葡萄灰霉病生物学特性研究11-3

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葡萄灰霉病病原鉴定和生物学特性研究

葡萄灰霉病病原鉴定和生物学特性研究

葡萄灰霉病病原鉴定和生物学特性研究
雷百战;李国英;石在强
【期刊名称】《石河子大学学报(自然科学版)》
【年(卷),期】2004(022)0z1
【摘要】对不同地区的葡萄灰霉病进行调查和采样,根据病害症状、病原形态和寄主范围对葡萄灰霉病进行鉴定,结果表明,该葡萄灰霉病菌为灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.).该菌的生长温度范围是5~30℃,最适温度为15~25℃;生长的pH 值范围是2~9,最适为3~6;光照条件对病菌的生长基本无影响;该菌的寄主范围广泛;木纳格和巨峰对葡萄灰霉病的抗性较强;甲基硫菌灵、亿嘉乐对葡萄灰霉病菌的抑制效果较好.
【总页数】5页(P145-149)
【作者】雷百战;李国英;石在强
【作者单位】石河子大学农学院植物保护系,新疆,石河子,832000;石河子大学农学院植物保护系,新疆,石河子,832000;石河子大学农学院植物保护系,新疆,石河子,832000
【正文语种】中文
【中图分类】S436.631.1+9
【相关文献】
1.仙客来灰霉病的病原鉴定及其生物学特性研究 [J], 张蕾;王福银;李阳春;陈秀蓉
2.香葱灰霉病病原鉴定及其生物学特性研究 [J], 李聪丽;阳亚婕;傅本重;张志林;付
应林;李国元
3.毛叶枣灰霉病的病原鉴定及其生物学特性研究 [J], 袁高庆;谭道朝;付岗;赖传雅;黄式玲
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葡萄灰霉病的发生规律及绿色防控技术的应用探析

葡萄灰霉病的发生规律及绿色防控技术的应用探析

2019年第14期现代园艺灰霉病的发生对环境产生一定影响,病原菌种群抗药能力强,控制灰霉病相对困难。

农户种植技术及管理水平差异较大,对葡萄无公害绿色防控技术认知不足,阻碍现代葡萄发展。

对此,需针对葡萄灰霉病的发生规律,采取有效的控制措施。

绿色防控技术在葡萄灰霉病防控中取得显著效果,为减轻农民的经济损失作出贡献,以下为详细分析。

1葡萄灰霉病的发病症状葡萄灰霉病对植物的花序及成熟果实等造成损害,部分情况下影响新梢及叶片。

花穗处于开花前发病,花序在受到影响的初期呈现烫伤状态,颜色暗褐,病变组织腐烂,表面出现灰色霉层,花序呈现萎蔫状态,幼果在此情况下容易掉落。

果梗在出现病症后颜色转变为黑褐色,部分病斑出现黑色块状菌核。

果穗在感染疾病后呈现淡褐色,并在短时间进展为暗褐色,果穗呈现腐朽及软化状态,此时气候转变,接连降葡萄灰霉病的发生规律及绿色防控技术的应用探析张薇王录俊樊晓锋(渭南市临渭区葡萄研究所,陕西渭南714000)摘要:我国北方地区葡萄种植产业不断扩大,葡萄病害发生率及程度不断加深,影响农户的经济收益。

分析了葡萄灰霉病的发病症状,进一步探讨葡萄灰霉病的发病规律,根据病害的发生规律,提出绿色控制技术,从而减少葡萄农药的使用量,并提升农民的经济效益。

关键词:葡萄;灰霉病;发生规律;绿色防控技术作者简介:张薇(1983-),女,汉族,陕西渭南人,硕士研究生,助理农艺师,研究方向:葡萄病虫害绿色防控技术。

通信作者:王录俊(1968-),男,本科,高级农艺师,渭南葡萄研究所所长,研究方向:葡萄育种与葡萄栽培。

的农田和过牧的草地。

该地区有水土流失面积达到了1.32万km2,风蚀面积高达8204km2,干旱、风沙和很多自然灾害经常发生,土地沙化和草场退化等严重的水土流失情况影响了人们的日常生产生活,此现象也成为了限制当地群众发家致富和经济社会可持续发展的重要因素。

3容器育苗的优点林业工作者们通过容器育苗技术,可以更好地加快造林进程,更有效地实现林业的快速发展。

葡萄灰霉病生物学特性研究11-3

葡萄灰霉病生物学特性研究11-3

葡萄灰霉病生物学特性研究白晓蒙生命科技学院植物保护0802班指导教师:齐慧霞摘要:为进一步了解葡萄灰霉病的发病规律, 对其病原菌生物学特性进行了系统的研究。

结果表明:葡萄灰霉病菌生长的最适宜温度是20℃~25℃,在各种营养条件的培养基上均能生长,其中最适宜的是在以蔗糖为碳源的培养基和以硝酸钾为氮源的培养基。

最适宜于灰霉菌丝生长的固体培养基是胁本哲式培养基,最适宜的液体培养基是PDA培养基,光照对菌丝生长也有一定的影响,连续黑暗最适宜于菌丝的生长。

分生孢子的致死温度是58℃, 5min。

关键字:葡萄灰霉;生物学特性;分生孢子。

灰霉病是由灰霉菌(B otry tis cinerea) 引起的一种世界性的重要病害, 能危害蕃茄、草莓、黄瓜、葡萄等多种植物, 引起果实蔬菜腐烂, 损失比较严[1 2]。

1999 年张继民[3]对灰葡萄孢菌的生理和形态特征进行了研究; 但对灰霉病菌的生物学特性缺乏系统的报道.本试验汲取前人的经验, 在培养基、温度和孢子萌发的试验范围上更加广泛, 试验更加系统。

试验与前人多数结果一致, 以期为今后葡萄灰霉病的发生与防治提供更为可靠的参考依据。

1 1材料与方法1.1 材料供试菌株:2010年10月从秦皇岛市昌黎县中粮集团华夏葡萄酿酒公司的葡萄基地上采集带有灰霉病菌的果实,经过组织分离,单孢纯化[4],镜检观察分生孢子和分生孢子梗的形态,经鉴定[5﹑6]属于Botryis cinerea .,将纯化的病原菌转入PDA试管斜面中保存备用。

A: 分生孢子梗B:分生孢子C:菌核1.2 病原菌生物学特性研究1.2.1温度对菌丝生长的影响在马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA)平板中央接入菌龄相同的直径为0.04cm的菌饼, 每皿1 片, 分别别置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃下的恒温培养箱中培养[7]每处理3皿,3次重复,用十字交叉法逐日测量菌落直径并记录[8]。

灰葡萄孢对氟啶胺的敏感性检测及敏感性降低菌株生物学性状研究

灰葡萄孢对氟啶胺的敏感性检测及敏感性降低菌株生物学性状研究

灰葡萄孢对氟啶胺的敏感性检测及敏感性降低菌株生物学性状研究作者:王晓辉向礼波刘美玲杨立军龚双军来源:《植物保护》2023年第06期关键词:灰葡萄孢;氟啶胺;敏感性;抗性菌株;生物学特性灰霉病(grey mold)波及范围广,是世界性重要病害之一,该病会导致多种蔬菜果实腐烂变质,是保护地蔬菜生产的一种威胁。

其病原菌灰葡萄孢Botrytis cinerea具有寄主范围广泛、产孢量大、易随气流传播、极易对杀菌剂产生抗性等特点。

目前,防治灰霉病的主要方法为施用杀菌剂。

但是,由于灰葡萄孢基因变异频率较高,生长速度快和产孢量大,其对杀菌剂具有较高抗性风险。

已有抗性监测表明,灰葡萄孢对琥珀酸脱氢酶抑制剂(SDHIs)、二甲酰亚胺类(DCFs)、呼吸抑制剂(QOls)和苯并咪唑类(MBCs)杀菌剂等均已产生了抗性。

另外,还存在对几种杀菌剂同时表现出多药抗性的菌株。

由于灰霉病菌的抗药性导致杀菌剂的防效降低,甚至某些药剂(DCFs和MBCs)在有些地区完全不能使用。

氟啶胺(fluazinam)是吡啶胺类杀菌剂(phe-nylpyrroles)中用于灰霉病防治的重要品种,由日本石原产业公司开发,它的作用机理独特,能够解偶联氧化磷酸化,具有高效和广谱特性。

对链格孢属Alternaria、葡萄孢属Botrytis、疫霉属Phytophthora,核盘菌属Sclerotium 的病原菌具有很好的防治效果。

目前,氟啶胺制剂已经登记防治多种作物病害,尤其在灰霉病防治上应用广泛。

已有的研究表明,植物病原菌对氟啶胺产生抗性风险低,氟啶胺属于低抗性风险杀菌剂;且与其他类型的杀菌剂不存在交互抗性。

自从1990年开始应用防治作物病害以来,只有Tamura报道在菜豆田发现了抗氟啶胺的灰葡萄孢菌株。

本研究从吉林、江西、湖北、山东、北京、湖南等地区的草莓、辣椒、四季豆、茄子和番茄上采集并分离了灰霉病菌菌株,测定其对氟啶胺的敏感性,比较敏感性下降菌株与敏感菌株之间的生物学性状的差异,研究抗氟啶胺灰葡萄孢菌株的适合度,旨在为灰葡萄孢对氟啶胺的抗性治理及氟啶胺的合理应用提供理论依据。

葡萄灰霉病拮抗酵母菌的筛选及产挥发性抑菌物质特性研究

葡萄灰霉病拮抗酵母菌的筛选及产挥发性抑菌物质特性研究

葡萄灰霉病拮抗酵母菌的筛选及产挥发性抑菌物质特性研究葡萄灰霉病拮抗酵母菌的筛选及产挥发性抑菌物质特性研究摘要:葡萄灰霉病是葡萄种植中常见的真菌病害,严重影响葡萄产量和质量。

在这项研究中,我们通过筛选酵母菌株,寻找具有抗葡萄灰霉病活性的菌株,并对其产生的挥发性抑菌物质进行特性研究。

研究结果表明,酵母菌菌株Y17具有较高的抗葡萄灰霉病活性,并且能够产生挥发性抑菌物质。

关键词:葡萄灰霉病、拮抗酵母菌、挥发性抑菌物质、筛选、特性研究引言:葡萄灰霉病是由一种名为葡萄灰霉菌(Botrytis cinerea)的病原菌引起的真菌病害。

该病害在全球范围内造成了严重的经济损失,对葡萄产量和质量造成了威胁。

目前,化学农药是防治葡萄灰霉病的主要手段,但这些化学农药存在着环境污染和对人体健康的潜在风险。

因此,寻找替代品成为了研究的重点。

本研究旨在通过筛选酵母菌株并研究其产生的挥发性抑菌物质,为探索替代化学农药的葡萄灰霉病防治方法提供依据。

材料与方法:1. 样品采集:从葡萄果实表面采集样品,并经过物理消毒处理。

2. 筛选酵母菌:将样品制成悬浮液,接种于富含葡萄糖的富马酵母培养基,于37℃培养48小时。

3. 抗菌活性测定:将酵母培养液过滤并与葡萄灰霉病孢子接触,观察菌落生长情况。

4. 酵母菌分离与纯化:从抗菌活性较高的培养液中分离出单菌株,通过连续传代培养获得纯化菌株。

5. 挥发性抑菌物质的提取与分离:对酵母菌产生的挥发性抑菌物质进行提取,并使用气相色谱-质谱联用技术进行分离和定性分析。

结果与讨论:经过筛选和酵母菌分离纯化,我们获得了一株具有较高抗葡萄灰霉病活性的菌株,命名为Y17。

Y17菌株在液体培养基中能够有效抑制葡萄灰霉病孢子的萌发和菌丝的生长。

进一步的实验表明,Y17菌株产生的挥发性抑菌物质能够与葡萄灰霉菌发生相互作用,从而抑制其生长和繁殖。

挥发性抑菌物质的分离和定性分析结果表明,Y17菌株产生了多种挥发性有机化合物,其中包括醇类、醚类、醛类和酮类等。

葡萄灰霉病发病规律与防治措施

葡萄灰霉病发病规律与防治措施

果农之友2018.8葡萄甘甜爽口、营养丰富,富含多种矿物营养、维生素和氨基酸,具有益脾健胃、补血美容、抗疲劳、预防心血管病等多种功效,既可鲜食又可加工,经济效益高。

近年来,随着菏泽市“一乡一业、一村一品”工程的大力推进,葡萄种植面积和产量日渐提高。

但随着引种范围的扩大,加之繁育体系和防治措施的不规范,间接为葡萄病害的发生、流行提供了良好的空间。

灰霉病是菏泽市葡萄栽培种植、运输贮藏过程中危害最严重的病害之一,又称烂花穗、灰腐病,给菏泽地区葡萄产业发展带来严重的威胁。

本文对灰霉病的发病规律、症状以及预防措施等进行了详细分析,以期为果农科学防治葡萄灰霉病提供有价值的技术指导。

1症状特点灰霉病主要危害葡萄果实、花序和幼穗,也可危害幼叶。

花序或幼穗染病,受侵染部位呈淡褐色、水渍状,后期病部色泽变暗,严重时会导致整个花穗失水萎缩、软腐坏死、干枯脱落(图1),并产生鼠灰色霉层覆盖表面。

嫩枝受害,出现不规则形状的淡褐色病斑,防治不及时病斑处会产生鼠灰色霉层,后期发病部位呈漂白色,覆盖黑色菌核或灰色分生孢子菌丝块。

叶片受侵染,多在靠近叶脉、叶片边缘、机械损伤部位发生,叶片尖端常出现“V ”字形病斑(图2),呈淡黄褐色,有时出现轮纹不明显、褐色病斑,病斑处多产生灰色霉层(图3)。

果实多在近成熟期或贮藏期染病,病菌从果柄入侵,果皮出现灰褐色凹陷圆斑,后期病斑扩大,易造成果实腐烂(图4),果皮与果肉分离,并在果皮裂缝处产生灰色霉层(图5)。

葡萄灰霉病发病规律与防治措施车升国1,樊庆军1,李新艳1,焦鹏1,徐久凯2(1菏泽市果树技术站山东菏泽274000;2中国农业科学院农业资源与农业区划研究所北京100081)图1葡萄灰霉病引起花序失水萎缩图2叶片尖端出现“V”字形病斑,并覆盖灰色霉层图3葡萄灰霉病危害叶片图4葡萄灰霉病引起果实腐烂绿色植保30果农之友2018.8绿色植保2发病规律2.1病原灰霉病由灰葡萄孢霉侵染导致,为真菌性病害。

葡萄灰霉病的防治

葡萄灰霉病的防治

葡萄灰霉病的防治葡萄灰霉病又叫葡萄灰腐病,病原菌为灰葡萄孢。

葡萄灰霉病是目前世界上发生比较严重的一种病害,在所有贮藏发生的病害中,它所造成的损失最为严重。

1.症状特点:在贮藏期间,罹病部位开始呈圆形,有时界限分明,在白色品种上呈褐色,在红色品种上呈浅褐色,在蓝色品种上由于颜色变异很小,病斑难以区别。

在侵染点有明显裂纹,用很小的压力,果皮即脱离感病部位,把内部组织暴露在外面,这便是灰霉病侵染的早期特征“脱皮”阶段。

到腐烂前期为止,仅有表皮和亚表皮细胞层被离析。

涨压可引起果皮开裂,病原菌通过开裂处形成灰色分生孢子梗和分生孢子而生长,致使产生灰色霉层和腐烂。

在冷藏温度下,病原菌产生少量孢子,菌丝体呈白色,而在葡萄园内的侵染则呈灰色。

果实感病后,其内部化学成分发生显著变化,单宁及某些芳香物质遭到破坏。

2.发病规律:雨、雾、露水及高湿度最适病菌孢子的产生及侵染。

孢子发芽最适温度为26℃,侵染的速度取决于温度、湿度及果皮表面是否存在露珠。

如果果皮上存在水分,病菌也可以不通过伤口侵染。

在12℃以下侵染需12~24小时,在2℃以下为18~36小时。

只要孢子发芽所需要的湿度得到满足时,低温并不能阻止孢子发芽。

灰霉菌可以在0℃以下生长,所以它是葡萄贮藏中最严重的病害。

观察表明,在贮藏过程中,灰霉病的侵染是从穗梗开始的,穗梗表皮组织对真菌的抗性远远低于果粒对真菌的抗性。

葡萄采收后,穗梗水分即开始急剧蒸腾而很快萎缩,失去生活能力和对霉菌的抵抗能力,这时霉菌即开始在穗梗的病部和枯死部位急剧生长,然后不经过表皮组织而进入浆果内部,这时霉菌在危害了中央维管束及相邻的果肉之后,便使浆果脱落,而后全部腐烂。

3.防治方法:(1)药剂防治:防治贮藏葡萄灰霉病的为害,必须从加强葡萄园病虫防治开始,按时喷布杀菌剂。

从花前到采收前,每隔10~15天喷一次500~800倍多菌灵或800~1000倍甲基托布津,能有效减少贮藏中灰霉病引起的腐烂。

23214009

23214009
如 果用 于按 压病斑 !病 处 表皮破 裂 肉 露 J ! I J
则 ,大小 2 4m ~ m×1 3 m。菌核萌 发 产生 子囊 ~ m
盘 ,但 葡萄 园少 见 。
2 生 物学 特性 . 2
已有研究结果表 明,灰霉病菌菌丝在 2 1C ~3 o
均 能生 长发 育 ,以 2 ~ 3c为最适 ,菌 丝 的致死 温 0 2 = I
收稿 日期:2 0 —9 2 0 50—7 作者简介:陈宇飞(9 8 ) 16 一 ,女 ,黑龙江人 ,副教授 ,硕士研究
温 度对灰 葡萄孢菌丝 生长 和孢子 萌发都 有影 响,田世平【 明在 P A培养基上 0o 以下低温明 】 J 证 D C 显地抑制菌丝生长并推迟孢子的萌发时间,但分生 孢 子仍 能在 一4c 下 1 = 4 I d后达到 10 0 %的萌 发率 。 不同的菌株对温度 的要求有一定 的差异 ,但是无明 显 的规律 ,菌丝生长对光照要求不高。分生孢子萌
6 9t - m,孢 子 集 生 呈 灰 色 。 菌 核 褐 色 ,形 状 不 规 x
后变 暗褐 色软腐病 萎蔫 ,严重 时整个花 序坏死 ,
表面密生 灰色霉 ,稍一触 动 ,即可到处飞扬 。葡 萄灰霉病在田间通常造成落花落果和果实腐烂 。 贮藏 阶段 ,浆果染病 早期 在果皮上 出现直径 2 3 m 的圆形 凹陷病斑 ,果 肉仍维持原有硬度 , ~ m 病斑颜色稍浅于周 围的正常组织 。用手轻擦病 斑 部 位 ,可见表 皮易与果 肉分离 而发生 局部脱 落 ,
生 ,主要从事植物病理方面的教学与科研工作 。
通讯作者 E maljh e @sh . r - i zw n o u o : cn
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葡萄灰霉病生物学特性研究白晓蒙生命科技学院植物保护0802班指导教师:齐慧霞摘要:为进一步了解葡萄灰霉病的发病规律, 对其病原菌生物学特性进行了系统的研究。

结果表明:葡萄灰霉病菌生长的最适宜温度是20℃~25℃,在各种营养条件的培养基上均能生长,其中最适宜的是在以蔗糖为碳源的培养基和以硝酸钾为氮源的培养基。

最适宜于灰霉菌丝生长的固体培养基是胁本哲式培养基,最适宜的液体培养基是PDA培养基,光照对菌丝生长也有一定的影响,连续黑暗最适宜于菌丝的生长。

分生孢子的致死温度是58℃, 5min。

关键字:葡萄灰霉;生物学特性;分生孢子。

灰霉病是由灰霉菌(B otry tis cinerea) 引起的一种世界性的重要病害, 能危害蕃茄、草莓、黄瓜、葡萄等多种植物, 引起果实蔬菜腐烂, 损失比较严[1 2]。

1999 年张继民[3]对灰葡萄孢菌的生理和形态特征进行了研究; 但对灰霉病菌的生物学特性缺乏系统的报道.本试验汲取前人的经验, 在培养基、温度和孢子萌发的试验范围上更加广泛, 试验更加系统。

试验与前人多数结果一致, 以期为今后葡萄灰霉病的发生与防治提供更为可靠的参考依据。

1 1材料与方法1.1 材料供试菌株:2010年10月从秦皇岛市昌黎县中粮集团华夏葡萄酿酒公司的葡萄基地上采集带有灰霉病菌的果实,经过组织分离,单孢纯化[4],镜检观察分生孢子和分生孢子梗的形态,经鉴定[5﹑6]属于Botryis cinerea .,将纯化的病原菌转入PDA试管斜面中保存备用。

A: 分生孢子梗B:分生孢子C:菌核1.2 病原菌生物学特性研究1.2.1温度对菌丝生长的影响在马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA)平板中央接入菌龄相同的直径为0.04cm的菌饼, 每皿1 片, 分别别置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃下的恒温培养箱中培养[7]每处理3皿,3次重复,用十字交叉法逐日测量菌落直径并记录[8]。

1.2.2 温度对病原菌分生孢子萌发的影响将病原菌在PDA平板培养基上培养7天,刮取其上的菌落,用无菌水配成孢子悬浮液,用纱布过滤得到分生孢子液,3000r/min离心10min,用灭菌的蒸馏水将分生孢子稀释至10×40视野下100个孢子左右备用。

用载玻片萌发法:培养皿中放一张滤纸(滤纸上打两个孔),上面放一个载玻片,用干热灭菌。

使用时,在载玻片上加两滴孢子悬浮液,位置在滤纸孔上方,培养皿中加适量的水,润湿滤纸,并除去玻片下滤纸空隙处的气泡,将培养皿置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃下进行培养,每处理3皿,3次重复,24小时后检查分生孢子的萌发率1.2.3 分生孢子致死温度的测定取10ml孢子悬浮液(400倍镜下50~100个孢子/视野)于灭菌试管中,分别于40℃、45℃、50℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃不同温度处理5 、10分钟后,接种到培养基上,4d后观察菌落生长状况,以不产生菌落为致死温度。

1.2.4光照对病原菌菌丝生长及分生孢子萌发的影响在PDA平板上移入直径4mm的菌苔,在25℃下分别置于连续光照,12h光暗交替,完全黑暗3组光照条件下培养,用十字交叉法逐日测量菌落直径,每处理3皿,将滴有分生孢子悬浮液的载玻片置于3组光照处理下保湿培养24小时后镜检其萌发率。

1.2.5不同固体培养基对病菌菌丝生长的影响将直径为5mm的病菌菌饼接种到燕麦片、玉米粒、PDA、PSA ,胁本哲式、大米汁、Czapek7种固体培养基上,置25℃恒温光照条件下培养,用十字交叉法逐日测量菌落直径,每处理三皿1.2.6不同液体培养基对病菌菌丝生长的影响配制Czapek、小麦汁、胁本哲氏、PDA、PSA、大米汁和燕麦片7种液体培养基,各取100mL 于体积为250mL的三角瓶内,每瓶接入两块直径5mm的病菌菌饼,置于摇床上28℃、120 r/min 振荡培养,7天后测量产孢量和菌丝干重。

1.2.7不同营养条件对病菌生长和产孢、孢子萌发的影响Richard培养基为基础培养基,以30 g蔗糖的含碳量为标准,分别用相同含碳量的葡萄糖、麦芽糖、乳糖和可溶性淀粉替换蔗糖,配制成含有不同碳源的培养基。

以10 g硝酸钾的含氮量为标准,以分子量计算,分别用相同含氮量的硝酸铵、硫酸铵、尿素、蛋白胨替换硝酸钾,配制成含有不同氮源的培养基。

2 结果与分析2.1 不同条件对病原菌菌丝生长的影响2.1.1不同温度对菌丝生长的影响表1不同温度对菌丝生长的影响温度(℃)菌丝生长直径(cm)1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d5 0.40 0.40 0.4 0.75 1.27 2.70 3.1210 0.40 0.40 1.183 2.83 4.82 7.20 8.0815 0.62 1.67 2.77 3.67 5.00 6.62 7.6220 0.65 2.67 3.85 7.35 8.12 8.40 8.4025 0.98 3.927 6.27 7.77 8.40 8.40 8.4030 0.59 1.56 2.65 3.75 4.76 6.67 8.35由表1可知灰霉病菌在5~30℃的范围内均可生长,5~10℃范围内菌丝生长缓慢,最适宜菌丝生长的温度是20~25℃,在第5d和第六天即达到到满皿,显著高于其他温度,35℃以上的温度条件下菌丝停止生长。

说明,灰霉病菌中、低温环境较适宜其生长发病。

2.12不同营养条件对病菌生长的影响表2不同碳源培养基对菌丝生长的影响不同碳源培养基生长速度有所差异,在乳糖和葡萄糖为碳源的培养基上第3d时的菌落直径之间无显著差异但与其他碳源之间存在极显著差异,在第4d时在以麦芽糖为碳源的培养基上菌落生长加快与葡萄糖、乳糖之间无显著差异,与其他三种碳源的培养基仍然达到极显著差异的水平,因此不同碳源培养基菌丝生长的顺序依次又大到小依次是蔗糖>乳糖>葡萄糖>麦芽糖>可溶性淀粉。

表4不同氮源培养基对菌丝生长的影响由表4可知以硝酸钾和蛋白胨为氮源的培养基最适宜于灰霉菌落的生长,均在第五天就达满皿,由表5可知葡萄灰霉菌种在不同碳源培养基上的生长速度之间存在差异,第3d时以硝酸铵和以硫酸铵为氮源的培养基之间无显著差异,硫酸铵和硝酸钾之间亦无显著差异但与其他氮源之间存在显著差异,在4d时以尿素为氮源的培养基上菌落生长加快与以硝酸铵为氮源的培养基之间无显著差异,综合以上情况可知在不同氮源培养基菌丝生长的顺序依次又大到小依次是硝酸钾>蛋白胨>硝酸铵>硫酸铵>尿素表7不同固体培养基菌丝生长的差异由表6可知最适宜灰霉菌丝生长的培养基是胁本哲式培养基,其前期生长缓慢在第三天时生长速度加快,菌落直径明显大于其它各个培养基,在第四天即达到满皿状态。

其次是PDA、PSA和大米汁培养基较适宜于菌落生长均在第五天达到满皿状态。

玉米汁、cazpek均在第七天时达到满皿,最不适宜于灰美菌落生长的是燕麦片培养基。

2.1.3光照对病原菌菌丝生长的影响由表8可知在持续黑暗、光暗交替、连续光照三个处理下,连续光照最适宜于菌丝的生长在第三天就达到满皿状态,其次是光暗交替较适宜于菌丝生长,第四天达到满皿,持续黑暗最不适于灰霉病的发生。

2.14不同液体培养基菌丝干重图1不同液体培养基菌丝干重5101520P D AP S A小麦c a z p e k胁本玉米汁大米汁培养基菌丝干重由图1可知最适宜于葡萄灰霉菌落生长的液体培养基是cazpek ,各种液体培养基的适宜程度依次是cazpek>PDA>PSA>玉米汁>胁本>大米汁>小麦. 2.2 不同条件对分生孢子萌发的影响 2.2.1 温度对分生孢子萌发的影响图2不同温度处理下孢子萌发率10203040505℃10℃15℃20℃25℃30℃35℃40℃温度孢子萌发率(%)由图2葡萄灰霉病菌的孢子在5 ~ 35 ℃范围内均能萌发,5℃和10℃萌发率较低仅为3.7%和16.4%在20 ℃和25 ℃ 条件下萌发率较高,分别为41.1%和38. 0%; 其次为15 ℃ 和30 ℃,萌发率分别为21. 7% 和24. 8%; 35 ℃萌发率极低,仅为1. 4%。

在20 ℃和25 ℃条件下的萌发率最高。

2.2.2不同培养基对孢子萌发的影响图3不同培养基24h孢子萌发率510152025303540玉米汁胁本哲式P S AP D A小麦大米培养基孢子萌发率(%)由图3可知在以上几种培养基中,灰霉孢子在24小时时均可萌发,其中以大米为主要材料的培养基中萌发率的最大达37.83%,在不同培养基中孢子萌发率由大到小依次是大米>小麦>玉米汁 >PDA >PSA>胁本哲式2.2.3不同培养基对孢子萌发的影响图4不同氮源24h孢子萌发率102030405060蔗糖麦芽糖乳糖葡萄糖淀粉碳源孢子萌发率(%)由图4可知在以上几种培养基中,灰霉孢子在24小时时均可萌发,其中以麦芽糖最适宜于菌丝的生长,萌发率达到55.33%。

在不同碳源培养基中孢子萌发率由大到小依次是麦芽糖>淀粉>蔗糖 >乳糖>葡萄糖。

图5不同氮源培养基24h孢子萌发10203040蛋白胨硫酸铵硝酸铵尿素硝酸钾氮源孢子萌发率(%)由图5可知可知在以上几种培养基中,灰霉孢子在24小时时均可萌发,最适宜于孢子萌发的是以蛋白胨为氮源的培养基,其萌发率显著高于其它三种氮源的培养基。

2.2.4 光照对分生孢子萌发的影响图6不同光照条件下24h孢子萌发率76788082848688全光光暗交替全暗光照条件孢子萌发率(%)由图6可知光照对灰霉菌孢子的萌发也有一定的影响,最适宜于其萌发的光照条件是全暗,其次是光暗交替,最不适宜的是全光照的条件。

孢子在40 ℃、45 ℃、50 ℃和55 ℃恒温水浴中5min 和10min 后,接种4d 后均能萌发形成菌落,60 ℃恒温水浴中5min 和10min 后,接种4 d 后不能萌发形成菌落。

因此,再进一步试验,将孢子置于56 ℃、5 7 ℃、58 ℃和59 ℃恒温水浴5min 和10min 后接种,结果表明: 56 ℃和57 ℃恒温水浴5min 和10min 后,接种4d 均能形成菌落;58 ℃和59 ℃,5min 和10min 后,接种4d 均不产生菌落。

因此,孢子致死温度为58℃,5min。

3.结语与讨论3.1 葡萄灰霉病菌在5~30℃下均可生长, 但生长速度存在显著差异,20~25℃生长速度最快次之. 胁本固体培养基最适合菌丝生长, 且有利于病菌产孢; 与雷百战等[9]研究的葡萄灰霉病菌生物学特性有所不同,有待进一步探讨.他们的研究结果是最适宜的温度是15~25,最适宜的培养基是PDA培养基3.2本试验中光照条件对灰霉菌的生长和孢子的萌发也有一定影响。

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