常见的几种禽病毒病采样技术
禽流感的流行特点和检测技术
中国动物保健2021.06禽流感（avian influenza ，AI ）的潜伏期一般较短，通常为4～5d 。
发病时精神沉郁，食欲、饮欲降低甚至废绝，被毛散乱，体温升高，趴卧不动，偶有流泪。
头部、面部水肿，脚鳞发紫出血，肉垂和鸡冠呈干枯紫色，甚至坏死。
呼吸困难，咳嗽，听诊呈啰音；下痢，粪便呈淡黄或白色。
出现神经症状，共济失调，不能站立或行走。
并且该病为人畜共患病，处理不好不但会危害养禽业的经济发展，还会危害人类身体健康。
1禽流感的流行病学特点1.1传染源主要由感染或携带禽流感病毒的鸡、鸭、鹅等家禽，野外野生鸟类，特别是迁徙性水禽相互传染所致。
1.2传播途径主要通过病禽的分泌物、排泄物、尸体，污染的饮水、饲料和其他物体，直接或间接接触引发感染，主要感染途径为呼吸道和消化道，以及直接接触病毒毒株感染。
人工接种可通过气溶胶经口鼻内、气管内、眼结膜、腹腔、肌肉、静脉和泄殖腔内等途径使易感禽类感染。
1.3易感动物禽流感病毒在世界范围内广泛分布。
许多家禽、野禽、人类、特别是鸭等迁徙水禽，发生病毒感染的概率比其他禽类高，而家养的鸡和火鸡所发生的流感最为严重。
1.4特点多为大流行，世界范围流行。
过去呈三年小流行，五年大流行。
该病主要在寒流较多，气温变化大的秋冬、冬春交替季节流行。
2禽流感的检测技术2.1血清学诊断技术中和试验中和试验的操作步骤复杂，容易造成材料的浪费，临床上不常用，但其为最原始的病毒检测技术，常用来做标准与其他检测方法作比较。
本试验常用鸡胚或组织培养细胞作为样本鉴定禽流感病毒。
中和试验是具有高度的灵敏性和特异性的血清学方法，抗体只和病毒上表面抗原相对应，特别是已吸附的宿主细胞上的病毒颗粒表面的抗原相对应。
所以，在某种特定血清型的中和实验中，抗体只和组内的其他病原发生有限的交叉反应。
琼脂扩散试验琼脂扩散试验检测禽流感时，以具有血凝素活性的鸡胚尿囊液作为样品，采用已知的阳性血清和未知抗原进行病毒抗原型的特异性鉴定。
畜禽免疫抗体监测采血技术及注意事项
畜禽免疫抗体监测采血技术及注意事项作者：罗士仙，康修田，梁盛，等来源：《江西畜牧兽医杂志》 2013年第4期罗士仙1,康修田1,梁盛2,饶鸣鹏3,曾梅群1,张有美4（1.泰和县畜牧兽医局，江西吉安343700；2马市畜牧兽医站；3沙村畜牧兽医站；4澄江畜牧兽医站）畜禽采血是疫病监测、检测、诊断和评估免疫效果的一项前提性工作，采血质量的好坏，直接影响到监测结果，所以作为基层兽医人员，畜禽的采血技术是必须掌握的常规技术之一。
现介绍几种常用的采血方法及注意事项供同行参考。
1采血样前器具的准备根据检测项目准备一次性手套、真空采血管、防护服、口罩、防护帽、采血针、离心管、套猪器、铁链条、一次性注射器、75％酒精棉球、橡皮筋、剪毛剪、灭菌脱脂棉球、采样单、油性记号笔、冷藏包、采样登记表等采样工具。
检查真空采血管管盖是否松动，一次性注射器安装是否密封等。
2畜禽血样采集的常用方法2.1牛血样的采集一般多采用颈静脉采血方法或耳静脉采血方法采集血样。
2.1.1牛颈静脉采血。
牛颈静脉分为颈内静脉和颈外静脉，颈内静脉较小，颈外静脉较粗，位于颈部肩骨乳突肌与胸头肌间的凹窝内。
采血前助手要用铁链栓树桩或电线杆保定好牛颈部，使其头向一侧上仰，让牛侧颈静脉充分暴露出来，采血者站立于牛颈部颈静脉暴露一侧，取真空采血针头，以拇指、食指和中指夹住，依靠腕力阴劲，沿颈静脉线走向垂直扎进颈静脉上的皮肤，然后调整位置，针头一旦进入血管，血液马上会喷射而出。
待血量达到要求后，拔出针头，用消毒过的干棉球按压针眼，轻压止血。
采血完毕后，及时做好血样的编号和采样表的填写工作。
2.1.2牛耳静脉采血。
①真空采血管牛耳静脉采血。
采血地点选择要平整、松软、干燥、有栓桩的场地，防止牛挣扎导致悬挂被勒死而出意外。
采血前助手用绳子把牛鼻栓两侧同时绑牢，先用铁链条栓树桩或电线杆保定好牛颈部，铁链条要调紧点，固定时先松后紧，避免采血时牛挣扎，同时用绳子把牛的双角固定在树桩或电线杆上，接着用一手压迫耳静脉近心端，或用皮筋绑紧耳根，另一手用75％酒精棉球涂擦牛耳静脉，使其耳静脉充盈。
人感染H7N9禽流感采样以及实验室检测技术
用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置30分钟， 1500～2000rpm离心10分钟，收集血清于2ml无菌螺口塑料管 中。
样本采集方法 (5)
鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：
用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取 呼吸道分泌物。先将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负 压，旋转收集器头部并缓慢退出；收集抽取的粘液，并用 采样液3ml涮洗收集器1次（可用小孩导尿管接在50ml注射 器上来代替收集）。
注：应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼 吸道标本）和发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复 期血清。
要求 呼吸道标本：发病早期采样，每份不少于3ml 血清标本每份分为2管，每管不少于0.5ml
样本采集方法 (1)
咽拭子：左手用压舌板压住患者舌头，右手用2根聚丙烯纤
维头的塑料杆拭子同时檫拭双侧咽扁桃体及咽后壁，应避免 接触舌头，将拭子头浸入含3ml采样液的管中，弃去尾部，旋 紧管盖。
胞分类计数减少； 4. 不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所
致的肺炎。
• 包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱 液和鼻洗液）；
◆下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）；
◆ 血清标本；
◆ 如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸 体解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组织）标本；
样本采集方法 (4)
鼻洗液 患者取坐姿，头微后仰，用移液管将5 ml生理盐水注入一侧鼻孔，嘱患 者同时发K音以关闭咽腔。然后让患者低头使生理盐水流出，用平皿或烧 杯收集洗液。重复此过程洗两侧鼻孔
漱口液 用10 ml生理盐水漱喉。漱时让患者头部微后仰，发“噢”声，让生理
盐水在咽部转动。然后，用50ml的无菌螺口塑料管收集洗液。
人禽流感标本采集、运送、处理及保存的操作规程
人禽流感标本的采集、运送、处理及保存操作规程一、目的规范人禽流感标本的采集、运送、处理及保存操作。
二、适用范围本操作规程适用于人禽流感标本的采集、运送、处理及保存。
三、简介人禽流感检测过程中，采集的标本包括鼻咽拭子、漱口液、血液等。
本实验室一般用鼻咽拭子或漱口液进行病毒分离与分子生物学检测，血清用于人禽流感抗体检测，采集血液部位一般位于前臂肘静脉。
四、器材1、用于血液收集的基本耗材包括：医用（5ml和10ml）一次性注射器、一次性乳胶手套、止血带、碘酒、无菌拭子、血清储藏管、标本标签、创可贴、可封口塑料袋、标本采集表格、带有冰袋的冰壶、棉拭子、污物桶、笔、试管架。
2、用于鼻咽拭子、漱口液等收集的基本耗材包括：一次性乳胶手套、防护服、十二层口罩（或N95口罩）、采样无菌棉签、采样液（螺口塑料管装）、可封口塑料袋、带有冰袋的冰壶、污物桶、样品登记表、笔、试管架。
附：血清保存管：2 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈)，可耐深低温（液氮保存）；鼻咽拭子保存管：10 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈)，可耐深低温（液氮保存）；尸检组织冻存管：50ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈)；记号笔：油性，防水。
五、人禽流感标本采集操作规程（一）标本采集要求1．采样人员须以无菌操作采集各类标本。
采集标本所使用的容器、采样液等均应无菌。
编制：福建省疾控中心病毒性疾病防治科审核：沈晓娜批准：严延生2. 每份标本必须标明标本编号、标本种类及采集日期。
采集单位应指定专人负责标本的登记、收集和管理，并认真填写“人禽流感标本采集登记表。
”3.所有标本的收集、运输和保藏都应装在有螺旋盖的塑料管中，以防止开、关标本管时产生气溶胶，并用两层清洁塑料袋包裹严实。
4.采集的标本应立即送当地疾病预防控制机构，同时附上标本送检单。
如不能立即送交，可置-20℃以下冰箱短暂保存（24小时之内）。
（二）标本采集种类与方法标本采集的时间、位置及质量对能否分离到病毒或提取到有活性的RNA至关重要，而标本保存与运输不当，也会影响病毒的分离。
禽流感病毒的分离与鉴定技术
禽流感病毒的分离与鉴定技术孙建宏,刘景利,张从禄①（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨150001）①摘要：禽流感病毒的诊断一般是通过鸡胚分离病毒，检测其血凝活性，并应用琼脂扩散试验或其他试验确定其是否为禽流感病毒，再进一步进行亚型鉴定、致病力测定。
如果是H5或H7亚型，还应采用PCR等方法对血凝素裂解位点的氨基酸序列进行测定。
①关键词:流感病毒;分离;鉴定①禽流感（Avianinfluenza，AI）由正黏病毒科A型流感病毒属的流感病毒引起。
该病毒的血清型分为15个HA亚型和9个NA亚型。
禽流感病毒可感染各种家禽和野禽，但多数呈亚临床感染。
一些H5和H7亚型可引起高致病性禽流感，可使鸡群100%死亡。
高致病性禽流感因其传播快、危害大，有的血清型可感染人，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物疾病，我国将其列为一类动物疫病。
①禽流感病毒的诊断可以根据临床症状、剖检变化做出初步诊断，进一步确诊需进行实验室检测。
目前一般是通过病毒分离和血清学试验检测病毒或是检测感染鸡的抗体进行鉴定。
近年来，随着分子生物学技术的发展，RT-PCR方法日臻成熟，也逐渐成为一种常用的诊断技术。
文章对这些禽流感的诊断技术分别做一些介绍。
①1禽流感病毒的分离①样本可采集死禽样本或活禽样本。
死禽样本一般采集肠内容物或泄殖腔拭子、鼻拭子、咽喉拭子以及内脏组织（气管、肺、气囊、肠、脾脏、肾、脑、肝脏和心脏等）；活禽样本可采集气管拭子、泄殖腔拭子。
由于采集棉拭子时幼禽容易受伤，所以还可取粪便。
①采集的拭子放入1.0mLPBS（pH7.0～7.4，含抗生素）的离心管中，静止作用30min。
对于泄殖腔拭子和粪便，用过滤器过滤除菌，上清液作为样本。
内脏样本应无菌取样，放于灭菌的玻璃研磨器，用PBS配成100g/L的悬液，加入1/10体积的抗生素，将处理过的样本移至离心管内，3000r/min离心10min，取上清液接种。
①采集或处理的样本在2℃～8℃条件下保存应不超过24h；如果需长期保存，需放置-70℃条件，但应避免反复冻融（最多冻融3次）。
禽白血病的检测与诊断
禽白血病的检测与诊断禽白血病（Avian Leukosis）是一种由禽白血病病毒引起的急性、亚急性或慢性传染病。
该病主要影响鸡、火鸡和鸽子等禽类动物，对禽类养殖业造成了严重的经济损失。
禽白血病病毒主要通过接触、垂直传播和水平传播途径传播，引起感染动物的免疫功能失调，导致机体出现贫血、免疫抑制和肿瘤形成等严重症状。
及早对禽类进行禽白血病的检测和诊断是非常重要的。
一、检测方法1. 血清学检测血清学检测是禽白血病检测的常用方法之一。
该方法通过采集禽类动物的血清样本，利用酶联免疫吸附试验（ELISA）或凝集素试验等技术，检测血清中是否含有禽白血病病毒抗体。
若检测结果呈阳性，则说明动物已被感染禽白血病病毒。
2. 分子生物学检测分子生物学检测是目前禽白血病病毒检测的主流方法之一。
该方法利用聚合酶链式反应（PCR）技术，针对病毒DNA或RNA进行检测，具有高度的特异性和敏感性。
通过该技术可以直接检测病毒在禽类动物的血液、组织或分泌物中的存在情况，从而及时发现患病动物，防止病毒的传播。
病理学检测是通过病理学方法对禽类动物的组织标本进行检测，观察组织病变的形态学改变，以及病毒的存在情况。
通过病理学检测可以直观地判断动物是否感染了禽白血病病毒，对于疑难病例的诊断具有重要意义。
二、诊断方法1. 临床表现禽白血病的临床表现包括贫血、体重减轻、食欲不振、呼吸困难、腹部肿块、运动障碍等症状。
对于出现上述症状的禽类动物，应及时进行禽白血病的诊断。
2. 实验室检测利用上述的检测方法对禽类动物进行实验室检测，可以明确禽白血病的感染情况。
根据检测结果，结合临床表现，可以对禽白血病进行准确的诊断。
通过对禽类动物的组织标本进行病理学检测，可以观察到病理改变的特征，如淋巴组织增生、肿瘤形成等，从而对禽白血病进行确诊。
三、预防措施1. 加强动物免疫力通过提高禽类动物的体质，加强饲养管理，合理配合饲料，以及定期进行免疫接种等措施，可以提高动物的免疫力，降低禽白血病的发病率。
非洲猪瘟实验检测样品采集、包装与运输技术要求
首先袁应使用红色盖子的真空采血管从病猪 的耳缘静脉采血袁待血液静置一段时间后再进行分离袁从而 达到收集血清的目的遥 如此时血清的颜色偏红袁则证明样品 发生了溶血现象袁通常情况下袁一旦生猪死亡袁其血清样品就 很容易溶血遥 如分离好血清样品袁应立即进行检测工作袁或将 血清储存在适宜的温度下遥 若进行抗体检测袁应将血清样品 储存在 -20益 的环境内曰如进行病毒检测袁应将血清样品储 存在 -80益 的环境内遥
外部包装在盛装液体时袁 应不高于 4L曰而在盛装固 体时袁应不高于 4kg遥 同时 样品一定要放在不高于 4益 的环境下袁并送到附近 的动物防疫机构保存遥 在 此过程中袁 不可混合有血
窑
842000
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非洲猪瘟专题
非洲猪瘟是一种急性尧高度接触性的传染病袁可在短时间 内造成生猪的死亡遥 目前袁该病已被世界卫生被列为重要动物 疫病遥 我国将其则为一类传染病袁该病会给养殖场户造成较大 的经济损失遥 因此袁相关人员应认真分析该病的临床症状袁并 研究该病的检测方法袁以保障非洲猪瘟实验检测的准确性遥 1 采样方法
品送至实验室检测袁而在检测过程中袁一定要遵循无菌操作
原则袁并明确样品采集尧包装尧运输的技术要求袁从而提高实
验室诊断的准确性袁并为后期防治非洲猪瘟提供参考性的依
据袁进一步促进养猪行业的稳定发展遥
参考文献
[1] 王海丰.非洲猪瘟实验检测样品采集尧包装与运输技术要求[J].
畜禽采血方法
畜禽疫情监测中的采血技术摘要：随着国家动物防疫水平的不断提升，畜禽疫病监测实验室工作在各级动物防疫部门迅速开展起来，监测工作的开展需要大量的血清，采血是目前获取血清的主要技术手段。
下面将牛、猪、羊、禽等畜禽的采血技术方法做以详细论述，为动物疫病检测工作顺利完成和重大动物疫病的防控打下基础。
关键词：疫情监测畜禽采血随着我国的养殖业日益向规模化、集约化方向发展，同时畜禽及其产品流通交易的日益频繁，使我国的畜禽疫病呈现新的发病特点，如病症复杂化和非典型化、混合感染居多等。
要对疫病进行正确的诊断分析，实施日常疫病监测和免疫抗体监测，从而为政府决策和疫病的预防、控制、净化提供技术支持，必须进行血清学检测，因此国家逐年加大了对动物疫情和动物免疫监测的力度。
熟练掌握一套采血技术是保质、保量完成血清收集必备条件，也是保护采血人员安全的必要保障。
现将几种畜禽的血液采集方法做如下介绍：1.牛血样的采集按照国标奶牛生产技术规程，奶牛布病检测是畜牧兽医部门一项日常任务，每头奶牛一年必须接受不少于1次的布病检测，再加上其他牛疫病防疫效果的检测，牛血清的需要量就相对较大。
一般散养户多采用颈静脉采血法，规模化养殖场多采用尾静脉采血法。
1.1颈静脉采血牛颈静脉分为颈内静脉和颈外静脉。
颈内静脉较小与颈动脉伴行，末端与颈外静脉汇合。
颈外静脉较粗，位于颈部肩骨乳突肌与胸头肌间的凹窝内采血前助手要保定好牛头部，使其向一侧上仰，使侧颈静脉暴露出来，采血者蹲于牛颈部颈静脉暴露一侧，取l6号针头，以拇指、食指和中指夹住，依靠腕力，垂直扎进颈静脉上的皮肤，然后调整位置，一旦进入血管，血液即会喷射出。
1.2 尾静脉采血牛尾静脉位于尾椎腹侧正中的脉管沟内，尾静脉采血具有方便快速的优点，一般不需要保定，站立于牛的正后方，左手抓住牛尾中段用力抬起，使之与地面平行，右手触摸尾椎前段腹侧凹沟（大约在尾根后下方4-5cm处），酒精棉球擦拭后，持采血器与尾椎纵轴成垂直方向，依靠腕力轻快进针，进针深度约0.5-1cm，进针后牛有不适反应，采血者举牛尾随之运动，待牛安静后右手向下拉动采血器旋杆，血液即流进采血器。
畜禽血液样品采集常用的方法
畜禽血液样品采集常用的方法作者：黄大林来源：《现代畜牧科技》 2015年第5期黄大林�（辽宁省宽甸满族自治县动物疫病预防控制中心 118200）免疫抗体监测是各级兽医实验室重要工作之一，因其科学、便捷、直观，更成为指导动物防疫，科学研判动物疫情的有力支撑，而畜禽血液样品的采集更是做好免疫抗体监测工作的基础。
如何采集到有效合格的畜禽血液样品，直接影响免疫抗体监测工作的准确性。
�针对不同畜禽，血液采集部位方法各有不相同，只有掌握技术方法，熟练操作，才能有效合格的采集到畜禽血液样品，为免疫抗体监测工作做好铺垫。
本文结合实际工作，对不同畜禽血液样品采集常用方法进行总结。
�1 家禽的采血方法�1.1 雏鸡心脏采血�采血前先用酒精棉球对雏鸡胸前口加以消毒，采血者左手抓鸡，右手持采血针，平行颈椎从胸前口插入，避免插入肺脏。
回抽见有回血时，缓慢采血，切忌采血过快，要伴随雏鸡心脏的跳动频率进行抽取血液。
�1.2 翅下静脉采血�家禽翅下静脉一般肉眼可见，采血前用酒精棉球消毒翅下静脉采血处。
由于鸭、鹅翅下绒毛多，用酒精棉球反复擦拭，除起到消毒作用外，还能够更好的暴露翅下静脉。
采血时，助手一手握住禽爪，一手轻握禽翅根部，禽只左右侧卧式均可，可根据个人采血习惯。
采血者一手轻压翅根部静脉，使翅下静脉怒张，另一手持采血针沿翅根到翅尖方向，呈20~25度角刺入翅下静脉，松开轻压翅根静脉的手，缓慢抽血。
采血时要保证保定禽只和手持采血针的稳定性，避免刺穿静脉，导致采血失败。
�2 家畜的采血方法�2.1 猪的采血�耳缘静脉采血。
猪站立保定，助手用力在耳根捏压静脉的近心端，手指轻弹，用酒精棉反复擦拭耳缘静脉，在消毒的同时使血管怒张。
采血针沿血管刺入，见有回流血液，缓慢采血，采血完后用棉球按压止血。
�前肢桡头采血。
猪站立保定，采血时用橡皮管勒紧或用手握紧前肢肘关节靠上部位，用酒精棉反复擦拭，消毒，并使血管怒张，可见桡骨前侧有充盈隆起的桡骨静脉。
引起禽类疾病的病原微生物及诊断方法
引起禽类疾病的病原微生物及诊断方法禽类疾病是指由各种病原体引起的禽类健康问题，它们会影响禽类的健康和生产能力，甚至会导致禽类的死亡。
禽类疾病给禽类养殖业带来了很大的经济损失。
因此，了解引起禽类疾病的病原微生物及诊断方法十分重要。
常见的引起禽类疾病的病原微生物1. 病毒病毒是引起禽类疾病的主要病原微生物之一。
以下是一些常见的禽类病毒疾病：•禽流感病毒：该病毒是由禽流感病毒（IAV）引起的，是禽类疾病中最为严重的一种。
禽流感病毒会引起鸟类呼吸系统疾病，导致禽类死亡率较高。
•新城疫病毒：该病毒是由新城疫病毒引起的，可影响禽类的神经系统功能，严重时会导致禽类死亡。
•禽传染性喉气管炎病毒：该病毒是由传染性支气管炎病毒引起的，它会影响禽类的呼吸系统，导致禽类的生产性能下降。
2. 细菌细菌是另一个导致禽类疾病的病原微生物。
以下是一些常见的禽类细菌疾病：•亿胞菌病：由亿胞菌引起，可导致禽类肺炎，严重时会导致禽类死亡。
•沙门氏菌病（盘尾病）：由沙门氏菌引起，会导致禽类腹泻和腹部肿胀。
•大肠杆菌毒素病：由大肠杆菌引起，会出现禽类腹泻、腹痛和衰竭等症状。
3. 真菌真菌也会引起禽类疾病。
以下是一些常见的禽类真菌疾病：•鸟瞳宁霉病：由鸟瞳宁霉引起，会影响禽类的眼睛和呼吸系统。
•鸟脚菌病：由皮肤寄生菌引起，可以导致病鸡的脚趾变形和易于感染其他疾病。
诊断方法为了确诊禽类疾病和寻找病原体，需要进行以下诊断方法：1. 细菌培养细菌培养是一种诊断禽类细菌疾病的方法。
将采集到的病禽组织样本、排泄物或分泌物在适当的培养基上进行培养，寻找可疑细菌的形态和芽胞等特征，进而诊断疾病类型。
2. 血清学检测血清学检测可以用于检测禽类感染病毒的血清学反应。
通过这种方法，可以检测感染禽流感、新城疫、传染性支气管炎等禽类病毒疾病的抗体水平。
3. 分子生物学检测分子生物学检测是一种新兴的禽流感、新城疫等禽类病毒疾病的诊断技术。
利用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对禽病样本进行分子检测，能够迅速并具有高灵敏度地检测到禽类病毒的存在。
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常见的几种禽病毒病采样技术
在防治畜禽疾病中，很多畜禽传染病的临床症状
不明显，单凭临床经验是难以做到确切诊断、准确用
药，往往因此而贻误了病情。为此，需要通过从病畜
或尸体采取病料，进一步做微生物学和血清学化验，
查清病原，进而有针对性地采取相应的防治措施，以
达到预防、控制和扑灭传染病的目的，同时减少临床
工作的盲目性，提高兽医人员的技术水平，保护养殖
户的利益。而病料采集、保存、送检的方法是否正确，
直接影响到检验的结果和防治工作的开展，故采集检
测样品是诊断检测工作的重要内容，另外采样的时机
是否适宜，样品是否具有代表性，样品处理、保存、
运送是否及时等，都会影响到检验结果的准确性和可
靠性。
下面就如何正确地采集、保存、送检病料等进行
归纳和整理，希望能够对基层兽医和养殖户提供一些
借鉴。
一、采集原则
1，新鲜、具代表性，且足量：采集死禽样本，夏
天6小时之内完成，冬天在24小时之内完成；采集样品
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的数量要满足诊断检测的需要，并留有余地，以备必
要时复检使用。
2，减少对病料的污染：在做尸体剖检时，应将尸
体浸泡在消毒剂溶液中，防止羽毛及皮屑飞扬对病料
造成的污染；病料采集时，对采集病料的器械及容器
必须提前消毒，减少因器械或盛放病料的容器对病料
的污染；尸体剖开腹腔时，第一时间采取病料，减少
病料因暴露于空气中而造成的污染。
3，典型采样：选取未经药物治疗、症状最典型或
病变最明显的样品，如有并发症，还应兼顾采样。
4，合理采样：根据诊断检测的要求，须严格按照
规定采集各种足够数量的样品外，不同疫病的需检样
品各异，应按可能的疫病侧重采样。对未能确定为何
种疫病的，应全面采样。
5，安全采样：既要保护采样人员，以要防止病原
外泄，还要防止样品受到污染。
6，迅速送检：应尽快送实验室进行检测，延误送
检时间，会影响到检测质量和结果的可靠性。
二、病料的采集方法
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1，组织和实质器官的采集：剖开腹腔后，必须注
意肠管的完整。如需进行细菌的分离培养，要以烧红
的手术刀片烫烙脏器表面，使用经火焰灭菌的接种针
插入烫烙的部位，提取少量的组织或液体，作涂片镜
检或接种于培养基上，进行培养。
2，液体病料的采集：采集血液、胆汁、脓肿液、
渗出物等液体病料，使用灭菌吸管或注射器，经烫烙
部位吸取病变组织的液体，将病料注入灭菌的试管中，
塞好棉塞送检。
3，全血的采集方法：用灭菌注射器自鸡的心脏或
翅静脉采血2-5毫升，注入灭菌试管中。建议加入少量
的抗凝剂（3.8%枸橼酸钠0.1-0.5毫升或柠檬酸钠液，
配制方法：葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、
氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml高压灭菌10磅/10分
钟。）
4，血清的采集方法：用灭菌注射器自禽的心脏或
翅静脉采血2毫升，注入灭菌的1.5ml离心管中摆成斜
面，待血液凝固血清析出后，将血清吸出注入另一个
灭菌试管中，备用。
5，肠道及肠内容物的采集方法：选择病变明显部
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位的肠道，将内容物弃掉，用灭菌生理盐水冲洗干净，
然后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送
检。亦可将肠管切开，用灭菌生理盐水冲洗干净，然
后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面，将接种针插入粘
膜层，取少量病料接种于培养基上。采集肠内容物则
需用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层，将接种针插入
肠道内，吸取少量肠内容，放入试管中或将带有肠内
容的肠道两端扎紧，去掉其它部分送检。
6，皮肤及羽毛的采集：皮肤要选病变明显部分的
边缘，采取少许放入灭菌的试管中送检；羽毛也要选
病变明显部分，用灭菌的刀片刮取羽毛及根部的皮屑
少许，放入灭菌的试管中送检；采集孵化室的绒毛需
用灭菌镊子采取出雏机出风口的绒毛3-5克，放入灭菌
的试管中送检。
三、各种病料的采集部位
表1鸡病毒性疾病主要采集的主要部位
疾病名称 病原 病料采集部位
鸡新城疫 副粘病毒
脑组织、喉头、气管、气囊、
肝、脾、肺
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禽流感 A型流感病毒
内脏器官、气管粘液、肺、
泄殖腔拭子、血液
传染性法氏囊病 双RNA病毒 法氏囊、内脏器官、肠道粘
液、泄殖腔拭子、血液
传染性支气
管炎病
冠状病毒 气管栓子、肺组织、肾、肝、脾、淋巴组织、输卵管、气
管泄殖腔拭子
传染性喉气
管炎
A型疱疹病毒 气管渗出物、气管、肺
病毒性关节炎 禽呼肠孤病毒 关节、腱鞘、脾、泄殖腔、
气管
禽脑脊髓炎 禽脑脊髓炎病毒 脑、胰
淋巴白血病
禽白血病病毒 血液、泄殖腔拭子、肿瘤组
织
马立克氏病 疱疹病毒 血液、肿瘤组织
网状内皮组
织增殖病
网状内皮组
织增殖病病毒 血液、肿瘤组织、脾
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鸡传染性贫血病 鸡传染性贫
血病毒
肝、皮肤、脾、心脏、胸腺、
肺、法氏囊、肾、骨髓、血
液
产蛋下降综合征 禽腺病毒 肝、胰、气管、肺、空肠、盲肠扁桃体、肠内容、输卵
管、畸形蛋、变形卵泡、粪
便、血液
禽痘 痘病毒
病变组织、口、鼻、咽、喉、
食道、气管粘膜的结节
鸭病毒性肝
炎
鸭肝炎病毒 肝、脾、病变组织、血液
鸭病毒性肠炎 疱疹病毒科鸭瘟病毒 肝、脾、脑、肺、肾、口腔
分泌物、肠道、粪便、血液
小鹅瘟 鹅细小病毒
内脏器官、组织、肠管、粪
便、血液
四、病料的保存和处理
1，采集的样品应一种样品一个容器，立即密封，
防止样品损坏、污染和外泄等意外发生。也可以根据
表1将几种适合检测同种病毒的病料合并于一个容器
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内。
2，装样品的容器应贴上标签，标签要防止因冻结
而脱落，标签标明采集的时间、地点、号码和样品名
称，并附上发病、死亡等相关资料，尽快送实验室。
3，根据样品的性状检验要求的不同，作暂时的冷
藏、冷冻或其它处理。
4，病料采集后，应先存放于冰箱中1-2小时后，
再做微生物检验。
五、病料的送检要点
1，在没有条件的情况下，可以采取运送整鸡、鹅
或鸭尸体，运送时用浸透消毒液的布包好，装入塑料
袋中运送；如果需要长途运输，整个尸体放入冰箱冰
冻过夜。
2，装在容器中的病料应先密封，然后装入冰桶中
运送，放入冰袋运送。
3，运送的病料必须标明：送检单位、地址、送检
病料的品种、性别、日龄、种类、数量、死亡日期、
送检日期、检验目的、送检者姓名，并附临床病例摘
要（发病时间、死亡情况、临床症状、产蛋及饮食情
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况、免疫和用药情况等）。
4，运送病料时一定注意病料要低温保存。供病毒
学检验的样品，数小时内要送到实验室，只作冷藏处
理，超过数小时的要冷冻处理，可将样品放入-30℃冰
箱内冻结后再装入有大小冰块或干冰的冷藏瓶（箱）
内运送，亦可将装入样品的容器放入隔热保温瓶内，
再放入冰块，然后按100ｇ冰块加入食盐约35克，立即
将隔热保温瓶瓶口塞紧，瓶内温度可达-21℃左右。
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