蛋白质化学复习思考题.doc

一、蛋白质化学部分复习思考题

一、判断题

1、（A ）具有四级结构的蛋白质都是寡聚蛋白质。

2、（x ）溶液的pH值等于7吋，蛋口质不带电荷。

3、（ a ）蛋口质的三级结构主要是由它的氨基酸顺序决定的。

4、（ X ）各种氨基酸的等电点（pl）是它们所有可解离基团的算术平均值。

5、（X ）蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏，因此常涉及到肽键的断裂。

6、（x ）蛋白质的四级结构指的是如何由多条肽链通过共价键连接成一个完整分子。

7、（X ）凡有相同氨基酸组成的蛋片质即有相同的空间结构。

8、（ A ）由于所有的a-氨基酸都能与即三酮反应，因此即三酮常用來作为氨基酸的显色剂。

二、单项选择题

1、（b）组成蛋白质的元素主要有

A.C、H、O、N、P

B. C、H、O、N、S C? C、H、0、P、S D.以上都不对

2、（A ）下列氨基酸屮有乙醛酸反应的是______ o

A. Trp B? Arg C. Lys D? His

3、（C ）对蛋白质三级结构的形成影响最人。

A.氢键

B.二硫键

C.疏水键

D.盐键

4、（C ）苛三酮b辅氨酸反应时，在滤纸层析谱上呈现色。

A.蓝紫

B.红

C.黄

D.绿

5、（B ）下列氨基酸中有坂口反应的是o

A. Trp

B. Arg

C. Lys

D. His

6、（B ）蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件不下稳定_______ o

A.溶液pH大于PI

B.溶液pH等于PI

C.溶液pH小于PI

D.溶液pH等于7.4（）

7、（D ）蛋口质变性是由于_______ o

A. 一级结构的改变

B.辅基的脱落

C.蛋口质分解

D.空间结构的改变

8、（B ）维持蛋白质分子a ■螺旋结构的化学键是______ o

A.肽键

B.肽链原了间的氢键

C.侧链间的氢键盘

D.二硫键和盐键

A9、血清蛋白（PI=4.7）在下列哪种pH溶液中带正电荷？

A. pH4.0

B. pH5.0

C. pH 6.0

D. pH 8.0

alO、盐析法沉淀蛋口质的原理是______ o

A.中和电荷

B.与蛋白质结合成不溶性蛋白盐

C.降低蛋白质溶液的介电常数

D.使蛋白质溶液成为P1

C11、变性蛋白质的主耍特征是________ o

A.不易被蛋口酶水解

B.溶解度增加

C.丧失原有生物活性

D.颜色反应减弱

B12、变性蛋口质最主要特征是原有牛?物活性的丧失，这是由于____ o

A.蛋白质一级结构改变

B.蛋白质空间结构改变

C.蛋白质亚基的解聚

D.蛋白质水解为氨基酸

D13、将蛋白质溶液的PH值调到等电点时_____ o

A.能使蛋口质的稳定性增加

B.能使蛋口质表而的静电荷不变

C.能使蛋口质表面的静电荷增加

D.能时蛋口质稳定性降低，易于沉淀析出

B14、可用于蛋白质多肽链N■末端分析的方法是____ o

A.即三酣法

B.二硝基氟苯法

C.双缩尿法

D.紫外吸收法

D15、关于蛋白质三级结构的叙述，正确的是________ o

A.稳定蛋口质三级结构最主要的键是氮键

B.貝有三级结构的多肽链都有牛:物学活性

C.具有三级结构的多肽链都无生物学活性

D.指整条多肽链屮全部原子的空间排布

E.每条具有三级结构的多肽链在多聚体蛋白质小称为亚基，所有亚基内均含有结构域A16、有关变性

的错误描述为____________________ 。

A.蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变

B.蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性改变

C.加热、紫外线照射、超声波等nJ以引起蛋片质变性

D.变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀

凝固是蛋白质变性后进一步发展的不可逆结果

三、多项选择题

bCl、有关蛋口质结构的叙述正确的是________ o

A.链内二硫键在确定蛋白质分子的构象上可能不是重要的。

B.带电荷的如革酸侧链多伸向蛋白质分了外侧而与溶液接触。

C.蛋白质的一级结构是决定其高级结构的重要因素。

D.氨基酸残基的疏水侧链极少埋在蛋白质分了内部而避免于水接触。

ACD2、关于a -螺旋结构的叙述正确的是_____ o

A.靠分子内的红键来达到稳定

B.通过最大限度地减弱不利的R基相互作用来达到稳定的

C.存在于某些蛋白质中的二级结构的一种类型

D.脯氨酸残基可中断a ■螺旋结构

AbcD3、下列关于a ■氨基酸化学性质的叙述正确的是 ____ o

A.所有的a _氨基酸与前三酮作用生成蓝紫色化合物

B. a-氨基酸与亚硝酸作用可定量放出氮气

C.a-氨基酸与小性甲醛作用，掩盖了竣基，故可用标准的NaOH滴定

D.2、4-二硝基氟苯(DNFB)和u?氨基酸的作用原理可作为从N■末端分析肽链的基础。

AbC4、分了伴侣_______ o

A.是一种蛋白质

B.在蛋白质二硫键正确形成中起作用

C.可引导肽链正确折證

D.在亚基聚合时发挥作用

BCD5、蛋口质变性时，_______ o

A.分子量发生改变

B.溶解度降低

C.溶液粘度降低

D.仅高级结构改变，一级结构无改变

bcd6、蛋白质在280nm波长处有最大光吸收，是由下列________ 结构引起的

A.组氨酸的咪岬基

B.酪氨酸的酚基

C.苯丙氨酸的苯环

D.色氨酸的呵喙坏

四、填空题

1、球状蛋口质屮有极性侧链的氨基酸常位于分子表面而与水结合。

2、加高浓度的盐使蛋口

质溶解度下降，称为盐析。3、血红蛋白与氧结合的过程呈现 __________ 。

4、测得某蛋白质溶液中含氮量为4克，则该溶液中蛋白质的含量是__________ 克。

5、冃前已知的超二级结构有 _________ 、BBB _________ 、BAB 三种基本形式。

6、在Ph6.0时间Gly、Ala、Glu、Lys、Arg和Ser的混合物进行纸电泳，向阳极移动最快的是

_______ ;向阴极移动最快的是 ____ 和 ____ :移动很慢接近原点的是_____ 、—和_______ o

五、名词解释：肽与肽键蛋白质a ?螺旋结构别构现象等电点。

六、问答题

1、有三中蛋白质A、B、C,其PI分别为4.0、5.0、7.5,请考虑若在中性条件下，用无机盐如(NH4) 2SO4 沉淀这三种蛋口质吋，哪种蛋口质首先沉淀？哪种其次？哪种最后？为什么？

2、试比较蛋口质二级结构小，a-螺旋、B -折叠、0 -转角结构小的氢键形成的异同点。

3、根据下列数据，求出各氮基酸的等电点。若将这三种氨基酸的混合液在PH=6.0的缓冲溶液屮电泳分出三个点，如下图所示，请表明它们所在的位置。

氨基酸PK.PK.PK3

亮氨酸 2.409.60

谷氨酸2」9 4.259.67

精氨酸2」79.0412.46

负极| °°°|正极

原点

4、已知卵清蛋白PI=4.6,乳球蛋白PI=5.2,糜蛋白酶原PI=9.1,问在PH=5.2时,上列每种蛋白质在电场中将向阳极或向阴极移动或不动？

5、蛋白质的分了量很大，为什么在溶液中还相当稳定？

参考答案:

、判断题 1 V2 X 3 V 4 X 5 X 6 X7 X8 J

二、单项选择题

1 B

2 A

3 C

4 C

5 B

6 B

7 D

8 B

9 A10 A11 C 12 B 13 D14 B 15 D16 A

三、多项选择题1 B C 2 A C D 3 A BCD 4 A B C 5 B C D 6 B C D

四、填空题1表血2盐析3别构效应 4 255（】

a B a B B B B 6Glu Arg Lys

Gly Ala Ser

食品化学综合练习题-蛋白质

一、填空： 1.胺类化合物发生Mailard反应的活性氨基酸，而碱性氨基酸的反应活性高于其他氨基酸。 2.稳定蛋白质构象的作用力和键包括（）、（）、（）、（）和（）。 3.小麦面粉中与面粉筋力有关的两个蛋白质是（）和（）。 4.蛋白质化学改性常用的方法有: __________、__________和_______________。 5.构成面筋的蛋白质主要包括__________和_______________。 6.Mailard反应主要是（）和（）之间的反应，该反应的初期阶段包括两个步骤，即（）和（）。 7.根据蛋白质分子的化学组成特点，一般可以将其分为3大类（），（），（）。 8.稳定蛋白质二、三、四级结构的作用力是，，，，。 9.蛋白质的功能性质包括三大类，，。二、概念：蛋白质的功能性质；蛋白质的变性作用；盐析效应；胶凝作用；盐溶效应；蛋白质的二级结构；蛋白质的等电点；胶凝；缔合；沉淀；絮凝；凝结；胶凝三、单项选择题() 1、下列关于氨基酸的描述不正确的是： A，氨基酸在等电点时所带净电荷为零；B，所有的氨基酸均有旋光性；C，水溶液中氨基酸一般以两性离子形式存在；D，氨基酸均可溶于水 2、不属于蛋白质起泡的必要条件是（） A. 蛋白质快速扩展到气-液界面 B. 蛋白质充分伸展和吸附 C. 在界面上形成粘弹性较好的蛋白膜 D. 具有较高的蛋白质浓度四、简答题（） 1、蛋白质变性的机制及影响因素是什么？ 2、什么叫乳浊液？乳浊液失稳的机制是什么？ 3、写出氨基酸与茚三酮反应的方程式 4、描述牛乳中的蛋白质及其分类 5、蛋白质的功能性质有哪些？

蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室(精)

蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室接受教育部评估 2005年9月5日-6日，教育部重点实验室评估专家组一行8人对我校“蛋白质化学及鱼类发育生物学”教育部重点实验室进行了现场评估。 5日上午，评估报告会在学校国际学术交流中心举行。参加报告会的有教育部重点实验室评估专家组成员：南开大学耿运琪教授、北京大学瞿礼嘉教授、厦门大学彭宣宪教授、上海交通大学张大兵教授、东北林业大学刘桂丰教授、山东大学曲音波教授、山东农业大学陈学森教授和教育部工作人员李小跃同志。省教育厅申纪云副厅长及科技处徐伟处长，学校刘筠院士、党委书记张国骥、副校长梁宋平、周景明、龚维忠、冀学锋、瞿树林、蒋洪新、科技处处长夏立秋以及重点实验室副主任罗琛教授和该实验室的全体老师参加了评估报告会。会议由学校副校长蒋洪新主持，学校党委书记张国骥代表学校致欢迎词。评估报告会上，评估专家听取了实验室主任梁宋平教授关于2001到2005年实验室整体建设情况的汇报，随后实验室刘少军教授、罗琛教授、张健教授、吴秀山教授和梁宋平教授5人分别做了"异源四倍体鲫（鲤）鱼和三倍体湘云鲫（鲤）研究"、“鱼类发育的基因表达调控”、"心脏发育的基因调控"、"疾病相关蛋白的鉴定与功能分析"、“蜘蛛毒素的结构与功能的研究及蛋白质化学与蛋白质组学技术发

展与应用”的研究工作汇报。汇报会上，专家们针对汇报内容进行了现场提问。下午，专家组对实验室进行了现场考察，核对了该实验室的科研项目、研究论文、获奖成果、发明专利、重大仪器与建设经费、人才培养等有关的材料，分别召开了实验室成员和职能部门负责人参加的座谈会。 6日上午，专家组召开了小组会，在对实验室的各项条件进行认真讨论的基础上形成了专家组的评估意见。评估意见认为：湖南师范大学“蛋白质化学及鱼类发育生物学”教育部重点实验室实验室主要围绕蛋白质化学与蛋白质组学、发育生物学等生命科学前沿研究领域的重大科技问题，开展基础与应用基础研究，已在蜘蛛毒素蛋白质结构与功能、多倍体鱼类育种、心脏发育调控机制、基因敲除和基因表达调控等研究领域形成了自己的特色，研究方向明确，定位准确。同时，该实验室的部分研究成果如湘云鲫(鲤)的研究已产生重大的社会经济效益。该实验室5年来，承担了国家“863”计划课题3项、“973”重大计划子项目4项、国家自然科学基金重点项目4项等一批国家级和省部级科研课题，总经费3667.2万元，实验室具备较强的承担国家重大、重点科研课题的能力。实验室5年来发表论文256篇，其中SCI论文74篇；获国家科技进步二等奖1项，省部级科技进步一等奖3项、二等奖3项，国家发明专利4项。实验室各研究方向均取得了重要进展，整体水平较高，特别是异源四倍体鱼和三倍体湘云鲫（鲤）鱼、蜘蛛蛋白质毒素的结构与功能、心脏发育的基因调控等方面的研究具有很高的原创性，取得国际先进水平的成果，在国内外学

蛋白质化学练习题及参考答案

－第一章蛋白质化学测试题－－一、单项选择题 1.测得某一蛋白质样品的氮含量为0.40g,此样品约含蛋白质多少？ A.2.00g B.2.50g C.6.40g D.3.00g E.6.25g 2.下列含有两个羧基的氨基酸就是: A.精氨酸 B.赖氨酸 C.甘氨酸 D.色氨酸 E.谷氨酸 3.维持蛋白质二级结构的主要化学键就是: A.盐键 B.疏水键 C.肽键 D.氢键 E.二硫键 4.关于蛋白质分子三级结构的描述,其中错误的就是: A.天然蛋白质分子均有的这种结构 B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 C.三级结构的稳定性主要就是次级键维系 D.亲水基团聚集在三级结构的表面 E.决定盘曲折叠的因素就是氨基酸残基 5.具有四级结构的蛋白质特征就是: A.分子中必定含有辅基 B.在两条或两条以上具有三级结构多肽链的基础上,肽链进一步折叠,盘曲形成 C.每条多肽链都具有独立的生物学活性 D.依赖肽键维系四级结构的稳定性 E.由两条或两条以上具在三级结构的多肽链组成 6.蛋白质所形成的胶体颗粒,在下列哪种条件下不稳定: A.溶液pH值大于pI B.溶液pH值小于pI C.溶液pH值等于pI D.溶液pH值等于7.4 E.在水溶液中 7.蛋白质变性就是由于: A.氨基酸排列顺序的改变 B.氨基酸组成的改变 C.肽键的断裂 D.蛋白质空间构象的破坏 E.蛋白质的水解 8.变性蛋白质的主要特点就是:

A.粘度下降 B.溶解度增加 C.不易被蛋白酶水解 D.生物学活性丧失 E.容易被盐析出现沉淀 9.若用重金属沉淀pI为8的蛋白质时,该溶液的pH值应为: A.8 B.＞8 C.＜8 D.≤8 E.≥8 10.蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？ A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.胱氨酸 D.丝氨酸 E.瓜氨酸二、多项选择题(在备选答案中有二个或二个以上就是正确的,错选或未选全的均不给分) 1.含硫氨基酸包括: A.蛋氨酸 B.苏氨酸 C.组氨酸 D.半胖氨酸 2.下列哪些就是碱性氨基酸: A.组氨酸 B.蛋氨酸 C.精氨酸 D.赖氨酸 3.芳香族氨基酸就是: A.苯丙氨酸 B.酪氨酸 C.色氨酸 D.脯氨酸 4.关于α-螺旋正确的就是: A.螺旋中每3.6个氨基酸残基为一周 B.为右手螺旋结构 C.两螺旋之间借二硫键维持其稳定 D.氨基酸侧链R基团分布在螺旋外侧 5.蛋白质的二级结构包括: A.α-螺旋 B.β-片层 C.β-转角 D.无规卷曲 6.下列关于β-片层结构的论述哪些就是正确的: A.就是一种伸展的肽链结构 B.肽键平面折叠成锯齿状 C.也可由两条以上多肽链顺向或逆向平行排列而成 D.两链间形成离子键以使结构稳定 7.维持蛋白质三级结构的主要键就是: A.肽键 B.疏水键 C.离子键 D.范德华引力 8.下列哪种蛋白质在pH5的溶液中带正电荷？ A.pI为4、5的蛋白质 B.pI为7、4的蛋白质 C.pI为7的蛋白质 D.pI为6、5的蛋白质 9.使蛋白质沉淀但不变性的方法有:

蛋白质测定实验报告

蛋白质测定方法——化学报告

蛋白质的检测酚试剂法灵敏度较高 20~250mg 费时蛋白质在碱性溶液中其肽键与 Cu2+螯合，形成蛋白质一铜复合物，此复合物使酚试剂的磷钼酸还原，产生蓝色化合物酚类、柠檬酸、硫酸铵、 tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用由上表可大致了解五种检测蛋白质的方法，下面以实验的形式进行详细阐述：

1 材料与方法 1.1 仪器材料 (1)仪器:凯氏定氮仪、紫外分光光度计、可见光分光光度计、工作离心机、布氏漏斗、抽滤泵。 (2)试剂及原材料:牛奶、酸奶、豆浆、0.12mol/LpH=4. 7醋酸- 醋酸钠缓冲液、乙醇-乙醚等体积混合液、浓H2SO4 、40%氢氧化钠、30%过氧化氢、2%硼酸溶液、0. 050molPL标准盐酸溶液、硫酸钾- 硫酸铜接触剂、混合指示剂、标准蛋白溶液、双缩脲试剂、考马斯亮蓝G- 250试剂。 1.2 实验方法 (1)凯氏定氮法测定蛋白质含量将待测样品与浓硫酸共热,含氮有机物即分解产生氨(消化) ,氨又与硫酸作用,变成硫酸铵。为了加速消化,可以加入CuSO4 作催化剂和加入K2SO4 以提高溶液的沸点,而加入30%过氧化氢有利于消化溶液的澄清。消化好的样品在凯氏定氮仪内经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至定量硼酸溶液中,然后用标准盐酸溶液进行滴定,记录,计算出样品含氮量。每个样品做三次重复测定,取平均值。 (2)紫外吸收法测定蛋白质含量蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质,吸收峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗样品,测定后仍能回收使用。低浓度的盐,例如, 生化制备中常用的(NH4)2SO4 等和大多数缓冲液不干扰测定,特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需测定蛋白质浓度的变化,而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差,干扰物质较多,在用标准曲线法测定蛋白质含量时,对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质有一定的误差,故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质,会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表,再进行计算的方法加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的,虽然经过校正,测定的结果还是存在一定的误差。此外,进行紫外吸收法测定时,由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。取待测样品制成蛋白浓度大约在0. 1～1. 0mgPmL的蛋白质溶液,用紫外分光光度计进行比色,对照标准曲线得出样品含氮量。每个样品做3次重复测定,取平均值。 (3)双缩脲法测定蛋白质含量

高中化学关于蛋白质和核酸的测试题及答案解析

高中化学关于蛋白质和核酸的测试题及答案解析 1.（株州高二检测）关于蛋白质的叙述错误的是（） A.浓HNO3溅在皮肤上，使皮肤呈黄色，是由于浓HNO3和蛋白质发生颜色反应 B.蛋白质溶液中加入饱和（NH4）2SO4溶液，蛋白质析出，再加水也不溶解 C.蛋白质水解的最终产物是氨基酸 D.高温灭菌的原理是加热后使蛋白质变性，从而使细菌死亡解析：蛋白质溶液中加入饱和（NH4）2SO4能使蛋白质发生盐析，加水后析出的蛋白质又会溶解. 答案：B 2.（广东高考）下列说法正确的是（） A.乙烯和乙烷都能发生加聚反应 B.蛋白质水解的最终产物是多肽 C.米酒变酸的过程涉及了氧化反应 D.石油裂解和油脂皂化都是由高分子生成小分子的过程解析：本题考查常见有机物，旨在考查考生对常见有机物性质的理解能力.乙烯分子中含有碳碳双键，能发生加聚反应，而乙烷分子中不含不饱和键，不能发生加聚反应，A项错误；蛋白质水解的最终产物为氨基酸，B项错误；米酒变酸的过程为米酒中的乙醇氧化为乙酸，发生氧化反应，C项正确；石油裂解是在高温条件下，把长链分子的烃断裂为各种短链的气态烃和液态烃，油脂皂化是在碱性条件下，油脂水解为高级脂肪酸钠和甘油，是由大分子（但不是高分子）生

成小分子的过程，D项错误. 答案：C 3.蛋白质分子中各种氨基酸的连接方式和排列顺序称为蛋白质的（） A.一级结构 B.二级结构 C.三级结构 D.四级结构解析：蛋白质分子中各种氨基酸的连接方式和排列顺序称为蛋白质的一级结构. 答案：A 4.下列有机物水解时，键断裂处不正确的是（）解析：肽键（）水解的断键部位为，而不是 . 答案：D 5.在澄清的蛋白质溶液中加入以下几种物质：（1）加入大量饱和食盐水，现象为________________，此过程叫做________. （2）加入甲醛溶液，现象为________________，此过程称为蛋白质的________. （3）加入浓硝酸并微热，现象为________________，这是由于浓硝酸与蛋白质发生了________反应的缘故. （4）加热煮沸，现象为________________________________________________，此过程称为蛋白质的________. 解析：蛋白质遇轻金属盐能发生盐析，加热或遇到甲醛能使蛋白质变性.蛋白质与浓HNO3发生颜色反应而呈黄色. 答案：（1）产生白色沉淀盐析（2）产生白色沉淀变性（3）蛋白质变为黄色颜色（4）产生白色沉淀变性

生物化学知识实验一蛋白质和氨基酸的呈色反应.doc

实验一蛋白质和氨基酸的呈色反应一、目的要求验证蛋白质特性；学习和掌握蛋白质呈色反应的原理和方法；学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。二、实验原理蛋白质中的某些化学键或氨基酸残基中的某些化学基团可以与某些特殊试剂形成特定的有色物质。这些反应称为蛋白质的呈色反应。各种蛋白质的氨基酸残基不完全相同。因此，呈色反应产物的颜色也不完全一样。呈色反应不是蛋白质所特有，一些非蛋白物质也能呈现类似的呈色反应。因此，不能仅以呈色反应结果来判别被测物质是否为蛋白质。三、呈色反应双缩脲反应 1.原理两分子尿素经加热至180°C 后可以缩合成一分子双缩脲，并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中与铜离子结合生成紫红色络合物，此反应称为双缩脲反应。多肽及所有蛋白质均具有肽键，与双缩脲分子中亚酰胺键结构相同，也能发生此反应，因此，蛋白质在碱性溶液中与铜离子也能呈现出类似于双缩脲的颜色反应。 2.器材与试剂 1)器材试管、药匙、电炉、试管夹、滴管。 2)试剂〈1〉蛋白质溶液(10%卵清蛋白溶液)：吸取鸡蛋清溶液10ml ，加蒸馏水稀释，定容至100ml 。〈2〉10%氢氧化钠溶液。〈3〉1%硫酸铜(CuSO4)溶液。〈4〉0.1%甘氨酸(Gly)溶液：称0.1g 甘氨酸溶于蒸馏水中，稀释至100ml 。〈5〉结晶尿素。 3.实验步骤双缩脲反应实验 1234 尿素＋加热后的尿素＋蛋白质溶液/滴3 0.1%Gly/滴3 10%NaOH/滴5555 1%CuSO 4/滴1111 显色现象试管试剂/滴 (1)制备双缩脲：取结晶尿素少许(约火柴头大小)，放入干燥的小试管中。微火加热至尿素熔解至硬化，刚硬化时立即停止加热，尿素放出氨，此时双缩脲

实验一蛋白质含量测定

实验一蛋白质含量的测定姓名：mangogola 一．实验原理生物化学实验中，经常需要测定蛋白质的含量，一般常用的蛋白质含量测定方法有紫外吸收法、福林酚试剂法以及一些改进的Lowry法可以应用。紫外吸收法测定蛋白质含量的原理是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸中的苯环含有共轭双键，因此蛋白质具有吸收紫外光的性质，吸收高峰在280nm处，且蛋白质溶液的光密度值与其含量呈正比关系。该方法具有简单、灵敏、快速和不消耗样品的优点，但易受核酸分子中嘌呤、嘧啶等的干扰，准确度较差。根据蛋白质和核酸的吸收峰不同，可通过计算适当校正核酸的干扰作用。 Lowry法的原理是：在碱性条件下，蛋白质与铜离子形成铜-蛋白质复合物，该复合物可还原磷钼酸-磷钨酸（Folin试剂）产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物。该方法灵敏度较高，但较费时。对膜蛋白或相当稀的（如<1ug/ml）蛋白溶液的含量测定，以及为减小去污剂、脂类、碳水化合物的干扰，可采用一些改进的Lowry法，如蛋白质-染料结合法。原理是：当染料考马斯亮蓝G250与蛋白质结合时，最大吸收峰从465nm移动到595nm，而且吸收值在一定蛋白浓度下线性相关，因此用标准浓度的蛋白测OD595作标准曲线，即可求得待测样品的蛋白浓度。此方法简单经济、快速、灵敏度也较高。需要注意的是，染料与蛋白质可在3min内完成结合，由于染料试剂中含有酒精成分，易挥发，所以结合生成的复合物在1h 内可比较稳定地存在于溶液中，制作的标准曲线后部会出现弯曲现象。二．实验过程（Lowry法） 1.溶液配制 A液：2%Na2CO3，用0.1mol/LNaOH配制。（不能将NaOH和 Na2CO3干粉混合配制，这样会因释放CO2而不准确） B液：0.5%CuSO4.5H2O,用1%酒石酸钾或酒石酸钠配制。 C液：使用前将A、B液按50:1混合，当天使用。 D液：Folin试剂标准蛋白溶液：200ug/mLBSA溶液 2.标准曲线测定按照下表进行操作，用一系列标准浓度的BSA平行进行两组测定反应，记录A500。取两组测定的平均值，以蛋白浓度为横坐标，光密度值为纵坐标绘制标准曲线。 3.将待测样品稀释至标准曲线浓度范围内，同时按上述方法测A500，根据标准曲线读出蛋

蛋白质化学练习题

蛋白质化学练习题第三章蛋白质化学一：填空题 1. _________________________________ 氨基酸的结构通式为。 2. __________________________________________ 组成蛋白质分子的碱性氨基酸有__________ 、和。酸性氨基酸有_________________ 和_________________ 。 3. 在下列空格中填入合适的氨基酸名称。
(1) 是带芳香族侧链的极性氨基酸。
(2) _______________ 和_________________ 是带芳香族侧链的非极性氨基酸。
(3) __________________ 是含硫的极性氨基酸。
(4) ______________ 或__________________ 是相对分子质量小且不含硫的氨基酸，在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。
(5) 在一些酶的活性中心中起作用并含羟基的极性较小的氨基酸是_________________________ 。 4. _________________________________________ H enderson-Hasselbalch 方程为。 5. ____________________________________ 氨基酸的等电点(pI) 是指。 6. _______________________________________ 氨基酸在等电点时，主要以离子形式存在，在pH>pI 的溶液中，大部分以 _________________ 离子形式存在，在pH

实验八食品蛋白质含量测定

实验八食品中蛋白质含量测定 1.实验目的（1）学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。（2）掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。 2.实验原理 2.1消解蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸在催化剂作用下共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵而留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。因为食品中除蛋白质外，还含有其它含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白。 NH 2(CH2) 2 COOH+13H 2 SO 4 =(NH 4 ) 2 SO 4 +6CO 2 +12SO 2 +16H 2 O 浓硫酸将有机物炭化后为碳、氢与氮，将形成的碳氧化： 2H 2SO 4 +C（Δ）=CO 2 +2H 2 O+2SO 2 ↑ 生成的二氧化硫将氧化态的氮还原为氨而自身被氧化为三氧化硫，氨随之与硫酸反应生成硫酸铵， H 2SO 4 +2NH 3 =(NH 4 ) 2 SO 4 在消解试验中，为了加速蛋白质的分解，缩短消解时间，常常加入下列物质：（1）硫酸钾：一般浓硫酸的沸点为340℃，但加入硫酸钾后，硫酸不断分解，水不断溢出引起硫酸钾浓度不断增加，沸点因此而增加。 K 2SO 4 +H 2 SO 4 =KHSO 4 KHSO 4（Δ）=K 2 SO 4 +H 2 O↑+SO 3 但硫酸钾浓度不能太大，否则消化温度过高会引起铵盐的热分解而释放出氨，（NH 4） 2 SO 4 （Δ）=（NH 4 ） 2 SO 4 +NH 3 ↑ 2KSO 4（Δ）=2H 2 O+2NH 3 ↑+2SO 3 ↑ 除了可以添加硫酸钾之外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等以提高溶液温度，但效果要差于硫酸钾。（2）硫酸铜：硫酸铜可以催化反应。可以采用的催化剂除了硫酸铜外，还可以加入氧化汞、汞、硒粉以及二氧化钛等，但考虑效果、价格以及污染等原因外，最常用的还是硫酸铜，同时可以加入少量的过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物的氧化，反应机理为： 2CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +O 2 ↑+SO 2 ↑ C+CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +CO 2 ↑+SO 2 ↑ H 2SO 4 +Cu 2 SO 4 （Δ）= 2CuSO 4 +2H 2 O↑+SO 2 ↑ 此反应不断进行，如溶液没有褐色生成（Cu 2SO 4 颜色）而呈现清澈的蓝绿色，说明有机物已经全部被消解完毕。因此，在试验过程中，硫酸铜不但能够催化反应，而且能够指示反应的进行程度。 2.2碱化蒸馏在消解完全的样品溶液中加入过量的浓的氢氧化钠溶液使溶液呈现碱性，加热蒸馏而放出氨气： 2NaOH+（NH 4） 2 SO 4 （Δ）= Na 2 SO 4 +2H 2 O+2NH 3 ↑ 2.3吸收与滴定将加热蒸馏释放出来的氨利用硼酸溶液进行吸收，因硼酸属于弱酸，其后再用盐酸进行滴定： 2NH 3+ 4 H 3 BO 3 =(NH 4 ) 2 B 4 O 7 +5H 2 O (NH 4) 2 B 4 O 7 +5H 2 O+2HCl=2NH 4 Cl+4H 3 BO 3 除此之外，也可以用过量的盐酸或者硫酸吸收整流而出的氨气，然后再用氢氧化钠进行回滴。 3. 仪器及材料 3.1仪器

生物化学蛋白质的结构与功能试题及答案

第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释：1．氨基酸 2．肽 3．肽键 4．肽键平面 5．蛋白质一级结构 6．α-螺旋 7．模序 8．次级键 9．结构域 10．亚基 11．协同效应 12．蛋白质等电点 13．蛋白质的变性 14．蛋白质的沉淀 15．电泳 16．透析 17．层析 18．沉降系数 19．双缩脲反应 20．谷胱甘肽二、填空题 21．在各种蛋白质分子中，含量比较相近的元素是____，测得某蛋白质样品含氮量为15.2克，该样品白质含量应为____克。 22．组成蛋白质的基本单位是____，它们的结构均为____，它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23．由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基，可以在酸性溶液中带____电荷，在碱性溶液中带____电荷，因此，氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时，氨基酸成为____离子，此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24．决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构，该结构是指多肽链中____的排列顺序。25．蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象，多肽链的折叠盘绕是以____为基础的，常见的二级结构形式包括____，____，____和____。 26．维持蛋白质二级结构的化学键是____，它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27．稳定蛋白质三级结构的次级键包括____，____，____和____等。 28．构成蛋白质的氨基酸有____种，除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____，____，____。酸性氨基酸有____，____。 29．电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下，蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的，还和蛋白质的____及____有一定关系。 30．蛋白质在pI时以____离子的形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以____离子形式存在，在pH

蛋白质化学(石河子大学生物化学试题库)

蛋白质化学（客观题带答案）蛋白质化学一、名词解释 1．氨基酸（amino acids）:是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物，氨基一般连接在α-碳上。氨基酸是肽和蛋白质的构件分子。 2.必需氨基酸（essential amino acids）：指人（或其它脊椎动物）自己不能合成，需要从饮食中获得的氨基酸，例如赖氨酸、苏氨酸等氨基酸。 3.等电点（pI，isoelectric point）：使分子处于兼性分子状态，在电场中不迁移（分子的净电荷为零）的pH值。 4.茚三酮反应（ninhydrin reaction）：在加热条件下，氨基酸或肽与茚三酮反应生成紫色（与脯氨酸反应生成黄色）化合物的反应。 5.肽键（peptide bond）：一个氨基酸的羧基与另一个氨基酸的氨基缩合，除去一分子水形成的酰胺键。 6.肽（peptides）：两个或两个以上氨基酸通过肽键共价连接形成的聚合物。蛋白质一级结构(primary structure)：指蛋白质中共价连接的氨基酸残基的排列顺序。 7.Edman降解(Edman degradation)：从多肽链游离的N末端测定氨基酸残基的序列的过程。N末端氨基酸残基被苯异硫氰酸酯修饰，然后从多肽链上切下修饰的残基，再经层析鉴定，余下的多肽链（少了一个残基）被回收再进行下一轮降解循环。 8.同源蛋白质（homologous proteins）:来自不同种类生物、而序列和功能类似的蛋白质。例如血红蛋白。 9.酰胺平面（肽单位peptide unit）：又称之肽基（peptide group），是肽链主链上的重复结构。是由参与肽键形成的氮原子和碳原子和它们的4个取代成分：羰基氧原子、酰胺氢原子和两个相邻的α-碳原子组成的一个平面单位。10.蛋白质二级结构（protein secondary structure）:在蛋白质分子中的局部区域内氨基酸残基的有规则的排列，常见的二级结构有α-螺旋和β-折叠。二级结构是通过骨架上的羰基和酰胺基团之间形成的氢键维持的。 11.蛋白质三级结构（protein tertiary structure）:蛋白质分子处于它的天然折叠状态的三维构象。三级结构是在二级结构的基础上进一步盘绕、折叠形成的。三级结构主要是靠氨基酸侧链之间的疏水相互作用、氢键范德华力和盐键（静电作用力）维持的。 12.蛋白质四级结构（quaternary structure）:多亚基蛋白质的三维结构。实际上是具有三级结构的多肽链（亚基）以适当方式聚合所呈现出的三维结构。 13.α-螺旋(α-helix)：蛋白质中常见的一种二级结构，肽链主链绕假想的中心轴盘绕成螺旋状，一般都是右手螺旋结构，螺旋是靠链内氢键维持的。每个氨基酸残基（第n个）的羰基氧与多肽链C端方向的第4个残基（第n＋4个）的酰胺氮形成氢键。在典型的右手α-螺旋结构中，螺距为0.54nm，每一圈含有3.6个氨基酸残基，每个残基沿着螺旋的长轴上升0.15nm。 14.β-折叠(β-sheet)：是蛋白质中的常见的二级结构，是由伸展的多肽链组成的。折叠片的构象是通过一个肽键的羰基氧和位于同一个肽链或相邻肽链的另一个酰胺氢之间形成的氢键维持的。氢键几乎都垂直伸展的肽链，这些肽链可以是平行排列（走向都是由N到C方向）；或者是反平行排列（肽链反向排列）。 15.β-转角（β-turn）:也是多肽链中常见的二级结构，连接蛋白质分子中的二级结构（α-螺旋和β-折叠），使肽链走向改变的一种非重复多肽区，一般含有2～16个氨基酸残基。含有5个氨基酸残基以上的转角又常称之环（loops）。常见的转角含有4个氨基酸残基，有两种类型。转角I的特点是：第1个氨基酸残基羰基氧与第4个残基的酰胺氮之间形成氢键；转角II的第3个残基往往是甘氨酸。这两种转角中的第2个残基大都是脯氨酸。 16.超二级结构（super-secondary structure）：也称之基元（motif）。在蛋白质中，特别是球蛋白中，经常可以看到由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成的有规则、在空间上能辨认的二级结构组合体。17.结构域(structural domain)：较大的多肽链或亚基，多肽链往往在二级结构的基础上先折叠成若干个球状的单位，这种相对独立的三维实体即为结构域。 18.二硫键（disulfide bond）：通过两个（半胱氨酸）巯基的氧化形成的共价键。二硫键在稳定某些蛋白的三维结构上起着重要的作用。

实验报告蛋白质分子的测定

实验一蛋白质分子的测定─凝胶层析法一、实验原理凝胶层析法（即凝胶过滤法，gel filtration）是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法。将凝胶颗粒在适宜溶剂中浸泡，使充分吸液膨胀，然后装入层析柱中，加入欲分离的混合物，再以同一溶剂洗脱，在洗脱过程中大分子不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙最先流出柱外，小分子可以进入凝胶内部，流苏缓慢，一直最后流出柱外，从而使样品中分子大小不同的物质得以分离。凝胶是由胶体溶液凝结而成的固体物质，不论是天然凝胶还是人工合成凝胶，其内部都具有很微细的多空网状结构。凝胶层析法常用的天然凝胶是琼脂糖凝胶（Sepharose），人工合成的凝胶是聚丙烯酰胺凝胶（Bio-gel-P）和葡聚糖凝胶（Sephadex G）。其中葡聚糖凝胶是具有不同孔隙度的立体网状结构的凝胶，不溶于水。将凝胶装柱后，柱床体积称为“总体积”，以Vt表示。Vt由V o，Vi与Vg三部分组成，即Vt=Vi+Vg+V o。V o为“孔隙体积”、“外水体积”，即存在于柱床内凝胶颗粒外面空隙之间的水相体积；Vi为内体积，即凝胶颗粒内部所含水相的体积；Vg为凝胶本身体积；Ve为洗脱体积，即自加入样品时算起到组分最大浓度（峰）出现时所流出的体积，Ve与V o及Vi之间的关系为：Ve=V o+K d Vi，；K d为样品组分在二相间的分配系数，Kd=(Ve-V o)/Vi，有效分配系数为Kav，Kav=(Ve-V o)/(Vt-V o)。在一般情况下，凝胶对组分没有吸附作用时，当流动相流过Vt体积后，所有的组分都应该被洗出来，这一点为凝胶层析的特点，与一般层析方法不同。 Ve与分子量的关系：对同一类型的化合物，洗脱特性与组分的分子量有关，流过凝胶柱时，按分子量大小顺序流出，分子量大的走在前面。Ve与分子量的关系为：Ve=K1-K2logM，K1与K2为常数，M为分子量，通常用Kav代替V e，建立标准蛋白质分子式量LgM与Kav的标准曲线，称为“选择曲线”。在允许的工作范围内，曲线越陡，则分级越好，而工作坊为越窄。凝佼层析主要决定于溶质分子的大小，每一类型的化合物，如球蛋白类，右旋糖酐类等都有它自己的特殊的选择曲线，可用以测定未知物的M r，测定时以使用曲线的直线部分为宜。二、试剂材料

第三章蛋白质化学期末复习样题

第三章蛋白质化学样题一、选择题 1.蛋白质分子的一级结构概念主要是指（） A、组成蛋白质多肽链的氨基酸数目。 B、氨基酸种类及相互比值。 C、氨基酸的排列顺序。 D、二硫键的数目和位置。 2.下列何种结构不属蛋白质分子构象（） A、右手双螺旋 B、α-螺旋 C、β-折叠 D、β-转角 3. 在蛋白质三级结构中可存在如下化学键，但不包括（） A、氢键 B、二硫键 C、离子键 D、磷酸二酯键 4. 下列关于蛋白质四级结构的有关概念，何者是错误的（） A、由两个或两个以上亚基组成。 B、参与形成四级结构的次级键多为非共价键。 C、所有蛋白质分子只有具有四级结构，才表现出生物学活性。 D、组成四级结构的亚基可以是相同的，也可以是不同的。 5. 蛋白质变性是由于（） A、蛋白质一级结构的改变 B、组成蛋白质的共价键发生变化 C、蛋白质空间构象的破坏 D、辅基的脱落 6. 维系蛋白质一级结构的化学键（） A、盐键 B、肽键 C、氢键 D、分子间作用力 7. 对具有四级结构的蛋白质进行一级结构分析时（）

A、只有一个自由的α-氨基和一个自由的α-羧基。 B、只有自由的α-氨基，没有自由的α-羧基。 C、有一个以上的自由α-氨基和α-羧基。 D、既无自由的α-氨基，也无自由的α-羧基。 8. 蛋白质分子中的α-螺旋和β片层都属于（） A、一级结构 B、二级结构 C、三级结构 D、四级结构 9. 维系蛋白质分子中α-螺旋的化学键是（） A、肽键 B、离子键 C、二硫键 D、氢键 10. α-螺旋每上升一圈相当于几个氨基酸（） A、2.5 B.2.7 C.3.0 D、3.6 11. 谷氨酸的等电点是3.22，下列描述正确的是（） A、谷氨酸是碱性氨基酸 B、谷氨酸是酸性氨基酸 C、谷氨酸在pH=7的溶液中带正电荷 D、谷氨酸分子中含有一个氨基和一个羧基 12. 肽键是（） A、属于维系蛋白质二级结构的重要化学键 B、属于次级键 C、可以自由旋转 D、由肽键形成的肽平面包含了6个原子 13. 关于蛋白质二级结构的描述正确的是（） A、属于蛋白质的空间构象

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