国家自然科学基金项目申请书写作范例-完整版

国家自然科学基金

申请书

( 2 0 1 0 版 )

申报日期：****年3月6日

国家自然科学基金委员会资助类别：

亚类说明：

附注说明：

项目名称：

申请人：电话：

依托单位：

通讯地址：

邮政编码：单位电话：

电子邮箱：

国家自然科学基金申请书

**** 版

。、申请人信息姓

名

****

性别男出生

年月

年 4 月

民族汉族

学位学士职称教授

每年工作时间（月） 4

电话电子邮箱 x 传

真

国别或地区中国

个人通讯地址工作单位

主要研究领域心肌缺血-再灌注损伤的发生机制和保护

依托

单位

信息名

称

****医科大学

联系人电子邮箱电

话

网站地址

合作研究单

位信

息

单位名称

[在此录入修改]

项目基本信息项目名称钙敏感受体在大鼠缺氧性肺动脉收缩和血管重构中的作用和分子机制

资助类别面上项目亚类说明

附注说明

申请代码 H0203:心肌细胞/血管细胞损伤、

修复、重构和再生

H0109:肺循环及肺血管疾病

基地类别科技部和****省生物医药工程重点实验室\部门开放研究年限

2011 年 1 月 — 2013 年 12 月

研究属性

基础研究

摘

要

(限 400 字)：肺动脉高压(PAH)可导致右心肥大、衰竭甚至死亡。PAH 确切机制尚未阐明，多认为与肺动脉收缩和重构所致的外周阻力增大有关。钙敏感受体（CaSR ）是 G 蛋白偶联受体。本课题组首次发现心肌组织有 CaSR 存在，并证实它参与心肌缺血-再灌注损伤、细胞凋亡和心肌肥大的发生。但是，CaSR 与 PAH 发生发展的关系，迄今国内外尚无报道。在前期研究中，我们发现大鼠肺动脉有 CaSR 的功能表达，并在预实验中观察到缺氧时 CaSR 表达增加我们

推测缺氧时肺动脉 CaSR 表达可诱导肺血管收缩和重构，这可能是缺氧性肺动脉高压的一个新机制。为证实这一假说，我们将复制大鼠急性和慢性缺氧模型，采用分子生物学、流式细胞仪等技术，从整体-血管环-细胞三个层次，观察 CaSR 表达增加或活化对肺动脉张力血管重构的

影响及其信号传导通路。本课题将从新的视觉阐明 PAH 发生的分子机制，并为 PAH 的防治提供新靶点。

关键词(用分号分开，最多 5 个) 缺氧性肺动脉高压；钙敏感受体；肺动脉平滑肌；血管重构；大鼠

项目组主要参与者（注: 项目组主要参与者不包括项目申请人，国家杰出青年科学基金项目不填写此栏。）

编号姓名出生年月性别职称学位单位名称电话电子邮箱项目分工每年工作时间（月）

总人数高级中级初级博士后博士生硕士生

10 1 3 1 2 3

说明: 高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生人员数由申请人负责填报（含申请人），总人数由各分项自动加和产生。

第3 页版本1.003.565

经费申请表（金额单位：万元）

科目申请经费备注（计算依据与说明）

一.研究经费29.6400

1.科研业务费7.2000

（1）测试/计算/分析费 2.2000 mRNA 测序、引物合成、图像分析、流式细胞仪、电

镜检查费等

（2）能源/动力费

（3）会议费/差旅费 1.9000 学术会议0.4×4 人次,科研调研差旅费 0.3

（4）出版物/文献/信息传播费 2.3000 国内外期刊论文发表费 1.5,文献资料费 0.3,答辩

评审费 0.3,信息传播费 0.3

（5）其他0.8000 不可预见费

2.实验材料费20.7000

（1）原材料/试剂/药品购置费18.5000 RNA 试剂盒、RT-PCR 试剂、各种抗体、化学试剂、

PCR 引物的设计、各种耗材

（2）其他 2.2000 标准实验动物购买及饲养

3.仪器设备费0.9400

（1）购置0.9400 氮气发生器

（2）试制

4.实验室改装费0.8000

5.协作费

二.国际合作与交流费 3.8000

1.项目组成员出国合作交流

2.4000 参加国际会议 1 人次

2.境外专家来华合作交流 1.4000 境外专家短期来华合作交流国际旅费和生活费

三.劳务费 3.8000 参加课题的研究生和博士后的劳务和生活补助费

四.管理费 1.9600 按基金委规定：经费 5％为管理费

合计39.2000

与本项目相关的其他经费来源国家其他计划资助经费

其他经费资助（含部门匹配）

其他经费来源合计0.0000

报告正文

（一）立项依据与研究内容

1. 项目的立项依据

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension，PAH)是不同病因导致的以肺动脉压力和肺血管阻力升高为特点的一组疾病或临床综合征，发病率和死亡率很高，其发病机制主要为血管收缩、血管重构和血栓形成【1，2】。如果PAH不加治疗，最终导致右心衰竭、容量负荷增加直至死亡【3】。通常肺动脉高压的判定标准为：平均肺动脉压力在静息状态下>25 mm Hg，运动状态下>30 mm Hg。

PAH有多种分类方法。1998年前，仅分为原发性肺动脉高压(PPH)和继发性肺动脉高压(SPH)两大类。2003年第3届威尼斯PAH会议，将PAH进一步分为：① 特发性PAH(IPAH)；② 家族性PAH(FPAH)；

③ 获得性PAH(APAH)；④ 与重要静脉或毛细血管相关的PAH；⑤新生儿持续性PAH(PPHN)。根据美国疾控中心的资料，各类型PAH患病率已超过3O～5O人／100万人【4，5】。

许多慢性呼吸系统疾病或缺氧可引起低氧性PAH：1）阻塞性肺疾病：慢性阻塞性肺疾病(COPD)、囊泡性纤维化/支气管扩张等；2）间质性肺病：特发性间质性肺炎等；3）肺泡换气不足：肥胖通气不良综合症神经肌肉病等；（4）睡眠障碍性呼吸：睡眠呼吸暂停等；（5）久居高山或高原；（6）发育异常/新生儿肺疾患【6】。

PAH的发生机制复杂。特发性和家族性PAH主要与BMPR2等基因突变有关【7】。众所周知，肺血管

收缩是PAH的早期组分，由细胞内钙增加触发，信号传导通路主要包括PKC、Rho激酶和环磷酸腺苷（cAMP和cGMP），钙库操纵性钙通道和电压门控性钾通道（见图1）【8】。

图1 肺动脉平滑肌细胞的钙稳态调节机制

在高肺血流、低氧、毒物等病理条件下，血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞以及血小板和单

核巨噬细胞分泌血管活性介质的平衡失调，可促进血管收缩、血管重构以及血栓形成（图2）【1】。

PAH发生的分子机制与血管舒张和收缩因子失衡、骨形态发生蛋白II型受体（BMPRII）信号通路激活、弹性蛋白酶活化、钾通道功能障碍、线粒体异常、瞬时受体电位钙通道（TRPC）激活、AMPK 激活血管壁促炎反应等有关（图3）【9】。

气体信号分子NO、CO、H2S及其调节等已成为PAH的研究热点【7】，杜军保等已开展了系列研究。Notch3查看报告正文撰写提纲

信号传导途径在促进PAH发展中作用开始受到人们重视（Li XD et al, nature medicine 2009; 15: 1289- 1299）. 近年来，哈医大朱大岭等对15-HETE在低氧性PAH的作用和机制进行了系统研究【10，11】。

图2 各种细胞在肺动脉高压时血管重构中作用

图3 肺动脉高压（PAH）分子发生机制

根据PAH发生的分子机制，人们采用弹性蛋白酶抑制剂、Kv开放剂、TRP通道抑制剂、负性生存素、他汀类药物、PPARγ 激动剂、各种生长因子受体的抑制剂、肾上腺髓质素、Rho 激酶抑制剂、内皮祖细胞、环孢霉素A等治疗【9】。

国内在PAH 的研究是方兴未艾。笔者以“肺动脉高压”为检索主题词检索国家自然科学基金委网站，结果显示：最近5 年内得到国家自然科学基金委资助的有关“肺动脉高压”研究项目合计37项，呈逐年增加趋势（05 年3 项，06 年4 项，07 年7 项，08 年9 项，09 年14 项），研究内容主要涉及上述提到的有关因素【7-11】。

但是，肺动脉高压的研究虽有100多年的历史，其发病机制至今尚未阐明【1，7，12】。尽管现代化的治疗明显改善了PAH患者的生理功能和延长了寿命，但其死亡率仍高达50%【13】。这就要求人们从