实验实训指导书药理学

实验一药理学实验基本知识和技术

实验目的：1、掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力；

2、更好地掌握药理学基本理论知识；

3、培养科学思维。

实验内容：一、药理实验的基本目的与要求

二、实验动物：

1、动物的选择；

2、动物的标记与捉拿、固定方法；

3、动物的取血方法（尾尖、眼眶静脉丛、摘眼球、断头）；

4、动物的给药方法（灌胃、腹腔、皮下、尾静脉）；

5、动物的麻醉方法；

6、动物的处死方法。

三、实验设计基本原则。

实验步骤：

一、药理学实验的基本目的与要求

药理学实验课在药理学教学中占有非常重要的地位。药理学实验课的目的在于通过实验验证药理学的基本理论，加深理解与掌握药理学的基本知识和规律；也是了解获得药理学知识的科学途径。同时，培养学生独立思考，独立工作，科学思维的能力；培养学生动手操作、分析问题和解决问题的能力；还应培养学生对科学工作的严肃的态度、严格的要求、严密的工作方法及实事求是的工作作风。

为了达到上述目的，要求做到下列事项：

1. 实验前：预习实验内容并复习相关理论知识；

2. 实验时：

（1）实验分小组进行，实验前分工明确，实验时密切配合；

（2）确定实验仪器、药品、动物与实验指导相符时，将实验器材妥善安排，正确装置、保管；

（3）实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录；

（4）注意爱护动物、节约实验药品；

（5）实验过程中保持实验室肃静、清洁。

3. 实验后：

⑴各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室；

⑵值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所；

⑶整理实验结果，经分析思考作出结论，按要求写出实验报告，按时交给指导老师。

实验报告的书写

1.题目

2.目的

3.原理

4.材料：实验动物，器材，药品

5.方法：用自己的语言简单扼要描述出来；

6.结果：要求真实、清楚；

7.讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失

败的原因；

8.结论：将实验结果进行归纳总结，应带有提示性质。

二、实验动物

1、动物的选择：

药理学实验中常用的动物有青蛙、蟾蜍、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猫、狗、猴等。动物对药物的反应具有种属差异性，可根据实验目的和要求选用不同的实验动物。例如：（1）小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。（2）大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。

（3）豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感，常用于抗结核病药的实验。（4）家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用于热原检查。

（5）狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。

（6）猴是接近于人类的高级动物。神经系统比较发达，常用于观察药物对行为的影响。猕猴的月经周期和人一样，是研究生殖课题的首选动物。另外，新药临床前毒性评价，也需要使用猴。

2、动物的标记与捉拿、固定方法

（1）动物的标记

狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠和家兔多用染色法，一般用1％的苦味酸溶液（黄色）或5％中性红溶液（红色）涂于动物体表不同部位的皮毛处，代表不同号码。编号原则是先左后右，自前到后。

（2）动物捉拿、固定方法

①小白鼠

右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上，用左手拇指及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤，并以左手的小指、无名指固定其尾部，便可将小鼠固定在手上。

②大白鼠

用右手提起尾部，放在粗糙面上，左手的拇指和食指捉其头部，其余三指夹住背腹部即可固定。

③豚鼠

豚鼠性情温和不咬人，用手握住躯干即可。

④家兔

可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。在进行仰位手术操作时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定。

3、动物的取血方法

（1）小鼠和大鼠

①颈静脉或颈动脉取血：麻醉动物，背部固定，颈部去毛，碘酒消毒，切开皮肤，分离出动脉或静脉，将注射针平行刺入血管，慢慢回抽针栓即可取血。动脉取血时，亦可将远心端结扎，用动脉夹夹住近心端，在动脉中央剪一小口，插入聚乙烯管，然后放开动脉夹，血液可自动流出。兔和豚鼠也常用此方法取血，手术操作与大鼠相似。

②尾尖取血：将鼠固定在铁丝笼或特别筒内，使鼠尾露在外面。剪掉鼠尾（小鼠1mm～2mm；大鼠5mm～10mm），用拇指和食指由尾根向尾尖按捏，血液即从尾尖流出。小鼠每次可采血0.1ml，大鼠每次可采血0.5ml。注意：只剪去尾尖，如剪去过多组织，反而流血少。下次取血时，只需将尾尖血痂剪掉即可。

③眼球取血：左手持鼠，使眼球突出，并使头向下。右手持弯曲镊，钳夹一侧眼球根部，将眼球摘除。血液即可从断裂的眼眶动物、静脉涌出，血量约为鼠体重的4％～5％，适用于一次性取血。

④眼眶后静脉丛取血：固定鼠头部皮肤，轻轻向后压迫颈部两侧，使头部静脉回流受阻，眼球充分外突，用内径1～1.5mm的毛细血管刺入下眼睑与眼球之间，轻轻向眼底部方向移动，血即可流入玻璃管内，一般两眼可各取一次。

⑤断头取血：用剪子剪断鼠头，立即将鼠颈部向下，提起动物，并对准已准备好的容器，可接取所需血液。小鼠可取血约1ml，大鼠可取血约8ml。

（2）家兔

①心脏取血：将家兔背位固定，在胸骨左缘3mm，第3～4肋间隙，触及心跳最明显部位，以8号针头刺入，即可有血流入注射器内，亦可抽取，如没刺入心脏，一定要将针提到皮下改变方向，再重新刺入。

②耳缘静脉取血：将耳根部压紧，拔去耳缘毛，用酒精涂擦使血管扩张明显，以6～7号针头，针尖向离心方向刺入，缓慢抽取血液。

③股动脉、静脉取血：将家兔麻醉、背位固定，手术分离出股动脉或静脉，插入套管即可根据需要量取血。

4、动物的给药方法

（1）小鼠、大鼠

①灌胃法(i.g.)：以左手固定鼠后，使其腹部朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面沿上腭进入食道。

②腹腔注射(i.p.)：以左手固定鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取30度角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免伤及内脏。

③皮下注射(s.c.)：用左手固定鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。

④静脉注射(i.v.)：将鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在50℃热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端，右手持注射器将针头刺入尾静脉，推入药液。

（2）家兔

①灌胃：需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取8号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注射器接通导尿管将药液推入。

②皮下、腹腔注射：给药方法基本上同小鼠，唯针头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为0.5～1.0/mg，腹腔为1.0～5.0ml/mg。

③静脉注射：将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器，将针头从近耳尖处刺入，当确认针头在血管中后，将药液推入。5、动物的麻醉方法

（1）局部麻醉：常采用2％普鲁卡因做皮下浸润注射，可用于局部手术。

（2）全身麻醉：

①吸入麻醉：可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内，利用乙醚挥发的性质，经肺泡吸收，作用较快，适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。

②注射麻醉：常用戌巴比妥钠和乌拉坦。