相关项目申报及限额一览表

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附件:1.申请填写指南

2.浙江省杰出青年科学基金项目申请指南

3.自然科学基金重大项目申请指南

4.自然科学基金重点项目申请指南

5.公益技术研究项目申请指南

6.自然科学基金青年科学基金项目申请指南

7.自然科学基金一般项目申请指南

8.自然科学基金—青山湖科技城联合基金项目

申请指南

9.自然科学基金—浙江省药学会联合基金项目

申请指南

10.除农业领域外的主要省部属高校2018年度公益技术研究项目申请限额一览表

附件1

申请填写指南

一、会员登陆省基础公益计划项目网络信息系统后,请按照要求补充完善个人基本信息和相关研究成果信息。会员信息是浙江省基础公益研究计划项目申请、遴选评审专家、评价学术成绩的主要依据之一,请务必如实完整填写。

申请人对其个人信息的真实性、合法性和完整性负责;各依托单位管理员应当对本单位会员注册信息进行认真审核,如发现不符合省申请人资格的,对于新会员应不予注册,对于已注册会员应立即停用其帐号并予备注。

二、申请书实行全文网上填报,不接收个人直接报送和非依托单位报送的申请材料。申请人应在省自然科学基金委员会网站(网址:)申报专栏下载2018年版的申请书正文撰写提纲和网上填报操作指南。

三、项目组成员分为“主要成员”和“非主要成员”两类。“主要成员”指省依托单位正式在编或者聘用且每年在浙江工作时间六个月以上的科学技术人员,并且应当是省的

注册会员。“非主要成员”指境外省外人员、省内非省依托单位人员、省依托单位不符合会员申请资格人员。符合项目组“主要成员”资格的科学技术人员,不得以“非主要成员”身份参与申报。申请人填写“主要成员”信息时,须输入各主要成员的“申请验证码”、身份证号码。各会员的申请验证码当年只能使用二次,请各位会员注意保管好本人的“申请验证码”。

四、申请人应认真阅读并依据《浙江省自然科学基金竞争性分配管理办法》《浙江省自然科学基金管理办法》《浙江省公益性技术应用研究计划管理办法(试行)》和各类项目管理的实施细则,按本通知、各类项目申请指南以及撰写提纲等具体要求填报申请书;申请人及所在依托单位应严格按照省级科技计划有关经费管理的要求,认真做好申请经费预算及相关审核工作。对于联合资助项目,各依托单位应按承诺足额配套联合资助经费并按财政拨款经费的要求进行监管。

五、申请人应当根据申请项目类型的资助强度下限金额及所在单位经费配套政策,在申请书中确定合理的研究目标、研究内容、研究计划、预期研究成果及预期发表的各类论文数。申请人应避免为获得资助而将预期指标填报过高。

如果申请获得资助,申请书记载的研究目标、研究内容、研究计划、预期研究成果及预期发表的各类论文数(注:申请人应当是论文等研究成果的主要完成人之一,并且发表、介绍论文等研究成果须正确标注省基础公益研究计划或省

自然科学基金计划资助及项目批准号)将直接作为研究计划书的组成部分,并作为结题验收的重要依据。申请人不得以资助经费未达到申请经费数额为由更改计划书内容。

立项后,如果资助项目总经费数额(含依托单位联合资助经费)与申请经费数额一致的,申请书记载的项目经费预算将直接作为资助项目经费预算,不再允许调整;如果资助项目总经费数额(含依托单位联合资助经费)未达到申请经费数额的,允许对相关栏目经费预算进行调减。

六、申请人应将网上填报并经依托单位审核后的申请书PDF文件打印成纸质材料一式三份,经所在单位盖章后,予以留存。

如果申请获得资助,申请人应在规定期间内将上述签字盖章后的纸质申请书一式二份与纸质项目计划书一式三份

提交给所在单位科研管理部门,其中纸质申请书一份与纸质项目计划书一式二份由所在单位集中报送至省基金办;申请人提交省杰青项目纸质申请书时须附签字盖章后的纸质推

荐表一份。以上签字盖章的纸质申请书、项目计划书由项目

负责人、所在依托单位和省基金办各留存一份,将作为日后结题验收的依据。

附件2

浙江省杰出青年科学基金项目申请指南支持在基础研究方面已取得突出成绩的青年学者自主选择研究方向开展创新研究,培育具备承担国家杰出青年科学基金等国家级人才计划的青年科研人才,形成一批进入国内外科技前沿的优秀学术带头人。

一、基本要求

1.1978年1月1日以后出生;

2.具有高级专业技术职称或者具有博士学位;

3.具有主持国家级基础研究项目或者在国外研究机构专职从事基础研究的工作经历;

4.应当是申请省杰青项目的实际负责人,限为1人。

二、限制申报条件

已主持国家杰出青年科学基金项目或者省杰青项目的,不得再申请省杰青项目。

三、申请书撰写要求

1.申请书包括简表、正文、参考文献三个部分。其中正文包括“项目名称”“主要学术成绩、创新点及其影响”“申请者发表的代表性论著(3-5篇)、主要获奖成果(3-5项)目录”“拟开展研究报告”等栏目。具体撰写要求参见省杰出青年基金项目申请书正文撰写提纲。申请人应当按照撰写提纲撰写申请书正文。

2.依托单位须组织学术委员会或专家组对省杰出青年基金项目申请人提出推荐意见(注:推荐表请从申报专栏下载),并将签章后的纸质推荐表与申请书一式一份提交所在单位科研管理部门。

省杰青项目申请人须同时上传签章后的《浙江省杰出青年科学基金项目推荐表》扫描件、3-5篇代表性论著PDF文档(注:请在会员信息“成果”栏中,填写代表性论著信息并上传PDF文档)。

四、研究期限:4年。

五、资助强度:全额资助项目50万元(数学、管理类为25万元)。联合资助项目:50万元,其中省自然科学基金资助30万元,依托单位资助20万元(数学、管理类省自然科学基金资助15万元,依托单位资助10万元)。

六、2017年度申请资助情况

2017年度杰青项目共资助50项,申请314项,资助率为15.9%。

七、2018年度计划资助数:50项。

附件3

自然科学基金重大项目申请指南

根据《浙江省国民经济和社会发展第十三个五年规划纲要》,支持科技人员主要围绕省基础研究重大专项等方向开展深入、系统的创新性研究,充分发挥中青年学术骨干的作用,促进学科发展,推动若干科学前沿或符合我省战略需求的重要领域取得突破。

一、基本要求

1.申请人须具有高级专业技术职称;

2.申请人原则上要求是1966年1月1日以后出生的中、青年科研人员;

3.具备良好的基础研究条件和基础。优先支持承担国家重点基础研究项目的团队成员;

4.重点领域:材料显微结构与性能表征研究、脑认知与脑机交互研究、干细胞与再生医学研究、作物品质形成和抗病毒研究;

5.具体可参考《浙江省“十三五”重大基础研究专项实施方案》。网络空间安全主动防御、大数据计算、传感材料与器件3个专项通过省政府与国家自然科学基金委员会“两化融合”联合基金组织实施,其他领域如确有意义重大、基础良好的项目,请申请人填写《2018年浙江省自然科学基金重大项目推荐表》(注:表格请从申报专栏下载)word 文档表,并由依托单位管理员汇总压缩打包后,于4月25

日16:00前通过网站“相关变更申请”处上报至省基金办,经审批同意后申请人方可正式填报申请书。

二、限制申请条件

1.正在主持省部级及以上科技计划项目,累计资助经费达到300万元的项目负责人不得申请;

2.正在主持国家自然科学基金重点项目、重大项目(课题)、国家杰出青年科学基金项目、国家重点研发计划项目(课题)的负责人不得申请。

2017年7月30日前(注:获资助时间以有关部门项目批准通知或立项文件的发文日为准),主持前款所列项目的,省自然科学基金将不予资助,申请人应主动告知省基金办并撤回其2018年度项目申请。

三、申请书撰写要求

1.申请书包括简表、正文、参考文献三个部分。其中正文包括“项目名称”“研究工作的科学意义”“本项目

研究目标,及其与申请者研究工作长期目标的关系”“项目研究内容,研究方案和进度安排”“项目创新之处”“工作基础与工作条件”“预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路”等栏目。具体撰写要求参见重点项目申请书正文撰写提纲。申请人应当按照撰写提纲撰写申请书正文。

2.申请书应当结合我省未来战略需求和科学前沿发展需求,提出明确的研究目标、创新的学术思想、合理的研究

方案,申请者和项目组应有厚实的研究工作基础和良好的研究条件。

四、研究期限:4年。

五、资助强度:全额资助项目80-100万元。联合资助项目:80万元,其中省自然科学基金资助50万元,依托单位资助30万元。

六、2018年度计划资助数:20项。

附件4

自然科学基金重点项目申请指南

支持科技人员面向已有较好基础的研究方向和优势学科开展深入、系统的创新性研究,充分发挥中青年学术骨干的作用,促进学科发展,推动若干科学前沿或符合我省战略需求的重要领域取得突破。

一、基本要求

1.申请人须具有高级专业技术职称;

2.申请人须在1966年1月1日以后出生。

二、限制申请条件

1.正在主持省部级及以上科技计划项目,累计资助经费达到300万元的项目负责人不得申请;

2.正在主持国家自然科学基金重点项目、重大项目(课题)、国家杰出青年科学基金项目、国家重点研发计划项目(课题)的负责人不得申请。

2017年7月30日前(注:获资助时间以有关部门项目批准通知或立项文件的发文日为准),主持前款所列项目的,省自然科学基金将不予资助,申请人应主动告知省基金办并撤回其2018年度项目申请。

三、申请书撰写要求

1.申请书包括简表、正文、参考文献三个部分。其中正文包括“项目名称”“研究工作的科学意义”“本项目

研究目标,及其与申请者研究工作长期目标的关系”“项目研究内容,研究方案和进度安排”“项目创新之处”“工作

基础与工作条件”“预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路”等栏目。具体撰写要求参见重点项目申请书正文撰写提纲。申请人应当按照撰写提纲撰写申请书正文。

2.申请书应当结合我省未来战略需求和科学前沿发展需求,提出明确的研究目标、创新的学术思想、合理的研究方案,申请者和项目组应有厚实的研究工作基础和良好的研究条件

四、研究期限:4年。

五、资助强度:全额资助项目30-40万元(数学、管理类为20万元)。联合资助项目:30万元,其中省自然科学基金资助20万元,依托单位资助10万元(数学、管理类省自然科学基金资助15万元,依托单位资助5万元)。

六、2017年度申请资助情况

2017年度重点项目共资助49项,申请385项,资助率为12.7%。

七、2018年度计划资助数:35项。

附件5

公益技术研究项目申请指南

为加强社会公益领域的技术攻关和推广应用,解决影响我省经济和社会发展公共领域的重大科技问题,支持公共性、非营利性、具有明确应用方向与前景的技术开发及成果的推广应用。重点围绕资源环境、人口健康、公共安全、现代农业、新农村建设、食品安全等领域开展研究。

一、基本要求

申请人具有从事应用研究和成果转化的条件并取得中级以上专业技术职称或者硕士学位。

二、限制申请条件

1.2016年获得国家自然科学基金资助,且累计资助经费在10万元(含)以上的不得申请;

2.正在主持省重点研发计划项目,或者正在主持省部级及以上科技计划项目且累计资助经费达到200万元的,不得申请。

2017年7月30日前(注:获资助时间以有关部门项目批准通知或立项文件的发文日为准),获主持前2条款所列类型当年项目的,省基础公益研究计划将不予资助,申请人应主动告知省基金办并撤回其2018年度申请。

三、申请书撰写要求

申请书包括简表、正文、参考文献三个部分。其中正文包括“项目名称”“研究工作的科学意义”“本项目研究目标,及其与申请者研究工作长期目标的关系”“项目研究内容、研究方案和进度安排”“项目创新之处”“工作基础与工作条件”“预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路”等栏目。具体撰写要求参见一般项目申请书正文撰写提纲。申请人应当按照撰写提纲撰写申请书正文。

四、研究期限:3年。

五、资助强度:10万元或15万元。申请人应当根据申请项目类型的资助强度下限金额及所在单位经费配套政策,在申请书中确定合理的研究目标、研究内容、研究计划、预期研究成果及预期发表的各类论文数。申请人应避免为获得资助而将预期指标填报过高。

六、2018年度计划资助数:500项。

附件6

自然科学基金青年科学基金项目申请指南

支持青年科学技术人员在浙江省自然科学基金资助范围内自主选题,开展基础研究工作,培养青年科学技术人员独立主持科研项目、进行创新研究的能力。

一、基本要求

1.具有从事基础研究的经历;

2.具有博士学位或者中级以上专业技术职称;

3.男性1985年1月1日以后出生,女性1980年1月1日以后出生;

二、限制申请条件

主持过国家自然科学基金或省级科技计划项目(不包括省属科研院所扶持专项资金人才类、载体类项目,以及分析测试、实验动物项目)的不得申请。

三、申请书撰写要求

申请书包括简表、正文和参考文献三个部分。其中正文包括“项目名称”“研究工作的科学意义”“本项目研究目标,及其与申请者研究工作长期目标的关系”“项目研究内容,研究方案和进度安排”“项目创新之处”“工作基础与工作条件”“预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路”等栏目。具体撰写要求参见青年项目申请书正文撰写提纲。申请人应当按照撰写提纲撰写申请书正文。

四、研究期限:3年。

五、资助强度:

全额资助项目:7万元。联合资助项目:7万元,其中省自然科学基金资助5万元,依托单位资助2万元。

六、2017年度申请资助情况

2017年度青年科学基金项目共资助293项,项目申请1433项,平均资助率为20.4%。

附件7

自然科学基金一般项目申请指南

支持从事基础研究的科技人员自由选题,开展创新性的科学研究,聚焦有限的基础科学问题上,开展阶段性研究工作,促进各学科均衡、协调和可持续发展。

一、基本要求

申请人具有从事基础研究的条件并取得中级以上专业技术职称或者博士学位。

二、限制申请条件

1.2016年获得国家自然科学基金资助,且累计资助经费在10万元(含)以上的不得申请;

2.正在主持省重点研发计划项目,或者正在主持省部级及以上科技计划项目且累计资助经费达到200万元的,不得申请。

2017年7月30日前(注:获资助时间以有关部门项目批准通知或立项文件的发文日为准),获主持前2条款所列类型当年项目的,省自然科学基金将不予资助,申请人应主动告知省基金办并撤回其2018年度项目申请。

三、申请书撰写要求

申请书包括简表、正文、参考文献三个部分。其中正文包括“项目名称”“研究工作的科学意义”“本项目研究目标,及其与申请者研究工作长期目标的关系”“项目研究内容、研究方案和进度安排”“项目创新之处”“工作基础与工作条件”“预期研究结果、利用研究结果计划和今后发展思路”等栏目。具体撰写要求参见一般项目申请书正文撰写提纲。申请人应当按照撰写提纲撰写申请书正文。

四、研究期限:3年。

五、资助强度

全额资助项目: 8-10万元。联合资助项目:8万元,其中省自然科学基金资助5万元,依托单位资助3万元。

六、2017年度申请资助情况

2017年度一般项目共资助807项,申请3497项,资助率为23.1%。

附件8

自然科学基金—青山湖科技城

联合基金项目申请指南

围绕杭州青山湖科技城建设发展所需的人才培养和技

术储备需求,以及青山湖科技城企业发展过程中遇到的关键、共性技术问题,按照“共同组织、联合管理、需求导向、充分开放”的原则,凝练需求、共同攻关,促进区域基础研究发展,推动产学研合作、人才培养和成果应用,为促进青山湖科技城发展提供创新源头支撑。本年度定位为省自然科学基金一般项目申请。

一、基本要求

本联合基金实行限项申报。

1.申请人须具有硕士及以上学位或者中级及以上专业技术职

称,企业研究院成员可适当放宽要求;

2.如申请人所在单位为青山湖科技城范围外有省财政拨款关系的省基金依托单位且申报内容与青山湖科技城发展紧密相关,并有青山湖科技城范围内的高校、科研院所和企业研究院成员作为主要成员参与,申请人应向青山湖科技城管委会事先提供申请书正文,在获得青山湖科技城管委会提供的申报授权码后,方可获取申报资格,后续申报程序与其他各类项目相同;

3.如申请人所在单位为青山湖科技城范围内的省基金依托单位,申请人应向青山湖科技城管委会事先提供申请书正文,在获得青山湖科技城管委会提供的申报授权码后,方可获取申报资格,后续申报程序与其他各类项目相同;

4.如申请人所在单位为青山湖科技城范围内的企业研究院等非省基金依托单位,通过青山湖科技城管委会统一申报,申报程序与其他各类项目相同。

二、限制申请条件

项目申报表格填写说明

项目申报表格填写说明 一、项目申报基础信息填写 填写说明: 1、项目名称:所需要申报项目的具体名称,请填写详细名称,如“××省××市××项目”。 注意:请按照批复文件中的项目名称录入。系统中的项目名称不可重复。 2、申报文号:向农业部申报的项目的正式文号,如“京农计【2006】85号”。 3、申报文件名称:项目申报文件的正式名称,如“关于《××项目名称》的可行性研究报告”。 4、申报年份:请选择项目申报的年份,系统默认是当前的工作年度。 5、品种类型:请选择项目类型下面的项目品种类型。 6、建设地点:选择项目建设的地点,如“××市××县”。 7、详细建设地点:项目建设的详细地点,如“××路××号”或者“××镇××农场”。 注意: (1)请不要填写“××市××县”,只需要填写县级以下的建设地点,如“XX镇”等。 (2)如果项目有多个建设地点,在“建设地点”栏无法多重选择,可以在此栏中补充完善。 8、建设单位:项目承建单位的具体名称。 9、建设年限:项目具体建设年限,请按照批复文件的批复日期算起,具体填写从哪一年到 哪一年。例如:批复文件中写的批复日期是06年,批复的建设年限是“两年”,那么建设年限就填写为“2006年~2007年”;批复文件中写的批复日期是06年,批复的建设年限是“一年”,那么建设年限就填写为“2006年~2006年”。

10、建设内容:项目具体建设内容的描述,注意:在250字以内。 11、建设性质:选择该项目是新建、扩建、改建、改扩建、单纯购置、翻建、迁建。 12、建设单位是否属农垦系统:选择该项目的建设单位是否是农垦系统的。

二、建设单位基本情况表 样表: 建设单位基本情况表 填写说明: 1、表格中,红色标注的单元格为必须填写项。 2、单位性质:本单位的所属性质,下拉框选择,为必选项。 3、仪器设备的备注:设备较少时可以直接在备注中说明详细的型号、规格,如果仪器设备较多时,可以以附件的形式上传详细说明的电子文件,备注中注明附件的名称。 4、该表格请根据实际情况填写,尽量填写全面。

常用限制性内切酶酶切位点保护残基

酶切位点保护碱基-PCR引物设计用于限制性内切酶 发布: 2010-05-24 20:19| 来源:生物吧| 编辑:刘浩| 查看: 161 次 本文给出了分子克隆中常用限制性内切酶的保护碱基序列,如AccI,AflIII,AscI,AvaI,BamHI,BglII,BssHII,BstEII,BstXI,ClaI,EcoRI,HaeIII,HindIII,KpnI,MluI,NcoI,NdeI,NheI,NotI,NsiI,PacI,PmeI,PstI,PvuI,SacI,SacII,SalI,ScaI,SmaI,SpeI,SphI,StuI,XbaI,XhoI,XmaI, 为什么要添加保护碱基? 在分子克隆实验中,有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点,用于后续的酶切和连接反应。由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开,因此在设计PCR引物时,人为的在酶切位点序列的5‘端外侧添加额外的碱基序列,即保护碱基,用来提高将来酶切时的活性。 其次,在分子克隆实验中选择载体的酶切位点时,相临的两个酶切位点往往不能同时使用,因为一个位点切割后留下的碱基过少以至于影响旁边的酶切位点切割。 该如何添加保护碱基? 添加保护碱基时,最关心的应该是保护碱基的数目,而不是种类。什么样的酶切位点,添加几个保护碱基,是有数据可以参考的。 添加什么保护碱基,如果严格点,是根据两条引物的Tm值和各引物的碱基分布及GC含量。如果某条引物Tm值偏小,GC%较低,添加时多加G或C,反之亦反。 为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求,NEB采用了一系列含识别序列的短双链寡核苷酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助(比如在多接头上切割位点很接近时),或者当切割位点靠近DNA末端时也很有用。在本表中没有列出的酶,则通常需在识别位点两端至少加上6个保护碱基,以确保酶切反应的进行。 实验方法:用γ-[32P]ATP在T4多聚核苷酸激酶的作用下标记0.1A260单位的寡核苷酸。取1μg已标记了的寡核苷酸与20单位的内切酶,在20°C条件下分别反应2小时和20小时。反应缓冲液含70mM Tris-HCl (pH 7.6), 10 mM MgCl2, 5 mMDTT及适量的NaCl或KCl(视酶的具体要求而定)。20%的PAGE(7M尿素)凝胶电泳分析,经放射自显影确定酶切百分率。 本实验采用自连接的寡核苷酸作为对照。若底物有较长的回文结构,切割效率则可能因为出现发夹结构而降低。

衡器项目申报材料

衡器项目申报材料 投资分析/实施方案

衡器项目申报材料 衡器作为计量器具的一个重要组成部分,主要是用来被称物质量或者被充当为质量函数的其它数值、数量、参数或特性的一种计量仪器。衡器作为国家强制管理的法定计量器具,是称重控制和贸易计量的重要手段,在各行各业被广泛运用,但同时它们也对衡器技术的发展提出越来越高的要求。 该衡器项目计划总投资22791.61万元,其中:固定资产投资17440.74万元,占项目总投资的76.52%;流动资金5350.87万元,占项目总投资的23.48%。 达产年营业收入47872.00万元,总成本费用35991.04万元,税金及附加430.13万元,利润总额11880.96万元,利税总额13949.84万元,税后净利润8910.72万元,达产年纳税总额5039.12万元;达产年投资利润率52.13%,投资利税率61.21%,投资回报率39.10%,全部投资回收期 4.06年,提供就业职位886个。 坚持应用先进技术的原则。根据项目承办单位和项目建设地的实际情况,合理制定项目产品方案及工艺路线,在项目产品生产技术设计上充分体现设备的技术先进性、操作安全性。采用先进适用的项目产品生产工艺技术,努力提高项目产品生产装置自动化控制水平,以经济效益为中心,

在采用先进工艺和高效设备的同时,做好项目投资费用的控制工作,以求 实科学的态度进行细致的论证和比较,为投资决策提供可靠的依据。努力 提高项目承办单位的整体技术水平和装备水平,增强企业的整体经济实力,使企业完全进入可持续发展的境地。 ......

衡器项目申报材料目录 第一章申报单位及项目概况 一、项目申报单位概况 二、项目概况 第二章发展规划、产业政策和行业准入分析 一、发展规划分析 二、产业政策分析 三、行业准入分析 第三章资源开发及综合利用分析 一、资源开发方案。 二、资源利用方案 三、资源节约措施 第四章节能方案分析 一、用能标准和节能规范。 二、能耗状况和能耗指标分析 三、节能措施和节能效果分析 第五章建设用地、征地拆迁及移民安置分析一、项目选址及用地方案

常见分子实验限制性内切酶酶切位点大全

Acc65I识别位点 AccI识别位点 AciI识别位点 AclI识别位点 AcuI识别位点 AfeI识别位点 AflII识别位点 AflIII识别位点 AgeI识别位点 AhdI识别位点 AleI识别位点 AluI识别位点 AlwI识别位点 AlwNI识别位点 ApaI识别位点 ApaLI识别位点 ApeKI识别位点 ApoI识别位点 AscI识别位点 AseI识别位点 AsiSI识别位点 AvaI识别位点 AvaII识别位点 AvrII识别位点 BaeI识别位点 BamHI识别位点 BanI识别位点 BanII识别位点

BbvCI识别位点 BbvI识别位点 BccI识别位点 BceAI识别位点 BcgI识别位点 BciVI识别位点 BclI识别位点 BfaI识别位点 BfuAI识别位点 BglI识别位点 BglII识别位点 BlpI识别位点 Bme1580I识别位点 BmgBI识别位点 BmrI识别位点 BmtI识别位点 BpmI识别位点 Bpu10I识别位点 BpuEI识别位点 BsaAI识别位点 BsaBI识别位点 BsaHI识别位点 BsaI识别位点 BsaJI识别位点 BsaWI识别位点 BsaXI识别位点 BseRI识别位点 BseYI识别位点

BsiEI识别位点 BsiHKAI识别位点 BsiWI识别位点 BslI识别位点 BsmAI识别位点 BsmBI识别位点 BsmFI识别位点 BsmI识别位点 BsoBI识别位点 Bsp1286I识别位点 BspCNI识别位点BspDI识别位点 BspEI识别位点 BspHI识别位点 BspMI识别位点 BspQI识别位点 BsrBI识别位点 BsrDI识别位点 BsrFI识别位点 BsrGI识别位点 BsrI识别位点 BssHII识别位点 BssKI识别位点 BssSI识别位点 BstAPI识别位点 BstBI识别位点 BstEII识别位点 BstNI识别位点

各类科研项目申报条件及时间

2006年可申报的各类科研项目申报条件及时间一览表(一)

具体时间以组织申报通知为准。 2006年可申报的各类科研项目申报条件及时间一览表(二)

具体时间以组织申报通知为准。 ▲详细说明如下: 一、可申报的项目 (一)自然科学类 1、国家自然科学基金项目(包括重大项目、面上项目等)(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:1—3月); 2、国家重点攻关项目和招标项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:2—3月)、 973项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html, 时间:2—3月)、 863项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:3—5月); 3、国家教育部自然科学基金项目;(https://www.360docs.net/doc/481743886.html,) 4、国家教育部重大招标项目; 5、国家教育部回国留学人员基金项目; 6、广东省自然科学基金项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:2—3月); 7、广东省科技厅软科学项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:2—3月); 8、广东省科技计划项目、攻关项目和招标项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:2—3月); 9、广东省教育厅自然科学基金项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:5-6月); 10、广东省教育厅"千、百、十"工程项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:5—6月); 11、肇庆市科技计划项目(全年受理、年末评审) 肇庆市科技创新项目(第一批1-2月、第二批8-9月)

12、肇庆学院基金项目(4—5月); 13、横向项目(全年受理); 14、其它。 (二)人文、社科、艺术类 1、国家人文社科规划项目(包括包括重大项目、面上项目)(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间1—3月); 2、教育部社科规划项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间8—9月); 3、国家教育部哲学社会科学重大招标项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间8—9月); 4、国家教育部回国留学人员基金项目; 5、文化部艺术类规划项目[网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,(单列学科)或(https://www.360docs.net/doc/481743886.html,)时间1—3 月]; 6、广东省社科规划项目(12月); 7、广东省科技厅软科学项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:1—3月); 8、广东省高校人文社会科学研究项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间5—6月); 9、广东省教育厅"千、百、十"工程项目(网址:https://www.360docs.net/doc/481743886.html,时间:2—3月); 10、肇庆学院基金项目(4—5月); 11、横向项目(全年受理); 12、其它。 (三)教育科学类

相关项目申报及限额一览表

附件:1.申请填写指南 2.浙江省杰出青年科学基金项目申请指南 3.自然科学基金重大项目申请指南 4.自然科学基金重点项目申请指南 5.公益技术研究项目申请指南 6.自然科学基金青年科学基金项目申请指南 7.自然科学基金一般项目申请指南 8.自然科学基金—青山湖科技城联合基金项目 申请指南 9.自然科学基金—浙江省药学会联合基金项目 申请指南 10.除农业领域外的主要省部属高校2018年度公益技术研究项目申请限额一览表

附件1 申请填写指南 一、会员登陆省基础公益计划项目网络信息系统后,请按照要求补充完善个人基本信息和相关研究成果信息。会员信息是浙江省基础公益研究计划项目申请、遴选评审专家、评价学术成绩的主要依据之一,请务必如实完整填写。 申请人对其个人信息的真实性、合法性和完整性负责;各依托单位管理员应当对本单位会员注册信息进行认真审核,如发现不符合省申请人资格的,对于新会员应不予注册,对于已注册会员应立即停用其帐号并予备注。 二、申请书实行全文网上填报,不接收个人直接报送和非依托单位报送的申请材料。申请人应在省自然科学基金委员会网站(网址:)申报专栏下载2018年版的申请书正文撰写提纲和网上填报操作指南。 三、项目组成员分为“主要成员”和“非主要成员”两类。“主要成员”指省依托单位正式在编或者聘用且每年在浙江工作时间六个月以上的科学技术人员,并且应当是省的

注册会员。“非主要成员”指境外省外人员、省内非省依托单位人员、省依托单位不符合会员申请资格人员。符合项目组“主要成员”资格的科学技术人员,不得以“非主要成员”身份参与申报。申请人填写“主要成员”信息时,须输入各主要成员的“申请验证码”、身份证号码。各会员的申请验证码当年只能使用二次,请各位会员注意保管好本人的“申请验证码”。 四、申请人应认真阅读并依据《浙江省自然科学基金竞争性分配管理办法》《浙江省自然科学基金管理办法》《浙江省公益性技术应用研究计划管理办法(试行)》和各类项目管理的实施细则,按本通知、各类项目申请指南以及撰写提纲等具体要求填报申请书;申请人及所在依托单位应严格按照省级科技计划有关经费管理的要求,认真做好申请经费预算及相关审核工作。对于联合资助项目,各依托单位应按承诺足额配套联合资助经费并按财政拨款经费的要求进行监管。 五、申请人应当根据申请项目类型的资助强度下限金额及所在单位经费配套政策,在申请书中确定合理的研究目标、研究内容、研究计划、预期研究成果及预期发表的各类论文数。申请人应避免为获得资助而将预期指标填报过高。

LNG船及配件项目申报材料

LNG船及配件项目 申报材料 规划设计/投资分析/实施方案

LNG船及配件项目申报材料 2018年,全球新成交大型LNG船达到66艘,达到近年来的新高。LNG 船是LNG洲际贸易的主力运输工具,目前只有美国、日本、韩国和欧洲的 少数几个国家的13家船厂能够建造,其中韩国和日本是最主要的生产者。 该LNG船及配件项目计划总投资20889.64万元,其中:固定资产投资15138.38万元,占项目总投资的72.47%;流动资金5751.26万元,占项目 总投资的27.53%。 达产年营业收入39919.00万元,总成本费用31189.45万元,税金及 附加369.99万元,利润总额8729.55万元,利税总额10303.62万元,税 后净利润6547.16万元,达产年纳税总额3756.46万元;达产年投资利润 率41.79%,投资利税率49.32%,投资回报率31.34%,全部投资回收期 4.69年,提供就业职位734个。 报告从节约资源和保护环境的角度出发,遵循“创新、先进、可靠、 实用、效益”的指导方针,严格按照技术先进、低能耗、低污染、控制投 资的要求,确保投资项目技术先进、质量优良、保证进度、节省投资、提 高效益,充分利用成熟、先进经验,实现降低成本、提高经济效益的目标。 ......

LNG船及配件项目申报材料目录 第一章申报单位及项目概况 一、项目申报单位概况 二、项目概况 第二章发展规划、产业政策和行业准入分析 一、发展规划分析 二、产业政策分析 三、行业准入分析 第三章资源开发及综合利用分析 一、资源开发方案。 二、资源利用方案 三、资源节约措施 第四章节能方案分析 一、用能标准和节能规范。 二、能耗状况和能耗指标分析 三、节能措施和节能效果分析 第五章建设用地、征地拆迁及移民安置分析 一、项目选址及用地方案

限制性内切酶的一般原则和建议!

限制性内切酶的一般原则和建议! 1.如何做酶切反应? 该问题看似什么简单: DNA中加上酶,然后保温一段时间就可以了。但是在实际操作过程中,我们不断听到:切不动,装不上。问题在什么地方?能系列生产限制性内切酶的公司国际上,就那么几个,位列前 3 的是NEB, Fermentas, SibEnzyme。这些公司提供酶的品质一般都能得到保证。您可以怀疑酶的质量问题,但是更多的问题来源于模板是否合适酶切要求。下面几点对你的酶切是有帮助的。 1) 成功酶切的关键是准备好模板DNA。DNA样品中不能含有有机溶剂(会使酶变性或产生星号货性),不能含有干扰酶活性的污染物质,不能含有高浓度的EDTA (TE中的EDTA浓度较低,对Mg的浓度影响较小);同时要对DNA甲基化程度及其对酶切效率的影响要做到心中有数。 2) 选用合适的酶。根据酶切序列选用,特别注意选用甲基化对酶活性的干扰。 3) 正确使用和保存酶。酶需要保存在-20度的低温环境中,只是在需要用酶才从冰箱中取出来。运输和临时存放时需要将酶至于冰上。手拿酶管时不要接触酶管下步含酶的部分,移酶时尽可能用长TIP, 避免污染。用完后需要及时送回原处。注意:酶通常是最后加。所有4) 反应体积需要根据实验目的定,常规的酶切一般要维持在10-50ul,酶切鉴定10-20ul就可以了。 5) 模板浓度问题:浓度过高,溶液黏度过大,酶不能有效扩散,酶切效果不会好。浓度过低,也会影响酶活性。 6) 注意模板用量和反应体积的关系。对酶用量,模板用量,反应体积等要素的确定需要的是时间和经验的积累。 7) 酶切反应的各个组分加完后,需要用TIP小心混匀几次,short spin 一下就可以保温了。一般不能使用振荡器混匀。 8) 反应温度的选择。一般反应都用37度,但是 Sma I 的最适合温度是25度,37度时酶仍表现出活性,但是效率下降50%。部分从耐热菌制备的酶需要在37度以上的温度反应,如Taq I的最适温度为65度,37度保温,效率仅为前者的1/10。 9) 反应时间的选择。一般酶切鉴定30分钟就可以了。要完全酶切可以采用少量的酶长时间反应,或较高的酶量短时间处理都可以达到。在使用高酶量的时候需要注意甘油的最终浓度不要超过5%,也就是说10ul的体系,酶的用量不要超过1ul。 10) 是否和如何终止反应?酶切鉴定之类的实验不需要特殊处理。灭活的手段:加入高浓度的EDTA;65度或80度热处理20-30分钟;部分从高温菌纯化出来的内切酶由于最适的反应温度比较高,热处理灭活不一定完全,需要用苯酚/氯仿/乙醇方法纯化;电泳回收也是实验室常用除酶的手段。 2.如果遇到酶切不动或切不完全,该怎么办? 要回答这么问题常常需要了解酶活性单位是如何确定,我们多次接到这样的问题:1个单位的酶能在60分钟内切1ug的DNA,为什么我们的DNA那么少切那么长时间也不能切开或切完全?从下面几个因素去考虑: 1) 酶是否有活性:酶的活性单位通常是在60分钟酶切1ug lambda DNA或特定线状DNA所需要的酶量。鉴定酶的活性高低不是用您待切的DNA模板,也不是别的公司的酶来判定。因为不同公司酶可能是从不同系统中纯化的,虽然识别位点相同,但是酶的特性可能是有差异的。鉴定酶必须使用使用说明书上认定的酶活确定的方式,通常需要用lambda DAN做模板来判定。同时如果酶对甲基化敏感,还需要用Dcm-, Dam-的DNA.不排除由于运输或分装不当导致酶活性下降,这种情况是很少发生。我们公

各类科技计划项目申报指南

附件2:各类科技计划项目申报指南 2011年度高新技术及产业化 项目申报指南 2011年《指南》根据省委、省政府对发挥科技创新的支撑作用,大力发展战略性新兴产业,促进经济平稳较快发展提出的新要求,以科学发展观为指导,以增强自主创新能力为核心,重点支持以下领域重大关键技术攻关和新产品开发,推进我省高新技术产业与战略性新兴产业加快发展。 一、电子信息领域 信息安全技术、物联网技术、行业应用软件、便携式卫星移动通信应用系统、3D网络游戏产品、IC设计与专用芯片、消费电子类芯片基于宽带移动与3G通信技术、数据通信设备、3C融合家电与3C 数码个人终端技术、基于下一代互联网和三网融合的信息技术、高端光电子技术、开放集成应用软件平台产品、嵌入式应用系统、设备安全与信息安全系列新产品、空中交通管理系统、各类DSP产品等。 二、先进制造领域 新型自动化仪表、新型传感器、微机电技术产品、科学分析仪器、检测仪器、精确制造中的测控仪器、先进制造系统、高档数控机床与基础制造装备、机器人开发及应用、激光加工技术及产品、电力电子技术和设备、纺织及轻工行业专用设备、机械基础件及模具、通用机械产品、新型机械产品的前端研究、先进汽车发动机零部件、新能源汽车关键零部件、现代汽车电子产品、车辆检测技术及装备、轨道交通领域关键零部件等。 三、航空航天领域

大型发动机整机、航空零部件、空间服务系统、航空维修、空中交通管制系统、机场综合电子信息系统等。 四、新材料领域 高性能结构材料、先进功能材料、高性能复合材料等。 五、核技术和新能源领域 动力核技术、非动力核技术、太阳能、风能等新能源相关技术及产品等。 六、化工 耐温抗蚀化工行业专用设备、电子化学品、新型催化剂、新型橡塑助剂、超细功能材料、非石油路线制备大宗化学品、节能减排的化工过程控制系统,其它精细及功能化学品等。 七、纺织、轻工 新型纤维材料、纺织及轻工行业专用设备、生物催化技术及产品、微生物发酵新技术和新产品、新型、高效工业酶制剂等。 八、交通、建工建材: 先进的交通管理和控制系统、先进的公共交通管理设备和系统、建筑储能技术及相关产品等。 九、现代服务业 现代物流业、金融业、现代信息服务业、科技服务业、商贸流通业、农村服务业、旅游业、服务外包产业、文化服务业等现代服务业领域中的共性技术研究开发与应用示范重大项目,能提升服务业领域原始创新能力和集成创新能力的重大项目。 十、节能减排技术 固体废弃物的处理与综合利用技术,新型工业和重点污染行业污染控制技术,发展清洁生产与循环经济的关键技术,高效节能技术和相关产品等。

常用限制性内切酶酶切位点汇总

ApaI识别位点Acc65I识别位点 ApaLI识别位点AccI识别位点 ApeKI识别位点AciI识别位点 ApoI识别位点AclI识别位点 AscI识别位点AcuI识别位点 AseI识别位点AfeI识别位点 AsiSI识别位点AflII识别位点 AvaI识别位点AflIII识别位点 AvaII识别位点AgeI识别位点 AvrII识别位点AhdI识别位点 BaeI识别位点AleI识别位点 BamHI识别位点AluI识别位点 BanI识别位点AlwI识别位点 BanII识别位点AlwNI识别位点

BmrI识别位点BbvCI识别位点 BmtI识别位点BbvI识别位点 BpmI识别位点BccI识别位点 Bpu10I识别位点BceAI识别位点 BpuEI识别位点BcgI识别位点 BsaAI识别位点BciVI识别位点 BsaBI识别位点BclI识别位点 BsaHI识别位点BfaI识别位点 BsaI识别位点BfuAI识别位点 BsaJI识别位点BglI识别位点 BsaWI识别位点BglII识别位点 BsaXI识别位点BlpI识别位点 BseRI识别位点Bme1580I识别位点 BseYI识别位点BmgBI识别位点

BspMI识别位点BsiEI识别位点 BspQI识别位点BsiHKAI识别位点 BsrBI识别位点BsiWI识别位点 BsrDI识别位点BslI识别位点 BsrFI识别位点BsmAI识别位点 BsrGI识别位点BsmBI识别位点 BsrI识别位点BsmFI识别位点 BssHII识别位点BsmI识别位点 BssKI识别位点BsoBI识别位点 BssSI识别位点Bsp1286I识别位点 BstAPI识别位点BspCNI识别位点 BstBI识别位点BspDI识别位点 BstEII识别位点BspEI识别位点 BstNI识别位点BspHI识别位点

科技计划项目申报书范本

科技计划项目申报书 计划类别: 项目类别: 项目名称:凝汽器补水系统及空冷技术的研究与应用 申请单位: 起止年限:2017年至2018年 申报日期:2017年11月12日 科技局

二零一六年十月制

一、项目的意义与目标 (一)意义和必要性 研究的背景和意义: 在现代大型电站凝汽式汽轮机组的热力循环中,凝汽设备的真空度是汽

轮机运行的性能考核指标,也最能直接影响到整个汽轮机组的安全性、可靠性、稳定性和经济性。实际运行经验告诉我们,凝汽器的真空水平对汽轮发电机组的经济性有着直接影响,汽轮机真空严密性差会直接导致一是降低汽轮机组的效率,有资料显示,真空每下降1kpa,机组的热耗将在家70kJ/kw,热效率降低1.1%,增加发电煤耗约3-5g/kwh;二是威胁汽轮机的安全运行。 因此提高真空度,维持机组经济最佳真空运行,提高整个汽轮机组的热经济性、保证汽轮机安全运行等方面很有必要。 其次根据新疆自治区节能监查总队对能源发展的规划,在到2020年,现役燃煤发电机组改造后平均供电煤耗低于310克/千瓦时,其中现役60万千瓦及以上机组(除空冷机组外)改造后平均供电煤耗低于300克/千瓦时。优先淘汰改造后仍不符合能效、环保等标准的30万千瓦以下机组,特别是运行满20年的纯凝机组和运行满25年的抽凝热电机组。逐步淘汰改造后平均供电煤耗不达标的火电机组。 直接空冷机组通常在设计时因考虑空冷散热面积与当地全年最热气温满负荷小时数的经济性关系,空冷机组普遍存在夏季高温时段背压高,煤耗高,带不满负荷的情况。 我厂#1机组于2012年投产,#2机组于2013年投产,环境温度达到30℃以上时机组运行工况变差,机组真空降低,当环境温度高达33度以上时,更是严重制约机组负荷。在7、8、9月份,机组平均发电煤耗在330g/KW.h以上。 为解决空冷的不足,我厂技术人员对凝汽器补水系统及空冷技术进行研究,研究项目成立后可降低机组背压1~3kpa,节约发电煤耗约3-5g/kwh,全

常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)

The Type II restriction systems typically contain individual restriction enzymes and modification enzymes encoded by separate genes. The Type II restriction enzymes typically recognize specific DNA sequences and cleave at constant positions at or close to that sequence to produce 5-phosphates and 3-hydroxyls. Usually they require Mg 2+ ions as a cofactor, although some have more exotic requirements. The methyltransferases usually recognize the same sequence although some are more promiscuous. Three types of DNA methyltransferases have been found as part of Type II R-M systems forming either C5-methylcytosine, N4-methylcytosine or N6-methyladenine. ApaI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5'GGGCC^C 3' BamHI(类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' G^GATCC 3' BglII (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' A^GATCT 3' EcoRI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' G^AATTC 3' HindIII (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' A^AGCTT 3' KpnI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' GGTAC^C 3' NcoI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' C^CATGG 3' NdeI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' CA^TATG 3' NheI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' G^CTAGC 3' NotI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' GC^GGCCGC 3' SacI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' GAGCT^C 3' SalI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' G^TCGAC 3' SphI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' GCATG^C 3' XbaI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' T^CTAGA 3' XhoI (类型:Type II restriction enzyme )识别序列:5' C^TCGAG 3' 当然,上面总结的这些肯定不全,要查找更多内切酶的识别序列,你还可以选择下面几种方法: 1. 查你所使用的内切酶的公司的目录或者网站;NEB网站上提供的识别序列图表下载 2. 用软件如:Primer Premier5.0或Bioedit等,这些软件均提供了内切酶识别序列的信息;

各级各类科研项目(纵向)申报渠道一览表概要

各级各类科研项目(纵向)申报渠道一览表

国家海洋局编号项目名称 1 国家海洋局青年海洋科学基金受理时间受理时间以当年发布的通知为准受理时间受理时间以当年发布的通知为准受理时间受理时间以当年发布的通知为准网站 https://www.360docs.net/doc/481743886.html, 网站联系单位国家海洋局科学技术司联系单位国家中医药管理局联系单位全国古籍整理出版规划领导小组办公室国家中医药管理局编号项目名称 1 中医药科学技术研究专项 https://www.360docs.net/doc/481743886.html, 网站全国古籍整理办公室编号 1 编号 1 2 3 4 5 项目名称国家古籍整理出版资助项目https://www.360docs.net/doc/481743886.html, 海南省项目名称海南省重点科技计划海南省自然科学基金海南省社会科学规划资助课题海南省教育厅高校科学研究资助项目海口市重点科技计划受理时间受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准网站联系单位海南省科学技术发展计划处海南省科学技术发展计划处海南省社会科学界联合会海南省教育厅高等教育处海口市科学技术工业信息产业化局计划处 https://www.360docs.net/doc/481743886.html, https://www.360docs.net/doc/481743886.html, https://www.360docs.net/doc/481743886.html, https://www.360docs.net/doc/481743886.html,/ https://www.360docs.net/doc/481743886.html, 其它类型 6 7 8 9 10 11 海南省委宣传部课题海南省发改委课题海南省国土资源厅项目海南省林业局项目海南省农业厅项

目海南省水务厅项目受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准受理时间以当年发布的通知为准海南省委宣传部 https://www.360docs.net/doc/481743886.html,/ 海南省发改委 https://www.360docs.net/doc/481743886.html,/ https://www.360docs.net/doc/481743886.html,/ https://www.360docs.net/doc/481743886.html,/ https://www.360docs.net/doc/481743886.html,/ 海南省国土资源厅海南省林业局海南省农业厅海南省水务厅 6 12 海南省文体厅项目受理时间以当年发布的通知为准 https://www.360docs.net/doc/481743886.html,/ 海南省文体厅另:海南师范大学校内项目编号 1 2 3 4 项目名称海南师范大学青年教师科研启动项目每年年底受理时间网站联系单位海南师范大学引进教授(博士)科研启动项目随时海南师范大学学术著作出版资助项目海南师范大学技术成果与转化项目具体以通知为准具体以通知为准 https://www.360docs.net/doc/481743886.html,.c 海南师范大学科研处 n/dzjgou/kysbchu/ 7

如何做好酶切

该问题看似什么简单:DNA中加上酶,然后保温一段时间就可以了。但是在实际操作过程中,我们不断听到:切不动,装不上。问题在什么地方?能系列生产限制性内切酶的公司国际上,就那么几个,位列前3 的是NEB, Fermentas, SibEnzyme。这些公司提供酶的品质一般都能得到保证。您可以怀疑酶的质量问题,但是更多的问题来源于模板是否合适酶切要求。下面几点对你的酶切是有帮助的。 1) 成功酶切的关键是准备好模板DNA。DNA样品中不能含有有机溶剂(会使酶变性或产生星号货性),不能含有干扰酶活性的污染物质,不能含有高浓度的EDTA (TE中的EDTA 浓度较低,对Mg的浓度影响较小);同时要对DNA甲基化程度及其对酶切效率的影响要做到心中有数。 2) 选用合适的酶。根据酶切序列选用,特别注意选用甲基化对酶活性的干扰。 3) 正确使用和保存酶。酶需要保存在-20度的低温环境中,只是在需要用酶才从冰箱中取出来。运输和临时存放时需要将酶至于冰上。手拿酶管时不要接触酶管下步含酶的部分,移酶时尽可能用长TIP, 避免污染。用完后需要及时送回原处。注意:酶通常是最后加。 4) 反应体积需要根据实验目的定,常规的酶切一般要维持在10-50ul,酶切鉴定10-20ul就可以了。 5) 模板浓度问题:浓度过高,溶液黏度过大,酶不能有效扩散,酶切效果不会好。浓度过低,也会影响酶活性。 6)注意模板用量和反应体积的关系。对酶用量,模板用量,反应体积等要素的确定需要的是时间和经验的积累。 7) 酶切反应的各个组分加完后,需要用TIP小心混匀几次,short spin 一下就可以保温了。一般不能使用振荡器混匀。 8) 反应温度的选择。一般反应都用37度,但是Sma I 的最适合温度是25度,37度时酶仍表现出活性,但是效率下降50%。部分从耐热菌制备的酶需要在37度以上的温度反应,如Taq I的最适温度为65度,37度保温,效率仅为前者的1/10。 9) 反应时间的选择。一般酶切鉴定30分钟就可以了。要完全酶切可以采用少量的酶长时间反应,或较高的酶量短时间处理都可以达到。在使用高酶量的时候需要注意甘油的最终浓度不要超过5%,也就是说10ul的体系,酶的用量不要超过1ul。 10) 是否和如何终止反应?酶切鉴定之类的实验不需要特殊处理。灭活的手段:加入高浓度的EDTA;65度或80度热处理20-30分钟;部分从高温菌纯化出来的内切酶由于最适的反应温度比较高,热处理灭活不一定完全,需要用苯酚/氯仿/乙醇方法纯化;电泳回收也是实验室常用除酶的手段。 2.如果遇到酶切不动或切不完全,该怎么办? 要回答这么问题常常需要了解酶活性单位是如何确定,我们多次接到这样的问题:1个单位的酶能在60分钟内切1ug的DNA,为什么我们的DNA那么少切那么长时间也不能切开或切完全?从下面几个因素去考虑: 1)酶是否有活性:酶的活性单位通常是在60分钟酶切1ug lambda DNA或特定线状DNA 所需要的酶量。鉴定酶的活性高低不是用您待切的DNA模板,也不是别的公司的酶来判定。因为不同公司酶可能是从不同系统中纯化的,虽然识别位点相同,但是酶的特性可能是有差异的。鉴定酶必须使用使用说明书上认定的酶活确定的方式,通常需要用lambda DAN做模板来判定。同时如果酶对甲基化敏感,还需要用Dcm-, Dam-的DNA.不排除由于运输或分装不当导致酶活性下降,这种情况是很少发生。我们公司销售的SibEnzyme公司的酶,在分装前严格检验过,不合格的东西(很少)都退回原厂,所以不合格的产品是不会送到用户手头的。 2)模板性质是否清楚:如果DNA的类型变了所需要的酶量也不同。酶切效果与DNA的

常用限制性内切酶酶切位点汇总

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如何撰写科技计划项目申报书教学内容

如何撰写科技计划项目申报书 申报书的含义与作用 课题负责人在调查研究的基础上撰写的报请上级批准的选题计划。它主要说明这个课题应该进行研究,自己有条件进行研究以及准备如何开展研究等问题,也可以说是对课题的论证和设计。申报书是提高选题质量和水平的重要环节。 撰写申报书的基本过程(1) *选题:立足于单位的专业基础和前期研发工作,确定项目及研究内容。并围绕其内容深刻思考一段时间。要有基础,避免“白手起家”。鼓励联合申报。 *草拟研究大纲。仔细阅读,体会其中心思路所在。 *查阅有关中外文献,尽可能参考近五年的,尤其要关注发明专利和核心期刊。 *确定项目名称,名称要准确、规范、简洁,不能太长。一般少于20个字。 撰写申报书的基本过程(2) *一旦确定落笔时,尽可能不要中断地一气呵成写出,暂不考虑修改。 *然后进行修改、润色,也可请人审阅修改或提出意见。 *反复审阅、反复修改,并准备附件材料。 *懂得客观表述和闪现亮点之间的分寸把握,要善于运用附件材料达到佐证和呼应的效果。 申报书包含的内容 *题目及问题的提出 *立项依据(概况和发展趋势、研究目的和意义、知识产权、产业化前景)*研究内容(开发内容、关键技术、特色和创新、技术经济指标) *研究方法、技术路线及工艺流程 *工作基础和条件(知识产权等) *预期的成果、计划实施进程 一、为什么做? 研究的目的、意义也就是为什么要研究、研究它有什么价值。你要做的事情有意义吗?这一般可以先从现实需要方面去论述,指出现实当中存在这个问题,需要去研究,去解决,本课题的研究有什么实际作用,然后,再写课题的理论和学术价值。这些都要写得具体一点,有针对性一点。避免“宏大”、空洞、不着边际、泛泛而谈。 二、做什么? 1.首先要根据企业和个人实际情况,思考要做什么?能做什么? 2.你如何界定要做的事情范围?范围大小要合适。 3.围绕思路深入查阅相关文献,相关核心文章和发明专利,并和前期工作相结合。 4.内容符合题意,否则进行修改。

2013年生物化学与分子生物学考试大纲汇总

华中科技大学生物学硕士研究生入学考试《生化与分子生物学》 考试大纲 (2004-2012十年真题考点分布整理) 第一部分考试说明 一、考试性质 全国硕士研究生入学考试是为高等学校招收硕士研究生而设置的。其中,生物学(专业部分)由我校自行出题。它的评价标准是高等学校优秀本科毕业生能达到的及格或及格以上水平,以保证被录取者具有基本的生物学知识而有利于我校在录取时择优选拔。 二、评价目标 生物学(专业部分)考试在重点考查生物化学和分子生物学的基础知识、基本理论的基础上,注重考查理论联系实际的能力,说明、提出、分析和解决这些学科中出现的现象和问题。 ?正确地理解和掌握有关的基本概念、理论、假说、规律和论断 ?运用掌握的基础理论知识和原理,可以就某一问题设计出实验方案 ?准确、恰当地使用专业术语,文字通顺、层次清楚、有论有据、合乎逻辑地表述 三、考试形式和试卷结构 o答卷方式:闭卷,笔试,所列题目全部为必答题 o答题时间:180分钟 o题型比例:名词解释约15%;填空题约25%;简答和计算约30%;分析论述约30% 第二部分考查要点 一、分子生物学 (一)DNA(2008年简答:为什么DNA最适合做遗传物质?) 1、DNA的结构(2008年填空题:A,B,Z型DNA) DNA的构成,DNA的一级结构、二级结构、高级结构 2、DNA的复制(2012名词解释:半保留复制;2011年名词解释:冈崎片段;2011年论述:复制叉上进行的基本活动和参与的酶有哪些?;2010年论述:保持遗传信息稳定性和表达精确性的分子机制;2009年填空:DNA复制需要什么酶;2008年计算题;2008年简答:DNA连接酶功能?在DNA复制中的作用。2007年填空题:DNA拓扑异构酶;2005年问答:DNA合成需要DNA连接酶,而RNA合成不需要连接酶,分析

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