德国Zeiss 激光共聚焦显微镜 快速操作手册
德国Zeiss 激光共聚焦显微镜快速操作手册德国 Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜快速操作手册制作: 光学仪器(上海)制作:Zeiss 光学仪器(上海)国际贸易有限公司孙凯 2009 年 6 月目录:目录:1 系统的组成系统组成及光路示意图实物照片说明实物照片说明2 系统的使用2.1 开机顺序软件的快速使用说明2.2 软件的快速使用说明快速使用显微镜的2.3 显微镜的触摸屏控制2.4 关机顺序3 系统的维护1 系统的组成激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。系统组成及光路示意图:系统组成及光路示意图: 组成及光路示意图电动荧光显微镜扫描检测单元激光器电脑工作站实物照片说明:实物照片说明: 电动荧光显微镜扫描检测单元CO2 培养系统控制器激光器电脑工作站2 系统的使用2.1 开机顺序 )打开稳压电源(绿色按钮)(1)打开稳压电源(绿色按钮) 等待 2 分钟(电压稳定)后，再开其它开关) “ ”(2)主开关 MAIN SWITC H “ON” “ ”电脑系统SYSTEMS/PC “ON” “ ”扫描硬件系统COMPONENTS “ON” )(3)打开电动显微镜开关打开荧光灯开关 (注:具有 5 档光强调节旋钮) ) 离子激光器主开关”(4)Ar 离子激光器主开关“ON”顺时针旋转钥匙至“—”预热等待约分钟，预热等待约 15 分钟，”将激光器扳钮由“Standby”扳至”状态，“Laser run”状态，即可正常使用 ) ，(5)打开电脑开关，进入操作系统注:键盘上也具有电脑开关 2.2 软件的快速使用说明(1)电脑开机进入操作系统界面后，双击桌面共聚焦软件 ZEN 图标(2)进入 ZEN 界面，弹出对话框: ”——“Start System”——初始化整个系统，用于激光扫描取图、分析等。“Image Processing”——不启动共聚焦扫描硬件，用于已”存图像数据的处理、分析。(3)软件界面: 功能界面切换:扫描取图( ) 图像处理( 、图像处
理1 功能界面切换:扫描取图(Acquisition) 图像处理(Processing) 维护(Maintain) 、、维护 ) 维护( 、 ) 专业工程师使用)(注:Maintain 仅供 Zeiss 专业工程师使用) 动作按钮; 工具组(多维扫描控制) 工具详细界面; 状态栏; 视窗切换按钮;2 动作按钮;3 工具组(多维扫描控制) 4 工具详细界面;5 状态栏;6 视窗切换按钮; ; 图像切换按钮; 图像浏览/预扫描窗口预扫描窗口; 文档浏览/处理区域处理区域;7 图像切换按钮;8 图像浏览预扫描窗口;9 文档浏览处理区域;10 视窗中图像处理模块动作按钮动作按钮:Single ——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。Start ——开始扫描单张图片或一个实验流程(1 组图片，如XYZ、XYT 等) ——。Stop ——暂停/结束扫描。——New ——建立一个新图像扫描窗口/文档。——激光连接状况检查激光连接状况检查眼睛观察/相机共聚焦光路切换( 软件界面右上角)眼睛观察相机/共聚焦 LSM 光路切换(ZEN 软件界面右上角) 相机 :Ocular ——通过观察筒用眼睛观察。(激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。) ——光路切换至相机。Camera ————共聚焦扫描成像光路。LSM ——显微镜设置:显微镜设置: ”——“Ocular”——”——“Light Path”——点击物镜图标，选择物镜——点击物镜图标，选择物镜————样品聚焦。样品聚焦。透射光控制(透射光控制(Transmitted Light Control) )反射光光闸控制(反射光光闸控制(Reflected Light Shutter) )荧光激发块选择(荧光激发块选择(Reflector) )共聚焦 LSM 扫描设置点击“ 软件界面右上角) 系统切换至共聚焦扫描光路:点击“LSM” ZEN 软件界面右上角) 系统切换至共聚焦扫描光路: ( ” ，光路设置:光路设置:Smart Setup ——自动预设光
路、、扫描方法，选取“荧光探针”“颜色” 。应用“Apply”(注:Fastest 为最快速扫描，多条激光谱线同时扫描。Best signal 为最佳信号扫描，多条激光谱线顺序扫描。Best compromise 为兼顾速度与信号的折 )中式扫描。扫描图像参数设置:扫描图像参数设置:每个通道的精细调节:每个通道的精细调节:包括:包括: )
的调节( 。该值越大，则信号越强，但共聚焦图像效果会降低。原则上，
(1)Pinhole 的调节(一般设为 1AU。该值越大，则信号越强，但共聚焦图像效果会降低。原则上，在保证图像质量的前提下，越好)在保证图像质量的前提下，该值越接近于 1AU 越好); ) 信号和噪音都增强，的调节(增大则信号和噪音都增强
减小则信号和噪音均减小。原则上，(2)Master Gain 的调节(增大则信号和噪音都增强，减小则信号和噪音均减小。原则上，在保证图像质量的前提下，值越小越好)像质量的前提下，Gain 值越小越好); ) 的调节(可扣除背景噪音，但标本信号也有一定程度的扣除。原则上，(3)Digital Offset 的调节(可扣除背景噪音，但标本信号也有一定程度的扣除。原则上，在保证图像质量的前提下，越好)像质量的前提下，Digital Offset 值越接近于 0 越好); ) 的调节(增大则信号和噪音都增强，减小则信号和噪音均减小。原则上，(4)Digital Gain 的调节(增大则信号和噪音都增强，减小则信号和噪音均减小。原则上，在保证图像质量的前提下，
越好)像质量的前提下，Gain 值越接近于 1.01.2 越好); )另外，对于每个通道，需要灵活调节激光的强度(激光强度越高，则信号越强，(5)另外，对于每个通道，需要灵活调节激光的强度(激光强度越高，则信号越强，但噪音也相应增同时标本更容易被漂白或淬灭。原则上，在保证图像质量的前提下，激光强度越低越好。强，同时标本更容易被漂白或淬灭。原则上，在保证图像质量的前提下，激光强度越低越好。) 选择可连续扫描、一边预览图像效果、一边精细调节各个通道的扫描参数。可连续扫描、一边预览图像效果、一边精细调节各个通道的扫描参数。精细调节各个通道的扫描参数如果预览图像的效果可以，则先“如果预览图像的效果可以，则先“Stop” ” 再点击“ ，再点击“Single” ” 或“Start” ”即可完成图像的扫描。即可完成图像的扫描。图像的保存:图像的保存: 三种方法: 三种方法: )“ ”菜单下，“ ” (1) File”菜单下，Save” 或者“ 或者“Save AS” ”。 ) (2)点击右下角按钮。 ) (3)点击工具栏按钮。如图所示)
(如图所示)另外，通过“ ”菜单下的“ ” 也可将图像以其它格式输出。另外，通过“File”菜单下的“Export” 也可将图像以其它格式输出。，显微镜的触摸屏控制2.3 显微镜的触摸屏控制显微镜可由 TFT 液晶触摸屏进行控制:由触摸
屏“Home/主页”进入“Control/显微镜控制”界面， TFT 触摸屏控制直观、便捷。直观、便捷。触摸屏常用控制界面:触摸屏常用控制界面: Objectives 物镜控制 TL 透射光光闸 RL 反射光光闸荧光激发块控制 Reflector 荧光激发块控制荧光观察时，荧光观察时，需要选择相应的荧光激发块或者激发波长、 (或者激发波长、发射波长相近的荧光激发块) 近的荧光激发块) Light path 光路设置触摸控制，可将光路切换至“ 触摸控制，可将光路切换至“Eyepiece” ” 观察筒，目镜观察筒目镜观察筒，或者将光路切换至左侧共聚焦光路“ ”，焦光路“Sideport L” 或者将光路切换至前侧“ ”相机。前侧“Frontport”相机。关机顺序:2.4 关机顺序: )关闭软件:主菜单“ ”——“ ” ，。(1)关闭软件:主菜单“File”——“Exit” 退出共聚焦软件 ZEN。主电脑操作系统、 )关闭主电脑操作系统显示器
电源。(2)关闭主电脑操作系统、显示器电源。 ) 荧光灯电源。(3)关闭荧
光灯电源。 ) 电动显微镜电源。电动显微镜电源(4)关闭电动显微镜电源。 ) 激光器:(5)关闭 Ar 激光器: 扳钮扳钮” ” 状态; 先将扳钮从“Laser run” 扳到“Standby” 状态; 钥匙钥匙逆时针从”状态; 再将钥匙逆时针从“—”旋转到“O”状态; 分钟、激光器风扇停止转动风扇停止转动后切记～等待约 8-10 分钟、激光器风扇停止转动后(切记～， ) 按到“ 按钮按到” 。将主开关按钮按到“OFF” )(6) “ ” 扫描硬件系统COMPONENTS “OFF” “ ”电脑系统SYSTEMS/PC “OFF” “ ” 主开关MAIN SWITCH “OFF” ) 灯箱充分冷却后，再放防尘罩。灯箱(7)等灯箱充分冷却后，再放防尘罩。系统长时间 )如果系统长时间( 个小时)不使用，则关闭稳压电源。(8)如果系统长时间
(超过 5 个小时)不使用，则关闭稳压电源。3 系统的维护主要注意事项如下:(1)打开稳压电源时，应等待 2 分钟(电压稳定)后，再开其它开关。激光器的开、关流程(详见“2.1、2.4 开/关机顺序”。(2)严格遵守激光器激光器 ) 油镜，或者物镜表面较脏，则需用擦镜纸(3)如果使用过油镜油镜擦镜纸擦干净物镜的前表擦镜纸面(清洁液使用无水乙醇和无水乙醚的混合液，混合比例:无水乙醇
30、。无水乙醚 70) 荧光灯。避免频繁开/关荧光灯。(4)不使用荧光时，不打开荧光灯荧光灯防尘罩。(5)必须等灯箱充分冷却后，再小心地盖上防尘罩防尘罩触摸屏控制，使用触摸屏时注意:(6)显微镜可由TFT 触摸屏 ?手指保持清洁、干燥状态，并且为了保证他人使用安全，触摸时严禁配戴有可能接触污染物或危险样品的手套; ?触摸屏已足够灵敏，不要大力按压触摸屏; ?不要旋转、插拔触摸屏。(7)刻录图像数据资料:应使用刻录光驱刻录，实验前应准备好刻录光盘。切记:为了防止计算机病毒，严禁在共聚焦电脑上使用 U 盘、硬动硬盘或切记:为了防止计算机病毒，者上网～～者上网～～～(8)未经授权，严禁自行安装任何软件～～(9)实验室温度应保持在 22??2?，湿度 40-60。(10)避免空调直接对着显微镜吹风。(11)整个实验过程应注意保持显微镜周围环境清洁。
激光共聚焦显微镜的原理与应用范围
激光共聚焦显微镜的原理与应用范围 激光扫描共聚焦显微镜是采用激光作为光源，在传统光学显微镜基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对所观察的对象进行数字图象处理的一套观察、分析和输出系统。把光学成像的分辨率提高了30%~40%，使用紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察生理信号及细胞形态的变化，成为形态学，分子生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域中新一代的研究工具。 1激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）的原理 从基本原理上讲,共聚焦显微镜是一种现代化的光学显微镜,它对普通光镜从技术上作了以下几点改进: 1．1用激光做光源因为激光的单色性非常好,光源波束的波长相同,从根本上消除了色差。1．2采用共聚焦技术在物镜的焦平面上放置了一个当中带有小孔的挡板,将焦平面以外的杂散光挡住,消除了球差;并进一步消除了色差 1．3采用点扫描技术将样品分解成二维或三维空间上的无数点,用十分细小的激光束(点光源)逐点逐行扫描成像,再通过微机组合成一个整体平面的或立体的像。而传统的光镜是在场光源下一次成像的,标本上每一点的图像都会受到相邻点的衍射光和散射光的干扰。这两种图像的清晰度和精密度是无法相比的。 1．4用计算机采集和处理光信号,并利用光电倍增管放大信号图 在共聚焦显微镜中,计算机代替了人眼或照相机进行观察、摄像,得到的图像是数字化的,可以在电脑中进行处理,再一次提高图像的清晰度。而且利用了光电倍增管,可以将很微弱的信号放大,灵敏度大大提高。由于综合利用了以上技术。可以说ＬＳＣＭ是显微镜制作技术、光电技术、计算机技术的完美结合,是现代技术发展的必然产物。 2ＬＳＣＭ在生物医学研究中的应用 目前,一台配置完备的ＬＳＣＭ在功能上已经完全能够取代以往的任何一种光学显微镜,它相当于多种制作精良的常用光学显微镜的有机组合,如倒置光学显微镜、紫外线显微镜、荧光显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜(ＰＨ)、微分干涉差显微镜(ＤＩＣ)等,因此被称为万能显微镜,通过它所得到的精细图像可使其他的显微镜图像无比逊色。
Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明
Nikon ECLIPSE Ti倒置荧光显微镜使用说明 操作步骤： 本显微镜的荧光光路与明视场（相差、DIC也属明视场）光路相对独立。当使用明视场时，无需打开荧光光源，进打开总电源即可。当使用荧光观察时，可同时打开总电源和荧光电源。 明视场观察： 1.开机：按动总电源开关“1”处接通电源，此时开关和指示灯点亮，打开显微镜底座左侧的透射照明器开关，从小到大调节照明器开关下方的亮度调节旋钮，使照明亮度适当。 2.首先将聚光器模板A放入光路，用10×物镜对样品进行对焦，调节目镜的屈光度调节环，然后换用40×物镜观察样品。 3.关机：将亮度调节旋钮旋至亮度最暗位置，关掉显微镜底座左侧的透射照明器开关，然后按动总电源开关“0”处关闭电源。 DIC微分干涉观察： 开机、关机等与明视场观察相同，区别是要使用聚光器相对应的DIC模板N1及起偏器、检偏器，将其放入光路后，再使用专用的银白色DIC物镜对焦观察。在观察过程中可旋转起偏器，达到最佳的观察效果。 相差观察： 开机、关机等与明视场观察相同，区别是要使用聚光器相对应的相差模板PH1。 荧光观察： 1.开机：先打开荧光灯电源开关，然后按住电源开关上方的荧光灯激发按钮3秒钟后松开，即可见荧光灯点亮。 2.打开荧光转盘上的荧光拨杆至“0”位置，此时荧光光路打开。旋转荧光转盘，转入所对应的滤光片位置即可进行荧光观察；在观察过程中可插入位于荧光灯源前方的减光片，以改变荧光强度，减弱对活细胞样品的损伤。 3.关机：直接关掉荧光灯电源开关即可。 注意事项： 1.短时间内频繁开关荧光灯电源，将极大的缩短荧光灯寿命。 2.荧光光源打开后即可使用，但必须使用20分钟才可以关闭；关闭30分钟以后才可以再次打开，否则会导致荧光灯损坏。 3.不要同时反方向转动显微镜左右两侧的调焦钮，否则会导致显微镜损坏。 4.粗动调焦钮达到限定位置后，如果继续向同一方向旋转会引起显微镜故障。请不要旋转过度。 5.显微镜光源在工作时会产生高温，因此小心不要接触光源以防烫伤，也不要将易燃品如纸张、布、塑料和酒精等放置于光源附近。
显微镜测量使用说明
WT-1000GM操作手册 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司
相机及操作软件介绍 上海微图仪器科技发展有限公司上海巍途光电技术有限公司专业开发显微镜数字相机CMOS系列(TCA-1.3C,TCA-1.3B/W,TCA-3.0C,TCA-5.0)及CCD 系列(TCC3.3MP、TCC-1.4HICE）广泛应用于显微镜成像、凝胶成像、化学发光成像等众多科研质检生产领域。 WT-1000GM 为通用相机操作、图像处理、图像测量软件，该软件操作方便，功能专业，性能稳定，界面友好，是您工作科研的得力助手。
相机安装及软件操作介绍 1.1 操作系统要求 本公司相机及软件支持windows XP, vista, 2000, 操作系统，但要求系统安装Directshow 9.0 components. 1.2Hardware requirement 1.2.1电脑要求配置 CPU: Intel Pentium 4－2.6G； 内存RAM: 512 MB 硬盘HDD: 10GB USB: USB2.0 interface 安装相机驱动 2.1安装相机 2.1.1. 自动安装 1．打开光盘内TCA-1.3驱动Driver文件夹，运行安装程序 。 2．出现下面窗口，选择下一步。
3．出现该窗口选择，仍然继续4．TCA-1.3已经成功安装到计算机内
5. 安装完毕右下角任务栏会提示硬件安装完成，选择设备管理器可以看到如下 位置有该相机的属性显示。 2.1. 3. 安装软件 直接运行WT-1000GM文件夹里的Sutup.exe文件就可以将软件安装到指定的位置了 1. 双击“setup.exe”
激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用
激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源，标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰；激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope，LSCM)采用点光源照射样本，在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点，该点被照射后发出的荧光被物镜搜集，并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔，分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔，焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像，这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面，避免了非焦平面上杂散光线的干扰，克服了普通显微镜图像模糊的缺点，因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图 二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统，激光光源，扫描装置和检测系统构成，整套仪器由计算机控制，各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地
进行。显微镜是LSCM的主要组件，它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式，前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 （一）细胞的三维重建 普通荧光显微镜分辨率低，显示的图像结构为多层面的图像叠加，结构不够清晰。LSCM能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描，得到一组光学切片，经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法，可作单色或双色图像处理，组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态，也可从不同的断面观察细胞内部结构，测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法，可以产生在不同照明角度形成的阴影效果，突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。（二）静态结构检测 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡 检测细胞凋亡不同时期细胞形态、细胞凋亡相关蛋白
Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 操作手册
Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜操作手册 目录: 1 系统得组成 系统组成及光路示意图 实物照片说明 2 系统得使用 2、1 开机顺序 2、2 软件得快速使用说明 2、3 显微镜得触摸屏控制 2、4 关机顺序 3 系统得维护 1 系统得组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。 系统组成及光路示意图: 电脑工作站 激光器 电动荧光显微镜扫描检测单元 实物照片说明: 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO2 培养系统控制器 激光器 电脑工作站 2 系统得使用 2、1 开机顺序 (1)打开稳压电源(绿色按钮) 等待2 分钟(电压稳定)后,再开其它开关 (2)主开关[ MAIN SWITCH ]“ON” 电脑系统[ SYSTEMS/PC ]“ON” 扫描硬件系统[ PONENTS ]“ON” (3)打开[ 电动显微镜开关] 打开[ 荧光灯开关] (注:具有5 档光强调节旋钮) (4)Ar 离子激光器主开关“ON” 顺时针旋转钥匙至“—” 预热等待约15分钟, 将激光器[ 扳钮] 由“Standby”扳至 “Laser run”状态,即可正常使用 (5)打开[ 电脑开关],进入操作系统
注:键盘上也具有[ 电脑开关] 2、2 软件得快速使用说明 (1)电脑开机进入操作系统界面后,双击桌面共聚焦软件ZEN 图标 (2)进入ZEN 界面,弹出对话框: “Start System”——初始化整个系统,用于激光扫描取图、 分析等。 “Image Processing”——不启动共聚焦扫描硬件,用于已 存图像数据得处理、分析。 (3)软件界面: 1 功能界面切换:扫描取图(Acquisition)、图像处理(Processing)、维护(Maintain) (注:Maintain仅供Zeiss专业工程师使用) 2 动作按钮; 3 工具组(多维扫描控制); 4 工具详细界面; 5 状态栏; 6 视窗切换按钮; 7 图像切换按钮;8 图像浏览/预扫描窗口;9 文档浏览/处理区域;10 视窗中图像处理模块 动作按钮: Single ——扫描单张图片、并在图像预览窗口显示。 Start ——开始扫描单张图片或一个实验流程(1组图片,如XYZ、XYT 等)。 Stop ——暂停/结束扫描。 New ——建立一个新图像扫描窗口/文档。 激光连接状况检查 眼睛观察/相机/共聚焦LSM 光路切换(ZEN软件界面右上角): Ocular ——通过观察筒用眼睛观察。(激光安全保护装置自动阻断激光、保护眼睛。) Camera ——光路切换至相机。 LSM ——共聚焦扫描成像光路。 显微镜设置: “Ocular”——> “Light Path”——> 点击物镜图标,选择物镜——> 样品聚焦。 透射光控制(Transmitted Light Control) 反射光光闸控制(Reflected Light Shutter) 荧光激发块选择(Reflector) 共聚焦LSM 扫描设置 点击“LSM”(ZEN软件界面右上角),系统切换至共聚焦扫描光路: 光路设置: Smart Setup ——自动预设光路 选取“荧光探针”、“颜色”、扫描方法, 应用“Apply”。 (注:Fastest 为最快速扫描,多条激光谱线同时扫 描。Best signal 为最佳信号扫描,多条激光谱线顺 序扫描。Best promise 为兼顾速度与信号得折
Nikon 80i荧光显微镜使用说明
Nikon 80i荧光显微镜使用说明 △荧光显微镜属贵重仪器，未经保管人员同意请勿擅自使用。 △严格按照操作步骤进行，在使用过程中如发现问题应及时向保管人员反映。 △因违反操作规程，而导致仪器损坏，根据本中心《损坏仪器赔偿制度》进行赔偿。 △使用者在使用完毕后应进行登记. 维护和保养 本仪器应定期进行维护和保养。 ●防止镜头霉变，定期除湿。 ●为防止损坏荧光灯泡，荧光光源关闭后，15分钟内不得再重新开启。 ●荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，如发现荧光强度明显降低应更换荧光灯泡。 荧光显微镜操作步骤 △显微镜系精密仪器，务请不要碰击，要仔细耐心使用。 △荧光光源关闭后，15分钟内不得再开启。 △荧光灯泡的最佳使用期限是200小时，因此每次使用时请尽量缩短时间。 1.插上电源插座，打开主机电源开关。 2. 将待检标本置于载物台上。 3. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。 4. 调节光圈及灯光强度至合适位置。 5. 调节粗调和微调使标本至最清晰。 6. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。 7.保存图象至电脑中。 8. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。 ●荧光光源操作 1.插上荧光光源电源插座，打开荧光光源电源开关。 2. 打开光栅。 3. 根据使用荧光素的不同选择不同的荧光滤光片。 4. 将待检标本置于载物台上。 5. 用10×物镜对焦点，根据使用者的眼间距调节双目镜筒的间距。 6. 调节粗调和微调使标本至最清晰。 7. 拔出活动杆，使光路通过CCD至显示器。 8. 保存图象至电脑中。 9. 使用完毕后关掉电源，如镜头上有指纹或污迹用擦镜纸将其擦除。 10. 登记使用情况。 Nikon 80i主要技术参数：放大倍数40-1000，CFI60无限远光学系统，内置滤色镜，数字成像头。明场、暗场、简单偏光、荧光/明场、荧光/暗场。波长：330-380，450-490，510-560。主电压90~250V。频率：50~60HZ。功率消耗：最大160W。周围环境温度：10~36℃。相对湿度：0~80%。污染级别：2。 应用范围：正置明场、相差及荧光，主要用于细胞及细菌等的观察及荧光摄影。
显微镜简易使用手册.
显微镜使用说明 1，显微镜开关时卤素灯电压一般应调至最低。 2，转换物镜时，应旋转物镜架，不要用手直接转物镜。 3，荧光光源汞灯由于使用寿命短,为保证尽可能的延长使用时间和安全，汞灯电源开/关间隔时间必须大于三十分钟。 4，显微镜的各光学部件应调节到位（如，DIC 插件，荧光滤片，物镜等），以免影响显微镜的正常工作。如果不到位,那么观察时 通常会看到月牙形阴影. 5，使用油镜时应使用专业用油，不要用其它介质（如香柏油），以免损伤镜头。每次使用完油镜后，需将油镜擦拭干净（物镜及 玻片）。（正置显微镜，油滴在样品上。倒置显微镜，油直接滴 在物镜上。） 6，不要用手直接触摸光学部件的表面（如物镜，荧光模块，目镜等），以免留下手指印在上面，影响观察效果。 7，在拆卸全自动显微镜的聚光镜，荧光滤片盒（倒置显微镜）等部件时，应在断电的情况下进行操作。 8，因为各款显微镜的有效工作距离/特性等各有不同，使用前应充分了解所用仪器的特性及观测范围，以免因不恰当的操作，对 显微镜及其配件造成损害。 提示：1，观测样品时（特别是金相样品），切不可将物镜撞及样品，以免将物镜镜头压碎。 2，移动显微镜时，应做到小心轻放，以免因震动而对光学部件及光路造成损害，影响显微镜的使用。（建议移动显微镜时，先将各光学部件拆 除，移位后，再重新安装。） 二一般观察方式的调节 为了观察和拍摄好图像，需要对显微镜和CCD以及CCD软件都要求进行调节。 在进行显微观察和摄影前，首先要做的就是对显微镜进行调节。调节项目包括柯勒照明、相差环调节、荧光中心调节等。其中后两项一般在安装是已经调节好，以后一般情况下就不需要再调节了。 柯勒照明调节方法如下：
激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用-17954讲解
激光扫描共聚焦显微镜的原理和应用 Tina(2007-10-23 09:40:17 一、激光扫描共聚焦显微镜的原理 传统的光学显微镜使用的是场光源，标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰；激光扫描共焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope，LSCM采用点光源照射样本，在焦平面上形成一个轮廓分明的小的光点，该点被照射后发出的荧光被物镜搜集，并沿原照射光路回送到由双色镜构成的分光器。分光器将荧光直接送到探测器。光源和探测器前方都各有一个针孔，分别称为照明针孔和探测针孔。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔，焦平面以外的点被挡在探测针孔之外不能成像，这样得到的共聚焦图像是标本的光学切面，避免了非焦平面上杂散光线的干扰，克服了普通显微镜图像模糊的缺点，因此能得到整个焦平面上清晰的共聚焦图像。 原理图
二、激光扫描共聚焦显微镜组成特点 LSCM由显微镜光学系统，激光光源，扫描装置和检测系统构成，整套仪器由计算机控制，各部件之间的操作切换都可在计算机操作平台界面中方便灵活地进行。显微镜是LSCM的主要组件，它关系到系统的成像质量。通常有倒置和正置两种形式，前者在切片、活细胞检测等生物医学应用中使用更广泛。 三、激光扫描共聚焦显微镜的应用 一）细胞的三维重建
普通荧光显微镜分辨率低，显示的图像结构为多层面的图像叠加，结构不够清晰。LSCM 能以0.1μm的步距沿轴向对细胞进行分层扫描，得到一组光学切片，经A/D转换后作为二维数组贮存。这些数组通过计算机进行不同的三维重建算法，可作单色或双色图像处理，组合成细胞真实的三维结构。旋转不同角度可观察各侧面的表面形态，也可从不同的断面观察细胞内部结构，测量细胞的长宽高、体积和断层面积等形态学参数。通过模拟荧光处理算法，可以产生在不同照明角度形成的阴影效果，突出立体感。通过角度旋转和细胞位置变化可产生三维动画效果。LSCM 的三维重建广泛用于各类细胞骨架和形态学分析、染色体分析、细胞程序化死亡的观察、细胞内细胞质和细胞器的结构变化的分析和探测等方面。 二）静态结构检测：原位鉴定细胞或组织内生物大分子、观察细胞及亚细胞形态结构 1.细胞原位检测核酸 用于细胞核定位及其形态学观察、检测细胞内DNA的复制及断裂情况以及染色体定位观察。 2.原位检测蛋白质、抗体及其他分子 原位检测蛋白质、抗体及其他分子 免疫荧光标记技术 检测荧光蛋白 3.检测细胞凋亡
荧光显微镜操作手册簿
荧光显微镜操作手册 Olympus BX51 物镜： 4 ×0.16 （无DIC） 10×0.40 20×0.75 40×1.00 oil 100×1.40 oil 荧光滤色块转盘： 1. WU 蓝 2. WIB 绿（长通） 3. WIBA 绿（带通） 4. WIG 红 5. CFP 青 6. YFP 黄 操作步骤：（注意：样品须在低倍镜下放置和取下） DIC观察：
1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 3.将起偏器、检偏器、DIC棱镜推入光路，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜应 与相应的物镜倍数相匹配 4.先选用低倍物镜（“10×”） 5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6.换到高倍镜头，观察样品 7.DIC观察时，光路选择拉杆拉到中间位置，既可观察，也可拍照 荧光观察： 1.打开明场电源开关 2.打开汞灯电源开关 3.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 4.检偏器、DIC棱镜在光路外 5.将荧光光路shutter打开（“○”为开，“●”为关），需保护样品时关闭shutter 6.光路选择拉杆推至最里边 7.根据样品的标记情况将荧光滤块转盘转到相应的位置 8.通过两组减光滤片调节激发光强度 9.从低倍镜开始观察，调焦，找到预观察视野， 10.依次换到高倍镜头，观察样品 11.拍照时光路选择拉杆完全拉出 普通明场观察： 1.打开明场电源开关（“︱”为开，“○”为关） 2.将样品置于载物台上，用样品夹夹好 3.起偏器、检偏器、DIC棱镜在光路外，荧光滤块转盘拨到“1”位置，DIC棱镜拨到 明场（BF）位置 4.先选用低倍物镜（“4×”） 5.调节透射光的强度，调节焦距，找到视野 6.依次换到高倍镜头，观察样品 7.光路选择拉杆拉到中间位置既可观察，也可拍照 关机： 1.关闭汞灯电源（注意：汞灯需使用半小时以上方可关闭，关闭半小时以后方可再次 开启） 2.将透射光调到最小，关闭明场电源开关 3.将镜头转到低倍镜，取出样品，若使用过油镜用干净的擦镜纸擦拭镜头 4.确认数据已经保存，关闭软件 5.使用光盘拷贝数据（禁止使用移动储存设备拷贝数据） 6.关闭电脑，登记使用时间、荧光数字等使用情况
激光共聚焦显微镜技术1讲解
激光共聚焦显微镜技术 The techniques and applications of Confocal Laser Scanning Microscopy 激光共聚焦显微镜(LSCM)的发展简史 1957年，Marvin Minsky提出了共聚焦显微镜技术的某些基本原理，获得了美国的专利。1978年，阿姆斯特丹大学的G.J.Brakenhoff首次展示了改善了分辨率的共焦显微镜。 1985年，Wijnaendtsvan Resandt推出了第一台对荧光标记的材料进行光切的共焦显微镜 激光共聚焦显微镜(LSCM)的发展简史 ?80年代末，各家公司都推出了商品化的共焦显微镜,英国的Bio-Rad公司的MRC系列，德国Leica公司的TCS系列，Zeiss公司的LSM系列等。 ?近二十年来，从滤片型到光谱型，人们对共焦高分辨率，采集图像快速，技术的改进及应用开发不断进行，出现了很多新的技术。如双光子，FCS,FLIM ,STED等。 共焦显微镜的优点 人眼分辨率：0.2mm 光学显微镜分辨率：0.25μm 电子显微镜分辨率：0.2nm 共焦显微镜分辨率：μm 共焦显微镜的优点 ?电子显微镜的缺陷： 1.只能观察固定样品 2.样品制备过程（固定、包埋、切片）造成的假象 ?荧光显微镜的缺陷: 1.可以观察活细胞或组织，但细胞或组织内结构高度重叠。 2.荧光具有强散射性，造成图像实际清晰度的大大下降。 3.荧光漂白很快，使荧光图像的拍照有困难。 4.如果荧光滤片选配不当，多荧光标记样品图像的采集很困难，且很难抑制光谱交叉。 共焦显微镜的优点 ?共焦显微镜与传统显微镜的区别 1.抑制图像的模糊，获得清晰的图像 激光扫描共焦显微镜技术 ?共焦显微镜与传统显微镜的区别
激光共聚焦显微镜
激光共聚焦显微镜 1．激光器： 1.1系统激光器覆盖可见光及紫外光： 1.1.1蓝光固体激光器488nm20mW； 1.1.2绿光固体激光器552nm20mW； 1.1.3红光固体激光器638nm，20mW 1.1.4紫外固体激光器405nm50mW； 1.2激光器的开闭和电压调节完全由软件控制，无需另设单根激光器的开关。并具有激光寿命保护装置。 1.3具有激光强度回馈稳定电路设计，在动态记录中激光强度不会受环境的影响而改变。 2．共聚焦扫描系统： 2.1激光扫描系统直接与共聚焦机身连接 2.2检测器数量 ①三个荧光扫描检测器+一个透射光DIC（明场/相差/微分干涉）扫描检测器； ②扫描检测器包括2个光电倍增管（PMT）和一个磷砷化镓混合型检测器HyD。*③可以升级为五个以上独立连续光谱荧光检测器。 2.3连续分光设计系统（或其它光谱分离系统） *①三个通道，一个透射光DIC通道；二个荧光通道均为可做连续全光谱检测的荧光通道； ②光谱型荧光通道可自由更换荧光通道检测的波长范围，二个荧光通道和一个透射光DIC通道可同时进行快速扫描； ③多通道荧光图像即时叠加、荧光图像与透射光DIC图像即时叠加，精确对光谱进行分析； ④荧光通道具有高精度的共聚焦针孔，具有宽波谱范围内的色差校正功能，保证在多重荧光标记的同时检测过程中每个通道扫描光切平面和厚度的一致性和荧光精确定位。 2.4光谱扫描功能 ①高速多通道光谱分析和扫描，可获得透射光谱图像； ②光谱分辨率2nm，可连续以1nm波长调节； ③光谱扫描范围：400-800nm；光谱扫描步进：1nm； ④高速棱镜分光，线性光谱拆分，可区分光谱大量重叠的染料； ⑤光谱数据来源：用户指定/用户自建/厂家预设（可调节）。 2.5扫描速度及速度调节 *①扫描视野22mm下扫描速度7幅/秒（512×512pixels）；70幅/秒（512×16pixels）； ②双向扫描速度3600线/秒；扫描速度可精确调节。 2.6共聚焦针孔1个，全自动调节型，孔径50-300微米，调节步进0.5微米。
德国Zeiss激光扫描共聚焦显微镜快速操作手册
德国Zeiss 激光扫描共聚焦显微镜 快速操作手册 制作制作：：Zeiss 光学仪器光学仪器（（上海上海））国际贸易有限公司 孙 凯 2009年6月
目录目录：： 1 系统的组成 系统组成及光路示意图 实物照片实物照片说明说明 2 系统的使用 2.1 开机顺序 2.2 软件的软件的快速快速快速使用使用使用说明说明 2.3 显微镜显微镜的的触摸屏控制 2.4 关机顺序 3 系统的维护
1 系统的组成 激光扫描共聚焦显微镜系统主要由激光扫描共聚焦显微镜系统主要由：：电动荧光显微镜电动荧光显微镜、、扫描检测单元扫描检测单元、、激光器激光器、、电脑工作站及各相关附件组成电脑工作站及各相关附件组成。。 系统系统组成及光路组成及光路组成及光路示意图示意图示意图：： 电脑工作站 激光器 扫描检测单元 电动荧光显微镜
实物照片说明实物照片说明：： 电动荧光显微镜 扫描检测单元 CO 2培养系统控制器 激光器 电脑工作站
2 系统的使用 2.1 开机顺序 （1）打开稳压电源打开稳压电源（（绿色按钮绿色按钮）） 等待2分钟（电压稳定）后，再开其它开关 （2）主开关 [ MAIN SWITCH ]“ON ” 电脑系统 [ SYSTEMS/PC ]“ON ” 扫描硬件系统 [ COMPONENTS ]“ON ” （3）打开 [ 电动显微镜开关 ] 打开 [ 荧光灯开关 ] （注：具有5档光强调节旋钮） （4）Ar 离子激光器离子激光器主开关主开关 “ON ” 顺时针旋转钥匙 至 “—” 预热预热等待约等待约15分钟分钟，， 将激光器 [ 扳钮 ] 由“Standby ”扳至 “Laser run ”状态状态，，即可正常使用 （5）打开 [ 电脑开关 ]，进入操作系统 注：键盘上也具有 [ 电脑开关 ]
倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要 第一部分观察方法步骤 1、明场观察方法步骤 2、相差观察方法步骤 3、荧光观察方法步骤 第二部分使用IPP拍摄图像流程(相差观察、荧光观察) 第三部分使用BX2-BSW拍摄图像流程(明场观察)
1、明场观察方法步骤 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” 准备工作：柯勒照明光轴中心调节 第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。 ① 聚光镜升高到最高位置 聚光镜高度升降旋钮 ② 用10X 物镜聚焦至清晰 ③ 视场光阑打至最小 视场光阑 ④ 逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像 聚光镜升降旋钮 ⑤ 调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心 聚光镜中心调节旋钮 ⑥ 逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切 视场光阑 ⑦ 稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可 视场光阑
步骤 涉及部件 I ” 载物台、标本夹 3、荧光观察方法步骤 准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯） 步骤 涉及部件 主开关拨到“I ” CD+或CD-钮
主开关拨到“I ” ND 片插槽 /孔径光阑 准备工作： 高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯） 调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。 ，待弧 载物台
观察筒 视场光阑中心调节钮 第二部分使用IPP 拍摄图像流程 1. 在桌面点击以下图标打开IPP。 2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/Digital Capture，或点击工具栏中，即出现控制CCD 拍照的对话框。
荧光显微镜 倒置荧光显微镜
致测维产品用户： 感谢您明智地选择了测维-里万光电的产品。 从您开始使用测维产品的那一刻起，测维便与您结下了不解之缘，无论何时，无论何地，您将享受测维切实和认真的服务。 测维更希望把您的要求作为我们的追求，以使测维产品的质量、性能、服务日臻完善。因此，您的任何建议和意见，我们都将予以充分的重视。 测维的信箱是：cwsh@https://www.360docs.net/doc/001523667.html, 如果您想更多地了解测维的产品，欢迎登陆测维的网站：https://www.360docs.net/doc/001523667.html,/或拨打我们的全国客服热线：400-711-6930。 手册导读 请您在使用仪器前务必仔细阅读本手册。 特别提示： 在操作前，务必把仪器左侧粗微动内侧的限位圈松开。 用途： LWD300-38LFT型倒置荧光显微镜是由倒置显微镜和落射荧光显微镜组成。倒置显微镜具有在培养瓶或培养皿内进行显微观察的特点；落射荧光显微适用于荧光显微术。仪器配有长工作距离平场消色差物镜、大视野目镜、双目观察，还配有特长或长工作距离聚光镜、同时配有相衬装置及相衬物镜，可以观察不经染色的透明活体；落射荧光显微镜采用落射光激发，荧光图象清晰。该仪器特别适用于对活体细胞和组织、流质、沉淀物等进行显微研究，是生物学，细胞学，肿瘤学，遗传学，免疫学等研究工作的理想仪器。可供科研、高校、医疗、防疫和农牧等部门使用一、规格1.目镜 2.物镜
3.总放大倍数 4.聚光镜：特长工作距离聚光镜（带相衬装置）：工作距离75mm； 5.大台面载物台：移动范围: 75mm×50mm； 6.带限位和调节松紧装置的同轴粗微动调焦系统；微动手轮格值为: 0.002mm； 7.瞳距调节范围：53mm~75mm； 8.照明系统: A.透射照明光源12V30W卤素灯（亮度可调）； B.落射荧光光源100W超高压直流汞灯； 9. 电源电压：110V（60Hz）或230V（50Hz） 10.激发滤色片组： 紫外光(UV)：激发光谱区域：330-400nm；可见荧光起始光谱：425nm. 紫光(V)：激发光谱区域：395-415nm；可见荧光起始光谱：455nm. 蓝光(B)：激发光谱区域：420-485nm；可见荧光起始光谱：515nm. 绿光(G)：激发光谱区域：460-550nm；可见荧光起始光谱：590nm. 11.防霉。
显微镜使用调节说明书
显微镜结构示意图
显微镜使用说明 您现在使用的是1600倍生物显微镜，配有三个目镜（5X、10X、16X）和三个物镜（10X、40X、100X） 1．低倍目镜和低倍物镜的使用（低倍镜容易找到目标）：（1）准备：将显微镜取出，平放于桌面上，转动粗调焦旋钮，将镜筒略升高使物镜转换器与载物台距离拉开，以便安装物镜，按任意顺序装上三个物镜（物镜转换器有一个孔上有防尘盖，装物镜时需取下），物镜需顺着螺纹方向旋到底；取下目镜筒上的防尘盖并插上一个低倍的目镜，安装完毕将显微镜置于前方略偏左侧，必要时使镜臂倾斜以便观察。再旋转物镜转换器，将低倍物镜对准载物台中央的通光孔（可听到“咔哒”声）。 （2）对光：打开光圈，转动聚光镜使其上升(其作用是把光线集中到所要观察的标本上)，双眼同时睁开，以左眼向目镜内观察，同时调节反光镜的方向，直到视野内光线明亮均匀为止。反光镜的平面镜易把其他景物映入视野，一般用凹面镜对光,光线不足时,可使用电光源（电光源的安装见下文）。 （3）放标本片：标本片朝上放到载物台上用移动尺的两个夹子夹住标本片（640倍的显微镜是用压片压住标本），调节移动尺的两个旋钮把要观察的部分移到通光孔的正中央。 （4）调节焦距：从显微镜侧面注视物镜镜头，同时旋转粗调焦旋钮，使镜筒缓慢下降，大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时，再用左眼从目镜里观察视野，左手慢慢转动粗调焦旋钮，使镜筒缓缓上升，直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰，可转动细调焦旋钮，使物像更加清晰。
如果按上述操作步骤仍看不到物像时，可能由以下原因造成： ①转动调焦旋钮太快，超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距． ②物镜没有对正，应对正后再观察。 ③标本没有放到视野内，应移动标本片寻找观察对象。 ④光线太强，尤其观察比较透明的标本片或没有染色的标本时，易出现这种现象，应将光线调暗一些后，再观察。 2．低倍物镜转高倍物镜（40倍物镜）的使用 （1）依照上述操作步骤，先用低倍镜找到清晰物像。 （2）眼睛从侧面注视物镜，用手转动物镜转换器，换高倍镜（40倍）。注意，此时不需要调节粗调焦旋钮。 （3）眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调焦旋钮，直至视野内看到清晰的物像为止。 如按上述操作仍看不到物像时，可能由下列原因造成： ①观察的部分不在视野内，应在低倍镜下寻找到后，移到视野中央，再换高倍镜观察。 ②标本片放反了，应把标本片放正之后，再按上述步骤操作。 ③焦距没调好，应仔细调节焦距。 如需要更换标本片时，应该先把镜筒升高，然后把标本片取下再换上。 3．油镜的使用（100倍的物镜称为油镜） 应先按上述步骤用低倍镜、高倍镜找到要观察的物像，然后再用油镜观察，操作如下： （1）先用10倍物镜观察标本的概况； （2）更换40倍物镜，把所要观察的部分移到视野中央； （3）把镜筒上升约厘米，再把油镜转到工作位置；
激光共聚焦显微镜原理
激光共聚焦显微镜原理 激光共聚焦扫描显微技术（Confocal laser scanning microscopy）是一种高分辨率的显微成像技术。普通的荧光光学显微镜在对较厚的标本（例如细胞）进行观察时，来自观察点邻近区域的荧光会对结构的分辨率形成较大的干扰。共聚焦显微技术的关键点在于，每次只对空间上的一个点（焦点）进行成像，再通过计算机控制的一点一点的扫描形成标本的二维或者三维图象。在此过程中，来自焦点以外的光信号不会对图像形成干扰，从而大大提高了显微图象的清晰度和细节分辨能力。 图1. 共聚焦显微镜简化原理图 图1是一般共聚焦显微镜的工作原理示意图。用于激发荧光的激光束(Laser)透过入射小孔(light source pinhole)被二向色镜(Dichroic mirror)反射，通过显微物镜(Objective lens)汇聚后入射于待观察的标本(specimen)内部焦点(focal point)处。激光照射所产生的荧光(fluorescence light)和少量反射激光一起，被物镜重新收集后送往二向色镜。其中携带图像信息的荧光由于波长比较长，直接通过二向色镜并透过出射小孔(Detection pinhole)到达光电探测器(Detector)（通常是光电倍增管（PMT）或是雪崩光电二极管（APD）），变成电信号后送入计算机。而由于二向色镜的分光作用，残余的激光则被二向色镜反射，不会被探测到。
图2. 探测针孔的作用示意图 图2解释了出射小孔所起到的作用：只有焦平面上的点所发出的光才能透过出射小孔；焦平面以外的点所发出的光线在出射小孔平面是离焦的，绝大部分无法通过中心的小孔。因此，焦平面上的观察目标点呈现亮色，而非观察点则作为背景呈现黑色，反差增加，图像清晰。在成像过程中，出射小孔的位置始终与显微物镜的焦点(focal point)是一一对应的关系（共轭conjugate）,因而被称为共聚焦（con-focal）显微技术。共聚焦显微技术是由美国科学家马文?闵斯基(Marvin Minsky)发明的；他于1957年就为该技术申请了专利。但是直到八十年代后期，由于激光研究的长足进步，才使得激光共聚焦扫描显微技术（CLSM）成为了一种成熟的技术。 图3. 激光共聚焦显微镜原理框图 当今的激光共聚焦显微镜已经发展为一种结合了激光技术，显微光学，自动控制和图像处理等多种尖端科研成果的高技术工具。是现代微观研究领域不可缺少的利器之一。Nikon秉承“信赖与创造”的一贯企业理念，正在为业界提供世界领先水平的共聚焦显微镜系统产品。
显微镜使用调节说明书样本
资料内容仅供您学习参考，如有 不当或者侵权，请联系改正或者 删除。 显微镜结构示意图 光阑调节杆 截物台 移动尺 聚光撓调节器 遞色片托架 底座 —反光镜
删除。 显微镜使用说明 您现在使用的是1600 倍生物显微镜, 配有三个目镜（ 5X、10X 、16X）和三个物镜（ 10X、 40X 、100X） 1．低倍目镜和低倍物镜的使用（低倍镜容易找到目标） : （ 1）准备: 将显微镜取出, 平放于桌面上, 转动粗调焦旋钮, 将镜筒略升高使物镜转换器与载物台距离拉开, 以便安装物镜, 按任意顺序装上三个物镜（物镜转换器有一个孔上有防尘盖, 装物镜时需取下） , 物镜需顺着螺纹方向旋到底; 取下目镜筒上的防尘盖并插上一个低倍的目镜, 安装完毕将显微镜置于前方略偏左侧, 必要时使镜臂倾斜以便观察。再旋转物镜转换器, 将低倍物镜对准载物台中央的通光孔（可听到”咔哒”
删除。 声）。 （ 2）对光: 打开光圈, 转动聚光镜使其上升（其作用是把光线集中到所要观察的标本上）,双眼同时睁开, 以左眼向目镜内观察, 同时调节反光镜的方向, 直到视野内光线明亮均匀为止。反光镜的平面镜易把其它景物映入视野, 一般用凹面镜对光,光线不足时, 可使用电光源（电光源的安装见下文）。 （ 3）放标本片: 标本片朝上放到载物台上用移动尺的两个夹子夹住标本片（ 640 倍的显微镜是用压片压住标本） , 调节移动尺的两个旋钮把要观察的部分移到通光孔的正中央。 （ 4）调节焦距: 从显微镜侧面注视物镜镜头, 同时旋转粗调焦旋钮, 使镜筒缓慢下降, 大约低倍镜头与玻片间的距离约5mm时,再用左眼从目镜里观察
LeicaTCSSP2激光共聚焦显微镜系统操作手册
Leica TCS SP2 激光共聚焦显微镜系统操作手册一、荧光显微镜Leica DMRE的使用 A：步距调节 B：电动升台按钮 C：电动降台按钮 D：微调 E：上限设置 F：下限设置 1、观察、扫描转换拉杆 2、卤素灯开关 3、透射光探测器开光横档 4、荧光光路开关 5、荧光滤镜转盘1：DAPI；2：TRITC；3：FITC；4：SCAN 6、镜头侧DIC棱镜转盘 7、与镜头相配DIC滤块 8、起偏器 9、检偏器
10、镜头侧DIC棱镜微调旋钮 11、光强调节纽 12、减光滤光片 13、孔径光阑 14、视场光阑 选择合适的镜头 Leica TCS SP2 镜头配置 镜头类型使用介质放大倍率/数值孔径编号 HC PL APO CS DRY 10X /0.4 506511 HC PL APO CS DRY 20X/ 0.7 506513 HC PL APO CS DRY 40 X 0.85/ CORR 506140 HC PL APO Ibd.BC OIL 63X /1.4 506192 Leica TCS SP2 AOBS 镜头配置 镜头类型使用介质放大倍率/数值孔径编号 HC PL FLUOTAR DRY 10X/0.3 506505 HC PL FLUOTAR DRY 20X/0.5 506503 HCX PL APO OIL 40X/1.25-0.75 506176 HC PL APO Ibd.BC OIL 63X/1.4 506192 HCX PL APO CS OIL 100X/1.40-0.70 506038 WATER HCX APO L U-V-I WA TER 63X/0.9 506148 荧光观察 荧光光路开关至“O”位， 转轮至“1.0×”位， 转换拉杆完全推进， 荧光滤块换到相应号位（1：DAPI；2：TRITC；3：FITC；4：SCAN） 图像输出扫描 荧光光路开关至“I”位， 转轮至“UV”位， 转换拉杆完全拉出， 荧光滤块换到4：SCAN） 荧光观察（以油镜观察为例） 1、样品正面朝上正确放在显微镜样品台上，点上镜油。 2、长按电动升台按钮，使镜头和样品上镜油接触，调节微调旋钮，找到样品。 3、将光路转换成荧光观察位置，找到预扫描目标，将光路转换至扫描状态。
显微镜DMS中文说明书
数码液晶生物显微镜 使用说明书
使用前须知 简介： 数码生物显微镜是显微镜、数字液晶屏、高清晰专业数码相机及大容量存储卡科学地融为一体高科技产品。数码显微镜具有视觉舒适，操作简便直观等特点。数码图像与观察同步，可方便地观察生物图像，明显降低视觉压力，减少头晕、目眩等生理反应；很适合长时间的观察操作。同时强大的图像处理技术，为您的实时拍照、存储、输出、打印提供最优化。 一、安全注意事项 1.开箱时应小心，防止镜头等附件跌落损坏。 2.避免将显微镜放置在有阳光直射、高温或高湿、多尘、以及容易受到强烈震动的地方，确 保载物台平坦、水平并足够坚固。 3.需要移动显微镜时，双手分别始终紧握显微镜体机架二侧。 4.工作时，显微镜体灯室附近会有些发热，应确保灯室周围有足够的散热空间。 5.使用本公司提供的专用电线。将本机接地，避免雷击。 6.为保证安全，更换卤素灯或保险丝前，一定要确保主开关已处于“O”（断开）状态，并切 断电源，同时等待灯泡及灯室完全冷却后进行。（指定灯泡：6V/20W 卤素灯泡）。 7.输入电压检查：显微镜背部标明的输入电压与供电电压一致，否则将会导致显微镜严重损 坏（注意双目液晶显示观察头的供电一定要用标配的12V电源）。 8.载物台上不得放置过重物体，以免栽物台变形甚至损坏。 二、维护和保养 1.本光学仪器所有镜头均经装校调整，请勿自行拆装。 2.物镜转换器和粗微动调焦机构，结构精密，请不要轻易拆装。 3.仪器应保持清洁，经常清除灰尘，清洁时应特别注意不要污染光学部件。 4.透镜的污迹如指纹、油脂可使用干净的软棉布、镜头纸或纱布蘸上无水（纯）酒精（乙 醇）或二甲苯轻轻拭去。（注意：乙醚和酒精都是易燃化学物品，应远离明火，勿将这些化学物品接近明火。尽量在通风良好的房间使用这些化学品。） 5.不要使用有机溶剂擦拭显微镜，特别是液晶屏等，如要清洁，请使用中性去除污剂。 6.使用时，如果显微镜被液体沾湿，应立即切断电源，并擦干。 7.仪器应放置在阴凉，干燥的地方，不使用显微镜时，应用防尘罩罩上。罩上前一定要等 灯室冷却下来。
显微镜使用说明
生物显微镜使用说明书 （一）明场显微观察使用方法步骤 1.接通电源，调节亮度：打开电源开关，调节亮度旋钮。 2.置入观察所需样本：把切片放到载物台上，调节载物台手轮，将标本移入光路。 3.将10×物镜转入光路对标本进行调焦：转动物镜转换器，将10×物镜转入光路；转动 粗微调手轮进行调焦。 4.调节双目瞳距与视度：调节双目镜筒的两转轴目镜筒瞳间距，使两眼视场重合；调节 屈光度调节圈使左右两眼目镜视度一致。 5.调节聚光镜孔径光栏：调节聚光镜（对焦旋钮）及孔径光栏（孔径光栏拨杆）。 6.将所需物镜转入光路对标本进行齐焦，开始观察 （二）油浸物镜的使用 先将40×物镜调焦清晰后移出光路，在标本上方光斑处滴一滴浸油，然后将100×物镜移入光路。轻轻转动物镜转换器或微微转动载物台的纵横移动手轮，同时稍微转动微动调焦手轮，以排除浸油中的气泡，否则气泡会严重影响成像效果。 ?用浸油观察完毕后，应立即用脱脂棉、镜头纸、纱布等蘸适量工业酒精与乙醚的混合 液（比例1:4）将仪器及切片上的浸油擦拭干净。 ?浸油虽然无毒，但当触及皮肤时，应用水和肥皂彻底冲洗，如进入眼睛应用清水彻底 冲洗15分钟以上。 （三）注意事项 1）观察样本时，物镜应先从低倍镜开始观察。 2）切忌不要同时用力反向旋转左右粗、微动手轮，造成调焦机构损坏。 3）变换物镜时，勿直接扳动物镜，应手持转换器的齿纹部分转动转换器。 4）瞳距因人而异，故使用前均应重新调整双目的瞳距。 5）使用完毕，应将亮度调节旋钮调到最暗，载物台调到最低，关闭电源，拔下电源插头。 若使用过浸油，则应及时将物镜和切片擦拭干净。最后将仪器用防尘罩遮盖严密。 6）如仪器停用时间较长，应将物镜、目镜从主机上取下，并放入干燥容器（如防潮缸）中并放置干燥剂。同时主机上应盖好相应的防尘罩。