表面活性剂在色谱分析中的应用

表面活性剂在色谱分析中的应用

摘要：本文综述了表面活性剂在色谱分析中的应用，具体介绍了在毛细管电动色谱（MECC）、胶束电动毛细管色谱中（MEKC）、胶束液相色谱（MLC）中的应用，并对表面活性剂的应用前景进行了展望。

关键词：表面活性剂；毛细管电动色谱；胶束电动毛细管色谱；胶束液相色谱

Abstract：This review surveys the application of surfactants in the chromatographic analysis,which are detail introduced in the capillary electrokinetic chromatography (MECC), micellar electrokinetic chromatography (MEKC), micellar liquid chromatography (MLC). The prospect of the applications of surfactants are discussed.

Key words：surfactant；MECC；MEKC；MLC

表面活性剂（SA）中有一类同时具有亲水基和亲油基，其结构中的一部分具有亲水性质，另一部分具有亲油性质（疏水性质），这种特殊结构决定了它与众不同的特性。表面活性剂包括阳、阴、非离子型及两性型四种基本类型以及混合与聚合型等表面活性剂（分别记为CAS、ASA、NSA、ZSA及MSA、PSA），它们在分析化学中已获得广泛应用。SA在色谱中的应用也取得显著成效，其中胶束色谱（MC）的诞生，标志着这一领域的日益成熟，并为众多的研究者们所重视，本文对这些成果予以系统总结，以期深入广泛地开展有关研究。

1.胶束色谱机理与表面活性剂的作用

自70年代末期Armstrong等[1]将SA胶束溶液作为流动相引入薄层色谱（TLC）和高效液相色谱（HPLC）以来，开辟了胶束色谱新的领域。许多分析家相继将SA或引入色谱流动相（作洗脱剂，萃取剂或离子对试剂），或用作显色剂及检测信号增敏剂，或用于浸溃及涂敷固定相等。在无机、有机、药物和生化样品等的分离与分析中获得广泛的应用。

SA的共同特性是当SA浓度大于临界胶束浓度（cmc）时，形成有序排列，即胶束状分子聚集体，在极性溶剂（如水）中形成极性端基向外而碳链在内的正相胶束（normal micelle，简称胶束）；而在非极性溶剂（如环已烷）中形成极性端基在内而碳链伸展在外的逆（反）胶束，前者为水包油型（O/W），后者为油包水型（W/O）。胶束中的SA与本体溶液中游离的SA处于动态平衡中。在cmc以上，增加SA总浓度只能增加溶液中胶束浓度而游离SA 浓度几乎保持不变。

MC较常规色谱有着独特的优越性及某些不足处：即①专属性或选择性好，一般只需调节流动相中所用SA浓度便能改变流动相的表观极性以改善分离效果；②应用范围广，MC 既可分离亲水性物质，又可分离亲脂性物质或两亲性物质，还能同时分离亲水、亲脂性物质。特别是逆胶束色谱更扩大了应用对象，且分离效果好，在反相（RP）色谱中尤显示其优越性；③所用SA的价廉，且一般无毒，不挥发不燃烧，使用安全；④适用于各种形式的色谱，如纸色谱（PC）、TLC、HPLC、气相色谱（GC），毛细管区域电泳（CPZ，相应称胶束电泳毛细管色谱MECC）及凝胶过滤色谱等；⑤检测灵敏度高，胶束流动相及固定相可增加检

测信号强度及其稳定性，特别是荧光与磷光信号。所建立的室温磷光（RTP）-HPLC分析法检测下限低、线性范围宽；⑥有利于梯度洗脱，改善操作条件，增大SA浓度主要使胶束浓度增大（而游离单体浓度不变），能实现梯度洗脱并降低损耗，缩短分析时间；⑦不足处仍是MC不适于色谱制备分离，且有时柱效较常规色谱低。

胶束体系较常用的单纯或混合有机溶剂体系有很大区别，可与溶质发生下列作用：①静电相互作用（electrostatic interaction），即离子型SA形成的荷电胶束能吸引相反电荷的溶质于其表面；②憎水相互作用（hydrophobic interaction），非极性及不易极化的物质或通过憎水作用分配于疏水内蕊；③静电/憎水双重作用，兼具亲水亲脂基团的两亲物质（如氨基酸等）可通过憎水/静电双重作用分配于胶束的SA定向分子之间形成“栅栏”结构，非极性碳氢链插入胶束内部，而极性端基混于SA极基之间,通过偶极子或氢健作用联系起来；④亲核作用，某些含氧SA与溶质分子可形成氢键。此外尚有空阻作用等。

有关MC机理研究正在不断深入。Armstrong等研究MLC中溶质分配行为时建立了固定相S，胶束相（拟似相或拟均相）M，与水相W的三相模型（图1），给出如下分配公式：V s/(V e-V m)=V(K MH-1)c m/K SW+1/K SW,并能计算溶质各分配系数K SW、K MW、K SM，奠定了MC 理论基础。Love等基于胶束效应及三相模型导出有关胶束流动相容量因子的计算公式，并算出平衡常数K MW；更重要的是倘若平衡常数可用独立的方法得到，便可由此准确地预期色谱容量因子。这意味着经过色谱测量可能准地预计色谱保留行为。唯混合流动相目标尚未能实现。Armstrong还依据七种染料溶质的色谱行为评价了它们与胶束的作用，并分为结合、非结合及反结合三种类型，指出胶束自身及环境的较小变化能引起溶质胶束相互作用较显著变化。Yarmchuk等发现溶质保留的递减顺序随SA浓度增大而颠倒的原因，乃是两种平衡竞争的结果所致，其容量因子的对数与SA浓度的对数成线性递减关系。对于可离子化的物种即有机弱酸、弱碱的胶束色谱机制还提出了相差分配模型。Pramaura研究发现，溶质保留对胶束浓度、缔合常数与分配系数有依赖关系。极性溶质还受到SA吸附量的影响。姬尚强依据疏水理论研究结果指出非极性分子滞留主要取决于流动相所施加的疏水作用，即体系熵值增加而非固定相则对溶质分子产生强烈的吸引。Tang以NSA为洗脱剂考察两性物质的反相色谱行为，指出SA浓度增加降低了表面张力，因而减小了保留时间。研究还发现胶束溶液能减小电位检测的基线电流漂移。Landy等考察了逆胶束LC的快速洗提能力。Kim将PV A柱MLC用于分析血清中核苦酸及碱基时考察了pH值、温度、胶束浓度的影响，提出了有关作用机理。

荷电SA已广泛用作流动相，改善荷电溶质的分配特性。离子交换模型（保留机制）认为，SA疏水部分吸附于非极性键合柱上，使柱行为象一离子交换器或称该机制为“溶剂再生（动态的）离子交换色谱”并得到支持。还对离子对模型与憎溶进行了理论解释，认为流动相中荷电SA先与相反荷电溶质结合在极性溶剂中形成不带电的离子对，然后吸附在非极性固定相上。离子相互作用模型认为，SA的亲脂部分吸附在固定相中为第一层，反电荷离子占第二层，即形成一双电层结构，在SA与溶质间建立起一动态平衡，这可以解释某些现象。与此同时，还提出了一个含有4个参数的热力学平衡的亲电SA色谱行为的定量离子作用模型，对非荷电SA可予以简化。

MLC不足处是柱效降低。Dorsey考察了其原因并提出解决办法，认为固定相不易被胶束水溶液相所润湿而导致低效传质，这点已被Foley所证实。他发现低浓度有机溶剂改性剂可修饰改良固定相表面，为高效传质提供了润湿的固定相。升高温度能克服胶束流动相高粘度的缺点而改善了峰形。实验表明，含3-6%丙醇的胶束流动相在40℃柱温下柱效接近常规有机溶剂。改性剂以正丙醇最佳，其他如甲醇、乙醇、乙腈等对胶束流动相增加效率甚少。实际上3%（V/V）丙醇改性剂使C18固定相90%以上的表面被覆盖，同浓度的甲醇改性剂则表面覆盖率仅50%；疏水表面以中等极性溶剂覆盖（使固相溶剂化），可起到相转移催化剂作用，有利于溶剂的胶束/固相传质转移，提高色谱效率。仅用SDS则本身将被吸附于固定相上使之不易溶剂化，因而柱效降低。Hinze对NSA作MLC流动相进行了评价，证实了MLC效率降低系因固定相低效传质所致，发现NSA比离子型SA被固定相吸附更显著,MLC 效率降低与固定相吸附SA量有关，似存一线性关系。Yarmchuk根据溶质在固定相的吸附/脱附动态平衡及溶质相对流动相胶束的进/出平衡，建立了MC传质模型以解释低效的原因，指出为提高传质效率应升高温度，降低线速率与胶束浓度。Armstrong研究了胶束对分子扩散的影响，指出流动相的传质影响会被其他因素所掩盖，所以减少流动相胶束浓度以提高色

谱效率未必一定有效。

2.表面活性剂在毛细管电动色谱（MECC）中的应用

2.1 MECC的理论研究

十年来，最受分析化学界瞩目的发展之一，是高效毛细管电泳（HPCE）的兴起。HPCE 以其分离效率高、样品用量少、分析时间短、运行成本低等优点，获得了越来越多的生化学家和分析化学家的研究和应用，并向成熟的高效液相色谱（HPLC）技术提出了挑战。在以往的概念和应用中，电泳技术只用来分离离子化合物。1984年，Terabe等提出了HPCE的“假固定相”概念，他们将阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）加入电解质溶液中，分离了中性分子。他们的工作被称为电泳发展中的“里程碑”。自此，各种不同的表面活性剂，包括阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂和非离子表面活性剂，都被陆续用于电泳分离并获得成功。表面活性剂的应用大大提高了电泳分离氨基酸及其衍生物、肽、蛋白质、核酸及其组份、药物等生化物质的能力，同时为无机离子分析另辟新径，并在HPCE中树起一帜，成为被称为毛细管电动色谱（MECC）的重要一支。

一般认为，烷基链碳数不足8的表便活性剂不能形成胶束，而MECC终表面活性剂的浓度必须大于它的临界胶束浓度。在MECC中采用最多的是阴离子表面活性剂，SDS是最常用的阴离子表面活性剂。在MECC中，被分析物质在水相和胶束相中进行分配，溶质在水相中的迁移受电渗流的支配，而在胶束相中的迁移是电渗流和胶束电迁移共同作用的结果，不同物质根据其电迁移率及分配系数的不同而被分离。近年来，有关MECC的理论研究不断深入。Burton等[2]评估过两种阴离子表面活性剂及两种阳离子表面活性剂对一些芳香化合物的分离的影响。Khaledi等[3]人描述了酸性及碱性化合物在MECC中的各种模式，讨论了迁移时间，电迁移率，pH值和表面活性剂浓度之间的关系。

2.2 阴离子表面活性剂的应用

2.2.1 SDS-MECC的改良新技术

SDS作为MECC中最常见的阴离子表面活性剂，已成功地应用于许多化合物尤其是生化分子的分离。随着研究的深入，人们对SDS-MECC进行了许多改进尝试，以满足更高要求的分离的需要。以下是对近年来发展的一些改良技术的简介：

2.2.1.1 环糊精的应用

Tarebe等[4]首次提出用环糊精（CD）作为MECC的添加剂，CD可以喝SDS同时使用，亦可完全取代SDS。被分离组分在水相、胶束相和CD的洞环中不同的迁移速率，其迁移时间取决于其迁移速率及其在不同相之间的分配情况。CD-MECC已经用于许多强疏水性化合物的分离。

2.2.1.2 胆汁盐类的应用

胆汁盐是最常用的生化表面活性剂之一。以Tarabe为首的研究小组[5]首先将它应用于手性生化分子的分离。Nishi[6]和Cole[7]比较了胆汁盐类与SDS在MECC分离中的不同效应，提出胆汁盐较SDS可更好地分离非极性化合物，因为更多的有机溶剂可加入胆汁盐溶液中而不影响分离效率。常用的胆汁盐类有牛磺脱氢胆酸钠等。

2.2.1.3 生化分子旋光异构体的分离

由于不同旋光异构体化合物的药理作用可能截然不同，生化学家和药物学家对旋光异构体的分离极为重视。采用α、β或γ环糊精、胆汁盐或金属离子-手性氨基酸络合物，可以实现许多氨基酸衍生物。药物的旋光异构体的分离。其中，环糊精或胆汁盐与被分析的対映体形成相应的络合物，由于络合物的空间结构。稳定常数和在胶束中的分配等的不同导致了迁移率的不同，因而使分离成为可能。金属离子如Cu与手性氨基酸可同时加入SDS溶液中以分离旋光异构体。其分离机理为络合基交换，被分离物质（通常是络合基）取代加入的手性氨基酸，与Cu中形成不同的络合物而被分离。Deyl等[8]在他们的综述中讨论了牛磺酸脱氧胆酸钠和N-十二烷基-L-缬氨酸钠在分离旋光异构体分离的影响。Snopek[9]在电迁移法分离旋光异构体化合物的综述中，评价了MECC技术的应用。

2.2.1.4 有机溶剂的应用

实验表明，在MECC体系中加入有机溶剂如甲醇可极大地影响分析的迁移时间和分离效率，从而提高选择性。Bushey和Jorgenson[10]研究了甲醇对一些胺类化合物的SDS分离的影响。

2.2.1.5 其它添加剂的应用

曾成功地用于HPLC中的添加剂，相继被试验用于MECC中。Wallingford等[11]认为,由于硼酸的加入，使儿茶酚和儿茶酚胺与硼形成络合物，从而提高了电化学检测灵敏度和选择性。Kajiwara[12]利用Ca、Zn等能够与一些蛋白质形成络合物的特点，有效地分离了这些蛋白质。Terabe的研究小组将尿素与SDS共用，更有效地分离了疏水性化合物。

2.3 阳离子表面活性剂及非离子表面活性剂的应用

尽管阴离子表面活性剂已成功地解决了许多分离难题，但研究人员仍在开辟其它种类的表面活性剂在MECC中的应用途径。常规的HPCE中，电渗流流向电场负极即检测器端。小分子阴离子包括无机阴离子和有机酸阴离子受电迁移力的作用欲迅速移向电场正极。其电迁移方向与电渗流方向相反。因此，这些小分子阴离子需要很长的时间才能被电渗流带往电场负极，或者根本不往负极移动，常规HPCE很难分析这些阴离子。研究人员发现，在电解液中加入阳离子表面活性剂如长链烷基胺盐可以有效地减小电渗流甚至使电渗流改向。他们认为是阳离子表面活性剂屏蔽了毛细管内表面的负电荷而引起电渗流的变化。在负高压下，置检测器于电场正极端（地端），这样，小分子阴离子的电迁移也电渗流方向一致，可大大缩短其迁移时间。Millipore Waters公司的HPCE研究小组据此结合了间接分光光度检测法，提出了一套分析方法，并使其添加于电解液中的电渗流改性剂Nice-Pak OFM Anion BT 成为专利产品。阳离子表面活性剂对电渗流的影响与烷基碳数及浓度有关。最近，Kaneta 等[13]专门研究了阳离子在阳离子表面活性剂中的迁移行为，从理论上进行了探讨。据称，有关阳离子表面活性剂的其它研究至今仍然极少。除了长链烷基胺盐外，被采用的还有含氟阳离子表面活性剂。Muijselaar等[14]认为，在分离蛋白质时，这种表面活性剂可以减少蛋白质在毛细管内壁的吸附。

非离子表面活性剂的应用尚不太多。非离子表面活性剂在HPCE中亦起着改善电渗流

的作用。其优越性在于加入非离子性表面活性剂并不增加电解液的电导，因而不影响电泳电流。Swedberg等[15]使用辛基苷为添加剂，分离了一些肽和抗抑制剂。

2.4 两性离子表面活性剂的应用

两性离子表面活性剂（简写为ZS）是指分子结构中同时含有阳离子亲水基团和阴离子亲水基团的表面活性剂。有关这类表面活性剂的报道始见于1937年的美国专利，1940 年美国杜邦公司首次报道了甜菜碱型ZS 的研制，1948 年德国的Adolf 等报道了氨基酸类ZS抗电解质的性能及其在外科杀菌等方面的应用[16]。由于ZS分子具有与众不同的结构和性质，所以除了将其作为一般表面活性剂应用外，还在许多领域有着重要的应用，如在分析检测中的应用。

近年来，ZS 被大量地用于色谱分离技术中。起初作为固定相，即把ZS以半胶束的形式吸附到用十八烷基硅（ODS）填充的分离柱中，其机理可用二元双电层理论（EDL）和瞬时离子对（TIPs）理论来解释。对于一个用电解质洗提剂处理过的ZS固定相，会形成一个EDL。以磺基甜菜碱为例，洗提剂中的阳离子在ZS带负电荷的磺酸基周围形成二元EDL，而其中的阴离子则在ZS带正电的季铵盐周围形成二元EDL，且磺基在分子末端，离ODS 的表面最远。在这种EDL 里，阴离子和阳离子以等摩尔比存在，当把样品注射到二元双电层的固定相中，样品中的阳离子将不会停留，因为它们将受到位于二元双电层上半部分阳离子层的排斥作用。相反，被检测的阴离子将进入二元双电层中而停留，这样阴离子就能得到分离。此现象也可进一步用离子对的概念来解释，此理论由Bjerrum 在1926 年首先提出，当时是表述电解质溶液中阴、阳离子的相互作用。现有人可将其用来解释双电层中离子的相互作用，即样品中的阴离子能进入阳离子- EDL的外层中，促成中性离子对的形成，但同时也受到阴离子- EDL的斥力，这样趋向与阳离子- EDL 形成离子对的阴离子有较长的停留时间，而那些不易形成离子对的离子将有较短的停留时间而先流出。形成离子对的平衡常数K可用来估计样品中阳离子的停留时间。Hu[17]等人的研究结果表明，用稀释的电解质作洗提剂，用甜菜碱型ZS作固定相能达到很好的分离阴离子的效果。若增大ZS 两荷电基团之间的烷基链长度，使两荷电基之间的距离增大，那么用这类ZS作固定相，由于极性离子的结合度要小一些，所以相对于用一般的作固定相的ZS 分离速度要快，并且对极性离子的选择性高、分离效果好。此种方法已大量应用于海水中I-的分离测定。

对于一般的ZS，若以水作流动相，既能分离阳离子，又能分离阴离子，但如果以电解质作流动相，不同的表面活性剂可分离电性相反的离子。如果用C12H25N+(CH3)2 (CH2)3SO3-作固定相，以Na2SO4作流动相，只可分离阴离子，而不能分离阳离子；若用十二烷基胆碱磷脂(C17H38NO4P) 作固定相，以KSCN作流动相，则只可分离阳离子。若以四硼酸钠作洗提离子，检测离子的停留时间可通过改变洗提离子的浓度来控制，此法灵敏度高，已被应用于雪和雨水中阴离子的检测。

随着色谱技术在生物领域中的应用，甜菜碱型ZS又被作为流动相使用，即把ZS溶解于电解质溶液中，此流动相能快速洗提含蛋白质的生物样品。对生物样品来说，不能直接注入色谱柱中，因其中所含的Cl-将引起其他分析离子峰的重叠，蛋白质也将吸附在固定相上，

从而缩短分离柱的使用寿命。以前都是采用预处理的办法将这两种物质除去，但预处理过程耗时，使体系不稳定，甚至有时由于氧化或还原改变其他物质的性质，且预处理过程所用的物质将污染体系，增加分析误差。而用ZS作流动相能克服上述缺点，在此流动相中的ZS 主要有两方面的作用：①它能保持固定相中的ZS数量恒定，从而增加被分析离子停留时间的稳定性；②两性胶束能通过除去蛋白质中的洗提剂而达到清洗分离柱的效果，延长了分离柱的使用寿命。此法已成功应用于尿液和血清样中许多阴离子的检测。

3.表面活性剂在胶束电动毛细管色谱中（MEKC）的应用

自从1984 年胶束电动毛细管色谱（MEKC,micellar electrokinetic chromatography）问世以来，它便以其具有高分辨率和可以同时分离离子化合物与中性化合物的优点，成为毛细管电泳（CE,capillaryelectrophoresis）家族中十分重要的一员。在MEKC中，离子型表面活性剂在毛细管内的溶液中形成带电的胶束，能进入胶束的待分离物质在随毛细管内溶液流动的过程中会在胶束的非极性内核与胶束外部的极性溶液间进行分配,从而起到了层析的效果。此过程中形成的胶束被称作伪固定相，其作用类似于层析中的固定相。MEKC能将不同的电中性物质分开，因为与普通的区带毛细管电泳（CZE,capillary zone electrophoresis）相比，决定电中性物质分离效果的是层析作用。同时，因为待分离物质所带电荷不同，受电场力牵引的速度就不同，因而待分离物在电泳和类似层析两个因素同时作用下，会达到更好的分离效果。这就是MEKC具有高分辨率的原因。

在MEKC中,表面活性剂是通过形成带电胶束而起作用的，胶束是影响分离效果的关键因素，表面活性剂的浓度、种类、pH值和无机离子浓度等对胶束的形成会起作用的因素都会对分离效果有影响。如今，被用作MEKC的表面活性剂种类很多，除最常用的十二烷基磺酸钠(SDS) 以外，非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂的混合体系也被成功的应用。尤其是当离子型表面活性剂的亲水基与待分离物之间有很强的静电相互作用时，非离子型表面活性剂的加入会降低混合型胶束表面的电荷，从而有效地避免待分离物与胶束同时迁移。[18]高分子表面活性剂是一类可以形成单分子胶束的表面活性剂，一些高分子表面活性剂也被成功的应用于MEKC。不同的表面活性剂之所以会对MEKC有不同的影响，从根本上讲是由表面活性剂的结构决定的。ZS 在MEKC中一般作为调节剂或在混合胶束中应用,ZS与其他类表面活性剂相比,选择性差异较大。Greve[19]采用一种带有胺基和磺酸基的ZS 在其cmc附近使多种小肽得到很好分离。Nass Q等[20]把ZS同硫酸和阴离子表面活性剂混合作缓冲剂,通过提高电渗流和产生一个负的胶束电泳流的方法,达到延长迁移时间的效果,此法已成功地用于各种非法毒品的分析检测中,其不仅能很好地分离主要成分鸦片,对于海洛因中的一些中性和酸性的掺杂物质也能在酸性条件下很好地分离出来。

MEKC主要用作小分子化合物的分离与分析，例如，手性药物的分离，氨基酸和相关多肽的分离，复杂混合物的分离等。MEKC与高压液相色谱(HPLC)相似，峰面积与溶质浓度成正比，因此可以将MEKC用来定量分析某些物质。Sano等就是通过MEKC中峰面积的比例测定磷酸化和非磷酸化的某蛋白激酶的相对含量，最终建立了可以高通量筛选某蛋白激酶抑制剂的平台。因为MEKC不仅是比较准确的测量方法，而且快速简便。

在MEKC出现之前,就有将表面活性剂加入到电泳介质(凝胶)中进行电泳的试验研究了。普通的凝胶电泳、等电点聚焦电泳和SDS电泳是用来分离和分析大分子物质的常用方法。疏水性较强的蛋白不易溶于极性溶剂,因此无法直接利用电泳进行分离。一些研究人员在凝胶中加入离子型表面活性剂，使其形成胶束，从而增大疏水性蛋白（如膜蛋白）的溶解性，使电泳得以进行。与MEKC所不同的是，一般电泳多用来分离生物大分子物质，主要是易变性的蛋白质，因此应选用性质温和的表面活性剂表面活性剂还应同时加在凝胶和电泳缓冲液中。

微乳状液是由不相混溶的油、水和表面活性剂自发形成的外观均匀、透明、稳定的液体。水包油型（O/W) 的微乳状液可用作CE 的电泳溶液。与MEKC相似，此时的微乳可看作伪固定相。这样的CE 称作微乳电动色谱（MEEKC, microemulsion electrokinetic chromatography)。

4.表面活性剂在胶束液相色谱（MLC）中的应用

与MEKC相似，将表面活性剂加入HPLC的流动相（有机流动相）中，形成反胶束，用带有反胶束的流动相作为洗脱液的HPLC被称作胶束液相色谱（MLC，micellar liquid chromatography）。胶束的存在提高了HPLC的分辨率，同时调整了溶质离子的保留时间，因此MLC可以用来分析含有更多组分的药物分子的混合物。Gonzalo-Lumbreras 等通过MLC成功地检测分析了存在于尿液中的各种甾体类激素的合成代谢物和分解代谢物。除此之外，MLC可以用来直接测定血样中小分子药物的含量，而不需血样前处理工作。因为反胶束的存在可以将血液中的水溶性蛋白包在其极性核内，而走在HPLC的最前端，从而被除去。Elisa[21]等通过直接进样血样并用MLC的方法实现了对几种巴比妥酸盐的同时检测。

除了用于药物分析外，Molero-Monfort等认为：因为药物被细胞主动转运的难易主要由药物本身的物化性质决定，而保留时间正是药物物化性质的综合体现，所以通过对药物MLC 保留时间的比较测定可以预测出某种药物是否易于被生物细胞吸收。Molero-Monfort 的独到见解为拓展MLC 的应用开辟了新思路。

5.展望

表面活性剂在生物分离领域中占有极其重要的位置，它们的应用具有广阔的发展前景。新型分离技术还需进一步完善和延伸，进而开发出更新的分离技术。对原有技术的完善和延伸需要设计开发新型表面活性剂，并将其用于现有的分离方法中。对表面活性剂结构、性质与功能关系的研究有助于寻找更适合某一分离方法的表面活性剂。表面活性剂形成胶束或反胶束受环境影响比较大，除了表面活性剂本身需改进外，还应研究助表面活性剂、无机盐和溶剂对分离方法的影响，以完善分离方法，提高分离效率。

表面活性剂形成胶束或反胶束，当其与层析或电泳方法相结合时,相当于将两种方法结合使用，从而改善分离效果。可尝试将各种分离机理不同或相似的方法相结合，从而创造出新的分离方法。CE和HPLC是两种精确度较高且重复性较好的分离方法，它们与表面活性剂的结合可以完善药物分析方法，扩充药物分析范围。

在现有的使用表面活性剂的分离方法的基础，随着新型表面活性剂的研制开发，会有更

多的新型生物分离技术的发明和应用，势必会对生物分离领域注入新的活力。

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