猪腹泻病检测仪
仔猪轮状病毒的分离与鉴定
∞上海市畜牧兽医学会２００４年学术论文集份流行结束，共死亡仔猪１３００头，３曰龄仔猪病症明显严重，一般于发病后３ｄ内死亡．病死率为１００％。
２０日龄仔猪发病率也高达１００％，但死亡率仪５％，耐过猪５ｄ左右康复，断奶后猪和成年猪均无临脒症状。
患猪临床症状表现为食欲和精神不振，挤堆，呕吐，呕吐物呈黄色胶冻状，乳白色水样腹泻，消瘦，苍白，脱水，最后衰竭而死，体温基本正常，后期稍有降低。
患猪用各类抗生素治疗无效。
剖解病变：肠系膜淋巴结水肿、充血，胃驰缓，充满凝乳块和乳汁，胃底粘膜充血，小肠充ｉ血，肠管变溥。
粘膜易脱落，内容物为液状，呈乳白色，脾肿大，ｄ肠绒毛缩短。
２２实验室监测结果经空脑绒毛检查，受检患猪空肠样品均呈现绒毛轻度萎缩变短，粗细不均。
直接荧光抗体试验检测ＴＧＥＶ和ＰＥＤＶ：４份空肠样品中。
均未检出ＴＧＥ和ＰＥＤ阳性。
双抗体夹心浩ＥＬＩＳＡ检测轮状病毒：经对４份猪腹泻粪便样品的检测，３份为阳性。
电镜观察：经对４份粪便样品的观察，有３份观察到特异的轮状病毒颗粒，病毒粒子略呈球形，具双层衣壳，直径为６５～７５ｎｍ、见图１。
３小结与讨论３．１根据流行病学调查和实验室检测结果．我们认为本病是由猪轮状病毒感染所引起．经用哈尔滨兽医研究所生产的猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒二联苗对发病仔猪群和全场母猪２ｍｌ／头进彳亍紧急免疫后．疫情得到了有效的控制。
３，２自从１９８２年我国营次从水牛中分离到轮状病毒以来１２］．己从多种动物中分离到病毒，猪群的感染也较普．ｉ崮ｔｔ３，４ｌ。
李国平等人经对福建省部分地区猪群的调查，结果显示１０日龄至断奶时阳性率高达８２．３％一。
．、尹１粤警ｊ寥妻粒子擘志｛１７万倍）９１．７％ｔｓ，。
去冬今春，上海有多家已免疫了猪流行性腹ｎｇ。
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泻和传染性胃肠炎两联苗的规模化猪场仔猪发生病毒性腹泻。
经诊断为猪轮状病毒感染。
造成很大损失㈣。
本病为上海规模化猪场近几年新出现的疫病，值得引起必要的关注和预防。
牦牛感染牛病毒性腹泻病毒的诊断
25看到出现被染色的感染细胞，既可以对猪流行性腹泻进行确诊。
5 治疗方法由于该病属于病毒感染，目前对与该病并没有特效的治疗药物以及治疗方法，临床上主要是通过对症治疗来降低仔猪的死亡率。
猪场发病以后，应停止为猪群提供饲料，多为其饲喂清洁的饮水，可以在饮水中添加少量的食盐或者食用红糖以防病猪因腹泻而出现脱水。
每天为病猪喂服口服盐溶液，其具体配方为：氯化钠13.5g、氯化钾1.55g、碳酸氢钠2.5g、葡萄糖20g 以及水1,000ml。
此外，每天为病猪按0.1mL/kg •bw 肌肉注射一次2.5%的恩诺沙星或者每天早晚按2.5mg/kg·bw 各肌肉注射一次盐酸环丙沙星注射液，从而防止并发感染。
6 结语猪流行性腹泻一旦发生会给养殖场带来巨大的经济损失。
因此，养殖户在日常的饲养过程中应加强饲养管理并对猪群进行免疫接种，一旦发现病猪应对其进行隔离并治疗以防病情的扩散。
只有这样，才能最大限度地减少猪流行性腹泻造成的损失。
■牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）属于黄病毒科瘟病毒属成员，为牛病毒性腹泻（Bovine viral diarrhea，BVD）的致病原。
BVDV 的感染非常普遍，可以感染黄牛、水牛、牦牛和猪、羊等动物，是当前危害养牛业的重要病毒性传染病之一。
患病动物和带毒动物为主要传染源，病畜的分泌物和排泄物都含有病毒，病毒可通过接触以及空气水平传播，还可以通过胎盘垂直传播，致使新生犊牛发生流产或死胎。
不同饲养方式、品种和年龄的牛均易感，但对犊牛的危害最为严重，一年四季都可发生，冬末和春季高发。
牦牛是我国高原牧区特有的一个独立物种，牦牛全身是宝，其奶和肉可食用，毛皮可以制作皮革和衣服，粪牦牛感染牛病毒性腹泻病毒的诊断任宜家（青海省海北州祁连县畜牧兽医站 青海海北 810499）作者简介：任宜家（1979年— ），男，汉族，青海人，本科，畜牧师，研究方向：畜牧兽医。
猪捷申病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立和初步应用
Chinese Journai of Veterinaa Medicine中国兽医杂志2020年（第56卷）第11期37猪捷申病毒TaqMan定量RT-PCR 检测方法的建立和初步应用秦毅斌1,苏乾莲1,赵硕2,卢冰霞1，何颖1,周展宏1,2,李斌1,1,2,赵武1（1.兽医研究所广西兽医生物重验室，530001；2.广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005）摘要:为建立猪捷申病毒(PTV)的TaqMan实时荧光定量RT-CR(RT-qPCR)检测方法，在PTV基因组序列保守区设计引物和TaqMan,重组为阳性标准品，通过优化反应,了PTV的RT-qPCR方法，并进行特异性、感性和重复性试验。
结果表明，该方法仅对PTV出现特异性扩增反应，与猪流行性腹泻、猪状、猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒等常见猪病毒均无交叉反应。
该方法的标准曲线Ct值与4.6x108~4.6x102拷贝/$L的质粒浓度范围具有良好线性关系，标准曲线方程为C=-3.201xlog?+40.527,线性相关系数(*)为0.996，检测下为4.6x 101拷贝多L对不同浓度的pMD18-PTV进行组内与组间重复检测，每个浓度重复试验的C值的变异系数均小于4.0%，好的重现性。
应所的方法对235份临床猪腹泻进行，PTV阳性32份，性为13.62%$本试验的RT-qPCR方法为PTV实验及研究分析提供了可靠的$关键词：猪捷申病毒；荧光定量RT-PCR;TaqMan探针中图分类号：S852.65T文献标志码：A文章编号：0529-6005(2020)11—0037—06Development and Preliminary Application of a Real-time TaqMan Fluorescent Quantitative RTPCR Assay for Detection of Porcine TeschovirucQU Yi-bin1，SU Qian-lian1，ZHAO Shuv2，LU Bing-xia1，HE Ying1，ZHOU Zhan-hong1，YUAN Ting-ting2，LI Bin1，DUAN Qun-peng1，OUYANG Kang2，ZHAO Wu1(1.Guangpi Veterinaa Research N s/NN，Guangxi Key Laboatoa of Veterinary Biotechnology，Nanning530001，China；2.Colleae of Anival Science and Technolog，Guangxi Universith，Nanning530005，China)Abstract:To establish a real-time TaqMan fuorescent quantitative RT-PCR(RT-qPCR)assay for the detection of porcine te-schovRus(PTV)，p/mem and TaqMan fluorescent probe were desianed according tr the conserved reaion of PTV genome sequence.A recombinant plasmid was constructed as the positive standard sample，and RT-qPCR was developed by optimization of reacting conditions./urthermoro，the specificity，sensitivity and repeatabilith of the established RT-qPCR were tested.Results showed that there was no cross-reaction with conventionai porcine viruses，such as porcine epidemic diarrhea virus，porcine tansmissible gastroenteritis，porcine deeacoanavRus，porcine rotavirus group A，and et ai.The assay was lineas for the template plasmin pMD18-TTV in the range from4.6x108copies/$L te4.6x102copies/$L，the standard equation was C=-3.201x log?+40.527，coeelation coefficient was*=0.996，and detection limit was low te4.6x101copies/$L.Also，the assay showed the good reproducibility with the coefficient of variation(CV)less than4%both in intra-5ssay and inter-5ssay.ThRty-two of the235clinicai fecai samples collected from dVferent areas in Guangi were positive for PTV tested by the developed assay.In conclusion，the development of this assay provides a convenient，specific and sensitive diagnostic method for the PTV detection and epidemiologicai investigation.Key words:porcine teschovRus；real-Cme TaqMan Iuorescent quantitative PCR；TaqMan Iuorescenco probeCorressonding author：ZHAO Wu，E-maii:zhaowul68866@收稿日期：2020—05—10基金项目:广西创新驱动发展专项资金项目（桂科AA17204057）；广西基本科研业务费专项（桂科专项202/19-2）；广西自然科学基金项目（2017GXNSFBA198092）；广西兽医生物技术重点实雌开放基金课题（16A?0A5氨A/17A59A6氨A）；广西柳州市科技计划（2018BH20501）作者简介:秦毅斌（1983-）,男，高级兽医师，硕士，研究方向为动物传染病病原与分子生物学,E-mel：qmymm51??@163•com通讯作者:赵武,E-maii:zhaowu168866@163-com38中国兽医杂志2020年(第56卷)第11期Chinese Journai of Veterinao Medicine猪捷申病(Porcina teschen disease,PTD)，又称塔尔凡病或脑脊髓炎，是由猪捷申病毒(Porcine tv-schovirus,PTV)感染引起的一种猪病毒性传染病$该病首次于1929年在捷克斯洛伐克的捷申地区发现，故命名为“捷申病”，随后传播至北美%非洲、澳大利亚和日本等国家，目前已散布于世界各养猪国家(1猪群感染PTV后，主要表现为腹泻、脑脊髓灰质炎⑵、肺炎、心包炎、心肌炎、皮肤损坏等症状,母猪还可导致繁殖障碍［3］,感染发病猪具有较高的病死率,给养猪业带来了较大经济损失$PTV属于小RNA病毒科(PRomavibdae)捷申病毒属(Teschovirus)成员，病毒粒子呈球形,外层包裹衣壳，无脂蛋白，病毒基因组为单股正链RNA,长约7.2kb,仅含有1个完整的编码1个多聚蛋白的开放阅读框!0RF)，该多聚蛋白被蛋白水解酶裂解为非结构蛋白2A、2B、2C、3A、3B、3C、3D和结构蛋白L、VP1、VP2、VP3%VP4(45)$PTV至少有11个血清型［6］,并且还不断出现新的血清型PTV12(7)、PTV13［8］$研究表明，我国猪群PTV感染较为普遍。
兽医检验试题+答案
兽医检验试题+答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、猪炭疽最常见发病部位是（）A、头颈部B、肠道C、肺脏D、皮肤正确答案：A2、待宰圈的地面坡度应（）。
A、＜1.5%B、＜1%C、≥1.5%D、1%～1.5%正确答案：C3、胴体剖检时，每侧胴体由上向下依次进行检验的部位分别是（）A、腰肌、肾脏、腹股沟浅淋巴结B、腹股沟浅淋巴结、腰肌、肾脏C、腹股沟浅淋巴结、肾脏、腰肌D、腰肌、腹股沟浅淋巴结、肾脏正确答案：B4、大肠菌群是粪便污染指示菌，它能反映食品（）。
A、被大肠杆菌污染的风险B、被肠道致病菌污染的风险C、被细菌污染的风险D、被沙门菌污染的风险正确答案：B5、肉品水分测量时可采用直接干燥法和（）。
A、红外水分测定法B、称量法C、紫外测定法D、天平称重法正确答案：A6、宰前群体检查的“三态”检查包括（）A、静态检查、动态检查、饮态检查B、静态检查、体态检查、饮态检查C、动态检查、饮态检查、体态检查D、体态检查、食态检查、饮态检查正确答案：A7、应配置PCR仪的检验室是（）A、微生物检验室B、理化检验室C、核酸检验室D、免疫学检验室正确答案：C8、肉品品质检验合格验讫印章的大印章应加盖在（）A、经肉品品质检验合格的生猪胴体B、《肉品品质检验合格证》C、产品外包装D、《动物检疫合格证明（产品A）》或《动物检疫合格证明（产品B）》正确答案：A9、关于出血性梗死不正确的描述为（）A、梗死灶呈黄白色B、常见于肺脏C、常见于脾脏D、梗死灶呈暗红色正确答案：A10、猪心肝肺取出后，在同步轨道钩子上检查时的挂钩部位为（）A、喉口B、肝脏C、心脏D、支气管正确答案：A11、进行猪二尖瓣检查时的不正确操作为（）A、左手环握心脏B、心尖朝向检验员，心前缘朝上C、右手握刀，于心脏前纵沟的右侧1.5cm处进刀D、由左心房至心尖全部剖开，打开心腔正确答案：C12、不会导致生猪病理性出血的是（）A、有机磷中毒B、砷中毒C、候宰时被驱打D、患非洲猪瘟正确答案：C13、生猪屠宰过程中，盛装废弃物和肉类的容器（）。
猪博卡病毒病原学和检测方法研究进展
猪博卡病毒病原学和检测方法研究进展汪洋;李玲;李真;李峰【摘要】猪博卡病毒是2009年新发现的一种猪细小病毒,近几年来在我国感染率日益升高,且常常与其他病原混合感染,增加了疫病防控的难度.论文就猪博卡病毒病原学与检测方法做一综述,为提高我国猪博卡病毒的综合防控能力提供参考.%Porcine bocavirus is a swine parvovirus recently discovered.In recent years the infection rate was increasing in China,and often mixed infection with other pathogens,thus increasing the difficulty of disease prevention and control.This paper makes a review on the etiology and detection methods of porcine bocavirus,in order to provide reference for improving the comprehensive prevention and control of porcine bocavirus in China.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2017(038)004【总页数】4页(P98-101)【关键词】猪博卡病毒;病原学;检测方法【作者】汪洋;李玲;李真;李峰【作者单位】山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州256600【正文语种】中文【中图分类】S854.43;S852.659.2猪博卡病毒(Porcine bocavirus，PBoV)是一种新型的猪细小病毒(Porcine parvovirus，PPV)，于2009年首次在患断奶仔猪多系统衰竭综合征(Post weaning multisystemic wating syndrome,PMWS)的仔猪淋巴结中分离鉴定出来[1]，随后世界养猪密集地区陆续发现该病毒的感染，目前该病毒已呈世界范围内流行[2-5]。
5种猪病多重PCR检测方法的建立
5种猪病多重PCR检测方法的建立王隆柏;张志刚;苏永裕;车勇良;吴学敏;周伦江【摘要】为建立猪群常见疫病多重PCR诊断方法,本研究据GenBank发表的猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)和猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)基因序列,设计并合成了5对特异性引物.通过反应条件优化、特异性、敏感性和重复性测定,建立了能同时扩增CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、PPV5种病毒的多重PCR方法.结果表明该方法只能检测出CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、PPV 5种病毒,不能检测出猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)、猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)、猪链球菌(Streptococcus suis,SS)和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),能检测到CSFV、PRRSV、PRV、PCV2和PPV的核酸浓度分别为220、1.6、72、400和370 pg.初步应用结果表明,建立的多重PCR方法适用于对CSFV、PRRSV、PRV、PCV2和PPV的快速诊断.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2014(041)002【总页数】5页(P21-25)【关键词】猪瘟病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;猪伪狂犬病病毒;猪圆环病毒2型;猪细小病毒;多重PCR;建立【作者】王隆柏;张志刚;苏永裕;车勇良;吴学敏;周伦江【作者单位】福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;肉食品安全生产技术国家重点实验室,福建厦门 361100;肉食品安全生产技术国家重点实验室,福建厦门 361100;福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013【正文语种】中文【中图分类】S852.65近年来，随着中国养猪业规模化、集约化蓬勃发展，猪病的发生和流行对养猪生产的危害日趋加重，且多病原混合感染已成为当前猪群疫病流行的主要形式与特点（陈焕春，2011）。
猪衣原体病病例报告
后PEDV 流行毒株由经典的G1型变为变异型G2型，G1经典毒株进化亚支G1a 主要是弱毒疫苗株及其衍生毒株，G1b 主要是传统意义上认为的田间流行经典野毒株。
G2变异毒株进化亚支G2a 主要是2010—2013年分离毒株，G2b 主要是2016—2019年分离的流行毒株，也是当前主要流行毒株，G2c 亚支则为重组毒株。
为了解猪场PEDV 流行毒株变异情况，对PEDV 邹平株S1基因进行克隆测序，并用DNAMan 软件进行遗传进化分析，以了解猪场流行毒株的S1基因遗传变异特点，旨在为猪场PEDV 疫苗的选择提供一定参考依据。
本研究所获得的PEDV 邹平株序列则属于G2b 进化分支，这对于邹平地区PED 的分子流行病学监测和防控具有重要意义。
猪流行性腹泻无有效药物治疗，只能以疫苗预防为主，然而免疫接种经典PEDV 毒株疫苗的猪场也常有PED 发病，推测由于PEDV 流行毒株发生变异，传统基因型疫苗毒株防控效果不理想所致，因此，选择当前流行毒株制备疫苗是防控PED 的关键。
猪场发病后除紧急接种适宜毒株疫苗外，还应该加强饲养管理，饲喂全价配合饲料，保证猪舍适宜的温度和湿度，饮水清洁卫生，定期清理卫生，加强消毒，无害化处理病死猪，开展灭蚊蝇灭鼠工作，做好后备猪驯化及常规疫苗免疫接种工作等综合性防控措施。
参考文献[1]李天芝，于新友，梅建国，等.猪流行性腹泻病毒分子生物学检测方法研究进展[J].养猪，2016（5）：81-84.[2]霍琳琳，李曦.黑龙江省2017年猪流行性腹泻病毒S1基因的遗传演化分析[J].黑龙江畜牧兽医，2020（1）：77-83，86.[3]Lee C.Porcine epidemic diarrhea virus:An emerging and reemerging epizootic swine virus[J].Virol J,2015,12:193.[4]潘孝成，沈学怀，赵瑞宏，等.流行性腹泻病毒5株猪安徽流行株S 基因的克隆与序列分析[J].养猪，2019（4）：109-112.[5]郭振华，阮海宇，李翔，等.2017年河南省猪流行性腹泻病毒检测及基于S1基因片段的遗传变异分析[J].中国兽医学报，2020，40（1）：1-8.[6]张辛铭，杨顺利，马雪婷，等.3株临床分离的猪流行性腹泻病毒S 基因克隆及序列分析[J].动物医学进展，2020，41（7）：16-20.（编辑：郭玉翠）猪衣原体病病例报告曾作财1，袁丽娟1，陈良荣2，吴文桃1，曾升坚1（1.江西农业工程职业学院，江西樟树331200；2.江西加大畜牧有限公司，江西赣州341000）中图分类号：S858.28文献标志码：A文章编号：1002-1957(2020)05-0126-03收稿日期：2020-04-25作者简介：曾作财（1983-），男，江西广昌人，讲师，硕士，主要从事动物健康养殖与疾病防控工作.E-mail:*****************衣原体是一种介于病毒和细菌之间，严格细胞内寄生的微生物。
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猪腹泻病核酸检测仪
一、仪器简介 猪腹泻病包括猪流行性腹泻(PED)、猪传染性胃肠炎（TGE)和猪轮
状病毒病(PRV-A)。猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的一种急性、
高度传染性肠道疾病, 可引起呕吐、腹泻、脱水，表现为高发病率和高死亡率；
猪传染性胃肠炎又称幼猪的胃肠炎，是由猪传染性胃肠炎病毒引起的猪的一种高
度接触传染性，以呕吐、严重腹泻、脱水，致两周龄内仔猪高死亡率为特征的病
毒性传染病；猪轮状病毒病是由猪轮状病毒引起的一种幼龄猪急性消化道传染
病，一般仔猪感染较多，中猪和大猪常为隐性感染。当猪腹泻病感染猪场后,对
所有猪群都能造成不同程度的损害,并导致严重的经济损失。猪腹泻病核酸检测
仪采用荧光定量PCR技术对猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒或猪轮状病
毒进行检测，灵敏度高，特异性强，在发病早期即可作出准确的诊断，是猪腹泻
病理想的检测仪器。
二、检测范围 猪流行性腹泻检测样本包括：肠内容物、肠系膜淋巴结和排泄物；
猪传染性胃肠炎检测样本包括：排泄物和肠内容物；猪轮状病毒病检测样本包括：
肠内容物、肠系膜淋巴结和排泄物。
三、仪器特点 BioG T16荧光定量PCR仪是我公司吸收了国外先进技术最新推
出的实时荧光定量PCR检测系统，该机性能稳定，反应效率高，具有卓越的检测
灵敏度，具体特点如下：
1.采用独特的光学设计路径，光信号非常稳定，并能检测到极弱的荧光信号。与
传统检测技术相比，仪器检测灵敏度较高，可以检测到弱阳性样本和早期感染样
本，不会漏诊，能够及时发现猪腹泻病感染病猪，避免养殖损失；
2.采用Taqman探针技术，引物、探针双重特异性保证，特异性高，不会误诊；
3.可生成标准曲线，对病原体进行定量检测，实时评估病情发展和治疗效果，指
导进一步用药；
4. 高通量设计，一次可检测16个样品，每个样品可检测2种病原体，可同时检
测多个项目，最多可同时检测32个项目；
5.人性化软硬件设计，大尺寸（10吋）触摸屏控制，图标式设置，操作极为舒
适简便。
6.除猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒外，还可广泛用于猪蓝耳
病、猪伪狂犬病、非洲猪瘟、猪瘟、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪肺疫、口蹄疫、
猪流感等感染性疾病的检测，可广泛应用于动物疫病预防控制部门、养殖场、屠
宰场,猪肉制品生产企业等。