植物组织培养复习资料.doc

1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。

2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为

n tv

3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。

4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效

果最好

5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。

6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。

7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“

脱分化”。

8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时

_________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。

9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。

1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。

2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。

3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压

4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o

5、在离体叶培养中，6?BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成

6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方?接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。

7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。

8、花药培养前的预处理:低温冷藏是最常用的方法。

1、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和丿、'、/「用阶段。

2、培养基最常用的碳源是蔗糖,使用浓度在1%?5%常用

_3_%o

3、培养基的种类按其态相不同分为固体培养基与液体培养基，其火菌方法一般采用壷热消毒灭菌方法。

4、

pll的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pll大于6.0时，，培养基将会 ___________ ,低于5.0时，琼脂不能很好地凝同。

5、一般情况下，生长索/细胞分裂素的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成:比值低有利于芽的形成。

6、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取

适宣的大小。

7花药和发粉培养的共同特点是利用花粉（小泡了）染色体数目的单倍性,培育出单倍体植株。

8、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。

1.器官培养、愈伤组织培养、细胞培养、原生质体培养、茎尖分生组织培养；T

2.分生、愈伤组织；”,“

3.普通培养、暗培养；”,“

4.固体、液体；”,”

5.植物脱毒、离体快繁「，”

6.不定器官形成、体细胞胚胎发生；”,“

7.无菌操作，在人工培养基上培养；T&器官、组织、细胞、去除细胞壁的原生质体；T9.胚状体、器官；”,T0.脱分化、再分化；VII.细胞全能性;VI2. 全部遗传信息、形成完整植株；”,T3.培养条件可以人为控制、生长周期短，繁殖率高、管理方便，利于T厂化生产和H动化控制「，“14.植物脱毒、离体快繁:T15.细胞：”,T6.机械法、酶解法；”,”17.愈伤；浅层培养、深层培养；T9.成批培养、连续培养；”,”20.腋芽萌发、不定芽发生、体细胞胚胎发生;丁21.糖的浓度;T22.

高;T23.CTK/ IAA； T24.GA、GA浸种；”,”25.单核靠边期；丁26.器官、细胞、单倍体植株；”27.自然释放法、研磨过滤收集法、剖裂释放法;T28.正比、反匕T29.高温钝化、组织培养；T30.普通茎尖、微茎尖培养；T31.指示植物法、抗血清鉴定法、电子显微铳鉴定法、酶联免疫测定法:-V-32.砧木培养、茎尖准备、嫁接、嫁接苗培养、移栽；丁33.细胞分裂素、脱分化；”「34.无菌外植体的建立、芽的增殖、中间繁殖体的增殖、诱导生根、移栽；T35.脱毒、0.2?0.5mm、热处理、病毒检定;”36.反比；","37.无性繁殖；“,”38.营养体；”39.50；“）;

1植物组织培养按培养对象分为（）、（）、（）、（）、（）等儿种类型。

2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为（）状态，并形成（）的现象称为“脱分化”。

3.植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为（）培养和（）培养。

4 植物组织培养按培养的方式分为（）培养和（）培养。

5.目前植物纟R织培养应用最广泛的方面是（）和（）。

6.由脱分化的细胞再分化出完敕植株有两种途径，一种叫做（），另一种叫做（）。

7.不同组织培养类型Z间的相同点是（）。

8.进行植物组织培养时，外植体可以是（）、（）、（）、（）o

9.组织培养植株的再生途径有两条：一是（）发生，另一是（）发生。

1（）?细胞的全能性，可以通过成熟细胞的（）和（）过程得以体现。

11?植物组织培养的理论基础是（）O

12.细胞全能性是指植物的毎个细胞都具有该植物的（）和（）的能力。

13.组织培养的特点是：（）、（）、（）。

14.（）和（）是目前植物细胞组织培养应用最多.最有效的方面。

15.（）培养和组织培养、器官培养并称为三种最基木的、传统的离体培养方式。

16.单细胞分离的方法有（）、（）。

17.常从离体培养的（）组织分离单细胞。

18.浮培养根据培养的目的分为（）和（）两种方式。

19.悬浮培养根据继代培养时是否将培养细胞转移到另一容器分为（）和（）。

20.外植体器官发生的三种途径包括（）、（）、（）。

21.幼胚培养与成熟胚培养在培养基成分上最大的不同点是（）。

22.进行再生培养（如叶片）时，通过诱导培养基诱导出愈伤组织后应更换分化培养基，分化培养基的特点是细胞分裂素的浓度应比诱导培养基（

23.（）控制着植物离体器官的发育方向。

24.种了培养时打破休眠可在培养基屮添加（），或在接种前进行（）处理。

25.大多数植物花药培养所要求的花粉发育适宜时期是在（）。

26.花药培养属（）培养，花粉培养属于（）培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成（）。

27.分离花粉的方法有（），（），（）。

28在无毒苗的组织培养屮，外植体的大小与其成活率成（），而与脱毒效果成（）。

29.去除植物病毒的主要方法是（）和（）两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。

30.茎尖培养根据培养日的和取材大小分为（）和（）两种类型。

31.脱毒苗鉴定与检测的主要方法有（）、（）、（）、（）。

32.应用微尖嫁接技术进行脱毒培养无病毒苗，主要程序为（）一（）一（）一（

）f （）。

33.“微型抒插”的主要原理是利用（）来抑制植物原有的顶端优势，而使侧芽和顶芽能共同生长，因为这种方法不通过（）而再生，是最能使无性系示代保持原品质特性的一种方法。

34.茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段，即（）、（）、（）、（）、（）。

35.茎尖分生组织培养的目的主要是（）,其茎尖一般取（）毫米。为了使脱毒效果更好，可以将茎尖分生组织培养与（）结合起来。脱毒处理的试管苗，在用于生产Z前，必须进行（）。

36.茎尖外植体的大小与脱毒效果成（）。

37.危害植物的病毒主要是靠（）的作物。

38.无性繁殖的种类由于病毒通过（）进行传递，在母株内逐代积累。

39.温汤浸溃处理是在（）°C左右的温水屮浸溃10分钟至数小时。

1、组织培养植株再生的途径：体细胞胚胎发化途径和器官发化途径。

2培养基的主耍成分包括①无机营养成分（大量元素、微最元素和铁盐）、②冇机营养

成分（包括维生素、氮基酸等）、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤H它物质o 3在同体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝I古I剂和支持物，一般用量为6-10g/L 间。

4、一般情况下，生长索/细胞分裂索的比值高，有利于根的形成和愈伤组织的形成:比值低有利于芽的形成。

5、试管苗的生态坏境：高温且恒温、高湿、弱光、无菌。

6、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式。

7、无病毒苗的保存分：隔离保存和长期保存两种方法。

8、爪片染色法是检测划分发育时期的简便有效方法,常用染色剂为醋酸洋红。

1、 ____________________________ 在植物组织培养屮，多用于诱导外植体脱分化，但当诱导再分化，即诱导

体细胞胚时，则应去除培养基中的________________________________________ ，而选

用 _______________ 、_________________ 、 _____________ 。

2、 ____________ _______________ 和________________________ 的比值大时，有利于

的形成，比值小时，

则促进 ______________ 的形成。（激素模式）。

3、 _____________________________________________________ 1902年徳国植物生理学家Haberlandt提___________________________________________ 概念。1962年，Murashige

和Skoog发表的一种改良培养基，后來被称为_________________ 培养基，现已经广泛应

用于植物组织培养。

4、 __________________________ 普通培养室要求每LI光照________________ h,光照强度lx,温度____________________ °C之间。

5、 ______________________________________ 植物组织培养的三大难题:

、_____________________________________ 、______________ o

6、 ___________________________________ 培养基的成分主要包括、____________ 、

、

等。

1、 ___________________________________ 植物热处理脱毒有两种方法：一种是处理；另一种是 ______________________________ 处理。

2、 _____________________________________ 大多数植物组织培养的适宜温度范囤是°C,培养基的pH值范|制是 ____________________ 。

3、 _____________________ 原生质体培养方法：、和。

4、 ______________________________ 在组织培养屮，不耐热的物质用法除菌，而培养基常用 ___________________________ 法灭菌。

5、原生质体的分离方法有___ 分离法和 ___ 分离法。

6、 _______________________________________________ 6-BA/ NAA的高低决定了外植体的发冇方向，比值___________________________________ 可促进根的生长；

比值 __ 可促进芽的生长。

7、 _______________________ 植物种质保存的方式：和。

8、 _________________ White培养基屮 _________ 浓度低，适合试管苗的培养。

9、 ______________________________ 单倍体细胞培养包括3方面：、和培养。

1、1974年我国朱至清等设计了（B ）培养基，目前广泛应用在花药培养屮。

A 、马铃蒋-2号

B 、N6

C 、W14

D 、cl7 A 、上风 B 、下风 C 、左风 D 、右风

B 、6—10

C 、10—15

D 、15—20

A 、 1、 A 、

2、 A 、

3、 A 、

4、

A 、 5、 1-3 细胞工程、（ 蛋白质工稈 配制（

B 2,4-D B 、 2-4

C 、 3-5

D 、 4-6

B ）、酶工程、发酵工程是生物技术的主要范畴。 B 、基因工程

C 、微生物工稈

D 、生化工稈 ）溶液时应先用10%的HC1溶解，再加蒸懾水定容。 B 、BA C 、GA3 D 、TAA 炼苗的环境开始时和（A ）相似，后期类似于田间栽培条件。 培

养室条件

B 、无菌界室条件

C 、缓冲间条件 离体培养常用的诱导生根的生长调节物质主要是（A 生长索

B 、细胞分裂索 植物组织培养实验室需要定期用（ 高猛酸钾和甲醛 B 、酒精和

洗液 进行无菌操作前，工作人员可以不必 洗脸 B 、换拖鞋 电了天平的感量一般在（C C 、

脱落酸

）进行熏熬。 高猛酸钾和酒精 A 穿工作服 C 、 A C ）。 D 、准备室条件 ）0 D 、乙烯 D 、高猛酸钾和洗液 D 、洗手 0. lg 或 O.Olg B 、O.Olg 或 O.OOlg 进行干热灭菌时，应在150°C 时保持（ 适合双了叶植物花药培养的培养基是（ A 、MS 培养基 B 、B 5培养基 10、下列不属于原生质体培养的是（D A 、平板培养 B 、液体浅层培养

）范围。 C 、0. 001g 或 O.OOOlg D 、0?lg 或 0.OOOlg 60 ） A c 、 ） 分钟。 ）O N 6培养基 D 、White 培养基

2、组培室应建立在安静、清洁，并且在该地长年主风向的（ A ）方向。

3、制作每升I 古I 体培养基常用琼脂的用量为（B ）克。

4、下列培养类型不属于液体培养的是（D ） A 、旋转培养 B 、纸桥培养 C 、振荡培养 D 、看护培养

5、进行茎尖培养脱毒时，通常以带1-3个幼叶原基的茎尖作外植体较合适。则茎尖的长

度约为（ B ）o A 0. 1-0. 3mm B 0. 3-0. 5mm C 、0. 4-0. 6【nm D 0. 6-0. 8mm

6、下列现象屮不属于离体培养容易出现的三大问题的是（C ）0

A 、污染

B 、褐变

C 、黄化

D 、玻璃化

7 超低温种质保存的温度为（C ）。 A 、0?15°C ； B> -80°C C 、-196°C ； D 、-280°C 8、 在植物组织培养表面灭菌时，常用的酒精浓度为（A ）0

A 、 70%-75%

B 、 80%-85%

C 、 90%-95%

D 、 100% 9、 一般来说，在愈伤组织培养时，幼年细胞和组织比成年细胞和组织（B ）0

A 、困难

B 、容易

C 、一样

D 、不一定 10、 利用花粉或花药培养，进行单倍体育种选育一个新品种只需（C ）年。

1、 根据培养器官的不同，植物组织培养的分类下列哪项除外？（）

A 、花药培养

B 、光培养

C 、根培养

D 、叶培养

2、 大量元素屮，不包括下列哪种元素？

（）A 、氮B 、磷C 、钾D 、锌 3、 细胞分裂素的生理作用，下列哪项除外？ （） A 、促进细胞分裂和扩大

B 、诱导芽的分化

C 、抑制衰老，减少叶绿素的分解

D 、促进细胞伸长，脱分化

4、培养基的PH大都要求在5.6~5.8的条件下，但经高温高压灭菌后，培养基的PH会下降

（）个单

位。 B 、广2 D 、5~6

5、母液的配制和保存时，下列哪两项需要单独配

制？ A 、 CaC12 和 KH2PO4 KXO3 和 KH2P04 铁盐容易发生沉淀， () C 、 6、 A 、 7、 B 、 B 、 MgS04 和 CaC12

D 、 KNO3 和 CaC12 需要单独配制，一般与下列哪种物质相互配? KNO3 C 、 CaC12 95%的纯酒精可以溶解下列哪两种物质？ 6-BA 和 2,4-D B 、IAA 和 KT C 、NAA 和 ZT

植物生长物质不包括下列哪项？

NAA B 、 2,4-D C 、 6-BA D 、 KH2PO4 () D 、KT 和 ZT () 9、在培养室和操作室屮，一年屮要定期进行一两次熏蒸，使用的药品是

A 、甲醛和高猛酸钾

B 、酒精和次氯酸钠

C 、紫外灯和酒精

D 、升汞和洒精 10、玻璃化产生的主要原因，不包括在内的是

（） A 、激素浓度 B 、苗太大 C 、琼脂用量 D 、离子水平

1、 下列实验屮可能获得单倍体植株的是 _______ 0 A 、小麦的茎尖培养；B 、番茄花药培养；C 、玉米胚乳培养；D 、烟草叶片培养

2、 外植体接种时，刀、剪、银了等用具一般在使用前浸泡在（）屮，用时在火焰上灼烧 灭菌，冷却后使用。

A 、70%酒精；

B 、85%酒精；

C 、95%酒精；

D 、0.1%升汞

3、 第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是 ________ :

A 、Morel ；

B 、Haberland ；

C 、Schleiden ；

D 、White

4、 、进行茎尖培养脱毒时，通常以带1?2个幼叶原基的茎尖作外植体较合适；则茎尖的长 度约为（）。

A 、0.1 ?0.3mm ；

B 、0.2?0.5mm ；

C 、0.4?0.6mm ；

D 、0.6?0.8mm

5、 下列不属于细胞分裂素类的植物激素是 ________ o

A 、6-BA ；

B 、NAA ；

C 、Zt ；

D 、Kt

6、 汕菜的生根培养基配方为：MS+NAA 0.1mg/L o 已知NAA 的母液浓度为2mg/mL ；如 配制500mL 的生根培养基，需加入的NAA 母液的量为（）

A 、0.2mL ；

B 、0.1mL ；

C 、0.05mL ；

D 、0.5mL

7、 琼脂在固体培养基中的用量一般为（）g/Lo

A 、6?10；

B 0.6?1.0；

C 、2?6；

D 、0.2?0.6

8、 在进行花药和花粉培养时，最适宜的花粉发育时期是（）。

A 、成熟花粉粒；

B 、单核花粉期；

C 、二核花粉期；

D 、三核花粉期

9、 适合豆科和十字花科植物花药培养的培养基是（）o

A 、MS 培养基；

B 、B5培养基；

C 、N6培养基；

D 、White 培养基

10、 超低温种质保存的温度为（）

A 、0?15°C ；

B 、?80?0°

C ； C 、-196°C ；

D 、-280°C

1、 为了减少污染，一般选择培养材料的大小，在（ A ） Z 间。

A 、0. 1-0. ocni 0. 5-1. 0cm C 、1. 0-1. 5cm D 、1. 5~2. 0cm

2、 世界上首次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是（B ）。

Morel Haberlandt C 、 Schleiden D^ White

()

3、在植物组织培养表面灭菌时，常用的氯化汞浓度为（A ）。

A、0. 1-1%

B、0. 2-2%

C、0. 3-3%

D、0. 4-4%

4、在细胞悬浮液成批培养过稈屮，细胞数bl会不断发生变化，其中细胞数目迅速增加，增长速率保持不变的是（C ）。

A、减慢期

B、延迟期

C、对数生长期

D、静止期

5、下列不属于原生质体培养的是（D ）

A、平板培养

B、液体浅层培养

C、悬滴培养

D、糖培养

6、在愈伤组织培养时，一般双子叶植物比单子叶植物诱导愈伤组织（B ）。

困难B、容易C、一样D、不一定

7、在进行花药和花粉培养时，最适宜的花粉发育时期是（B ）o

A、成熟花粉粒

B、单核花粉期

C、二核花粉期

D、三核花粉期

8、植物组织培养屮大多数植物都适用的培养基是（A ）培养基。

A、MS

B、N6

C、White

D、B5

9、下列现彖中不属于离体培养容易岀现的三大问题的是（C ）o

A、污染

B、褐变

C、黄化

D、玻璃化

10、配制微量元素母液时，浓缩了200倍保存在1升容量瓶内，当制作4升培养基时，应取

用铁盐母液（ D ）ml。A、50 B、40 C、30 D、20

1.______________________________________ 下列不属于细胞分裂素类的植物激素是__________________________________________ 、A BA： B NA A； C ZT； D KT

2.___________________________ 植物组织培养的特点是: A培养条件可人为控制；B 生长周期短，繁殖率

高；C管理方便；D产量大

3、诱导试管苗生根，培养基的调整应__________

A加大生长索的浓度B加大分裂索的浓度C加活性炭D降低盐的浓度

4.下列不属于大量元素的盐是___ oA NH4NO3； B KN03； C ZnSO t. 7H2O； D MgSO,. 7H20

5.培养休眠的植物材料时必需加入的激素是：

A GA；

B IAA；

C NAA；

D ZT 1. A C 2. A 3. BD 4. D 5. B

1.在MS的培养基成分屮，MgSO4. 7H20属于微量元索。

2.试管苗生长细长有愈生组织化是生长素过高

3.固体培养基可加进活性炭来增加通气度，以利于发根。

4.生根培养屮加入GA?可提高生根率。

5.用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好越好。

1、P H增高不利于原生质体的再生。（X ）

2、剥离法是植物离体培养屮花粉分离的一种方法。（X ）

3、茎尖培养一般采用半固体培养基，也可使用液体培养基。（V ）

4、培养基的营养成分越复杂、营养成分越丰富，植板细胞的临界密度越低。（V ）

5、睛天下午取材在一定程度上可以减轻污染。（V ）

6、细胞悬浮培养的培养基屮氧浓度低于临界水平时，利于根的形成。（X ）

7、植物组织培养有利于快速繁殖稀有植物并挽救濒临灭绝得植物。（V ）

8、培养室的试管苗瓶内湿度在80%左右。（X ）

9、愈伤组织继代培养屮钱态氮的含量一般不能高于Smmol/Lo （V ）

10、“脱毒苗”是指不含该种植物的主要危害病毒。（V ）

1、叶柄和叶脉的切口处不能形成愈伤组织和分化成苗（X ）o

2、在植物组织培养过程屮，所用外植体是指植物体上的根、茎、叶、花、果、种了。（

X ）

3、植物组织培养的培养基使用前须经过高压灭菌。（V ）

4、离体叶培养屮，消毒后的叶片应整理切割成5X5mm大小。（V ）

5、一般來说单叶了植物的愈伤组织培养比双了叶植物容易。（X ）

6、连续培养是植物脱毒的常用方法。（ X ）

7、试管苗与常规苗相比，茎、叶绿色，光合作用更强。（X ）

8、茎尖培养主要用于消除病毒，也可消除植物体屮其他病原菌，包括类病毒、类菌质体、细菌和真菌。（V ）

9、细胞悬浮培养的培养基屮氧浓度低于临界水平时，利于形成胚状体。（V ）

10、漂浮释放法是植物离体培养屮花粉分离的一种方法。（V ）

1 ＞环境的相对湿度可以影响培养基的水分熬发，一般要求80%?90%的相对湿度。

2、幼年的细胞和组织比成年的细胞和组织诱导愈伤组织更容易。

3、一般地说，PH值高于6.5时，培养基易变硬；低于5时琼脂不能很好地凝固。

4、在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的NaOH溶解，再加温蒸脩水定容。

5、在MS的培养基成分屮，化合物MgSO4.7H2O屮含有微量元索Mg。

1、植物组织培养属于有性繁殖范畴。（X ）

2、茎尖分生组织主要是指对茎尖长度不超过0. lmm的茎尖进行培养。（V ）

3、外植体是指用于组培接种用的离体植物材料。（V ）

4、悬浮培养属固体培养的一种。（ X ）

5、植物离体培养屮细菌污染的特点是污染部分长有不同颜色的霉菌。（X ）

6、试管苗的茎叶呈绿色，光合作用弱。（V ）

7、大多数植物组织培养要求的PII范围是4.0-7.0。（X ）

8、植株进行一次病毒鉴定未发现病毒，就可确定该植株不带病毒。（X ）

9、大多数外植体组织培养的温度要求在25±2°C。（V ）

10、IAA/KT高，利于芽分化。（X ）

3.褐化现象的产生原因和预防措施各是什么？

答：褐变的主耍原因：植物品种；生理状态；培养基成分；培养条件不当。

预防措施：选择合适的外植体；合适的培养条件；使用抗氧化剂；连续转移。

MS固体培养基的制作步骤如下：

⑴母液取出。

⑵适量蒸馆水放入加热容器，接通电源加热。

⑶加入称量好的琼脂至完全溶化，称取相应量的蔗糖至溶解，将母液混合液加入混匀，最示用蒸馆水定容至所需体积。

（4）测试培养基溶液的PH值（5. 8-6. 0）,调整。

1、简述MS培养基、White培养基、B5培养基的特点？

制作配方为MS+6-BA0. 5mg/ L的培养基2L （大量元素母液为10X,微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为100X,激素母液浓度为lmg/ml）

（1）按配方移取各母液：大量元素母液为200ml,微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为20ml, 6-BA激素母液为1迅。

（2）定容：用蒸镭水定容至21,。

（3）称量蔗糖和琼脂:蔗糖50-60g,琼脂14-16go

（4）培养基熬制：加入蔗糖和琼脂后进行培养液熬制，肓至琼脂全部融化。

（5）调PH值：先用PH计或PH试纸测量示再用0. lMNaOH或HC1调PH值为5.8 —6.0。

（6）二次定容：当培养基熬制后总体积少于2L时要定容至2Lo

⑺分装并扎瓶口：趁热分装，100ml的三角瓶约装入30—40ml, 35瓶/I,。

（8）高压灭菌：及时灭菌，121-123C条件下保持20-30分钟。

（9）冷却：待接种。

四?计算题（每题5分）

1、培养基的配方是l/2MS + BA0.5 + IBA1.0+2.5%Wi，要配制1000ml, MS母液的浓度分

别是：大最元素20倍，微最元素500倍，铁盐10（）倍，有机物50倍，BAI mg/ml , NAAO.lmg/mlo要吸取各种母液各多少ml?糖称取多少克。

一、选择题

1.植物组织培养是指（）

A.离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织愈伤组织培育成植株

C.离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体

D.愈伤组织形成高度液泡化组织

2.植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是（）

A.植物体细胞的结构组成屮不包括细胞壁

B.细胞壁使原生质体失去活力

C.细胞琏阻碍了原生质体的融合

D.细胞壁不是原生质的组成部分

3.植物体细胞杂交的结果是（）

A.产生杂种植株

B.产生杂种细胞

C.原生质体融合

D.形成愈伤组织

4.科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合，培冇出的驱蚊草含有香

茅醛，能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培冇的叙述中，错误的是（）

A.驱蚊草的培育属于细胞工稈育种，其优点是能克服远源杂交不亲和的障碍

B.驱蚊草培冇过程要用到纤维素酶果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法

C.驱蚊草培冇过程是植物体细胞杂交，不同于植物组织培养无愈伤组织和试管苗形成

D.驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离

5.（2005,上海）将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件屮不需要的是（

）

A、具有完整细胞核的细胞

B、一定的营养物质和植物激素

C、离体状态

D、导入指定基因

6.植物体细胞杂交的目的屮错谋的是（）

A.把两个植物体的优良性状集屮在杂种植株上

B.获得杂种植株

C.克服远源杂交不亲和的障碍

D.实现原生质体的融合

7.植物组织培养的用途屮不正确的是（）

A.快速繁殖

B.生产新品种

C.生产生物碱

D.生产白细胞介索一2

8.A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如右图所示（仅显示细胞核），将A、B两种植物细

胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过纽?

织培养后得到了杂种植株，则该杂种植株是（）

A.二倍体；基因型是DdYvRr

B.三倍体；基因型是DdYyRr

C.四倍体；基因型是DdYyRr

D.四倍体；基因型是DDddYYyyRRrr

9.以下关于原生质的叙述，正确的是（）A物种B物种

A、原生质泛指细胞内的基质

B、原生质就是细胞质

C、一个动物细胞就是一团原生质

D、细胞膜、细胞核和细胞壁是原生质

10.不能人工诱导原生质体融合的方法是

A.振动

B.电刺激

C. PEG试剂

D.

11.植物细胞表现出全能性的必要条件是

A.给予适宜的营养和外界条件

C.脱离母体示给予适宜营养和外界条件

（）重压

（）

B.导入其他植物细胞的基因

将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内

12.细胞具有全能性的原因是

A.生物体细胞具有使麻代细胞形成完桀个体的潜能

R.生物体的每一个细胞都具有全能性

C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因

D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发冇來的

13.植物组织培养过程屮的脱分化是指（

A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞

B.未成熟的种子经过处理培育岀幼苗的过程

C.植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程

D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程

14.下列植物细胞全能性最高的是（）

A.形成层细胞

B.韧皮部细胞

C.木质部细胞

D.叶肉细胞

15.植物组织培养过程的顺序是（）

①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽③愈伤组织④脱分化

⑤再分化⑥植物体

A.①?③⑤②⑥

B.①④③②⑤⑥

C.①⑤④③②⑥

D.⑥①?③⑤②

16.（2005,上海）将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（）

A.具有完整细胞核的细胞

B. 一定的营养物质和植物激素

C.离体状态

D.导入指定基因

17.下列有关细胞工程的叙述不正确的是（）

A.在细胞報体水平上定向改变遗传物质

B.在细胞器水平上定向改变遗传物质

C.在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质0.在细胞整体水平上获得细胞产品

18.下列细胞全能性最高的是（）

A.植物的卵细胞植物的精了细胞C.被了植物的受精卵D.被了植物的的叶肉细胞

19.植物体细胞融合完成的标志是（）

A、产生新的细胞壁

B、细胞膜发生融合

C、细胞膜发生融合

D、细胞膜发生融合

20.植物体细胞杂交的目的是（）

A.川酶解法去掉细胞壁分离岀有活力的原生质体

B.以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合

0.用植物纟R织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株D.通过以上三者来完成

21.下列提法正确的是：（）

A、原生质专指细胞质

B、人体内的水都属于原生质

C、细胞核不是原生质

D、一个动物细胞就是一团原生质

22.（多选）有关原生质体的下列叙述屮，正确的是

A.组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸

B.原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者Z间的原生质

C.被脱掉细胞壁的植物裸嘉细胞是原生质体

D.原生质体只能用于植物细胞工程

23.（2006,广雅中学考题）（多选）下图为植物组织培养过程示意图，则下列叙述正确的是

脫分化―再分化—

①② ----- ?③------- ?④

A.植物组织培养依据的生物学原理是细胞的全能性

B.③ ---------- 过程是指植物的营养生长和生殖生长阶段

C.将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮即可获得人工种了

D?②------ 的再分化过程中，诱导②生根的激素为细胞分裂素和生长素

二、非选择题

1.下图是植物组织培养的简略表示。据此冋答：

脱分化再分化

?----- ? ② ------ ------------ ④

（1）_______________ ?表示________________________________________ ，它能被培养

成为④的根本原因是 _ 3

（2）_____________ ②表示 ______________________ ,它与①相比分化程度 ,全能性o

（3）____________________________________________ 若想制作人工种子，应该选用（填

编号）_________________________________________ 0

（4）__________________________ 若①是花药，则④是 ____ ,继续对其使用______ 处理

可获得________________________ 正常

植株，该过程称为 _________ 。

（5）____________________________________________________________ 若①是胡萝卜根尖细胞，则培养胞__________________ O

（6）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，培养

将进行到（填编

号）____________ o

2?右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图冋答：

（1）_____________________________ 步骤①是,最常用的方法

是______________ O

（2）__________________________________ 步骤③一般常用的化学试

剂是 ,目的

是______________ O

（3）在利用杂种细胞培冇成为杂种植株的过程屮，运用的技术手段

是_____________ ，其屮步骤④相当于_______________ ，步骤⑤相

当于_______ 。

（4）

植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使 ____________

能够在新的植物体上有所表现，其根本原因 ____________ ，

（5）

若远源杂交亲木A和B都是二倍体，则杂种植株为__________

倍体。

（6）__________________________________ 从理论上讲，杂种植株的育性为。若运用传

统有性杂交方

法能否实现？_______ ，原因是__________。因此，这项研究对于

培养作物新品种方面的重大意义在于 ____________________ 。

（7）利用植物体细胞杂交的方法培冇作物新品种过程屮，遗传物质的

传递是占遵循孟徳尔的遗传规律？为什么？ ___________ ，

2.1.1植物细胞工程的基本技术参考答案

一、选择题

CCACD DDCCD CCCAA DCCACD （AC）（ABD）

二、非选择题

1、（1）离体的植物器官、组织或细胞植物的全能性（2）愈伤组织低高

（3）③（4）单倍体植株秋水仙素纯合单倍体育种

（5）绿色含有与叶绿体形成相关的基因（6）②

2、（1）去掉细胞壁，分离岀有活力的原生质体酶解法

（2）PEG 诱导不同植物体细胞的原生质体融合

（3）植物组织培养脱分化再分化

（4）远源杂交亲本的遗传特征杂种植株获得双亲的遗传物

质（5） pq

（6）可育不能因为不同种生物Z间存在生殖隔离克服远源杂交不亲和的障碍

（7）否有性生殖的过程屮进行减数分裂,才遵循孟徳尔的遗传规律

由于6?BA具有高效、稳定、廉价和易于使用等特点，因而被广泛采用，并且是组织培养者最喜爱的细胞分裂索。BA的主要作用是促进芽的形成，也可以诱导愈伤组织发生。可用于提高茶叶、烟草的质量及产量；蔬菜、水果的保鲜和无根豆芽的培育，明显提高果品及叶片的品质。

1植物组织培养过程屮，最常用的培养基是______ ，培养基的pH因外植体的来源不同而异，常用_____ 和_______ 调节pH,大多数植物的pH要求调节在__________ 范围内。

2.可以通过________ 、_______ 、_______ 、______ 、_____ 等措施预防褐变的发生。

3.植物组织培养时，外植体可以是________ 、_________ 、_________ 、________ 。

4应用微尖嫁接技术进行脱毒培养无病毒苗，主要程序为____________ - ____________ -> 5组织培养植株的再生途径有两条：一是__________ 发生，另一是__________ 发生。

6.______________________________________ 在配制培养基时，可以在培养基屮添加,

利用口吸附能力，可以降低褐变的发生,

但它对物质的吸附 ______ 。

7培养基的灭菌要求压力为_______ 、温度为________ 、维持时间为_________ 。

8.组织培养中常用的生长素有眄|哆乙酸(IAA), 2, 4-二氯苯氧乙酸(2, 4-D),眄|哆丁酸(IBA),蔡乙酸(NAA),它们的作用强弱顺序为__________ > _____ > _______ > _____ 。

9.茎尖微繁殖过稈…般包括讥个阶段，即______ 、 _____ 、—、_、_____________ 。

10.茎尖分生组织培养的目的主要是 ,其茎尖一般取亳米。为了使脱毒效果更好,

可以将茎尖分生组织培养与 ________ 结合起来。脱毒处理的试管苗，在用于生产Z前，必

须进行_______ 。

11.污染的原因从病源菌上分析主要有两大类________ 、________ O

1.一般将微量元素母液均配制成10倍，在配制培养基时，使用量为10ml/Lo细胞分裂素 /

生长素的比值较高时，有利于愈伤组织的诱导。

2.对于金边虎尾兰等遗传学上的嵌合体植物，要是组织培养繁殖的植株保持原有的园艺价值，只能通过叶培养。

植物生长调节物质使用不当时，材料也容易褐变，生长素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。

4.利用茎尖分生纟H.织进行脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成正比。

5.某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗。

6.无病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，体内营养和生理状况发生改变, 因而对其他病毒和病原体的侵染更为敏感，因此在种植脱毒苗的一定要隔离种植。

7.微繁不定芽的产生有两个途径，一是不定芽不通过愈伤组织由外植体育接产生，二是外

植体诱导产生愈伤纟R织，由愈伤组织上产生不定芽。示一途径相对较为优越，因为通过愈伤组织不会出现一些突变。

8.细胞的全能性，可以通过分裂细胞的脱分化和再分化过稈得以体现。

9?培养基屮的铁盐，常川不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物，以防在pH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。

1.MS、HCL、NaOH、5.6?6.0

2.适宜外植体、最佳的培养基、连续转接、加抗氧化剂、加活性洪。

3.器官、组织、细胞、去掉细胞壁的原生质体4无菌砧木、茎尖准备、嫁接、嫁

接苗培养、移植5器官、胚胎6活性炭、无选择性。7. 1000?500()Lx、16h、25±2°C

8. 2, 4-D、NA A. IBA、IAA 9无菌外植体的建立、芽的增殖、中间繁殖体的增殖、诱导生根、试管苗的移栽。10脱毒、0.1热处理、病毒检定11细菌、真菌

三1. X-般将微量元素母液均配制成100倍，在配制培养基时，使用量为I0ml/Lo

2.X细胞分裂素/生长素的比值较高时，有利于愈伤组织芽的诱导。

3.X对于金边虎尾兰等遗传学上的嵌合体植物，要是组织培养繁殖的植株保持原有的园艺价值，只能通过茎尖和侧芽培养。

4.X植物生长调节物质使用不当时，材料也容易褐变，细胞分裂有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。

5. X利用茎尖分生组织讲行脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成反比。

6.J某些植物通过愈伤组织培养可以获得无病毒苗。

7.丁无病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒Z后，体内营养和生理状况发生改变，因而对其他病毒和病原体的侵染更为敏感，因此在种植脱毒苗的一定要隔离种植。

& X微繁不定芽的产生有两个途径，一是不定芽不通过愈伤组织由外植体直接产生，二是外植体诱导产生愈伤组织，由愈伤组织上产生不定芽。前一途径相对较为优越，因为通过愈伤组织会出现一些突变。

9.丁细胞的全能性，可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过稈得以体现。

10.丁培养基屮的铁盐，常用不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物，以防在pH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。