植物体内硝态氮含量的测定

二、植物体内硝态氮含量的测定

硝态氮是植物最主要的氮源。 植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况， 作为土壤肥氮肥的指标。 测定植物体内的硝态氮含量， 不仅能够反映出植物的氮素营养情况， 对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。 一）原理

贮于棕色瓶中。置冰箱保存一周有效。

三）实验步骤

1. 标准曲线的制作

10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm 的系列标准溶液。

0.11cm 3,分别放入刻度试管中，以 0.11cm 3无离子水代替标准溶

液作空白，再分别加入 0.4cm 3水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置

20分钟后再加入8%NaOH 因此可 而且

色， 支； 个； 锅1 在浓酸条件下， NO 3- 与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（ 在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。

二）仪器与用具

PH>12) 呈黄 1）722 型分子光光度计 1 台；（2）电子顶载天平 1 台（感量 1/ 万）；（ 3）刻度试管 20cm 326

4）刻度吸管 0.1cm 3. 0.5cm 3. 5cm 3. 10cm 3 各 1 支；（ 5 ）容量瓶 50cm 3 8 个；（6）容量瓶 25cm 33

（7）小漏斗（为5cm 3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝

个；（ 12 ）玻璃塞；（ 13 ）定量滤纸 7cm 。

试剂：

500ppmNO 3 标准溶液精确称取烘至恒重的

KNO 3 0.7221 克溶于无离水中，定容至 200cm 3。 5% 水杨酸一硫酸溶液 称取 5 克水杨酸溶于 100cm3, 浓硫酸中（密度为 1. 84 ），搅拌溶解后，

8% 氢氧化纳溶液 称取 10 克氢氧化纳溶于

1dm 3 无离子水中即可。

1 ）吸取 500ppmNO 3- 标准溶液 33 1cm . 2cm. 3cm 3. 4cm 3. 6cm 3. 8cm 3. 10cm 3. 12cm 3 分别放入 501cm 3

容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成 2 ）吸收上述系列标准溶液

溶液9. 51cm 3摇匀冷却至室温，显色液总体积为101cm3。

(3)以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。以NO-N浓度为横坐标，吸光度为纵坐标,

绘制标准曲线。

2. 样品中硝酸盐的测定

(1)样品液的制备，取一定量的植物材料剪碎混匀后，精确称取2-3克分别放入三支刻度试

管中, 加入10cm3无离子水，用玻璃塞封口，置入沸水浴中提取30分钟，到时间后取岀，用自来水

冷却, 将是取液过滤到25cm3容量瓶中，并反复冲洗残渣，最的定容至刻度。

(2)样口液的测定吸取样品0.1 cm分别于三支刻度试管中，然后加入5%水杨酸一硫酸溶液0.4 cm3,混匀后置室温下20分钟，再慢慢加入9. 5 cm 3 8%NaOH溶液，待冷却至室温后，以空白

作参比，在410nm波长下测期吸光度。在标准曲线上查得或用回归方程计算岀NO--N浓度，再用下公式计算其含量。

NSN含量(A畝鲜重)

标准曲线上查得或回归方程计算得曲度X牒|备

祥品鲜重

旱作物组织中硝态氮的测定一一硝酸试粉比色法

1. 目的

作物根系从土壤吸收的硝态氮，一部分很快参加蛋白质的合成但仍有相当数量的硝态氮是在向

地上部分转运途中逐步转化的。特别是某些旱作物叶柄硝态氮的水平, 在一定范围内反映了当时体

内的氮素营养水平和土壤供氮状况。定期检测作物适当部位的硝态氮含量的水平，可以为作物的施

肥和促控措施等提供一些依据。

本方法是基二锌在酸性条件下产生氢气，将硝酸根还原成亚硝酸根, 亚硝酸根对氨基苯磺酸和

a-萘胺作用，形成红色偶氮染料，在一定范围内可按颜色(玫瑰红)深浅估测NQ-N含量。

灵敏度范围为0.5-2Oppm，其反应一定要在PH5左右条件下进行，在碱性条件下不显色或显色

不明显。

2. 材料和试剂

(1 )硝酸试粉称硫酸钡50g，分成数份，分别与硫酸锰( MnS04?"。)5g，锌粉1g，对氨基苯磺酸2g，a-萘1g，在研钵中研细混匀，最后与37. 5g柠檬酸一起研磨均匀，贮于暗色瓶中，防

潮避光。此试粉灰白色，若变为粉红色，则不能使用。

(2)PH5柠檬酸缓冲液称取化学纯柠檬4. 31g，柠檬酸钠 6. 86g，溶于500ml蒸馏水中(溶

液必须新鲜酸置)。

(3 )硝态氨标准溶液称取7. 22g分析纯硝酸钾加水定容到1000ml，即为1000ppmNo-N。

3. 方法与步骤

(1)取样清晨在待测田块中，选取有代表性的植株10-20株的敏感部位，用湿布擦净，剪碎,

榨汁备用。

(2)测定于15ml刻度试管中，加入5mlPH5. 0的柠檬酸缓冲液，滴入一滴组织汁液，摇匀

加入0.2g硝酸试粉，塞紧，纵向摇动试管1分钟(200次/分)，静置15分钟后，与硝态氮试管

法比色卡或标准色阶溶液进行比较，目测硝态氮ppm 数。

(3 )结果计算

植株组级f^NOyN含童(ppm)二标准色阶相当NO3'N〔ppm)X丄*

其中：V1-显色溶液的ml数；

V2- 所取汁的ml数(按每毫升20滴计)