药物半数有效量(ED50)测定
实验报告 戊巴比妥钠半数有效量测定
实验二戊巴比妥钠半数有效量测定Experiment 2 Determination of Median Effective Dose (ED50)of Sodium Pentobarbital in Mice[实验操作过程]1．你所在实验室，本次实验的分组数为 5 ，r值为 1.316 。
2．预实验中，D m 代表确定引起100%阳性反应的剂量，D n 代表0%阳性反应的剂量，3．实验中，各剂量组的剂量值要成比例，且公比值要求在 1.2-1.5 之间，以确保其线性相关性，一般分成 4-8 个剂量组较为合适。
4. 本次实验所采用的计算方法是改良寇氏法。
5．较理想的实验结果最小剂量组产生阳性反应率小于 30% ，最大剂量组产生阳性反应率大于 70% 。
6. 戊巴比妥钠溶液的浓度为1% ，你所在小组所用的稀释浓度为2.6mg/ml ，剂量为 26mg/kg 。
7. 观察指标为给药15min内翻正反射消失的动物数，应持续 1 分钟以上。
8. 小白鼠注射的容量为 0.1 ml/10g。
你所在组的动物数为 10 只。
9. 戊巴比妥钠的药理作用包括镇静、催眠、抗惊厥、麻醉（请写出四种以上作用）。
[实验操作过程]1.请描述你们小组探索剂量范围的过程：(1)参考剂量（Dm：60mg/kg； Dn：20mg/kg ）(2)取小鼠12只，平均分成3组，腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠（0.1ml/10g）(3)观察给药15min内各组翻正反射消失的动物数(4)确定引起100% （Dm）、0% （Dn）阳性反应的剂量2.药物稀释过程Tab .1 Data Sheet for Drug DilutionGroup n Dose(mg/kg) Concentration（%）V olume (ml)1 10 20 0.20 52 10 26 0.26 53 10 35 0.35 54 10 46 0.46 55 10 60 0.60 53.请描述所在小组的实验操作过程（1）每只小鼠称重、标号（2）按0.1ml/10g给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥稀释液。
中山大学药理学实验——戊巴比妥钠对小鼠催眠作用有效量ed50测定
图11-4-3剂量对数与有效百分率分布 图11-4-4正态曲线下的面积与标准正 态离差及
概率单位的关系
【实验】
【实验对象】 小鼠。 【实验器材和药品】 注射器（1ml）、针头（4号）、小烧杯、小
鼠罩、托盘、计算器。 戊巴比妥钠、苦味酸（标记动物号用）。
【实验步骤】
1. 实验准备及预试
动物: 一般用健康活泼的小鼠。体重 18～20克，雌雄各 半（雌鼠应无孕）。有时用大鼠、豚鼠等。从外地购进 的动物通常需在本实验室饲养一周。
（3）分组及给药
取小鼠50只（18～22克），每组雌 雄各半，按体重随机分成五组。每组 分别按设计的浓度、容积腹腔注射药 物。用原始记录本记录给药时间。 ED50 测定时是否要设对照组，应视 情况而定。
（4）观察与记录
记录在观察时间内动物的表现或动物中毒症状 、死亡时间。整个实验应记录的事项：日期 、药物名称、批号及制药单位、配药的溶剂 、药液浓度、给药途径、给药容积及给药剂 量、动物名称、性别及体重、实验时室温、 给药时间、动物的表现或中毒症状及出现的 时间、死亡时间、各组有效（或死亡）率、 计算ED50或LD50 。
附注：
腹腔注射戊巴比妥钠对小鼠的LD50测定 及计算机软件计算实例简介
Bliss法电子计算机软件
Bliss法电子计算机软件运算结果： 请应用软件计算！！！
Feiller精确校正
经过三轮加权回归，符合要求的精度（0.001），由于 回归显著性系数g > 0.01，应采用Feiller精确校正结 果。
日期药物名称批号及制药单位配药的溶剂药液浓度给药途径给药容积及给药剂量动物名称性别及体重实验时室温给药时间动物的表现或中毒症状及出现的时间死亡时间各组有效或死亡率计算ed50或ld50
药理实验课件药物半数有效量(ED50)的测定课件
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方法和步骤
小鼠随机分成 5 组，每组10只、雌雄各半
戊巴比妥钠 (腹腔注射, 0.2ml/10g) 20、25、31、39、49 (mg/kg) 以翻正反射消失 (15S) 为入睡指标，记录给 药15分钟后各组睡眠鼠数。
Bliss法计算：ED50、ED5、ED95
#
半数有效量（50％ effective dose，ED50） 半数致死量（50％ lethal dose，LD50 ） 治疗指数（therapeutic index，TI）= LD50/ED50 安全系数（safety factor，SF）＝ LD5/ED95 可靠安全系数（certain safety factor，CSF）＝ LD1/ED99
灌胃
2只 生理盐水（0.1ml/10g，ig） 15min后 2只 阿司匹林（0.1ml/10g，ig）
0.6% 醋酸溶液 （ 0.1ml/10g，ip）
观察15min内各组小鼠 出现的扭体次数
腹腔注射
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组别 动物数（n） 发生反应动物数(%) 小鼠出现的扭体次数 （15min内）
12 22
汇总各组实验结果，记于上表内，并依照下列公式计算药物镇痛百分 率和抑制百分率。
• 使各组样本的条件尽量一致，消除或减小组间 人为的误差，从而使处理因素产生的效应更加 客观
#
对照原则
对照就是要设立参照物
戊巴比妥钠半数有效量ED50的测定
戊巴比妥钠半数有效量ED50的测定姓名：叶郑涛学号：1502010080 班级：15级眼本3班一、实验目的1.测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。
二、实验材料1.实验动物：小鼠（雌雄各半，18g~22g）60只。
2.器材：鼠笼（2个），天平，注射器（1ml或0.25ml），注射针头（51/2号），棉签（1支）。
3.药品：戊巴比妥钠溶液（浓度为0.400%、0.320%、0.256%、0.205%、0.164%、0.131%），0.5%苦味酸溶液。
三、实验方法和步骤1.取小鼠60只，随机分为6组，每组10只，称重。
各组分别腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠40.0、32.0、25.6、20.5、16.4、13.1mg/kg，药液容量均为0.1ml/10g。
2.以翻正反射消失作为入睡指标，给药15min后，记录各组出现催眠反应的鼠数并记录。
3.采用公式ED50=lg-1[X m–i(P-0.5)]计算并用GraphPad Prism 7.0a软件【1】求得腹腔注射戊巴比妥钠出现催眠反应的ED50。
1)其中X m =最大剂量对数值；2)P=动物催眠反应率（用小数表示）；3)P=各组催眠反应率的总和；4)i=相邻两组剂量比值的对数（高剂量做分子）。
四、实验结果1.不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响组别剂量D（mg/kg）lgD实验鼠数催眠鼠数催眠反应百分率（%）140.0 1.602010880232.0 1.505110550325.6 1.408210330420.5 1.31131000516.4 1.21441000613.1 1.11751000表1. 不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用2.半数有效量和量效关系曲线图3. 戊巴比妥钠量-效关系曲线五、实验讨论1.戊巴比妥钠的药理机制戊巴比妥钠属于中效累巴比妥类镇静催眠药。
对中枢神经系统有抑制作用。
其随着剂量的增加，中枢抑制作用由弱变强，相应表现为镇静、催眠、抗惊厥及抗癫痫、麻醉等作用。
戊巴比妥钠半数有效量的测量
戊巴比妥钠半数有效量（ED50）的测定一、实验目的1、测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。
2、实验示例戊巴比妥钠的LD50以供参考。
3、求其治疗指数。
二、实验材料1、实验动物：小鼠60只2、器材：鼠笼(2个)、天平、注射器(1ml）、棉签(2支)3、药品：戊巴比妥钠溶液(浓度为0.400%、0.320%、0.256%、0.205%、0.164%、0.131%)，0.5%苦味酸溶液三、实验方法和步骤1.预试0%及100%估计有效量分别为13.1mg/kg，40mg/kg，在此范围内测定ED50。
2.按等比级数（0.8）分成6个剂量组（mg/kg），分别为：40；32；25.6；20.5；16.4；13.1。
（本组测量剂量为16.4mg/kg）3.取小鼠60只，随机分为6组，每组10只，将每只小鼠分别称重，每组分别腹腔注射以上不同剂量戊巴比妥钠，药液容量均为0.1ml/10g。
4.以翻正反射消失（即小鼠趴卧不动时，捉背部皮肤，使其仰卧或侧卧，5s内不翻正）作为入睡指标，记录给药15分钟后，各组出现催眠反应的鼠数。
5.计算ED50（ED50=log-1[Xm- i(Σp-0.5)]）Xm=最大剂量对数值P=动物催眠率（用小数表示）Σp=各组催眠率的总和i=相邻两组剂量比值的对数（高剂量做分子）四、实验结果不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用1 40.0 1.6020 10 10 100 1.002 32.0 1.5051 10 10 100 1.003 25.6 1.4082 10 9 90 0.9017.54 20.5 1.3113 10 7 70 0.705 16.4 1.2144 10 3 30 0.306 13.1 1.1175 10 3 30 0.30ED50=17.5mg/kgLD50=120mg/kg治疗指数=6.857五、实验讨论1.药物剂量对药物作用有什么影响？答：药物剂量可对药物作用的速度、效率、产生作用的初始时间、作用持续的时间等均有影响。
戊巴比妥钠半数有效量的测量
戊巴比妥钠半数有效量（ED50）的测定一、实验目的1、测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。
2、实验示例戊巴比妥钠的LD50以供参考。
3、求其治疗指数。
二、实验材料1、实验动物：小鼠60只2、器材：鼠笼(2个)、天平、注射器(1ml）、棉签(1支)3、药品：戊巴比妥钠溶液(浓度为0.400%、0.320%、0.256%、0.205%、0.164%、0.131%)，0.5%苦味酸溶液三、实验方法和步骤1.预试0%及100%估计有效量分别为13.1mg/kg，40mg/kg，在此范围内测定ED50。
2.按等比级数（0.8）分成6个剂量组（mg/kg），分别为：40；32；25.6；20.5；16.4；13.1。
3.取小鼠60只，随机分为6组，每组10只，将每只小鼠分别称重，每组分别腹腔注射以上不同剂量戊巴比妥钠，药液容量均为0.1ml/10g。
4.以翻正反射消失作为入睡指标，记录给药15分钟后，各组出现催眠反应的鼠数。
5.计算ED50（ED50=log-1[Xm- i(Σp-0.5)]）四、实验结果不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用1 40.0 1.6020 10 10 100 1.00 17.52 32.0 1.5051 10 10 100 1.00 17.53 25.6 1.4082 10 9 90 0.90 17.54 20.5 1.3113 10 7 70 0.70 17.55 16.4 1.2144 10 3 30 0.30 17.56 13.1 1.1175 10 3 30 0.30 17.5ED50=17.5治疗指数=6.857五、实验讨论：1、药物剂量对药物作用有什么影响给药剂量不同对药物作用有影响，甚至发生药物性质的改变。
当药物的剂量增加时，药物的效应也增加，但这一效应的增加不是无限制的，当增加到一定程度时，药物的效应恒定在一定水平，而当药物剂量过大时，可致中毒或死亡。
药物半数致死量(有效量)测定_图文
均衡随机法分组：先按易控制的因素（性别、年龄 、体重等）均衡分档。 然后在每一档随机取出等量的动 物分配到各组，使难控制的因素（活泼程度、饥饱、疲 劳程度等）得到随机安排。
作业：
实验测定的戊巴比妥钠ED50以及上 述例子LD50有关数据求出：
治疗指数 TI ＝ LD50/ED50 ＝ 安全指数 SI ＝ LD5/ED95 ＝
40
LD50 /ED50
20
0
ED50
LD50
质反应的量效曲线
剂量
Fig.2-3 The frequency curve and cumulative frequency curve of a drug action in a quantal-effect experiment.
质反应量效关系曲线
分工合作，统一计算
分组及给药
取小鼠50只（ 18～22克 ）， 雌雄各半， 不同性别动物按体重随机分成五组。每组 各动物称重，标记后分别按设计的容积和 浓度腹腔注射给药。ＬＤ50（或ＥＤ50 ）测 定时是否要设对照组，应视药物性质等情 况而定。
必须注意：正式实验如单人操作时宜从浓 度偏高的剂量组开始给药！起效快和对后 续实验有重要提示作用。思考！
正式实验：在此剂量范围内安排５～６个对数剂 量实验组，便于用对数剂量对死亡数百分率作图 和计算数据。
本实验备有：50, 40 ,32, 25.6 ,20.5,16.4 五个剂量 组(组间公比=0.8)；昆明小鼠120只雌雄各半。
每个同学做4～5个连续的浓度，每浓度一只小鼠 。
实施：规范操作，观察计时；
【实验要求】
1、掌握小白鼠半数致死量或半数有效量 测定的基本方法。
机能实验学：药物半数有效量(ED50)测定
LD50来表示毒力（或用ED50来表示效力）比用LD5更为 灵敏、精确，且误差也小。
【材料与方法】
一、实验动物：小白鼠，雌雄各半，18～ 22g。
▪ 计算ED50有以下几种方法：加权机率单位法 （Bliss法）、机率单位图解法、序贯法及点斜 法（又称孙氏改良计算法）。其中孙氏改良计 算法简便、精确度较好，计算ED50的全部数据， 不受目测者个人的影响，下面仅介绍该方法。
▪ 本法要求以下实验设计条件：
▪ 各组动物数相等， ▪ 组间剂量呈等比级数 ▪ 有效率包括0%及100%至少要包括20%以下及80%以
3.翻正反射消失出现一次就作为入睡的 小鼠记录。
9/17/2020
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【思考题】
1.药物剂量对药物作用有什么影响? 2.简述药物的半数有效量、半数致死
量、药物治疗指数及其测定意义
9/17/2020
17
SED50 i
p p2 N 1
∑P2为各组有效率平方和
求ED50的95%平均可信限（L95） L95=ED50±4.5·ED50·SED50
不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响
组别 剂量D(mg/kg)
1ogD
实验 催眠 催眠反应 鼠数 鼠数 百分率% P
ED50(mg/kg)
1
40.00 1.6020 10
（5）配二号药液，在余下的16ml一号液中加 生理盐水4ml，混匀后吸出4ml为二号液， 依次类推，配出一系列比值1:0.8的药液。
4．动物随机分组
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3/8/2020
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2.汇总整个实验室各浓度组催眠反应的鼠
数后记入下表，采用公式
ED50=1og-1[Xm-i(Σp-0.5)]
（其中Xm=最大剂量对数值，P=动物催眠 率（用小数表示），Σp=各组死亡率的总 和，i=相邻两组剂量比值的对数（高剂量 做分子））计算出现催眠反应的ED50。
3/8/2020
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不同剂量戊巴比妥钠对小鼠的影响
组别 剂量D(mg/kg)
1ogD
实验 催眠 催眠反应 鼠数 鼠数 百分率% P
ED50(mg/kg)
1
40.00 1.6020 10
2
32.00 1.5051 10
3
25.60 1.4082 10
实验八 戊巴比妥钠半数有效量
（ED50）的测定
【实验目的】
1.用小白鼠求戊巴比妥钠的ED50 2.实验示例戊巴比妥钠的LD50以供参考。 3.求其治疗指数。
3/8/2020
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2
【实验原理】
1.质反应实验中，以对数剂量为横坐标，反应百 分率为纵坐标绘图，形成一条对称的“S”形曲 线。半数有效量（ED50）：50%的实验对象有 效时对应的剂量。半数致死量（LD50）：50% 的实验对象死亡时对应的剂量。
2.测定ED50的方法很多，但仍以改良的寇氏法计 算简便，结果较准确，比较常用。
3/8/2020
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3
【材料与方法】
一、实验动物：小白鼠，雌雄各半，18～ 22g。
二、器材与药品：鼠笼×2个、天平×1个、 注射器1ml（或0.25ml）×1支、注射针 头51/2×1个、0.5%苦味酸（一支棉签）、 戊巴比妥钠溶液（浓度为0.40%，0.32%， 0.25.6%，0.2048%，0.1638%，0.1311 ％）。
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4
20.48 1.3113 10
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16.38 1.2144 10
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13.11 1.1175 10
3/8/2020
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【注意事项】
1.分组时采用均衡随机法。 2.实验室保持安静，实验操作的过程中
尽量避免喧哗，以致影响催眠的效果， 已睡眠鼠与未睡眠鼠分笼放置。
3.翻正反射消失出现一次就作为入睡的 小鼠记录。
3/8/2020
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【思考题】
1.药物剂量对药物作用有什么影响? 2.简述药物的半数有效量、半数致 死量、药物治疗指数及其测定意义
3/8/2020
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3/8/2020
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4
三、方法与步骤：
1.取小鼠60只，分为6组，每组10只， 称重。每组分别给与腹腔注射不同 剂量戊巴比妥钠40、32、25.6、 20.48、16.38、13.11 mg/kg，以翻正 反射消失作为入睡指标，记录给药 15分钟后，各组出现催眠反应的鼠 数。