抗菌检测知识简介
抗菌检测报告
抗菌检测报告背景抗菌检测是一种检测细菌对抗生素的敏感性的方法，以帮助医生选择最适合的治疗方案。
随着抗生素的广泛使用，越来越多的细菌出现了耐药性，因此抗菌检测变得尤为重要。
分析在本次抗菌检测中，我们使用了标准的微生物培养和药敏试验方法。
首先，我们采集了患者的样本，如血液、尿液或伤口分泌物，并将其分别接种在含有营养物质的培养基上。
然后，我们将培养基放入恒温培养箱中，以提供适宜的温度和湿度条件，促使细菌生长。
细菌在培养基上生长后，我们进行了药敏试验。
我们在培养基上放置了含有不同抗生素的纸片，然后观察细菌对这些抗生素的敏感性和抵抗性。
通过观察细菌生长的程度和形态，我们可以判断细菌对抗生素的敏感性。
结果根据我们的抗菌检测结果，我们发现患者体内存在两种不同的细菌感染。
1.细菌A感染：–细菌A对抗生素X和Y敏感，但对抗生素Z抵抗。
–建议使用抗生素X或Y进行治疗，以消除细菌A感染。
2.细菌B感染：–细菌B对抗生素X、Y和Z都表现出抵抗性。
–建议进行进一步的检测，以确定其他有效的治疗方案。
建议根据我们的抗菌检测结果，我们提出以下建议：1.针对细菌A感染的治疗：–建议使用抗生素X或Y进行治疗，因为细菌A对这两种抗生素敏感。
–建议在治疗过程中密切监测患者的症状和细菌感染的变化。
2.针对细菌B感染的治疗：–由于细菌B对抗生素X、Y和Z都表现出抵抗性，建议进行进一步的检测，以确定其他有效的治疗方案。
–建议与专业的医疗团队合作，制定个性化的治疗方案，以最大程度地减少细菌B感染的风险。
3.预防措施：–推荐患者和医护人员遵守良好的卫生习惯，包括勤洗手、正确使用抗生素、避免过度使用抗生素等。
–建议定期进行抗菌检测，以及对医疗设施和器械进行消毒和清洁，以减少细菌感染的风险。
总结抗菌检测是一种重要的方法，可以帮助医生选择最适合的抗生素治疗方案。
通过我们的抗菌检测，我们发现患者体内存在两种不同的细菌感染，并提出了相应的治疗建议。
我们强调了预防措施的重要性，以减少细菌感染的风险。
抗菌试验
体外抗菌试验必须严格控制试验条件，使 其尽可能标准化 。
抗菌效力的测定 药品卫生质量的检查
药物含量测定
第一节 体外抑菌试验
检查药物的抗菌效能 体内试验 体外试验 广泛应用
一、常用的体外抗菌试验（antimicrobial test in vitro）
主要用于筛选抗菌药物或测定细菌对药物的敏感性，所以 也称药敏试验，常用最低抑菌浓度（MIC）表示，是指药 物完全抑制某种微生物生长的最低浓度。 试验大多在玻璃器皿中进行，优点是方法简便、需时短、 用药量少，不需要动物。 但是没有体内复杂的因素参与，故体内和体外抗菌试验结 果有时会不一致。
药物稀释成系列浓度
与琼脂培养基混合（1：9）铺平板 平板上接种多种试验菌（多点接种仪） 培养，观察试验菌的生长与否，判断MIC。
杀菌曲线（KCs） 不同抗菌药物的杀菌速度
（三）联合抗菌试验 检查两种或两种以上药物在联合使用时的相互作用以及抗菌药物 与不同pH或不同离子溶液的相互影响。
4．挖沟法
滤纸片法
打孔法
管碟法
挖沟法
液体~
（二）系列稀释法（serial dilution test）
固体~
微量稀释 法用微孔 稀释板代 替试管。
MIC
MBC
液体培养基稀释法
固体培养基稀释法
（1）平板法：同时测定多个试验菌的MIC （2）斜面法：适用于需长时间培养的试验菌或避免 孢子飞扬污染环境的霉菌。 平板法步骤：
抗菌测定国标标准
抗菌测定国标标准摘要：一、抗菌测定国标概述1.什么是抗菌测定国标2.抗菌测定国标的作用和意义二、抗菌测定国标的内容1.测定方法2.技术要求3.实验报告三、抗菌测定国标在实际应用中的意义1.对生产企业的影响2.对消费者的保障3.对行业发展的推动四、抗菌测定国标的发展趋势1.标准的更新和完善2.国际化合作与交流3.行业技术水平的提升正文：抗菌测定国标是我国对抗菌产品性能进行评价的权威标准，对于保证产品质量、指导企业生产、保障消费者权益等方面具有重要意义。
一、抗菌测定国标概述抗菌测定国标，即《抗菌性能测定方法》国家标准，是我国对抗菌产品性能进行评价的权威依据。
该标准规定了抗菌产品的抗菌性能测定方法、技术要求、实验报告等内容，为抗菌产品的设计、生产、检测、销售等环节提供了重要参考。
二、抗菌测定国标的内容1.测定方法：包括实验室常用的抑菌圈法、纸片扩散法等，为抗菌性能的检测提供了具体操作依据。
2.技术要求：对测定过程中的设备、试剂、样品等提出了明确要求，确保实验结果的准确性和可靠性。
3.实验报告：规定了实验报告的内容、格式、数据处理等要求，为生产企业、检测机构和消费者提供详细的实验数据。
三、抗菌测定国标在实际应用中的意义1.对生产企业的影响：抗菌测定国标为生产企业提供了明确的生产指导，帮助企业提高产品质量，降低生产成本，提升市场竞争力。
2.对消费者的保障：抗菌测定国标为消费者提供了选购抗菌产品的依据，有助于消费者辨别产品质量，保障自身权益。
3.对行业发展的推动：抗菌测定国标为整个抗菌行业提供了统一的技术规范，促进行业内部的技术交流和合作，推动行业整体技术水平的提升。
四、抗菌测定国标的发展趋势1.标准的更新和完善：随着科学技术的进步和行业发展的需求，抗菌测定国标将不断进行修订和完善，以适应新的技术和应用要求。
2.国际化合作与交流：我国将积极参与国际标准化组织的抗菌测定标准制定工作，推动国际间的合作与交流，提高我国在国际标准领域的影响力。
抗菌测试检测标准
抗菌测试检测标准
抗菌测试是评价物质抑制或杀灭细菌或其他微生物能力的方法。
下面是常见的抗菌测试方法和相关的标准：
1. 纸片扩散法（Disk diffusion method）：根据CLSI（Clinical and Laboratory Standards Institute）标准进行抗菌活性测试。
该
标准包括了对不同细菌株和药物的测试方法和结果解读标准。
2. 最小抑菌浓度法（Minimum Inhibitory Concentration, MIC）：根据CLSI或欧洲常用测试方法（EUCAST，European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing）进行细菌的
药敏性测试。
该测试可以确定药物对细菌的最低有效抑制浓度。
3. K-B法（Kirby-Bauer method）：也是一种常用的纸片扩散法，测定细菌对抗生素的药敏感性。
除了上述各种抗菌测试方法外，还有许多其他的标准和指南可供参考，例如：
- 美国药典（USP，United States Pharmacopeia）中的相关方法
规范。
- 欧洲抗菌药物开发委员会（EUCAST）的药敏性测试指南。
- 中国药典（ChP，Chinese Pharmacopoeia）中的抗菌药物相关标准。
这些标准和指南提供了在实验室中进行抗菌测试的具体步骤和结果的解释。
根据不同的应用领域和目的，选择合适的标准进行抗菌测试非常重要。
抗菌测定国标标准
抗菌测定国标标准一、光催化抗菌材料及制品抗菌性能术语和定义微生物：细菌、病毒、真菌等微生物。
抗菌性能：光催化抗菌材料及制品对微生物的生长和繁殖的抑制能力。
防霉性能：塑料材料及其制品对霉菌生长和繁殖的抑制能力。
二、抗菌性能的评定抗菌率：在一定时间内，样品对微生物生长和繁殖的抑制率。
以百分比表示。
微生物死亡率：在一定时间内，样品对微生物的致死率。
以百分比表示。
抑菌环：在培养皿中，样品对微生物生长和繁殖的抑制圈。
以毫米表示。
最小抑菌浓度（MIC）：样品抑制微生物生长和繁殖的最小浓度。
以百分比表示。
最大耐受浓度（MCC）：样品对微生物的最大耐受浓度。
以百分比表示。
三、试验方法和试验报告试验样品：选取具有代表性的样品，切割成规定尺寸和形状，表面清洁干净。
试验菌种：选取具有代表性的微生物菌种，如细菌、病毒、真菌等。
试验方法：采用规定的试验方法，如抑菌环试验、最小抑菌浓度试验等。
试验条件：根据不同试验方法的要求，设置适当的试验条件，如温度、湿度、光照等。
试验报告：记录试验数据和分析结果，编写试验报告。
四、塑料材料及其制品的防霉性能测试样品准备：选取具有代表性的塑料材料或制品，切割成规定尺寸和形状，表面清洁干净。
试验菌种：选取具有代表性的霉菌菌种，如黑曲霉、黄曲霉等。
试验方法：采用规定的防霉性能测试方法，如砂浆盘法、三角瓶法等。
试验条件：根据不同试验方法的要求，设置适当的试验条件，如温度、湿度、光照等。
防霉等级评定：根据试验结果，评定塑料材料或制品的防霉等级。
如何检测材料的抗菌防霉性能
如何检测材料的抗菌防霉性能？
抗菌防霉检测是检验抗菌防霉类产品质量是否过关的重要手段。
抗菌防霉检测分为定量检测和定性检测两种。
电器、医用材料、食品、化妆品包装等新材料都有新的抗菌防霉的功能需求，嘉峪检测网已经成功帮助一批生产企业完成了抗菌防霉的实验方案和测试。
下面我们来了解一下测试原理。
1、抗菌产品定量检测
定量检测的原理是将标准菌株定量接种于抗菌产品后，经过一定时间的培养，抗菌产品抑制或杀死标准菌株；而没有经过抗菌处理的对照样品接种标准菌株后，接种菌不会受到抑制或杀死，因此，根据测试菌数量的减少率可以定量评价抗菌效果。
根据检测方法和计算方法的不同，计算结果又可以分为抑菌率和杀菌率（对应杀灭对数值）。
在定量检测法中，根据测试菌液接种到试样上的方式不同，可分为振荡法、吸收法、悬液定量法、载体法等。
定量测试方法包括试样（包含对照样）制备、消毒、接种标准菌株、培养、一定时间后对接种菌进行回收并计数。
定量测试方法的优点是定量、准确、客观，缺点是时间长、费用高。
2、抗菌产品定性检测
定性检测原理是通过将抗菌样品与标准菌株以及琼脂相接触，经过一段时间培养，观察琼脂接触面有无微生物生长，以此来判断样品是否具有抗菌性能。
定性检测的优点是测试时间短、测试费用较低；但该试验不能定量测试抗菌产品抗菌活性的强弱，只能判定产品有无抗菌性能，而且测试重复性及稳定性相对较差。
3、防霉产品定性检测
按标准类型分类。
抗菌抗病毒常用实验研究方法知识
抗菌抗病毒常用实验研究方法细菌、病毒性疾病是目前国内外流行的主要传染病,尤其是近两年来,由冠状病毒引起的SARS及由流感病毒引起的禽流感给动物及人类带来的严重危害,是人所共知的"由于各种疫苗的不断出现,虽然一些细菌、病毒病已得到了有效的控制,但是其治疗尚无有效的解决方法因此研制高效、低毒的新型中药抗菌、抗病毒制剂已成为巫待解决的问题。
1、常用的抗菌方法1、1稀释法1、1、1试管稀释法培养基内抗生素的含量按几何级数稀释并接种适量的细菌，经孵育后，观察能引起抑菌作用最低抗生素浓度，称最低抑菌浓度(MIC)为该菌对药物的敏感度。
稀释法所获得的结果比较准确，常被用作校正其他方法的标准。
如以下黄贝贝等的青钱柳抗菌作用的实验研究和黄利权等的火绒草的抗菌活性研究的实验方法:1、应用试管稀释法,测定青钱柳提取物对试验菌的抑菌效果,检验不同浓度下青钱柳提取物对细菌、霉菌的抗菌作用。
结果:青钱柳提取物在体外对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等革兰氏阳性菌具有较强的抗菌作用;而对大肠埃希氏菌、铜绿假单孢菌等革兰氏阴性菌的抗菌作用不明显;对黄曲霉、烟曲霉等霉菌的抗菌作用不明显[1]。
2、采用试管稀释法,分别测定了火绒草水煎液、水提醇沉液、醇提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提水溶部分等7种提取物对大肠杆菌C83882、大肠杆菌C83903、大肠杆菌C83914、沙门氏菌C79-20、金黄色葡萄球菌Newbould S-305、金黄色葡萄球菌临床分离株等6株病原菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。
试验结果表明,火绒草醇提物及其石油醚部分和乙酸乙酯部分对两种金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用,其MIC为0114 mg/ml生药浓度,MBC为0127 mg/ml生药浓度,而其它部分对金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱。
火绒草醇提正丁醇部分和水溶部分对3株大肠杆菌和1株沙门氏菌具有较强的抑制作用,其MIC为2170 mg/ml生药浓度,MBC为2170 mg/ml 生药浓度,显示了较强的抗菌活性[2]。
抗菌测试检测标准
抗菌测试检测标准摘要：1.抗菌测试的背景和意义2.抗菌测试的主要方法3.我国对抗菌测试的标准要求4.抗菌测试在实际应用中的重要性5.未来抗菌测试的发展趋势正文：抗菌测试是在医学、卫生、日用品、建筑材料等领域中广泛应用的一种检测技术。
它可以用于检测物品或材料是否具有抗菌性能，为产品研发、生产、质量控制等提供科学依据。
目前，抗菌测试的主要方法有抑菌圈法、滤膜法、琼脂平板法等。
抑菌圈法是通过测定测试物质在平板培养基上形成的抑菌圈的大小来判断其抗菌活性。
滤膜法则是将测试物质涂布在滤膜上，通过测定滤膜对细菌的阻拦效果来评价其抗菌性能。
琼脂平板法则是将测试物质加入培养基中，观察细菌在含有测试物质的培养基上的生长情况，从而判断其抗菌效果。
我国对抗菌测试的标准要求非常严格，我国相关标准规定了各种测试方法的实验步骤、评价指标、实验条件等，确保了测试结果的科学性和准确性。
同时，我国还积极参与国际标准的制定，为国际抗菌测试领域的发展做出贡献。
抗菌测试在实际应用中具有重要意义。
例如，在医疗卫生领域，抗菌药物的合理使用对于治疗感染性疾病至关重要。
在日用品领域，抗菌性能是许多产品的重要卖点，如抗菌毛巾、抗菌餐具等。
在建筑材料领域，抗菌性能可以有效防止建筑物内部的细菌滋生，提高居住者的生活质量。
未来，随着科技的发展，抗菌测试将更加精确、快速、便捷。
例如，基于生物传感技术的抗菌测试方法已经取得了突破性进展，有望在不久的将来投入实际应用。
此外，随着大数据和人工智能技术的发展，抗菌测试的数据处理和分析也将更加智能化。
总之，抗菌测试作为一项重要的检测技术，在各个领域具有广泛的应用前景。
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日本国家标准JIS Z 2801:2000抗菌制品抗菌性能的检测与评价引言本标准是为规范抗菌制品抗菌性能的评价方法制定的，并于1998年12月在“生活相关新型（抗菌）功能制品会议”的报告上公布的，（亦称“抗菌制品的指导方针”）。
本标准规定了作为抗菌制品重要性能之一的抗菌性能的测试方法。
抗菌制品的其他重要性能，包括安全性、性能持久性以及制品标识则请参考“抗菌制品的指导方针”。
1. 范围本标准规定了抗菌制品（包括中间制品）表面抗细菌活性及效果的测试方法。
备注：本标准暂不包括抗菌制品的其他功能，如抗真菌性能和除臭性能。
2. 规范性引用标准下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
JIS K 0950 灭菌塑料培养皿JIS K 0970 微量移液器JIS K 3800 二级生物安全柜JIS K 8101 乙醇（99.5）JIS K 8150 氯化钠JIS K 8180 盐酸JIS K 8263 琼脂JIS K 8576 氢氧化钠JIS K 9007 磷酸二氢钾JIS K 9017 磷酸氢二钾JIS L 1902 纺织品抗菌性能的检测与评价JIS R 3505 玻璃量具3. 定义本标准中用到的主要术语定义如下：a）抗菌抑制制品表面细菌生长的状态。
b）抗菌整理为获得抗菌效果而进行的处理。
c）抗菌制品实施抗菌加工后的制品。
d）抗菌活性值抗菌制品和未处理制品在接种细菌培养后，得到活菌数目对数的差值。
参考资料：JIS L 1902的抑菌（静菌）活性和本标准中的抗菌活性概念相同。
e）抗菌效果根据抗菌活性值判定抗菌制品抗菌效果。
4.抗菌效果按本标准的测试方法，抗菌制品的抗菌活性值应不小于2.0，超过2.0的数值若取得各相关单位同意也可采用。
5.试验方法5.1 纺织制品测试方法抗菌纺织制品的检测方法根据JIS L 1902 : 8（定量法）测定5.2 塑料等制品的测试方法适用于非纺织制品，如塑料制品、金属制品、陶瓷制品等。
根据纤维制品的形状和用途也可采用5.1 的方法测试。
5.2.1 试验菌种试验所采用的菌种见下，需采用下述细菌中的每一种：a) 金黄色葡萄球菌b) 大肠杆菌试验所用菌株举例如表1所示。
如从有别于表1的机构获取菌株，则该机构必须是国际菌种保藏中心（WFCC: World Federation of Culture Collection）的成员或日本菌种保藏协会（JSCC：Japan Society of Culture Collection）的成员，并且菌株必须和表1相同。
5.2.2 化学试剂、材料和器材除非另有说明，本试验方法所用的化学试剂、材料和器材如下所示。
乙醇（C2H5OH）符合JIS K 8012规定的一级或更高牛肉膏微生物试验用蛋白胨微生物试验用氯化钠符合JIS K 8150纯化水符合日本药典第十三次修订版要求琼脂符合JIS K 8263酵母浸膏微生物试验用胰蛋白胨微生物试验用葡萄糖微生物试验用酪蛋白胨微生物试验用大豆蛋白胨微生物试验用卵磷脂微生物试验用非离子表面活性剂聚山梨醇脂（吐温80）磷酸二氢钾符合JIS K 9007磷酸氢二钾符合JIS K 9017氢氧化钠符合JIS K 8576盐酸符合JIS K 8180棉塞等棉制，或硅胶、金属、莫顿塞等白金接种环端部直径约为4mm环干热灭菌器可在160-180℃工作蒸气消毒锅可保持121℃并在103KMPa保压安全柜符合JIS K 3800的规定洁净台微生物试验用移液管符合或等同于JIS K 0970 或达到JIS R 3505中规定的A级培养箱温度控制精度±1℃培养皿玻璃材质，内直径90mm或遵照JIS K 0950中90A或90B规定洗脱袋微生物试验用Stomacher 微生物试验用薄膜不影响微生物生长并且不吸水的材料，厚度无明确规定，但要求附着性好5.2.3 灭菌方法a) 干热灭菌放入干热灭菌器在160-180℃下灭菌30-60分钟注意：灭菌后，如果棉塞或包装纸不小心被水弄湿，相关器皿请不要继续使用。
b) 高压蒸汽灭菌在灭菌消毒锅中注入水，将待灭菌的物品装入筐中，并放于消毒锅架子上，盖紧，加热，在121℃或103Kpa下保持15-20分钟。
停止加热，然后使其自然冷却到100℃以下，打开排气阀放出蒸汽，打开盖，取出灭菌物品。
必要时放入洁净台或安全柜中冷却。
为避免灭菌锅受培养物质或化学品污染，用中性洗涤剂洗涤灭菌锅，并用水冲洗干净。
c) 火焰灭菌将待灭菌的物品置于由燃气或酒精燃烧而产生的火焰上，如对于白金接种环应加至红热，对于试管则在火焰上烤2-3秒钟。
d) 器材准备用碱性或中性洗涤剂洗刷试管、烧瓶等器具，充分冲洗，干燥后干热灭菌或蒸汽灭菌后使用。
5.2.4 培养基等使用下列培养基，如商品培养基和此处介绍的培养基组成相同，则也可使用商品培养基。
a）营养肉汤将3.0g牛肉膏、10.0g蛋白胨、5.0g氯化钠溶于1000ml蒸馏水或去离子水中，放入锥瓶、混合、充分溶解后，用盐酸或氢氧化钠溶液调节其pH为7.0-7.2（25℃），使用前，将其分别注入试管，加上棉塞，然后进行高压灭菌。
若配好后不立即使用，要在5℃～10℃下保存。
不要使用配制完存放一个月或以上的培养基。
b）营养琼脂将5.0g牛肉膏、10.0g蛋白胨、5.0g氯化钠和15.0g琼脂，加入1000ml蒸馏水或去离子水中，置入锥瓶、混合并放入沸水浴中充分溶解。
用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节其pH为7.0-7.2（25℃），加上棉塞，然后进行高压灭菌。
若配好后不立即使用，要在5℃～10℃下保存。
不要使用配制完存放一个月或以上的培养基。
c）平板计数琼脂将2.5g酵母粉、5.0g胰蛋白胨、1.0g葡萄糖和15g琼脂加入到1000ml 蒸馏水或去离子水中，置于锥瓶中混合并在沸水浴中充分溶解。
然后用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH为7.0-7.2（25℃），加上棉塞，然后进行高压灭菌。
若配好后不立即使用，要在5℃～10℃下保存。
不要使用配制完存放一个月或以上的培养基。
d）斜面培养基将6-10ml加热溶解的营养琼脂b)注入试管，塞上棉塞并用高压蒸汽法灭菌。
灭菌后的试管在洁净间中以和水平面成15°倾角放置来让其凝固。
若配好后不立即使用，要在5℃～10℃下保存。
如没有冷凝水出现，将其溶解，并凝固后使用。
不要使用配制完存放一个月或以上的斜面培养基。
e）SCDLP肉汤将17.0g酪蛋白胨、3.0g大豆蛋白胨、5.0g氯化钠和2.5g磷酸氢二钠、2.5g 葡萄糖和1.0g卵磷脂加入到1000ml蒸馏水或去离子水中，置于烧瓶，加7.0g非离子表面活性剂以促进溶解。
用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节其pH为6.8-7.2（25℃）.使用此培养基时，将其分散到试管中或烧瓶中，将棉塞塞上，然后用高压湿热法灭菌。
若配好后不立即使用，要在5℃～10℃下保存。
不要使用配制完存放一个月或以上的SCDLP肉汤。
f）磷酸盐缓冲溶液将34.0g磷酸二氢钾放入容量瓶中，加入500ml蒸馏水或去离子水已将其充分溶解，用氢氧化钠溶液调节其pH为6.8-7.2(25℃),然后加入蒸馏水或去离子水将溶液定容到1000ml。
使用时，取部分溶液到试管或烧瓶中，塞上棉塞，并加入7.0g 非离子表面活性剂。
用盐酸或氢氧化钠溶液调节其pH为6.8-7.2（25℃）。
使用此溶液时，将其分装至试管或烧瓶中，塞上棉塞，然后用高压湿热法灭菌。
若配好后不立即使用，要在5℃～10℃下保存。
不要使用配制完存放一个月或以上的磷酸盐缓冲溶液。
g）磷酸盐缓冲生理盐水溶液用浓度为0.85%的氯化钠溶液稀释磷酸盐缓冲溶液至体积比800倍。
当使用此溶液时将其分装至试管或烧瓶中，塞上棉塞，然后用高压湿热法灭菌。
若配好后不立即使用，要在5℃～10℃下保存。
不要使用配制完存放一个月或以上的磷酸盐缓冲生理盐水溶液。
5.2.5 细菌的保藏在无菌条件下转接试验细菌，必要时要使用生物安全柜。
一手同时拿着保藏菌和5.2.4 d)的待接种斜面培养基，另一手拿接种环，并用拿接种环的手拔开试管的橡胶塞。
在火焰上对试管口灭菌，并对接种环灭菌，然后将接种环的头部放入斜面培养基的冷凝水中冷却。
用接种环从细菌生长面上刮下细菌，并用划线法接种到斜面培养基上。
用火焰再次对试管口部进行消毒并塞上棉塞。
用火焰对接种环进行消毒。
在35±1℃下对接种后的斜面进行24-48小时培养，然后在5-10℃保藏。
一个月内将其接种到新的斜面（以此类推），但接种次数从菌种中心得到的细菌算起不应超过10代。
如保存时间达到或超过一个月，不可进行继代培养。
备注：如图1将接种环端部插入冷凝水中分散细菌，用接种环从底部拉一条线到上部，或将接种环再次插入到冷凝水中画一条折线到顶端。
注意：如细菌保藏机关提供的细菌经过冻干法或冷冻法用于长时间保存，从原始保存菌制备保藏细菌的次数也应包括在细菌培养代数之内。
如使用此保藏菌株，则其继代培养次数不应超过10减去保藏菌的代数。
5.2.6 试验操作细菌操作必须在无菌条件下进行，试验菌注意不能对试验操作人员、设备和环境构成污染，如有需要则使用生物安全柜。
a）细菌前培养用接种环从5.2.5的保藏细菌的培养基中取1环细菌接种到5.2. 4 d)的斜面培养基上，35±1℃条件下培养16-24小时。
从这一培养物上，再取一环细菌到新的斜面培养基上，35±1℃条件下培养16-20小时。
b）样片准备从制品上切取边长为50±2mm，厚度不大于10mm[3]的方块，作为标准样片。
空白对照样[4]6块[5]、抗菌样片3块。
如不能得到空白对照样，则利用5.2.2的薄膜。
密切注意样片和样片制备过程中的微生物污染以及制品的污物污染。
最好从制品上采集样片，如由于制品的形状的原因不能从制品采集样片，则利用相同的原料和工艺单独制备样片。
备注：[3]如难以或不能将制品切成50±2mm，厚度不大于10mm的方块，也可采用非标准形状和尺寸的样片，这一样片应该可以在其上覆盖400-1600mm2的薄膜。
[4]从空白样或薄膜制得的样片。
[5]6个未抗菌处理样片中，3个用于接种后零时间记数，另外3个用于接种后培养24小时后记数。
c）样片清洗用纱布或脱脂棉蘸酒精轻轻擦拭b)中样片2-3次，并干燥彻底。
若上述处理会导致样片软化、样片表面涂层溶解及组分溶出等现象，则认为此种处理将影响试验结果，可采用其他方法处理或直接试验而不进行任何处理。
d）接种菌液的制备将5.2.4 a）的营养肉汤稀释500倍，用氢氧化钠溶液或盐酸溶液调节pH至6.8-7.2,然后高压灭菌，作为1/500NB。
将a)中的前培养物取1环均匀分散到少量的1/500NB中，采用显微镜观察法或其它合适的方法估计细菌数目，并用1/500NB稀释菌液至细菌浓度为(2.5～10)×105cfu/ml,以此作为试验用菌液。