2019年高考生物二轮习题:专题十五 专题强化训练 (含解析)

选择土壤―→土壤样品――→选择培养――→划线纯化――→获得菌种

广

1.(2018·东茂名五大联盟学校高三联考)若长期使用某种除草剂(有机物),会对土壤造成严重污染。下图

是从土壤中分离出能降解该除草剂菌株的实验过程。请回答下列问题:

A B C

(1)为了获取能降解该除草剂的菌株,选择的土壤样品应来自______________________。

(2)图中A过程所用的培养基中不能添加其他有机物,理由是_____________________。若图中B过程在一个平板的5个区域内划线,则划线工具需灼烧灭菌________次。

(3)图中A、B、C过程所用培养基中应含有四类营养成分,即______________________。

(4)若要推算该土壤样品中的细菌含量,应采用____________法进行接种。先将1mL土壤溶液稀释100倍,然后随机选取6个灭菌处理的平板,其中4个平板上分别接入0.1mL稀释液,2个平板未接入稀释液,经适当培养后,6个平板上的菌落数分别为52、49、51、48、0和0。

①由未接入稀释液的平板所长菌落情况,可得出的结论是________________________。

②经计算可得出每毫升土壤溶液中的活菌数为________个,该结果往往偏小,原因是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

解析:(1)由于只有被除草剂污染过的土壤才可能含有分解该除草剂的分解菌,所以为了获取能降解该除草

剂的菌株,最好从被该除草剂严重污染的土壤采集土壤样品。(2)为了淘汰不能分解该除草剂的微生物,而仅保

留能分解该除草剂的菌种,则在配制选择培养基时应以该除草剂作为唯一碳源,若添加了其他有机物,则碳源不唯一而达不到筛选目的,所以图中A过程所用的培养基中不能添加其他有机物。由于每次划线之前都要灼烧一次且划线结束后也要灼烧灭菌,所以图中B过程在一个平板的5个区域内划线,则划线工具需灼烧灭菌6次。

(3)普通培养基中都应含有四类营养成分,即水、无机盐、碳源和氮源。(4)若要推算该土壤样品中的细菌含量,

应采用稀释涂布平板法进行接种。实验过程中,为了检查平板培养基灭菌是否合格,常常需要留一个空白培养基平板不接种,观察是否有菌落生成。根据0.1mL稀释100倍的菌液接种培养得到的4个平板的菌落数计算:每毫升土壤溶液中的活菌数=(52+49+51+48)÷4÷0.1×100=5.0×104个。由于稀释涂布平板法得到的菌落常常

存在两个或多个细菌连在一起而最后在平板上只观察到一个菌落的情况,所以估算值比实际值要小。

答案:(1)被该除草剂严重污染的土壤(2)选择培养基中除草剂为唯一碳源,其他有机物也属于碳源6

(3)水、无机盐、碳源和氮源(4)稀释涂布平板①平板(培养基)未被污染②5.0×104当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只有一个菌落

2.(2018·北唐山一中高三模拟)炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落

呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的寄主专一性,通过实验进行确诊。

(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。

(2)细菌鉴定:实验流程图如下图所示。

①对配制的液体培养基要采用________法灭菌。培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是________________________。

②挑选可疑菌落制片后,用________观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。

③接种可疑菌后,35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是________________。图中的对照组试管中应加入______________。两组试管同时培养6小时后,进行比较,若实验组液体培养基的浑浊度________(填“提高”“降低”“不变”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染。此实验依据的原理是

_____________________________________________。

解析:(2)①对配制的液体培养基要采用高压蒸汽灭菌法灭菌。平板培养基配制的基本流程为:计算→称量

→溶化→调节pH→灭菌→倒平板,据此可知:培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是先调节pH、后灭菌。②挑选可疑菌落制片后,用显微镜观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。③接种可疑的细菌后,细菌大量繁殖,导致液体培养液变浑浊。题图显示:该实验的自变量为是否加入噬菌体。实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液,则对照组试管中应加入等量生理盐水,以排除生理盐水对实验结果的影响。实验组中加入的噬菌体能够特异性地侵染炭疽杆菌,导致炭疽杆菌裂解死亡而使其数量下降,进而使溶液变澄清,所以若实验组液体培养基的浑浊度降低,则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。

答案:(2)①高压蒸汽灭菌先调节pH,后灭菌②显微镜

③细菌大量繁殖等量生理盐水降低实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌,使细菌死亡,溶液变澄清

3.(2018·东、湖北部分重点中学模拟)从土壤中分离尿素分解菌和纤维素分解菌,具有下列类似的操作过程:

(1)过程④中的选择培养基是__________(填“固体”或“液体”)培养基,过程⑧中的选择培养基是

__________(填“固体”或“液体”)培养基。过程④的选择措施是______________________;过程⑧的选择措施

是__________________________________。

(2)在过程③样品梯度稀释后,一般只将稀释度为104~106倍的菌液分别接种到3个平板培养基上。接种的

常用方法为__________________法。

(3)过程⑩采用________________________的鉴别方法较简单。若菌落周围出现透明圈但不能100%确定为纤维素分解菌的菌落,原因是___________________________________。

解析:(1)将微生物接种在固体培养基上培养,才能形成菌落,可见,过程④的选择培养基是固体培养基。

进行梯度稀释并接种前要进行过程⑧所示的选择培养,因此过程⑧的选择培养基是液体培养基。④选择培养的目的是筛选尿素分解菌,所以选择措施是以尿素为唯一氮源;⑧选择培养的目的是筛选纤维素分解菌,所以⑧

的选择措施是以纤维素为唯一碳源。(2)常采用稀释涂布平板(或平板划线)法,将稀释度为104~106倍的菌液分

别接种到3个平板培养基上。(3)刚果红可与纤维素形成红色复合物,但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应。当纤维素被纤维素酶水解后,刚果红—纤维素复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。可见,过程⑩采用倒平板时加入刚果红染液的鉴别方法较简单。由于不分解纤维素(或分解刚果红或淀粉)的微生物菌落也可能出现透明圈,所以周围出现透明圈的菌落,不能100%确定为纤维素分解菌。

答案:(1)固体液体以尿素为唯一氮源以纤维素为唯一碳源(2)稀释涂布平板(或平板划线)(3)倒平板时加入刚果红染液不分解纤维素(或分解刚果红或淀粉)的微生物菌落也可能出现透明圈4.(2018·林长白山质量监测)自然界中,除了植物和动物以外的生物统称为微生物。微生物无处不在,大多数对我们人类是有利的,少数有害。我们只有清楚地认识它们,才能合理利用它们。回答下列问题:

(1)传统发酵技术中,人们利用酵母菌酿制果酒、醋酸菌制醋、毛霉制作腐乳以及乳酸菌制作泡菜。

①可以依据是否____________将酵母菌、毛霉与以上其他微生物区分开。

②利用乳酸菌制作泡菜过程中,需对发酵中生成的亚硝酸盐含量进行测定,目前常用的测定方法是

_________________________________________________。

③豆腐发酵时主要利用的是微生物产生的____________________等,通过发酵腐乳中营养物质的种类________(填“减少”或“增多”),且更易于消化和吸收。

(2)土壤有“微生物的天然培养基”之称。

①现从红色玉米中筛选出一种生产胡萝卜素的红酵母菌株,纯化并计数的接种方法为________。要大量繁殖该菌株应选用________(填“液体”或“固体”)培养基。

②若想在此菌株基础上获得多种其他未发现的新性状菌株以供实验需求,应该经过________处理,该育种方式的不足是具有一定的盲目性;需要大量处理供试材料。

解析:(1)①酵母菌、毛霉属于真核生物,醋酸菌、乳酸菌属于原核生物,因此可以依据是否有核膜包被的成形的细胞核将酵母菌、毛霉与以上其他微生物区分开。②利用乳酸菌制作泡菜过程中,亚硝酸盐含量的检测常用比色法,即在盐酸酸化的条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐形成玫瑰红色染料。③腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵,其中起主要作用的是毛霉,毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸,脂肪酶能将脂肪转化成甘油和脂肪酸,因此与豆腐相比腐乳中营养物质的种类增加,且容易吸收。(2)①接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法,其中稀释涂布平板法可用于对微生物进行计数;要大量繁殖该菌株应选用液体培养基进行培养。②诱变育种的原理是基因突变,其具有不定向性,可以在此菌株基础上获得多种其他未发现的新性状菌株以供实验需求;但具有一定的盲目性,需要大量处理供试材料。

答案:(1)①有以核膜为界限(包围的)细胞核②比色法

③蛋白酶、脂肪酶增多(2)①稀释涂布平板法液体

②诱变

5.下图1所示为制作泡菜的流程,请回答有关问题:

(1)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是________。为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的作用是____________。发酵坛密封的主要目的是________________________。

(2)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有________、________和________等。

(3)某研究小组的同学为了探究泡菜在发酵过程中不同食盐浓度和发酵时间对亚硝酸盐含量变化的影响,设

计了相关实验进行研究,图2为实验结果。从图2可知,比较适合制作泡菜的食盐浓度为5%,理由是_______________________________。

解析:(1)泡菜制作过程中加入少量陈泡菜液的作用是增加乳酸菌数量。因为乳酸菌可以进行无氧呼吸产生

乳酸,所以可以利用乳酸菌进行发酵制作泡菜。(2)制作泡菜过程中影响亚硝酸盐含量的因素有腌制的时间、温

度和食盐用量等。(3)从题图中看出,5%的食盐浓度适合制作泡菜,因为5%食盐浓度时泡菜中亚硝酸盐含量变化最快,说明乳酸菌代谢最旺盛,发酵11d后亚硝酸盐含量降到最低。

答案:(1)杀灭杂菌增加乳酸菌数量为乳酸菌发酵提供无氧环境(2)温度腌制时间食盐用量

(3)食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化最快,说明乳酸菌代谢最旺盛,到发酵11d后亚硝酸盐含量降到最低值

6.(2018·东烟台高三模拟)胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的酵母菌R

细胞中提取获得,流程如下:

(1)培养酵母菌的培养基中一般含有水、碳源、氮源、无机盐等营养成分,不同的是制作固体培养基时加入

了__________。要获得大量的酵母菌R用于胡萝卜素的提取,应选择______培养基。

(2)筛选酵母菌R时,可采用稀释涂布平板法接种,涂布前的操作是___________。在固体培养基中理想的菌

落是由单个活细胞组成,原因是__________________________________。

(3)图中A过程表示________,该过程宜采用__________方式加热。纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素,鉴定过程中需用胡萝卜素标准样品作为____________。

(4)经一系列培养环境的优化,酵母菌R产胡萝卜素的量有所提高。在此基础上,要获得产量更高的菌株,可采取的操作是____________________。

解析:(1)制作固体培养基时,除了加入了水、碳源、氮源、无机盐等营养成分外,还需加入凝固剂琼脂。

液体培养基可用于工业生产,要获得大量的酵母菌 R 用于胡萝卜素的提取,应选择液体培养基。(2)采用稀释涂

布平板法接种微生物时,涂布前的操作是将菌液进行一系列的梯度稀释。由于菌类 DNA 、细胞周期及理化性质

都一样,便于科学研究,所以在固体培养基中理想的菌落是由单个活细胞组成。(3)图中 A 过程表示萃取。因萃

取剂为有机溶剂,易燃易爆,所以胡萝卜素的萃取过程应该避免明火加热,而应采用水浴加热。采用纸层析法

鉴定所提取的胡萝卜素的过程中,需用胡萝卜素标准样品作为(实验)对照。(4)要获得产量更高的酵母菌 R 菌株,

可采取诱变育种的方法,即诱导菌株突变再进行筛选。

答案:(1)琼脂

液体 (2)将菌液进行一系列的梯度稀释

菌类 DNA 、细胞周期及理化性质都一样,便于科 学研究 (3)萃取

水浴 (实验)对照 (4)诱导菌株突变再进行筛选

7.(2018· 南丘北二中月考)柠檬油是植物芳香油中的一种,它是一种广谱性的杀虫剂,它可杀死蚊子、苍 蝇、蟑螂和臭虫等传染疾病的害虫,以及危害粮食、蔬菜的常见害虫,包括幼虫、蛹等,被称为一种绿色杀虫

剂。提取的必经步骤如图所示,请根据实验流程图回答下列问题:

(1)柠檬果皮精油的提取适宜采用________法,此种方法是通过________将液相柠檬油从固液两相混合物中

分离出来。

(2)A 是________,目的是___________________________________________。

(3)B 过 程 一 般 加 入 相 当 于 柠 檬 果 皮 质 量 0.25% 的 小 苏 打 和 5% 的 硫 酸 钠 , 其 目 的 是

________________________________________________________________________。

(4)C 过程为________,目的是___________________________________________。

(5)采 用 柠 檬 油 作 为 杀 虫 剂 , 可 以 解 决 其 他 杀 虫 剂 给 人 类 带 来 的 隐 患 , 其 突 出 的 优 点 是

________________________________________________________________________。

解析:(1)根据图示分析可知柠檬果皮中精油的提取适宜采用压榨法,该方法是利用机械压力将液相柠檬油

从固液两相混合物中分离出来。(3)B 过程一般加入相当于柠檬果皮质量 0.25% 的小苏打和 5% 的硫酸钠,使柠檬

精油易与水分离。(4)C 过程为过滤,目的是除去固体物和残渣。(5)因柠檬油为天然提取的物质,用其来作为杀

虫剂属于生物防治法,对人、动物和植物均无毒性,也减少了对环境的污染。

答案:(1)压榨

机械压力 (2)石灰水 破坏细胞结构,分解果胶,防止压榨时果皮滑脱,提高出油率 (3)

使精油易与水分离 (4)过滤

除去固体物和残渣 (5)对人、动物、植物均无毒性;减少对环境的污染

8.(2018· 建三明高三质检)经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株,菌体自身不能合成天冬氨酸,必须从

外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程

(注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题:

或,

(1)过程①接种的方法是____________。待测培养皿中的培养基是________(填“基本”或“完全”)培养基。

(2)过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落,先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到

________(填“基本”或“完全”)培养基上,原因是__________________________。

(3)完成②过程的转印并在28℃的培养箱中培养2天后,两个平板上出现的菌落有的相同,有的不同。完全培养基上出现的菌落A和菌落B中,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是菌落________(填“A”“B”)原因是

_______________________________________________。

(4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,科研人员又制备了甲、乙两个平板,这两个

平板中营养成分的差异是______________________。将待鉴定菌种接种到两个平板中,置于适宜条件下培养一段时间后,若观察到两个平板中菌落的生长情况是____________________________________,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

解析:(1)分析图解可知,过程①导致菌落均匀分布,因此该方法为稀释涂布平板法;两种培养基分别培养

是为了筛选出氨基酸缺陷型菌株,因此与基本培养基相比,待测培养皿中特有的成分有氨基酸,类似于完全培养基。(2)过程②应将印在丝绒布上的菌落先转印至基本培养基上,原因是防止基本培养基中混入氨基酸。(3)比

较基本培养基和完全培养基中的菌落可知,B菌落在基本培养基上能生长繁殖,说明它能合成天冬氨酸,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株。(4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,对照实验的两个平板

中营养成分的差异是是否含有天冬氨酸,接种后若两个平板中菌落的生长情况是含有天冬氨酸的平板上有菌落生长,另一个平板上没有菌落生长,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

答案:(1)稀释涂布平板法完全(2)基本防止基本培养基混入氨基酸(3)B B菌落在基本培养基中能生长繁殖,说明它能合成天冬氨酸(4)是否含有天冬氨酸含有天冬氨酸的平板上有菌落生长,另一个平板上没有菌落生长

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