尿酸酶概述
【疾病名】高尿酸血症肾病【英文名】hyperuricemicnephropathy【缩写
【疾病名】高尿酸血症肾病【英文名】hyperuricemic nephropathy【缩写】【别名】gouty kidney；nephropathy caused by hyperuricemia；尿酸肾病；痛风肾【ICD号】N15.8【概述】随着我国人民生活水平的提高和寿命延长、人口老龄化，高尿酸血症和痛风发病率正迅速增加。
临床上，高尿酸血症常伴有高尿酸尿症，无论高尿酸血症还是高尿酸尿症，均可使尿酸(盐)在肾组织沉积引起肾损害称尿酸肾病。
尿酸和尿酸盐可引起痛风、急性尿酸肾病(acute uric acid nephropathy)、尿酸性肾结石、慢性痛风肾病(chronic gouty nephropathy)以及无症状性高尿酸血症等。
1960年，Talbot和Terplan的研究结果认为痛风的唯一本质性病理学特征是尿酸晶体的出现，肾脏的病理表现有显微痛风石、肾硬化和尿路感染。
现认为肾脏的显微痛风石是痛风肾(gouty kidney)本质性病理特征。
关于痛风和肾疾病之间的关系，需要认识两种不同的综合征：一种是由原发性肾疾病并发痛风性关节炎，如铅肾病引起痛风；另一种是由痛风引起肾脏病变。
最早记录的痛风性肾损害可追溯到公元2世纪。
17世纪Sydenham记载了“痛风时肾脏有结石生成”，19世纪注意到痛风病人有蛋白尿，Garrod发现本病肾小管间有尿酸晶体沉积。
1930年的统计结果，痛风患者肾炎发生率为30%，因并发尿毒症而死亡的病例占8%，这些病例都有超过10年的痛风关节炎病史，伴发的全身性血管疾病和高血压也对肾脏病变有影响。
【流行病学】本病随着人口老龄化及生活状态的改变，近年来发病率迅速增加，但具体统计资料不详；各年龄均有发生，但以中年以上男性多见。
1930年的统计结果，痛风患者肾炎发生率为30%，因并发尿毒症而死亡的病例占8%，这些病例都有超过10年的痛风关节炎病史。
【病因】引起尿酸肾病与痛风肾病的病因是血和(或)尿中尿酸浓度增高，而使持续性尿酸浓度增高的许多因素有：1.尿酸生成增加(1)遗传因素：酶基因突变，如次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺乏。
2024年度高尿酸血症ppt完整版
针对痛风性关节炎的免疫治疗研究逐渐深入，如生物制剂、细胞疗法 等，为痛风治疗提供了新的思路。
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未来发展趋势预测
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个体化治疗策略
随着精准医学的发展，未来高尿酸血症的治疗将更加注重个体化策略，根据患者的基因型 、代谢特点等制定针对性的治疗方案。
多学科协作诊疗模式
疾病的风险。
控制危险因素
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针对高血压、高血脂等危险因素，采取相应的治疗措施，如降
压、降脂等。
健康生活方式
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倡导健康的生活方式，包括戒烟、限酒、合理饮食、适量运动
等。
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代谢综合征管理策略
综合评估
对患者进行全面的代谢综合征评 估，包括血糖、血脂、血压等指
标。
个体化治疗
根据患者的具体情况，制定个体 化的治疗方案，包括药物治疗和
饮水充足
保持每日尿量在2000ml以上 ，有助于尿酸排泄。
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运动处方制定和执行情况跟踪
有氧运动
如散步、游泳、慢跑等，可提 高身体代谢水平，促进尿酸排
泄。
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运动强度和时间
根据患者具体情况制定个性化 的运动处方，避免剧烈运动导 致关节损伤。
运动频率和持续时间
建议每周进行3-5次运动，每次 持续30-60分钟。
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尿酸是嘌呤代谢的终产物，主要 由细胞代谢产生的核酸和其他嘌 呤类化合物经酶的作用分解而来 。
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发病原因及危险因素
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发病原因
尿酸生成过多或排泄减少导致血 尿酸水平升高。
危险因素
包括遗传、饮食、生活习惯、药 物使用等多个方面。
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尿酸酶
6.PEG修饰如何改变尿酸酶的各类酶学性质
8.PEG修饰对尿酸酶结合金属离子能力的影响 尿酸酶对金属阳离子结合能力较强，铁离子对酶活 有促进作用，而镁离子，铜离子和锰离子 对尿酸酶活 性有不同程度的抑制作用，而 PEG尿酸酶与金属离子 结合的能力相对较弱。 9.PEG修饰对尿酸酶在不同缓冲体系中活性的影响 相对于乙酸盐缓冲体系，尿酸酶在磷酸盐缓冲体 系中，等电点附近酶活有所下降，酶活降至乙酸盐缓 冲体系中酶活的 50%，而不同缓冲体系对于 PEG尿酸 酶则没有明显的影响。 10.PEG修饰对尿酸酶抗胰蛋白酶水解能力的影响 尿酸酶在作用200 min后,活性降至最高值的20%;而 修饰的尿酸酶仍保留70%的活性。
2.尿酸酶代谢反应及其对生理活动的影响
在不同的生物体中,尿酸酶代谢反应有所差 异，鸟类和爬行类动物的排泄方式是形成无毒 性且不溶性的尿酸悬浊液排出体外。人类和其 他高等的灵长类动物,由于物种的突变，不能 编码尿酸酶基因，所以不能产生尿酸酶。
有部分学者提出，正是由于 这种缺陷才导致了一种选择优 势，即——因为尿酸酶的缺乏 导致了血清中尿酸含量增加， 尿酸充当着生理活动中重要的 抗氧化剂。3.尿酸酶在Fra bibliotek床治疗上的应用
痛风治疗的极佳选择
根据高尿酸症的形成机理，服用尿酸酶能够在短时间
内有效降低患者体内的尿酸水平，并克服了别嘌呤醇的 副作用。
尿酸酶已经作为治疗痛风的理想 药物上市，并得到了好评。
4.尿酸酶的应用的研究进展
1
上世纪 90 年代，尿酸 酶作为治疗痛风的药物 首先在欧洲上市，它能 够在短时间内有效降低 患者体内的尿酸水平， 但作为一种外源性的蛋 白质，仍存在着易被体 内酶水解，稳定性低、 血浆半衰期短等缺点， 且抗原性较强，易产生 过敏反应或耐受期很短 的问题，因此大大限制 了其临床使用。
高尿酸血症和痛风的诊治进展
代谢综合征患者中70%同时合并HUA， 因此提出代 谢综合症概念的Reaven教授提出将HUA纳入代谢综 合征 。 我国一项1600人的横断面调查显示，在我国代谢性 危险因素人群中HUA的患病率男性和女性分别为 20.58%和30.55%。 HUA合并3种以上代谢性危险因素（肥胖、高血压、 高胆固醇血症、高甘油三酯血症、低高密度脂蛋白血 症）的比例男性和女性分别高达76.92%和67.64%。 提示高尿酸血症与代谢性心血管危险因素存在着密切 的复杂联系
Drugs. 1999, 58 suppl1: s19-s20 首都医科大学学报. 2005，26（4）：520-524
尿酸是心血管事件的独立危险因素素干预研究）入选中老年男性 12866例随访16年 PIUMA研究（原发性高血压患者并发症和死亡率观察登 记研究）入选2363例无并发症的中年高血压患者随访 14年（平均5年） 荷兰Erasmus大学医学中心的Rottedam队列研究入选 年龄大于55岁老年人4395例随访8.4年， 美国worksite研究（收缩压治疗计划）入选7978例轻 中度高血压患者随访6.6年
从 头 合 成 鸟苷酸 补 救 合 成 鸟嘌呤 降 解
次黄嘌呤核苷酸
HGPRT
腺嘌呤
XOR
次黄嘌呤 黄嘌呤 尿酸
8-羟基腺嘌呤
XOR
2,8-二羟基腺嘌呤
PRPS 磷酸核糖焦磷酸合成酶 XOR 黄嘌呤氧化还原酶
HGPRT 次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 APRT 腺嘌呤磷酸核糖转移酶
◆ 尿酸的分解
1/3尿酸在消化道由大肠细菌分解排出
急性发作期
非甾体抗炎药（NSAIDs) 秋水仙碱(colchicine) 糖皮质激素（glucocorticoids) 及早、足量使用，症状缓解后减停 急性发作时，不开始给予降尿酸药 已服用降尿酸药者出现急性发作不需停药
尿酸酶试纸的制备方法
尿酸酶试纸的制备方法概述尿酸酶试纸是一种常用的临床检测工具，用于检测尿液中的尿酸水平。
本文将详细介绍尿酸酶试纸的制备方法，包括试纸材料的选择和制备步骤等。
试纸材料选择制备尿酸酶试纸所需的材料包括尿酸酶、染色剂、试纸基板等。
以下是一些常用的材料选择建议：1.尿酸酶：尿酸酶是制备尿酸酶试纸的关键成分之一。
建议选择具有较高活性和稳定性的尿酸酶，以保证试纸的灵敏度和准确性。
2.染色剂：染色剂用于与尿酸反应产生颜色，从而判断尿液中尿酸的浓度。
可以选择一种与尿酸反应高度特异的染色剂，如乙酰丙酮柠檬酸含胱氨酸铵盐。
3.试纸基板：试纸基板将上述材料固定在其表面，通常选择无色、无毒的吸收性纸作为基板。
制备步骤制备尿酸酶试纸的具体步骤如下：步骤一：准备工作1.准备所需材料和设备，包括尿酸酶、染色剂、试纸基板、离心机、取样棒等。
2.清洁工作区和实验器材，确保实验操作的无菌环境。
步骤二：制备尿酸酶溶液1.将尿酸酶加入适量的缓冲液中，使其浓度适当。
可以根据需要进行稀释。
2.在室温下轻轻摇动或轻轻搅拌，使尿酸酶均匀溶解。
步骤三：制备染色剂溶液1.将染色剂加入适量的溶剂中（如水），使其浓度合适。
建议根据需要进行调整。
2.用离心机等设备将染色剂溶液离心，去除其中的悬浮固体物质。
3.将澄清的染色剂溶液转移到干净的容器中，备用。
步骤四：涂覆尿酸酶和染色剂1.将试纸基板浸泡在尿酸酶溶液中，待其吸收尿酸酶。
2.取出浸泡过的试纸基板，轻轻晾干或用吸水纸吸走余液。
3.将试纸基板浸泡在染色剂溶液中，待其吸收染色剂。
4.取出浸泡过的试纸基板，轻轻晾干或用吸水纸吸走余液。
步骤五：切割和包装1.使用切割设备，将试纸基板切割成适当大小的试纸片。
2.将试纸片装入密封容器或包装袋中，以防止水分和污染。
步骤六：质量控制1.从制备好的尿酸酶试纸中随机抽取一些样品，进行质量控制测试。
2.使用已知浓度的尿酸溶液，浸泡试纸片并观察颜色变化。
3.根据颜色变化的程度，与已知浓度的尿酸溶液进行比对，评估试纸的灵敏度和准确性。
专14肾功能及早期肾损伤检验
【临床意义】
Ccr降低可反映肾小球的早期损害，并可根据其降低的程度来 判断肾小球滤过功能损伤程度：Ccr也用于指导治疗。
（三）血清尿酸的测定
来自体内和食物中嘌呤代谢的最终产物，主要从肾脏排泄。 血尿酸浓度受肾小球滤过功能、肾小管重吸收及分泌功能的 影响
第四节 肾功能特殊检验
一、反映肾小球滤过功能的实验
肾清除率： 指单位时间内多少毫升血浆中的某物质经肾脏清除。 内生肌酐清除率
若某物质由肾小球滤过后，既不被肾小管重吸收又不被肾小管所分泌， 那么它的肾清除率可以反映肾小球滤过率（GFR）。
在控制外源性肌酐摄取的情况下，体内肌酐产量恒定，并且由 于前述肌酐在肾脏中的排泄方式，故临床上通过内生肌酐清除率 近似地反映肾小球滤过功能，称为内生肌酐清除率。
测定方法：免疫学方法
参考区间：
临床意义
二、反映肾小管重吸收功能的试验： （一）尿酶检验 1、肾损害和抗生素毒性的酶：NAG 2、尿路感染：NAG、GRS 3、肾肿瘤：LDH、ALP、GRS 4、肾排斥反应：LYS、GRD、NAG、GGT (二)酚红排泄实验（PSP） 方法：注射一定量的酚红，测定2小时内尿中
维生素C、丙酮、乙酰乙酸、α-酮酸、葡萄糖、蛋白质以及 头孢菌素类抗生素、强心甙、甲基多巴等
排除假肌酐的干扰：
①吸附法 ②速率法 ③二次读数法 ④在手工操作中制备无蛋白滤液或加入十二烷基硫酸钠去除 蛋白质干扰，在连续流动自动化生化分析仪中可采用透析器 清除蛋白质。 ⑤在缓冲液中加入硼酸盐消除葡萄糖、维生素C的干扰。
此外，肾脏也是一些激素的代谢场所靶器官
第二节 肾脏功能试验
血清尿素、肌酐、尿酸的测定 尿液总蛋白、微量蛋白的测定 尿液pH、相对密度及渗透量的测定 其 它
[重点]尿酸酶概述
![[重点]尿酸酶概述](https://img.taocdn.com/s3/m/7590cb16b42acfc789eb172ded630b1c59ee9b3f.png)
PEG修饰尿酸酶在医药领域的应用摘要：尿酸酶是生物体内嘌呤降解代谢途径中的一种酶，在鸟类爬行类和不包括人在内的灵长类动物体内，能催化尿酸氧化,生成尿囊素和过氧化氢。
而痛风是长期嘌呤代谢障碍,血尿酸增高引起组织损伤的一组异质性疾病。
尿酸酶作为一种外源性的蛋白质，存在着易被体内酶水解、稳定性低、血浆半衰期短、抗原性较强、易产生过敏反应或耐受期很短的问题，因此大大限制了其临床使用。
而PEG修饰可解决天然尿酸酶存在的诸如此类的问题。
PEG 修饰使尿酸酶的最适PH往中性偏移、最适温度反应曲线展宽、与底物亲和力增加但最大反应速率降低、在低离子强度条件下更加稳定、对尿酸酶结合金属离子及阴离子的能力有弱化作用。
研究结果显示:PEG修饰不仅可以通过屏蔽效应改善尿酸酶的药代动力学性质，也可能通过影响尿酸酶亚基解离和亚基表面电荷分布等性质而影响尿酸酶的酶学性质。
这些结果为新药开发PEG尿酸酶提供了基础。
关键词：尿酸酶；痛风；尿囊素；PEG修饰；酶学性质。
一、关于尿酸酶尿酸酶是生物体内嘌呤降解代谢途径中的一种酶，在鸟类爬行类和不包括人在内的灵长类动物体内，其以分子氧作为受体催化尿酸氧化,生成尿囊素、二氧化碳和过氧化氢。
尿酸酶首先在牛的肾脏中发现。
随后在动物、植物、真菌、酵母和细菌中均发现有此酶的存在。
作为重要的氧化剂：有学者提出，正是由于缺乏尿酸酶导致了一种选择优势，因为尿酸酶的缺乏导致了血清中尿酸含量增加，尿酸充当着生理活动中重要的抗氧化剂。
尿酸累积形成高尿酸血症进而出现痛风等系列疾病：尿囊素在体内具有良好的溶解性，不发生积累而直接排出体外。
以尿酸作为嘌呤代谢的终产物，体内嘌呤代谢紊乱可使尿酸水平异常升高而形成高尿酸血症，而尿酸及其盐类在血液中的低溶解度和易沉积性，使得高尿酸血症成为痛风等系列疾病和肿瘤治疗中出现急性肾衰竭的直接原因，根据痛风发生的生化机理，尿酸酶应是治疗该病的理想药物。
二、尿酸酶在临床治疗上的应用痛风是长期嘌呤代谢障碍，血尿酸增高引起组织损伤的一组异质性疾病。
第六章 微生物与酶制剂
微环境是指在固定化酶附近的局部环境，而把主体溶 液称为宏观环境。
固定化酶制备的一般方法及特点
关键在于选择适当的固定化方法和必要的载体以及稳定
性研究、改进。
1． 四大类方法：
吸附法（包括电吸附法）
结合法（无机多孔材料） 交联法（双功能试剂） 包埋法（微胶囊法）
各类固定化方法的特点比较:
其他品种
三． 四． 五． 六． 七． 八． 九． 十． ß -淀粉酶 葡聚糖酶 转苷酶 果胶酶 蛋白酶 木聚糖酶 脂肪酶 纤维素酶
用途 食品加工 业
作用 1生产麦芽糖 2果汁提取 3生产高甜天冬精 4生产果聚糖 5果实防霉 1降解纤维素 2分解地下水污染物-三氯乙烯 3纸浆漂白及废糖蜜水处理 4原油脱硫，降低空气污染 1生产丙烯酰胺 2在特殊条件下将煤转变为液 体燃料 1用于诊断心脏病和肝病 2用于分析血清中的尿酸浓度 3用于测定血清中的胆红素水 平
五、 酶制剂在饲料工业中应用
酶作为饲料添加剂的研究及应用发展很快，范 围也越来越广。酶制剂由单一型转向复合型， 多种酶搭配使用，起到互补作用，效果更加显 著。进一步开发活性强、价位低的专用酶制剂 是发展的一个趋势。 酶制剂具有作用效果显著、效益高、安全无毒， 能够最大限度地提高饲料的利用率和消化率， 增加某些有限制用量的饲料原料的使用，进一 步扩大非常规饲料资源的开发，促进动物的生 长，减少动物体内氮、磷及矿物质的排泄量， 减轻对环境的污染。在可持续发展的农业中， 最有效地使用非常规饲料和当地的饲料资源具 有重大意义。
葡萄糖异构酶——世界上生产规模最大的一种固定化酶。
用吸附法、结合法、凝胶包埋法等进行固定化。 葡萄糖
葡萄糖异构酶
果糖
果葡糖浆
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PEG修饰尿酸酶在医药领域的应用
摘要：尿酸酶是生物体内嘌呤降解代谢途径中的一种酶，在鸟类爬行类和不包括人在内的灵长类动物体内，能催化尿酸氧化,生成尿囊素和过氧化氢。
而痛风是长期嘌呤代谢障碍,血尿酸增高引起组织损伤的一组异质性疾病。
尿酸酶作为一种外源性的蛋白质，存在着易被体内酶水解、稳定性低、血浆半衰期短、抗原性较强、易产生过敏反应或耐受期很短的问题，因此大大限制了其临床使用。
而PEG修饰可解决天然尿酸酶存在的诸如此类的问题。
PEG 修饰使尿酸酶的最适PH往中性偏移、最适温度反应曲线展宽、与底物亲和力增加但最大反应速率降低、在低离子强度条件下更加稳定、对尿酸酶结合金属离子及阴离子的能力有弱化作用。
研究结果显示:PEG修饰不仅可以通过屏蔽效应改善尿酸酶的药代动力学性质，也可能通过影响尿酸酶亚基解离和亚基表面电荷分布等性质而影响尿酸酶的酶学性质。
这些结果为新药开发PEG尿酸酶提供了基础。
关键词：尿酸酶；痛风；尿囊素；PEG修饰；酶学性质。
一、关于尿酸酶
尿酸酶是生物体内嘌呤降解代谢途径中的一种酶，在鸟类爬行类和不包括人在内的灵长类动物体内，其以分子氧作为受体催化尿酸氧化,生成尿囊素、二氧化碳和过氧化氢。
尿酸酶首先在牛的肾脏中发现。
随后在动物、植物、真菌、酵母和细菌中均发现有此酶的存在。
作为重要的氧化剂：有学者提出，正是由于缺乏尿酸酶导致了一种选择优势，因为尿酸酶的缺乏导致了血清中尿酸含量增加，尿酸充当着生理活动中重要的抗氧化剂。
尿酸累积形成高尿酸血症进而出现痛风等系列疾病：尿囊素在体内具有良好的溶解性，不发生积累而直接排出体外。
以尿酸作为嘌呤代谢的终产物，体内嘌呤代谢紊乱可使尿酸水平异常升高而形成高尿酸血症，而尿酸及其盐类在血液中的低溶解度和易沉积性，使得高尿酸血症成为痛风等系列疾病和肿瘤治疗中出现急性肾衰竭的直接原因，根据痛风发生的生化机理，尿酸酶应是治疗该病的理想药物。
二、尿酸酶在临床治疗上的应用
痛风是长期嘌呤代谢障碍，血尿酸增高引起组织损伤的一组异质性疾病。
其特点是：高尿酸血症、特征性急性关节炎反复发作，关节滑液中可见尿酸钠结晶、有痛风石或肾尿酸结石。
尿酸主要由细胞代谢分解的核酸和其它嘌呤类似物及食物中的嘌呤经酶的作用分解而来。
由于人体内缺乏有功能的尿酸酶，尿酸不能进一步分解，作为嘌呤代谢的终产物。
血液中尿酸的浓度取决于尿酸生成和排泄之间的平衡。
三、痛风的治疗方法的研究进展（即尿酸酶的应用的研究进展）
事实上，上世纪90年代，尿酸酶已作为治疗痛风的药物首先在欧洲上市，它能够在短时间内有效降低患者体内的尿酸水平，并克服了别嘌呤醇的副作用，但是作为一种外源性的蛋白质，存在着易被体内酶水解，稳定性低、血浆半衰期短等蛋白质药物的共同缺点，更严重的是它还存在着抗原性较强，易产生过敏反应或耐受期很短的问题，因此大大限制了其临床使用。
美国风湿病学会在2005年度会议上发布杜克大学研制的PEG和重组猪尿酸酶结合物经二期临床试验证明，可用于禁忌常规疗法或使用常规疗法无效的严重痛风患者,并取得了可喜的试验结果，于2006年进入三期临床试验阶段,预计PEG一uricase结合物将成为治疗痛风的新一代特效蛋白药物。
尿酸酶是治疗痛风的理想药物之一，尤其对于那些禁忌常规疗法或使用常规疗法无效的患者来说是唯一的特效药物。
对于痛风的治疗，一般使用排尿酸或抑制尿酸合成的药物，使血尿酸浓度维持在正常范围内。
排尿酸药有梭苯磺胺、苯澳酮和苯磺哇酮，通过抑制肾小管对尿酸重吸收，增加其排泄，从而降低血尿酸浓度。
抑制尿酸合成的药有别嘌呤醇，是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂，使得尿酸合成减少。
不过，别嘌呤醇使得黄嘌呤浓度上升。
事实上，黄嘌呤比尿酸的溶解度还要低，有些病人会发生黄嘌呤肾损伤和沉积。
因此，别嘌呤醇是有一定副作用的。
尿酸酶可将尿酸转化为远比尿酸易溶的尿囊素，是一种很有价值的治疗痛风和高尿酸血症的药物。
四、PEG修饰技术的简介和修饰尿酸酶的方法
利用聚乙二醇修饰技术对尿酸酶进行修饰是解决上述问题的有效途径之一。
聚乙二醇修饰是一种较为成熟的长效蛋白质药物开发技术，通过将活化的聚乙二醇分子连接到蛋白质分子表面上，从而改善蛋白质类药物的药代动力学性质，如: 抵抗蛋白酶水解的能力提高，免疫原性和免疫反应性降低，体内半衰期延长，血浆清除率降低等。
聚乙二醇是一种柔性的惰性分子，连接到蛋白质分子上不会改变蛋白质空间结构和生物学活性。
聚乙二醇是通过空间屏蔽效应影响蛋白质的理化性质从而改善蛋白质药物的药代动力学性质的。
蛋白质和肤类生物大分子聚乙二醇化后，溶解行为改善，稳定性增强，免疫原性和抗原性消除或降低，循环半衰期延长，药物动力学优化，因而在生物技术和生物医学中具有重要的应用前景，聚乙二醇化也逐渐发展成为一种平台技术。
五、PEG修饰如何改变尿酸酶的各类酶学性质
一方面，PEG修饰后PEG长链包裹于尿酸酶分子外形成了一个柔性PEG外层，这一外层约束了尿酸酶分子的亚基解离，亚基之间稳定聚合提高了尿酸酶与底物的亲和力。
另一方面，由于PEG的两亲性质使得尿酸分子更容易通过扩散作用进入底物结合位点，从而使尿酸酶与底物分子能够更加容易稳定的结合。
其次，PEG修饰改变了尿酸酶表面电荷分布，影响到尿酸酶与不同缓冲液中的金属离子的结合，从而使不同缓冲体系对于PEG尿酸酶的影响较小。
再者，PEG的修饰作用同时还可以提高尿酸酶的空间构象在不同离子强度的缓冲液中的稳定性。