色链霉菌四天插片培养物。 2. 啤酒酵母24至28h液体培养物。 3. 黑曲霉和根霉4d搭片培养物。 4. 多种真菌示范片。 5. 市售平菇
显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、 酒精灯、镊子等。
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真核微生物
酵母菌：酵母菌细胞一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或
柠檬形。酵母细胞核与细胞质有明显旳分化，个体直 径比细菌大几倍到十几倍。繁殖方式也较复杂，无性 繁殖重要是出芽生殖，有些酵母能形成假菌丝。有性 繁殖是通过接合形成子囊及子囊孢子。
霉菌：凡在营养基质上形成绒毛状、棉絮状或蜘蛛网
形丝状菌体旳真菌，统称为霉菌。霉菌涉及分类学上 许多不同纲或类旳真菌，它们分别属于藻状菌纲、子 囊菌纲、担子菌纲和半知菌类。
实验室环境中微生物旳检查 用棉签取实验室环境条件下旳微生物进 行涂板。
人体表面微生物旳检查 用棉签取人体表面旳微生物进行涂板。
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五、实验成果
记录所观测到旳放线菌基内菌丝和气生 菌丝旳差别
绘图表达黑曲霉、根霉、青霉、酵母和 担孢子旳形态特性
实验四-微生物的菌落形态观察、平板菌落计数及菌种保藏(张理珉)
四、菌种衰退的原因
▪ 基因突变－－主要原因 ▪ 1、有关基因发生负突变导致菌种衰退 ▪ 2、表型延迟造成菌种衰退 ▪ 3、质粒脱落导致菌种衰退 ▪ 连续传代－－加速衰退 ▪ 不适宜的培养和保藏条件－－加速衰退
五、菌种衰退的防止
▪ 控制传代次数 ▪ 创造良好的培养条件 ▪ 利用不易衰退的细胞移种传代 ▪ 采用有效的菌种保藏方法 ▪ 讲究菌种选育技术 ▪ 定期进行分离纯化，测试性能
干燥或较干燥 小而紧密
丝状交织，紧密 细而均匀
干燥 大而疏松或大而致密
丝状交织 粗而分化
菌落透明度
菌落与培养 基结合程度
菌落颜色 参 考 菌落正反面 特 颜色的差别 征
菌落边缘
细胞生长速度
气味
透明或稍透明 不结合 多样 相同
一般看不到细胞 一般很快
一般有臭味
稍透明
不透明
不结合
牢固结合
单调，一般呈乳脂或矿 烛色，少数红色或黑色
实验四 微生物的菌落形态观察、 平板菌落计数及菌种保藏
目的要求
1、观察细菌、放线菌、霉菌的菌落形态 特征，并加以区分。
2、掌握平板菌落计数的原则和方法。 3、掌握三种类群微生物的单菌落挑取，
并接种于斜面，进一步加强无菌操作技 术。 4、了解菌种保藏的原理、重要性及常见 方法。
实验内容
▪ 微生物菌落形态观察及区分（细菌、放线菌、 霉菌、酵母菌——放在后面介绍）
做培养基的时间。主要用于细菌总数检测。 （4）其它：如Simplate即用胶，改良MPN产
品。
螺旋平板法
DWS螺旋平板接种仪
aColyte自动菌落计数仪
螺旋平板原理
接种针往外移
动同时自动将 样品稀释1000 倍。
霉菌的形态观察
实验三、霉菌的形态观察
一、实验目的：
（1）观察霉菌的群落特征
（2）观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态
（3）掌握霉菌的制片方法
二、实验原理：
霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。
在超市的条件下，霉菌可以生长出丝状，绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。
单个菌丝在显微镜下观察呈管状，有的霉菌其菌丝有横隔膜，将菌丝分割为多细胞，成为有隔菌丝。
有点霉菌，其菌丝没有横隔膜，称为无隔菌丝。
菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。
菌落形态较大，质地较疏松，其疏松程度不等，颜色各异。
菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。
在观察时，要注意菌丝直径大小，菌丝体有无横隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。
由于霉菌的菌丝较大，而且孢子容易飞散，如将菌丝体制与水中易变形，故观察时用浸片法将其置于乳酸石碳酸棉溶液中、菌丝和孢子染成蓝色，保持菌丝体圆形，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。
三、实验材料：
（1）菌种：产黄青霉、黄曲霉、黑根霉
（2）时间和溶液：乳酸石炭酸棉溶液
（3）仪器和其他物品：显微镜、接种环、载片、擦镜纸等
四、实验内容：
产黄青霉：顶囊分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黄曲霉：分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜
黑根霉：假根匍匐枝孢子顶囊孢子囊舟孢子囊孢子囊孢子
五、实验结果：
六、讨论
（1）霉菌的无性繁殖和有性繁殖的孢子各有几种？
无性繁殖——无形孢子：游动孢子、包囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子、芽孢子掷孢子
有性繁殖——有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。
霉菌形态及菌落特征的观察
霉菌得培养与形态观察一．实验目得1、掌握霉菌得观察法——小室观察法。
2、了解四种常见霉菌形态、二．实验原理１、霉菌霉菌可产生复什分枝得菌丝体,分基内菌丝与气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体(尤其就是繁殖菌丝)及孢子得形态特征就是识别不同种类霉菌得重要依据。
霉菌菌丝与孢子得宽度通常比细菌与放线菌粗得多(约３~10μｍ ),常就是细菌菌体宽度得几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察、２、观察方法观察霉菌得形态有多种方法,常用得有直接制片观察法、载玻片培养观察法与玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)。
３、载玻片培养观察法(小室培养法)用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片与盖玻片之间得有限空间内沿盖玻片横向生长。
培养一定时间后,将载玻片上得培养物置于显微镜下观察。
这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期得培养物。
三．实验器材2、菌种:曲霉( Ａsｐergiｌluｓ sp、 ) ,青霉,根霉 ( Rhizopus ｓp、 ) , 毛霉( Ｍucoｒsｐ. ),培养 7ｄ得马铃薯琼脂平板培养物3、培养基:马铃薯培养基(简称PＤA)(配方见附表)4、仪器或其她用具:平皿,载玻片,盖玻片,无菌吸管,U 型玻棒,解剖刀,镊子,５０%乙醇,20％甘油,显微镜,接种环,酒精灯等四．实验内容a)配置１５0ml得PDＡ(霉菌)培养基,然后高温灭菌。
b)培养小室得灭菌:在平皿皿底铺一张略小于皿底得圆滤纸片,再放一Ｕ形玻棒,其上放一洁净载玻片与两块盖玻片,盖上皿盖,包扎后于１10℃灭菌20～３0分钟,烘干备用。
c)倒平板:取已灭菌得马铃薯琼脂培养基各6～7ml 注入另两个灭菌平皿中,使之凝固成薄层。
用解剖刀切培养基:在无菌操作得情况下,利用解剖刀将培养基切成d)1cmｘ1ｃｍ得琼脂块,并将其移至上述培养室中得载玻片上(每片放两块 )。
霉菌的形态实验报告
霉菌的形态实验报告霉菌的形态实验报告引言：霉菌是一类微生物，广泛存在于自然界中的土壤、空气、水体以及植物和动物体内。
它们具有多样的形态和结构，对人类和环境有着重要的影响。
本实验旨在通过观察和研究霉菌的形态特征，了解其生长和繁殖方式，进一步认识霉菌的生物学特性。
实验材料与方法：1. 霉菌培养基：将适量的琼脂糖、葡萄糖、酵母粉和琼脂按比例混合，加入适量的蒸馏水，混合均匀后加热煮沸，倒入培养皿中，冷却凝固。
2. 霉菌样品：从自然环境中采集到的霉菌样品，如土壤、腐烂的植物等。
3. 实验器材：培养皿、显微镜、移液管、烧杯等。
实验步骤：1. 准备好霉菌培养基，将其倒入培养皿中，待凝固。
2. 从采集到的霉菌样品中取一小块，用移液管将其转移到培养皿的表面，轻轻涂抹均匀。
3. 将培养皿放入恒温箱中，设置适宜的温度和湿度，培养一段时间。
4. 取出培养皿，用显微镜观察霉菌的形态特征，记录下所见。
实验结果与讨论：在观察过程中，我们发现了霉菌的多样形态。
有些霉菌呈现出菌丝状的结构，由细长的菌丝组成，形成一个复杂的网络。
这种菌丝状的结构有助于霉菌在环境中的生长和营养吸收。
另外，还有一些霉菌呈现出颗粒状或球状的形态，它们通常生长在潮湿的环境中，如水体或腐烂的植物上。
除了形态上的差异，我们还观察到了霉菌的颜色多样性。
有些霉菌呈现出白色或浅黄色，而另一些则呈现出绿色、黑色或红色等。
这是由于霉菌在生长过程中产生的色素的不同。
色素的产生与霉菌的代谢活动密切相关，不同的色素可能具有不同的生物学功能。
此外，我们还注意到霉菌在培养基上的分布情况。
有些霉菌呈现出均匀的分布，形成一个连续的菌落；而另一些则呈现出不规则的分布，形成散落的斑点。
这可能与霉菌在培养过程中的生长速度和竞争关系有关。
通过这次实验，我们对霉菌的形态特征有了更深入的了解。
霉菌的多样形态和色彩给我们展示了微观世界的奇妙之处。
同时，我们也认识到霉菌在自然界中的重要作用，它们可以分解有机物质，促进土壤肥沃化，还可以产生抗生素等有益物质。