第二章 蛋白质与非蛋白含氮化合物检验
一、概述
二、常用体液蛋白质与非蛋白含氮化合
物检测项目
三、体液蛋白质与非蛋白含氮化合物检
测的临床应用
第一节概述一、血浆蛋白质
1.直接在血液中发挥作用
?在血浆中运载弱水溶性物质维持血浆胶体渗透压
组成血液pH缓冲系统
?参与凝血与纤维蛋白溶解?血浆固有酶在血浆发挥作用2.需要时进入组织发挥作用?对组织蛋白起修补作用?组成体液免疫防御系统?抑制组织蛋白酶
?参与代谢调控作用的激素
血浆蛋白质功能
血浆蛋白质的功能分类
运输载体
?血浆脂蛋白(CM、VLDL、LDL、HDL等)?白蛋白
?转铁蛋白
?结合珠蛋白
?血色素结合蛋白
?铜蓝蛋白
?视黄醇结合蛋白
?甲状腺素结合球蛋白
?皮质素结合球蛋白
?类固醇激素结合球蛋白
血浆蛋白质的功能分类
凝血与纤溶蛋白：纤维蛋白原，凝血酶原，凝血因子
Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ、ⅩⅢ，前激
肽释放酶、HMW激肽原，
抗凝血酶Ⅲ,纤维蛋白溶酶原等
免疫球蛋白和补体蛋白：IgG、A 、M、D、E
C1q、C1r、C1s、C2、C3、C4、C5、C6、
7、C8、C9、B因子、D因子、备解素等
蛋白酶抑制物：α1-抗胰蛋白酶、α1-抗糜蛋白酶
α2-巨球蛋白等6种以上
血浆酶：卵磷脂胆固醇酰基转移酶、假性胆碱酯酶等蛋白类激素：胰岛素、胰高血糖素、生长激素等
血浆蛋白质的功能分类
血浆蛋白质的电泳分类
醋纤膜电泳或琼脂糖电泳：
白蛋白
α
1
球蛋白
α
2
球蛋白
β球蛋白
γ球蛋白
分辨率高时：可有β
1和β
2
α
2
中也可有两条采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，
在适当条件下可以分出30多个区带
各电泳区带的主要血浆蛋白质前白蛋白甲状腺素转运蛋白0.2~0.4g/L
白蛋白白蛋白35~55
α
1
-球蛋白α
1
-抗胰蛋白酶0.9~2.0
α
1
-酸性糖蛋白0.5~1.5
甲胎蛋白3×10-5
高密度脂蛋白 1.7~3.25
α
2
-球蛋白结合珠蛋白0.3~2.0
α
2
-巨球蛋白 1.25~4.1
铜蓝蛋白0.2~0.5
β-球蛋白转铁蛋白 2.0~3.5
低密度脂蛋白0.6~1.55
C40.1~0.4
β
2
-微球蛋白0.001~0.002
纤维蛋白原 2.0~4.0
C3 0.7~1.5
γ-球蛋白IgA0.7~4.0
IgG7.0~16
IgM0.4~2.3
C-反应蛋白0.008
（一）前白蛋白（prealbumin,PA）
?即甲状腺素转运蛋白(transthyretin，TTR)
?电泳显示在白蛋白前方故名PA，
?肝脏合成，55kD，半寿期仅2.5天。
?50％～70％与视黄醇结合蛋白组成复合体。
?能转运甲状腺素和三碘甲腺原氨酸，
大约结合血浆中10％的甲状腺激素。
?必需氨基酸含量很高，是组织修补材料。
（二）视黄醇结合蛋白
（retinol-binding protein，RBP）?肝脏合成，仅21kD，半寿期12h
?携带视黄醇从肝脏转运到各种靶组织。
?与TTR以1:1比例结合，避免RBP从肾小球滤过，在靶细胞，TTR-RBP降解，视黄醇被摄入细胞，?无视黄醇的RBP载体蛋白与TTR无亲和性，
被肾小球滤出，肾近端小管细胞吸收并降解。
（三）白蛋白（albumin ，ALB）
生化特性
?占血浆总蛋白的57％～68％，不含糖，66.3kD
?由肝脏合成，11～14.7g/d，半寿期约18～20天
合成储备大，由血浆胶体渗透压和蛋白质摄入量调节肾病综合征时合成量可增高到正常的300％以上
?遗传性变异可发生电泳迁移率变化，出现双白蛋白区带（大量使用青霉素或水杨酸等药物亦可）
（三）白蛋白生理作用
?最重要血浆营养蛋白，胞饮进入细胞，氨基酸合成组织蛋白?最重要血浆载体蛋白
?维持血浆胶体渗透压的最重要成分
?缓冲酸碱物质的主要血浆蛋白质
?高度溶于水，能运载许多疏水分子
生理pH中为负离子，每分子带200个负电荷
运输胆红素.长链脂肪酸.胆汁酸盐.前列腺素.类固醇激素无机离子(如Ca2+、Cu2+、Ni2+).药物(如阿司匹林、青霉素)?结合型激素和药物无活性，ALB含量或pH变化时其活性变化
（四）α
1-抗胰蛋白酶（α
1
-antitrypsin，α
1
AT或AAT ）
蛋白酶和抗蛋白酶
?蛋白酶：清除病原微生物、坏死组织和衰老红细胞蛋白酶过多或活性过强可破坏正常组织和细胞
?抗蛋白酶：机体为对抗蛋白酶的异常作用而产生抗蛋白酶减少可导致某些疾病发生
（四）α
-抗胰蛋白酶
1
生理功能
?占血清中抑制蛋白酶活力的90％左右
?能抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、胶原蛋白酶及白细胞释放的溶酶体蛋白水解酶
形成不可逆的酶-抑制物复合体
（四）α
-抗胰蛋白酶
1
AAT的多种遗传表型
至少有75种，表达的蛋白质有M型和Z型、S型PiMM型最多，占人群95%以上
类型：PiMM、PiMS、PiMZ、PiSS、PiSZ、PiZZ 活力：100%、80％、60％、60％、35％、15％
（五）α
1
-酸性糖蛋白
(α
1-acid glycoprotein，α
1
–AG或AAG)
?肝脏合成，40kD，又称血清类黏蛋白，?含糖约45％，包括11％～20％唾液酸，?血清黏蛋白的主要成分，黏蛋白是能被高氯酸和其它强酸沉淀的一组蛋白质。
（五）α
1
-酸性糖蛋白
(α
1-acid glycoprotein，α
1
–AG或AAG)
?主要的急性时相反应蛋白
急性炎症时增高，与免疫防御功能有关
?AAG可以结合利多卡因和心得安等
急性心肌梗死时升高，药物结合状态增加游离状态减少，需要增加药物剂量。
（六）结合珠蛋白（haptoglobin，Hp）
生化特性和表型
?由肝脏合成，85kD～400kD，分子量变化很大
?α2β2四聚体，α亚基不同而形成的四聚体表型不同α亚基有三种遗传表型α1F、Α1s 、α2，氨
基酸数不同有些表型的四聚体又形成聚合体，在
电泳中出现多条带
结合珠蛋白的几种遗传表型
表型亚单位的结构组成
Hp1-1 (α1F)
2β
2
80kD，α链氨基酸83个
α1Fα1S β
2
β链氨基酸245个
(α1S)
2β
2
Hp2-1 (α1Sα2 β
2
)n 120kD-200kD的聚合体
(α1Fα2 β
2
)n n不同在电泳中呈多条带Hp2-2 (α2β)n 160kD-400kD
n =3-8 n不同在电泳中呈多条带
（六）结合珠蛋白
生理功能
?能与RBC中释放的游离Hb结合
每分子Hp结合两分子Hb
防止Hb从肾丢失而保留铁，避免Hb对肾脏损伤。?Hp不能被重新被利用，溶血后其含量急剧降低，血浆Hp浓度多在一周内由再生而恢复。