罗氏全自动免疫组化染色仪特点之欧阳家百创编

罗氏全自动免疫组化染色仪特点之欧阳家百创编
罗氏全自动免疫组化染色仪特点之欧阳家百创编

目前罗氏独有的SISH技术和北京金菩嘉的FISH技术两者区

别如下:

欧阳家百(2021.03.07)

由于FISH方法中的荧光容易淬灭,保存时间短,不利于病理科存档。没有相应的仪器完成全自动检测,对操作人员技术要求高,荧光显微镜价格昂贵;但技术开展较早,有较好的市场声誉。SISH与目前应用的FISH方法对比其结果符合率大于98%;可用仪器全自动完成检测;操作相对简单;不需特殊显微镜;结果可长期保存;将是未来分子病理发展的重点,目前罗氏可提供Her2和EGFR探针,可同时和17号染色体在同一张片子上显色,未来会有TOP2,MIT等各种新的探针提供给临床。

FISH:荧光原位杂交,需用荧光显微镜观察。

SISH:银染原位杂交,可用光学显微镜观察。

●Benchmark XT 仪器介绍

Benchmark XT病理检测系统是罗氏于2008年推出的最新型全自动多功能的组织病理检测系统,具有以下优势:?运用于免疫组化和原位杂交技术

免疫组织化学技术与原位杂交技术是近年来病理诊断发展先进的检测技术;为临床实现个体化及分子靶向治疗提供有力的支持。

?具备最佳检测性能,包括以下指标:1.高灵敏度2.高特异性检测3.高稳定性4.全液体试剂5.条形码技术6.专利的喷射清洗7.多喷头分配器8.专利液体封盖膜技术(LCS)9专利空气涡流混匀技术10.专利Themopad温控技术11.检测方案多样化及个性化(为各厂家最齐全的)12.专利的脱蜡液

1.仪器可以开展哪些新项目?会对学科发展和临床诊断有哪些指导作用?

仪器除了解决常规IHC的工作,还可以进行基因检测ISH,如鼻咽癌和Bukitt’s淋巴瘤的EBER,宫颈HPV 6和16型检测, 乳腺癌her2/new基因检测等。这些基因检测目前对临床的靶向治疗有指导作用,同时在病人癌前预测方面有价值,值得推广。

2.新的广东省免疫组化收费是多少钱、银染原位杂交收费是多

少钱?

新的广东省免疫组化收费,大概是200元左右/项;银染原位杂交收费大概是2200元左右/项。

3.该设备可给医院和科室解决哪些问题?

减少免疫组化染色工作中手工操作带来的误差,使操作程序标准化,缩短实验时间,提高科室工作效率,可满足科室免疫组化质量控制。满足免疫组化需求及分子病理项目的开展,为临床实现个体化及分子靶向药物治疗提供有力的支持。环保

的试剂有益于病理技术人员身体健康,降低医院处理废液的成本。

Roche Benchmark XT与Leica Bond-Max对比表

免疫组化技术全程原理

免疫组化技术全程原理 一、概念和常用方法介绍 1、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。 2、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。 2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。 3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。 4、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1)免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用较广。 2)免疫酶标方法

迈瑞BSBS全自动生化分析仪操作

BS-330/BS-350全自动生化分析仪标准作业程序 1 开机前检查 1 检查电源,确认电源有电并且能够提供正确的电压。 2 检查分析部、操作部和输出部的通讯线和电源线,确认已连接且没有松动。 3 检查打印纸是否足够。 4 确认试剂盘的39号位置已放置足够的强化清洗液,40号位置已放置足够的蒸馏水。如果选配了 ISE模块,检查37号位置是否放置了ISE清洗液,38号位置放置了尿液稀释液。 5 检查去离子水的连接、废液的连接、注射器的连接是否漏液。 6 检查加样针是否弯曲、有污物、挂液。 7 检查搅拌看杆是否弯曲、有污物。 8 检查去离子水桶是否有足够的去离子水。 9 检查废液桶是否清空。 2 开机 系统通上电后,按下列顺序依次打开电源:分析部主电源、分析部电源、操作部显示器电源、操作部主机电源、打印机电源。 3 启动控制软件 登陆Windows操作系统后,双击桌面上操作软件的快捷图标,或从【开始】处选择操作软件程序,启动操作软件。 ?注意:开机后观察加样针的清洗水流、水量是否正常,搅拌杆的旋转、清洗水量是否正常。 4 设置参数 申请测试前,必须至少设置完成下列参数: √点击“设置”→“系统设置”,设置系统参数。 √点击“设置”→“医院设置”,设置医院和医生信息。 √点击“定标”→“定标液设置”,设置定标液信息。 √点击“参数”→“项目设置”,设置项目参数、参考范围、定标规则、质控规则。 √点击“试剂,”设置试剂信息。 √点击“设置”→“交叉污染”,设置交叉污染信息。

√点击“设置”→“打印设置”,设置打印信息。 5 放置试剂 在试剂盘上设定的试剂位放置相应的试剂,并打开试剂瓶盖。 6 试剂空白 需要时,进行试剂空白测试。 点击“定标”→“定标申请”,申请试剂空白。 点击“开始测试”,运行试剂空白。 点击“定标”→“结果查看”,查看试剂空白结果。 7 定标 需要时,进行定标测试。 ?注意:改变试剂盒批号、更改测试参数、更换光源及其它原因等导致测定条件改变,需要新定标。 点击“定标”→“定标申请”,申请定标。 点击“开始测试”,运行定标测试。 点击“定标”→“结果查看”,查看定标结果。 8 质控 点击“质控申请”,申请质控。 申请质控后,在样本盘上设定的位置放置相应的质控液。 点击“开始测试”,运行质控测试。 点击“质控”→“实时质控”/“日内质控”/“日间质控”,查看质控结果。 9 样本分析 点击“样本申请”,申请样本测试。 ?注意:急诊申请的操作与普通样本的操作基本相同,不同这处在于申请时选中“急诊”。 申请样本后,在样本盘上设定的位置放置相应的样本。 点击“开始测试”,运行样本测试。 点击“历史结果”或“当前结果”,查看样本测试结果。 10 编辑样本结果 需要时,编辑样本结果。

免疫组化基本步骤

细胞免疫组化染色步骤 1.细胞爬片,取出后,PBS洗三遍,每次3分钟。4℃冷丙酮固定10分钟,(或用4%多聚甲醛固定30分钟),干燥30分钟。 2. 用PBS洗三次,每次5分钟,加3%过氧化氢30μl,室温孵育10分钟,(以消除内源性过氧化物酶的活性)蒸馏水冲洗,PBS洗三次,每次5分钟。 3.加1%的Triton X-100 30μl,室温孵育10分钟,增加细胞膜的通透性。蒸馏水冲洗,PBS洗三次,每次5分钟。 4.滴加正常山羊血清30μl,封闭非特异性结合位点,以消除非特异性染色,室温孵育30分钟,倾去勿洗。 5.滴加适当稀释度的一抗,空白对照组以PBS代替一抗,4℃湿盒孵育过夜。PBS洗三次,每次5分钟。 6.滴加生物素标记的二抗工作液30μl,室温孵育30分钟。PBS洗三次,每次5分钟。 7.滴加辣根酶标记链酶卵白素30μl,室温孵育30分钟。PBS洗三次,每次5分钟。 8.滴加DAB显色剂30μl,显微镜下观察显色,自来水冲洗。 9. 将处理好的玻片细胞核衬染:浸入苏木精染液染色2min,自来水洗,迅速过盐酸酒精溶液,自来水洗,过氨水溶液,自来水洗。 10.梯度酒精脱水,过70%酒精1次,95%酒精2次,无水乙醇3次,每次1min 11.二甲苯透明,过二甲苯溶液3次,每次1min。 12.中性树胶封片将有细胞的一面向下,用中性树脂封片。 稀盐酸酒精溶液:用75%酒精配制1%盐酸。 淡氨水溶液:在400ml自来水中滴2滴浓氨水(使细胞核蓝化) 另外:需1%TritonX-100增加细胞膜通透性。苏木素复染时间和盐酸酒精脱色时间需自己摸索,我是染5-6秒脱色1-2秒。盐酸酒精还可用70%乙醇配制1%盐酸。我没用淡氨水溶液。若为悬浮细胞则需涂片,20μl即可。

全自动生化分析仪校准规范

全自动生化分析仪校准规范 全自动生化分析仪校准规范(湿式) 全自动生化分析仪是临床诊断的重要手段之一 ,其检测结果是否准确对临床疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。在仪器检测结果精密度良好的前提下,仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤,为此结合国内的相关标准的基础上,就全自动生化分析仪校准的基本要求提出如下建议。 1杂散光的试验方法 1.1设定两个单试剂项目,波长设为340nm; 1.2设定上述项目的试剂位,分别以蒸馏水和亚硝酸钠标称溶液(50g/L)为试剂和样本,每个项目重复测定5测试; 1.3查看反应曲线或反应数据,以最后一点的吸光度作为所测定溶液的吸光度,共得到5个蒸馏水和5个亚硝酸钠标称溶液的吸光度; 1.4计算最小的亚硝酸钠溶液吸光度与最大的蒸馏水溶液的吸光度的差值,为杂散光。 1.5应符合标准的要求;当测定波长为340nm时,杂散光应不大于 0.5%(或吸光度不小于2.3)。 2吸光度线性范围的试验方法 2.1以340nm吸光度不低于2.0(以蒸馏水为空白)的重铬酸钾溶液为原液,用蒸馏水稀释出相对浓度分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9和10(原液)的系列溶液; 2.2设定一个单试剂项目,波长为340nm,试剂和样本均为待测溶液;通过反应曲线或反应数据查找试剂空白段的吸光度; 2.3按照浓度由低到高的顺序,每个浓度重复测定2次; 2.4以相对浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,画出散点图; 2.5用最小二乘法对所有数据进行线性拟合,按照公式(1)、(2)和(3)计算每一个点的相对偏倚;

相对偏倚=100*(A-(a+b*C))/(a+b*C) (1) 式中:A为实际测定的吸光度,a为线性拟合的截距,b为线性拟合的斜率。 22b=(nΣA*C-ΣAΣC)/( nΣC-(ΣC)) (2) a=(ΣA/n)-b*(ΣC)/n (3) 式中:A为吸光度,C为相对浓度,n为总的测定点数。 2.6应符合标准的要求:线性范围不小于2.0,各测定值的相对偏移不大 于?5,。 3吸光度稳定性的试验方法 3.1设定一个单试剂项目,波长为340nm,试剂量+样本量的总和为全自动生化分析仪的最小总反应体积,反应时间为全自动生化分析仪标称的最长反应时间或10分钟、读数间隔为全自动生化分析仪的测定周期或30秒 3.2以340nm吸光度为0.5(允许偏差为?5,)的重铬酸钾溶液为试剂和样本,查看反应曲线或反应数据,得到试剂和样本均加入后的多个吸光度值; 3.3计算所有次吸光度的最大与最小值之差。 3.4应符合标准的要求:吸光度的最大与最小值之差小于0.005。 1 4吸光度重复性的试验方法 4.1设定一个单试剂项目:波长为340nm,试剂量为全自动生化分析仪标称的最小试剂量、样本量全自动生化分析仪标称的最小样本量、反应时间为全自动生化分析仪标称的最长反应时间或10分钟、读数间隔为全自动生化分析仪的测定周期或30秒; 4.2以340nm吸光度为1.0(允许偏差为?5,)的重铬酸钾溶液为试剂和样本,连续申请20个测试,查看反应曲线或反应数据,最后一点的吸光度值为该溶液的吸光度值,共得到20个吸光度值; 4.3计算吸光度值变异系数CV, 4.4应符合标准的要求:吸光度值变异系数CV小于1%。

Roche Benchmark XT(罗氏全自动免疫组化仪)

瑞士罗氏全自动多功能组织病理检测系统 品牌:瑞士罗氏Roche 型号:Benchmark XT 上市时间:2008年应用于免疫组化(IHC)、原位杂交(ISH)及FITC标记抗体(IF)的免疫组织或细胞化学检测 实现单次运行同时完成30张IHC、ISH及IF检测,为实现个体化医疗及分子靶向治疗提供强有力的技术保障。 具备最佳检测性能,包括以下指标: 高敏感性:专利的小分子多聚体Multimer检测技术,减少空间位阻,更容易进入细胞,增加反应敏感性。 高特异性:采用单克隆抗体技术,保证抗原抗体结合的高特异性;非生物素标记的检测试剂最大程度的降低内源性生物素的背景干扰。高稳定性:试剂对温度变化具有高度的耐受;避免因试剂变质而引起的浪费。 快速工作流程:单次循环免疫组化只需要2.5~3小时完成;原位杂交需6小时完成。 条形码技术:罗氏专利技术。存储试剂信息量大,节省手工输入错误。专利的喷射清洗:双清洗与喷气清洗工作站,减少非特异背景干扰,节省一抗与探针用量。 专利液体封盖膜技术:有效防止试剂挥发,防止干片,提供稳定反应环境,保证染色均一。 专利空气涡流混匀技术:保证组织全层覆盖,试剂充分混匀,避免“边

缘效应”及“阶梯效应”。 专利Thermopad温控技术:每张切片独立温控,37 ℃ 至95 ℃ 4分钟,95 ℃ 至37 ℃ 仅 7 分钟。提供最佳的反应动力学环境。 检测方案多样化及个性化(为各厂家最齐全的):支持多种实验方案(IHC, ISH, SISH, IF);支持多种样本(石蜡切片、冰冻切片、细胞学样本);支持多种染色方式(单染/双染/多重染色);支持多种反应温度同时监控;支持多种抗原修复方式;支持多种复染方式。专利的脱蜡液EZ prepTM:不含酒精与二甲苯的脱蜡液,符合环保标准。 Benchmark XT组织病理检测系统技术参数 条形码技术; 喷射清洗技术; 液体封盖膜技术(LCS); 空气涡流式混匀技术; Themopad独立温控技术: 专利环保脱蜡液EZ prepTM; 快速工作流程,单次免疫组化需2.5~3小时,原位杂交只需6小时; 多样化的检测方案,可在一切片上同时实现多重染色; 个性化的设置,用户可自行设置修复方式,反应温度及复染方式等。

开放式全自动管式化学发光免疫分析仪

全自动化学发光免疫分析仪 技术审查指导原则 (第一次征求意见稿) 一、前言 本指导原则旨在指导注册申请人对全自动化学发光免疫分析仪注册申报资料的准备及撰写,同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。 本指导原则是对全自动化学发光免疫分析仪的一般要求,申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用,若不适用,需具体阐述理由及相应的科学依据,并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件,但不包括注册审批所涉及的行政事项,亦不作为法规强制执行,如果有能够满足相关法规要求的其他方法,也可以采用,但需要提供详细的研究资料和验证资料,相关人员应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的,随着法规和标准的不断完善,以及科学技术的不断发展,本指导原则相关内容也将适时进行调整。

二、适用范围 化学发光免疫分析根据化学发光物质的类型和发光特点,可分为电化学发光免疫分析和化学发光免疫分析,其中化学发光免疫分析根据发光剂的不同,可分为直接化学发光免疫分析、酶促化学发光免疫分析和鲁米诺氧途径免疫分析。目前,各类型化学发光免疫分析的常见发光剂包括:电化学发光剂为三联吡啶钌[RU(bpy)3]2+,直接化学发光剂为吖啶酯(AE),酶促化学发光剂为辣根过氧化物酶(HRP)催化鲁米诺(3-氨基苯二甲酰肼,luminol)及其衍生物或者碱性磷酸酶催化3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷(AMPPD),鲁米诺氧途径发光剂为酞箐、二甲基噻吩衍生物及Eu螯合物。 化学发光免疫技术根据反应过程中标记物是否需要分离可分为均相反应和非均相反应。均相反应主要应用于鲁米诺氧途径免疫分析中,而非均相反应则应用于其他类型化学发光免疫分析中,通过采用固相分离、过滤分离、珠式分离、顺磁性颗粒分离等方式实现游离标记物和免疫复合物标记物的分离,其中顺磁性颗粒分离较其他分离方式更为常用。目前,基于鲁米诺氧途径免疫分析原理的产品还比较少,临床常用的全自动化学发光免疫分析仪更多地采用非均相反应模式。

免疫组化常用方法介绍及个人经验总结

免疫组化常用方法介绍及个人经验总结 1 、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。 2 、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3 、分类 1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。 3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP 法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。 4 、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1)免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用较广。 2)免疫酶标方法 免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60 年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前最常用的技术。 本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准确,对比度好,染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。 免疫酶标方法的发展非常迅速,已经衍生出了多种标记方法,且随着方法的不断改进和创新,其特异性和灵敏度都在不断提高,使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的有ABC 法、SP 三步法、即用型二步法检测系统等。

全自动生化分析仪7600操作规程

全自动生化分析仪7600标准化操作程序文件 单位:山东省平度市人民医院 部门:检验科生化室 文件编号: SHJW20110310 版本:第二版 批准实施日期: 2011年03月10日 有效期:一年 复审计划:每年进行复审,测定系统发生变化时需进行修订编写者:张关磊 审批者:张建军 保管者:张建军 修订记录:

全自动生化分析仪7600标准化操作规程1、操作流程 开机检查→打开电源→水源→仪器状态确认→试剂准备→校验与质控测定→一般样品测定→复查样品测定→急查样品测定→仪器状态测定→结束操作→关闭电源、水源→关机检查。 2、基本使用流程 2.1开机检查 接通电源前需进行开始工作检查,如加样机构、试剂分注机构、反应容器清洗机构、各种清洗液量的检查。操作部检查、轨道的检查。样品针、试剂针有无脏物附着、是否弯曲。反应容器清洗喷嘴和试剂吸量器是否有漏气和气泡等。 2.2打开水源、电源 此法只对不使用定时器的仪器说明。 (1)打开水源开关和纯水机电源,水压要求0.5-3.5Kgf/cm2,电传导率为1us/cm以下。 (2)打开样品供给部左侧的电源开关(绿色按钮),为了使试剂藏库工作,分电盘的开关通常是开着的。仪器显示初始画面并自动进行初期动作。所有指定准备工作进行完呈待机状态。2.3仪器状态确认 (1)报警确认: 仪器发生报警时,触摸“报警”(Alarm)键,显示报警窗口,显示详细说明和处理方法,按处理方法进行处理。 (2)流路内气泡的确认: 若发现流路内有气泡,则触摸实用工作键(Utility)键、维护(Maintenance)键,显示维护保养画面。触摸维护“排气”后,按“实行”(Select)键。 (3)吸光度的确认: 检查吸光度值,确认检查值在允许范围内。 A.触摸“Maintenance”键,维护画面打开。 B.触摸“Maintenance”键,“光度计检查”键后,按“实行”(Select)键。 (4)反应槽温度的确认: A.触摸主菜单的观察(System Overview)键,观察窗口打开。确认温度分别在37±0.1摄氏度。

罗氏全自动免疫组化染色仪特点之欧阳家百创编

目前罗氏独有的SISH技术和北京金菩嘉的FISH技术两者区 别如下: 欧阳家百(2021.03.07) 由于FISH方法中的荧光容易淬灭,保存时间短,不利于病理科存档。没有相应的仪器完成全自动检测,对操作人员技术要求高,荧光显微镜价格昂贵;但技术开展较早,有较好的市场声誉。SISH与目前应用的FISH方法对比其结果符合率大于98%;可用仪器全自动完成检测;操作相对简单;不需特殊显微镜;结果可长期保存;将是未来分子病理发展的重点,目前罗氏可提供Her2和EGFR探针,可同时和17号染色体在同一张片子上显色,未来会有TOP2,MIT等各种新的探针提供给临床。 FISH:荧光原位杂交,需用荧光显微镜观察。 SISH:银染原位杂交,可用光学显微镜观察。 ●Benchmark XT 仪器介绍 Benchmark XT病理检测系统是罗氏于2008年推出的最新型全自动多功能的组织病理检测系统,具有以下优势:?运用于免疫组化和原位杂交技术

免疫组织化学技术与原位杂交技术是近年来病理诊断发展先进的检测技术;为临床实现个体化及分子靶向治疗提供有力的支持。 ?具备最佳检测性能,包括以下指标:1.高灵敏度2.高特异性检测3.高稳定性4.全液体试剂5.条形码技术6.专利的喷射清洗7.多喷头分配器8.专利液体封盖膜技术(LCS)9专利空气涡流混匀技术10.专利Themopad温控技术11.检测方案多样化及个性化(为各厂家最齐全的)12.专利的脱蜡液 1.仪器可以开展哪些新项目?会对学科发展和临床诊断有哪些指导作用? 仪器除了解决常规IHC的工作,还可以进行基因检测ISH,如鼻咽癌和Bukitt’s淋巴瘤的EBER,宫颈HPV 6和16型检测, 乳腺癌her2/new基因检测等。这些基因检测目前对临床的靶向治疗有指导作用,同时在病人癌前预测方面有价值,值得推广。 2.新的广东省免疫组化收费是多少钱、银染原位杂交收费是多 少钱? 新的广东省免疫组化收费,大概是200元左右/项;银染原位杂交收费大概是2200元左右/项。 3.该设备可给医院和科室解决哪些问题? 减少免疫组化染色工作中手工操作带来的误差,使操作程序标准化,缩短实验时间,提高科室工作效率,可满足科室免疫组化质量控制。满足免疫组化需求及分子病理项目的开展,为临床实现个体化及分子靶向药物治疗提供有力的支持。环保

CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪标准操作规程-SOP

CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪标准操作规程 一、CL-2000i全自动化学发光免疫分析仪标准操作规程(开关机和使用程序) 1 开机前检查 注意:每天开始测试前,请将试剂盘盖上的防冷凝水塞子取下;否则,可能导致机械复位失败,试剂针被撞弯。 a. 检查电源,确认电源有电并且能够提供正确的电压。 b. 检查样本调度模块、操作部和输出部间的通讯线和电源线,确认已连接牢固且没有松动现象。 c. 检查打印机内是否有足够的打印纸。若不够,请添加打印纸。 d. 检查废液桶,查看桶内废液是否排空。若未排空,请排空废液桶。 e. 检查废液连接,确保废液管无弯折,下水道排液口不高于仪器废液出口。 f. 检查样本针、试剂针,确认无污物,无弯折。 g 检查样本放入区、重测缓存区和样本回收区,确保无样本架和脏物;检查传送通道、常规通道 和返回通道,确保通道上无障碍物。 h 检查试剂盘盘盖是否盖好; i. 检查分离液是否充足,如不够,请添加。 J 检查反应杯余量,如不足,请装载反应杯。 K 检查底物是否充足。如不足,请更换底物。 L 检查固体废料箱和下料区反应杯托盘,清空废料箱的反应杯和下料区托盘。 2 开机 按下列顺序依次打开电源开关:外置气泵(若选配)、仪器主电源开关、样本调度模块电源开关、分 析模块电源开关、打印机、操作部显示器和主机电源、计算机显示器和主机电源。 登录Windows操作系统后,系统会自动启动CL-2000i操作软件。 3 确认仪器状态 确认系统状态(打印机状态、系统状态、和LIS连接状态)、分析模块状态、故障/报警状态、试剂/ 校准状态、维护报警状态,以及子系统状态。 4 装载试剂及耗材 ?装载免疫试剂 仪器空闲状态下,打开试剂盘盖,在试剂盘上的试剂位放置相应的试剂。放完试剂后,盖好试剂盘 盖。 注意:请勿将液体洒落在试剂盘控制按钮上,否则可能导致按钮损坏。 ?装载分离液

项目一全自动生化分析仪技术参数要求

项目一:全自动生化分析仪技术参数要求

二、要求具有以下功能及特点。 、条形码样品试管。 、样本自动预稀释功能。 、超范围重检功能。 、血清外观检测功能。 、凝块检测功能。 、高质量石英玻璃比色杯,免日常保养,使用寿命大于年。、反应系统采用半导体接触式传导恒温系统,免日常保养。、每小时用水量小于7.0升。 、可以在运行中装载试剂。 、光源采用脉冲式氙灯,使用寿命大于年。 、同时对一个项目使用个波长检测。 、智能双向通讯。 、仪器内置,可进行远程诊断。 、测定项目齐全。 、具备电解质测试功能,秒完成个电解质项目。 项目二、呼吸机技术参数要求 一、技术参数

?适用于成人和儿童,带雾化功能; ?每台带:的如下配置:满足呼吸机用气要求的空气压缩机、带夹板的硅胶模拟肺、全 套硅胶呼吸管路及接头、气体加温湿化装置、彩色液晶显示屏、含内置电池(当外界供空气源时能正常工作不少于小时); ?通气模式:、、、、、; ?压力触发灵敏度:;流速触发灵敏度:-20L ?潮气量: ?压力支持水平: ?压力控制水平: 、: ?吸入氧浓度:连续可调 二、监测参数 潮气量(吸、呼)、每分钟通气量、氧浓度、气道压力(含峰压、平均压、呼气末正压),总计呼吸频率、自主呼吸频率、自主分钟呼气量。 三、售后服务 免费保修两年,维修时提供备用机。 四、付款 冲标公司在接到中标通知书三个工作日内把中标价的款项打到购买方单位帐号上作为 “签约保证金”,待合同签定后全部退还,然后双方签定合同,不能按时(接到中标通知书三个工作日内)签定合同恕不退还“签约保证金”。 ?机器验收合格后,满半年付款,余部分作为质保金满一年无质量问题付清。

罗氏C501全自动生化分析仪常见故障及处理方法[1]

有害信息的干扰。其次,要积极地发挥专业特长,开展用户信息能力的培训和教育工作;介绍信息技术发展状况;发布最新的数据库信息;指导医护人员熟悉网络环境,提高网络获取信息的能力。要教会他们熟练掌握检索系统,学会使用关键词和通配符。对常见的网页结构、网络软件及程序也要有一定了解。指导不同的医护人员利用不同的专业数据库,尤其是要重点关注国内外比较权威的专业数据库和网站。【参考文献】 [1] 李南南.医院图书馆服务模式之我见[J ].医学信息学杂志,2008, 29(2):27-28. [2] 吴艳萍.怎样当好医院图书馆的知识导航员[J].现代医院,2006,6 (4):110-111. [3] 邓湘琳,刘险峰.信息迷航与网络信息素养教育的探索[J ].高校图 书馆工作,2002,22(5):4-5,39. [4] 张雅茹,郭晓玲,赵阿龙.常用医学搜索引擎简介[J ].西北国防医 学,2007,28(6):467-468. [5] 张亚莉.信息素养内涵的建构[J ].图书馆论坛,2005,25(5):53-55,117. 收稿日期:2009-01-10;修回日期:2009-04-04 责任编辑:李新志 数字化摄影系统的应用与维护体会 吴初阳,刘行超 作者单位:江苏省无锡市第三人民医院影像科214041 【主题词】 摄影术/仪器和设备 【中图分类号】 R445 【文献标识码】 B 【文章编号】 1009-6647(2009)19-4628-01 随着数字化医学摄影设备的广泛使用,应用过程中需要不断的维护,才能保证设备的长久使用。现将我院在应用数字化摄影系统以来的体会总结如下。1 机房管理 机房应保持清洁、干燥、通风。投照间温度维持在摄氏17~26℃之间,湿度在10%~70%之间,而控制站机房温度应维持在摄氏20~25℃之间。每日工作前应打开换气设备使室内空气流通。患者入内检查时,随身物品要放在指定位置,以免细小物品进入机器内部。如遇下雨天穿鞋套或换拖鞋后再进入。每日工作结束后要切断全部电源。2 系统维护 每日开机前应用拧干的湿布擦拭探测器的外壳及探测计算机的通风格栏。为干燥清洁摄影头而设立的氮气系统要每日检查压力表,其指针指向红色区域时应及时更换(一般情况下,一瓶氮气可用1a ),要保证氮气系统一直处于开通状态。控制站计算机开机时应按照先外设、后主机的顺序进行。现在的计算机虽然本身散热性能很好,但过高的温度仍然会使计算机工作时产生的热量散不出去,轻则缩短机器使用寿命,重则烧毁计算机芯片或其他配件,而温度过低则会使计算机各配件之间接触不良,从而导致计算机不能正常工作,最好在安放计算机的房间安装空调,以保证计算机正常运行时所需的环境温度。 使用过程中最好能一个月清理一下计算机机箱内部的灰尘,做好机器的清洁工作,以保证计算机的正常运行。静电有可能造成计算机芯片的损坏,为防止静电对计算机造成损害,在打开计算机机箱前应当用手接触暖气管等可以放电的物体,将本身的静电放掉后再接触计算机的配件[1]。 在安放计算机时将机壳用导线接地,可以起到很好的防静电效果。显示屏最好安装保护屏,以达到降低辐射,防尘防飞沫的目的。 经常使用计算机者,由于荧屏的光线比较强、图像变换比较快,容易使操作人员的视觉产生疲劳,应注意保护自己的视力。将显示器的色温调节至6500K 通常是最适合亚洲人的视觉习惯的,其亮度、对比度都比欧洲的9300K 低一些,不刺眼、看着很舒适为宜。工作人员在使用计算机1h 左右要休息几分钟,向远处眺望,让调节视力的眼肌得以放松。 软件方面,系统中不允许安装与工作无关的软件。时常清理随计算机启动时不必要的启动项目,会使计算机的启动速度加快,而且可以空出更多内存以运行需要的项目。当程序运行需时较长时,不应同时打开其他程序,以防死机。每日工作结束后,要及时删除系统生成的临时文件,以提高系统的运行速度。【参考文献】 [1] 郭国新,张树义,贾小芳.放射治疗单位的放射卫生管理现状分析 [J].医药论坛杂志,2005,226(7):6294. 收稿日期:2009-01-10;修回日期:2009-04-08 责任编辑:李新志 罗氏C 501全自动生化分析仪常见故障及处理方法 左瑞菊 作者单位:河北省沧州市人民医院检验科061000 【主题词】 自动分析/仪器和设备;设备失效;维修 【中图分类号】 R447 【文献标识码】 B 【文章编号】 1009-6647(2009)19-4628-02 罗氏co bas C501是生化和电解质模块组成,采用的是罗氏的封闭试剂盒(试剂是非接触方式如超音波搅拌),主要为急诊生化实验提供的,具体操作简单,携带污染少,软件功能丰富等 特点。经过我一年来使用,积累了一些常见故障的处理经验,供 同道参考。 (1)Cell blank out o f limits (10x /2x )杯空空白报警,在测试过程中出现此类报警,仪器如果能继续做,就等出结果后再处理,若停止,就要寻找原因并处理: 看是否有不清洁的杯子,

免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结

免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结 1、方法操作不难,最大的难处是出现异常结果时如何解决?这就需要掌握免疫组化实验原理,每一步知道为什么这样做,这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间,这三者一般是相互成反比的(相对),其中浓度是最重要的先决条件,温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说,可以有4度、室温、37度,我推荐4度最佳,反应最温和,背景较浅;而37度反应速度较快,时间较短;室温我不太提倡,除非你每次都把环境温度控制在一定的范围,否则,尽量选择前两者。 2、免疫组化最大的优势是定位和定性。相比于其他蛋白检测方法,免疫组化具有定性灵敏度高、定位较直接准确,是定位检测分析首选方法。尤其对于有些因子的转位研究十分有用。 3、免疫组化结果定量分析的前提是高质量的染色切片。免疫组化结果也能定量分析,但必须是背景染色浅而特异性染色较深的情况下,分析最为准确,这种原则可能也是我们日常审稿时判定研究结果的必备条件。 4、免疫组化实验一定要设置阳性对照和阴性对照。阳性对照一般是用肯定表达这种抗原的切片来做;阴性对照一般是用PBS或非一抗替代一抗来进行反应,其余步骤均一致。前者是排除方法和实验系统有无问题;后者是排除有无一抗外的非特异性染色。 5、免疫组化的应用广泛,是当前实验研究的最重要方法之一。如今发SCI论文时,明显感觉仅靠量化的数据来发文章很难,加一些形态学数据或图片,老外十分欢迎,可能是怕你学术造假吧。当然也不能做假阳性或假阴性结果。 6、免疫组化技术掌握与否的鉴定标准是同一切片或不同切片中不同抗原均从摸索浓度或条件而做出优良的染色切片。我在平时带教中就发现许多研究生把我已经摸索很成熟的反应条件、浓度、方法步骤,重复运用于同一性质的切片和同一种抗体,做出来后就觉得自己已经掌握了免疫组化方法,更换一种抗体后,居然连二抗的种属来源都拿错了。失败往往促进你去思考试验原理和过程,成功有时也加快你自傲。 7、实验方法需要动手+动脑。如今我还不敢说我在免疫组化什么都知道。我只所以今天敢在这里说这说那,这是因为我经过了反复的动手+动脑,把理论原理运用于实践,在把实践中发现的问题带到理论知识中去解决,最终把理论与实践融会贯通。 一、概念和常用方法介绍 1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。 2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。 3、分类 1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较

全自动生化分析仪测量方法

全自动生化分析仪测量方法 全自动生化分析仪测量方法 全自动生化分析仪目前在测量血液常规项目时,是以比色法为主,主要原理是运用光谱技术中不同原子吸光不同而测量的,那么对于ISE模块的功能实现,主要有两种方法,一是比色法,二是间接法。比色法因其测量精度,准确度等与所要求的相差太大,此法在医学的早期实验室检查中使用,已经是属于淘汰的用法。间接法,其方法原理与目前市场上存在的其它仪器所用直接法相似,但ACA的脆弱性所致,为防仪器内部被堵塞,对样品的要求极为严格,需经常规分离再经稀释后方可测量,而一般的生化ISE模块对样品的稀释倍数又大都在30倍左右,在如此大的稀释倍数下,对管路确是有益,但从数据统计处理角度来看,这样的测量,将会把误差同比例放大,那么这样测到的结果,准确度和精确度不能达到要求。 另外,ACA所采用的间接法与目前其它仪器所采用的直接法的差异,在此引用一本检验行业的权威之作《临床生化检验》一书对此的描述:间接电位法:样品与标准液要用指定离子强度与pH的稀释液作定量稀释,再行测定,此时样品和标准液的pH和离子强度趋向一致,所测离子活度等于离子浓度,间接法所测结果与火焰法相似。在高脂血症或高蛋白血症的血清样品中,由于单位体积血清中水量明显减少,若用定量样品作稀释后,再用间接法测定,会得到假性低血钠(或钾),但直接法能真实地反映血清中离子的活度,据报告:直接法比间接法约高2~4%。 通过对ACA的了解,也发现ACA对使用者的解放度不够,想人类自从走上电子电器时代,辅助电子产品的宗旨之一就是解放人的时间,而ACA仪器,因庞大而复杂的系统,在检测操作前有预热、校正、模块检测、纯水检测、系统试剂检测等诸多繁杂工作要准备,此为常态流程,但若仪器再出故障,工作量势必会大幅增加。尽管为全自动工作仪器,但却不利于检验科室工作的顺利进行,以大型三甲医院为例,每天的病患标本多则上百,若仅在ACA 上花费如些之多的时间,工作的开展将使效率大大降低。从费用方面讲,进口设备因为技术垄断,在国内的市场上尚无有力竞争对手的情况下,有一定的定价权,更有市场垄断之疑,售价少则十多万,多则几十万,而对于带ISE模块的ACA仪器则又在同等基础上贵出约5到8万,且大多只能检测三项指标K、Na、Cl,而同等产品,将不同项目分离单测,国内品牌售价则要低较多,如国内品牌迈瑞。在试剂消耗上,因ACA大都是整套配套试剂,所以用于电解质的测定上,相应的成本就会上升,对于中小型医院,因各种原因,只能对常见疾病做治疗,可能真正所需只是电解质的检验报告,如此,为测定少数项目而使用ACA,对医院来讲,设备的利用率不高,造成一定的资源浪费。

全自动生化分析仪工作原理(1)

一、基本结构 (一)按照反应装置的结构,自动生化分析仪主要分为流动式(Flow system)、分立式(Discrete system)两大类。 1.流动式指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。 2.分立式指各待测样品与试剂混合后的化学反应都是在各自的反应杯中完成。其中有几类分支。 (1)典型分立式自动生化分析仪。此型仪器应用最广。 (2)离心式自动生化分析仪,每个待测样品都是在离心力的作用下,在各自的反应槽内与试剂混合,完成化学反应并测定。由于混合,反应和检测几乎同时完成,它的分析效率较高。 3.袋式自动生化分析仪是以试剂袋来代替反应杯和比色杯,每个待测样品在各自的试剂袋内反应并测定。 4.固相试剂自定生化分析仪(亦称干化学式自动分析仪) 是将试剂固相于胶片或滤纸片等载体上,每个待测样品滴加在相应试纸条上进行反应及测定。操作快捷、便于携带是它的优点。 (二)典型分立式自动生化分析仪基本结构 1.样品(Sample)系统 样品包括校准品、质控品和病人样品。系统一般由样品装载、输送和分配等装置组成。 样品装载和输送装置常见的类型有: (1)样品盘(Sample disk),即放置样品的转盘有单圈或内外多圈,单独安置或与试剂转盘或反应转盘相套合,运行中与样品分配臂配合转动。有的采用更换式样品盘,分工作和待命区,其中放置多个弧形样品架(Sector)作转载台,仪器在测定中自动放置更换,均对样品盘上放置的样品杯或试管的高度、直径和深度有一定要求,有的需专用样品杯,有的可直接用采血试管。样品盘的装载数,以及校准品、质控品、常规样品和急诊样品的装载数,一般都是固定的。这些应根据工作需要选择。 (2)传动带式或轨道式进样即试管架(Rack)不连续,常为10个一架,靠步进马达驱动传送带,将试管架依次前移,再单架逐管横移至固定位置,由样品分配臂采样。 (3)链式进样试管固定排列在循环的传动链条上,水平移动到采样位置,有的仪器随后可清洗试管。 分配加样装置大都由注射器、步进马达或传动泵、加样臂和样品探针等组成,①注射器(syrine unit)。根据注射器直径和活塞移动距离的多少,定量吸取样品或试剂。它的精度决定加样的

全自动化学发光免疫分析仪Immulite2000标准操作规程完整

IMMULITE ? 2000 全自动化学发光免疫分析仪 标准操作程序 本文件仅供参考,各实验室需根据各自情况建立自己的操作规程 IMMULITE?2000全自动化学发光免疫分析系统标准操作规程

SOP编码:页数: 制定人签名:日期: 审核人签名:日期: 批准人签名:日期: 生效日期:颁发日期:周期性审查:年一次 修订登记: 审查登记:

[目的]描述IMMULITE?2000全自动化学发光免疫分析系统的使用和维护。 [范围] 适用IMMULITE?2000全自动化学发光免疫分析系统的操作。 [仪器工作原理和检测过程] 1 IMMULITE 2000使用包被特定抗体的聚苯乙烯珠子作为固相,包被珠放在一个特定的反应杯中,从而进行温育,清洗以及信号发生。

2. 样本与结合了碱性磷酸酶的试剂温育反应结合之后,通过高速离心将剩余试剂甩到与反应杯同轴的废液管路中。系统在几秒钟内完成四次离心清洗,以便与系统的其他同步。去除未包被试剂的包被珠仍然保留在反应杯中。 3. 包被珠上的结合标记随后同发光底物进行定量发光。当包被珠上结合的碱性磷酸酶标记同化学发光底物反应时,就产生发光。发光强度同样本中待测物的含量有关。仪器通过光电倍增管检测发光强度,随后计算出每个样本的结果。 4. 操作者在IMMULITE 2000上运行测试时,需要做下列操作:: 4.1进行每日探针清洗工作。 4.2 选择RUN IMMULITE 2000按钮。 4.3 查系统状态指示,加满或者清空耗材或者废物。 4.4 初始化样本和试剂加样器、蒸馏水喷嘴和底物喷嘴。 4.5 使用图像扫描器扫描试剂转盘上的过敏原试剂楔。 4.6在样本转盘上装载病人血清、质控、校正液和稀释液。 注意: 运行仪器需要用到的试剂都在 IMMULITE 2000试剂盒中。只有需要预稀释的测试项目才会有稀释液。 4.7 在工作列表列表界面为样本指定测试项目以及编号。 4.8 检查试剂以及与之匹配的包被珠是否足够完成所需测试。 4.9选择RUN开始实验。 5. 仪器自动检测过程: 在操作者按下 RUN 按钮之后,Immulite 2000 自动开始检测并输出检测结 果。 5.1 在反应杯中加入一个包被珠。 5.2 样本,特定的试剂和水加入到包被珠上。 5.3 反应杯运到温育圈,在37°C (98.6°F)的环境中震荡温育。 5.4 清洗测试杯。 5.5 加入底物,发光。 5.6 光电倍增管(PMT)检测光子强度,计算结果并打印。 [免疫分析原理] 1.双抗体夹心法:双抗体夹心法使用ALP标记的抗体在检测单位中进行反应。 1.1 标记的抗体的液相试剂加到检测单位中,标记有ALP的特异性抗体(Ab※ALP)与样品中的相应抗

常用免疫组化

一、泌尿与男性生殖系统肿瘤 前列腺癌:CK、P63、34E12、PSA、P504S(9AMAC)、AR 前列腺增生/腺瘤:CK、P63、34BE12、P504S 肾癌:CK、EMA、Inhibin、Melan-A、CK7、Vimentin、PAX2、CD10 肾母细胞瘤:WT-1、CK、P53、Ki-67 膀胱尿路上皮癌:CK7、CK20、P53、Ki-67、P63 精原细胞瘤:CK、PLAP、CD117、LCA、OCT3/4 二、淋巴造血系统肿瘤 胸腺肿瘤:CK、CD3、CD5、CD20、TdT、EBV* 霍奇金淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV*、PAX -5 非霍奇金淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、TdT、CD43 间变大细胞淋巴瘤:CD30、CD15、ALK-1、EMA、CD3、CD20、EBV* 弥漫性大B细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD43、CD30、Ki-67 小B细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD10、CD20、CD23、CD79α、CyclinD1、TdT T细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD43、CD45RO、CD79α、TdT、TiA-1、Perforin 套细胞淋巴瘤:CD3、CD5、CD20、CD79α、CyclinD1、TdT、Bcl-2、Ki-67 T/NK细胞淋巴瘤:CD3、CD20、CD45RO、CD79α、CD56、TiA-1、Perforin、粒酶B 淋巴上皮病变/癌:CK、EMA、S-100、Ki-67、P53、EBV*、P63、CD30、CD20

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