20141008常规病理染色技术
病理常用的染色方法
病理常用的染色方法引言病理学是研究疾病形态学和组织学变化的学科，它通过对组织和细胞的观察，帮助医生诊断疾病并制定治疗方案。
在病理学中，染色方法是一种常用的技术手段，它可以使细胞和组织在显微镜下更清晰地显示出不同的结构和成分。
本文将介绍一些常用的病理染色方法。
常见的染色方法血液标本染色血液标本染色是一种常用的病理染色方法，它能够帮助医生观察血液中的各种细胞类型，并诊断出相应的血液疾病。
以下是几种常见的血液标本染色方法：Wright-Giemsa 染色法Wright-Giemsa 染色法是一种常用于鉴定白细胞类型和评估红细胞形态学特征的染色方法。
该方法通过使用 Wright-Giemsa 染料对血液标本进行染色，然后在显微镜下观察各种细胞的形态和染色性质。
嗜酸性染色法嗜酸性染色法是一种用于检测嗜酸性细胞（如嗜酸性粒细胞）的染色方法。
该方法使用嗜酸性染料（如伊红、艾尔伯特染料）对血液标本进行染色，然后使用显微镜观察细胞的颜色变化。
组织标本染色除了血液标本，病理学中还常用组织标本进行观察和诊断。
以下是几种常见的组织标本染色方法：血片制备血片制备是一种将血液标本涂布在载玻片上，然后进行固定和染色的方法。
这种方法可以帮助医生观察血液中不同类型细胞的形态和数量。
组织切片制备组织切片制备是一种将组织标本切割成薄片，并固定在载玻片上，然后进行染色的方法。
这种方法可以帮助医生观察组织中各个结构和成分的分布情况。
免疫组化染色免疫组化染色是一种利用抗体和标记物对组织标本进行染色的方法。
该方法可以帮助医生观察组织中特定蛋白质的表达情况，从而诊断疾病并确定治疗方案。
染色方法的步骤不同的染色方法具有不同的步骤，下面以免疫组化染色为例，介绍一般染色方法的步骤：1.样本处理：将组织标本固定在载玻片上并进行脱水和透明化处理，以保持样本形态稳定。
2.抗原修复：对固定的组织标本进行抗原修复处理，以使抗原暴露出来，并提高抗体与抗原的结合效率。
病理染色的原理
病理染色的原理
病理染色是一种通过在活组织或已切片的组织中应用染料来突出显示细胞或组织的特定结构和病理变化的技术。
它是病理诊断中的重要工具。
病理染色的原理基于不同物质对染料的亲和力以及染料和细胞组织之间的相互作用。
常用的病理染色方法有荧光染色、免疫组化染色和组织化学染色。
荧光染色主要利用荧光探针与特定分子的结合，通过荧光显微镜观察来检测细胞或组织中的特定分子，例如染色体、蛋白质或核酸。
荧光染色可以提供高分辨率的细胞成像，对于观察细胞内结构和功能具有重要意义。
免疫组化染色则是利用抗体与特定抗原发生反应的原理。
通过与特定抗原结合的抗体，可以将其标记上染料，从而在组织切片中显示出目标抗原的位置和分布。
免疫组化染色广泛应用于癌症诊断和研究中，可以帮助确定细胞类型、确定肿瘤分级和分子标记等。
组织化学染色则是利用特定染料与组织分子间的化学反应来显示细胞或组织的特定结构和成分。
例如，希尔伯纳染色可以突出显示胶原纤维，而酸性染料可以突出显示细胞核和胞质。
总之，病理染色通过应用染料和特定方法，可以使细胞和组织中的目标结构和病理变化显现出来，为病理学家提供重要的信息，从而实现病理诊断和研究。
病理学技术—特殊染色最最全总结(均配图)
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色，显示胶原纤维，A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核图表 E 2.胶原纤维，V an Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞 myocardial infarction：心肌梗塞后2个月，van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替，黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红（Sirius red）苦味酸染色法(参照上图) 红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他3.1 Gordon-Sweets银氨染色法（梅花开枝图，金色阳光伴树枝）黑色：网状纤维红色：胞核（核固红复染）黄棕色：胶原纤维淡红色：细胞质（红液复染）图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表 G Gomori氏银氨液配制法Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表 H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色：弹性纤维红色：胶原纤维黄色：背景图表 I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法（PTAH）蓝色：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色：胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色：粗弹性纤维（有时）紫蓝色或棕黄色：缺血缺氧早期病变的心肌图表 J 6.1.磷钨酸苏木素法图表 K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法（1974年）红色：缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色：正常心肌蓝色：细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色（光学显微镜, ×200）2.Poley显示缺氧心肌染色法（1964年）红色：缺氧心肌紫色：胞核绿色：其他组织七、糖类染色过碘酸-Schiff（PAS）染色法红色：糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色：细胞核图表 L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质图表 M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表 N 8.1.胃粘膜组织 AB-PAS染色 40×：2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质图表 O 8.2.爱先蓝（PH2.5）染色液图表 P 8.2.爱先蓝法图表 Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色：黑色素及嗜银细胞颗粒红色：胶原纤维浅黄色：背景图表 R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色：黑色素浅绿或不着色：背景黄色：肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue（普鲁士蓝）反应显示三价铁蓝色：含铁血黄素浅红色：其他组织图表 S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
病理常用染色方法及结果分析解读
病理常用染色方法及结果分析解读病理学是一门重要的医学学科，通过病理检查可以为临床诊断提供重要的依据。
在病理学中，常用染色方法是一种重要的技术手段，它能够使细胞和组织的结构、形态以及异常变化更加清晰可见。
本文将介绍病理常用染色方法及其结果分析解读。
一、组织病理学常用染色方法1. 血液与组织涂片染色血液与组织涂片染色主要用于血液涂片或组织切片的染色，常用的染色剂有吉姆萃红、伊红、偏碱性碘，其中吉姆萃红染色可用于鉴别血液细胞的性质和数量，伊红染色可用于观察红细胞的形态和大小，偏碱性碘染色可用于观察组织细胞核的形态和结构。
2. 细胞、核和细胞器染色细胞、核和细胞器染色主要用于观察细胞的核形态和细胞器的分布情况。
常用的染色剂有甲苯胺蓝、伊红、嗜酸性染料等。
甲苯胺蓝染色常用于染色细胞核，伊红染色常用于染色红细胞，嗜酸性染料用于染色细胞器。
3. 结缔组织染色结缔组织染色主要用于观察组织中结缔组织的形态和数量。
最常用的染色方法是伊红染色和伊红-酸性染料染色。
4. 免疫组织化学染色免疫组织化学染色常用于检测组织中的特定抗原。
该方法利用特异性抗体与标记物结合，形成抗原-抗体复合物，通过观察标记物的染色情况来判断抗原的存在。
常用的标记物有酶类、荧光物质等。
二、病理常用染色方法结果分析解读1. 组织学形态分析组织学形态分析是通过染色后的组织切片观察和分析细胞和组织的形态学特点。
根据染色剂的选择和染色结果，可以判断细胞核的形态、染色质的分布情况和细胞器的形态变化等。
2. 病理诊断辅助病理诊断辅助是指根据染色结果来辅助病理诊断。
例如，染色结果显示细胞核异常增生、异型细胞集聚等，可以对恶性肿瘤进行诊断和判断。
3. 分子生物学研究染色技术在分子生物学研究中也有重要应用，如原位杂交技术能够通过染色方法观察和分析特定基因的表达情况。
总结：病理常用染色方法是一种重要的病理学技术手段，可以使细胞和组织的结构、形态以及异常变化更加清晰可见。
病理学中的染色技术与应用
病理学中的染色技术与应用病理学是现代医学领域中一门重要的基础学科，是研究疾病的病因、发病机制、组织病理变化、诊断和治疗等方面的一门学科。
而染色技术则是病理学中一项非常重要的技术手段，它能够帮助病理学家更加准确地诊断疾病、研究疾病的病理学机制以及预测疾病的发展趋势。
下面，我们将对病理学中的染色技术与应用进行详细的介绍。
一、染色技术的概念及分类染色技术是将染料或者其他特殊的化学物质应用于细胞、组织或者病理标本中，使其具备染色、显色或者反显色的特点，从而更好地观察和诊断细胞或者组织形态及其他方面的变化。
目前，染色技术主要分为常规染色技术、特殊染色技术以及免疫组化染色技术三大类。
常规染色技术主要是对常规的细胞和组织进行染色观察。
常用的常规染色技术有：巴氏染色、伊红染色和戴奥辛染色。
特殊染色技术则是针对一定类型的细胞或者组织进行染色，以观察其结构或者功能的变化。
特殊染色技术主要有：神经元特殊染色、肝细胞特殊染色和胶原纤维染色等。
而免疫组化染色技术主要是利用物种特异性的抗体来检测细胞和组织中蛋白质、抗原和其他分子的表达及定位，主要用于研究细胞分子生物学和病理学机制。
免疫组化染色技术在现代病理诊断和研究中广泛应用。
二、染色技术在病理学中的应用染色技术在病理学诊断和研究中有着广泛的应用。
其中常规染色技术是常规病理学诊断的重要手段之一，其主要作用在于观察生物样本的细胞、结构和组织学特征。
通过常规染色技术，医生可以观察到细胞和组织中的细胞核、细胞质、胞膜和胶原纤维等结构，诊断出不同类型的疾病。
特殊染色技术则是针对特定的细胞或者组织类型，通过特殊的染色方法来获得更加明确的结论。
比如，对于血液病学研究，通常采用酸性染料来染色细胞，并通过不同的染色方法来识别出不同类型的白细胞，从而达到更加准确地诊断疾病的目的。
免疫组化染色技术则是在病理学研究中发挥了重要的作用。
因为不同蛋白质、肿瘤标志物和免疫细胞具有不同的表达方式，科学家可以通过免疫组化染色技术来快速、可靠地识别不同细胞和组织。
病理制片技1
病理制片技术——常用特殊染色一、六胺银染色1．第一步准备工作：配制六胺银染液，将10％硝酸银2．5ml倒入干净的染色缸内，加入2％硼砂5ml，液体呈乳白色，再加入3％乌洛托品40ml，染液逐渐呈透明状。
2．第二步染色过程：事先把温箱调至60℃备用，切片经脱蜡至水，用1％过碘酸氧化10 min，水洗，然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h，染真菌时间要相对短一些，一般情况下肉眼看到染液变色，切片呈棕色时从温箱取出染色缸，倒掉染液，自来水冲洗1min，用0．25％氯化金调色1 min，水洗后，用3％硫代硫酸钠染5min,水洗，用苏木精染液浅染，水洗、分化、冲水返蓝，伊红染10 s，最后经脱水、透明、封固。
3．图示结果：基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色，核呈蓝色。
4．注葸事项(1)掌握染色温度和时间，如60℃染1 h，80℃染30～40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短，染色时间过长，切片染色过深，可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1．第一步准备工作：配制黏卡染液，将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内，加入5 0％L醇100 rnl混合摇匀，再加入氯化铝0．5g，水浴加温逐渐煮沸并搅动液体，使其充分溶解(注意染液容易外溅)，数分钟后，染液由红色变成透明深紫红色，冷却后将液体倒入量筒，再加入50％乙醇至原量，过滤，放人冰箱备用。
2．第二步染色方法：染液使用时原液与蒸馏水比例为1：4稀释.切片厚5 um，脱蜡至水，经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上，染液可以重复使用多次，但要适当延长染色时间．切片水洗后，脱水、透明、封固。
3．图示结果：黏液为红色，胞核为蓝色．4．注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液，4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大，消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1．第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液：盐基性品红溶于乙醇内。
病理切片染色方法
病理切片染色方法
病理切片染色是一种常用的病理学检查方法，可以帮助病理医师观察和诊断疾病。
常用的病理切片染色方法有以下几种：
1. 高尔基染色法：可以染色细胞核为蓝色，细胞质为粉红色，便于观察细胞形态和排列情况。
2. 血液涂片染色：常用的涂片染色方法有吉姆萨染色法、健康那染色法等，可以帮助观察血细胞的类型和数量。
3. 组织切片染色：常用的组织切片染色方法有血红素-伊宁染色法、苏木精-伊宁染色法等，可以染色细胞核和细胞质，以及观察组织结构和病理变化。
4. 免疫组化染色：通过特定抗体与组织中的特定抗原结合，来观察和诊断疾病。
常用的免疫组化染色方法有免疫组织化学染色法、免疫荧光染色法等。
5. 特殊染色：用于染色特定的结构或化合物，例如透明质酸染色、银染色等。
以上是一些常见的病理切片染色方法，根据具体需要和疾病类型，病理医师会选择不同的染色方法来进行诊断和研究。
病理学常用染色方法及其应用范畴
病理学常用染色方法及其应用范畴下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!引言病理学是研究疾病的本质、原因和发展规律的科学。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
（三）苏木精的氧化 1.自然氧化（成熟氧化） 暴露在阳光和空气中，这个过程比较缓慢，约需3-
4个月，但染液可使用较长时间。 2.化学氧化
采用氧化剂（如氧化汞、碘酸钠、高锰酸钾等）使 染液立即被氧化成熟。这种苏木精配制后即可使用。 化学氧化苏木精较自然氧化的寿命要短。
Page
9
1g苏木精所需氧化剂的量：
去掉不该着色的部位。
Page
12
（四）苏木精的媒染剂
苏木精被氧化成酸性染料苏木红后，仍不具有染色力， 需与媒染剂结合，形成带正电荷的蓝色色淀，才能与
细胞核结合而完成染色。 媒染剂的多为二价或三价的金属盐如铝盐和铁盐，少
数特殊苏木精也有采用铁等。 常用的媒染剂有：
硫酸铝钾（钾明矾）、硫酸铝铵（铵明矾） 硫酸铁铵（铁明矾）、硫酸铝、三氯化铁
关于封片
切片经过酒精脱水、二甲苯透明后必须湿封片。 如干封片，切片会出现黑色结晶样黑点（胞核炭化）。
伊红染色后或脱水后直接吹干会出现细胞核收缩、龟 裂，细胞收缩，组织间隙增加，透明度差。
Page
47
不同封片
Page 48
（二）影响HE制片因素 1.组织脱水、包埋
①取材：组织取材大小适度。 ②固定：充足、及时、固定液的量。
5.冰醋酸、柠檬酸：
抵消氧化剂的氧化作用，使苏木精与苏木红保持均 衡。同时又可增加细胞核的选择性染色，使细胞核 染色质显示清晰细致。1g柠檬酸=20ml冰醋酸。
（醋酸比例一般为染液3%-5%的量比例）
Page
16
（六）影响苏木精氧化的因素 1.酸碱度：染液偏碱性氧化快，中性时稍慢，酸性时
较慢。染液内加酸（冰醋酸或柠檬酸）可延缓氧化 作用。
2.贴片位臵恰当 “定点”“定向”
Page
44
面部包块 临床诊断：面部痣？ 两个不同包埋面结果
最终病理诊断：基底细胞癌
Page 45
3.染色核浆分明、红蓝适度 4.无污染
组织污染是制片的禁忌 5.封片采用湿封片
6.封片无气泡、胶不外溢 封片树胶适ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，浓度适中
7.切片标签端正、编号清晰
Page
46
②一瞬间由红色转变为紫蓝色慢慢扩散:成熟且质量好 ③很快散开呈蓝色:已经失效
Page
19
3.将苏木精染液滴在滤纸，染液在滤纸上扩散片刻，
外周呈紫蓝色，中心呈紫红色圆斑：质量好的染液。 周边不呈紫蓝色：染液不成熟或没有配制好。
Page 20
二、苏木精染液的性质 （一）Harris苏木精 传统、经典的经氧化汞化学氧化成熟的明矾苏木精。
三、染色后的处理（脱水透明） 1.染色后的脱水：由低浓度向高浓度乙醇逐级过度， 保证脱水彻底。
Page
4
2.脱水后的透明
四、封固
1.甘油明胶封固剂：脂肪染色的标准封固剂。 2.中性树胶封固剂：最常用封固剂。
Page
5
一、染料的性质 染料具有染色能力须具备的条件：
①本身具有颜色，即其分子结构中要含发色团。 ②与被染组织有亲和力，即其分子结构中要含有助色团。
1、切片要求 2、染色要求
质控要求
质量控制是保证正确病理诊断不可缺少的重要环节
Page 43
（一）常规HE制片质控要求 1.切片完整、厚薄均匀，无刀痕、无皱褶
组织包埋面按有病灶的一面向切面包埋 胃肠道等管腔组织应有层次、小组织各块切全
厚度为3-5um为宜，淋巴结组织稍薄 切片刀需锋利，展片水温适度（石蜡熔点减15°C）
Page
14
（五）苏木精染液配制试剂作用 1.无水酒精： 溶解苏木精，抑制真菌生长。
2.碘酸钠（钾）、氧化汞：
氧化剂，使苏木精经过氧化后变成苏木红。 3.硫酸铝钾、铵、铁： 媒染剂，其中三价铝离子与苏木红结合形成蓝/黑色
的色淀，与细胞核内核酸的磷酸根牢固结合而着色。
Page
15
4.甘油： 稳定剂，防止苏木精在空气中不断氧化，延长染液的 使用时间。
在实际配制苏木精染液时，常用半量碘酸钠，目的是 先使部分苏木精氧化成苏木素，染液中未被氧化的苏 木素在染液保存和使用过程中慢慢被完全氧化。
Page 11
苏木精属于进行性染色还是退行性染色，是由苏木精
染液内苏木素的浓度和被氧化程度而定。 1.进行性染色：苏木精染色后，组织和细胞的不同部
分深浅恰如其分地被显示出来，无须分化。 2.退行性染色：先将组织过染，再用分化剂有选择性
醇溶性伊红Y:称为四溴荧光素,易溶于酒精,不溶于水。 水溶性伊红B又称蓝光伊红，二溴二硝基荧光素二钠，
易溶于水。 醇溶性伊红B又称醇溶伊红B，溶于乙醇。
伊红B略带蓝色，与蓝色的苏木精对比染色不理想，
Page
26
水溶性伊红配制简单，最为常用。但染液使用一久后
易长真菌而污染切片及出现沉淀，需经常过滤。染色 后需要流水稍洗再进行脱水。（水洗及低浓度酒精脱
Page
29
分化液：
0.5ml 浓盐酸+99.5ml 70%酒精 蓝化液：
1g碳酸锂+100ml蒸馏水 0.3ml浓氨水+99.7ml蒸馏水
Page
30
四、常规HE染色流程
Page
31
细胞核呈蓝色，细胞质、肌纤维、 胶原纤维、和红细胞呈不同程度的红色。
Page 32
细胞学HE染色
Page 33
Page 13
苏木红与铝盐结合形成蓝色色淀（Harris苏木精）
苏木红与铁盐结合形成黑色色淀（Weigert铁苏木精） 色淀与细胞核结合牢固，水、乙醇都难以洗脱，有利
于苏木精染液的对比染色，且在完成染色后经脱水、 透明、封固过程不容易脱色。
Weigert铁苏木精染液作为耐受分化和用较强酸性染料 做复染的首选细胞核染料。
Page
28
返蓝目的： 蓝→红→蓝过程 苏木红与Al3+形成蓝色色淀的结合、离解和再结合的 过程。蓝色色淀在酸性环境处于离子状态，呈红色 （色淀离解）；红色离子状态的色淀，在碱性/中性 环境中处于结合状态，呈蓝色（色淀形成）。 返蓝控制： 通常用流动自来水冲洗10-15分钟。若用碱性蓝化液 可缩短时间，但蓝化后也需流水冲洗2-3分钟。
五、HE切片的规范技术标准
质量标准
1 2 切片完整 切片厚薄均匀
满分（分）
15 15
质量缺陷减分
①稍不完整：减1-7分 ②不完整：减8-15分 ①厚薄不均：减3-6分 ②切片厚，影响诊断：减7-15分
3
4 5
切片无刀痕、无皱褶、无颤 痕
切片无污染 切片染色对比清晰、红蓝适 度、透明度好
15
15 20
③脱水：彻底、时间的控制。低浓度酒精脱水可延长。 ④透明：透明宜充分，不过度。一般60-90min。
⑤浸蜡：一般2-3小时。 ⑥包埋：组织包埋面正确，优质的包埋石蜡。
每个环节衔接恰当
Page 49
脱水严重不足：无法切片
2.氧化剂的量：加入氧化剂后苏木精可立即被氧化成 熟可用。
3.温度：碘酸钠作为氧化剂时，在常温下加入即可， 氧化汞作为氧化剂时，需煮沸苏木精加热才能起到
氧化作用。
Page 17
（七）配制后苏木精染液的判断 1.采用组织进行预染色。
Page
18
2.将几滴苏木精染液到自来水中： ①不散开且仍保持红色:未足够成熟
水均有分化作用。 ） 醇溶性伊红染色可不经水洗直接进行乙醇脱水、二甲 苯透明和封片。
较常用0.5-1%水溶性伊红，染色时间为2-5分钟。
Page
27
三、分化与蓝化 分化目的： 酸能破坏苏木精的醌型结构。 用盐酸乙醇将细胞核中结合过多的染料、细胞质中吸 附的染料及不需要着色的部位离解，以利于伊红的进 一步染色。 分化控制： 分化液的新鲜程度和浓度决定分化时间。 ①新配制、高浓度分化液分化时间要短一些，反之分 化时间要长一些； ②苏木精染色时间久分化的时间要长一些，反之分化 时间要短一些。
6
切片封胶适中、无气泡，洁 净 切片标签端正牢固，编号清 晰
10
7 合计
10 100
切片质量分级标准：1.甲级片：≥90分（优） 2.乙级片：75-89分（良） 3.丙级片：≥60-74分（基本合格） 4.丁级片：≤59分（不合格）
Page 34
六、冰冻切片染色流程 1.取材后组织放臵标本托，立即放到冰冻切片机速冻 台，添加包埋剂放上冷冻锤。（1-2min） 2.将冻好的组织移到切片机夹头内夹紧，修片至适度 面，即可切片，切好的组织薄片（4-8um），黏贴 在编号的载玻片。（1-2min） 3.立即固定（95%酒精/甲醇-冰醋酸)。（30s-1min） 4.改良Carazzi苏木精染色。（50s-1min） 5.稍水洗，碳酸锂水溶液蓝化。（15s） 6.1%水溶性伊红染色。（15s） 7.稍水洗，80%酒精、95%酒精Ⅰ、95%酒精Ⅱ、无水 酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ逐级脱水，二甲苯Ⅰ、二甲苯 Ⅱ透明。 8.中性树胶封固，贴附标签。
Page 24
（三）伊红(曙红) 人工合成染料。
桃红色或粉红色的粉末。 伊红是由荧光素衍生而来，有多种，常规病理染色中，
主要是水溶性伊红Y和醇溶性伊红Y。 常用浓度0.5%-1%。
微量醋酸（1000ml染液中加入0.5ml）可增强着色。 常规病理染色中不采用伊红B染色。
Page
25
水溶性伊红Y
Y：代表黄色,化学名称为四溴荧光素二钠盐，其分子 内含溴愈多，颜色愈红。
Page
39
冷冻的速度
Page 40
2、固定： 防止细胞退变。切片后立即固定。 切记勿采用电吹风或酒精灯加热固定。 95%酒精或甲醇固定细胞收缩小、作用快、染色清晰、 对比鲜明。
Page
41
固定的速度
Page 42