电泳

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电泳

电泳技术简介

带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。1937 年瑞典学者A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造了移动界面电泳仪,分离了马血清白蛋白的3种球蛋白,创建了电泳技术。

目录

什么是电泳

电泳种类

电泳原理

电泳

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什么是电泳

电泳种类

电泳原理

电泳

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电泳Electrophoresis

什么是电泳

在确定的条件下,带电粒子在单位电场强度作用下,单位时间内移动的距离(即迁移率)为常数,是该

电泳图谱

带电粒子的物化特征性常数[1]。不同带电粒子因所带电荷不同,或虽所带电荷相同但荷质比不同,在同一电场中电泳,经一定时间后,由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。

在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。胶体有电泳现象,证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同,它们吸附的离子不同,所以带有不同的电荷。

电荷移动规律

利用电泳可以确定胶体微粒的电性质,向阳极移动的胶粒带负电荷,向阴极移动的胶粒带正电荷

电泳仪

一般来讲,

金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子,带正电荷

非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子,带负电荷。

因此,在电泳实验中,氢氧化铁胶体微粒向阴极移动,三硫化二砷胶体微粒向阳极移动。利用电泳可以分离带不同电荷的溶胶。

例如,陶瓷工业中用的粘土,往往带有氧化铁,要除去氧化铁,可以把粘土和水一起搅拌成悬浮液,由于粘土粒子带负电荷,氧化铁粒子带正电荷,通电后在阳极附近会聚集出很纯净的粘土。工厂除尘也用到电泳。利用电泳还可以检出被分离物,在生化和临床诊断方

面发挥重要作用。本世纪40年代末到50年代初相继发展利用支持物进行的电泳,如滤纸电泳,醋酸纤维素膜电泳、琼脂电泳;50年代末又出现淀粉凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

应用领域

电铸电泳

电泳已日益广泛地应用于分析化学、生物化学、临床化学、毒剂学、药理学、免疫学、微生物学、食品化学等各个领域。在直流电场中,带电粒子向带符号相反的电极移动的现象称为电泳(electropho-resis)。1809年俄国物理学家Peнce首先发现了电泳现象,但直到1937年瑞典的Tiselius建立了分离蛋白质的界面电泳(boundary electrophoresis)之后,电泳技术才开始应用。本世纪60-70年代,当滤纸、聚丙烯酰胺凝胶等介质相继引入电泳以来,电泳技术得以迅速发展。丰富多彩的电泳形式使其应用十分广泛。电泳技术除了用于小分子物质的分离分析外,最主要用于蛋白质、核酸、酶,甚至病毒与细胞的研究。由于某些电泳法设备简单,操作方便,具有高分辨率及选择性特点,已成为医学检验中常用的技术。

电泳又名——电着(著),泳漆,电沉积。创始于二十世纪六十年代,由福特汽车公司最先应用于汽车底漆。由于其出色的防腐、防锈功能,很快在军工行业得到广泛应用。近几年才应用到日用五金的表面处理。由于其优良的素质和高度环保,正在逐步替代传统油漆喷涂。

电泳漆膜

喇叭电著电泳

电泳漆膜具有涂层丰满、均匀、平整、光滑的优点,电泳漆膜的硬度、附着力、

耐腐、冲击性能、渗透性能明显优于其它涂装工艺。

详细特点:(1)采用水溶性涂料,以水为溶解介质,节省了大量有机溶剂,大大降低了大气污染和环境危害,安全卫生,同时避免了火灾的隐患;

(2)涂装效率高,涂料损失小,涂料的利用率可达90%~95%;

(3)涂膜厚度均匀,附着力强,涂装质量好,工件各个部位如内层、凹陷、焊缝等处都能获得均匀、平滑的漆膜,解决了其他涂装方法对复杂形状工件的涂装难题;

(4)生产效率高,施工可实现自动化连续生产,大大提高劳动效率;

(5)设备复杂,投资费用高,耗电量大,其烘干固化要求的温度较高,涂料、涂装的管理复杂,施工条件严格,并需进行废水处理;

(6)只能采用水溶性涂料,在涂装过程中不能改变颜色,涂料贮存过久稳定性不易控制。

(7)电泳涂装设备复杂,科技含量较高,适用于颜色固定的生产。

电泳种类

移动界面电泳

是将被分离的离子(如阴离子)混合物置于电泳槽的一端(如负极),在电泳开始前,样品与载体电解质有清晰的界面。电泳开始后,带电粒子向另一极(正极)移动,泳动速度最快的离子走在最前面,其他离子依电极速度快慢顺序排列,形成不同的区带。只有第一个区带的界面是清晰的,达到完全分离,其中含有电泳速度最快的离子,其他大部分区带重叠。

区带电泳

是在一定的支持物上,于均一的载体电解质中,将样品加在中部位置,在电场作用下,样品中带正或负电荷的离子分别向负或正极以不同速度移动,分离成一个个彼此隔开的区带。区带电泳按支持物的物理性状不同,又可分为纸和其他纤维膜电泳、粉末电泳、凝胶电泳与丝线电泳。

等电聚焦电泳

是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽中,当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷,向负极移动;若其处在高于其本身等电点的环境中,则带负电向正极移动。当泳动到其自身特有的等电点时,其净电荷为零,泳动速度下降到零,具有不同等电点的物质最后聚焦在各自等电点位置,形成一个个清晰的区带,分辨率极高。

等速电泳

是在样品中加有领先离子(其迁移率比所有被分离离子的大)和终末离子(其迁移率

比所有被分离离子的小),样品加在领先离子和终末离子之间,在外电场作用下,各离子进行移动,经过一段时间电泳后,达到完全分离。被分离的各离子的区带按迁移率大小依序排列在领先离子与终末离子的区带之间。由于没有加入适当的支持电解质来载带电流,所得到的区带是相互连接的(图d),且因“自身校正”效应,界面是清晰的,这是与区带电泳不同之处。

电泳分离原理示意图a 移动界面电泳b 区带电泳c 等电聚焦电泳d 等速电泳L 领先离子T 终末离子

电泳原理

综述

电泳是电泳涂料在阴阳两极,施加于电压作用下,带电荷的涂料离子移动到阴极,并与阴极表面所产生的碱性物质作用形成不溶解物,沉积于工件表面。它包括四个过程:

电解(分解)

在阴极反应最初为电解反应,生成氢气及氢氧根离子OH ,此反应造成阴极面形成一高碱性边界层,当阳离子与氢氧根作用成为不溶于水的物质,涂膜沉积,方程式为:H2O→OH+H

电泳动(泳动、迁移)

阳离子树脂及H+ 在电场作用下,向阴极移动,而阴离子向阳极移动过程。

电沉积(析出)

在被涂工件表面,阳离子树脂与阴极表面碱性作用,中和而析出不沉积物,沉积于被涂工件上。

电渗(脱水)

涂料固体与工件表面上的涂膜为半透明性的,具有多数毛细孔,水被从阴极涂膜中排渗出来,在电场作用下,引起涂膜脱水,而涂膜则吸附于工件表面,而完成整个电泳过程。

电泳

综述

电泳(Electrophoresis)是指带电荷的粒子或分子在电场中移动的现象称为电泳。大分子的蛋白质,多肽,病毒粒子,甚至细胞或小分子的氨基酸,核苷等在电场中都可作定向泳动.1937年Tis

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elius成功地研制了界面电泳仪进行血清蛋白电泳,它是在一U型管的自由溶液中进行的,电泳后用光学系统使各种蛋白所形成折光率差别成为曲线图象,将血清蛋白分为白蛋白,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白和γ-球蛋白五种,随后,Wielamd 和Kanig 等于1948年采用滤纸条做载体,成功地进行了纸上电泳。从那时起,电泳技术逐渐被人们所接受并予以重视,继而发展以滤纸,各种纤维素粉,淀粉凝胶,琼脂和琼脂糖凝胶,醋酸纤维素薄膜,聚丙烯酰胺凝胶等为载体,结合增染试剂如银氨染色,考马斯亮蓝等大大提高和促进生物样品着色与分辨能力,此外电泳分离和免疫反应相结合,使分辨率不断朝着微量和超微量(1ng~0.001ng)水平发展,从而使电泳技术获得迅速推广和应用。在此主要介绍常用电泳的一般原理及其应用.

电泳的基本原理

生物大分子如蛋白质,核酸,多糖等大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用.在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。

如果把生物大分子的胶体溶液放在一个没有干扰的电场中,使颗粒具有恒定迁移速率的驱动力来自于颗粒上的有效电荷Q和电位梯度E.它们与介质的摩擦阻力f抗衡。在自由溶液中这种抗衡服从Stokes定律.

F=6πrvη

这里v是在介质粘度为η中半径为r的颗粒的移动速度。但在凝胶中,这种抗衡并不完全符合Stokes定律.F取决于介质中的其他因子,如凝胶厚度,颗粒大小,甚至介质的内渗等。

电泳迁移率(mbility)m规定为在电位梯度E的影响下,颗粒在时间t中的迁移距离d.

d

m= ------------ 或m=V / E

t·E

迁移率的不同提供了从混合物中分离物质的基础,迁移距离正比于迁移率。

影响电泳的因素

1.电泳介质的pH值

溶液的pH值决定带电物质的解离程度,也决定物质所带净电荷的多少.对蛋白质,氨基酸等类似两性电解质,pH值离等电点越远,粒子所带电荷越多,泳动速度越快,反之越慢。因此,当分离某一种混合物时,应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差别的pH值,以利于各种蛋白质的有效分离.为了保证电泳过程中溶液的pH值恒定,必须采用缓冲溶液。

缓冲液的离子强度

溶液的离子强度(Ion intensity)是指溶液中各离子的摩尔浓度与离子价数平方的积的总和的1/2.带电颗粒的迁移率与离子强度的平方根成反比。低离子强度时,迁移率快,但离子强度过低,缓冲液的缓冲容量小,不易维持pH恒定.高离子强度时,迁移率慢,但电泳谱带要比低离子强度时细窄。通常溶液的离子强度在0.02~0.2之间。

I=1/2∑CiZi2 (I:离子强度;Ci:离子的摩尔浓度;Zi:离子价数. )

0.154M NaCl溶液的离子强度为:

I= 1/2(0.154×12+0.154×12)=0.154

0.015M Na2SO4溶液的离子强度为:

I= 1/2(0.015×2×12+0.015×22)=0.045

3.电场强度

电场强度(电势梯度Electric field intensity)是指每厘米的电位降(电位差或电位梯度).电场强度对电泳速度起着正比作用,电场强度越高,带电颗粒移动速度越快。根据实验的需要,电泳可分为两种:一种是高压电泳,所用电压在500~1000V或更高.由于电压高,电泳时间短(有的样品需数分钟),适用于低分子化合物的分离,如氨基酸,无机离子,包括部分聚焦电泳分离及序列电泳的分离等。因电压高,产热量大,必须装有冷却装置,否则热量可引起蛋白质等物质的变性而不能分离,还因发热引起缓冲液中水分蒸发过多,使支持物(滤纸,薄膜或凝胶等)上离子强度增加,以及引起虹吸现象(电泳槽内液被吸到支持物上)等,都会影响物质的分离.另一种为常压电泳,产热量小,室温在10~25℃分离蛋白质标本是不被破坏的,无需冷却装置,一般分离时间长。

4.电渗现象

在电场中液体对于一个固体的固定相相对移动称为电渗.在有载体的电泳中,影响电泳移动的一个重要因素是电渗。最常遇到的情况是γ-球蛋白,由原点向负极移动,这就是电渗作用所引起的倒移现象.产生电渗现象的原因是载体中常含有可电离的基团,如滤纸中含有羟基而带负电荷,与滤纸相接触的水溶液带正电荷,液体便向负极移动。由于电渗现象往往与电泳同时存在,所以带电粒子的移动距离也受电渗影响;如电泳方向与电渗相反,则实际电泳的距离等于电泳距离加上电渗的距离.琼脂中含有琼脂果胶,,其中含有较多的硫酸根,所以在琼脂电泳时电渗现象很明显,许多球蛋白均向负极移动。除去了琼脂果胶后的琼脂糖用作凝胶电泳时,电渗大为减弱.电渗所造成的移动距离可用不带电的有色染料或有色葡聚糖点在支持物的中心,以观察电渗的方向和距离。

电泳的分类

目前所采用的电泳方法,大致可分为3类:显微电泳,自由界面电泳和区带电泳.区带电泳应用广泛,区带电泳可分为以下几种类型:

按支持物的物理性状不同,区带电泳可分为:

(1)滤纸为支持物的纸电泳;

(2)粉末电泳:如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳;

(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳;

(4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳

2.按支持物的装置形式不同,区带电泳可分为:

(1)平板式电泳:支持物水平放置,是最常用的电泳方式;

(2)垂直板电泳:聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直板式电泳。

(3)柱状(管状)电泳:聚丙烯酰胺凝胶可灌入适当的电泳管中做成管状电泳.

3.按pH的连续性不同,区带电泳可分为:

(1)连续pH电泳:如纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳;

(2)非连续pH电泳:如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳;

电泳所需的仪器

电泳所需的仪器有:电泳槽和电源。

1.电泳槽

电泳槽是电泳系统的核心部分,根据电泳的原理,电泳支持物都是放在两个缓冲液之间,电场通过电泳支持物连接两个缓冲液,不同电泳采用不同的电泳槽.常用的电泳槽有:

(1)圆盘电泳槽:有上,下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。上槽中具有若干孔,孔不用时,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5~7mm,为保证冷却和微量化,现在则越来越细.

(2)垂直板电泳槽:垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中,而是在块垂直放置的平行玻璃板中间.

(3)水平电泳槽:水平电泳槽的形状各异,但结构大致相同。一般包括电泳槽基座,冷却板和电极.

电源

要使荷电的生物大分子在电场中泳动,必须加电场,且电泳的分辨率和电泳速度与电泳时的电参数密切相关。不同的电泳技术需要不同的电压,电流和功率范围,所以选择电源主要根据电泳技术的需要.如聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS电泳需要200~600V电压。

电泳技术的应用

1.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用做蛋白质纯度的鉴定.聚丙烯酰胺凝胶电泳同时具有电荷效应和分子筛效应,可以将分子大小相同而带不同数量电荷的物质分离开,并且还可以将带相同数量电荷而分子大小不同的物质分离开。其分辨率远远高于一般层析方法和电泳方法,可以检出10-9~10-12g的样品,且重复性好,没有电渗作用.

2.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可测定蛋白质分子量.其原理是带大量

电泳管路

电荷的SDS结合到蛋白质分子上克服了蛋白质分子原有电荷的影响而得到恒定的荷/质比。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白质分子量已经比较成功,此法测定时间短,分辨率高,所需样品量极少(1~100μg),但只适用于球形或基本上呈球形的蛋白质,某些蛋白质不易与SDS结合如木瓜蛋白酶,核糖核酸酶等,此时测定结果就不准确.

3.聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于蛋白质定量。电泳后的凝胶经凝胶扫描仪扫描,从而给出定量的结果.凝胶扫描仪主要用于对样品单向电泳后的区带和双向电泳后的斑点进行扫描。

4.琼脂或琼脂糖凝胶免疫电泳可用于①检查蛋白质制剂的纯度;②分析蛋白质混合物

的组分;③研究抗血清制剂中是否具有抗某种已知抗原的抗体;④检验两种抗原是否相同. 电泳后结果检测

对于不同的目的,应采用不同的检测方法。用染料和生物大分子结合形成有色的复合物是电泳后检测最常用的方法.

(七)聚丙烯酰胺凝胶电泳结果不正常现象和对策1.指示剂前沿呈现两边向上或向下的现象。向上的"微笑"现象说明凝胶的不均匀冷却,中间部分冷却不好,所以导致凝胶中分子有不同的迁移率所致.这种情况在用较厚的凝胶以及垂直电泳中时常发生。向下的"皱眉"现象常常是由于垂直电泳时电泳槽的装置不合适引起的,特别是当凝胶和玻璃板组成的"三明治"底部有气泡或靠近隔片的凝胶聚合不完全便会产生这种现象.

2."拖尾"现象是电泳中最常见的现象。这常常是由于样品溶解不佳引起的,克服的办法是在加样前离心,选用合适的样品缓冲液和凝胶缓冲液,加增溶辅助试剂.另一方法是降低凝胶浓度。

3."纹理"现象常常是由于样品中不溶颗粒引起的,克服办法是增加溶解度和离心除去不溶性颗粒.

4.蛋白带偏斜常常是由于滤纸条或电极放置不平行所引起的,或由于加样位置偏斜而引起。

5.蛋白带过宽,与邻近蛋白泳道的蛋白带相连,这是由于加样量太多或加样孔泄漏引起的.

6.蛋白带模糊不清和分辨不佳是由于多种原因引起的。虽然梯度凝胶可以提高分辨率,但与其他方法相比,常规聚丙烯酰胺凝胶电泳是分辨率较低的方法.为了提高分辨率,不要加过多的样品,小体积样品可给出窄带。加样后应立即电泳,以防止扩散.选择合适的凝胶浓度,使组分得以充分的分离。通常靠近前沿的蛋白带分辨率不佳,所以应根据分子量与凝胶孔径的关系,灌制足够长度的凝胶,以使样品不会走出前沿.样品的蛋白水解作用也引起扩散而使分辨率降低。水解作用通常发生在样品准备的时候,系统中的内源性蛋白酶会水解样品蛋白,如果在缓冲液中加蛋白酶抑制剂可以减少这种情况的发生

电泳生产线安全操作规程

电泳安全操作规程 (安全生产方针:安全第一、预防为主、综合治理) 01.所有电泳线工作人员,必须在正式上岗前,进行基础知识、设备操作、工艺规程等相关内容的培训,合格后才能上岗; 02.员工上班前,必须按要求穿戴好工作服和劳保用品; 03.生产线启动前,对设备电源、水泵、风机、控制柜、超滤装置、燃烧机等电器设备进行检查和调试,同时检查吊具、环链各部位部件是否正常,确保安全,并核查上一班的设备安全记录; 04.工件开始走线时密切监控各系统设备的运行状况,认真详细地作好运行记录,对出现的异常情况及时反映和处理,以防意外事故发生。核查上一班的生产及质量记录,了解当班工作内容; 05.检查工作范围内的相关电泳和清洗槽的工艺控制参数、工作条件的设置及相关辅助器具,进行必要的补添和调整,稀释、补加药品时,精神集中,不得东张西望,真实记录槽液补添情况和仪器、仪表设置情况;06.每日定期清理喷淋系统、过滤装置,特别是查看喷嘴和滤网是否堵塞;07.电泳线全天24小时保证动力电源,在车间停电的情况下,立即通知相关部门开动发电机组实现电泳线的供电正常。电泳线上任何电气设备在没有验明无电以前,一律认为有电,不能盲目触及。所有控制开关非有关工作人员,禁止随意开启闭合; 08.要经常对工件导电夹及电极棒进行清理,保证导电良好。任何人员不得破坏悬挂的指示牌,不得跨越安全线,非工作人员严禁登上工作平台;09.生产准备工作就绪,启动生产设备; 10.在工作平台上操作,工作人员必须严格注意工件入槽状态,对工件的偏摆错位及时进行调整;作业完后,应送达工件下线,确保万无一失;11.电泳线在运转过程中,操作人员要做到勤检查、勤巡视、勤维护、勤记录,例如:槽液液位、温度、各工位喷淋状态、泵运行情况及阀门管道有无泄露等。 12.对工作范围内的工艺参数、工作条件、设备仪器、仪表随时跟踪,并按要求记录在案; 13.操作者应对工作范围内的产品质量进行控制和确认,并真实记录;14.本工序发生质量问题时,在本序操作人员无法解决时,应及时停止本序生产,并报告工艺管理人员,立即进行解决; 15.当设备出现故障时,应立即切断电源,停止生产,并通知车间管理人员和设备维修人员,对设备进行抢修,工序员工必须无条件配合; 16.员工上班期间不得串岗,必须认真对待本职工作,不得造成人为疏忽的质量和设备问题; 17.工作场地严禁吸烟,杜绝出现明火; 18.禁止在处理槽内加错药品,防止异物进入处理槽; 19.清洗槽内严禁洗手,禁止用手触摸处理后的工件; 21.未使用的和未使用完的药品,必须妥善保存,以防药品变质。禁止浪费药品; 22.员工在生产现场注意滑倒摔跤,更不允许追逐打闹,影响他人工作,以此造成的人员受伤,不作工伤对待;

电泳

电泳技术简介 带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动,称为电泳(electrophoresis, EP)。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。1937 年瑞典学者A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造了移动界面电泳仪,分离了马血清白蛋白的3种球蛋白,创建了电泳技术。 目录 什么是电泳 电泳种类 电泳原理 电泳 展开 什么是电泳 电泳种类 电泳原理 电泳 展开 电泳Electrophoresis 什么是电泳 在确定的条件下,带电粒子在单位电场强度作用下,单位时间内移动的距离(即迁移率)为常数,是该

电泳图谱 带电粒子的物化特征性常数[1]。不同带电粒子因所带电荷不同,或虽所带电荷相同但荷质比不同,在同一电场中电泳,经一定时间后,由于移动距离不同而相互分离。分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。 在外加直流电源的作用下,胶体微粒在分散介质里向阴极或阳极作定向移动,这种现象叫做电泳。利用电泳现象使物质分离,这种技术也叫做电泳。胶体有电泳现象,证明胶体的微粒带有电荷。各种胶体微粒的本质不同,它们吸附的离子不同,所以带有不同的电荷。 电荷移动规律 利用电泳可以确定胶体微粒的电性质,向阳极移动的胶粒带负电荷,向阴极移动的胶粒带正电荷 电泳仪 。 一般来讲, 金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子,带正电荷 非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子,带负电荷。 因此,在电泳实验中,氢氧化铁胶体微粒向阴极移动,三硫化二砷胶体微粒向阳极移动。利用电泳可以分离带不同电荷的溶胶。 例如,陶瓷工业中用的粘土,往往带有氧化铁,要除去氧化铁,可以把粘土和水一起搅拌成悬浮液,由于粘土粒子带负电荷,氧化铁粒子带正电荷,通电后在阳极附近会聚集出很纯净的粘土。工厂除尘也用到电泳。利用电泳还可以检出被分离物,在生化和临床诊断方

图片分层及分类标准

ICS 35.240.70 A90 备案号:****-**** GA 警用地理信息数据分层及命名规则 Data classify and naming rules for police geographic information (征求意见稿) 中华人民共和国公安部 发布

目次 前言............................................................................. II 1 范围 (3) 2 规范性引用文件 (3) 3 术语与定义 (3) 4 数据分层原则 (3) 5 图层命名规则 (4) 附录A(规范性附录)警用数据分层及图层命名列表 (6)

前言 本标准代替GA/T532-2004《城市警用地理信息数据分层及命名规则》,与其相比,除逻辑性修改外主要技术变化如下: ——标准的名称由《城市警用地理信息数据分层及命名规则》扩大为《警用地理信息数据分层及命名规则》; ——增加了数据分层的基本原则(见4.1); ——细化了图层命名规则(见5); ——附录A中增加了表A.3 专业地理信息数据分层及图层命名(见A.3); ——附录A中修改了表A.4 业务关联地理信息数据分层及图层命名(见A.4)。 本标准由公安部科技信息化局提出。 本标准由公安部计算机与信息处理标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:公安部第一研究所 本标准主要起草人:

警用地理信息数据分层及命名规则 1 范围 本标准规定了警用地理信息数据的分层原则与图层命名规则。 本标准适用于警用地理信息应用系统建设与数据交换。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 13989-1992 国家基本比例尺地形图分幅和编号 GA/T 491-2010 警用地理信息分类与代码 GA/T XXX-2010 警用地理信息属性数据结构 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 拓扑关系 topology 对点、线、面、体之间空间关系的表述。 3.2 图层layer 在一定空间范围内,具有同类或共性特征的空间实体数据的集合。 3.3 物理图层physical layer 相关空间实体数据的集合对应的数据结构。 3.4 逻辑图层logic layer 从应用出发,具有相同属性特征的某类空间实体数据的集合。 3.5 数据整合data integration 将相关领域相同空间范围内的空间及非空间数据,按其自然属性和人们对其应用的需求,并遵照合理的数据模型进行优化管理和综合分析、处理的过程。 3.6 警用地理信息 Police Geographic Information 在警务活动和警务管理工作中,直接或间接与空间位置相关信息的总称。 4 数据分层原则 4.1 基本原则 根据国家和相关行业已公布的数据标准,并考虑警用地理信息的实际情况,对警用基础地理信息、警用公共地理信息和业务专用地理信息三类数据分别划分若干图层,对数据的分层遵循如下原则:

电泳厂规章制度

电泳车间制度与处罚条例 1、上班迟到、早退一次罚款10元;迟到、早退1—2小时罚款30元;2 小时以上则扣半天考勤,上班中途请假则按10元每小时计算. 2、请假人员事先写好请假条,交主任批准后方可生效。打电话或捎 口信一律罚款20元每次。未写请假条按旷工处理(一天扣三天考勤,三天未写请假条的 作自动离职处理)。 3、每月设满勤奖100元(从车间总工资扣除付给)。 4、生产过程中各区域卫生随时保持清洁,下班前给区域卫生未打 扫者罚款10元(上排人必须将垫片分开捆好放在指定地点,框上的三角铁跟原框走,不 允许乱扔,空框放回指定位置,否则每次罚款10元)。 5、上班期间严禁串岗,串岗20分钟以上则按20元每次罚款。 6、吊机手掉倒大梁按每条20元计算,如造成行车出轨则按50—100 元处罚。 7、电泳车间吊机手要定期清炉,如因没有清炉而造成电泳料有灰、 尘点将予30—50元处罚。 8、上班时间严禁睡觉,视情节轻重处以20—50元罚款。 10、如成排料因砂面造成报废或者膜厚不达标,则对相关人员处罚,1号、2号吊机手、 控制员占50%。 11、生产过程中,各岗位出现异常情况未及时向主任上报造成废料 的处予20-50元罚款。 12、生产过程中槽液严禁带进带出,允许成滴不成线,否则每次对 负责人按情节轻重给予20-100元处罚。 13、车间内严禁吸烟和随地吐痰,违反者将给予20元处罚每次。 14、正常生产时,吃饭时间定为25分钟,超过25分钟每次给予20 元处罚。 15、上班时间各岗位不能干与本岗位无关的事情,否则给予当事人 处罚20-50元。 16、班长每天对产量、废料的数据必须要准确,追踪卡、计划单、 支数核对准确,并且要做到单、卡、物相符,否则给予 20-30元 处罚。 17、班长安排生产时必须按出炉的先后顺序生产(加急料除外), 否则每次罚款20-50元。 18、上、下排人员必须把产品的不同档次区分清楚,如未区分清或 不按正规工艺操作将给予10-50元处罚。 19、对色人员必须将各种颜色分清楚看准确,如因颜色深浅不一致 造成报废的处以50元以上/排处罚。 20、包装人员在包装和抬料过程中不按正规操作损坏型材者处以5 元/支罚款。 21、包装过程中型材混包罚款20元。 22、包装人员捆贴膜料时,保护膜脱落没有按要求补上,每次罚款 10元。 23、生产中贴错保护膜、缠错封口胶:5扎-10扎罚款20元、10扎 以上罚款30元(跟错单同上) 24、下班前各岗位区域的物品摆放不整齐或混乱的罚款10元。

电泳操作方法

XXX有限公司SDS-PAGE 电泳的测定方法 文件编号XXXX-02 制定部门研发部 版本A/0 页码1/3 生效日期2014/4/9 一、目的 建立SDS-PAGE电泳的测定方法,确保电泳检测的准确性,保证电泳的安全性、有效性。 二、范围与权责 适用于本公司的所有成品以及中间体的分析,由化验员负责采样检测。 品控主管负责审核。 三、原理 SDS-PAGE电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS,SDS会与变性的多肽结合,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关,在达到饱和的状态下,每克多肽可与1.4g去污剂结合。当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:lgMw=k-bX。式中:Mw为分子量;X为迁移率;k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对数分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 四、实验仪器及试剂 1.DYCZ-24DN 双垂直电泳仪 2.DYY-8C 电泳仪电源 3.STS-2A 脱色摇床(水平) 4.标准蛋白Marker 5.平皿:直径150mm 6.TEMED:四甲基乙二胺 7.DTT:二硫苏糖醇 8.储存液 ①2M Tris-HCl缓冲液:称取24.2g Tris,用50ml蒸馏水溶解后,滴加HCl调节pH至8.8, 待室温,加蒸馏水至100ml。 ②1 M Tris-HCl缓冲液:称取12.1g Tris,用50ml蒸馏水溶解后,滴加HCl调节pH至6.8, 待室温,加蒸馏水至100ml。 ③10%SDS溶液:称取10g SDS ,加蒸馏水溶解至100ml。 ④50%甘油:50ml甘油加50ml蒸馏水,混合均匀。 ⑤1%溴酚蓝:100mg溴酚蓝,加蒸馏水至10ml,搅拌至完全溶解,水相针式过滤器过滤除去聚 合的染料。 9. 工作液 ①A液:30%丙烯酰胺储存液,丙烯酰胺是一种神经毒素,可通过皮肤被人体吸收并富集。操 作时要避免皮肤接触,并带合适的口罩于通风橱中进行。 ②B液—分离胶缓冲液:取75ml 2M Tris-HCl缓冲液,4ml10%SDS溶液,加21ml蒸馏水,混 合均匀,4℃保存数月。 ③C液—浓缩胶缓冲液:取50ml 1M Tris-HCl缓冲液,4ml10%SDS溶液,,加46ml蒸馏水,混 合均匀,4℃保存数月。 ④10%APS:称取1g过硫酸铵,加10ml蒸馏水溶解后,水相针式过滤器过滤分装到EP管中,

流程的分级分类与分层

流程的三大诡异概念:分级、分类、分层 现在很多企业在搞流程管理,都会安排各个部门、各个岗位将自己做的事情画成流程图。等到把布置 的工作收集上来一看,企业竟然有上千个流程。 看上去企业的业务很复杂,其实里面重复性的内容很多。特另提跨部门的同一件事情,比如一个单位送图纸、对另外一个单位来说就是取图纸,事情还是那一件,只是看事情的角度不同,结果两个部门“各自为政”,弄岀两个来。重复描述且不说,因为视角不同,对这一流程节点的交接时间、标准等会存在理解的差异,也就是我们常说的流程边界不清楚。原本是要通过绘制流程图,将上下左右的关联流程、业务节点给梳理清楚的,这下反而更复杂了。 所以,要想流程描述好,界定流程边界很重要。而要确定流程边界,首先要将企业所有的流程名称组织起来,形成一个流程清单的树形结构。 其实,企业的流程从来都不是简单的树形或者层次结构,而是一个多维度的网络结构。比如,常态化的工序加工质量检验流程,当发现了产品缺陷时,除了通过本流程处理好这个产品的质量缺陷外,还可能触发一个工艺改进流程,或者供应商质量评价和处理流程。这三个流程的流向、处理进度、完成标准正如其目标不同一样,是有很大差别的。 流程描述的一个难点在于,要在一个单一的树形结构中,同时表述这种具有网络结构的流程清单。这 就好比用单一的关系型数据库来表示复杂的数据结构一样,令人难懂。 这里先从最简单的流程分级概念说起。 流程分级可以简单理解为将不同颗粒度的流程按照粗细分为不同的级别。不同级别的流程之间是有关系的。比如世界地图是一个分级,中国地图是另一个分级,江苏省或者南京市地图又分别是一个级,这就叫分级。 那分类是什么? 同一个分级也可以有不同的分类,比如,同样是中国地图,可以有全国高速公路交通图,也可以是全 国海拔高度分布图,或者绿色植被覆盖图。他们之间是同一级别的不同分类。 不同的分级之间,可能会采用不同的分类。比如企业的采购流程,作为企业的主营业务流程,其下可以分为采购申请、采购询价、采购合同订立、采购入库、采购付款等子流程,也就是分为五个下级流程。而分类可能是说,同样的采购申请流程,可以根据采购物资的性质不同,分为固定资产采购申请流程、原材料采购申请流程、办公用品采购申请流程等三个分类,因为各种分类涉及的采购申请对象、审批人都不尽相同。 从上面的例子也可以看岀,分级分类流程的是两个属性维度,相互关联又有区别。那么如何在同一个 流程清单的树形结构中同时清楚地表述这两者之间的差别呢?流程管理顾问有一套方法,配合其他概念和规则,可以很好地解决流程描述边界的问题,这里不再细说。如有需要,可联系我们延展咨询的流程咨询顾问。

电泳车间管理制度

重庆弘炫涂装有限公司 电泳车间日常管理规章制度 1、上下班不得迟到、早退。如有迟到、早退者,按10~20分钟内为迟到早退,处罚20元一次;超过20~50分钟记旷工半天,超过半天记旷工一天处理,旷工者处旷一罚三并处考核100元,旷工三天者自动解除劳动合同。 2、上班工作时间不得追逐、嬉戏、打瞌睡、闲聊、私自离开工作岗位,发现一次罚款10元。 3、各种生产工具、材料必须保管好,不得乱丢、乱放,更不得拿作私用,发现一次罚款10元。 4、各种机械运转或两人配合做事时,任何人不得与操作者动手动脚,嘻嘻哈哈。在没有征得管理人员同意下,不得随便乱开、乱调、乱拆各种机械设备。违者发现一次罚款20元。 5、在生产过程中,根据特性,必须按照规定工艺要求生产,保证质量,不得私自变动、调动(如发现有问题应及时提出、更正,经管理人员核对允许情况下方可调动)。否则发现一次罚款20元。 6、进行打磨、抛光、敲打周转料架漆疤工作之时,必须佩戴眼镜,以防残渣飞溅入眼睛而发生意见。否则发现一次罚款10元。 7、下班之前提前五分钟时间,将个人工作范围内的卫生搞好、把产品、电线、门窗收好、关好,违反者罚款10元。 8、节约水电,不能有长流水、长明灯、长用电等铺张浪费现象,发现一次罚款10元。 9、节约材料,严防电泳漆被污染,严格杜绝人为污染的现象,一经出现,视情节轻重,按损失额的30%-70%进行赔偿,情节严重违反法律者,担负相应的法律责任。 10、严格遵守操作规程,若因违反操作规程出现的各种损失,视情节轻重给予相应的赔偿。 11、上挂件的操作工在上挂件时,一定要注意挂件毛坯是否符合生产要求,如有灰尘、铁锈、油渍、塑料标签等影响产品质量的因素存在,要及时向当值领班及主管反映,如因毛坯质量问题而导致产品返工而又没有及时反映者,挂件工每人罚款50元。(毛坯本身材质问题除外) 12、卸件人员在卸工件时,对第一挂工件要严格进行检查,并及时向班长或喷枪手反映喷涂状况,以便喷枪手及时调整喷涂条件。违者每人每次罚款20元。 13、包装工在包装时一定要配合质检员严格执行产品质量的标准,严禁有不良品包装入框的现象发生。产品标签要贴牢、端正,包装要规范。发现一次不合格除责令其返工外,每人每次罚款10元。 14、产品的质量不是靠检出来的,而是靠做出来的,我们要做到人人都是质检员,人人都是质量的把关者。这样才能降低返工率,进而达到提高成品率的目的。 15、上班时间必须服从管理人员的工作安排、调动、不得无故顶撞、辱骂,违者罚款20元。 16、上班时间一律不准做与自己本职工作无关的事,如看报纸、玩手机、听MP3等,发现一次罚款10元, 17、各种电灯、风扇、机械在没人做事时必须关掉。违者发现一次罚款10元。 18、工作期间上厕所和饮水时间次数和时间不能过多过长,不能在工作岗位之外的地方闲逛,如发现多次处予罚款10元。 19、车间内严禁吸烟,乱扔垃圾,发现一次罚款50元。望大家互相监督,款金将由举报、检举人所得。 20、晚上安排加班的,不得以任何理由推脱(除病假、请假之外)。如不到位者当旷工半天处理。 21、生产车间在没获得公司的允许外不准带入不相关的人员及朋友进入参观,否则罚款20元。 22、上班时间有穿拖鞋、敞开衣服做事的罚款20元。 23、班长必须按要求每日填写记工本,把每天所做的工序、数量和存在的问题记录清楚,以备统计、

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白 [实验目的] (1)学习聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳原理。 (2)掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术。 (3)比较醋酸纤维薄膜电泳与聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白的操作效果。[实验原理] 带电质点在电场作用下,会向两极移动;带正电荷的移向负极,带负电荷的移向正极,这种现象称为电泳。 聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(简称Bis)在加速剂N,N,N',N'—四甲基乙二胺(简称TEMED)和催化剂过硫酸铵(简称AP)或核黄素的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)。 [实验试剂] 1、待测样品:新鲜血清 2、制备分离胶、浓缩胶有关试剂: (1)凝胶缓冲液:称取1 mol/L HCl 48ml,Tris(三羟基氨基甲烷)36.6g,TEMED 0.23mL,加重蒸馏水至80mL 使其溶解,调pH8.9,然后加重蒸馏水定容至100mL ,至棕色瓶,冰箱储藏。 (2)分离胶贮液,一般有两种配法: ⅰ28%Acr-0.735%Bis贮液:丙烯酰胺28.0克,甲叉双丙烯酰胺0.735克,加重蒸馏水使其溶解然后定容至100mL. ⅱ30%Acr-0.8%Bis贮液:Acr30.0克,Bis0.8克,加重蒸馏水使其溶解定容至100mL. 以上两种溶液需用棕色试剂瓶盛放,4℃储存,一般可放置一个月左右. (3)分析纯过硫酸铵(AP)(AR)0.14g加重蒸水100mL,棕色瓶,4℃储存仅能用一周,最好当天配置.上述三种试剂用于制备分离胶. (4)浓缩胶缓冲液:称取1mol/LHCL48mL,Tris5.98g,TEMED 0.46mL,加重蒸水至80mL,调pH6.7,用重蒸水定容至100mL,棕色瓶4℃储存. (5)浓缩胶贮液:称取Acr10g,Bis2.5g,加重蒸水溶解定容100mL,过滤后至棕色瓶4℃贮存。 (6)40%蔗糖溶液(W/V)

分层分类教学指导经验总结

分层教学、分类指导经验总结 素质教育是面向全体学生,促进学生各方面发展的教育,在教学中教师应该充分关注重视学生的个性差异,允许学生思维方式的多样化和思维水平的多层次性,鼓励不同的学生从不同的角度认识问题。这是关注学生的个体差异,因材施教,促进每个学生获取个性发展的有效途径。 近年来,我在数学学科的教学中尝试分层教学,分类指导取得了点滴的经验如下: 一、依据学生认知差异和知识水平的悬殊,将学生合理分层、分类。 要对学生合理分层、分类,必须首先做到全面了解学生,根据学生的不同思维方式,不同的兴趣爱好和不同的认知潜能分成不同的层面和类别。如在2005—2006学年度的第一学期接任了三年级数学课教学。一开始我就耐心的像原来的任课教师了解每一位学生的学习情况,兴趣爱好,并做仔细的分析,认为班中的沈朝壮、王中宝、沈蝶蝶等同学思维敏捷,在接受知识方面,数学应用意识和实践能力方面都很强,现有的教学内容已不能满足他们的需求,是班里的优秀生,把他们分为A组。 像魏芳雅、孙悦悦、沈萍萍等同学,他们能较好的理解和掌握学习目标所规定的教学内容,有着较强的数学意识和较大的潜能,把他们分为B组。 对于王卫、蒋玉春、将宋玉、蒋亚男、王艳等同学学习兴趣较低,认知能力也很差,接受知识感觉困难,压力大,把他们分为C组。 二、课堂中分层教学,分类指导的实施。 课堂教学是实施素质教育的主阵地,具体实施我从以下几个方面着手: 1、例如我在教学第九册数学应用题例时,就针对不同层次的同学采取了不同的提问方式和教学要求。对于A组同学,提出问题,要求独立思考,

会列出综合算式,会一题多解会比较两种解法之间的联系,提高他们的思考能力。对于B组,要求他们通过独立思考,小组交流,列出不同解法的综合算式。对于C组学生采取引导提问,多为差生创设问题情境让他们相互交流,巡视指导,帮助差生列出分布算式或综合算式,这给几位成绩好的学生创造了发展的机会,又为差生提供了思维的空间。 2、课堂练习分层教学,分类指导。 练习题目的设计要有针对性,要结合学生的实际,难易要适度。比如我在教学数学第十册练习二十三的第7—11题及思考题中,对于A组学生不但要求独立完成7—9题,还要完成带星号的题目第10—11题,及思考题。对于B组学生在完成带星号的题目有一定的难度时给予一定的指导,提示,让同学之间进行相互交流,进而理解题意。对于C组学生的素质,要求他们通过独立思考、合作交流,教师引导且鼓励A组、B组学生帮助C组同学,做好7—9题。 三、拓展课外活动,实施分层教学,分类指导。 课外活动是课堂教学的补充和延伸。做好课外活动工作对实施素质教育有重要的意义。 根据A组学生的认识能力,兴趣爱好,为他们创造一个发挥潜能的机会,比如鼓励他们做一些课外延伸的题目,结合他们的兴趣爱好,培养他们善于发挥的技能。对于C组学生把他们反馈来的信息及时分析。结合学生实际,给予一定的辅导,同时做好家访工作。 四、在学生评价方面。 在评价中我采取了平时和期末相结合的评价方式,在课堂评价中对于不同层面的学生都采取了多表扬鼓励,少批评的原则,从而激发他们的学习兴趣。在期末质量检测中我设计了基础知识、知识与技能、思维拓展。不同的试题供不同层面的学生使用,充分发挥了他们的思维积极性和知识的潜能。

(完整版)铝型材氧化、电泳生产车间工艺操作规程[1]

氧化车间生产工艺操作规程 阳极氧化、电泳涂漆工艺操作规程 本规程适用于铝合金型材的阳极氧化、电解着色和电泳涂漆生产工艺。 1生产工艺流程 1.1阳极氧化、电解着色工艺流程 备料及装挂—脱脂—水洗—水洗—碱洗—水洗—水洗—中和—水洗—水洗—阳极氧化—水洗—水洗—电解着色—水洗—水洗—封孔—滴干—卸料—检验—包装—入库 1.2电泳涂漆工艺流程 备料及装挂—脱脂—水洗—水洗—碱洗—水洗—水洗—中和— 水洗—水洗—阳极氧化—水洗—水洗—电解着色—水洗—纯水洗—热纯水洗—纯水洗—阳极电泳—水洗1—水洗2—滴干—固化—自然冷却—卸料—检验—包装—入库 2阳极氧化、电解着色工艺规程 2.1备料及装料 2.1.1按生产计划要求,准备好检验合格的型材。 2.1.2在装挂前,应检查料挂的导电杆与导电梁上螺杆连接是否紧固,导电杆是否弯曲。 2.1.3装挂前,应用锉刀或其它方法去除吊杆上与型材接触面的阳极

氧化膜以及漆膜,确保良好的导电性。 2.1.4装挂时,应按照工艺卡片规定的支数挂料。 2.1.5装挂时,应尽量把相同断面或相近形状尺寸的型材装在同一挂上,型材与型材之间应保持均匀的间距(着色型材一般为30~35mm,非着色型材为20~25mm)和合适的倾角(>5℃),型材绑线位置距端头应<50mm。 2.1.6装挂时,型材重要的装饰面应朝向邻近阴极。 2.1.7型材装挂必须牢固,不得窜动。 2.1.8装挂时,应轻拿轻放,防止型材磕碰伤。 2.1.9装挂完毕后应仔细检查,型材之间不应相互接触,挂在吊杆最上面的型材在处理时不能露出液面。 2.2脱脂 在酸液中使铝型材表面的油污和天然氧化膜等脏物与铝基体的 结合力松弛,且趋于一致,便于碱洗时去除速度均一。脱脂采用硫酸(工业纯H2SO4,GB/T534)溶液。为降低成本,可以使用氧化槽排放的硫酸。 槽液成分及工艺制度如下: 硫酸:150~180g/L 温度:室温 时间:1~3min 生产合金元素含量较高的6061合金型材,或在使用废料较多的情况下,为防止铝材出现黑斑,可在硫酸中加入10~20g/L硝酸。

SDS-PAGE电泳的基本原理及浓缩胶浓缩样品的原理

SDS-PAGE电泳的基本原理及浓缩胶浓缩样品的原理 SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是目前最常用的分离蛋白质的电泳技术 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS,SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,与SDS分子按比例结合,形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物,这种复合物由于结合大量的SDS,使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块,从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异,由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的,因此在进行电泳时,蛋白质分子的迁移速度取决于分子大小。当分子量在15KD到200KD之间时,蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系,符合下式:logMW=K-bX,式中:MW为分子量,X为迁移率,k、b均为常数,若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图,可获得一条标准曲线,未知蛋白质在相同条件下进行电泳,根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 SDS-PAGE电泳成功的关键是什么? ①溶液中SDS单体的浓度 SDS在水溶液中是以单体和SDS-多肽胶束的混合形式存在,能与蛋白质分子结合的是单体。为了保证蛋白质

与SDS的充分结合,它们的重量比应该为1∶4或1∶3。②样品缓冲液的离子强度因为SDS结合到蛋白质上的量仅仅取决于平衡时SDS单体的浓度,不是总浓度,而只有在低离子强度的溶液中,SDS 单体才具有较高的平衡浓度。所以,SDS电泳的样品缓冲液离子强度较低,常为10-100 mM。③二硫键是否完全被还原只有二硫键被完全还原以后,蛋白质分子才能被解聚,SDS才能定量地结合到亚基上从而给出相对迁移率和分子质量对数的线性关系。Sample buffer 中的β-巯基乙醇的浓度常为4-5%,二硫苏糖醇的浓度常为2-3%。前者有挥发性,最好使用前加入。 SDS-PAGE缓冲液系统的选择,Tris-Glycine、Tris-Tricine、Tris-硼酸盐或者其他? 一般来说,在被分析的蛋白质稳定的pH范围,凡是不与SDS发生相互作用的缓冲液都可以使用,但缓冲液的选择对蛋白带的分离和电泳的速度是非常关键的。Tris-甘氨酸系统是目前使用最多的缓冲系统。Tris-甘氨酸系统是目前使用最多的缓冲系统。如果要测定糖蛋白的分子量,最好采用Tris-硼酸盐缓冲系统,对于分子质量小于15 kDa的蛋白样品,可以使用SDS-尿素系统,也可以采用Tris-tricine缓冲系统。 积层胶(或称浓缩胶)的作用原理?

分层管理

分层分类管理人才 实现团场人力资源管理迈上新台阶 现代企业的竞争越来越集中于核心竞争力的较量,而构成企业核心竞争力的源泉在于核心人力资源。在未来市场竞争的较量中,团场如何将团场现有人才转变为提升企业核心竞争优势的源泉并予以开发?关键需要解决两个层面的问题:一是团场战略方向的引导并被领导干部和职工认可;二是人才的合理使用并被“激活”。对此,构建一套战略性人力资源管理体系,是建设团场科学的经营管理体制的核心和基础。重构战略性人力资源管理的新体制,最重要的是把人看作团场中重要的战略性资源,按照团场战略要求,对团场现有人力资源进行分层分类的管理,并以此构建团场战略性人力资源管理体系。 战略性人力资源管理的出发点和归宿都在于打造团场未来的核心竞争力,核心在于如何从团场现有人力资源存量中培养、锻炼出一支具有核心竞争力的人才队伍。团场战略性人力资源管理解决方案的基础在于要对团场的人力资源进行分层分类的管理,核心是价值链管理,成败在于激励机制和沟通机制。 从战略性人力资源管理的角度看,人力资源价值链的三个环节具有环环相扣的内在联系,可以说,激励的依据是价值评价,激励的手段是价值分配,而激励的目的在于使团场

价值的创造者发挥主动性和创造力,从而为团场创造更多的利益。另一方面,价值评价和分配本身就是沟通机制的具体化形式。因此,只有在人力资源分层分类的基础上,建立起科学的价值评估体系和价值分配体系,才能形成有效的激励机制和沟通机制,从而推动各层级人才为团场创造更多的价值。 一、如何对团场人力资源进行分层分类 我们可以看到,一个团场核心能力突出表现为团场所具有核心的人力资源,核心人力资源是形成团场核心能力的基础,并已取代资金、技术、资本而成为团场重要的战略性资源,是构成团场核心竞争力的基本要素。作为知识和技能“承载者”的核心人力资源,代表了团场所拥有的专门知识、技能和能力的总和,是团场创造独占性的异质知识和垄断技术优势的基础。针对这一特殊的战略性资源必须进行分层分类的科学管理,以人为本,注重人和事的相互适应,注重对人才的培训和潜能的开发,建立有效的激励机制,才能充分发挥其创造性和主观能动性,从而谋求团场与人才的共同发展。 与团场核心竞争力的衡量标准类似,我们可以用“价值性”和“唯一性”这两个标准来对人力资源分层分类,并以此界定团场的核心人力资源。 1、衡量现阶段人力资源的价值,还是衡量远期的人力

电泳涂装及其原理

前处理电泳班工艺知识讲义 编制:王立维 校对:立志

电泳工艺知识 电泳涂装时一种特殊的涂膜形成方法.仅使用于与一般涂料不同的电泳涂装专用的水性涂料.简称电泳涂料.它是将具有导电性的被涂物浸渍在装满水稀释的浓度比较低的电泳涂料槽中作为阳极(或阴极).在槽中另设置于相应的阴极(或阳极).在两极间通直流电一定时间.在被涂上析出均一.水布溶的涂膜的一种涂装方法.根据涂物的极性和电泳涂料的种类.电泳涂装分为两种. 阳极电泳涂装法和阴极电泳涂装法 一.电泳原理 电泳涂装过程伴随着电解.电泳.电沉积.渗透等四种化学物理作用组合.形成涂膜. 二.电泳涂料的组成 树脂液.颜料浆.溶剂(-03.-04)PH值调节剂.去离子水. 三.电泳工艺流程 电泳槽—UF1—UF2—新鲜纯水洗—转挂—电泳烘干炉. 四.电泳各系统的工艺及工艺设备要求 电泳槽分为主槽和辅槽.槽液进主槽流向辅槽.电泳涂装的其它一切装置都为本槽服务. 工艺要求;1.PH:5.6—6.0 2.电导率950—1250us/cm

3.固体份:16—18% 4.工作时间;2—4分钟 5.工作温度:30—32度 6.电泳的工作条件:分两段式供给:低压100—150V.时间 控制在30—40秒.高压230—300V.时间控制在150-160 秒. 7.阴极液PH值:2.0—4.0 电导率:100—300us/cm 工艺设备:电泳槽加料系统.制冷机组.循环过滤系统.阴极系统。超滤系统. UF1工艺参数及技术要求 工艺参数:PH:5.0—6.0 电导率600—100us/cm 喷射压力:0.1—0.2MP2 技术要求:1.检查过滤罐的进出口压力.当达到0.08—0.1MP2时更换过滤袋. 2.检查喷嘴的喷淋情况.定期更换. 四.电泳加料系统 设备作用:及时补加电泳漆材料.以保持电泳槽液的参数稳定及特殊情况及时调整. 工艺要求:补加完后用少量纯水冲洗管路和泵件.以免泵被堵塞.

流程的分级分类与分层

流程的分级分类与分层-标准化文件发布号:(9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

流程的三大诡异概念:分级、分类、分层现在很多企业在搞流程管理,都会安排各个部门、各个岗位将自己做的事情画成流程图。等到把布置的工作收集上来一看,企业竟然有上千个流程。 看上去企业的业务很复杂,其实里面重复性的内容很多。特别是跨部门的同一件事情,比如一个单位送图纸、对另外一个单位来说就是取图纸,事情还是那一件,只是看事情的角度不同,结果两个部门“各自为政”,弄出两个来。重复描述且不说,因为视角不同,对这一流程节点的交接时间、标准等会存在理解的差异,也就是我们常说的流程边界不清楚。原本是要通过绘制流程图,将上下左右的关联流程、业务节点给梳理清楚的,这下反而更复杂了。 所以,要想流程描述好,界定流程边界很重要。而要确定流程边界,首先要将企业所有的流程名称组织起来,形成一个流程清单的树形结构。 其实,企业的流程从来都不是简单的树形或者层次结构,而是一个多维度的网络结构。比如,常态化的工序加工质量检验流程,当发现了产品缺陷时,除了通过本流程处理好这个产品的质量缺陷外,还可能触发一个工艺改进流程,或者供应商质量评价和处理流程。这三个流程的流向、处理进度、完成标准正如其目标不同一样,是有很大差别的。 流程描述的一个难点在于,要在一个单一的树形结构中,同时表述这种具有网络结构的流程清单。这就好比用单一的关系型数据库来表示复杂的数据结构一样,令人难懂。 这里先从最简单的流程分级概念说起。 流程分级可以简单理解为将不同颗粒度的流程按照粗细分为不同的级别。不同级别的流程之间是有关系的。比如世界地图是一个分级,中国地图是另一个分级,江苏省或者南京市地图又分别是一个级,这就叫分级。 那分类是什么? 同一个分级也可以有不同的分类,比如,同样是中国地图,可以有全国高速公路交通图,也可以是全国海拔高度分布图,或者绿色植被覆盖图。他们之间是同一级别的不同分类。 不同的分级之间,可能会采用不同的分类。比如企业的采购流程,作为企业的主营业务流程,其下可以分为采购申请、采购询价、采购合同订立、采购入库、采购付款等子流程,也就是分为五个下级流程。而分类可能是说,同样的采购申请流程,可以根据采购物资的性质不同,分为固定资产采购申请流程、原材料采购申请流程、办公用品采购申请流程等三个分类,因为各种分类涉及的采购申请对象、审批人都不尽相同。

电泳仪电源工作原理介绍

BG-Power600k标准电泳仪电源,恒压恒流恒功率输出,可作核酸、蛋白、转印等电泳。能提供强大的1000mA电流,可同时运行4台DNA(每台约需180 mA)或RNA(每台约需250 mA)电泳槽,可轻松达到实验要求。 可选配的温度探测器与BG-Power600K标准电泳仪电源配套使用,能在电泳过程中监测核酸、蛋白、转印等凝胶温度,将电泳槽温度控制在理想范围内(0-100℃),使电泳结果不因高温而作废。核酸(尤其RNA)、转印等电泳易被高温侵扰。 BG-Power600K电源具有自动升成、微电流状态以及断电自动恢复等功能。液晶屏显示可编程,同时显示所有运行参数即时监控进程。可存储12种程序并可定时运行。 产品特点: *1.自动升成功能:恒定任意值(电压、电流或功率)后,其余两项指标自动升至匹配位置,无需手动调到最大值或仔细找寻匹配位置。避免了将输出值调到最大后对电泳结果的影响,也避免了因找寻不准而误恒定的现象。 *2.微电流状态功能:目前电泳仪电源的两种定时方式:一种是到时间后蜂鸣报警,电泳照常进行;另一种是到时间后,在蜂鸣报警的同时停止电泳。实验室无人值守时,前者会造成电泳跑过头,后者会造成谱带扩散。微电流状态是指电泳到时间后,在蜂鸣报警的同时电流

变成微小输出,长时间无人处置也不会跑过头或扩散。 *3.断电自动保护恢复功能:因停电、掉闸或人为因素造成使用中的电泳仪电源断电时,电源会自动记忆当时电泳状态,来电后即自动恢复。 本电泳仪电源还具有以下特点: *1.自动升成功能:防止误恒定 *2.微电流状态功能:防止样品跑过头或谱带扩散 *3.断电自动恢复功能:随时记录实验过程 *4.温度控制功能:随时调控缓冲液温度 5.微电脑控制开关电源,可编程,能够存储12个常用程序,宽电压赫兹,适合国内外使用,具有空载、突变、过载、短路、过压、漏电等安全保护,暂停/继续功能,方便实验中的连续操作。 技术参数:1.输出类型:恒压、恒流、恒功率 *2.输出范围:电压5-600V;电流:1-1000mA;功率:1-300w 3.分辨率:电压1V、电流1mA、功率1w 4.显示方式:液晶显示屏 5.定时范围:定时1-99h59min 6.外型尺寸:32*22*8cm(L*W*H) 7.重量: 3.5kg应用BG-subMINI,BG-subMIDI,BG-subMAX等大型水平电泳,BG-verMINI.SE600X等大板面垂直电泳,BG-blotMINI,TE22,TE42,TE62等转印电泳实验

建立分层分类的业务流程管理

建立分层分类的业务流程管理,提升企业执行力 目前,企业战略落地的一般做法是将战略通过计划指标和绩效考核指标“科学地”具体到各个部门甚至个人,常用的方法是传统的计划分解方法和现代的平衡积分卡理论。企业的战略是根据企业所面临的市场和企业本身的价值链结构来制定的,而企业的组织结构是根据企业的功能来架设的。这中间大多数企业忽视了联结企业价值链结构和组织结构之间的桥梁,即企业的业务流程。其结果是:尽管企业的目标和计划设计得很科学和很全面,但是,一到“真枪实战”,部门之间的“扯皮”便层出不穷。更为严重的一个问题是,一旦发现目标偏离,往往无法找到有效的纠偏措施,致使看着绩效滑坡,却束手无策。 此外,即使企业的价值链结构和其组织结构相当吻合,业务流程的概念相当清晰,CEO们仍然还可能会有企业执行力的困惑。常见的现象是在战略部署时各部门和员工均清楚其任务和职责,但到执行时,却发现各部门和员工之间对同一个任务的定义和内涵的理解是差别很大的,以至于导致执行不到位,甚至铸成大错。这些现象背后隐含的问题是我们的企业目前还不够重视企业内部流程和绩效的标准统一问题。 企业在谈论执行力时,往往强调人的作用。其实,执行力首先表现为企业目标从上至下的贯通,从而使得每一层次的流程都有明确的目标。流程控制体系可以监控执行过程和结果,担负着企业目标实现的重任。因此梳理、优化现有企业业务流程,实现流程标准化,规范

化企业内部运转机制,直接影响着企业执行能力的高低。 鉴于这种状况的普遍性,企业首先要构架一个很好的流程管理体系,企业的流程管理体系应该是清晰的多维度结构,而且必须是端到端和集成的。只有这样,才有可能以此为基础实现组织、流程和IT应用系统的整合及改进。 一、在架构流程管理体系时,首先要将流程进行分类。 通常,企业的业务流程一般被分为核心流程、支持流程。这种分类主要是根据流程在企业中所体现的功能不同而进行区分的。核心流程的输出输入都是面向客户和市场的,是满足客户和市场需求的实现过程;支持流程是支撑服务核心流程的。分类的目的并非只为从理论上或者概念上阐述的方便,而是企业实现经营目标所必须的相互依赖的功能的高层次架构。 二、在分类的基础上,要对流程进行分层。 业务流程之间的层次关系反应业务建模由总体到部分、由宏观到微观的逻辑关系。这样一个层次关系也符合人类的思维习惯,有利于企业业务模型的建立。一般来说,我们可以先建立主要业务流程的总体运行过程,然后对其中的每项活动进行细化,建立相对独立的子业务流程以及为其服务的辅助业务流程。流程通过分级管理,一般一个面向客户的端到端的价值链可以分解为若干业务领域、业务领域进一步细分为流程、流程细分为活动。 三、打通端到端业务流程。 所谓端到端流程,端为企业外部输入或输出,这些输入或输出来

垂直电泳槽操作步骤

1.目的 规范垂直电泳槽的使用、维护与保养。 2.范围 3.职责 使用人员对本规程的实施负责,部门负责人监督实施。 4.规程 4.1安装 4.1.1打开包装,将垂直电泳槽放在平稳无振动的实验台桌面上。 4.2使用 4.2.1制胶: 4.2.1.1选择所需间隔厚度的垫条玻璃板,玻璃板上标记的箭头方向向上,玻璃板上有垫条的 那面面对操作者。薄玻璃板平行盖在垫条上。 4.2.1.2将上述一套玻璃板(垫条玻璃和薄玻璃)垂直放入制胶支架,在平整的桌面上将垫条 玻璃和薄玻璃的底面在制胶支架上的锁紧门向二侧旋转锁紧,完成一个制胶单元。4.2.1.3将准备好的制胶单元的底面压到制胶固定架的密封相交条上,世制胶支架的后边尽量 靠近制胶固定架,左手轻轻下压垫条玻璃板上缘至制胶固定架的弹簧夹能卡住为止,右手调整弹簧夹,使弹簧夹能固定在垫条玻璃的中间位置。 4.2.1.4按要求调配合适浓度的胶灌入二块玻璃板中间的间隙中至薄玻璃板上缘1mm处,插入 对应厚度和齿数的梳子,等待胶的凝固。 4.2.1.5胶凝固后,轻轻把掉梳子,取出制胶单元,打开制胶支架上的锁紧门,将玻璃板从制 胶支架中取出,移入电泳槽。 4.2.2电泳槽准备: 4.2.2.1将已制完的二组玻璃板(薄玻璃板向着电极架的红色胶条)分别装入电极架的两面, 玻璃板的底部架在电极架的支脚上,薄玻璃的边缘与电极架的红色橡胶条紧贴。如仅走一块胶,可用提供的玻璃替代塑料片装在电极架的另一面(请注意玻璃替代塑料片上的方向提示)。 4.2.2.2将装完玻璃板的电极架插入垂直槽槽内固定架,并确认电极架已到底。 4.2.2.3再下压已装入的电极架的电极二边外突部分,使玻璃底面与电极架支脚面分离。 4.2.2.4将垂直槽槽内固定架上的锁紧门向中间旋转锁紧。 4.2.3电泳: 4.2.3.1在内槽中加入电泳缓冲液,直至电泳液溢出到外槽中,外槽中电泳液高度约3-5㎝。 4.2.3.2在梳井内加样,注意避免引入气泡。 4.2.3.3盖好上盖。保证电极架的正负极与槽盖的正负极始终相对应。 4.2.3.4接通电泳仪,电压推荐使用60V-200V。 4.3清洁、维护与保养 4.3.1清洁:

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