菌种生化反应检查标准操作规程
菌种生化反应检查标准操作规程
依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。
范围：适用于大肠杆菌表达的重组人基因工程产品。
目的：通过生化试验鉴定所用的菌种是否为标准的大肠杆菌。
原理：枸椽酸盐利用试验原理：枸椽酸盐培养基中仅含一种氮源（铵盐）和唯一碳源（枸椽酸钠）一般细菌能利用磷酸二氢铵作为氮源，但不一定能分解枸椽酸盐而取得碳源，因此可否利用该盐，能将不同细菌鉴别。
吲哚试验原理：有些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成吲哚，吲哚本身没有颜色，不能直接观察，所以加入二甲基氨基苯甲醛试剂，使之与吲哚作用形成红色的玫瑰吲哚。
甲基红试验原理：大肠杆菌和产气杆菌在糖代谢中都能分解葡萄糖产生丙酮酸。产气杆菌能将两个分子丙酮酸脱羧生成一个分子中性乙酰甲基甲醇，故培养物中形成酸类较少，使酸碱度PH可在5.4以上，因此加入甲基红指示剂后呈桔黄色，是为甲基红试验阴性，而大肠杆菌能进一步分解丙酮酸，产生酸类较多，使培养物的酸碱度在PH4.5或更低，故甲基红指示剂呈红色，是为甲基红试验阳性。
V-P试验原理：测定细菌分解葡萄糖后能否产生乙酰甲基甲醇，产气杆菌可使丙酮酸脱羧变为中性的乙酰甲基甲醇，在碱性条件下被空气中的氧气氧化成二乙酰，后者又与培养基蛋白胨中精氨酸所含胍基起作用，生成红色化合物，称为U-P试验阳性。
内容：
1 材料、设备
1．1 材料：
1．1．1 菌种：PBV
888/DH
5α
，来源于主种子批或工作种子批。
1．1．2注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。
1．1．3 试剂
蛋白胨
氯化钠 NaCl 分析纯
葡萄糖 C
6H
12
O
6
分析纯
溴麝香草酚兰 C
27H
28
Br
2
O
5
S 分析纯
对二甲基氨基苯甲醛 C
9H
11
NO 分析纯
戊醇 C
5H
15
O 分析纯
浓盐酸 HCl 分析纯
甲基红 C
15H
15
N
3
O
2
分析纯
无水乙醇 CH
3CH
2
OH 分析纯
氢氧化钠 NaOH 分析纯氢氧化钾 KOH 分析纯α-萘酚 C10H7OH 分析纯
硫酸镁 MgSO
4?7H
2
O分析纯
磷酸氢二钾 K
2HPO
4
分析纯
磷酸二氢铵 NH
4H
2
PO
4
分析纯
枸椽酸钠 C
6H
5
Na
3
O
7
·2H
2
O 分析纯
琼脂粉分析纯
1．2 器皿
盐水瓶、中试管、胶头滴管、烧杯、量筒（100ml、500ml、1000ml）、吸管（10ml）、试剂瓶（250ml、500ml）。
1．3 仪器、设备
PH计 PHC-3C型上海大中分析仪器厂
电子秤 ES-200A型沈阳腾龙电子仪器公司
电子天平 ACS 太原
恒温培养箱 HG303-5B型湖北省黄石市医疗器械厂
水浴箱 6 Liter LKB
生物安全台Ⅱ级A型安徽蚌埠净化设备厂
1．4 其它材料
硫酸纸、牛皮纸、片带、橡皮膏、吸球（1ml及10ml）玻棒、接种环、透气栓。
2 方法
2．1 准备工作
2．1．1 工作环境：在十万级洁净室内进行，确认场地清场合格，摘下“清场合格”标志牌，挂上“使用中”标志牌。
2．1．2 器皿清洁要求
经本室洗刷间处理烤干后用二层硫酸纸、一层牛皮纸包好，用线绳系紧，经121.3℃，60分钟高压蒸汽灭菌备用。
2．1．3调试仪器设备
2．1．3．1 确认PH计运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。
2．1．3．2 确认电子秤运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。
2．1．3．3 确认电子天平运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。
2．1．3．4 确认培养箱运行状态良好，已挂有“运行”标志牌。
2．1．3．4 确认水浴箱运行状态良好。已挂有“备用”标志牌。
2．1．4溶液及培养基的配制：
2．1．4．1 1N NaOH 100ml
摘下电子秤“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌，接通电源，校零。
用电子秤称取NaOH 4克，加注射用水80ml溶解，用量筒定容至100ml，置试剂瓶中，标明溶液名称、浓度、体积、批号、配制日期，放室温待用。
2．1．4．2 1%的溴麝香草酚兰（BTB）100ml
摘下电子天平“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌，接通电源，校零。用电子天瓶称取1克溴麝香草酚兰，加1N NaOH 1.6ml，加注射用水定容至100ml。置试剂瓶中，标明溶液名称、浓度、体积、批号、配制日期，放室温待用。
2．1．4．3 0.4%的溴麝香草酚兰（BTB）100ml
用电子天平称取溴麝香草酚兰0.4克加1N NaOH 0.64ml，加注射用水至100ml装入试剂瓶中，标明名称、浓度、体积、批号、配制日期，放室温待用。
2．1．4．4 95%乙醇500ml
量取475ml无水乙醇，加注射用水定容500ml，装入试剂瓶中，标明名称、浓度、体积、批号、配制日期，放室温待用。
2．1．4．5 甲基红试剂 500ml
用电子天平称取甲基红0.1克，溶于95%乙醇300ml，然后加注射用水定容至500ml，
置试剂瓶中，标明溶液名称、浓度、体积、批号、配制日期，放室温待用。
2．1．4．6 枸氏试剂 100ml
摘下水浴箱“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌，接通电源，设定56℃，预热。用电子天平称取对二甲基氨基苯甲醛5克，加入到75ml戊醇内，置于56℃水浴中，不断摇动使其溶解，取出冷却后徐徐滴入浓盐酸25ml，滴加时随滴随摇，以免骤热。放置一夜，即成淡褐色透明液体，置250ml试剂瓶中，标明名称、浓度、体积、批号、配制日期，保存于冷暗处或冰箱内。
2．1．4．7 40%氢氧化钾溶液100ml
用电子秤称取40克KOH，充分溶于80ml注射用水，补足体积至100ml，摇匀，盛于250ml 试剂瓶中，标明溶液名称、浓度、体积、批号、配制日期、放室温待用。
2．1．4．8 6% α-萘酚酒精溶液100ml
用吸管吸取6mlα-萘酚，用无水乙醇定容至100ml，置250ml试剂瓶中，标明名称、浓度、体积、批号、配制日期，放室温待用。
2．1．4．9 75%乙醇的配制
取无水乙醇75ml，用注射用水定容至100ml，混匀，装入250ml试剂瓶中，贴标签，标明液体名称、浓度、体积、批号、日期。室温备用。
2．1．4．10 培养基的配制
2．1．4．10．1 蛋白胨水培养基（吲哚试验用）1000ml：
摘下pH计“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌。用电子秤称取蛋白胨10克，NaCl 5克，加入800ml注射用水，混匀，调PH值7.4-7.6，定容1000ml， 115.6℃，30分钟高压灭菌。
2．1．4．10．2 葡萄糖蛋白胨水培养基（甲基红和U-P试验用）1000ml
用电子秤分别称取蛋白胨5克，葡萄糖5克，磷酸氢二钾5克，加800ml注射用水，混匀，调PH7.2-7.4，定容1000ml， 115.6℃，30分钟高压灭菌。
2．1．4．10．3 枸椽酸盐培养基1000ml
用电子天平分别称取NaCl5克，MgSO
4·7H
2
O 0.2克，磷酸氢二钾1克，磷酸二氢铵1
克，枸椽酸钠2克，琼脂20克，溶于注射用水1000ml，调PH6.8-7.2，加入1% BTB指示剂10ml，摇匀，115.6℃，30分钟高压灭菌。
2．2操作步骤
2．2．1 吲哚试验
2．2．1．1 摘下生物安全台“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌。用75%酒精棉擦拭台内，接通电源，打开风机，吹30分钟。在生物安全台内，将蛋白胨水培养基用吸管分装于灭菌中试管，每管2ml。用接种环（经火焰灭菌，冷却后）取细菌接种于蛋白胨水培养基中，盖上透气栓。
2．2．1．2 于37℃恒温培养箱中培养48小时后取出，每管加2-3滴枸氏试剂，轻轻振摇，使戊醇分散于液体中，将培养物静置，待戊醇升至培养液面后，如有吲哚存在，就可以被提取在戊醇层中，反应呈玫瑰红色者为阳性，以“+”表示，仍呈黄色者为阴性以“-”表示。
2．2．2 甲基红试验
2．2．2．1 在生物安全台中将葡萄糖蛋白胨水培养基分装于灭菌中试管中，每管2ml。用接种环（火焰灭菌，冷却后）接种细菌于葡萄糖蛋白胨水培养基中，用透气栓盖好。
2．2．2．2 37℃恒温培养箱培养2-3天后，取出滴加甲基红试剂2-3滴，可立即观察，显现红色为阳性，用“+”表示，否则为阴性，用“-”表示。
2．2．3 V-P试验
2．2．3．1 在生物安全台中将葡萄糖蛋白胨水培养基用吸管分装于灭菌中试管中，每管2ml。用接种环（火焰灭菌，冷却后）取细菌，接种于该培养基中，用透气栓盖好。
2．2．3．2 37℃恒温培养箱培养2-3天取出后，在每管中加入0.4ml 4%的KOH和1ml 6% α-萘酚酒精溶液，混匀，室温下静置5-15分钟，如出现红色为阳性，以“+”表示，否则为阴性以“-”表示。
2．2．4 枸椽酸盐利用试验
2．2．4．1 将灭菌后的枸椽酸盐培养基冷却至50℃左右，在生物安全台中用吸管分装于试管中，每管5ml，倾斜放置。斜面培养基冷却后，用接种环（经火焰灭菌，冷却后）取细菌，接种于该斜面培养基中，用透气栓盖好。
2．2．4．2 37℃恒温培养箱中培养24小时，观察，有菌生长，培养颜色由绿变为深兰者为阳性，以“+”表示，否则为阴性以“-”表示。
工作场地摘下“使用中”标志牌，挂上“待处理”标志牌。
3 结果判定
3．1判定标准
吲哚、甲基红、U-P及枸椽酸盐利用四项试验，合称为IMVIC试验，鉴别大肠杆菌的结果应为“++--”。
3．2判定结果
判定结果经二人复核，填写检定记录，注明菌种名称、批号、判定日期、检定结果、工作者及复核者等。
4 清场
4．1配液清场
4．1．1称取药品之后将药品瓶盖好，放回药品柜中。
4．1．2将电子秤、电子天平和PH计切断电源后，清洁干净，放回原处，填写使用记录，摘下“运行”标志牌，挂“备用”标志牌。生物安全台，用75%酒精棉擦拭台内，继续吹10分钟后，关闭风机，切断电源，摘下“运行”标志牌，挂上“备用”标志牌，并填写使用记录。
4．1．3清洁操作台面，用专用抹布擦净。
4．1．4地面用专用拖布拖净。
4．2操作清场
4．2．1试验完毕，含细菌的中试管121.3℃，60分钟高压灭菌。
4．3 清场结束后，由车间工序负责人或质量监督员检查合格后，摘下“待处理”标志牌，挂上“清场合格”标志牌，并填写清场记录。
5 注意事项
5．1 各种培养基的标识一定要醒目，以免判定时失误。
5．2 清场时，必须将带菌的器皿先送高压灭菌处理后，再送洗刷组处理。
5．3 所有工作均应经二人复核，并及时填写工作记录。
煤炭样品的采取标准操作规程(20080828)
MTJCSOP-001 煤炭样品的采取标准操作规程 1.概述 本规程规定了煤炭样品采取的方法原理，采样器具，操作步骤等内容。 本规程适用于太兴公司各种煤样的采取。 2.依据 本规程依据GB 475-1996 《商品煤样采取方法》标准，结合质检中心的实际制定。 3.基本原理 本规程以数理统计学原理为理论基础。 3.1中心极限定理： n个子样平均值的方差比单个样的方差小n倍，中心极限定理可用下式表示： V（x）=V（x）/n 式中：V（x）—平均值的方差 V（x）—观测值之间的方差 n —观测值的数目 3.2散装矿产品取样、制样通则。 4.术语 4.1 煤样和商品煤样： 为确定某些特性而从煤中采取的具有代表性的一部分煤样。代表商品煤平均性质的煤样叫商品煤样。 4.2 子样： 采样器具操作一次或截取一次煤流全断面所采取的一份样。 4.3 总样： 从一个采样单元中取出的全部子样合并成的煤样。 4.4批： 在相同的条件下，在一定时间内生产的一个量。 4.5 采样单元： 从一批煤中采取一个总样的煤量，一批煤可以是一个或多个采样单元。 5.采样工具 5.1 采样铲 用以从煤流中和静止煤中采样。铲的长和宽均应不小于被采样煤最大粒度到2.5～3倍，对最大
粒度不大于150mm 的煤可用长3宽约300mm 3250mm 的铲。 5.2 接斗 用以在落煤流处截取子样。斗的开口尺寸应为被采样煤最大粒度的2.5～3倍。接斗的容量应能容纳输送机最大运量时煤流全断面的全部煤量。 5.3 采样桶 用以贮存所采每个子样的样品。其容量约30Kg 。 6.采样的基本原则 6.1采样单元 6.1.1本规程规定1000t 为基本采样单元。 6.1.2 运量超过1000t 或少于1000t 时，可以实际运量为一采样单元。 6.2 子样数目 6.2.1基本采样单元为1000t ，最少应采取的子样数目，按表1规定。 表1 基本采样单元最少应采取的子样数目 注：原煤、筛选煤灰分不清楚时，按灰分大于20%规定计算。 6.2.2 煤量大于1000t 的采样单元，子样数目按式（1）计算： m ＝ n 1000 M …………（1） 式中: m — 实际应采子样数目，个； n — 基本采样单元表1所规定的子样数目，个； M — 实际发运的煤量，t 。 6.2.3煤量少于1000t 时，子样数目根据表1规定的数目按比例递减，但最少不得少于表2中规定数目。
生化岗位安全操作规程实用版
YF-ED-J1127 可按资料类型定义编号 生化岗位安全操作规程实 用版 In Order To Ensure The Effective And Safe Operation Of The Department Work Or Production, Relevant Personnel Shall Follow The Procedures In Handling Business Or Operating Equipment. （示范文稿） 二零XX年XX月XX日
生化岗位安全操作规程实用版 提示：该操作规程文档适合使用于工作中为保证本部门的工作或生产能够有效、安全、稳定地运转而制定的，相关人员在办理业务或操作设备时必须遵循的程序或步骤。下载后可以对文件进行定制修改，请根据实际需要调整使用。 1 本岗位容易发生的事故为机械伤害、液碱灼伤、甲醇中毒、火灾、电气伤害、高处坠落。 2.本岗位涉及到的危化品为烧碱、甲醇： 2.1液碱危险、有害识别 中文名：氢氧化钠、片碱 英文名： sodiun hydroxide；solution 分子式：NaOH 分子量：40.04 UN编号：1824 危规号：82001
RTECS号： CAS号：1310-73-2 危险性类别：第8.2类碱性腐蚀品化学类别：无机碱 包装标志：腐蚀品 包装类别：II类包装 理化性质 性状：白色不透明固体；无色液体规格：95%；20% 溶解性： 饱和蒸气压/kPa： 相对密度（空气=1）：无资料 临界温度/℃： 燃烧热（kJ?mol-1）：无意义 临界压力/Mpa：
最小点火能/mJ：无意义 燃烧爆炸危险性 燃烧性：不燃 燃烧分解产物： 闪点/℃：无意义 聚合危害：不聚合 爆炸极限（体积分数）/％：无意义 稳定性：稳定 引燃温度/℃：无意义 禁忌物：强酸、易燃或可燃物、二氧化碳、过氧化物、水。 危险特性：与酸发生中和反应并放出热。本品具有强腐蚀性。 灭火方法：用水、砂土扑救，但须防止物品遇水产生飞溅，造成灼伤。
16SrDNA鉴定菌株的标准操作规程
16SrDNA鉴定菌株的标准操作规程 1.适用范围 本标准规定了通过特定引物对细菌的16SrDNA片段进行PCR扩增，然后对扩增片段进行序列分析比对，快速获得细菌种属信息的操作规程。 本标准适用于未知细菌的快速种属分析，以及为细菌的生化鉴定提供指导信息。 2.方法和原理 16SrDNA鉴定是指用利用细菌16SrDNA序列测序的方法对细菌进行种属鉴定。包括细菌基因组DNA提取、16SrDNA特异引物PCR扩增、扩增产物纯化、DNA测序、序列比对等步骤。是一种快速获得细菌种属信息的方法。 细菌rRNA（核糖体RNA）按沉降系数分为3种，分别为5S、16S和23S rRNA。16S rDNA是细菌染色体上编码16S rRNA相对应的DNA序列。16S rDNA由于大小适中，约1.5Kb左右，既能体现不同菌属之间的差异，又能利用测序技术较容易地得到其序列，故被细菌学家和分类学家接受。 在16S rRNA分子中，可变区序列因细菌不同而异，恒定区序列基本保守，所以可利用恒定区序列设计引物，将16S rDNA片段扩增出来，利用可变区序列的差异来对不同菌属、菌种的细菌进行分类鉴定。 16SrDNA序列的前500bp序列变化较大，包含有丰富的细菌种属的特异性信息，所以对于绝大多数菌株来说，只需要第一对引物测前500bp序列即可鉴别出细菌的菌属。针对科学论文发表或是前500bp无法鉴别的情况，需要进行16SrDNA的全序列扩增和测序，得到较为全面的16SrDNA的序列信息。 由于测序仪一次反应最多只能测出700bp的有效序列，为了结果的可靠性，通常将16SrDNA全长序列分成3部分进行测序。 3.设备和材料 3.1器材 移液器（1000μL、200μL 、100μL、10μL）；涡旋振荡器；Eppendorf MixMate；离心机；水浴锅；电泳仪；制冰机；低温冰箱；PCR仪：Veriti 96 Well Thermal
菌种管理规程
1. 目的 规范微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 2. 适用范围 适用于微生物实验用菌种管理，包括菌种的申购、传代、使用及销毁等。 3. 引用/参考文件 ChP2015 实用药品微生物检验检测技术指南 4. 职责 质量控制实验室负责菌种的申购、传代、使用、销毁等工作，QA负责监控和参与OOS调查。 5. 程序 5.1术语和定义 5.1.1 标准菌株 由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌。 5.1.2 传代菌株 用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种，3代后的传代菌株在需要时可以作为工作菌株使用。 5.1.3 工作菌株 用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 5.1.4 菌种的代 将菌种接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 5.2 菌种来源 5.2.1 标准菌株由中国药品生物制品检定所医学菌种保藏中心（CMCC）或者其他经认可的机构提供的冷冻干燥菌种。 5.2.2质量控制实验室涉及到的菌种种类、代码、保存方法及保存条件如下。
5.3.1菌种的申购 5.3.1.1 微生物室QC依据菌种的库存及菌种的使用情况，提出采购申请，申请需明确菌种的名称，标准编号以及申购数量等信息。 5.3.1.2 质量部经理对申购计划进行审批，审批后由公司的商务部按要求进行采购，采购过程执行《采购控制程序》。 5.3.1.3 菌种的采购需向法定的业务部门或者认可的机构采购。 5.3.1.4 购买菌种的同时应保留相关证明资料，说明菌种的名称、代数、数量等。 5.3.2 菌种的验收 5.3.2.1 微生物室QC负责对采购回的菌种以及相关的证明资料进行验收； 5.3.2.2 验收应包括菌种外包装的完好性、具体验收的依据为批准后的申购计划。 5.3.2.3 验收符合后签字确认并领回菌种，及时填写《菌种验收、入库记录》，并将菌种的相关证明资料贴在菌种接收登记表当页背面留存。如验收不符合则拒绝签字领用，商务部负责退货处理。 5.3.3 菌种的保存 5.3.3.1验收合格的冷冻干燥菌种，应保存在温度设定为-20℃冰箱中保存，有效期可至1年。 5.3.3.2 验收后的菌种需在验收合格接收后14天内完成转种。
生化系统操作规程
生化系统操作规程 安全操作规程 1.进入生化区的人员禁止吸烟，携带火种，易燃易爆物品。严禁无证作业。 2.外来人员一律严禁进入生产区，若有特殊任务，经公司有关领导签字同意后， 方可入内。 3.厌氧罐顶部的水封每班检查一次，当水封水柱超过20mm时，要及时排掉水 柱内的余水。 4.生化去内的盐酸罐，液碱罐，次钠罐以及输送管道每班巡检3次以上，发现 泄漏要及时汇报处理。 5.盐酸，液碱，次钠在投加之前，一定要按要求佩戴劳保用品。 6.若发现盐酸，液碱，次钠泄漏，要迅速切断泄漏源，同时及时汇报处理。不 小心溅到皮肤上上或眼睛里，要迅用大量的水清洗，然后就医。 7.厌氧发酵罐检修时，要先放空消化液，然后清洗通风，进入罐内必须戴防毒 面罩，系安全带，保险绳一端固定在罐外，安排两人以上监护，每次进罐作业时间不得超过一小时。 8.发生中毒，应立即将中毒者移至新鲜空气流通处，并立即通知医护人员救护 处理。 9.在生化区严格执行下罐，下池作业制度，按有关规定填写各种作业票证，经 过主管安全领导签字后方可进入作业，严禁无票作业，避免安全事故的发生。 10.对全车间人员进行必要的安全知识培训，使人人懂得盐酸，次氯酸钠，液碱 的性质特征，预防常识和中毒接触后的抢救措施等。 11.生化区所有污水池栏杆，发酵罐栏杆必须安全牢靠，定期进行检查，维修， 防腐。 12.定期对生化区的大型设备保养，检修；对所有运行设备加强巡检，防止安全 事故的发生。 13.对所有设备进行检修之前，必须首先断开电源，同时对所属部位挂警示牌； 严禁对运转设备进行检修，防止人身事故的发生。 14.车间每星期要对所有运转设备进行一次大检查，对发现存在安全隐患的部位， 限期及时整改。
标准菌种确认标准操作规程完整
一目的 建立标准菌种确认标准操作规程，以减少菌种污染和生长特性的改变，保证实验结果的可靠性和准确性。 二围 本规程适用于质量控制实验室所用标准储备菌株。 三容 1.1 试验菌株 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B)44102] 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC(B)26003] 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B)63501] 白色念珠菌（Candida albicans）[CMCC(F)64941] 黑曲霉（Aspergillus niger）[CMCC(F)98003] 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）[CMCC(B)10104] 生孢梭菌（Clostridium sporogenes）[CMCC(F)98001] 1.1.1 标准菌株 1.1.1.1 标准菌株应来自认可的国或国外菌种收藏机构。 1.1.1.2 标准菌株经过复活并在适宜的培养基中生长后，即为标准储备菌株。 1.1.1.3 标准储备菌株应进行纯度和特性确认。 1.1.2 工作菌株 1.1. 2.1 标准储备菌株可用于制备每两个月或定期转种的工作菌株。 1.1. 2.2 工作菌株的传代次数应严格控制，不得超过 5 代（从菌种收藏机构获得的标准菌株为第0代），以防止过度的传代增加表型变化的风险。因此必要时，应对工作菌株的纯度和特性进行确认。 1.2 菌种确认试验的主要容
1.2.1 菌种的纯度确认 1.2.1.1 纯度检测：是指通过适当的方法检测菌种是否为纯培养物。 1.2.1.2 试验容 ①菌落形态：在特定的培养基上，将待检测培养物稀释涂布或平板划线，适宜培养后，同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似；对于两种或以上形态的出发菌株，应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养，检测是否重复出现相同特征。 ②镜检特征：对数生长期的培养物革兰氏染色反应应呈现一致性；细胞形状、大小、荚膜、芽孢等特征应相似。 1.2.2 菌种的特性确认 1.2.2.1 生化试验：各种微生物具有各自的独特的酶系统，因而在代过程中所参与的物质分解和合成代的产物也不同，这些代产物又具有不同的生化特征。根据此特征，利用生物化学方法来鉴定不同的微生物的试验即为微生物的生化试验。 1.3 菌种的确定方法 用无菌接种环粘取培养物，在相应的培养基平板上划线分离单个菌落，并在适宜条件下培养。培养后观察是否具有典型的菌落形态，然后挑取单一纯菌落，进行革兰氏染色、镜检，观察其染色特性及菌形。再做生化试验或使用菌种鉴定系统进一步鉴定菌种。 1.3.1 大肠埃希菌的确认 1.3.1.1 菌落形态 1.3.1.1.1 取大肠埃希菌新鲜培养物至营养肉汤培养基中，经35℃培养18～24h后，形成菌膜，管底有粘液状沉淀，培养物有粪臭味。 1.3.1.1.2 取上述培养物接种于曙红亚甲蓝琼脂(EMB)琼脂平板和麦康凯琼脂平板上，35℃培养18～24h后，观察结果。 ①曙红亚甲蓝琼脂(EMB)平板上菌落形态呈紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑、湿润，常有金属光泽。 ②麦康凯琼脂平板上菌落形态呈鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润。 1.3.1.2 革兰染色、镜检 1.3.1. 2.1 革兰染色
02微生物实验室菌种管理规程
1、目的：规范微生物试验用菌种的管理，确保菌种的有效使用。 2、适用范围：微生物试验用菌种的管理。 3、责任者：质检科负责人、微生物试验人员、菌种管理人员 4、正文： 概念 a、标准菌株：由国内或国际菌种保藏机构保藏的，遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌株。 b、标准储备菌株：由标准菌株经一次传代得到的培养物。 c、商业派生菌株：由供应商提供的所有特性与标准菌株等效的菌株。 d、工作菌株：由标准储备菌株经传代得到的培养物。
e、代：将活的微生物接种到新鲜培养基中进行培养，并希望获取新的微生物培养物。这种操作方式，新培养物对接种培养物而言就称为一代。 菌种的采购和接收 菌种的采购 从药检所或菌种保藏中心等外单位购入菌种斜面或冻干菌种。 根据工作需要对购买国内保藏中心提供的菌种斜面提前1个月填写采购申请单，冻干菌种提前2个月申请购买，国外保藏中心提供的菌种应提前3个月申请购买。 菌种的接收 检定菌应设专人保管，管理人员应接受过专业培训，有足够的菌种保存经验。 接收菌种时，应核实菌种的名称、编号、传代代数、数量、有效期等，并调查清楚菌种的保存条件和注意事项。 接收时应填写菌种接收登记表。内容包括：菌种名称、菌种保藏中心编号、传代次数、接收日期、菌种来源等。 对新购入的冻干菌种在使用前应按要求对其进行生物形态确证试验和纯度鉴定，由于新购买的菌种斜面已由菌种提供单位做过生物形态确证试验和纯度鉴定，所以传代5代以内的菌种斜面不需要进行纯度鉴定。 对新购入的斜面菌种应在2～8℃保存，并应在1周内转接。 菌种的复苏 使用人员根据需要应向菌种管理人员领取菌种，仔细核对标签上菌名、编号，并在《菌种接收及领用登记表》上记录菌名、数量、领用人、领用日期等信息。 菌株解冻后不得重新冷冻和再次使用。 菌种复苏应在生物安全柜内操作。 常用菌种接种用培养基和培养条件表 菌种的传代 每株菌种应建立菌种使用及传代记录，斜面菌种应根据其特性决定传代时间间隔。
抓煤上煤工安全技术操作规程正式版
Guide operators to deal with the process of things, and require them to be familiar with the details of safety technology and be able to complete things after special training.抓煤上煤工安全技术操作 规程正式版
抓煤上煤工安全技术操作规程正式版 下载提示：此操作规程资料适用于指导操作人员处理某件事情的流程和主要的行动方向，并要求参加施工的人员，熟知本工种的安全技术细节和经过专门训练，合格的情况下完成列表中的每个操作事项。文档可以直接使用，也可根据实际需要修订后使用。 1 煤场 1.1 进入厂房必须将劳动保护用品穿戴齐全、规范。 1.2 现场作业区域必须保持良好的照明。 1.3 在厂房内工作时必须注意运行中的桥式抓斗起重机、装卸煤车以及煤坑、平台、走梯等设备设施，防止滑倒、碰伤、摔伤等。 1.4 天车工和皮带工在工作过程之中要相互进行监护。在配煤仓上清理杂物时必须将振动电机停下来。
2 行车（桥式抓斗起重机） 2.1 行车工作前要首先进行安全检查，在确认安全、发出警告信号（电铃）后，方可将控制器板到正常运转位置，开始工作。工作过程中，任何人禁止停留在桥架和小车上，检查人员需上车进行检查时，必须同司机取得联系，停车拉闸挂牌。 2.2 行车上不准堆放任何物品，如工具、材料、易燃品等，以防震动落下造成人身或设备事故。 2.3 行车在工作过程中禁止进行检查、擦拭、加油、清扫。 2.4 行车在抓煤移动时，抓斗必须提起，至少要高于煤堆或障碍物1.5米以
CS-1300全自动生化分析仪操作规程教学教材
CS-1300全自动生化分析仪操作规程 一、开机程序 1.1 开机前检查 ①加样系统 探针（样品针、试剂针），搅拌棒是否沾有水滴，脏污，是否弯曲，堵塞；反应槽以及各清洗槽是否脏污或堵塞。如有以上情况发生，请参照“维护指南”进行。 ②清洗液 测试前先检查清洗液，不足时添加，具体位置如下： 清洗液位置清洗液种类 W1……………………………CS-碱性清洗液 ★W2……………………………CS-ISE清洗液 ★W3……………………………CS-酸性清洗液 清洗液盒………………………CS-碱性清洗液 45号位置………………………CS-抗菌无磷清洗液 ★此清洗液为选用 注：以上所有清洗液请使用迪瑞原厂清洗液 ③废液桶 应保证废液桶有足够的空间盛装废液，当桶满时，及时倒掉并清理。 ④打印机 检查打印机是否正确地安装，打印纸是否充足。 ⑤仪器台面 检查仪器台面是否清洁，有无杂物。 ⑥供电电源 检查UPS电源开关应处再打开（ON）状态。 ⑦供水 打开自来水阀门，接通纯水机的电源，保证春水装置清洁，纯水机能正常给仪器供水且供水管路连接正确。 注：CS系列全自动生化分析仪耗水量最大为40L/h（CS-800为60L/h）, 要求纯水导电率小于1us/cm。 ⑧连接 分析仪与计算机主机间用通讯电缆正确地连接。
1.2 开机 ①打开仪器右侧下方空开（总电源开关）。 注：为保证试剂仓和样样品圈的冷藏作用，存放试剂时，总电源开关处于打球开状态。 ②打开仪器右侧上方的电源开关（分析部电源）。 ③打开电脑，进入“CS全自动生化仪”操作软件，仪器进入待机状态后，方可进行下一步操作。 1.3 开机后试剂准备 ①在软件主界面上点击“试剂信息”键，查看各试剂的剩余量。 ②更换试剂：结合当日预计测定量及时更换试剂（不同批号的试剂不能混合使用），试剂位置按屏幕显示放置，注意试剂瓶内不能有气泡。 ③试剂水平扫描：仪器可进行“自动扫描试剂水平”和“手工扫描试剂水平”两种试剂水平扫描模式。 自动扫描试剂水平：更换试剂完成后，如果“试剂信息”窗体下的“自动扫描试剂水平”单选框被选。那么仪器在盖好试剂盘盖后将自动进行试剂水平的扫描； 手工扫描试剂水平：更换试剂完成后，点击“试剂信息”窗体下的“手工扫描试剂水平”键，此时仪器进行试剂水平扫描，扫描完成后方可进行测试。 二、常规操作程序 2.1单个样本登记 在主界面点击“样本登记”选项，输入以下相应内容： ①样本编号，盘号，位置号； ②条形码号（也可以不输入条码）； ③样本类型：血清，尿液，血浆，胃液，脑脊液，胸腹水，其他； ④样本量：正常量，减量，增量，稀释； ⑤样本杯类型：试管，标准杯； ⑥选择测试项目或项目组合；输入完毕以上内容后，点击“样本登记”键登记。 ⑦登记患者信息：样本信息登记完毕后在患者信息界面登记样本号，病历号、患者类别、姓名、年龄、性别、送检医生、送检日期等患者信息。登记完毕后点击“患者登记”键，样本号自动递增为下一号，重复以上操作。 2.2批量样本登记 若多个样本测定项目相同时执行批量登记： 在“样本登记”界面点击“常规批量登记”键，输入以下内容：样本编号范围、起始样本号、样本盘号、样本位置选择、样本类型、样本量、杯类型，再选择测试的项目即可。也可按样本数量登记起始样本号和样本数进行批量登记。 注：批量登记必须先登记样本信息，再登记患者信息。 2.3常规样本测试
菌种抗生素的抗性检查标准操作规程
菌种抗生素的抗性检查标准操作规程 依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。 范围：适用于大肠杆菌表达的重组人基因工程产品。 目的：验证该菌种的抗生素抗性是否与原始菌株相符。 原理：该菌种所携带的重组质粒含有氨苄青霉素抗性基因，在含有氨苄青霉素的LB琼脂培养基上能够生长。 责任：检定人员。 内容： 1 材料 1．1 材料 1．1．1 菌种：PBV 888/DH 5α ，来源于主种子批或工作种子批。 1．1．2 注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版的要求。1．1．3 药品 氯化钠 NaCl 分析纯 琼脂粉分析纯 酵母粉 OXOID 蛋白胨 OXOID 氨苄青霉素 C 16H 19 N 3 O 4 S 分析纯 无水乙醇 CH 3CH 2 OH 分析纯 1．1．4 器皿 三角烧瓶（1L）、量筒（500ml、1000ml）、烧杯（500ml）、平皿、盐水瓶（250ml、500ml、1000ml）。 1．1．5 其它材料 线绳、牛皮纸、硫酸纸、剪刀、接种环、煤气灯、脱脂棉。 1．2 设备 恒温培养箱 HG303-5B型湖北省黄石市医疗器械厂 生物安全台Ⅱ级A型安徽蚌埠净化设备厂 扭力天平TN-100B 上海第二天平厂
2 方法 2．1 准备工作 2．1．1 生产环境：在十万级洁净间中进行。场地摘下“清场合格”标志牌，挂上“使用中”标志牌。 2．1．2 器皿的洁净要求 玻璃器皿经本室洗刷组处理后，用二层硫酸纸、一层牛皮纸包好，用线绳系紧，送高压灭菌（121.3℃，60分钟）。脱脂棉用硫酸纸、牛皮纸包好，121.3℃60分钟高压灭菌。 2．1．3．1 确认扭力天平运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。 2．1．3．2 确认恒温培养箱运行状态良好，已挂有“运行”标志牌。 2．1．3．3确认生物安全台运行状态良好，已挂有“备用”标志牌。 2．1．4 配液 2．1．4．1 LB琼脂培养基的配制（500ml） 摘下扭力天平“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌。用扭力天平准确称取酵母粉2.5克，蛋白胨5克，NaCl 5克，琼脂粉10克，倒入500ml烧杯中，加入400ml 注射用水，用玻棒搅匀溶解，定容至500ml，混匀，倒入1L三角瓶中，分别用二层硫酸纸和一层牛皮纸包瓶口，用线绳系紧，115.6℃，30分钟高压灭菌。贴上标签，标明液体名称、批号、配制日期，备用。 2．1．4．2 75%酒精1000ml 用量筒量取750ml无水乙醇，加入250ml无菌注射用水，置1000ml盐水瓶中，摇匀，标明液体名称、批号、浓度、日期，室温备用。 2．1．5 LB琼脂平板培养基的制作 摘下生物安全台“备用”标志牌，挂上“运行”标志牌，用75%酒精棉擦拭台内，接通电源。打开电机，无菌风吹30分钟，待已灭菌LB琼脂培养基500ml冷却到50℃左右，加入25mg氨苄青霉素，轻轻摇匀，倒平板，每皿20-30ml，待培养基冷却后，贴上标签，并注明名称、批号、配制日期，置37℃孵箱中孵育，判定合格后置于4℃冰箱中保存，待用。 2．3 操作步骤 2．3．1 在生物安全台中，将接种环用火焰灭菌并冷却后，用接种环取一环菌
标准菌种管理规程
标准菌种管理规程 目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确 保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 职责： QC 主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员 负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传 代、使用及销毁等。 内容： 1术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理 中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存 的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养 后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即 称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 2.标准： 2.1 检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购 买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购
买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制 代数。 2.2 检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及 每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表 1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种 的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并 储存于 2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过 5 年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养 基上，待菌生长充分以后，转移至2～8℃冰箱中保存。此法仅用于 工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同， 细菌： 1 个月；酵母菌： 2 个月；霉菌及芽胞： 3 个月。 2.3.2 传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 2.3.2.1．甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面 的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到 预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10 号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度 20%），
长春迪瑞CS型全自动生化分析仪操作规程
CS-400全自动生化分析仪操作规程 一、开机程序 开机前检查 ①加样系统：探针（样本针、试剂针）、搅拌棒是否沾有水滴、脏污；是否弯曲、堵塞；恒温槽及各清洗槽是否脏污或堵塞。如有以上情况发生，请参照“保养、维护程序”进行操作。 ②清洗液：测试前先检查清洗液，不足时添加，具体位置如下： 清洗液位置清洗液种类 W1……………………………CS-碱性清洗液 ★W2……………………………CS-ISE清洗液 ▲W3……………………………CS-碱性清洗液 浓清洗液桶……………...……CS-碱性清洗液 清洗液盒…………........….….CS-抗菌无磷清洗液 ★表示此清洗液选配ISE装置时使用。 ▲用户在使用样本针交叉污染功能时也可根据实际需要选择迪瑞其他清洗液 注：以上所有清洗液请使用迪瑞原厂清洗液。 ③废液：请将浓废液与淡废液管路分别连接到相应下水排放管路中。 ④打印机：检查打印机是否正确地安装，打印纸是否充足。 ⑤仪器台面：检查仪器台面是否清洁、有无杂物。 ⑥供电电源：检查UPS电源开关，应处在打开（ON）状态。 ⑦供水：打开自来水阀门，接通纯水机的电源，保证纯水装置清洁，纯水机能正常给仪器供水且供水管路连接正确。 ⑧连接：分析仪与计算机主机间用网线正确地连接。 开机 ①打开仪器后部总电源开关。 注：为保证试剂仓的冷藏作用，存放试剂时，总电源开关应处于打开状态。 ②打开仪器右侧分析部电源开关。 ③打开电脑，进入“CS-400全自动生化分析仪”操作软件，仪器进入待机状态后，方可进行下一步操作。测试前准备 试剂登记 试剂通道开放模式下可使用试剂名称或者试剂条形码进行手工登记，也可以将粘贴试剂条码的试剂瓶放置在试剂盘上，使用“试剂条码扫描”功能进行试剂信息的自动登记。试剂通道封闭模式下可使用试剂条码扫描方式自动登记，或者手工输入条码信息方式手工登记。
BJ-SOP-WJ013-A1菌种保存、传代、使 用、销毁标准操作规程
菌种管理制度 1、目的建立菌种保存、传代、使用、销毁标准操作规程，规范微生物学检定用菌种的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。 2、适用范围本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的购买、保存、传代、使用及销毁等。 3、定义 标准菌株是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏 管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌株制备的采用特定保存方法长期固定 保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌株或传代用菌种接种至普通琼脂斜面 培养后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发 一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 4、职责 4.1部门主管负责菌种的申购、接收、保存分发。 4.2微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 5、规程 5.1菌种的申购 部门主管根据菌种的使用情况，提出年度购买计划（包括临时检验需要），填写申购流程，经审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌株）或传代用菌种，购买时，需确定菌种的代数，以便控制传代代数。 5.2菌种的接收 菌种到达实验室后，由部门主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《标准菌株库存记录》上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，并将其暂贮存于4～8℃冰箱中，在一周内必须完成转种。
5.3菌种的保存 5.3.1工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的琼脂斜面培养基上，待菌生长充分以后，转移至4～8℃冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：每个月转种一次；酵母菌及芽胞：3~6个月转种一次；丝状真菌每年转种一次。 5.3.2传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 5.3.2.1甘油冷冻管保存法 用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度20%），即为10%甘油菌悬液，轻轻振摇，使内容物充分混合，分装于无菌小试管，在-30℃冷冻条件下保存。此甘油冷冻管为第2代（G2）。可以每隔2年转种一代。使用时，取出一支放至室温，转种增菌培养或接种至琼脂斜面复苏，挑取纯菌落传代或工作用。此种方法主要适用于需氧细菌和酵母菌的保藏（如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、乙型副伤寒沙门菌）。 5.3.2.2液体石蜡保存法 5.3.2.2.1无菌液体石蜡的制备：选用优质化学纯液体石蜡，将液体石蜡分装加塞，用牛皮纸包好，在121℃灭菌30分钟,置40℃恒温箱中蒸发水分，经无菌检查后备用。 5.3.2.2.2液体石蜡管的制备：将菌种穿刺接种于半固体高层培养基中，在适宜条件下培养结束后，在层流台下用无菌吸管吸取上述无菌液体石蜡至培养好的菌种管内，并使石蜡高出菌种表面约1cm使菌体与空气隔绝，并将试管直立，置于-20℃冷冻或2～8℃冰箱中保存。此法主要适用于霉菌、厌氧菌、放线菌、芽孢杆菌的保存（如枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌等）。 5.3.3各菌种的保存方法、条件及期限，见下表1 表1 传代用菌种保存方法、保存温度、保存期限
煤检验标准操作规程
壬 口 程 GB212-91 标 准。 1. 引用标准: 2. 技术要求: 3.测定方法： 3.1外在水分：(Wwz) 3.1.1仪器： 3.1.1.1电热恒温干燥箱；内附鼓风机。 3.1.1.2 架盘药物天平：感量0.1g 3.1.1.3 瓷盘：20X 25cm 3.1.2操作步骤： 3.1.2.1先将煤样破碎至粒度小于13mm 混匀，然后用预先干燥并称量过的瓷盘称取粒度少 于13mmi 勺煤样100g,平摊在瓷盘中，即放入预先鼓风并已加热到105~110°C 的电热恒温干燥箱中, 在一直鼓风的条件下干燥1h,取出煤样在室温条件下冷却至恒重，称量。 3.13结果计算： 外在水分(Wwz)% =m1 X 100 m 式中： W WL 外在水分含量，% m 1 —煤样干燥后减少的质量，g m —煤样的质量，g 3.1.3允许差：两个平行测定结果之差不大于 0.4%，结果保留一位小数。 3.2内在水分(Wz) 3.2.1仪器、设备 3.2.1.1 321.2 321.3 3.2.1.4 分析天平：感量0.0001g 粉碎机 电热恒温干燥箱。 干燥器：内装变色硅胶。 玻璃称量瓶：直径40mm 高25mn 并带有严密的磨口盖。 3.2.1.5 3.2.2操作步骤 3.2.2.1 先将5.1.2.1的干燥煤样粉碎，粒度应少于 0.2mm 混匀，作分析基煤样用。 3.2.2.2 用预先干燥至恒重并称量过的称量瓶称取粒度少于 0.2mm 的分析基煤样1 ± 0.1g ,
精确至0.0002g ，平摊在称量瓶中。 3.2.2.3 打开称量瓶盖，放入预先已加热到105~110°C 的电热恒温干燥箱中，干燥3h,取出, 加 盖，放入干燥器中，冷却至室温(20-30min)称量。 3.2.3 结果计算 3.2.4 3.3 rwl 内在水分(W N Z) %= — X 100 m wz ――分析基煤样的内在水分含量， %； m ――煤样干燥后减少的质量，g; ――煤样的质量，g 。 允许差：两个平行测定结果之差不大于 0.2%，结果保留1位小数。 灰分 方法提要 3.3.1 称取一定量的分析基煤样，放入高温箱形电阻炉中，以一定的速度加热到815± 10C 灰化并灼 烧 到质量恒定。以残留物的质量占煤样质量的百分数作为灰分产率。 3.3.2仪器 3.3.2.1 3.3.2.2 3.3.2.3 分析天平：感量O.OOOIg 高温箱形电阻炉 瓷灰皿：长方形，底面长 45mm 宽22mm 高14mm 干燥器：内装变色硅胶。 3.3.2.4 3.3.3操作步骤： 3.3.3.1用预先灼烧至质量恒定并称量过的灰皿，称取粒度少于0.2mm 的分析基煤样1± 0.1g ， 精确至0.0002g ，均匀地摊平在灰皿中，将灰皿送入温度不超过 300C 的高温箱形电阻炉中，关上 炉门并使炉门留有15mn 左右的缝隙。在不少于30min 的时间内将炉温缓慢升至约 500C ,并在此温 度下保持30min ，继续升至815± 10C ，并在此温度下灼烧1.5h 。 3.3.3.3 从炉中取出灰皿，放在耐热的石棉网上，在空气中冷却 5mi n,移入干燥器中冷却至 室温(20-30min )后称量。 3.3.4结果计算： m 1 .—100 m A f ——分析基煤样的灰分，% 1――灼烧后残留物的质量，g ――煤样的质量，g 允许差：两个平行测定结果之差不大于 0.20%，结果保留一位小数。 3.4挥发分 3.4.1方法提要 称取一定量的分析基煤样，放在带盖的瓷坩埚中，在 900 ± 10C 温度下，隔绝空气加热7mi n, 以减少的质量占煤样质量的百分数，减去该煤样的水分含量( W)作为挥发分产率。 灰分(A f )% 式中: 3.3. 5
迈瑞BS自动生化仪标准操作规程
BS-420全自动生化分析仪标准操作规程 一、BS-420全自动生化分析仪标准操作规程（开/关机程序） 1开机 1.1依次打开分析部主电源、分析部电源、操作部显示器电源、操作部主机电源、打 印机电源； 1.2开启操作部主机后会自动启动操作软件，在对话框中输入用户名与密码； 1.2.1若只关闭分析部电源保持试剂盘制冷，则要依次打开分析部电源、操作部显 示器电源、操作部主机电源、打印机电源； 1.2.2若使用仪器睡眠功能，则只需在对话框中输入用户名与密码，重新登陆；2分析前准备 2.1观察各压力表是否在绿色标线之内； 2.2检查蒸馏水、去离子水是否足够、废液管道有否堵塞，废液桶是否清空； 2.3检查高浓度清洗罐是否有足够高浓度清洗液； 2.4确认试剂盘的D1号位置已放置碱清洗液，D2号位置已放置酸清洗液，W号位 置已放置蒸馏水、去离子水。 2.5确认样本盘的U号位置已放置尿液稀释液（ISE专用稀释液），D1位置已放置ISE 清洗液（如选配有ISE模块），D2位置已放置酸清洗液，D3位置已放置碱清洗 液，W位置已放置足够的蒸馏水、去离子水。 2.6对于选配ISE模块的仪器，确认ISE试剂包已安装且试剂存量充足。 2.7检查样本注射器和试剂注射器是否漏液以及是否有气泡。 2.8检查样本针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.9检查试剂针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.10检查样本搅拌杆与试剂搅拌杆，确认搅拌杆表面无污物，杆无弯折。如有污物， 清洗搅拌杆。 3关机 3.1 行关机操作。依次关闭打印机电源，操作部主机电源，操作部显示器电源，分析 部电源，分析部主电源。此时需要取走试剂仓内试剂冰箱保存。 3.2如保留试剂制冷功能，则不需要关闭分析部主电源。 3.3 以新用户登陆。 3.4 行休眠状态。 3.5清理取走样本盘所有标本。 二、BS-420全自动生化分析仪标准操作规程分析参数设置程序 1 1.1
菌种生化反应检查标准操作规程
菌种生化反应检查标准操作规程 依据：《中华人民共和国药典》2005年版第三部。 范围：适用于大肠杆菌表达的重组人基因工程产品。 目的：通过生化试验鉴定所用的菌种是否为标准的大肠杆菌。 原理：枸椽酸盐利用试验原理：枸椽酸盐培养基中仅含一种氮源（铵盐）和唯一碳源（枸椽酸钠）一般细菌能利用磷酸二氢铵作为氮源，但不一定能分解枸椽酸盐而取得碳源，因此可否利用该盐，能将不同细菌鉴别。 吲哚试验原理：有些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成吲哚，吲哚本身没有颜色，不能直接观察，所以加入二甲基氨基苯甲醛试剂，使之与吲哚作用形成红色的玫瑰吲哚。 甲基红试验原理：大肠杆菌和产气杆菌在糖代谢中都能分解葡萄糖产生丙酮酸。产气杆菌能将两个分子丙酮酸脱羧生成一个分子中性乙酰甲基甲醇，故培养物中形成酸类较少，使酸碱度PH可在5.4以上，因此加入甲基红指示剂后呈桔黄色，是为甲基红试验阴性，而大肠杆菌能进一步分解丙酮酸，产生酸类较多，使培养物的酸碱度在PH4.5或更低，故甲基红指示剂呈红色，是为甲基红试验阳性。 V-P试验原理：测定细菌分解葡萄糖后能否产生乙酰甲基甲醇，产气杆菌可使丙酮酸脱羧变为中性的乙酰甲基甲醇，在碱性条件下被空气中的氧气氧化成二乙酰，后者又与培养基蛋白胨中精氨酸所含胍基起作用，生成红色化合物，称为U-P试验阳性。 内容： 1 材料、设备 1．1 材料： 1．1．1 菌种：PBV 888/DH 5α ，来源于主种子批或工作种子批。 1．1．2注射用水：符合《中华人民共和国药典》2005年版要求。
1．1．3 试剂 蛋白胨 氯化钠 NaCl 分析纯 葡萄糖 C 6H 12 O 6 分析纯 溴麝香草酚兰 C 27H 28 Br 2 O 5 S 分析纯 对二甲基氨基苯甲醛 C 9H 11 NO 分析纯 戊醇 C 5H 15 O 分析纯 浓盐酸 HCl 分析纯 甲基红 C 15H 15 N 3 O 2 分析纯 无水乙醇 CH 3CH 2 OH 分析纯 氢氧化钠 NaOH 分析纯氢氧化钾 KOH 分析纯α-萘酚 C10H7OH 分析纯 硫酸镁 MgSO 4?7H 2 O分析纯 磷酸氢二钾 K 2HPO 4 分析纯 磷酸二氢铵 NH 4H 2 PO 4 分析纯 枸椽酸钠 C 6H 5 Na 3 O 7 ·2H 2 O 分析纯 琼脂粉分析纯 1．2 器皿 盐水瓶、中试管、胶头滴管、烧杯、量筒（100ml、500ml、1000ml）、吸管（10ml）、试剂瓶（250ml、500ml）。 1．3 仪器、设备 PH计 PHC-3C型上海大中分析仪器厂 电子秤 ES-200A型沈阳腾龙电子仪器公司 电子天平 ACS 太原 恒温培养箱 HG303-5B型湖北省黄石市医疗器械厂 水浴箱 6 Liter LKB 生物安全台Ⅱ级A型安徽蚌埠净化设备厂 1．4 其它材料 硫酸纸、牛皮纸、片带、橡皮膏、吸球（1ml及10ml）玻棒、接种环、透气栓。
标准菌种管理规程
标准菌种管理规程目的：规范药品微生物学检定用菌的管理，最大限度降低变异率，确保菌种的溯源性与稳定性，从而确保微生物学检验结果的准确可靠。职责：QC主管负责菌种的申购、接受、保存、分发，微生物检验员负责菌种的确认、传代、使用及销毁。 范围：本规程适用于检定用菌种的管理，包括菌种的申购、保存、传代、使用及销毁等。 内容： 1 术语 标准菌种是指由中国药品生物制品检定所医学微生物菌种保藏管理中心提供的冷冻干燥菌。 传代用菌种是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作用菌种。 工作用菌种是指用标准菌种或传代用菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。 菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代。 2.标准： 2.1 检定菌的申购 QC主管每年根据检定菌种的使用情况（包括临时检验需要），提出购买计划，交由质量管理部部长审批后，向中检所菌种保藏中心或省（市）药检所购买冻干菌种（标准菌种）；也可以直接向省（市）药检所购
买传代用菌种，购买时，需询问与确定菌种的代数，以便传代时控制代数。 2.2 检定菌的接收 菌种到达实验室后，由QC主管接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写在《检定菌接收记录》（附表1）上，内容包括：名称、数量、编号（无编号者按检定菌种的编号原则编号）、代数、来源、接收日期、接收人等，贴好标签并储存于2-8?C直到需要使用时。储存期最长不超过5年。 2.3 检定菌的保存 2.3.1 工作用菌种的保存 工作用菌种采用斜面低温保存法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养 基上，待菌生长充分以后，转移至2~ 8C冰箱中保存。此法仅用于工作用菌种的短期保存，并应随时检查其污染杂菌和变异等情况，发现异常情况，经应灭活处理后销毁。保存时间根据菌种种类而不同，细菌：1个月；酵母菌：2个月；霉菌及芽胞：3个月。 2.3.2 传代用菌种的保存 采用甘油冷冻管保藏法或液体石蜡保存法。 2.3.2.1．甘油冷冻管保存法用无菌接种环轻轻刮取经冷冻复溶增菌后并接种至平板或琼脂斜面的菌苔，并通过接种环与试管壁之间的轻轻摩擦而使细菌充分扩散到预先装入试管中的无菌纯化水中，调整菌液浓度，使其等同于10 号比浊管，向已制备好的菌悬液中加入等体积的无菌甘油（浓度