中药药理试验方法学试题

一简答题（共7小题，每小题5分，共35分）

1．检查甲同学的实验原始记录发现，记录书写整齐，页面干净，偶有错误处做了更正，错误的数据、文字上画了横杠，原先的文字、数据依然可辨，右上角处已写上更正后的文字或数据。有些计算机打印的数据已经装袋另存。乙同学赞赏甲同学原始记录认真，称其为了尽量减少记录出错，每次记录都先写在草稿纸上，然后认真抄写。改错方式正确。

但是他认为有时其他同学帮忙其操作，原始记录也应该签上其他同学的名字。另外原始记录应反映最初的实验情况，每次实验后的数据统计及其结果分析可以忽略，以免原始内容记录太多。对上述原始记录的涉及的情况及乙同学的评价你认为存在什么问题？

关于原始记录：原始记录应书写整齐，且不得随意修改，修改处应划一斜线，画除的内容应能被辨识，在其右上角（或其空白处）修改者签名并说明修改原因及时间；原始记录应记录及时、直接，记录不经过誊抄、加工修饰；实验记录应包括所有参与实验研究的人员，则记录本上应记录帮其操作的人员姓名；计算机打印的数据应按顺序粘贴在记录相应位置，不宜粘贴的另行装订成册并编号；每次实验结果的数据应及时进行数据统计和结果分析。

2．药理实验常设阳性对照和阴性对照，设置的目的分别是什么？中药药理实验如设阳性对照是否可以选择化学合成药？

阳性对照意义：①检验实验体系是否可靠，防止假阴性

②粗略估计受试药与对照药相比，作用强度与特点上有哪些差异。

阴性对照意义：消除溶媒或基质等无关因素的影响

中药药理实验可以选择化学合成药作为阳性对照药。但其选择必须符合合法性（药典或部颁标准收载或新批准合法生产的药物）、可比性（选用药效肯定的同类中药或

化学药，主治相同，给药途径尽量一致）、择优性（择优选择公认疗效好的药物）。

3．要进行某药物的药效实验，分别观察其对血压、免疫系统、体温的影响，应分别选用何种实验动物为好？为什么？

原则：选择与人类对受试药具有相似反应的动物：

血压：大鼠，其血压稳定，对降压药的反应敏感，与人体接近；

免疫功能：纯种小鼠，幼年，因幼鼠胸腺对免疫药物敏感。

体温：兔，其对热原反应敏感、典型且恒定

4．中药新药进行药效实验时，对受试药有何要求？实验时对给药途径和给药量有何要求？

处方固定、制备工艺、药品质量标准应基本稳定，剂型和质量标准应与临床用药基本相同可选不含赋形剂的中药提取物。

1.制备情况

（1）新药受试药要求：用处方固定，质量稳定、工艺、质控指标恒定后的中试产品。

（2）一般受试中药：生药经鉴定，科属种清楚；提取制备工艺明确，含量确定。

（3）单体：化学结构式清楚。

（4）在注射给药或离体试验时应注意药物中杂质、不溶物质、无机离子及酸碱度等因素对实验的干扰。

2、给药途径

实验的给药途径与临床拟使用的途径一致。

中药粗制剂一般不用注射给药或体外实验的方法检测药物效应。

3、剂量组数：新药研究至少设3个剂量组。

三者最好成等比，能反应量效关系。

给药容量相等，浓度不等。

合理选择剂量：

（1）参考LD50：在LD50的1/10、1/20、1/40等范围内设置高、中、低剂量组。

（2）根据临床用药等效量计算

6、列举两种过氧化损伤涉及的疾病，三种检测过氧化损伤的指标（不必说明具体测试方法）

氧自由基参与的疾病

神经退行性病变（阿尔茨海默病，帕金森病）肿瘤、糖尿病、动脉粥样硬化、慢性炎症、人类免疫缺陷病、缺血再灌注损伤、睡眠呼吸暂停综合症

（一）过氧化产物的测定

过氧化脂质分解产物是自由基损害作用的产物，故可以作为机体器官损伤或衰老的一个定量指标。

1、过氧化脂质的测定、

2、丙二醛（MDA）、

3、脂褐质的测定

（二）抗氧化酶活性的测定

1、过氧化氢酶（CAT）CAT存在于红细胞及某些组织细胞内线粒体中，主要的作用是催化过氧化氢分解，减少羟自由基的损害。年龄增长，该酶活力下降。

测定过氧化氢酶是衡量抗衰老药物的重要指标。

2、超氧化物歧化酶（SOD）超氧化物歧化酶（SOD）是体内清除自由基的重要酶之一，它随着衰老过程或清除过多氧自由基消耗过多而减少，故测定该酶的活性可作为人体抗氧自由基能力的一个定量指标。

3.谷胱甘肽过氧化酶GSHPx

7、制备2种“炎症”的动物模型，并说明如何证明此模型确实制备成功。

（一）非特异性炎症模型

急性和亚急性炎症的实验方法

脚肿胀模型是最常用的抗炎实验模型，多种化学、物理以及免疫学刺激均可导致大鼠脚爪水肿，因水肿发展和消退的快慢及持续时间不同，可将其分为急性、亚急性和慢性脚肿胀。大鼠足趾肿胀法：足趾皮下注射致炎剂

致炎剂：鸡蛋清，角叉菜胶，酵母，甲醛，右旋糖酐，酵母液，组胺，5-羟色胺，制霉菌素

检测指标：测定大鼠足趾或关节的周长、厚度或整个足趾、踝关节的容积。

（二）免疫性炎症模型

大鼠佐剂性关节炎

常作为类风湿性关节炎的一种实验模型。

将弗氏完全佐剂皮内注入大鼠足趾部或尾根部致炎。

原发病变类似于一般炎性水肿，在致炎部位12h后出现肿胀。继发病变由迟发性超敏反应引起，在致炎10d左右后出现对侧、前肢足爪肿胀，耳、尾、出现炎症结节和红斑等。

6.临床观察发现某中药复方有活血化瘀疗效，该方每日服用总生药量为120g，现欲进行动物实验。请按规范的新药临床前实验要求设计一项抗血瘀动物实验，验证其疗效。要求：说明选择用的动物，分为几组，每组动物个数，造模法（一种即可），给药剂量（对照组剂量略），三种观察指标（测定方法可略）。（16分）

大鼠32只．雌雄各半，分为4组。分别受试药组、阳性药组（华法令）或模型组（自来水）和正常组。三组给药容量相同，受试药给药剂量为(120/56/0.2=10)g/d /kg bodyweight，连续3d，末次给药后45min．在乌拉坦麻醉下，切开颈部皮肤，分离左颈总动脉．用BT87－2型实验性体内血栓形成测定仪刺激，使大鼠产生血栓．以血栓形成时间、血栓长度、血栓重量为指标，反映血凝状态，观察药物抗血栓形成作用。