动物组织各种固定液及优缺点
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例是根据所需固定的组织的大小和类型来确定的。
一般而言，常用的固定液和组织的比例是10:1，即10部分的固定液与1部分的组织混合。
然而，不同的组织类型可能需要不同的比例。
以下是一些常用的组织固定液比例：
1. 大体组织：对于较大的器官或动物组织，通常使用10%缓冲福尔马林溶液（10% buffered formalin）固定。
这意味着将10部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的组织混合。
2. 细胞和细胞簇：对于大部分细胞和细胞簇的固定，一般使用4%缓冲福尔马林溶液。
这意味着将4部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的细胞或细胞簇混合。
3. 骨骼组织：对于骨骼组织的固定，常用的固定液是10%缓冲福尔马林溶液或中性缓冲福尔马林溶液。
需要较长的固定时间。
除了以上常用的固定液比例外，还有其他特殊组织和细胞类型可能需要不同的固定液比例。
此外，固定时间和固定温度也会影响固定效果，需要根据具体实验要求进行调整。
因此，最好根据实验需要和参考相关文献确定合适的固定液和组织比例。
(七)固定液和保存液
(七)固定液和保存液）固定液和保存液定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等，能保存组织内细胞的形态、结构及其组成，尽量使它近于生活状液一般有防腐和保存的作用，分为单纯固定液和混合固定液。
单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味、重铬酸钾、升汞等，前两种固定液是中学生物实验室常用的。
单纯固定液的优点是简便，缺点是有一定的局限性到理想的固定要求。
混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成，使各自的优缺点相互补充，成为较完美。
这种固定液的制备虽比较麻烦，但是效果比较好。
常用的混合固定液是醋酸-酒精混合液、福尔马林-醋酸-酒精液固定液等。
的保存液大致跟固定液相同，主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。
有时按特需要，再保存液中增加某些药品（如原生标本的保存液）。
尔马林马林在固定组织标本时杀菌能力强，所以防腐性强，渗透力大，固定得快。
永福尔马林固定精细的解剖标本时，要酒精、石炭酸等混合使用。
液常用的浓度是5～10%（根据材料的大小、性质和数量而定）。
液常用的浓度是5～10%。
用福尔马林作保存液，效果好且价格低廉。
制福尔马林溶液（固定液或保存液）时，应将37～40%的甲醛作为整个溶质来配。
例如配制5%福尔马林是取市售37～溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。
实际上甲醛含量只有1.9～2%，这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
事项：福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸，可适量的加入碳酸钙（）或碳酸镁（）等碱性物质进行中和。
福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低，并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛，使浸液变浊，影所以，根据一定保存期的情况，可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液，以防标本变坏。
其中如有白色沉淀物，使它溶解。
市售的福尔马林液常带有酸性，能腐蚀石灰质，因此，最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。
精（乙醇）也是常用的固定液，它有强烈的杀菌作用，对组织材料的渗透力较大，固定的快。
动物组织标本制作技术
动物组织标本制作技术第一章：取材及固定一、动物致死法1、麻醉法第二章可将浸有乙醚或氯仿的棉球连同小动物一起密封于钟罩或有盖玻璃瓶内进行麻醉；也可用4%戊巴比妥作静脉注射，剂量按动物体重1ml/kg；或用20%氨基甲酸乙脂作腹腔注射，剂量一般按动物体重5ml/kg。
2、空气栓塞法如家兔可用50ml注射器将空气由耳静脉推入，使动物很快死亡。
3、击头法如大、小鼠，可用重物击头后部或将其头后部猛撞桌沿，最好一击而死。
4、断头法青蛙、小鼠等小动物，可用剪刀剪去其头部，较大动物如兔子等，可用斧头迅速砍头致死。
5、股动脉放血法动物经吸入乙醚或氯仿稍麻醉后，立即切开股动脉放血。
注意：上述各法，应根据制片需要选用，如空气栓塞法不宜用作血管注射标本的制作；乙醚麻醉对丘脑下神经部分泌物染色标本不利；股动脉放血法有利于肠系膜铺片的制作。
二、取材注意事项1、材料新鲜最好是动物心脏还在跳动时取材，立即投入固定液内，脏器的上皮组织最易变质，应争取在死后半小时内处理完毕。
2、组织块力求小而薄组织块的厚度以不超过5毫米为宜，较理想的厚度为2毫米左右，主要目的是使固定液迅速而均匀的渗入组织块内部。
3、勿使组织块受挤压切取组织块时刀剪要锋利，不要来回挫动，夹取组织时切勿猛压，取材时组织块可稍大，以便固定后修块。
4、尽量保持组织的原有形态新鲜组织经固定后，或多或少产生收缩现象，为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
5、要熟悉取材部位要能准确的按解剖部位取材，如胰腺，一般取胰岛较多的胰腺尾部；肺应取有细支气管及带有软骨片的小支气管部。
6、动物品种的选择如观察肥大细胞，以大、小鼠皮下组织及肠系膜、大网膜铺片为佳，欲观察运动终板，可用小鼠的肋间肌等。
7、选好组织块的切面熟悉一些器官组织成分安排，然后决定其切面的走向；如一长管状器官以横切面较好。
8、保持材料的清洁组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用生理盐水冲洗，然后再入固定液，但要注意防止组织损伤。
动物组织标本的固定
各种实验动物组织标本的固定、脱水、透明、浸蜡等问题的探讨病理科研工作的需要，不同种类实验动物的组织切片应用日益广泛。
和临床检验标本不同，组织标本多为柔软细小，含水分较多而纤维组织较少。
组织固定、脱水、透明、浸蜡方面的程序应有所不同以制备出高质量的动物病理组织切片。
如果不出现变异，最常见的问题是组织块变得很脆，易碎，切不成片，染片时易脱片。
国内外一些病理技术专著均无详细的数据可查（1~5）。
根据病理学科的发展趋向，有必要将其作为专题进行阐述，有利于实验病理工作的发展。
一固定10%的中性福马林最为常用，经济、简易。
组织块大小在1×1×0.15cm左右。
固定12~24小时。
固定时间过长，即使是多血脏器如肝、脾，也不会有福马林的色素产生，某些抗原性稳定的抗原物质如乙型肝炎表面抗原和核心抗原等，以10%中性福马林固定效果甚好，无需特殊处理即可获得良好的免疫染色。
Carnoy氏固定液对糖蛋白成分的抗原效果理想，此液适用于脱氧核糖核酸、核糖核酸的固定，只需要固定数小时，切勿超过24小时，否则将要溶去核糖核酸及脱氧核糖核酸，影响效果。
二脱水标本固定水洗后，组织内仍含有大量水分，这些水分除尽才有利于透明、浸蜡。
常用实验动物组织脱水的是酒精。
采用逐级提高酒精浓度以除去组织内的水分，脱水一般在室温下进行。
为了减少组织收缩，采用50%酒精或70%酒精开始→80%酒精→95%酒精Ⅰ→95%酒精Ⅱ→100%酒精Ⅰ→100%酒精Ⅱ。
所用的酒精的浓度尽量精确。
组织块在95%的酒精Ⅰ中逗留2~4小时。
我们常把组织在95%酒精Ⅱ中过夜，但在100%酒精Ⅰ及Ⅱ总时间不超过4小时。
这样处理组织都能将水分脱净，且不会出现硬化现象。
如脱水不尽即转入二甲苯，则影响二甲苯的浸入，蜡液则更不能渗入组织。
这样做出来的组织蜡块，切片时极难切出，即使勉强切出，不仅切片质量很差，而且易在染片时脱片。
此类组织蜡块因其中还有一定量的水分，石蜡切片后，蜡块的切面一经与空气接触，即干燥而呈凹形。
固定液总结
固定液总结什么是固定液？固定液是一种化学试剂，主要用于固定组织或细胞以保持其形态和结构。
固定液可以阻止生物材料的腐败和变性，防止其在处理和染色过程中失去结构和功能。
固定液在组织学、细胞学和病理学等领域中广泛应用，有助于观察和研究生物组织和细胞的形态、结构和功能。
常见的固定液福尔马林（Formalin）福尔马林是一种常见的固定液，广泛用于组织学研究和病理学诊断中。
它是一种含有37%甲醛的溶液，能够固定组织并保持其形态和结构。
福尔马林固定的组织可用于组织切片制备、免疫组化染色等进一步的实验。
福尔马林固定组织的优点是固定效果好、保存时间长，能够保存大部分的组织结构和抗原表达情况。
然而，福尔马林固定液会对细胞核和某些蛋白质产生交联作用，可能导致染色效果差，同时还有潜在的致癌风险，因此在使用福尔马林固定液时需要注意安全操作和废液处理。
乙醛（Glutaraldehyde）乙醛是一种常用的电子显微镜固定液，主要用于固定细胞和亚细胞结构以进行电子显微镜观察。
与福尔马林不同，乙醛固定液能够更好地保持细胞和细胞器的形态和结构，有利于观察细胞内部的细节。
乙醛固定液的使用需要注意浓度和固定时间的控制，过高的浓度和过长的固定时间可能会导致组织和细胞的变性和损伤。
此外，乙醛固定液对某些酶和蛋白质具有灭活作用，因此在使用乙醛固定液时需要根据实验需要选择合适的条件。
缓冲盐水（Buffered Saline）缓冲盐水是一种用于固定组织和细胞的温和固定液。
它通常由含有适当浓度的盐水和缓冲剂混合而成，能够保持组织和细胞的形态和结构，并且对某些抗原和酶具有较好的保存效果。
缓冲盐水固定液的优点是温和、安全、易于制备和使用，适用于一些对固定条件要求较宽松的实验。
然而，由于其固定效果不如福尔马林和乙醛固定液，保存时间较短，因此在实验设计时需要根据实验目的和需求来选择合适的固定液。
固定液的使用注意事项使用固定液需要注意以下几个方面：1.安全操作：固定液常常含有有害化学物质，使用时需要佩戴防护手套、口罩等个人防护装备，避免直接接触和吸入液体或气体，注意实验室通风。
固定液
1．经过固定的组织可保持在10%福尔马林或70%乙醇中。
2．染色前脱掉组织中的苦味酸①自来水冲洗②50%乙醇③或70%乙醇饱和碳酸锂
乙醇BOUIN’S液（DUBOSCQ-BRAZIL FLUID）
用途：用于固定肾活检，组织学制备固定液。
试剂：
乙醇Bouin’s贮存液:
80%乙醇750.0ml
甲醛300.0ml
步骤：
1．活检标本要立即放入Hollande’s固定剂中，标本容器上注明时间。
2．标本完成固定后保持在70%乙醇中。
3．不能让Hollande’s液固定的标本与磷酸缓冲福尔马林接触，否则会出现蓝色沉淀。
ORTH’S液
用途：用于证实肾上腺胞浆中嗜络微粒，这种证明可能对嗜络细胞瘤的诊断很重要。不是一种好的多用途的固定剂。
苦味酸5.0g
充分混合，液体稳定性2年，标明配制日期。
工作液：
贮存液70.0ml14.0ml
醋酸5.0ml10.0ml
使用前加醋酸。
固定时间：1～4小时。
步骤：
1．把新鲜组织标本放进乙醇Bouin’s工作液中。
2．充分固定后把组织移到70%的乙醇中。
HOLLANDE’S固定液
用途：作为胃肠和前列腺活检基本固定剂，这种固定剂让H.E染色更清晰，它“软化”组织避免切片脆裂。苦味酸会溶解掉红细胞。
ZENKER’S液
用途：Zenker’s液是一种核固定剂。该液是细胞学及病理学常用的固定剂，对细胞核固定最好，最适合于造血和网状内皮组织的固定。也常作为三色染色的组织固定剂，在三色染色中还作为媒染剂使用。但对于含血量较多的组织标本尽量不要选Zenker’s液固定。
试剂：
Zenker’s贮备液：
一些固定液及方法介绍
一些固定液及方法介绍前，免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂，其中以甲醛类和戊二醛最为常用。
在此，简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂，以供读者选用。
1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）试剂：多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500～800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）使粉末完全溶解，通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮，最后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。
该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续浸泡固定2～24h。
另外，该固定剂较为温和，适于组织标本的较长期保存。
2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂：A液：多聚甲醛40g蒸馏水400mlB液：Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水300mlC液：NaOH 3.86g蒸馏水200m配制方法：A液最好在500ml的三角烧瓶中配制（方法同前），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。
注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，以1N NaOH或1N HCl 将pH调至7.2～7.4，最后，补充蒸馏水至1000ml充分混合，4℃冰箱保存备用。
该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究，用于免疫电镜时，最好加入少量新鲜配制的戊二醛，使其终浓度为0.5%～1%。
该固定剂较温和，适于组织的长期保存。
组织标本于该固定液中，4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。
3．Bouin's液及改良Bouin's液试剂：饱和苦味酸40%甲醛250ml冰醋酸50ml配制方法：先将饱苦味酸过滤，加入甲醛（有沉淀者禁用），最后加入冰醋酸，混合后存于4℃冰箱中备用。
常用固定液的性质、用途
常用固定液的性质、用途和配置1．单一固定液的性质和用途（1）乙醇（C2H5OH）（ethylalcohol）：又名酒精，可沉淀白蛋白、球蛋白、核蛋白，后者易溶于水，所以经酒精固定的标本对细胞核染色不良。
酒精可溶解脂肪、类脂体，所以不能用酒精固定脂肪。
酒精可沉淀肝糖，但仍可溶解于水，因此肝糖经酒精固定后不能在低于70％酒精中保存。
单独固定使用酒精的浓度应为95—100％。
无水酒精渗透力较差，并且能使组织收缩，在与醋酸、氯仿混合使用时，可增强它们的穿透力。
酒精除固定作用外，还具有硬化和脱水的作用，固定后的组织可保存于70％酒精中，所以酒精在制片过程中用途很大。
无水乙醇容易挥发，又容易吸收空气中的水分，所以瓶盖必须塞紧，为了吸去其中水分，最好在无水乙醇瓶内放入少量无水硫酸铜粉末。
酒精是一种还原剂，不能与重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合使用。
（2）甲醛（HCHO）（formeldehyde）：是一种气体，溶于水成为甲醛水溶液或称福尔马林，一般使用浓度为10％福尔马林（formalin）液，其配法是取市售的甲醛液10ml 与90ml 蒸馏水混合即可，实际上其含量只有4％甲醛。
这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
甲醛不能沉淀白蛋白及核蛋白，但能与蛋白质化合。
它是一种应用广泛，使用简单的固定液，具有穿透力强、固定均匀、组织收缩小、硬度适当，适用于一般器官组织的固定及保存。
尤其对脂肪、神经组织固定效果较好。
更适于病理组织的制片及大体积标本的保存，一般组织需固定24 小时以上，固定后的组织可移入50％酒精中逐步脱水。
甲醛是一种强还原剂，不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合，因极易被氧化为甲酸。
在配混合固定液时，如海利氏液等需临用前再加入，24 小时后失效。
甲醛由于长期贮存，特别是低温气候，容易产生多聚甲醛，即溶液中的白色沉淀，在高温下又成为甲醛。
不纯的甲醛易产生甲酸，使溶液变为酸性，影响核的染色。
所以在备用的福尔马林中加入小量的醋酸钙、碳酸镁或大理石作为中和剂。
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动物组织各种固定液及优缺点
编
号
类别名字配方优缺点或备注
甲醛：从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.
缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,临床活检不用.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。
1 10%缓冲福尔马林固
定液甲醛100ml
蒸馏水900ml
NaH2PO44g
Na2HPO4 6.5g
该固定液是当今流行的固定液,因它对组织固
定较好,损伤较少,因对其后的各方面研究都较
好,尤其是对免疫组化的染色.
2 10%福尔马林固定液甲醛100 ml
自来水900ml 这是一种最简单的固定液，适合于边远地区携带的固定液，但由于它的单一性，因此，只要有条件的单位都不要求使用这种固定液。
3 10%福尔马林盐固定
液甲醛100ml
自来水900ml
Nacl 9克
先将Nacl溶于水，再加入甲醛。
这也是一种
较为简单的固定液，但由于加入Nacl，它是
一种重金属盐物质，加入了它可促进和改善染
色，增加染色的强度
4 Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液
75ml
甲醛 2 ml
冰醋酸 5 ml 该固定液中的冰醋酸，对胶原纤维等组织有膨胀作用。
而甲醛对组织有收缩作用。
两种试剂的混合使用，用以抵消彼此间的副作用。
使组织固定达到优良的固定水平
5 醛糖钙固定液甲醛100ml
蔗糖300ml
乙酸钙20g
蒸镏水90ml 先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水，后加入甲醛。
该固定液对于做酶的组织化学的研究效果较好，组织固定后，做冰冻切片，再给予显示。
酒精：优点：1、可保存尿酸结晶和糖原等物质。
2、能在任何比例的情况下与水混合，如组织的脱水，切片染色前后都离不开酒精，通常都用95%的工业酒精来配成60%、70%、80%、90%等不同的浓度来使用。
3、可溶解苯类物质为染色步骤中的桥梁试剂。
常规活检等切片上的石蜡必须除去，才能进行染色，能除去石蜡的物质有苯及汽油等，因此称它为桥梁试剂。
4、能除去切片上的水份，使切片无水化。
切片经染色后，到无水酒精中已完全无水，这样处理对于切片的保存是有好处的，否则，切片将会褪色。
5，可与其它试剂配成多种的混合固定液，加快固定，它的缺点是：1、可溶解脂类物质，凡要证明组织是否含有脂类和类脂物时，切不能用含有酒精的固定液去固定组织，也不能用石蜡切片。
2、对组织收缩较大，不宜作单纯固定液。
3、渗透力不强。
当用酒精固定组织时，组织表面很快就被固定，并形成了一层蛋白膜，这层膜可阻挡固定液向里渗透，造成了中间组织固定不佳的现象。
4、可沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，凡经酒精固定的组织，核的染色都不好。
5、可脱去切片上已着染的各种颜色，切片经染色后，一是必须洗去多余的染液，二是必须脱去切片上的水。
在用酒精洗切片时，必须仔细地掌握显微镜下观察，还要掌握酒精的浓度，低浓底的酒精脱色力强，稍不注意，便可脱去切片上大部分的颜色。
切片脱水时，要较快地通过低浓度的酒精，以免使已着染的颜色被脱去。
6 Carnoy氏固定液氯仿300ml
冰醋酸100 ml
95%酒精600 ml 该固定液固定组织快速，在固定的同时兼有脱水的作用。
溶液中的氯仿和酒精，对组织的收缩较厉害，但应用了冰醋酸，这种现象便被中和去
7 AF固定液甲醛100 ml
冰醋酸50 ml
95%酒精850 ml 这种固定液的作用与上液有相似之处，但要注意的是，凡使用含有醋酸的固定液，其脱水用具不能使用铜制的脱水盒，因冰醋酸跟铜离子起反应，生成醋酸铜，这种物质可沉淀于组织间，可破坏组织中的抗原，造成免疫组化检测的失败。
应用时应多加注意
冰醋酸:优点有：1、能迅速固定染色质，助于染色，用醋酸配成的固定液，其作用快，固定效果均匀，对于染色质的固定快，因此，用其作固定的切片染色好，在配其它染色液如明矾苏木素和伊红时，常常需加入一定量的醋酸，以促进染色。
2、能使组织尤其是富含纤维的组织膨胀。
各种固定液对组织都有收缩的作用，尤其是对富含纤维的组织。
而它不但不会使组织收缩，而且还会令许多组织发生膨胀的作用。
不足之处：1、不能作为单一的固定剂。
2、不能凝固蛋白质，不能保存白细胞颗粒，红细胞及含血铁黄素等。
8 Zenker氏固定液：重铬酸钾25G
升汞50G
蒸馏水1000ml
冰醋酸50ml 先将重铬酸钾和升汞溶于水中，尢其是重铬酸钾，应用热水或加温的方法将其溶解，然后过滤贮存于带盖的玻璃瓶中以防失效。
临用时，取贮存液950ml，加入50ml的冰醋酸，即可使用。
应用该固定液固定的组织，一般不要超过24h，取出组织，流水冲冼12小时以上，然后保存于75%-80%的酒精中，在切片染色前，必须用碘除去汞盐的沉着。
应用该固定液的组织，细胞核及细胞浆染色十分清晰，特别是要显示骨骼肌的横纹时，应用本液可获得满意的结果，但由于其含有醋酸，故不能用于保存细胞颗粒，红细胞及含铁血黄素。
9 Flemming氏液2%酸水溶液200ml
1%铬酸水溶液
700ml
冰醋酸100ml 该液中的奥酸对脂肪组织既有固定作用，又有染色作用，对有髓神经纤维也有固定兼染髓鞘的作用。
如果做HE的染色，该液不适合。
应用该液固定的组织，切片不能太大过厚，一般1-2毫米厚固定时间1-3天，后经水洗，保存于80%酒精中，除上述两液体外，还有Bouin 氏液和Carnoy氏液等
重铬酸钾: 它的优点是：1、能固定脂肪及类脂物。
2、为髓鞘及嗜铬细胞优良的媒染剂。
3、可配成多种的混合固定液足之处有：1、不能沉淀蛋白质，它必须和醋酸配成混合固定液，方能发挥作用，产生铬酸，沉淀蛋白质。
2、具有毒性及产生高温。
在配制液体时，如清洗剂，当加入硫酸时，可产生很高的温度，并挥发出刺鼻的气体，应特别注意。
3、它不能长期固定组织，经它固定的组织应充分水洗后保存于80%酒精中。
10 Helly氏液重铬酸钾25g
升汞50g
蒸馏水1000ml
甲醛50ml 临用时加入甲醛，因其加入后于24小时后可发生沉淀而失效，因用时应特别注意。
该液是白细胞颗粒的优良固定剂，因此凡为白细胞或造血器官如骨髓，脾脏及患先天性梅毒之肝脏等，可用此液固定。
此液原配方要求加入硫酸钠，但据我们经验认为，硫酸钠在液中对组织无任何作用，故省去
11 Orth氏液重铬酸钾20g
蒸馏水1000ml
甲醛100ml 该液固定组织较缓慢，不适合于作临床的活检
固定液，4毫米厚的组织固定时间需36-72小时，该液对于染色质的固定好，显示清晰，但可溶解部分红细胞和含铁血黄素。
重铬酸钾的不足之处有：
1、不能沉淀蛋白质，它必须和醋酸配成混合固定液，方能发挥作用，产生铬酸，沉淀蛋白质。
2、具有毒性及产生高温。
在配制液体时，如清洗剂，当加入硫酸时，可产生很高的温度，
并挥发出刺鼻的气体，应特别注意。
3、它不能长期固定组织，经它固定的组织应
充分水洗后保存于80%酒精中。