板青颗粒在体外对大肠杆菌的抑制效果研究
复方荔枝草颗粒体内外抗菌消炎作用研究
动学。电话： ５ ３３４１ 一自 汤 ２ ０ 一８（ ６６ 义 ９ ）
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复方荔枝草颗粒为南京大学医学院附属鼓楼医院院内制 剂， 具有清热解毒、 利尿通淋之功效川 临床用于治疗泌尿系统 ， 感染２ 多年， ０ 疗效较好且毒副作用较低。 为了进一步研究开发 该药， 笔者对复方荔枝草颗粒在抗菌消炎方面的药效作用进行 了研究。 １ 材料
１１ 仪器 ．
荔枝草颗粒（ 南京鼓楼医院药剂科提供， 批号：０５２１实验 ２ １０ ，
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・
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 绿脓杆菌 变形杆菌 肺炎克雷伯杆菌 表皮葡萄球菌 拘椽酸杆菌 不动杆菌
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０． ３ ０２ ０．６ ０３ ０． １ ０６ ０． ６ ０３ ０． １ ０６ ０．３ ０２
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复方荔枝草颗粒体内外抗菌消炎作用研究
黄 庆‘方 芸 “． 京 医 大 药 院南 市 ２０ ； 南 大 医 院 属 楼 院南 市 ＊ ， ’１南 中 药 学 学 ，京 １２ ． 京 学 学 附 鼓 医 ，京 （ ０９ ２
２０ ） １０ ０８
中图分类号 Ｒ ８．； ９７２ ２５５Ｒ ７ ． ７ 文献标识码 Ａ 文章编号 １ １０ ８２ ８０ 一 ６７ ０ ） （ ０ ０ ９ ０ 一 ４ 《 ） ０５一 ３ ） （
摘 要 目 研究复方荔枝草颖粒的抗菌消炎作用。方法： 的： 采用体内 和体外扰菌、 二甲苯致小鼠耳肿胀及二甲苯致小鼠腹部毛细 血管通透性实 研究复方荔枝草颖粗的杭菌消炎作用。 脸， 结果： 复方荔枝草颗杜在体外对 金黄色葡萄球菌、 绿脓杆菌、 大肠杆菌及变 形杆菌有不同 程度的抑制作用； 能够显著降低变形杆菌感染小鼠的死亡率， 但对大肠杆菌感染小鼠的死亡率没有显著作用； 能显著 抑制二甲苯所致小鼠 耳肿胀和小鼠腹部毛细血管通透性增加。结论： 复方荔枝草颖杜体内、 外均具有良 好的杭菌消炎作用。 关键词 复方荔枝草颖粒； 抗菌作用； 消炎作用； 体内、 外实脸
克痢痧胶囊体外抑菌实验研究
实用中西医结合临床２００７年８月第７卷第４期噻肟、环丙沙星、复方新诺明、红霉素、四环素等高度耐药，耐药率５０％以上。
而甲氧西林敏感葡萄菌对青霉素Ｇ、氨苄西林、红霉素出现高度耐药，对头孢唑啉、头孢噻肟、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明、利福平、呋喃妥因等耐药率低于４５％。
因此，临床上检测甲氧西林耐药株或敏感株，对于指导临床用药有重要参考意义。
万古霉素、替考拉宁为糖肽类抗生素，其中万古霉素是临床上治疗ＭＲＳ最为经济、有效药物。
本文分离到的５２８株葡萄球菌中未发现万古霉素、替考拉宁耐药葡萄球菌。
近年来，不断有报道ＭＲＳＡ对万古霉素敏感性降低，而且先后有报道表皮葡萄球菌与溶血性葡萄球菌对万古霉素敏感性下降［２，３］。
因此，防止和减缓耐万古霉素葡萄球菌的出现，已变得非常迫切，临床上应避免预防性使用万古霉素，根据药敏试验合理使用抗生素尤为重要。
对多重耐药ＭＲＳ，应依据病情严重程度而采用万古霉素单用或与喹诺酮类药物如左氧氟沙星、利福平、呋喃妥因等联合治疗。
参考文献［１］汪复．实用抗感染治疗学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００４．５７￣５９［２］ＧａｒｒｅｔｔＤＯ，ＴｏｃｈｉｍｓｅｎＥ，ＭｕｒｆｉｔｔＫ，ｅｔａｌ．ＴｈｅｅｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆｄｅｃｒｅａｓｅｄｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｉｎＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ［Ｊ］．ＩｎｆｅｃｔｃｏｎｔｒｏｌＨｏｓｐＥｐｉｄｅｍｉｏｌ，１９９９，２０：１６７￣１７０［３］Ｄｅｌ’Ａｌａｍｏｌ，ＣｅｒｅｄａＲＦ，ＴｏｓｉｎＩ，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｃｏａｇｕｌａｓｅ－ｎｅｇａｔｉｖｅＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｉｓｏｌａｔｅｓｗｉｔｈｒｅｄｕｃｅｄｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｔｙｔｏｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ［Ｊ］．ＤｉａｇｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌＩｎｆｅｃｔＤｉｓ，１９９９，３４：１８５￣１９１（收稿日期：２００６－０９－２５）克痢痧胶囊体外抑菌实验研究李蔚辉黄莉华廖华（江西省新余市中医院新余３３８０２５）关键词：克痢痧；抑菌；实验研究中图分类号：Ｒ９６９．４文献标识码：Ｂ文献编号：１６７１－４０４０（２００７）０４－００８４－０１克痢痧组方源于浙南民间，应用已具一千多年的历史，克痢痧是由苍术、白芷、猪牙皂、石菖蒲、丁香、荜茇等十二种名贵中药材经现代方法研制而成，制成胶囊可克服口感不良的缺点，服用后起效快、效果显著。
抗菌抗病毒常用实验研究方法
抗菌抗病毒常用实验研究方法细菌、病毒性疾病是目前国内外流行的主要传染病,尤其是近两年来,由冠状病毒引起的SARS及由流感病毒引起的禽流感给动物及人类带来的严重危害,是人所共知的"由于各种疫苗的不断出现,虽然一些细菌、病毒病已得到了有效的控制,但是其治疗尚无有效的解决方法因此研制高效、低毒的新型中药抗菌、抗病毒制剂已成为巫待解决的问题。
1、常用的抗菌方法1、1稀释法1、1、1试管稀释法培养基内抗生素的含量按几何级数稀释并接种适量的细菌，经孵育后，观察能引起抑菌作用最低抗生素浓度，称最低抑菌浓度(MIC)为该菌对药物的敏感度。
稀释法所获得的结果比较准确，常被用作校正其他方法的标准。
如以下黄贝贝等的青钱柳抗菌作用的实验研究和黄利权等的火绒草的抗菌活性研究的实验方法:1、应用试管稀释法,测定青钱柳提取物对试验菌的抑菌效果,检验不同浓度下青钱柳提取物对细菌、霉菌的抗菌作用。
结果:青钱柳提取物在体外对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等革兰氏阳性菌具有较强的抗菌作用;而对大肠埃希氏菌、铜绿假单孢菌等革兰氏阴性菌的抗菌作用不明显;对黄曲霉、烟曲霉等霉菌的抗菌作用不明显[1]。
2、采用试管稀释法,分别测定了火绒草水煎液、水提醇沉液、醇提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提水溶部分等7种提取物对大肠杆菌C83882、大肠杆菌C83903、大肠杆菌C83914、沙门氏菌C79-20、金黄色葡萄球菌Newbould S-305、金黄色葡萄球菌临床分离株等6株病原菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。
试验结果表明,火绒草醇提物及其石油醚部分和乙酸乙酯部分对两种金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用,其MIC为0114 mg/ml生药浓度,MBC为0127 mg/ml生药浓度,而其它部分对金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱。
火绒草醇提正丁醇部分和水溶部分对3株大肠杆菌和1株沙门氏菌具有较强的抑制作用,其MIC为2170 mg/ml生药浓度,MBC为2170 mg/ml 生药浓度,显示了较强的抗菌活性[2]。
穿心莲水提取物对大肠杆菌临床分离株的体外抑制试验
穿心莲水提取物对大肠杆菌临床分离株的体外抑制试验
穿心莲（Centella asiatica）是一种常见的中药植物，被广泛应用于中医药领域。
研究发现，穿心莲具有多种药理活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等，以及对多种细菌具有抑
制作用。
本实验旨在研究穿心莲水提取物对大肠杆菌临床分离株的体外抑制作用。
我们从医院获得了10株大肠杆菌临床分离株。
这些菌株经过分离纯化后，存储在琼脂培养基中。
穿心莲水提取物的制备方法如下：将穿心莲干燥草药粉末加入乙醇中浸泡制备
提取液，用水蒸气蒸馏法浓缩提取物，最后用无菌蒸馏水稀释至所需浓度。
然后，我们对穿心莲水提取物进行了抗菌试验。
我们准备了Muller-Hinton琼脂平板，并用细菌涂布棒将菌液均匀涂布在琼脂平板上。
然后，我们在每个琼脂平板上制作了4个孔，每个孔都注入了不同浓度的穿心莲水提取物。
接下来，我们将平板孵育在37℃的恒温箱中，孵育24小时后观察菌落生长情况。
浓度最高并且能起到抑制菌落生长作用的穿心莲水提取物浓度将被确定为最低抑菌浓度（MIC）。
实验结果显示，穿心莲水提取物对大肠杆菌临床分离株具有抑制作用。
在不同浓度的
穿心莲水提取物作用下，菌落生长出现明显的抑制效果。
通过观察菌落的直径和菌落的数量，我们确定了不同浓度的穿心莲水提取物的最低抑菌浓度。
对于不同的大肠杆菌临床分
离株，最低抑菌浓度范围在100-500μg/mL之间。
浅谈黄芪甲苷及其在畜牧生产上的应用前景
摘要：近年来，我国经济社会不断发展，人民群众对畜禽产品的质量和安全有了更高的要求，怎样在绿色安全的前提下，提高动物生产性能，促进畜禽健康，已成为行业发展的重要课题。
2021年农业农村部印发《全国兽药抗菌药使用减量化行动方案（2021—2025年）》，将“促进兽用中药产业健康发展”作为重要内容，在全国范围内推广和应用兽用中药，鼓励和支持兽用抗菌药替代产品应用。
黄芪作为我国传统中药材的代表，其增强免疫、抗菌抗病毒等作用在人类和动物疾病治疗、预防中被广泛应用。
本文通过概述黄芪主要成分黄芪甲苷的主要作用，以期为黄芪甲苷在畜牧生产上的应用提供参考。
关键词：黄芪；黄芪甲苷；畜牧生产浅谈黄芪甲苷及其在畜牧生产上的应用前景赵同渊，杨香芳，刘召明，刘玉静*，王翠菊，魏嘉（青岛易邦生物工程有限公司山东青岛266113）doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2023.11.031收稿日期：2023-02-21作者简介：赵同渊（1978.10—），山东青岛人，大专，兽医师，主要从事兽用生物制品动物实验相关工作。
*通信作者：刘玉静（1985.2—），女，河北石家庄人，硕士，兽医师，从事兽用生物制品研发、检验等工作。
健康养殖黄芪（radix astragali）是豆科植物蒙古黄芪或荚膜黄芪的干燥根，古称黄耆又名绵芪或棉黄芪，其药用价值可追溯到2000多年前《神农本草经》，主要分布在我国北方地区。
现代药学研究表明黄芪的主要活性成分包括黄芪多糖、黄芪皂苷、黄芪异黄酮三种，均与黄芪扶正益气的效用有关，其中除黄芪多糖外，黄芪皂苷中的黄芪甲苷（astragalosideⅣ,AS-Ⅳ）研究较为系统，是《中国药典（2020年版）》和《中国兽药典（2020年版）》规定的黄芪定性定量指标之一，是黄芪的药效物质基础。
1黄芪甲苷概述皂苷是由苷元和糖组成的一类大分子化合物，广泛存在于植物中，具有消炎、抗癌、抗过敏、抗病毒、心血管保护等多种生物活性和药理作用，有重要的应用价值，目前已在黄芪中提取出超过40种皂苷成分。
清开灵口服液体外抑菌效果的实验研究
释为 １ １ 、 ／０两个浓度 ， 后无 菌操 作取直径 ４ ｍ 的滤纸 ／０１２ 然 ｍ 片６ ４张分别浸泡于装有 ２ 清开灵 口服液 原液 、／ ０清开灵 ｍｌ １１
口服液 、／ ０清开灵 口服液 、 理盐水 的无 菌玻 璃瓶 中 ， 瓶 １２ 生 每
ｌ ６张纸 片 ， 制成不 同的药物纸 片 ， 待干供用 。 １２ ３ 采 用 Ｋ－ ．． Ｂ纸片琼脂 扩散法检 测抑菌效 果 按 Ｋ Ｂ纸 － 片琼脂扩散法 的操 作 规程 ， 制备 好 的各实 验 菌液 在 １ ｍｉ 将 ５ ｎ 内分别接种 于 Ｍ－ 琼脂培养基 上 ， Ｈ 并将各个 实验 菌均分 为 ５ 组， 即清开灵 口服液原 液组 、 １／ １ Ｏ清开灵 口服液组 、 １／ ２ ０
１２ 方法 ．
抑菌强 度标 准 ＿ ： ３ 无抑 菌 圈者 为抗 药 ； 菌 圈直 径小 于 ］ 抑
１ｍｍ者 为低 度敏感 ； １ ～１ｍｍ 之 间者为 中度敏 感 ；５ ０ 在 Ｏ ５ １ ～
０ ０ ｍｍ， 国上 海 ， 圈 牌 ） 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅 （ 海 三 申公 司 ．２ 中 三 ， 上
绿脓杆菌 、 肺炎克 雷伯 杆菌 的平板 上 。然 后在 １ ｒｉ ５ ｎ内翻转 ａ 所有 的 Ｍ－ Ｈ琼 脂培养基 ， 并放 于隔水式 电热恒 温培养箱 中培
养， 每个平板单独摆 放 ， 中金 黄 色葡 萄球 菌 ３ ℃培养 １ ± 其 ４ ８ ２， ｈ 大肠杆菌 ， 绿脓杆 菌 ， 肺炎 克雷 伯杆 菌 ３ ℃培养 １ ±２ 。 ７ ８ ｈ 然后取 出平板 ， 在透 射光 下用游 标卡 尺量 取各纸 片 的抑 菌圈 直径 ， 抑菌圈的边缘 以肉眼见不到细菌 明显生长 为限 。
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＭ ａｈ ｍａｉａ ｄｃｎ ｏ ｒ ａ ｔ ｅ ｔｃｌＭｅ ｉｉｅ ｏ
槲皮素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用的研究
槲皮素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用的研究洪志伟;孟令宇;葛雅琨;张元新【摘要】槲皮素是普遍存在于植食性植物中的一类黄酮类化合物,具有明显的抗氧化、抗炎、保肝、抗肿瘤、抑菌等多种生物学功能特性.通过SDA-PAGE和碱性磷酸酶实验分析槲皮素作用前后的菌体蛋白质及碱性磷酸酶的变化,研究其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果.研究结果表明,槲皮素是通过破坏细胞壁结构、抑制菌体对蛋白质的利用,导致细菌正常生理功能的丧失或减退,达到抑菌的目的.%Quercetin,a kind of flavonolignans found in phytophagous plants,has obvious biological function,such as antioxidant,anti-inflammatory,anti-tumor and bacteriostatic properties.Though SDS-PAGE and alkaline phosphatase assay,we analyze the change of protein and activity of alkaline phosphatase after quercetin treatment of Escherichia coli and Staphylococcus aureus.The results show that quercetin inhibit the growth and protein utilization of the Escherichia coli through the disruption of cell wall and the loss of physiological function of bacterium.【期刊名称】《吉林化工学院学报》【年(卷),期】2017(034)005【总页数】4页(P38-41)【关键词】槲皮素;抑菌作用;金黄色葡萄球菌;大肠杆菌【作者】洪志伟;孟令宇;葛雅琨;张元新【作者单位】吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林 132022;吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林 132022;吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林 132022;吉林化工学院生物与食品工程学院,吉林吉林 132022【正文语种】中文【中图分类】O501槲皮素(Quercetin)作为普遍存在于生菜、洋葱、茶叶、卷心菜、西兰花、荞麦、豆类、苹果、等人类食用性植物中的重要生物黄酮化合物，具有多种生物学功能与活性.在银杏叶、桑寄生等中草药中是是多酚物质中重要的抗氧化剂之一[1-3].槲皮素的可能作用机制有：增强抗氧化酶活性，降低谷胱甘肽的耗竭，抑制脂质过氧化而提升原代肝细胞抗酒精性氧化损伤能力，保护作用呈剂量与时间效应关系[4].赵丽婷等[5]的研究表明饲料中添加槲皮素后，动物外周血的抗氧化能力明显增强，而且还有保护和节约维生素C、维生素E的作用，表明小肠上皮细胞吸收后的槲皮素以直接或间接的方式发挥了抗氧化作用.大量的研究也表明，槲皮素可以影响肿瘤基因的正常表达，抑制细胞的增殖；降低细胞内某些酶类的活性，蛋白质分子的降解，最终诱导细胞裂解、肿瘤细胞凋亡.除此之外，槲皮素还具有抗病毒、抗菌、抗炎、保肝等多种生理生化功能[6-8].由于槲皮素分布广泛、生物学作用多样，近年来受到学术界广泛关注，成为各领域的研究热点.尤其是槲皮素通过损伤细胞壁、阻碍蛋白质/核酸合成、作为代谢拮抗物等机制所展现出的抗菌潜力，为解决临床多药耐药现象提供了新思路.而且，近年来对黄酮类化合物的各种研究成果，如抑菌、抗炎、抗氧化、抗溃疡等作用被广泛应用到临床医药及食品行业[9,10].因此，研究槲皮素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等疾病和环境污染微生物的作用机制，将对临床应用具有重要的理论和实践指导意义.1.1 试剂与仪器试剂：槲皮素(Quercetin)，Sigma-Aldrich.仪器：DHG-9240(A)酶标仪，BILON96-II细胞破碎仪，MP-8050电泳仪.菌种：金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)购买于中国普通微生物学菌种保藏管理中心.1.2 实验过程1.2.1 槲皮素的抑菌实验(滤纸片药敏法)用直径为6 mm的打孔器制作圆形滤纸片，并将其分装到小离心管中，进行高压灭菌(121 ℃，15 min)，烘干备用.在无菌操作台中，将滤纸片浸于一定浓度的槲皮素药剂中，浸渍一段时间后取出，风干，备用.取1 mL过夜培养的菌液，2 000 rpm离心2 min，使细菌聚集在离心管底部，移走上清800 μL，剩余200 μL，用移液器重悬菌体，用涂布棒均匀的涂布在含琼脂粉的固体培养基上，分别涂布两块平板；平板静置3～5 min，在无菌条件下将药敏滤纸片贴于平板表面，轻压一下，使滤纸片贴平；37 ℃条件下培养16～18 h，测量其抑菌圈的直径，在两个不同方向各测量2次，最后取其平均值[11].抑菌效果等级按如下标准划分[12]：D抑菌直径<8 mm为无抑菌作用，用“-”表示；8 <D抑菌直径<11 mm为弱抑菌作用，用“+”表示；11<D抑菌直径<16 mm 为中等抑菌作用，用“++”表示； D抑菌直径>16 mm以上为强抑菌作用，用“+++”表示.1.2.2 槲皮素对供试菌生长的影响对照组生长曲线：将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌稀释至5×105 cfu/mL后培养，间隔2 h取样，在595 nm处用紫外分光光度计在测OD值，记录数据.样品组生长曲线：将对数生长期的金黄色葡萄球菌或大肠杆菌接种到含有不同浓度槲皮素的LB液体培养基中，细菌终浓度为107 cfu/mL，恒温摇床培养(37 ℃，150 rpm)8 h后，超声波破碎细胞(500 w，工作5 s，间隔5 s，超声10 min).12 000 rpm，4 ℃离心10 min，收集上清.将上清与上样缓冲液混合后，100 ℃煮沸5 min，冷却后进行SDS-PAGE电泳.同等条件培养的不含槲皮素的金黄色葡萄球菌或大肠杆菌做对照组.1.2.3 槲皮素对供试菌蛋白利用的影响将对数生长期的金黄色葡萄球菌或大肠杆菌接种到含有不同浓度槲皮素的LB液体培养基中，细菌终浓度为107 cfu/mL，恒温摇床培养(37 ℃，150 rpm)8 h后，超声波破碎细胞(500 w，工作5 s，间隔5 s，超声10 min).12 000 rpm，4 ℃离心10 min，收集上清.将上清与上样缓冲液混合后，100 ℃煮沸5 min，冷却后进行SDS-PAGE电泳.同等条件培养的不含槲皮素的金黄色葡萄球菌或大肠杆菌做对照组.1.2.4 碱性磷酸酶活性实验将供试菌接种于液体LB培养基中，37 ℃培养过夜，收集菌体，以含不同浓度的槲皮素的培养基重悬菌体，是菌体中浓度为105 cfu/mL.同时设置空白对照.分别在1、3、6、9 h取样，4 000 rpm离心10 min，取上清检测碱性磷酸酶的活性.2.1 槲皮素的抑菌实验表1的实验结果表明，槲皮素以浓度依赖的方式对大肠杆菌产生抑制作用，随着浓度的增加，抑菌效果逐渐增强；当其浓度达到100 μM时，其抑菌圈直径为9.7±0.2 mm，抑制强度为弱；当其浓度达到200 μM时，其抑菌圈直径为14.5±0.3 mm，抑制强度为中等；当其浓度达到400 μM以上时，其抑菌圈直径大于16.9±0.2 mm，抑制效果为强；而槲皮素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较弱，只有浓度达到800 μM时，其抑菌圈直径才达到9.1±0.4 mm，仅有微弱的抑制效果.2.2 槲皮素对供试菌生长的影响由图1A可以看出，在对照组中大肠杆菌正常生长，有明显的延滞期、指数期、平稳期等特征；用100 μM、200 μM、400 μM的槲皮素处理后，大肠杆菌的生长速度明显减缓，缺乏对数生长期，菌数只是小幅上升，没有明显的平稳期，菌体浓度即表现为下降趋势.而槲皮素作用金黄色葡萄球菌后，加药组与对照组生长曲线相同，说明在该浓度下槲皮素对金黄色葡萄球菌没有明显的抑制作用(图1B).2.3 槲皮素对供试菌蛋白利用的影响槲皮素处理大肠杆菌后，菌体蛋白的电泳谱带与正常大肠杆菌的菌体蛋白电泳谱带呈现了较明显的差别，尤其是200 μM的槲皮素作用后，部分谱带变浅或消失(图2B)，表明槲皮素影响了大肠杆菌部分蛋白的正常表达，从而破坏其细胞结构和正常生理功能，最后抑制细菌的生长甚至菌体死亡.而不同浓度的槲皮素作用金黄色葡萄球菌后，菌体蛋白电泳谱带没有发生明显变化(图2A).2.4 碱性磷酸酶活性实验碱性磷酸酶(AKP)存在于细胞壁与细胞膜之间，它不能自由透过细菌细胞壁.因此，在细菌细胞壁完好的情况下，在胞外不能检出AKP的活性，但当细胞壁收到损伤后，胞外AKP的活性将大量增强，其AKP的变化情况间接的检测细胞壁的破坏程度[13].从图3可以看出槲皮素作用大肠杆菌60 min后，菌液中碱性磷酸酶活性逐渐增加，说明槲皮素对大肠杆菌的细胞壁有了一定的作用.但是槲皮素作用金黄色葡萄球菌后，其碱性磷酸酶活性没有特别明显的变化.这一结果和前面的槲皮素对大肠杆菌有明显抑菌效果而对金黄色葡萄球菌没有明显的抑菌效果是一致的.本文研究表明槲皮素对大肠杆菌有明显的抑制作用，而对金黄色葡萄球菌的作用较弱.进一步试验结果表明，槲皮素可能机制是通过破坏细菌细胞壁结构、改变细菌蛋白的表达谱，进而对大肠杆菌产生明显的抑制作用；此外，由于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁结构上的差异，造成其对金黄色葡萄球菌抑制作用的降低. *通信作者：张元新，E-mail:*****************.cn。
疏清颗粒对EV71的体外抗病毒研究
疏清颗粒对EV71的体外抗病毒研究呼洁;王鑫磊;张超;张宇;赛景影;张晓天;王放【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2013(033)012【摘要】目的观察疏清颗粒体外抗肠道病毒71型(EV71)作用,为临床治疗EV71感染提供理论依据.方法观察EV71病毒感染人横纹肌肉瘤细胞(RD细胞)后引起的细胞病变效应(CPE),并用MTT法测定疏清颗粒对EV71的抑制作用,同时以板蓝根颗粒作为阳性对照药物.结果疏清颗粒能明显抑制EV71引起的细胞病变效应(CPE),疏清颗粒及板蓝根颗粒抑制EV71增殖的半数有效浓度(IC50)分别为(0.136±0.022)和(0.199±0.016)g·L-1.结论与板蓝根颗粒组相比,疏清颗粒在体外能明显的抑制EV71增殖,差异有统计学意义(P＜0.05),为进行临床治疗EV71感染引起的手足口病提供新方法.【总页数】2页(P3,7)【作者】呼洁;王鑫磊;张超;张宇;赛景影;张晓天;王放【作者单位】吉林大学白求恩医学院,吉林,长春,130021;吉林大学白求恩医学院,吉林,长春,130021;吉林大学白求恩医学院,吉林,长春,130021;吉林大学白求恩医学院,吉林,长春,130021;吉林大学白求恩医学院,吉林,长春,130021;吉林大学白求恩医学院,吉林,长春,130021;吉林大学白求恩医学院,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.菌毒清颗粒体外抗病毒的实验研究 [J], 郭姗姗;包蕾;崔晓兰2.一清滴丸与一清颗粒及一清胶囊的体外溶出度比较研究 [J], 李莉;刘玉国3.疏清颗粒抗手足口病病原体柯萨奇A16型体外研究 [J], 刘建伟;王鑫磊;张宇;呼洁;石玥n;王放4.天葵菌毒清颗粒的制备与清开灵颗粒抗病毒临床对比研究 [J], 陀有明;侯伟元;禤骥烈5.病毒清颗粒剂的体外抗病毒及抗菌作用 [J], 陈玉祥;王秀良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄连等中药水煎剂对粪肠球菌的体外抑制作用
黄连等中药水煎剂对粪肠球菌的体外抑制作用于静;戴东晓;谢景朝;李军如;陈惠珍【摘要】目的比较黄连等6种中药水煎剂对粪肠球菌的体外抑菌效果.方法采用M-H琼脂稀释法检测6种中药水煎剂对32 株粪肠球菌的体外抑菌作用,测定最小抑菌浓度(MIC)、MIC50、MIC90及累积抑菌百分率.结果浓度为1∶320(3.125 mg/ml)时,六种中药差异有统计学意义(P<0.05),黄连抑菌率明显高于其他组(χ2=56.74P=0.000).浓度为1∶40(25 mg/ml)时,6种中药差异有统计学意义(P<0.05),五味子、大黄、黄连、连翘抑菌率高于乌梅、黄芩(χ2=8.381,P=0.004),乌梅、黄芩二者差异无统计学意义(χ2=3.471,P=0.062).浓度为1∶20(50 mg/ml)时,6种中药有统计学意义(P<0.05),乌梅抑菌率最低(χ2=33.52,P=0.000).浓度为1∶10(100 mg/ml)时,6种中药差异无统计学意义(P>0.05),抑菌率均为100%.结论 6种中药中黄连抑菌效果最好,乌梅、黄芩作用较弱.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2012(034)017【总页数】3页(P2580-2582)【关键词】根管消毒;粪肠球菌;中药;水煎剂;MIC【作者】于静;戴东晓;谢景朝;李军如;陈惠珍【作者单位】050051,河北省石家庄市第二医院口腔科;050051,河北省石家庄市第二医院口腔科;050051,河北省石家庄市第二医院口腔科;050051,河北省石家庄市第二医院口腔科;050000,河北医科大学第二医院口腔科【正文语种】中文【中图分类】R187.1粪肠球菌(Enterococcus faecalis，E.faecalis)在治疗前的根管中并不是优势菌，但在根管消毒和充填后，其比例却大大提高，成为最常见的细菌种类。
它在根管治疗后的根管中为优势菌，占发现细菌的24%～77%［1］。
清开灵胶囊抑菌作用的实验研究
清开灵胶囊抑菌作用的实验研究目的：分析清开灵胶囊的抑菌作用，为临床合理用药提供数据参考。
方法：采用体外与体内两种抑菌试验方法对清开灵胶囊抑菌的作用进行分析。
结果：清开灵胶囊内容物对标准菌株大肠杆菌44102、金黄色葡萄球菌26003以及分离菌株大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌等均具有一定的体外抑菌作用；口服清开灵胶囊05、10、20g/kg，能对被金黄色葡萄球菌与肺炎克雷伯氏菌所感染的小鼠具有良好的保护作用。
结论：清开灵胶囊能有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌等菌种，具有良好的抑菌效果。
标签：清开灵胶囊；抑菌效果；试验研究清开灵胶囊具有抗菌、退热、消炎、退黄、镇静及提高机体免疫力等作用，常用于外感风热引起的发热、咽喉肿痛、病毒性感冒及上呼吸道感染等病症[1]。
清开灵胶囊的主要成分包括胆酸、猪去氧胆酸、板蓝根、珍珠母、黄芩苷等[2-3]。
为了进一步探讨清开灵胶囊的抑菌作用，本试验根据清开灵胶囊的功能主治进行抑菌实验研究。
1 材料和仪器11 药物清开灵胶囊（广州白云山明兴制药有限公司提供，国药准字Z10950087，规格：25g/粒，用法：3次/d、2～4粒/次），实验样品配制方法为：称取一定的清开灵胶囊内容物，置入乳钵内，并添加少量蒸馏水进行磨细，一边加水，一边研磨，配制成实验所需的各种浓度。
12 菌种121 标准菌株标准菌株为大肠杆菌44102、金黄色葡萄球菌26003，均由黑龙江省药品检验所提供，并由中国药品生物制品检定所鉴定。
122 临床分离菌株临床分离菌株主要包括大肠杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌及乙型溶血性链球菌，均由广东南方医科大学微生物教研室提供。
13 试剂伤寒、副伤寒甲、乙三联菌苗（批号：040102-1-3，长春生物制品研究所）；胃膜素（国药准字H13023865，唐山葵花药业集团生物制药有限公司）；营养肉汤培养基（批号040214，黑龙江省药品检验所）。
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板青颗粒在体外对大肠杆菌的抑制效果研究
一. 试验目的：研究板青颗粒在体外对大肠杆菌的抑菌效果，为新产品开发提供
数据支持。
二. 试验周期：5天
三. 试验材料
1、仪器
超净工作台、电子天平、移液枪、隔水式电热恒温培养箱、高压灭菌锅、恒温水
浴锅、游标卡尺、锥形瓶、PH计、培养皿若干、牛津杯若干、陶瓦盖若干、96
孔V型板、试管若干、量筒、玻璃棒、接种环
2、药品
板青颗粒、双蒸水、麦康凯培养基和营养肉汤培养基或自备蛋白胨、牛肉膏、乳
糖、牛胆盐、NaCL、中性红、结晶紫、琼脂等自制培养基
3、菌种
大肠杆菌
四. 试验方法
1. 药敏试验
①营养琼脂培养基的制备：
a. 用电子天平称量适量麦康凯培养基，按说明比例加入一定量的双蒸水（或者
用电子天平称量蛋白胨17g、脙胨3g、乳糖10g、牛胆盐5g、NaCL5g、中性
红0.03g、结晶紫0.001g、琼脂17g，将蛋白胨、脙胨、牛胆盐、NaCL溶解于
400ml双蒸水中，调PH值为7.2，将琼脂加入600ml双蒸水中加热溶解，
将两液合并，121℃，高压灭菌15min，冷藏，备用）。
b. 临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，温度降到50～55℃时，加入结晶紫
和中性红，摇匀，在超净工作台内将麦康凯溶液倾倒进培养皿内（每个培养
皿倒15ml），冷却，备用；然后把剩下的麦康凯溶液放到恒温水浴锅内，40℃
保温备用。
② 营养肉汤培养基的制备：
a. 用电子天平称量适量营养肉汤培养基，按说明比例加入一定量的双蒸水（或
者用电子天平称量牛肉膏0.6g、蛋白胨2g、NaCL1g，置于锥形瓶中，加双
蒸水定容至200ml，调PH值为7.4），混匀，分装于20个试管内，每管10ml。
b. 121℃，高压灭菌15min，冷藏备用。
③ 大肠杆菌的纯化：将菌种先接种于麦康凯培养基（15 ml），36±1℃培养18～
24小时，然后挑选典型菌落接种于牛肉汤中，37℃培养18h后，再将细菌稀释
为106个/ml～108个/ml的备用菌液（稀释涂布平板法）。
④ 药液的制备：用电子天平称取板青颗粒，共称量5次，每次称10g，然后分
别溶于2.5ml、5ml、10m、20ml、40ml的双蒸水中，配制浓度为4g/ml、 2g/ml、
1g/ml、 0.5g/ml、0.25g/ml的板青颗粒溶液，备用。
⑤ 在超净工作台内，将培养皿均匀分成5个区域，并用记号笔做记号1、2、3、
4、5，将制备好的菌液倒入剩下的麦康凯培养基溶液（40℃左右）中，混匀，做
成菌液麦康凯培养基，在已经制作好的培养皿中再倒入10ml菌液麦康凯培养基，
轻轻摇匀，放置1分钟，然后将牛津杯均匀的放到做好记号的5个区域内（稍微
用点力，牛津杯才不会移动），两个牛津杯之间的间距﹥2ｃｍ，距平皿边缘1.5
ｃｍ，备用。
⑥ 用移液枪分别吸取浓度为4g/ml、2g/ml、1g/ml、0.5g/ml、0.25g/ml的板青颗
粒溶液250μl，按做的标记依次加入5个牛津杯中，盖上陶瓦盖，将培养皿放入
37℃恒温培养箱中,培养16～18ｈ后观察牛津杯周围有无抑菌环。
⑦ 同法平行另做2组后,分别量取抑菌环的直径,记录并计算抑菌环平均直径。
2. 最小抑菌浓度（MIC）的测定
根据抑菌圈直径最大时的药物浓度，测定药物的MIC值，假如抑菌圈直径最大
时的药物浓度为4g/ml
① 在96孔V型板第一行中（12个孔），先给每孔加菌液麦康凯培养基50ul。
② 然后在第1孔中加入4g/ml的板青颗粒溶液50ul，混匀，吸出50 ul加入第2
孔中……依次倍比稀释，第11孔混匀后，吸出50 ul，弃掉，最后一孔不加板青
颗粒溶液，做阳性对照。
③ 以同样的方法再平行做2组。
④ 将96孔V型板置于恒温培养箱中37℃培养24h，观察并判定药物的最低抑
菌浓度（MIC）。
五、试验结果与分析
六、讨论