“生物组织中脂肪的鉴定”实验方法的拓展
“生物组织中脂肪的鉴定”实验方法的拓展
[摘要]通过撕取内表皮法、血涂片法、压榨法、水油分界法、滴加法等对脂肪的鉴定实验进行改进和优化，提高实验成功率。[关键词]脂肪的鉴定苏丹Ⅲ试剂撕取内表皮法血涂片法压榨法水油分界法滴加法
本实验在必修一教材中属于必做实验，但因其对实验材料的选择和处理要求较高，如花生要提前3－4小时浸泡，浸泡时间过短不易切片，过长则切下的薄片不易成型，还有高倍镜的使用等等。尤其是要求切出在显微镜下可清晰观察到脂肪粒的花生薄片，这对于几乎没有切片基本功的高一新生来说难度较大、成功率较低。笔者通过撕取内表皮法、血涂片法、压榨法、水油分界法、滴加法等对脂肪的鉴定实验进行改进和优化，在实验材料的选择、实验方法和实验过程方面进行了一些改进，取得的较好的效果，提高实验成功率，同时也增加学生的学习兴趣和自信心。
方法一、撕取内表皮法
①取浸泡过的花生种子，去掉种皮，分开两片子叶；
②从子叶的内侧面边缘下刀，薄厚均可，注意不要切断；
③用手捏住切开部分，顺着子叶内侧面方向撕取，连带揭下一层薄膜；染色后，在显微镜下可见薄膜的单层细胞排列紧密，被染色的脂肪粒清晰可见。显微镜下观察到的图片如下：
优点：撕取的表皮较薄，经苏丹Ⅲ试剂染色后在显微镜下可找到单层的细胞；且可以清晰的看到被染成橘黄色的脂肪颗粒；缺点：内表皮不宜撕取，同时要求操作者能熟练使用高倍镜。
(笔者在实验中发现，染色3分钟后在显微镜下刚开始观察到的花生种子的子叶细胞被染成了橘黄色，且橘黄色的颗粒较多，观察起来不清晰，但是放置两小时后再次观察时更加清晰。如上图)
方法二、血涂片法
①取浸泡过的花生种子，去种皮，研钵研磨碎成花生泥；②取一小团花生泥于载玻片上的右侧约1／4－1／3处画一条细线，左手将载玻片固定在左面上，自该线的右侧以300－400夹角向左侧推动另一载玻片，形成花生泥薄膜；③染色后，在显微镜下被染色的脂肪颗粒清晰可见。
此法优点：该法模仿的是血涂片观察血细胞的原理，实验过程中不需制作切片，操作简单；缺点：研磨要充分，染色后滴加酒精洗去多余的浮色的同时，脂肪分子也被酒精溶解成小的脂肪颗粒，染色后的脂肪颗粒较小一些，由于每位学
检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质教学设计
《检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质》的教学设计 梅县高级中学生物组李清梅 一、教材分析： 1、教材的地位和作用 新教材把实验安排在学习蛋白质、糖类和脂质等知识内容之前，一方面为接下来的学习各类有机物奠定感性认识基础，另一方面，由于实验内容的设置上注重学生对材料的选择，对检测结果的预期和实验方案的设计，因此有利于培养了学生的实验探究的能力，为以后各章节的探究性实验的顺利开展搭建了一个较高的起点。 2、教学目标 （1）知识： ①尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 ②推断组织液中有机物的种类和大致含量 （2）能力： ①学习实验探究的方法 ②初步掌握评价和报告实验结果的能力 （3）情感态度价值观：严谨认真合作学习敢于质疑善于反思 3、教学重点难点 重点：检测生物组织中的糖类，脂肪和蛋白质的原理和方法。 难点：实验所用材料多，试剂种类和使用方法多，课堂容量大。 突破：面对全体学生，做好充分的准备:材料仪器准备，学生的情感和知识准备。课堂上发挥小组长的协助管理作用，合理有序地组织教学。 二、学情分析 1、学生的思维水平、学习能力已经发展到较高阶段，乐于并有能力接受自主探究的学习模式。 2、感兴趣，有实验操作的基础。 3、材料试剂多，任务繁重，合作学习显得尤为重要。 三、教法学法 1、学法：任务驱动，自主探究合作学习，分享交流。 2、教法：组织者，引导者，注意生成性问题的再探究。 四、教学过程 1、实验动员，知识准备 教师：介绍有关实验原理和检测方法（见板书） 学生：讨论交流，合作学习（讨论题见板书） 2、创设情景，任务驱动 提供ABCD四种未知组织液，（梨汁、马铃薯匀浆、豆浆、花生种子匀浆）
生物实验室安全管理制度培训课件
大柳河镇中学 生物实验室安全管理制度 1、生物实验室要有消防设备。 2、使用危险药品要特别引起学生注意保护。 3、离开实验室，要检查水龙头是否关紧，用电器是否断开，加热设备是否熄灭，门窗是否关好等。 4、割伤后，轻的用硼酸水或双氧水洗干净，涂上碘酒或经汞水包扎。重的去医院止血、缝合、包扎。 5、进行安全操作，防止酒精或酒精喷灯和腐蚀性化学元素药品烧伤。 6、实验室内的毒品，易烧品、腐蚀品要严格药品保管的规定执行，防止中毒和火灾事故。
学校实验室管理制度 一、仪器借用制度 1、仪器由实验教师专人保管。教师在教学中所借用的仪器，应先填好借用单，注明借用品名、数量和归还日期。 2、仪器借用应按时归还，借前和归还时，要对仪器的质量性能状况进行全面细致的检查。 3、仪器要妥善保管，帐物要相符，绝不允许流失或移作它用。出借校外的，须经主管校长或教导主任和仪管员商讨同意，未经同意不得出借。若擅自借出或流失在校外的仪器，必须及时追回。因工作失职而造成后果的，对管理人员要给予批评教育，并追究有关人员的相应责任。 4、主管领导和实验教师应经常对学校的仪器进行清点核对，并定期进行全面的清查。 二、仪器损坏赔偿制度 1、经学校主管人员同意，校外单位和本校个人借用的仪器，若人为造成破损的，应照价赔偿。 2、学生未经实验教师或课任教师同意，擅自操作而损坏仪器的，应照价赔偿。 3、仪器因被盗或火灾等原因造成损失和损坏的，要追查有关人员的责任，并视情节轻重，给予相应的处理和赔偿。
4、对赔偿的仪器金额，原则上应按现行价格，经学校主管领导同意，相应予以赔偿。 三、仪器报损制度 1、各类仪器药品，一学年应全面核查一次。对在教学过程中损坏的仪器，应及时修理，无修理价值的器材，应填好报损单，单独存放。特别对贵重和生活中实用仪器的报损，必须经学校主管领导和县主管部门鉴定后，才能办理报损注销手续。 2、对已办理报损的仪器，应及时补充添置，以保证实验教学活动的正常开展。 3、对报损的仪器，应在报损单内注明损坏程度及原因。 4、对已报损的仪器，应及时在仪器明细帐的支出栏和结存栏中分别填好支出和结存的数量和金额，并注明减少原因。 四、仪器使用制度 1、实验仪器是为教学服务的，必须保证各科演示实验和学生实验按要求及时开出。 2、各类仪器要及时验收、编号入柜、登记入帐。仪器的存放保管要做到“三分三定”、“六防四清二保养”。对易燃、有毒药品应设地窖或专柜存放，各种仪器都要处于良好的备用状态。 3、严格管理和使用好剧毒药品。取用剧毒药品，应有两人以上才可打开专柜定量提取，并要及时作好记录，严防意外事故的发生。 4、仪器使用前，应认真阅读使用说明书，明确性能和使用方法；使用时要严格操作规程，不得发生因使用不当而造成仪器损坏等事
“生物组织中脂肪的鉴定”实验方法的拓展
“生物组织中脂肪的鉴定”实验方法的拓展 [摘要]通过撕取内表皮法、血涂片法、压榨法、水油分界法、滴加法等对脂肪的鉴定实验进行改进和优化，提高实验成功率。[关键词]脂肪的鉴定苏丹Ⅲ试剂撕取内表皮法血涂片法压榨法水油分界法滴加法 本实验在必修一教材中属于必做实验，但因其对实验材料的选择和处理要求较高，如花生要提前3－4小时浸泡，浸泡时间过短不易切片，过长则切下的薄片不易成型，还有高倍镜的使用等等。尤其是要求切出在显微镜下可清晰观察到脂肪粒的花生薄片，这对于几乎没有切片基本功的高一新生来说难度较大、成功率较低。笔者通过撕取内表皮法、血涂片法、压榨法、水油分界法、滴加法等对脂肪的鉴定实验进行改进和优化，在实验材料的选择、实验方法和实验过程方面进行了一些改进，取得的较好的效果，提高实验成功率，同时也增加学生的学习兴趣和自信心。 方法一、撕取内表皮法 ①取浸泡过的花生种子，去掉种皮，分开两片子叶； ②从子叶的内侧面边缘下刀，薄厚均可，注意不要切断； ③用手捏住切开部分，顺着子叶内侧面方向撕取，连带揭下一层薄膜；染色后，在显微镜下可见薄膜的单层细胞排列紧密，被染色的脂肪粒清晰可见。显微镜下观察到的图片如下： 优点：撕取的表皮较薄，经苏丹Ⅲ试剂染色后在显微镜下可找到单层的细胞；且可以清晰的看到被染成橘黄色的脂肪颗粒；缺点：内表皮不宜撕取，同时要求操作者能熟练使用高倍镜。 (笔者在实验中发现，染色3分钟后在显微镜下刚开始观察到的花生种子的子叶细胞被染成了橘黄色，且橘黄色的颗粒较多，观察起来不清晰，但是放置两小时后再次观察时更加清晰。如上图) 方法二、血涂片法 ①取浸泡过的花生种子，去种皮，研钵研磨碎成花生泥；②取一小团花生泥于载玻片上的右侧约1／4－1／3处画一条细线，左手将载玻片固定在左面上，自该线的右侧以300－400夹角向左侧推动另一载玻片，形成花生泥薄膜；③染色后，在显微镜下被染色的脂肪颗粒清晰可见。 此法优点：该法模仿的是血涂片观察血细胞的原理，实验过程中不需制作切片，操作简单；缺点：研磨要充分，染色后滴加酒精洗去多余的浮色的同时，脂肪分子也被酒精溶解成小的脂肪颗粒，染色后的脂肪颗粒较小一些，由于每位学
《生物组织中还原糖脂肪蛋白质的鉴定》教学设计
《生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定》教学设计 一、设计思路 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验是教材中第一个验证性实验，本节实验课以“自主性、探究性、合作性、完整性”为课堂教学的四个基本维度，面向全体学生，以培养学生的生物科学素养、侧重科学方法教育与现实生活的联系为重点，在实验操作中充分发挥小组长的协助作用，分工合作以提高课堂效率。其次，需要给学生充分的思考讨论时间，对实验结果进行认真分析，从而达到理想的教学效果。 二、实验教学分析 1、内容分析 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验是一个面向全体学生的探究实验，新课标教材把此实验安排在学习蛋白质、糖类和脂肪等知识内容之前，目的在于一方面为接下来学习各类有机物奠定感性认识基础，另一方面，由于实验内容的设置上注重学生对材料的选择，对检测结果的预期和实验方案的设计，因此有利于培养学生的实验探究能力，为以后各章节的探究性实验的顺利开展奠定了基础。 2、学情分析 高中生的思维水平、学习能力已经发展到较高阶段，乐于并有能力进行自主探究性的学习，实验的内容与日常饮食有关，注重与现实生活的联系，学生极易产生学习兴趣，设置不同层次的探究，以适应不同智力水平、性格、兴趣、思维方式学生的需要。但材料试剂多，规范操作细节多，合作学习显得尤为重要。 3、教学条件分析 本实验所用到的材料和各种实验器材都是学校实验室中经常用到的，各种化学试剂、器材的使用都在以前的教学中涉及到，学生应该对此并不陌生。 三、教学重点和难点 重点：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的原理和方法。 难点：实验所用材料多，试剂种类和使用方法多，课堂容量大。特别对于区分斐林试剂和双缩脲试剂的成分、配制和使用方法的不同。 突破策略：面对全体学生，做好充分的准备，包括材料仪器准备和学生的情感、知识准备；课堂上发挥小组长的协助管理作用，合理有序地组织教学。 四、实验目标 1、知识目标：说明特定的化学试剂能够使生物组织中相应的有机化合物产生特定的颜色反应；简述实验探究的一般方法，主要是根据所选实验材料设计实验并做出预期实验结果。 2、情感态度价值观目标：参与合作学习，形成严谨认真、敢于质疑的科学态度。按照实验操作规则操作实验，养成良好的实验习惯。 3、能力目标：尝试用化学试剂检测生物组织中的还原糖、脂肪、蛋白质和淀粉。 五、实验准备 1、可溶性还原糖的鉴定 常见的还原糖有葡萄糖、果糖和麦芽糖，本实验最理想的实验材料是还原糖含量较高的植物组织，而且要求组织的颜色较浅或近于白色，如苹果和犁的果实。 2、脂肪的鉴定 所用材料要求一脂肪含量高，二有一定大小做徒手切片，花生种子符合本实验的要求。实验前要将花生种子浸泡3~4h，有利于切成薄片，但浸泡时间也不宜过长，否则组织太软，切
检测生物组织中的脂肪
检测生物组织中的脂肪、糖类、蛋白质和淀粉实验改进 广东省罗定中学李稚虹 一、实验目的 1.尝试用化学试剂检测生物组织中的脂肪、糖类、蛋白质和淀粉。 2.掌握实验的操作技能。 3.认识到脂肪、糖类、蛋白质和淀粉是生物组织的重要成分。 二、实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。脂肪可以被苏丹III染液染成橘黄色。糖类中的还原糖，与斐林试剂发生作用，产生砖红色颜色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。淀粉遇碘变蓝色。 三、材料与器具 1.实验材料：新鲜猪的皮下结缔组织，雪梨，鸡蛋清，马铃薯。 2.仪器：解剖刀，滴管，小烧杯，培养皿，载玻片，盖玻片，吸水纸，显微镜，酒精灯。 3.试剂：苏丹III染液，体积分数为50％的酒精溶液，蒸馏水，斐林试剂，双缩脲试剂，碘液。 四、方法步骤 1．脂肪颗粒的检测 ①取材 取新鲜的肥猪肉（富含脂肪），切成小块放入培养皿中备用。从中间将肥肉切开两半，用解剖刀刀面在肥肉内侧轻刮几下，把刀面上附有粘稠物的一端，均匀涂抹在载玻片的中央。 ②染色 在载玻片的粘稠物上滴加苏丹III染液滴2～3滴，染色5min；用吸水纸吸掉染液。倾斜载玻片，并在染色的部位缓慢滴加3～4滴50％的酒精，洗去浮色；然后，用吸水纸吸掉粘稠物周围的酒精。滴一滴蒸馏水于粘稠物上，盖上盖玻片，制成临时装片。 ③观察
使用显微镜观察临时装片。先在低倍显微镜下观察，并选择最理想的观察对象（肉末层的较薄、染色均匀且橘黄色明显的区域）。将目标移至视野中央，转换高倍镜观察被染色后的脂肪细胞。 2．还原糖的检测 ①取材 新鲜雪梨去皮后切成小块放入培养皿中备用。用解剖刀在雪梨组织上轻刮几下，把刮下的组织涂抹到载玻片的中央。 ②染色 向有组织处滴加两滴菲林试剂（甲乙液等量混合）。 ③加热观察 用试管夹夹着载玻片的一端，把载玻片在酒精灯外焰末端来回移动烘烤，观察雪梨组织颜色变化。 3．蛋白质的检测 ①向试管内注入稀释的蛋清2mL。 ②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL，摇匀。 ③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。 ④可见组织液颜色变化。 4．淀粉颗粒的检测 ①取材 马铃薯切成小块放入培养皿中备用。用解剖刀在马铃薯组织上轻刮几下，把刮下的组织涂抹到载玻片的中央。 ②染色 向马铃薯组织处滴加两滴碘液，盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余的染液制成临时装片。 ③观察
(完整word版)生物实验室安全操作规程
初中生物实验操作规程、安全预案 为了顺利地做好生物实验，保证实验成功，保护实验仪器设备，维护每个师生的安全，防止一切实验事故，特制订本安全守则。 一、未进实验室时，就应对本次实验进行预习，掌握操作过程及原理，弄清所有仪器、药品的性质。估计可能发生危险的实验，在操作时注意防范。 二、实验开始前，检查仪器是否完整无损，装置是否正确稳妥。严禁在实验室内吸烟或饮食。实验完毕要细心洗手。 三、水、电、灯一经使用完毕，就应立即关闭。离开实验室时，应检查水、电、门窗是否关好。 四、绝对不允许任意混合各种化学药品，以免发生意外事故。不能用手接触药品，不要把鼻孔凑到容器口去闻药品的气味，不得品尝任何药品的味道。 五、实验剩余的药品既不能放回原瓶，也不能随意丢弃，更不能拿出实验室，要放回指定的容器内。 六、灯火加热时要注意安全在酒精灯快烧尽、灯火还没熄灭时千万不能注入燃料，酒精灯熄灭时要用灯帽来罩，不要用口来吹，防止发生意外，不要用一个酒精灯来点燃另一个酒精灯，以免酒精溢出引起燃烧，点燃的火柴用完后立即熄灭，不得乱扔。 七、倾注药剂或加热液体时，不要俯视容器，以防溅出。试管加热时不要把试管口朝着自己或别人同时要来回移动试管使试管受热
均匀防止液体喷出口外也不要把烧烫的试管接触冷的灯芯。 八、不得挥动锋利的解剖器以免伤人 九、温度计要轻取轻放如有破损立即报告老师，不得用手触摸以免割伤或中毒。汞洒落时应尽快收集起来并用硫磺粉盖在洒落的地方。 十、使用玻璃器皿要注意安全。以免划伤。用玻璃棒搅和器皿里的液体时，玻璃棒转动的方向必须跟器皿底部平行。 十一、水和浓酸混合时，必须把酸慢慢地注入水中，边注入边搅和，才有消除高温、避免液体溅散的可能。若酸、碱溶液溅到皮肤上，立即用水冲洗皮肤 十二、取固体药品时，可以用药匙，块状的可以用镊子。用过的药匙要马上擦干净。 十三、解剖动物时，乙醚很容易挥发变成气体，人如果吸入过多的乙醚蒸气会头疼、恶心，实验时应使动物迅速麻醉，并打开窗户，让空气流通。 巴里坤县第二中学
生物实验室安全管理规范
：①所有操作人员必须经过培训，通过考核，获得上岗证书；②在开始相关工作之前，应对所从事的病原微生物和其他危险物质以及相关操作进行危险评估，根据国家对于各种微生物操作的危险等级划分和防护要求以及危险评估的结果，制定全面、细致的标准操作规程和程序文件。对于关键的危险步骤设计出可行的防护措施并对这些细节了然于胸；③熟悉各级生物安全实验室运行的一般规则，掌握各种仪器、设备、装备的操作步骤和要点，进行正确的操作和使用，对于各种可能的危害应非常熟悉；④应掌握各种感染性物质和其他危险物质操作的一般准则和技术要点。实验室的生物安全技术规范，包括但不仅限于实验室运行的基本规范、仪器设备的使用规范、针对感染性材料、危险化学品、放射性核素等的操作规范以及个人防护用品的使用规范等。一、日常管理规范人员控制仪器设备搬入和移出防虫及防节肢动物措施清洁与消毒水电安全管理一）人员控制规范1、人员专业和安全培训、持证上岗2 、禁止独自进入实验室工作3 、有禁忌症的人员不得进入实验室工作4 、孕妇暂时离开实验岗5 、实习进修人员不得独自开展实验活动 6 、参观、检查人员须经管理部门审批、持证进入7 、后勤保障人员应经过相关培训、持证进入8 、厂商维修人员须持管理部门准入证进入。9 、严禁在实验室会客。二）设备搬入和移出、摆放规范1、实验室应为大型设备应进出留出通道（设备门）2 、实验室应有足够的电力供应设施3 、考虑设备的摆放空间4 、实验室考虑足够的承重水平5 、先前考虑设备的维修通道和位置6 、移出实验室的设备应经过前面的消毒，消毒方法可采用擦洗表面和整
体熏蒸的措施，消毒方法不应损害设备的安全和使用性能。9 、摆放的位置应符合要求三）防虫及防节肢动物措施规范1、有自动闭门系统2 、有放昆虫和节肢动物的设施，如纱窗、挡板等3 、实验室门窗的密闭性能应符合要求 4 、实验室送、排风管道有安全措施，防止小型动物或昆虫从管道进入实验室；四）清洁与消毒规范1、实验室应保持整洁，定期进行消毒。2 、实验活动结束后及时清理实验台面，清理实验器具，并进行前面消毒。3 、实验室消毒方法与消毒程序应符合规定要求。4 、消毒剂应采用符合国家标准、质量合格的产品，不得使用未经验证和过期的消毒剂。5 、消毒时间应严格按照规定要求，不得随意缩短或改变。6 、消毒剂应现配现用，并在规定的时间内使用。7 、消毒和灭菌方法应根据消毒对象的具体情况进行选择。五）水、电安全管理规范1、实验室应加强对水、电的管理2 、避免常明灯、长流水等现象3 、禁止超负荷用电4 、设备使用后及时切断电源 5 、对需要连续通电的设备，要定期进行巡视，特别是节假日期间更应注意巡查。6 、使用电炉、灭菌器等设备时应做到全程有人监管。7 、实验室发生断电、停电、停水时应及时检查，切断电源或关闭水龙头，防止发生以外。8 、生物安全实验室应有可靠的电力供应，最好有双路供电或有备用电源，保证重要设备的正常运行和实验室的安全。二、实验室安全管理规范一）完善管理体系文件1 、制定相应的安全管理制度和规定 2 、制定实验设备的管理制度和操作程序3 、制定实验检测规程和标准操作程序4 、制定实验室人员准入和项目准入制度5 、制定实验室进、出程序6 、制定实验废弃
脂肪鉴定脂类细胞化学实验报告
脂类细胞化学（苏丹Ⅲ染色法） 1.实验目的：用苏丹Ⅲ染液对小鼠的肠系膜细胞染色，观察细胞颜色，掌握苏丹Ⅲ染液的 染色方法。 2.实验用品： （1）仪器及器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管 （2）实验药品：蒸馏水、甲醛钙溶液、70%乙醇水溶液、苏丹Ⅲ染液 （3）实验材料：小鼠 3.实验原理： （1）由脂肪酸和醇作用生成的酯及其衍生物统称为脂类，这是一类一般不溶于水而溶于脂溶性溶剂的化合物。脂类是机体内的一类有机大分子物质，它包括范围 很广，大体上可以分为类脂和油脂两大类。类脂包括磷脂(phospholipids)， 糖脂(glycolipid)和胆固醇及其酯(cholesterol and cholesterol ester)三 类。而油脂可以分为常温下常温液态的油和常温下固态的脂肪两类。这几种 脂类化学结构有很大差异，生理功能各不相同。其共同物理性质是不溶于水 而溶于有机溶剂，在水中可相互聚集形成内部疏水的聚集体。 （2）在固定细胞时，通常使用脂溶性固定液。然而，鉴定的材料是脂肪时，脂溶性的固定液会溶解脂肪，致使把切片放到显微镜下观察时，观察不到被 染色的脂肪，只能看到脂肪细胞中有很大的空洞。最好的固定材料是甲醛类 的固定液。如医学上保存尸体采用的是福尔马林，即40%的甲醛水溶液，本次 实验采用的则是甲醛钙溶液。 （3）光学显微镜的切片多是石蜡切片。在熔接石蜡时，需要用到脂溶性溶剂，而脂溶性溶剂会溶解细胞中的脂肪，因此本次实验不可采用石蜡切片。但是 锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等有机溶剂，可以采用石蜡切片。 （4）制作切片有多种方法，如冰冻切片、明胶包埋冰冻切片、本次实验采用的是操作简单的铺片法。 （5）脂类染色的原理是，染料溶于脂类显色。选择溶剂时应注意，溶剂必须既溶解的染料，又不溶解掉脂类。 4.实验步骤： （1）用断头法处死小鼠，置于解剖盘中。剪开腹腔，用镊子提起小肠，使盖玻片紧贴于肠系膜。用剪子将连同盖玻片和其上粘的肠系膜剪下，反扣于已 滴加甲醛钙的载玻片上，固定15分钟, （2）吸蒸馏水滴于载玻片、载玻片之间冲洗，用滴管不断吸取液体以去除固定液。 （3）用70%的乙醇水溶液代替蒸馏水重复上一步骤，进行冲洗。 （4）用苏丹Ⅲ染液染色30mins。 （5）染色结束时，用吸水纸吸去多余染液。擦净盖玻片周边及表面，用显微镜观察。
生物实验室安全常识
生物实验室安全常识（废液处理篇） 2007-12-26 10:11:24 信息来源：生物谷 ?生物实验室安全常识（废液处理篇）生物谷编者按：我们的生物实验室存在多少危险？生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通联合《遗传》、《中国生物工程杂志》、《生命世界》杂志开展2 007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染，如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物 .bioon. 生物谷网站 生物谷编者按： 我们的生物实验室存在多少危险？ 生物实验对我们操作人员造成了怎样的危害？ 实验室工程菌外流对我们环境的影响有几多？ 这些平时并不引起我们注意的隐患也许会给我们自身健康，或者环境带来长远的影响，因此生物通联合《遗传》、《中国生物工程杂志》、《生命世界》杂志开展2007赛默飞世尔中国生物实验室安全现状调查活动，提出警示，珍惜生命！此次活动的现状调查报告将发于相关部门，提出宝贵意见的读者将有机会获得精美礼品。 实验室的污染主要有生物性污染和化学污染两种。如按形态分则可大致分为废水、废气和固体污染物三种。其中生物污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染，如血液、尿、粪便、各种电泳液、特种生物试剂等。而化学污染则包括有机物污染和无机物污染。除此以外，还有部分实验室存在放射性污染。 在此次赛默飞世尔中国生物实验室安全调查活动中，从现有调查结果中，我们惊讶的发现许多生物实验室存在严重的污染问题，而其中又以废液废品的处理为最，大部分实验室在进行
脂肪鉴定 脂类细胞化学(苏丹Ⅲ染色法) 实验报告
细胞生物学实验报告 脂类细胞化学（苏丹Ⅲ染色法） 1.实验目的：用苏丹Ⅲ染液对小鼠的肠系膜细胞染色，观察细胞颜色，掌握苏丹Ⅲ染液的 染色方法。 2.实验用品： （1）仪器及器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管 （2）实验药品：蒸馏水、甲醛钙溶液、70%乙醇水溶液、苏丹Ⅲ染液 （3）实验材料：小鼠 3.实验原理： （1）由脂肪酸和醇作用生成的酯及其衍生物统称为脂类，这是一类一般不溶于水而溶于脂溶性溶剂的化合物。脂类是机体内的一类有机大分子物质，它包括范围 很广，大体上可以分为类脂和油脂两大类。类脂包括磷脂(phospholipids)， 糖脂(glycolipid)和胆固醇及其酯(cholesterol and cholesterol ester)三 类。而油脂可以分为常温下常温液态的油和常温下固态的脂肪两类。这几种 脂类化学结构有很大差异，生理功能各不相同。其共同物理性质是不溶于水 而溶于有机溶剂，在水中可相互聚集形成内部疏水的聚集体。 （2）在固定细胞时，通常使用脂溶性固定液。然而，鉴定的材料是脂肪时，脂溶性的固定液会溶解脂肪，致使把切片放到显微镜下观察时，观察不到被 染色的脂肪，只能看到脂肪细胞中有很大的空洞。最好的固定材料是甲醛类 的固定液。如医学上保存尸体采用的是福尔马林，即40%的甲醛水溶液，本次 实验采用的则是甲醛钙溶液。 （3）光学显微镜的切片多是石蜡切片。在熔接石蜡时，需要用到脂溶性溶剂，而脂溶性溶剂会溶解细胞中的脂肪，因此本次实验不可采用石蜡切片。但是 锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等有机溶剂，可以采用石蜡切片。 （4）制作切片有多种方法，如冰冻切片、明胶包埋冰冻切片、本次实验采用的是操作简单的铺片法。 （5）脂类染色的原理是，染料溶于脂类显色。选择溶剂时应注意，溶剂必须既溶解的染料，又不溶解掉脂类。 4.实验步骤： （1）用断头法处死小鼠，置于解剖盘中。剪开腹腔，用镊子提起小肠，使盖玻片紧贴于肠系膜。用剪子将连同盖玻片和其上粘的肠系膜剪下，反扣于已 滴加甲醛钙的载玻片上，固定15分钟, （2）吸蒸馏水滴于载玻片、载玻片之间冲洗，用滴管不断吸取液体以去除固定液。 （3）用70%的乙醇水溶液代替蒸馏水重复上一步骤，进行冲洗。 （4）用苏丹Ⅲ染液染色30mins。
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验问题解析 题辅导
生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验问题解析 1、鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的实验原理是什么？ 某些化学试剂能够使生物组织中的有关化合物产生特定的颜色反应，根据颜色反应鉴定生物组织中是否有还原糖、脂肪和蛋白质的存在。 还有，如：鉴定DNA 用二苯胺（沸水浴）出现蓝色反应；鉴定染色体用0.01g/mL 或0.02g/mL 的醋酸洋红液（或龙胆紫溶液）出现红色（或紫色）反应。 2、做还原糖的鉴定实验，为什么选择苹果或梨？ 因苹果或梨含还原糖量较高，颜色为白色或近于白色，容易观察实验现象。有些单子叶植物如韭菜、鸢尾并不将光合作用的初始产物转为淀粉，故叶子内含有大量的可溶性还原糖，但由于叶片中叶绿素较多且颜色深，对需要观察的颜色反应起着掩盖作用，因此，最好不要选用单子叶植物的叶子作为实验材料。甘蔗的薄壁组织和甜菜的块根虽然富含近于白色的蔗糖，但蔗糖无还原性，即不能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。至于蔗糖液经稀盐酸处理后可以与斐林试剂反应产生砖红色沉淀，是因为蔗糖在酸性条件下被水解成可溶性还原性单糖的缘故。 3、为什么花生需浸泡3h~4h ，黄豆需浸泡1d~2d ？ 因为花生浸泡3h~4h ，最适于切片，黄豆浸泡1d~2d 后，适于研磨。 4、鉴定可溶性还原糖实验中为什么要水浴加热？直接加热是否可以？ 实验证明，直接加热至沸腾30s 时，迅速出现砖红色沉淀；继续加热，溶液变成黑色。所以直接加热不容易掌握加热程度，时间稍长就会使砖红色的O Cu 2转化为黑色的CuO ，就不能再鉴定可溶性还原糖了。通过水浴加热可以保持反应的适宜温度，可长时间观察所需的反应颜色变化。 5、蛋白质稀释液在制备时为何要稀释？ 为了避免蛋白液与双缩脲试剂发生反应后粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管也不易刷洗。
高中生物实验：《检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质》
高中生物实验：《检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质》 教学设计 一、教学设计思路 本实验为高中生物教学中的第一个实验，既要体现高中生物新课标的要求，又要考虑学生的接受能力，因此我首先在讲清楚整个实验的基础上，进行实验演示，然后让学生以小组为单位自主选择实验材料，自主进行实验，并且进行交流和总结，体现以学生为主体的教学理念，培养学生的自主探究意识。 二、实验内容分析 对于生活中常见植物组织中富含的有机物，学生并不陌生，在此基础上教材安排了对这些有机物的检测，体现了高中生物课程基本理念要求：注重与现实生活的联系，难度适中，学生感兴趣也容易接受，通过本节课的学习，使学生的思维及 实验能力得到提高。 三、教学目标 1．知识目标 （1）举例说出生活中常见植物组织中富含的有机物 （2）区别斐林试剂和双缩脲试剂
2．能力目标 （1）尝试用化学试剂检测生物组织中的可溶性还原糖、脂肪和蛋白质（2）通过实验的操作培养学生的动手及合作能力,初步掌握实验设计方法,提高 学生的创新思维能力 3．情感态度与价值观 （1）关注检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的其他方法 （2）将教材与现实生活联系起来，通过提高学生的学习热情，使同学们认识到 生物这门课程的价值 四、教学重和难点 教学重点：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质的操作过程及实验现象观察教学难点：区分斐林试剂和双缩脲试剂及实验注意事项 五、授课课型 实验课 六、计划课时 1课时 七、教学流程图
八、教学过程 1．课题导入（情景创设）：（教师提前在实验台上摆放了苹果、花生、牛奶、 豆浆、鸡蛋等食物） 师：同学们，讲台上放了一些我们在生活中常见的、常吃的食物，大家也知道苹果中糖类的含量很高，花生中脂肪的含量较高，而牛奶、豆浆、蛋清中含有较高的蛋白质，那么你们有没有思考过，我们用什么方法来检测这些有机物呢？ （学生思考）
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质试题
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质试题
————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期： 2
1．鉴定可溶性还原糖、蛋白质、脂肪所用实验材料较合理的一组是() A．韭菜叶、豆浆、大豆B．梨、鸡蛋清、花生子叶 C．西瓜、花生子叶、大豆D．番茄、豆浆、花生子叶 2．下列有关颜色反应实验的叙述，正确的是() A．成熟番茄和成熟西瓜均含有较多的果糖和蔗糖等还原糖，但不适合用于还原糖的鉴定实验B．利用花生的组织样液或组织切片进行脂肪鉴定实验时，需用显微镜才能观察到相应的颜色C．蛋白质与双缩脲试剂作用，颜色变化为浅蓝色→紫色，该过程不需要水浴加热处理 D．还原糖鉴定实验中，应向组织样液中先加入斐林试剂甲液，后加入乙液 3．表格是某同学探究不同材料中还原糖含量高低的实验。下列是对结果的分析，错误的是 试管1 试管2 试管3 试管4 苹果提取液 2 mL 雪梨提取液 2 mL 白菜提取液 2 mL 蒸馏水 2 mL 斐林试剂 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 水浴加热砖红色很深砖红色深砖红色较浅无砖红色 A.苹果组织细胞中含还原糖较高B．白菜叶肉细胞中也含有还原糖 C．试管4中溶液为无色D．试管1～3中，溶液颜色渐变成砖红色 4．现提供可配制斐林试剂的溶液：甲液(0.1 g/mL NaOH溶液)、乙液(0.05 g/mL CuSO4溶液)、以及蒸馏水，如果充分利用上述试剂及必需的实验用具，可灵活性地鉴别出下列哪些物质() ①葡萄糖②乳糖③胃蛋白酶④RNA A．只有①B．①和②C．①和③D．②、③和④ 5．下列有关生物实验的叙述中正确的是 A.用双缩脲试剂检测生物组织中的蛋白质，不能用煮过的豆浆做实验材料，因为蛋白质已经变性 B.甘蔗含有较多的糖，可用于进行可溶性还原糖的鉴定 C.许多土壤动物身体微小且有较强的活动能力，可用取样器取样的方法进行采集、调查 D.调查古树木、蝗虫的幼虫、某种蛇的种群密度，通常采用样方法 6．判定从植物体榨出的白色液体是否含有脂肪、酵母菌酒精发酵是否彻底、提取的DNA是否 被DNA酶污染、酪蛋白是否充分水解成氨基酸，依次选择的试剂是 ①苏丹III染液② 2 () Ca OH③斐林试剂④双缩脲试剂⑤二苯胺A．①③⑤④ B．①②⑤⑤ C．①②④⑤ D．①③④⑤ 7．下列实验中所用试剂错误 ．．的是（）A．在观察植物细胞有丝分裂实验中，使用醋酸洋红溶液使染色体着色 B．在提取叶绿体色素实验中，使用丙酮提取色素 C．在DNA的粗提取与鉴定实验中，使用氯化钠溶液析出DNA D．在蛋白质的鉴定实验中，使用苏丹Ⅲ染液鉴定蛋白质 8．将小麦种子分别置于20℃和30℃培养箱中培养4天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液Ⅰ和提取液Ⅱ。取3支试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀 粉液，然后按下图加入等量的提取液和蒸馏水，45℃水浴保温5分钟，立即 在3支试管中加入等量裴林试剂并煮沸2分钟，摇匀观察试管中的颜色。结 果是（） A．甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色 B．甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 C．甲、乙皆呈蓝色，丙呈砖红色 D．甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色 9．生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的 是（） A．可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀 B．只有脂肪的鉴定需要使用显微镜 C．用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热 D．使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用 10．检验苹果中是否有还原性糖,可以选用的试剂是（）A．碘液B．苏丹Ⅲ染液C．双缩脲试剂D．斐林试剂11．下列关于实验的描述，正确的是（）A．将在蔗糖溶液中已发生质壁分离的洋葱表皮细胞转到更高浓度的蔗糖溶 液中，则发生质壁分离复原 B．将斐林试剂加入到蔗糖溶液中，加热后出现砖红色沉淀 C．将肝脏研磨液煮沸冷却后，加入到过氧化氢溶液中立即出现大量气泡 D．将双缩脲试剂加入到蛋清稀释液中，溶液变成紫色 81
生物实验室安全应急预案
阴阳赵镇初级中学生物实验室安全应急预案为进一步落实市教育局有关安全工作的文件精神，坚持“安全第一，预防为主”原则，使全体师生牢固树立“隐患险于明大，防范胜于救灾，责任重于泰山”的安全意识，不断提高学校处置学生安全事故的能力和水平，特制订本应急预案。 一、指导思想 实验室是我校教学工作使用和保管仪器设备、危险品的要害部位，各类具有易燃、易爆、氧化、剧毒、放射性物质和贵重仪器设备，在使用和保管过程中，稍有不慎，即能引起人身伤亡事故和对社会造成危害。为此，除了对实验室进行必要的技术预防，还必须保障实验操作中师生的安全，促进实验室各项工作顺利开展，防范安全事故发生，对我实验室引发的刑事案件和灾害性事故的发生，具有充分的思想准备和应变措施，做好事故发生后补救和善后工作，确保实验室在发生事故后，能科学有效地实施处置，切实有效降低和控制安全事故的危害。 二、组织机构 组长：学校副校长刘海民（全面主持综合协调部突发事件应急工作） 副组长：温静（负责教辅处突发事件应急工作） 组员：王艳纳 三、应急原则 1、先救治，后处理 2、先制止，后教育 3、先处理，后报告 四、注意事项：
1、实验物品要摆放规范； 2、在学生操作之前，要明确要求及示范正确的操作程序； 3、对一些危险物品要向学生重点强调其危害使用的注意事项，做好安全教育工作。 4实施实验管理员课堂巡视，关注并消除各类安全隐患。 五、应急措施 明火操作安全应急预案 1、实验室内严禁吸烟，使用一切加热工具均应严格遵守操作规程，离开实验室时应检查是否关上自来水和切断电源。 2、转移、分装或使用易燃性液体，溶解其他物质时，附近不能有明火。 3、一旦发生火灾，一定要迅速而冷静地首先切断火源和电源，并尽快采取有效的灭火措施。水和沙土是最常用的灭火材料。 4、发生火灾报警程序： ①任课教师迅速报告学校安保处，同时组织疏散学生离开现场。我室有关人员携带消防器具赶赴现场进行先期扑救，等待学校消防安全领导组组织的后援。 ②根据火势如需报警，由安保处就近用电话或手机报告消防中心（电话119），报告内容为：“这里是…………发生火灾，失火物质为…………，请迅速前来扑救”，待对方放下电话后再挂机。 5、明确分工： ①参加人员：在消防车到来之前，学校教师均有义务参加扑救。 ②消防车到来之后，校内人员配合消防专业人员扑救或做好辅助工作。 ③使用器具：灭火器、水桶、脸盆、水浸的棉被等。
检测生物组织中的糖类
检测生物组织中的糖类、脂肪蛋白质 民勤三中闫小青 一、实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应：糖类中的还原糖（如葡萄糖、果糖）与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色沉淀;脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）; 蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应;淀粉遇碘变蓝色。因此，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。 二、实验材料、用具及试剂 1．材料: 梨匀浆，鸡蛋清（稀释10倍后使用），质量分数为1%的淀粉溶液、花生种子匀浆。 2．用具: 滴管、试管、试管架、试管夹、烧杯、小量筒、三脚架、石棉网、火柴。 3．试剂:（1）斐林试剂甲液：质量浓度为0．1 g/mL的NaOH溶液，乙液：质量浓度为0．05 g/mL的CuSO 4 溶液。 （2）双缩脲试剂A液：质量浓度为0．1 g/mL的NaOH溶液（10 g NaOH加水至100 mL）， B液：质量浓度为0．01 g/mL的CuSO 4溶液（1 g CuSO 4 加水至100 mL）。 （3）碘液 （4）苏丹III或苏丹IV染液，体积分数为50%的酒精溶液 三、操作过程及实验结果 （1）还原糖的检测和观察 ①向试管内注入2 mL待测组织样液。 ②向试管内注入1 mL斐林试剂（甲乙液等量混合均匀后再注入）。 ③将试管放入盛有50～65℃温水的大烧杯中加热约2 min。 ④观察实验现象：如果待测组织样液中还原糖含量较高，可见溶液的变化为：浅蓝色→绿色→棕黄色→砖红色沉淀。 （2）蛋白质的检测和观察 ①向试管内注入待测组织样液2 mL。 ②向试管内注入双缩脲试剂A液1 mL,摇匀；再注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀。 ③观察实验现象。如果待测组织样液中蛋白质含量较高，可以观察到待测组织样液变成紫
生物实验室安全管理制度实用版
YF-ED-J5828 可按资料类型定义编号 生物实验室安全管理制度 实用版 In Order To Ensure The Effective And Safe Operation Of The Department Work Or Production, Relevant Personnel Shall Follow The Procedures In Handling Business Or Operating Equipment. （示范文稿） 二零XX年XX月XX日
生物实验室安全管理制度实用版 提示：该管理制度文档适合使用于工作中为保证本部门的工作或生产能够有效、安全、稳定地运转而制定的，相关人员在办理业务或操作设备时必须遵循的程序或步骤。下载后可以对文件进行定制修改，请根据实际需要调整使用。 一）生物教师是学生进行各类生物实验的指导者和监护者。每次实验课前，教师必须进行先期实验，以确认实验的成功率和安全性，确保学生的人身和健康不受伤害。 （二）每次实验课，教师必须强调安全注意事项和操作程序。如果教师未强调注意事项和操作程序，意外事故责任由教师承担；如果学生违反安全注意事项和操作程序，意外事故责任由学生承担。 （三）实验过程中若需要使用刀、剪等利刃器械，教师务必嘱咐学生正确使用器械的方
法，告诫学生不要相互争抢或动作粗鲁，以防被利刃扎伤、划伤。一旦出现意外，轻则速到医务室进行包扎，重则速带学生到医院进行治疗。 （四）在使用乙醚时，教师应严格控制剂量和告诫学生正确的操作方法，并采取良好的通风措施，防止发生过敏或被麻醉的事故，一旦发生意外，教师应立即采取必要的补救措施。 （五）在使用乙醚过程中，教师一定要严格控制乙醚的浓度和数量，防止高浓度乙醚的丢失。一旦发生丢失应立即追查，避免误饮造到中毒事故。 （六）在观看各类标本时，对易碎、有毒等有碍学生身体健康的标本，教师务必反复强
(高考生物)生物安全实验室建设要求
（生物科技行业）生物安全实验室建设要求
生物实验室工艺设计和要求 现代化生物实验室工艺设计任务书的制定，包括制定实验楼每个部门、每个实验室的面积和功能要求；制定生物实验室每间房的建筑、装修内容，门窗要求，环境控制、电力（照明、通讯及网络等）、气体管道、给排水、空调、消防控制、结构等工艺设计的要求；制定每间生物实验室所需固定实验设备清单。 现代化生物实验室工艺设计/设备规划，包括按照国际生物实验室标准及项目工艺任务书的要求，完成生物实验室固定设备规划、工艺布置图、典型生物实验室放大工艺平面图、主要立面图和主要剖面图；完成生物实验室固定设备厂商资料及工程设计数据归总。具体地说，现代化生物实验室建筑工艺设计的要求是: 1.基地环境方面 在对基地现状充分分析基础上,采用将建筑作为环境背景的设计理念，将单体建筑包容于环境之中。 2.建筑方面 主要包括生物实验室建筑设计、室内装修材料要求等。 实验室基本工作区域尺度（ELM），是为保证生物医学研究的安全运行，而对其所需工作区域尺度的规划。实验室的ELM一般包括对操作台、实验设备（包括储藏柜）、工作台、化学排烟罩以及生物安全柜的长度要求。 实验室设计当前的趋势，已经开始朝着规划区域空间尺度的方向发展，而不仅仅限于规划区域长度。这种趋势是起源于模块化实验室形式的采用。 建筑面积由于包括流通区域、建筑核心区域、墙体以及公共区域的面积，必然在整体上大于特定功能区域的使用面积。参考根据AIA使用面积与建筑面积的换算方式，实验室（包括内部流通和功能分配区域）面积的基本换算系数在1.7至2.2之间。换算出的工程总面积在实际规划时，还需要做相应调整。 实验室建筑的材料，应该选择耐用和易清洗的类型，并且应能有助于创造一个舒适安全的工作环境。材料设计的关键因素，在于易清洗、易维护、易储藏并且尽量减少毒害传播。所选材料作穿墙以及楼板处理时，还必须考虑到保证实验室人员的安全。 3.结构方面 包括生物实验室结构设计、结构负荷要求等。由于振动会干扰到实验室的敏感性仪器，所以设计者们必须考虑适当控制振动，并将振动源放置在远离敏感性仪器的区域，必须对建筑结构的振动反应进行细致分析。为了控制振动在实验室区域的传导，
脂肪干细胞的提取及鉴定(1)
红色的是参考同类实验所用的方法，比例，不知道在我们实验室可行不，黄色是疑问的地方，希望老师解答下谢谢 一、脂肪干细胞（ASCs）的提取及鉴定 1、实验技术及原理：运用细胞培养技术、流式细胞术（体外扩增后ACSs的表型会发生改变，主要体现在细胞表面蛋白和细胞因子表达的变化），差异离心术（可将基质血管细胞沉淀与悬浮的成熟脂肪细胞分离，沉淀中除ASCs，还包括血细胞、成纤维细胞和内皮细胞，基质血管细胞沉淀可以接种到孰料培养瓶中，基质细胞可贴壁，造血和其他杂质细胞不贴壁，在随后的传代过程中被出去，最终得到的ASCs可再很长时间内保持摸分化状态）。取C57BL／6 WT小鼠2只，常规麻醉消毒，取腹股沟脂肪组织剪碎至糊状，PBS液冲洗去麻药及血液， 0.075%II型胶原酶消化（37℃，30分钟）以去除外基质，生理盐水终止胶原酶的消化，离心（1200g,10分钟），去上清液及未消化的脂肪，10%FBS的DMEM 重悬细胞沉淀，0.16mol/L氯化氨溶解剩余红细胞，离心洗涤，过200目铜网，得到单个核细胞。镜下计数，按10⒋个细胞/ml种植在培养瓶中，37℃5%CO2孵箱培养，24小时后第一次换液，以后3天换液一次，80%融合后0.25% Trypsin,0.02%EDTA消化传代。细胞镜下作形态学观察及取第三代细胞用流式细胞仪作细胞周期及细胞免疫表型（CD29/CD44）的鉴定。 2、实验用品： 2.1 材料：C57BL／6 WT小鼠 2.2 试剂：PBS液，0.075%II型胶原酶消化，10%FBS，低糖DMEM 2.3 仪器设备：超净工作台、恒温培养箱、普通显微镜、倒臵显微镜、离心机、离心管、解剖剪、眼科剪、镊子（尖头、平头和有沟镊）、小烧杯，200目铜网过滤器，低糖DMEM、血球计数板、橡皮瓶塞、酒精灯、换药碗 3、细胞培养的方法与步骤： 3.1无菌操作的要领和要求。（前两周重点学习） 3.2细胞原代培养： 3.2.1操作步骤 a．培养用品消毒后，安防在超净工作台内，紫外线消毒，做好洗手等准备工作。 b. 取材：取C57BL／6 WT小鼠2只，常规麻醉消毒，取腹股沟脂肪组织剪碎至糊状，PBS液冲洗去麻药及血液。 c. 消化：将漂洗后的组织至于平皿中,加入胶原酶（0.075%II型胶原酶, PH），用量（0.1-0.3ug/ml或200U/ml），再用移液管移至烧瓶中，臵于37℃水浴或恒温箱中30分钟），每隔5-10min振荡一次。30min后，生理盐水终止胶原酶的消化。 d. 离心和计数：将离心管做好标记，平衡后以（1200g,1200r/min？10分钟），去上清液及未消化的脂肪，10%FBS的DMEM重悬细胞沉淀，0.16mol/L氯化氨溶解剩余红细胞，将收集的细胞悬液经200目铜网过滤，1200r/min？离心10分钟（先后顺序），得到单个核细胞。加入培养液吹打混匀后取样计数。根据计数结果调整细胞浓度为10⒋个细胞/ml。